乙型肝炎病毒基因变异的检测及相关因素的分析
乙型肝炎病毒基因变异及临床相关性研究
（ ）１例 ， 性 乙 型 肝 炎 ｆＨ ）０ ＡＨ ９ 慢 Ｃ Ｂ ３ ９例 ， 硬 化 （Ｃ 肝 Ｌ１
５ ８例 ， 型 肝 炎ｆＨ ８ 重 Ｓ ）３例 ， 发 性 肝 癌 （ＨＣ １ 原 Ｐ ）４例 临床 诊 断均 符合 ２ ０ ０ ０年第 十次 全 国病 毒 性 肝 炎 与 肝 病 学 术 会 议 修 订 的 《 毒 性 肝 炎 防治 方 案 》 病 的标
时， 即判定 为 Ｈ Ｖ １ ９ ｃ阳性 。在 ９ ￣ ０Ｂ Ｂ ８ ６ ５ １ Ｄ处出现
ｌ 资 料与方 法 １１ 标本 和来 源 ６ ０例 ＨＢ ． ４ Ｖ感染 者 血 清均来 自 我 院 ２０ ０ ６年 ０ ８年 期 间 门诊 和 住 院患 者 ． ５ １ ２０ 男 ４ 例， 年龄 ３ ７ ～ ４岁 ． ９ 女 ９例 ， 年龄 ４ ６ ～ ７岁 。其 中慢 性
３ ｓ ５ ｑ ０ ２ ３ ｓ ２个 循环 ．２【 ０ ｎ ０ ０Ｃ ３ ｓ ７ ℃ ０ ） ３ ７。 ＝１ｍｉ。经 Ｐ Ｒ 扩 增 后 ．将 样 品 加 入 到 微 流 芯 片 中 ．放 人 Ｃ
异情 况 ． 探讨 Ｈ Ｖ基 因变 异 临床 意 义 ． Ｂ 了解 南 昌地
区 ＨＢ Ｖ基 因变异 频率 和类 型
孙 华 宝 曹 立 罗娅 薇 ｚ吕定英 ｓ 龙 ｓ ， ， ， ， 徐 ， 敖琴 芳 庄 小红 刘淑 萍 ， ，
（ 、 昌市 第 九 医 院 中 心实 验 室 ； 、 剂科 ； 、 染 科 ， １南 ２药 ３感 江西 南 昌 ３０ ０） ３ ０ ２
摘 要： 目的 了解 南 昌地 区 乙 型 肝 炎 患 者 Ｈ Ｖ基 因变 异 特 征 ， 讨 ＨＢ 基 因 变 异 与 临 床 的 关 系 。 方 法 应 用 微 流 芯 片 技 术 Ｂ 探 Ｖ
HBV耐药基因突变检测
HBV耐药基因突变检测项目简介：HBV是一种经血液传播的嗜肝DNA病毒，是导致慢性肝炎、肝硬化和肝癌的重要因素。
抗病毒治疗是最常见的乙肝治疗方式。
国内外公认的抗病毒药物主要有干扰素和核苷（酸）类药物两类。
核苷（酸）类药物因口服方便、毒副作用少、病毒载量下降较快而受到广泛关注。
长期服用核苷（酸）类药物易产生耐药。
在用药过程中，患者体内HBV DNA及谷丙转氨酶（ALT）逐渐下降，继而达到一个平稳期，患者病情减轻。
此时，HBV很难被完全清除，而是处于一个低复制非活动时期。
随着用药时间的延长，对药物敏感的野生株数量下降，具有耐药突变的变异株因对药物不敏感，而得以不断复制、增加，从而导致HBV DNA及ALT重新上升，使得肝炎复发。
耐药发生的直接后果即为药物疗效的降低和丧失，具体表现为肝炎复发、肝病急性加重、肝硬化，甚至出现肝衰竭。
乙型肝炎病毒耐药是指在核苷酸类似物作用下，药物靶乙型肝炎病毒 P 基因中的某些位点发生改变，导致这种药物对乙型肝炎病毒的抑制作用下降或消失。
自拉米夫定上市以来，目前经美国FDA 批准先后上市的核苷酸类似物有阿德福韦、恩替卡韦和替比夫定。
这些药物作用下出现的病毒耐药均与乙型肝炎病毒 P 基因变异有关。
如拉米夫定耐药相关突变位点为D 区M204V/ I、B 区L180M，阿德福韦相关突变位点为D 区N236T、B 区A181V，替比夫定为M204I，L180M，病毒只需要1 个上述位点突变就可发生对这些药物耐药。
而对恩替卡韦耐药必须建立在拉米夫定耐药基础上(L180M +M204I/V)，同时出现Al84G 或S202I 或M250V 突变。
随着用药时间推移，各类核苷酸类似物发生耐药的几率是不尽相同的。
其中拉米夫定几率最高，而恩替卡韦由于具有较高耐药基因屏障，所以产生耐药的几率最低，在用药后的4 年内都维持在1.1%。
因此通过检测HBV耐药基因突变点有助于判断治疗的效果、制定个体化抗病毒治疗方案。
浅析乙肝病毒基因突变检测及治疗
浅析乙肝病毒基因突变检测及治疗发表时间：2011-02-15T10:46:47.500Z 来源：《中外健康文摘》2010年12月第34期供稿作者：莫飞渊[导读] 由于我国人民生活水平低和卫生资源溃乏，造成乙肝泛滥。
