医学基础知识重要考点:病毒感染的检测方法-医学微生物学
护理微生物学第十六章 病毒感染的检查方法及防治原则
三、药物防治
抗病毒治疗原则:
- 抑制病毒复制; - 增强机体免疫应答能力,促进消灭病毒感染的细胞;
抗病毒药作用机理:
①与病毒竞争细胞表面的受体,阻止病毒的吸附;
②阻碍病毒穿入或脱壳;金刚烷安 ③阻碍病毒生物合成;
④增强宿主抗病能力的物质;
⑤中草药具有清热解毒功效,有抗病毒作用; 如大青叶、板蓝根
抗病毒药物或制剂
4.标本应低温保存并尽快送检 病毒在室温中易 失去活性,故采取标本后应立即送实验室,如 标本需较长时间运送,可用保温瓶 ( 内放冰块 和食盐,或固态二氧化碳和酒精) 存放。
5. 血清学诊断标本的采取 应 在发病初期和病后各取 1 份血清, 以便对比双份血清抗体效价的动 态变化。血清抗体标本应保存在 20℃
灭活疫苗:
乙脑疫苗 狂犬疫苗 流感灭活疫苗
等
减毒活疫苗:
脊髓灰质炎疫苗 麻疹疫苗
HAV疫苗 腮腺炎疫苗
风疹疫苗 其他疫苗:基因工程疫苗,核酸疫苗 ,亚单位疫苗等
人工被动免疫 常用制剂有: ①抗病毒免疫血清,现有抗麻疹、 抗狂犬病、抗乙型脑炎免疫血清等, 这些免疫血清具有显著的预防作用; ②人免疫球蛋白制剂,包括人血清丙 种球蛋白、胎盘球蛋白 ③特异性免疫球蛋白
2、核酸扩增法 PCR ,这一技术能使核酸在短时间 内扩增百万倍而被检出。 已被广泛应用于病毒性感染的诊 断与研究中
对以测定基因核酸序列的病 毒,设计相应的病毒基因的引物, 作多聚酶链反应( PCR), 通过扩 增病毒基因片段可诊断标本中是 否存在病毒核酸。 检测病毒核酸的缺点是:核 酸阳性不等于标本中有活病毒,不 能检测不了解核酸序列的病毒
病毒感染的检查方法及 防治原则
教学大纲 熟悉病毒的防治原则 了解病毒感染的检查方法
执业医师之医学微生物25
执业医师之医学微生物25、26第二十五节病毒感染的检查方法一、病毒感染的检查方法(一)标本的采集和送检病毒标本的采集和送检原则基本与细菌相似,但要特别注意一下原则:1.用于分离病毒或检测病毒及其核酸的标本应采集病人急性期标本。
2.对本身带有其他微生物(如咽拭子、粪便)或易受污染的标本,进行病毒分离培养时,应使用抗生素以抑制标本中的细菌或真菌等生长繁殖。
3.标本应低温保存并尽快送检。
如需长时间运送,标本保持在冰块或维持低温的材料的保温容器内冷藏。
4血清学诊断标本采取应在发病初期和病后2~3周内各取1份血清,以利于动态观察双份血清抗体效价。
(二)病毒分离培养方法1.动物接种是最早的病毒分离方法。
目前多不用。
2.鸡胚接种鸡胚对多种病毒敏感。
按病毒接种部位分:①绒毛尿囊膜接种,用于培养天花病毒、痘苗病毒和人类疱疹病毒等;②尿囊腔接种,用于培养流感病毒、腮腺炎病毒;③羊膜腔接种,用于培养流感病毒初次分离;④卵黄囊接种,用于某些嗜神经病毒培养。
3.组织培养细胞培养法是病毒分离鉴定中最常用方法。
根据细胞生长方式分为单层细胞培养和悬浮细胞培养。
病毒在培养细胞中增殖的指证:细胞病变、红细胞吸附、病毒干扰作用。