莫飞渊 (江苏省宜兴市人民医院检验科 214200)【中图分类号】R512.62 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2010）34-0016-02一、概况由于我国人民生活水平低和卫生资源溃乏，造成乙肝泛滥。
据统计：我国有乙肝病毒携带者约1.5亿、慢性迁延性肝炎约2500万、慢性活动性肝炎约1000万、重症肝炎约150万、肝硬化约100万和肝癌16～30万。
肝硬化和肝癌80%以上是由乙肝病毒引起，而且80%左右来源于家族性垂直传播、与病人接触而感染机率很少。
乙肝传染病已被国家疾病预防控制中心列为重点监控的疾病之一。
乙型肝炎病毒（HBV）属嗜肝病毒科，基因结构复杂，根据HBV-DNA核苷酸序列异质性≧8% 为一种基因型的规定，HBV目前分为A ～H 8个基因型，其中A、B、C、F 4个基因型存在不同的亚型，且分布呈区域性。
由于其在复制过程中HBV-DNA聚合酶缺乏校正功能，导致易于变异，有报导HBV的基因型与基因型变异可能与HBV相关性肝癌的发生发展有关。
HBV变异给疾病的预防、诊断、治疗和预后带来了新问题，不同基因型的基因变异、临床表现及对抗病毒、肝移植等的治疗反应存在差异。
二、变异及区域HBV受自然压力、个体免疫力和药物治疗作用出现变异。
HBV有四个开放阅读框架（ORE）即S、C、P、X区。
1、C区变异：用基因芯片检测HBV前C区和C基因启动子（BCP）区4位点突变，发现前C区A1896、前C区A1814、BCP区nt1762、BCP区nt1764突变检出率分别是58.57%、12.86%、54.29%、52.86%。
突变的发生依次是慢重肝、慢乙肝重度、中度、轻度，血清病毒标志是HBeAg(-)HBeAb(+)、HBV-DNA定量在104-106copy/ml之间的突变发生率最高。
不同基因型的乙型肝炎病毒基因变异状况分析
国际检验 医学杂志 ２０ 年 １ ０７ ２月第 ２ ８卷第 １ Ｉｔ ａ ｄＤ ｃ ｅ ０７Ｖ １ ８Ｎ ．２ ２期 ｎ ＪＬｂＭｅ，ｅｅ ｒ ０ ，ｏ． ，因型 的 乙型肝 炎 病 毒 基 因变 异 状 况 分 析
Ａｎ ｌｓｓｏ ｅ ａｉｓＢ ｖｒ ｓｇｎ ｕａｉｎ ｔ ｉｆｒ ｎ ｅ ｏｙ ｅ ＬＪ Ｃ ｅ ｇ ｎ ａｙ ｉ ｆｈ ｐ ｔ ｉ ｉｕ ｅ ｅｍ ｔｔ ｓｗｉｈｄ ｆｅｅ ｔｇ ｎ ｔｐ ｓ ｔ ｏ ｈ ｎ 一 ｏ ｇ，Ｇ ＡＯ ｉ Ｙｕｊ ｎ，
Ｈ（Ｕ ｕ ｎ ｐ ｉ ｔ １ ） Ｙ ａ — ｅ ，ｅ ．ＸＭ ｈ） ｎｆ ｃｉｕ ｓａ ｅ ｓ ｔ ｌ ａ （ Ｉ ｅｔｏ ｓＤｉｅ ｓｓＨｏｐｉａ ，Ｘｕ ｈ ｕ２ １ ０ ，Ｃｈ ｎ ｕ ｚｏ ２０ ４ ｉａ
６ 例 、 细 胞 癌 （ Ｃ）６例 、 型肝 炎 （ ＨＦ ３ ９ 肝 ＨＣ ２ 重 Ｆ ）４例 的 基 因型 和 部 分 点 突 变 ， 比 较 基 因 型 与 基 因 变 并 异 、 床 类 型 与 基 因 变 异 的 关 系 。结 果 临 各 临 床 型 间第 １７２位 和 第 １７ ４ 双 变 异 差 异 显 著 ， Ｃ ６ ６ 位 ＡＳ 组与 Ｃ ＨＢ组 、 Ｈ１ ｃ组 、 Ｃ组 和 Ｆ ＨＣ ＨＦ组 相 比较 ， 分 别 为 １ ． ９ 、２ ４ ８６ １ ． １ 、１ ７ ２４ ０ ８ ８５ ４ ． ０ 、４ ０ ５９ ２ ． ３ ， Ｐ分 别 为 ０ ０ １０ ０ ０ ００ ０ ０ ０２和 ０ ０００ 基 因型 Ｂ与 Ｃ 型 的 第 １７ ２位 、 １７４位 双 突 变 相 ．０ 、． ０ 、． ０ ． ０ ； ６ 第 ６ 比 ，ｚ ８ １９５Ｐ一 ０ ０００ 结 论 Ｙ 一４ ． ３ ， ． ０ 。 基 因 型 的存 在 决 定 了 ＨＢ 的某 些 其 他 基 因 变 异 的方 向和 频 Ｖ 率 ， 而 也 决 定 了 因此 而 造 成 的肝 损 伤 的程 度 。 从
乙型肝炎病毒基因自然变异耐药性与HBV DNA、HBeAg、ALT及AST相关因素分析