(三)病毒感染的血清学诊断方法1.中和试验是指病毒在细胞培养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。
中和抗体特异性高,持续时间较长,因此中和试验适用于人群免疫情况的调查,较少用于临床。
2.血凝抑制试验具有血凝素的病毒能凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞,称为血凝现象。
这种现象能被相应抗体所抑制,称血凝抑制试验。
常用于粘病毒、乙型脑炎病毒感染的辅助诊断及流行病学的调查,也可鉴定病毒的型和亚型。
3.补体结合试验用已知病毒可溶性补体抗原检测病人血清中相应的补体抗体,作为近期感染的指标。
4.凝胶免疫扩散试验方法简便、特异性与敏感性均较高,此法可用于多种病毒的鉴定。
【经典习题】1. 对病毒性传染进行血清血诊断时,双份血清抗体效价至少增高几倍时,才有诊断意义A.2倍B.4倍C.8倍D.16倍E.32倍答案:B考点:病毒感染的血清学诊断解析:搜检病毒特异性抗体IgG时,应采集急性期和恢复期双份血清,只有当恢复期血清抗体效价比急性期的效价较着升高达4倍或以上时,方有诊断价值。
24.1 病毒感染的检查方法
)
医学微生物学(Medical Microbiology
病毒感染的检查方法与防治原则
补充学习和理解
第一节病毒性感染的病原学诊断
学习目标●掌握:
病毒感染的标本采集和送检原则
血清学诊断和快速诊断方法
●熟悉:
病毒分离与鉴定的流程和方法
病毒感染性和数量测定
1. 病毒性感染标本的采集和送检
●总原则与细菌相似,另外注意:
发病早期采集标本: 前驱期、急性期、发病前1~2天
抗生素处理: 拟分离培养标本,应加抗生素抑菌
低温保存,快速送检: 病毒易被灭活(细胞内寄生,怕热不怕冷) 采集双份血清: 发病初期、病后2~3周;血清学诊断动态检查抗体效价
2. 病毒性感染的检查流程标本采集分离培养快速诊断细胞培养鸡胚接种动物接种病毒的鉴定光镜观察包涵体电镜或免疫电镜观察病毒中和试验
血凝抑制试验
补体结合试验
ELISA 病毒成分检查核酸检测核酸电泳核酸杂交PCR 基因芯片基因测序抗原检测ELISA IFA RIA WB 血清学诊断
形态学检查常规鉴定技术
形态学鉴定
血清学鉴定
分子生物学鉴定
动物致病性
鉴定在细胞中增殖CPE 培养液pH 改变病毒成分检查红细胞吸附和红细胞吸附抑制试验
3. 病毒的感染性和数量测定
●病毒的定量
50%组织细胞感染量(TCID50)
空斑形成试验: 空斑形成单位(PFU)
血凝试验: 仅适用于含血凝素病毒
●感染复数(MOI):感染细胞时病毒与细胞的比值
●测定病毒的毒力:50%致死量(LD50)。
医学微生物学:病毒感染的检查方法与防治原则
第一节 病毒感染的检查方法
一、标本采集与送检
原则:与细菌类似 •用于分离培养的标本: 采取采取急性期标本、使用抗生素处 理防细菌污染
无菌操作、低温保存、尽快送检
•血清学诊断的标本: 双份血清?