变异可 以导致原发性 耐药 ， 响抗 病毒疗效 。因此 ， 影 研 究 Ｈ Ｖ基因 自然变异耐药性及其相 关 因素 ， 预防耐 Ｂ 对 药、 合理制订抗 Ｈ Ｖ治疗方案十分重要 。随着抗 Ｈ Ｖ Ｂ Ｂ 核苷 （ ） 酸 类似物 种类 的增 多和使 用 时间的延 长 ， 的 新 耐药 突变形 式 的陆续 出现 ， 仅检测 拉米夫 定耐药 突变
４ ８ —４ ６． ５ ６
毕均可尽早拔除喉罩 ， 恢复 咳嗽反射 和咽部反射 ， 而 从 避免积 血和痰 液潴 留于气管 及肺 内 ， 最快使 呼吸道恢
复通畅 。 综上所述 ， 喉罩 通气七 氟醚 吸人全 麻 和丙 泊酚 静 脉全麻 均满 足用 于支气管镜 检查 ， 氟醚 吸人全麻 在 七
ｔｖｄｎｓｐ ａｏｅＨＰ、 国 Ｑ Ａ Ｅ 生 产 Ｐ ｒＭａｋＧ ｌ ａｉｉ ｅ ｈ ｒｓ 德 ＩＧ Ｎ ｙｏ ｒ ｏｄ
注 ：Ａ 拉米夫定 ； Ｄ 阿 德福韦酯 ； Ｔ 恩替卡 韦 ；Ａ 替 比 Ｌ Ｍ： Ａ Ｖ： Ｅ Ｖ： Ｉ Ｔ：
夫 定 ；Ｄ 替诺 福 韦 Ｔ Ｆ：
２ ４ Ｈ Ｖ 自然 变异 与 ＨＢ Ｎ 载 量 、 ． Ｂ ＶＤ Ａ Ａ 、 Ｔ相 关 ＡＳ
４ （ ） ２ ４—２６ ６６ ：６ ６．
早期 苏醒恢 复咳嗽反射对防止肺不张等并 发症有极 大 的好处 。因此 ， 选用 短小 易苏醒 的麻 醉药物 是实 施支 气管镜检查 中首先考虑 的因素 。
本研究显示 ， 在喉罩通气保证呼 吸的前 提下 ， 应用 七氟醚 吸入全麻 及丙 泊酚静 脉全麻 ， 均可保证 患者 在 检查 中无痛 ， 术后无不 良刺激 。２种 方法实施 麻醉 ， 术
ｔ ｅ ａ ｅ ｔ ｅｉ ｓｏ ｉ ｎ ｓｈ ｔｃ ｎ Ｋ ａ ｄ Ｃ 一 ｈ ｎ ｅ ｕ ｒ ｎ ｓｉ ｏ ｃ ｎ ｒ ｃ ｅ ｌ ｌ ｎ １ ｃ ａ ｎ ｌｃ ｒｅ ｔ ｎ ｐ ｒ ｉ ｅ ｔ ｈ ａ ａ
乙型肝炎病毒X基因变异和慢性乙型肝炎患者临床与组织病理学指标的相关性
［ ｂ ｔａｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｔ ｄ ｈ ｅａｉｎ ｈｐ ｂ ｔ ｅ ｈ ｔｔ ｎ ｆｈ ｐ ｔ ｉ Ｂ ｖｒ ｓＸ ｇ ｎ Ａ ｓｒｃ］ ｊｃｉ ｏ ｓｕ ｙｔ ｅｒｌｔ ｓ ｉ ｅｗｅ ｎ ｔｅｍｕａｉ ｓｏ ｅ ａｉｓ ｉｕ ｅ ｅ ｖ ｏ ｏ ｔ
包 云 朱虹光 张慧萍 凌玉 胡锡琪 朱 荣 ４ ／ － 琴
（ 复 旦 大 学附 属 华 山 医 院 外科 病 理 室 ‘ 上海 ２ ０ ４ ； 复 旦 大 学 上海 医学 院 病 理 学 系 上 海 ０００ ！ ２） １ ） 【１ ２ （３ （
【 要】 目 的 探 讨 慢 性 乙 型 肝 炎患 者肝 组 织 内 乙 型 肝 炎 病 毒 （ Ｖ） 基 因部 分 区 段 的 变 异 与 ＨＢ 相关 各 摘 ＨＢ Ｘ Ｖ
ｎ ｌ ６ ， ７ ４突 变 型所 占 比率 肝 癌 组 与 肝 炎 组 相 比 显 著 增 高 （ ｔ７ ２／ ６ １ Ｐ＜ ０ ０ ） ． １ 。结 论 肝 组 织 内 ， ｎ ｌ ２ ～ １ ３ 在 ｔ７ ５ ０突 ７
变 能 显 著 降 低 ＨＢ Ａ ｃ ｇ的表 达 和 ＨＢ ＮＡ 水 平 ， ｔ７ ２ １ ６ ＶＤ ｎ ｌ ６ ／ ７ ４突 变 则相 反 。肝 组 织 内 ＨＢ 的 高 负 载可 能与 肝 Ｖ
四 种病 毒蛋 白的 表 达 ； 光 实 时 定 量 Ｐ Ｒ 检 测 肝 组 织 内 Ｈ Ｖ Ｄ 荧 Ｃ Ｂ ＮＡ 含 量 。 结 果
ＨＢ 基 因 ｎｌ８ ～ １９ ＶＸ ｔ５ ３ ７ ３
区 段 错 义突 变 主 要 出 现 在 对 应 的 Ｘ 蛋 白 ａ ８ ｎ ｌ ３ 、 ６ ３ 、 ８（ ｔ ６ ５、 ６ ６） １ ６（ ｔ７ ９） １ ８（ ｔ７ ６、 ａ ７（ ｔ６ ２ １ ３ ） ８ ｎ ｌ ３ １ ３ 、 １ ｎ ｌ １ 、 １ ｎ ｌ ２
乙型肝炎病毒基因变异的探究
若 此 区基 因的变异株 （ ａ 抗原 ） ， 血 清 中虽有抗 一 Ｈ Ｂ ｓ
参考文献 ：
而无免疫保护作用 ， 结果 Ｈ Ｂ ｓ Ａ ｇ 与抗 一 Ｈ Ｂ ｓ 可同时 出现
于血清中 ； 有试验证 明， ｓ 基 因的突变体可干扰病毒颗粒 的组装 ，导致 Ｈ Ｂ Ｖ颗粒分 泌下降 ；实验 研究 还发 现 ，
［ １ ］ 骆 抗先． 乙型肝 炎一基础与 临床 ． 人 民卫生 出版社 ，
１ ９ ９ ７ ． 【 ２ 】 叶维法． 肝病免疫 学． 科 学技术 出版社 ， １ ９ ９ ３ ．
Ｈ Ｂ Ｖ基 因组 剪接 ｓ 基 因区产生 的大分 子蛋 白变异体可
导致肝细胞 空泡化及肝细胞 凋亡作 用 ，与 Ｈ Ｂ Ｖ感染导 致肝细胞直接病变有关 。 由此可见 ， ｓ 基 因的多处变异均
（ Ｙ Ｍ Ｄ Ｄ ） 区域 ， 不 同的核 苷类似 物耐药 株 的变 异位点 不 一致 ，拉 米夫定 耐药 株 的 Ｐ基 因变异 多位 于 Ｂ区和 ｃ 区， 其 中 ｃ区 Ｙ Ｍ Ｄ Ｄ变异最 为常见 ， 而泛昔 洛韦耐 药株 的Ｐ 基 因变异多 位于 Ｂ区 ， 两者 较少 重叠 ， 这 对 于设 计 使用 不同的核苷类似物有重要 的指导意 义。核苷类似物 可避免 的， 目前体 内外实验 均证明耐药性 的产生 与 Ｐ 基 因变异有关 。随着 抗 Ｈ Ｂ Ｖ核苷类 似物的临床应用 ， 正确
的， 但相对集 中于 Ｐ基 因酪 氨酸 一蛋氨酸 一天 门冬 氨酸
系列简单 、 准确 的分 型方法 ， 推动 了 Ｈ Ｂ Ｖ基 因型 的流 Ｈ Ｂ Ｖ基因组又称 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ，由 ３ ２ ０ ０碱基对组成 ，
行病学及临床相关研 究。 为环状部分双股 Ｄ Ｎ Ａ ， 分 为长 的负链 （ Ｌ ） 和短 的正链 （ ｓ ）
慢性乙型肝炎患者HBV DNA YMDD 变异的检测及意义
文章编号:100025404(2005)022******* 论著慢性乙型肝炎患者HBV DNA YMDD变异的检测及意义李 玲,毛 青,黄燕萍,王宇明 (第三军医大学西南医院全军传染病研究所,重庆400038) 提 要:目的 了解慢性乙型肝炎患者H BV DNA Y M DD变异的存在情况及意义。
方法 检测90例慢性乙型肝炎患者H BV DNA Y M DD变异,对发生H BV DNA Y M DD变异的20例患者的肝功能、H BeAg、H BV DNA及H BV DNA Y M DD变异情况进行分析。
结果 90例慢性乙型肝炎患者中检出H BV DNA Y M DD变异共20例(阳性率12100%),已服用拉米夫定者36例,检出Y M DD变异9例(25100%),未服用拉米夫定患者54例,检出Y M DD变异11例(阳性率20137%)。
在20例Y M DD 变异患者中有5例H BeAg阴性;20例Y M DD变异患者H BV DNA在31021×105～21369×108(5141×107±7175×107)copies/ ml,A LT34～1216(288120±338107)I U/L,T B819～32617(48174±72120)μm ol/L。
结论 Y M DD变异株可在拉米夫定治疗过程中出现,也可天然存在,Y M DD变异可与前C基因变异同时存在,提示H BV的变异常常是多位点的;Y M DD变异株H BV复制处于中～高度水平;Y M DD变异株的致病性轻重不等,肝功能可为正常,也可是轻度～高度等不同程度异常。
关键词:慢性乙型肝炎;Y M DD变异;拉米夫定 中图法分类号:R373.21;R394233;R512.63 文献标识码:ADetection of HBV DNA YMDD mutation in patients with chronic hepatitis B and the significanceLI Ling,M AO Qing,H UANG Y an2ping,W ANG Y u2min(Department of In fectious Diseases,S outhwest H ospital,Third Military Medical University,Chongiqng400038,China) Abstract:Objective T o investigate the existence of H BV DNA Y M DD mutation in patients with chronic