早期采集
标本的采集和送检六原则
无菌采集 采集合适的标本
采集双份血清
尽快送检 正确标记
❖ 种类:常用的传代细胞有HeLa(宫颈癌)细胞、KB(口 腔癌)细胞、HEp-2(喉癌)细胞、Vero(非洲绿猴肾) 细胞等。
❖ 特点及作用:由于传代细胞系能有规律地持续传代,容
易保存(-70℃~-196℃)且对某些病毒易感,因此,在
诊断、科研等非疫苗生产的项目中常被采用。目前广泛 用于病毒的实验室诊断工作,根据病毒对细胞的亲嗜性 ,选择敏感的细胞系使用传代细胞系
病毒1:100稀释
病毒1:1000稀释
中性红染色:活细胞呈红色,受病毒感染破坏的细胞不着色
三、病毒感染的诊断
1.病毒形态学检查 2.病毒成分(病毒蛋白和核酸)检查 3.病毒感染的血清学(病毒抗体)检查
❖ 标本类型? 与细菌标本类似 ❖ 好的标本? 正常无菌性体液 ❖ 标本内容物一般需要含有宿主细胞
二、病毒的分离培养与鉴定
病毒的实验室诊断方法
动物接种
病 毒
鸡胚培养
分离培养方法(金标准)
检 细胞培 养 测 病毒成分检测
活细胞
血清学诊断
(一)病毒的分离培养
1.动物接种
❖ 最原始的病毒培养方法 多用于没有敏感细胞进行细胞培养的病毒 (乙肝、丙肝、丁肝、戊肝病毒等)
二倍体细胞培养(diploid cell culture )
《医学微生物学》第二十五章和第二十六章复习题及答案
《医学微生物学》第二十五章和第二十六章复习题及答案第二十五章病毒感染的检查方法与防治原则一、单项选择题1.进行病毒病原学检查的标本递送要求是:A.孵箱保存B.室温保存C.加入防腐剂D.冷藏速送E.加入含抗生素和蛋白质的运输培养基中冷藏速送2.细胞病变效应不包括:A.细胞圆缩.脱落B.细胞融合C.形成包涵体D.干扰现象E.胞裂解3.可用于制备病毒灭活疫苗的的理化因素是:A.紫外线B.甲醇C.甲醛D.乙醇E.乙醛4.IFN-γ的产生细胞主要是:A.活化的T细胞B.活化的B细胞C.白细胞D.成纤维细胞E.巨噬细胞5.防病毒感染最有效的方法是A.使用抗生素B.使用抗病毒化学疗剂C.使用中草药D.使用疫苗E.使用抗菌药物6.下列关于减毒活疫苗缺点的叙述,错误的是:A.偶尔可能恢复为毒力株而致病B.进入人体偶尔引起并发症C.对人体免疫系统刺激过强而引起免疫麻痹D.可能活化其他的潜伏病毒E.偶尔可能引起持续感染7.病毒的致病因素是:A.内毒素B.外毒素C.侵袭力D.表面结构E.以上均不对8.下述药物对治疗病毒感染无效的是:A.干扰素B.抗生素C.聚肌苷酸D.黄连.黄苓E.三氮唑核苷9.灭活疫苗的缺点不包括:A.需多次注射B.免疫维持时间短C.疫苗成本高D.诱导细胞免疫反应差E.可发生干扰现象降低免疫效果10.人工被动免疫最常用的制剂是:A.转移因子B.干扰素C.免疫核糖核酸D.免疫球蛋白E.白蛋白11.机体在抗病毒感染中起主要作用的是:A.干扰素B.中性粒细胞C.致敏T细胞D.中和抗体E.抗毒素二、多项选择题1.病毒在细胞内增殖的指标有:A.CPEB.干扰现象C.红细胞吸附D.细胞培养液浑浊E.免疫荧光法可检测到病毒抗原2.细胞病变包括:A.变圆B.坏死C.溶解D.脱落E.融合3.送检标本分离病毒应做到:A.冷藏.速送B.加入石碳酸防治污染C.60℃加热灭菌D.置50%甘油盐水保存运送E.加入青霉素.链霉素抗菌4.能抑制病毒核酸合成的药物是:A.金刚烷胺B.阿糖腺苷C.阿糖胞苷D.无环鸟苷E.三氮唑核苷5.临床上常取粪便标本作为检测材料的病毒是:A.甲型肝炎病毒B.狂犬病病毒C.脊髓灰质炎病毒D.乙型肝炎病毒E.EB病毒6.干扰素抗病毒作用的特点包括:A.有种属特异性B.间接作用C.发挥效应早D.广谱抗病毒作用E.低毒性三、名词解释1.CPE2.减毒活疫苗3.亚单位疫苗4.IFN四、简答题1.