hep2 atitis B and the related significance1Methods H BV DNA Y M DD mutation was detected in90patients with hepatitis B1The liver function,HbeAg,H BVDNA,and H BV DNA Y M DD mutation in patients with H BV DNA Y M DD muta2 tion were analyzed1Re sults H BV DNA Y M DD mutation was found in20out of90patients with hepatitis B(posi2 tive rate12100%)1H BV DNA Y M DD mutation was found in9out of36patients receiving lamivuding therapy(posi2 tive rate25100%),but H BV DNA Y M DD mutation was found in11out of54patients without lamivuding therapy (positive rate20137%)1In the20patients with H BV DNA Y M DD mutation,5patients were negative in H BeAg1H BV DNA,A LT,and Tb of the20patients with H BV DNA Y M DD mutation were310221×105-21369×108(5141±7175×107)copies/ml,34-1216(288120±338107)I U/L,and819-32617(48174±72120)μm ol/L,re2 spectively1Conclusion H BV DNA Y M DD mutation may occur during the process of lamivuding therapy or may exist naturally1Y M DD mutation may co2exist with pre2C gene mutation,suggesting that mutation often occurs in many sites in H BV genes1The reproduction level of H BV DNA ranges from the middle to the high levels1The pathogenicity of Y M DD mutation species is various1The liver function may be normal and may als o be abnormal in various degrees in these patients with H BV DNA Y M DD mutation1 K ey w ords:chronic hepatitis B;Y M DD;mutation;lamivudine 拉米夫定是一重要的抗H BV药物,它具有起效快、副作用小、服用方便等优点,但随着拉米夫定的广 作者简介:李 玲(1963-),女,重庆市人,博士,副主任医师,主要从事乙型肝炎发病机制的研究,发表论文15篇。
乙型肝炎病毒基因型和基因变异在乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎中的意义
Ｃｌ ｉａ ｉ ｎ ｆｃ ｎ ｅ ｏ ＢＶ ｅ ｏ ｙ ｅ ａ ｄ ｍｕ ａ ｏ ｓ ｉ ｅ ａ ｔｓ Ｂ ｉｕ ｓ ｏ ｉ ｔ ｄ ｉ ｃ ｌ ｓｇ ｉ ａ ｃ ｆ Ｈ ｎ ｉ ｇ ｎ ｔｐ ｎ ｔ ｔ ｎ ｎ ｈ ｐ ｔ ｉ ｖ ｒ ｓ ａ ｓ ｃａ ｅ ｉ ｉ
ห้องสมุดไป่ตู้
著 木
乙型肝 炎病 毒 基 因型 和 基 因变 异 在 乙型肝 炎病 毒 相 关 性 肾小 球 肾炎 中 的意义
田华 生 ，杨 艳 萍 ，刘 树 人 李超 群 ，
摘要 ：目的 探讨 Ｈ Ｖ基 因型及基 因变异等病毒 因素在 乙型肝炎病毒相 关性 肾小 球肾炎 （ Ｂ － Ｎ） Ｂ Ｈ ＶＧ 中的意义。方法 选择 ４ 例 Ｈ Ｖ Ｇ 患者 ，采用荧光 Ｐ Ｒ法检测 Ｈ Ｖ Ｇ 患者基 因型 ，Ｈ Ｖ多态性 １ Ｂ －Ｎ Ｃ Ｂ －Ｎ Ｂ
ｗｅｅｅａ ｎ ｄｉ ４ ａｉ ｔｗｉ Ｂ － Ｎ． ｅｈ ｄ ＨＢ ｅｏｙ ｅａ ｄＨ Ｖ ＮＡ ｍｕ ｔ ｎ （ｒｃ ｒ ｒ ｘｍｉｅ ｐｔ ｎｓ ｔ Ｈ Ｖ Ｇ Ｍ ｔｏ ｓ ｎ １ ｅ ｈ Ｖ ｇ ｎｔｐ ｎ Ｂ Ｄ ｔ ｉ ｓ ｐｅｏｅ ａ ｏ １９ ｎ ＭＤＤ ｗｅｅｄｔ ｍｉｅ ｙｒｓ ｉｉｎｆ ｇ ｎ ｎ ｔ ｏｙ ｒｈｓ ｔｃｎｑ ｅ． ｌ ｉａ ｄｔ， ６ａ ｄＹ ８ ） ｒ ｅ ｒ ｎｄｂ ｅｔｃ ｏ ａｍｅｔｅ ｇ ｐ ｌｍｏｐ ｉ ｅｈ ｉ ｓ Ｃｉ ｃｌ ａａ ｅ ｒｔ ｒ ｌ ｈ ｍ ｕ ｎ
Ｌｖｒ ｓａｅ Ｐ ４ ８Ｈ ｓｉ ｌＧ ａｇ ｈｕ５ ０， ｈｎ ； ｕａ ｎｖｒｉ ｆ ｌ ｔ ｕ ｌ ｅ ｌ ｉ ｅｓ， Ｌ ５ ｏｐ ｔ ， ｕ ｎｚ ｏ １ ６ ０ Ｃ ｉａ ３Ｆ ｄ ｎＵ ｉ ｓｔ Ａ ｉ ｅ Ｐ ｂｉ Ｈ ａｔ ｅ Ｄｉ ａ ０ ｅ ｙ ｉ ａｄ ｃ ｈ
影响乙型肝炎患者HBV YMDD变异的相关因素分析
２ ４ 肝穿病理 学检查 对 ５例慢性 乙型肝 炎 １ 月，血清 ． ４个 ＨＢ ＤＮ Ｖ－ Ａ依然 阳性 患者 ， 进行肝 穿病理 诊 断， 果提示 肝组 结
织炎症及纤维化 状 态依 然存 在 ， 免疫 组化 ＨＢ Ａｇ ＨＢ Ａｇ阳 ｓ 、 ｃ
性。
３ 讨
论
本 组实验观察发现拉米 夫定可迅 速 、 显著地抑 制病毒 ， 使
王 砚 冰 ， 石 铭 。
（． 宁省铁 岭 市 中心血 站 １２ ０ ；．辽 宁省 大连 市第 六人 民 医院 １６０ ） １辽 １００ ２ １０ １
【 要】 目的 摘 探讨 拉米夫定治疗 慢性 乙型肝炎 （ 称 乙肝 ） 下 过程 中 乙肝 病毒 Ｄ ＮＡ 聚合酶 Ｐ区 （ Ｖ Ｙ ＨＢ Ｍ— 对应用拉米夫定 （ Ｍ） ＬＡ 治疗 的 ２ ２例 慢性 乙肝患者 进行肝功 能 、 乙肝病 毒血清 学标
变异 ， 随着 治疗时间延长 ， 其变异发生率 越高 ； ｅ ＨＢ Ａｇ血清转换率不高 ； 组织内仍处于炎症及纤维化状 态 肝
【 关键词】 拉米夫定 ； 慢性 乙型肝炎 ； ＨＢ ＹＭＤ Ｖ； Ｄ 中圈分类号 ： １ ． ２ Ｒ５ ２６ 文献标 识码 ： Ａ 文章编 号：６ ２９ ５ （０ ７ ０ —４０ １ ７ —４ ５ ２ ０ ） １２—１ 可快速抑制病毒 。 治疗前 病毒量的高低不影 响其 治疗效果 。见
≥２ ｇ ｍ！ ０ｎ ／ 为高病毒含量 。 ｏｎ ／ 为低病 毒含量 ， ＜２ ｇ ｍｌ 以寻找
ＨＢ ＤＮ 含量高低 与治疗 效果 讯
２ １ 丙 氨酸 氨基 转 移酶 （ Ｔ） ＨＢ Ａ ． ＡＬ 、 ｅ ｇ血 清转 换 及 ＨＢ Ｖ－ Ｄ ＮＡ 检验结 果 ２ ２例中有 １ ２例 Ａ Ｔ升高 ， Ｌ 血清 ＨＢ Ｄ ＮＡ Ｖ 阴性 ７ ， 清 ＨＢ Ａｇ发生转换 ３例（ ３６ 见表 １ 例 血 ｅ １ ． ％） 。 裹 １ 患者血清 ＨＢ － ＮＡ、 Ｔ检测结 果 ＶＤ ＡＬ
乙型肝炎病毒X基因变异的研究现状
原 发 性 肝 细 胞 癌 （ Ｃ 是 世 界 嗣 内 肿瘤 导 致 死 ｒ 的 Ｈ Ｃ） ＿ 最 主 要 原 因 之 一 ． 我 国 Ｈ Ｃ发 生 与 慢 性 乙 珏 肝 炎 病 毒 Ｃ ！ ！ （ Ｂ 感染 密切相关 ， Ｂ Ｈ Ｖ） Ｈ Ｖ基 因 编 码 的 Ｈ Ｖ Ｘ蛋 白 （ Ｂ ） Ｂ Ｈ ｘ 为 Ｈ Ｖ感 染 和 复制 所 必 需 ． 广 泛 涉及 宿 主细 胞 的增 殖 、 Ｂ 并 转
的结果证实了一种地域问的差异 ， 时更说 明了 Ｈ Ｖ 相关 同 Ｂ Ｈ Ｃ发生 的复 杂性 。 Ｃ 、
于高复制 ．特别是 ｆ于基 因组 复制，需先转 录为 Ｒ Ａ巾问 Ｉ Ｉ Ｎ