比较减毒活疫苗和灭活疫苗的异同?2.目前可用疫苗预防的病毒性疾病有哪些?3.其抗原性不同,人类IFN分为几种?各自有何特点?答案一、单项选择题1.E2.D3.C4.A5.D6.C7.E8.B9.E 10.D 11.C二、多项选择题1.ABCE2.ABCDE3.ABD4.BCDE5.AC6.ABCDE三、名词解释1. CPE(细胞病变效应):在体外实验中,通过细胞培养和接种杀细胞性病毒经过一定时间后,可用显微镜观察到细胞变圆.坏死,从瓶壁脱落等现象,称细胞病变效应。
医学基础知识重要考点:病毒感染的检测方法
内科学辅导:老年心衰的临床特点
1、老年人因恼血管硬化及脑供血不足,记忆力差,病史常陈述不清,同时常伴有全身多种疾病存在,致使临床症状错综复杂,而心力衰竭症状往往不典型。
2、老年人在脑血管硬化的基础上,由于心力衰竭加重脑供血不足,导致脑神经细胞缺氧及机能减退,可出现各种神经精神症状,而疲乏、无力或头晕常是老年人心力衰竭最早出现的症状,亦可出现表情淡漠或烦躁不安、神志恍惚、嗜睡等症状。
8.短路血管 指一些血管床中小动脉和静脉之间的直接联系。它们可使小动脉内的血液不经过毛细血管而直接流入小静脉。在手指、足趾、耳廓等处的皮肤中有许多短路血管存在,它们在功能上与体温调节有关。
内科学辅导:胰腺癌治疗的误区
胰腺癌治疗的误区:
当胰腺癌以上腹饱胀、隐痛、胀痛不适等症状起病时,易误诊为慢性胃炎和消化性溃疡等慢性胃部疾患,但后两者临床经过为非进行性,多无体重减轻和食欲减退,胃镜检查对诊断常有决定性意义。
(五)抗原构造
本菌抗原构造与肠道杆菌一样具有O、H和K抗原。根据O抗原,可把空肠弯曲菌分成45个以上血清型,第11、12和18血清型最为常见。
二、致病性与免疫性
空肠弯曲菌是多种动物如牛、羊、狗及禽类的正常寄居菌。在它们的生殖道或肠道有大量细菌,故可通过分娩或排泄物污染食物和饮水。
(二)培养特性
为微需氧菌,在含2.5~5%氧和10%CO2的环境中生长最好。最适温度为37~42℃。在正常大气或无氧环境中均不能生长。本菌在普通培养基上难以生长,在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落,单个菌落呈中心凸起,周边不规则,无溶血现象。
(三)生化反应
由粗面内质网合成的蛋白质输送到此,经加工装配形成分泌颗粒,分泌到细胞外,例如肝细胞合成的白蛋白和脂蛋白即按此方式形成和输出。此外,细胞本身的酶蛋白如溶酶体的水解酶类也是这样,但却不装配成分泌颗粒和排出细胞外,而是以高尔基小泡的形式(初级溶酶体,前溶酶体)输送到各种吞噬体中。高尔基体在形成含糖蛋白的分泌物中、在构成细胞膜及糖萼中,以及在形成结缔组织基质中也均起着重要的作用。
病毒感染的微生物学检查方法
(一)病毒分离
标本采集
杀灭杂菌
(青链霉素)
接种
三大方法
易感动物 出现病状 鸡胚 病变或死亡 细胞培养 细胞病变
鉴定病毒种型
(二)病毒鉴定
酒也。节奏划分思考“山行/六七里”为什么不能划分为“山/行六七里”? 明确:“山行”意指“沿着山路走”,“山行”是个状中短语,不能将其割裂。“望之/蔚然而深秀者”为什么不能划分为“望之蔚然/而深秀者”?明确:“蔚然而深秀”是两个并列的词,不宜割裂,“望之”是总起词语,故应从其后断句。【教学提示】引导学生在反复朗读的过程中划分朗读节奏,在划分节奏的过程中感知文意。对于部分结构复杂的句子,教师可做适 当的讲解引导。目标导学三:结合注释,翻译训练1.学生结合课下注释和工具书自行疏通文义,并画出不解之处。【教学提示】节奏划分与明确文意相辅相成,若能以节奏划分引导学生明确文意最好;若学生理解有限,亦可在解读文意后把握节奏划分。2.以四人小组为单位,组内互助解疑,并尝试用“直译”与“意译”两种方法译读文章。