体 ， 聚合酶缺乏校正功能所致 。 ｘ 【位于 Ｈ Ｖ基 组 但 ＨＢ 基 大 Ｉ Ｂ 中 ｃ基 因的上游，病毒基 闪组 的粘性 未端 附近 １ ７ ～ ３ ６１ ７ ３ ８ 位， 长约 ４ ５ ６ 个核苷酸， 与多聚酶 、 ｃ和 Ｏ 、 Ｒ 序列重 前 Ｒ Ｏ 叠， 编码 １４个氨基酸的基因产物 Ｈ ｘ ｇ ５ Ｂ Ａ 。Ｘ 蛋 白质 自身尤 Ｄ Ａ结合 活性 ， Ｎ 必须通过活化一些蛋 白质 子， 使这些蛋 白 质因子结合于 自身的或异源 的启动子或增强子上 ． 发挥其转 录水平上的反式调控作用１ ４ １ 。
２ Ｈ ｘ基 因 突变 与 Ｈ Ｃ Ｂ Ｃ
２ ＨＢ ， ２ ｘ突变与反式激活
反式 激活作用 是 Ｈ ｘ Ｂ 研究领域
巾最广泛被涉及到的。研究 发现 Ｈ ｘ Ｂ 含有 功能性的反式激 活区域（ １ １８个氨基酸 ） ５～４ 及调整 区域 （ ～ ０个氨 基酸 ）其 １５ ，
调 整 区域 主 要 抑 制 ＨＢ ｘ的 反 式 激 活 功 能 。Ｋ ｍａ 等 …构 建 ｕ ｒ Ｉ
患 者 的检 测 示 ，共 鉴 定 出 ５ ４种 不 同 的 Ｈ ｘ基 Ｌ 突 变 形 Ｂ 大 ｌ
乙型肝炎病毒基因变异与临床
乙型肝 炎病毒 （ｅａ ｔ ｉ ， Ｂ ） ｈｐｔ ｓｂｖ Ｈ Ｖ 为了逃避各 种 内源 ｉ ｉ ｍｓ 性（ 机体免疫清除） 和外 源性 （ 药物治 疗 ） 压力 ， 常常发 生基 因 变异。这种变异可 以发生 于 Ｈ Ｖ的每一个 基因 区， Ｂ 以致使 乙 型肝炎 病原学检测结果 多样化 、 临床表现复杂化 和抗 Ｈ Ｖ治 Ｂ 疗 困难化 。核苷类似物 （ｕｌ ｓ ｅ ｎｌ ｕ， Ｒ Ｉ是 临床治疗 ｎｃ ｏｉ ａ ｇｅ Ｎ Ｔ ） ｅ ｄａ ｏ
（ 泸州医学院附属 医院感染病科 ， 四川 泸州 ６６ Ｏ ） ４ＯＯ
中 图 分 类 号 ： ５ ２６ Ｒ １． 文献 标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０６２８ （０ ８０ －５４０ １０．０４ ２０ ）４０４ －３
摘要 ： Ｂ Ｈ Ｖ在多种 因素影响下发 生基 因变异 ， 以实现 自身 生存 的 目的。乙型肝 炎病毒 （ Ｖ） ＨＢ 基 ２ １ Ｓ 因 区 变 异 ． 基
关键 词 ： 型肝 炎 病 毒 ； 因 变异 ； 测 方 法 乙 基 检
Ｇ ｎ ｔｔ ｎ ｆ ｐ ｔ ｓ ＇ ｓ（ Ｖ） ｎ ｓａ面ｊ ｌ 衄 Ｉ幅 Ｇ Ｎ 凡 ， Ｈ ＮＧＪ ｎ ｕ ． ｅｅＭｕａｉ ｓｏ Ｈｅａ ｔ Ｖ ｕ ＨＢ ａ ｄｉ ｎｃ ｏ ｉ Ｂ ｍ ｉ ｔ ａＳ ｌ ｃ Ｅ ＧＫ ｇ Ｚ Ａ ｉ － ｎ ａｊ （ ｅａｔｅｔｆＩ ｅｔｎＤｓ ｓｓ ｆ Ｄｐ ｒ ｎ ｏ ｎ ｃｏ ｉａｅ， Ｈ ｓｉｌ Ｉｇｏ ｄ ａ ｏｅｅ ｍ ｆ ｉ ｅ ｏ ｔ ＭｈｕＭｅｉ ｌ ｌｇ ， ｐａ ｏ ｆ ｃ Ｃｌ “６６ Ｏ ， ｈｎ ４０Ｏ Ｃ ｉ ａ） Ａｂｔ ｃ：ｏｓｒｉ ａｉ ｎｉｎ ｅｔ，ｅｅｖｒ ｔｎｏ Ｈ ｐｔ ｓＢｖ ｕ Ｈ Ｖ）ｏｃｒ． Ｂ ｅｅ ｓｒ ｔＴ ｕｖ ｅｉ ｖｒ ｄｅｖｏｍ ｎｓｇｎ ａａｉ ｆ ｅａｔ ｒｓ（ Ｂ ａ ｖ ｎ ｅ ｒ ｉｏ ｉ ｉ ｉ ｃｕｓＨ Ｖ ｇｎ
基层医院护理人员乙肝病毒标志物 流行病学调查及感染相关因素分析
基层医院护理人员乙肝病毒标志物流行病学调查及感染相关因素分析目的探讨基层医院护理人员乙肝病毒标志物流行病学状况及相关危险因素。
方法对重庆市某区4所镇中心卫生院中的216名医护人员进行乙型肝炎（HBV）血清学标志物酶联免疫吸附试验（ELISA）检测，设计调查问卷调查受试者人口学特征、乙肝疫苗接种及职业暴露情况，二分类Logistic回归分析乙型肝炎病毒感染相关因素。
结果基层医院护理人员乙型肝炎感染率为19.0%，免疫率为61.1%，易感率为19.9%。
多因素分析显示年龄、工作时间和职业暴露次数是乙型肝炎感染危险因素，乙肝疫苗接种为保护因素。
结论基层医院护理人员乙型肝炎感染率高，提高护理人员乙型肝炎防护意识，降低职业暴露率和进行乙肝疫苗接种工作是降低基层医院护理人员HBV感染的关键。
标签：基层医院;护理人员;乙型肝炎病毒;感染;相关因素乙型病毒性肝炎是经血传播且危害严重的病毒性传染病，成为严重危害我国国民健康水平重大的公共卫生问题[1]。