3.教师选择疑难句或值得 翻译的句子,请学生用两种翻译方法进行翻译。翻译示例:若夫日出而林霏开,云归而岩穴暝,晦明变化者,山间之朝暮也。野芳发而幽香,佳木秀而繁阴,风霜高洁,水落而石出者,山间之四时也。直译法:那太阳一出来,树林里的雾气散开,云雾聚拢,山谷就显得昏暗了,朝则自暗而明,暮则自明而暗,或暗或明,变化不一,这是山间早晚的景色。野花开放,有一 股清幽的香味,好的树木枝叶繁茂,形成浓郁的绿荫。天高气爽,霜色洁白,泉水浅了,石底露出水面,这是山中四季的景色。意译法:太阳升起,山林里雾气开始消散,烟云聚拢,山谷又开始显得昏暗,清晨自暗而明,薄暮又自明而暗,如此暗明变化的,就是山中的朝暮。春天野花绽开并散发出阵阵幽香,夏日佳树繁茂并形成一片浓荫,秋天风高气爽,霜色洁白,冬 日水枯而石底上露,如此,就是山中的四季。【教学提示】翻译有直译与意译两种方式,直译锻炼学生用语的准确性,但可能会降低译文的美感;意译可加强译文的美感,培养学生的翻译兴趣,但可能会降低译文的准确性。因此,需两种翻译方式都做必要引导。全文直译内容见《我的积累本》。目标导学四:解读文段,把握文本内容1.赏析第一段,说说本文是如何引 出“醉翁亭”的位置的,作者在此运用了怎样的艺术手法。
医学微生物第24章病毒感染的检查方法与防治原则
尽早诊断和治疗,控制病毒复制,减轻病情,降 低并发症的发生率。
公共卫生措施
监测与预警
01
建立健全的病毒监测网络,及时发现疫情,采取有效措施控制
疫情扩散。
卫生宣传教育
02
加强公众的卫生宣传教育,提高公众的自我防护意识和能力。
隔离与控制措施
03
对疑似和确诊病例采取隔离措施,控制传染源,切断传播途径。
04 病毒感染的案例分析
案例一:流感病毒感染的检查与防治
病毒分离与培养
通过采集呼吸道标本进行病毒分 离与培养,是确诊流感病毒感染 的金标准。
抗原检测
利用抗原抗体反应原理,通过采 集鼻咽拭子等标本进行快速检测 。
案例一:流感病毒感染的检查与防治
• 核酸检测:利用聚合酶链式反应(PCR) 技术对病毒核酸进行检测,具有高灵敏度 和特异性。
血清学检查的优缺点
方法简便、快速,可用于回顾性诊断和流行病学调查,但不能用于 早期诊断。
抗原检测
01
02
03
原理
通过检测病毒抗原,确定 病毒的存在。
方法
包括免疫荧光法、酶联免 疫法等。
抗原检测的优缺点
灵敏度高,特异性强,可 用于早期诊断,但可能出 现假阳性或假阴性结果。
核酸检测
1 2
原理
通过检测病毒核酸(DNA或RNA),确定病毒 的存在。
方法
包括反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时 荧光定量PCR等。
3
核酸检测的优缺点
灵敏度高,特异性强,可快速诊断,但可能出现 假阳性或假阴性结果,且对检测技术要求较高。
02 病毒感染的防治原则
预防原则
疫苗接种
通过接种疫苗,提高人群免疫 力,预防病毒感染。
[医学微生物学]病毒感染的检查方法和防治原则
(3) 细胞培养(cell culture)
根据细胞来源、染色体特征及传代次数分: 原代培养细胞 二倍体细胞株 传代细胞系或株
①原代培养细胞(primary cultural cells)
剪碎 组织
蛋白酶 培养基 组织块 分散的单个细胞 单层细胞CHAPTER 25
病毒感染的 检查方法与防治原则
• 1)掌握病毒的分离培养方法; • 2)熟悉标本的采集与送检原则、病毒感染的快 速诊断; • 3)了解病毒感染的免疫预防、抗病毒治疗。
内
容
第一节 病毒感染的检查方法
第二节 病毒感染的特异性预防
第三节 病毒感染的治疗
第一节 病毒感染的检查方法
一、标本的采集与运送 病人急性期标本 标本+抗生素抑制细菌真菌繁殖
③CPE:形成包涵体(inclusion body)
⑵ 红细胞吸附(hemadsorption, HAd)
受染细胞膜表面血凝素(HA)+ RBC表面HA受体
Syncytial formation caused by mumps virus and haemadsorption of erythrocytes onto the surface of the cell sheet.
病毒鉴定:
病毒在细胞中增殖的指标
病毒形态学鉴定
病毒抗原鉴定
病毒基因鉴定
⑴ 细胞病变效应( cytopathic effect,CPE)
病毒在敏感细胞内增殖引起特有的细胞病变。
①CPE:病毒感染细胞发生形态改变
②CPE:病毒感染细
胞与邻近细胞融合
Syncytium formation in cell culture caused by RSV (top), and measles virus (bottom).
医学微生物学:第二十五章 病毒感染的检测与防治原则
➢人工主动免疫 ➢人工被动免疫
人工主动免疫 Artificial active immunization
病毒感染的预防
➢灭活疫苗 ➢减毒活疫苗 ➢亚单位疫苗 ➢基因工程疫苗 ➢核酸疫苗
Fig Edward Jenner vaccinating (inoculating) James Phipps with cowpox material.
Successful vaccines Smallpox
Smallpox
• Variolation
Smallpox
• Jenner 1796: Cowpox/Swinepox • 1800’s Compulsory childhood vaccination • 1930’s Last natural UK case • 1940’s last natural US case • 1958 WHO program • October 1977: Last case (Somalia) • 1979 WHO announcement
注意事项
1. 减毒疫苗回复突变导致毒性增强; 2. 在免疫系统受损的人中导致疾病; 3. 导致先天缺陷,尤其是在怀孕头3个月接
种活疫苗; 4. 减毒疫苗和其他病毒重组。
Inactivated vaccines (Vaccinia, Salk) Live attenuated organism (Sabin) Subunit vaccines (HBsAg) DNA vaccines (still in effort)
Hep-2 HeLa A549 Vero
人喉癌 人子宫颈癌
人肺癌 非洲绿猴肾
无限
➢ 识别病毒增殖的方法
病毒的检测方法
病毒的检测方法
病毒是一种微生物,它可以侵入人体,引起各种疾病。
为了及时发现和治疗病毒感染,科学家们研究出了多种病毒检测方法。
下面我们来详细了解一下这些方法。
首先,最常见的病毒检测方法之一是血清学检测。
这种方法通过检测血液中的抗体和抗原来判断是否感染了某种病毒。
例如,ELISA(酶联免疫吸附法)就是一种常用的血清学检测方法,它可以快速、准确地检测出病毒感染的情况。
其次,分子生物学检测方法也是一种常用的病毒检测手段。
这种方法通过检测病毒的核酸来确定感染情况。
例如,PCR(聚合酶链反应)技术可以在体外放大病毒核酸的数量,从而快速准确地检测出病毒感染。
除此之外,还有一种新兴的病毒检测方法——免疫荧光检测。
这种方法利用荧光标记的抗体来检测病毒颗粒或感染细胞,具有高灵敏度和高特异性的优点,可以在短时间内准确判断出病毒感染的情况。
此外,还有一些其他的病毒检测方法,如快速抗原检测、核酸杂交检测等。
这些方法各有特点,可以根据具体情况选择合适的方法进行检测。
总的来说,病毒的检测方法多种多样,每种方法都有其独特的优势和适用范围。
在实际应用中,我们可以根据具体情况选择合适的检测方法,及时发现和治疗病毒感染,保障人们的健康。
希望以上内容对您有所帮助。
病毒感染的诊断方法
病毒感染的诊断方法随着科技的不断发展,病毒感染的诊断方法也得到了很大的提升。
传统的病毒检测方法主要包括细胞培养、病原体血清学检测和凝胶扩增反应(PCR)等。
但是这些方法不仅耗时、费力、成本高昂,而且其诊断结果通常需要等待数天或数周才能得到,这严重影响了治疗效果的实施。
近年来,基于分子诊断技术的病毒检测技术逐渐成为了病毒感染的重要诊断工具,其具有快速、准确、灵敏、特异性高等优点,常用的包括PCR、实时PCR、荧光定量PCR、LAMP等。
PCR技术是目前最常用的病毒检测方法之一,可以通过扩增DNA序列来检测病原体的存在。
其基本的扩增过程是依靠聚合酶链反应(PCR)引入寡核苷酸引物,把双链病毒基因组DNA针对性扩增为单链,然后由核酸杂交探针或测序鉴定实现病毒检测和鉴定。
PCR技术优点众多,扩增速度快、检测结果可靠、检测灵敏度高等;但同时也有一些不足之处,比如对于样品的污染容易造成假阳性结果、扩增过程中需要提取病毒RNA或DNA等等。
因此,PCR技术在实际应用中常常需要与其他分子诊断技术联合使用。
实时定量PCR技术是PCR技术的一种改进,通过同步扩增和检测,使得扩增反应和检测过程可以同时完成,从而显著节省检测时间和检测成本。
使用这种技术,可以在一小时之内查出细菌和其他微生物的存在与否,极大地提高了临床诊断效率和准确率。
近年来,LAMP技术也逐渐成为了一种有前途的病毒检测技术。
这种基于等温扩增的技术能够快速、高效地检测出微生物DNA片段,并具有极其高的检测敏感性和特异性,因此可以检出极低浓度的病毒。
与PCR技术不同的是,LAMP技术直接利用寡核苷酸引物在等温环境下扩增DNA,其运行温度相对比较低,热稳定性也更强一些。
此外,LAMP技术的反应体系比传统PCR技术更简单,可以拓宽检测范围,帮助诊断人员更好地监控和控制疫情。
总之,病毒感染的诊断方法的不断发展与完善给了我们更大的希望和更准确的诊断结果。
不过,由于病毒的变异和传播速度很快,因此更加复杂的病毒检测技术和方法需要得到更加深入地研究和应用。
病毒的检测方法
病毒的检测方法病毒是一种微生物,它可以侵入宿主细胞并利用宿主细胞的生物合成系统复制自己。
病毒的检测是非常重要的,它可以帮助人们及时发现病毒的存在,采取相应的措施来控制和治疗病毒感染。
目前,病毒的检测方法有很多种,包括免疫学方法、分子生物学方法、细胞学方法等。
下面将详细介绍几种常见的病毒检测方法。
首先,免疫学方法是一种常用的病毒检测方法。
这种方法利用人体免疫系统产生的抗体来检测病毒的存在。
常见的免疫学方法包括ELISA法、免疫荧光法和免疫印迹法。
这些方法可以通过检测血清、唾液、尿液等样本来确定病毒感染的情况。
免疫学方法具有操作简单、结果快速的特点,因此被广泛应用于临床诊断和流行病学调查中。
其次,分子生物学方法也是一种常用的病毒检测方法。
这种方法利用PCR、实时荧光定量PCR、核酸杂交等技术来检测病毒的核酸。
分子生物学方法具有高灵敏度和高特异性的特点,可以检测到病毒的极低浓度,因此被广泛应用于病毒性疾病的诊断和研究中。
另外,细胞学方法也是一种常用的病毒检测方法。
这种方法利用细胞培养和显微镜技术来检测病毒的存在。
通过观察细胞的形态和结构变化,可以判断细胞是否受到病毒感染。
细胞学方法具有直接观察病毒感染的优势,可以帮助人们更直观地了解病毒的生物学特性。
总的来说,病毒的检测方法有很多种,每种方法都有其特点和适用范围。
在实际应用中,可以根据具体情况选择合适的检测方法来进行病毒检测。
同时,随着科学技术的不断发展,病毒的检测方法也在不断更新和完善,相信在不久的将来,会有更多更准确、更快速的病毒检测方法出现,为人们的健康保驾护航。
公卫执业医师辅导:病毒感染的检查方法
公卫执业医师辅导:病毒感染的检查方法1.病毒感染的检查方法(1)标本的采集与送检病毒感染的检查结果取决于标本的正确采集和递送。
发病初期或急性期采集的标本,易于分离出病毒。
血清学诊断的标本,应在患者急性期和恢复期各取一份血液,以便对比双份血清中抗体效价。
(2)病毒分离培养的方法①鸡胚接种:鸡胚对多种病毒敏感。
根据病毒种类不同,可将标本接种于鸡胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜上,主要用于流感病毒的分离。
②组织培养:将离体活组织块或分散的活细胞加以培养,统称为组织培养。
组织培养法有三种基本类型:器官培养、移植培养和细胞培养。
细胞培养最常用于培养病毒。
③动物接种:这是最原始的病毒培养方法。
常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接种的途经有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内等。
根据病毒种类不同,选择敏感动物及适宜接种途径。
(3)病毒感染的血清学诊断方法:环球网校整理常用的方法有中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验等方法。
和应用免疫学标记技术发展的酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)等特异、灵敏的微量血清学方法。
①中和试验(NT):是指病毒在或体内或细胞培养中,被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。
中和抗体特异性高,持续时间较长,因此流行病学常用此法。
②血凝抑制试验:许多病毒能凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞,称为血凝现象。
这种现象能被相应抗体所抑制,称血凝抑制试验。
③酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)④蛋白印迹试验(WB)⑤检测病毒核酸的分子生物学试验:聚合酶链反应(PCR);核酸杂交技术;基因芯片技术;病毒基因测序等。
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医学微生物学属于医学基础知识需要掌握的内容,中公卫生人才招聘考试网帮助大家梳理相关知识。
1.病毒检测与细菌检测的区别:
病毒是非细胞型微生物,必须在易感活细胞内才能增殖,其最大区别在分离培养和形态观察。
(1)病毒的分离培养需要用动物接种、鸡胚培养和组织细胞培养,而细菌大多可用人工培养基培养。
培养物的鉴定:病毒多通过观察动物发债额细胞病变效应等方法;细菌则主要通过观察在培养基内的生长情况及生化反应等。
(2)病毒的观察需要电子显微镜,光学显微镜只能观察病毒形成的包涵体;细菌则可在光镜下观察。
2. 测定病毒抗原的常用方法有:直接免疫荧光法、ELISA法、蛋白电泳和蛋白印迹分析等;测定病毒抗体常用的方法有:补体结合试验、中和试验、血凝抑制试验、间接免疫荧光法、ELISA等。
3. 检测病毒抗原与抗体的临床意义:病毒侵入机体的是病毒抗原,随后才产生抗体。
因此检测抗原比检测抗体更有早期诊断价值。
检测抗体除测定特异性IgM有早期诊断意义外,IgG测定一般多用于流行病学调查。