临床护理人员在治疗及护理操作中，与患者接触亲密，存在较高的职业暴露风险，其职业安全问题引起社会的日益关注。
目前已有众多文献报道了医院护理人员乙型肝炎病毒（HBV）感染状况调查分析[2，3]，但对基层医疗机构临床护理人员HBV感染的调查分析却罕见报道。
为了解基层医院护理人员的HBV感染现状，对重庆市某区下辖的四个乡镇中心卫生院护理人员进行乙肝病毒血清学标志物进行统一检查，同时对参加调查的护理人员进行问卷登记，并分析基层护理人员HBV感染的相关因素。
现将结果报道如下。
1 对象与方法1.1 对象重庆市某区所辖四所乡镇中心卫生院护理人员216名，均为女性，年龄18～58岁，平均年龄为32.4岁。
目前均在护理岗位工作，即往无自觉症状。
护理人员职称构成：护士128名，护师51名，主管护师32名，副主任护士5名;学历：中专187人，大专：22人，本科：7人。
所有参与对象签署了知情同意书。
HBV X基因变异的PCR-高分辨率熔解曲线检测及意义
其含有基 本 核心 启动 子 （ ｂ ａ ｓ ｅ ｃ ｏ ｒ ｅ ｐ ｒ ｏ ｍ ｏ ｔ ｅ ｒ ， Ｂ Ｃ Ｐ ） 、 核 心上游 调 节 序 列 （ ｃ ｏ ｒ ｅ ｕ ｐ ｓ ｔ ｒ ｅ ａ ｍ ｒ ｅ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ， Ｃ Ｕ Ｒ Ｓ ） 、 负 性调 节 元件 （ ｎ ｅ ｇ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｒ ｅ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｅ ｌ ｅ ｍ ｅ ｎ ｔ ， Ｎ Ｒ Ｅ ） 、 增 强 子 Ⅱ（ ｅ ｎ ｈ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ， Ｅ ｎ ｈ １ １ ） 和 直 接重 复序 列 （ ｄ ｉ ｒ ｅ ｃ ｔ ｒ ｅ ｐ ｅ ａ ｔ ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｅ ｅ ， Ｄ Ｒ ） １ 、 Ｄ Ｒ ２等 重要 的基 因表达
吴晓 蔓 ，朱锦 宏
广 州 医 学 院第 二 附属 医 院检 验 科 （ 广州 ５ １ ０ ２ ６ ０ ）
【 摘 要】 目的
研 究乙型肝 炎病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） ｘ基 因区变异情 况及其 临床意义 。方法
采用 Ｐ Ｃ Ｒ一高分辨率熔
解 曲线 （ Ｐ Ｃ Ｒ— ｈ ｉ ｇ ｈ ｒ ｅ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｍ ｅ ｌ ｔ ｉ ｎ ｇ ， Ｐ Ｃ Ｒ—ＨＲ Ｍ） 分 析技 术检 测 １ ６ ８例 乙肝 患者 血 清 Ｈ Ｂ Ｖ Ｘ基 因 区 变异 情 况 ， 直 接 测 序 技 术确 证 变异 位 点 ； Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法和 Ｐ Ｃ Ｒ法 分 别 检 测 血 清 Ｈ Ｂ ｅ Ａ ｇ水 平 和 ＨＢ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ含 量 。结 果 （ １ ） １ ６ ８例 乙 肝 患 者血 清 Ｈ Ｂ Ｖ Ｘ 区段 突 变检 出 率 前 ５位 的 位 点 是 ｎ ｔ １ ７ ６ ４（ ７ ２ ． ６ ％） 、 ｎ ｔ １ ７ １ ９ （ ６ ８ ． ５ ％） 、 ｎ ｔ １ ７ ６ ２ （ ６ ７ ． ８ ％） 、 ｎ ｔ １ ７ ２ ７
病毒性乙型肝炎病原学诊断及其感染因素调查
病毒性乙型肝炎病原学诊断及其感染因素调查薛韶华;梁继新;赵连珠;李建启;吴瑞【期刊名称】《疾病监测》【年(卷),期】1995(010)012【摘要】为了解郑州铁路地区病毒性肝炎患者中乙型病毒性肝炎(乙肝)的感染状况及其流行病学特点,本文对郑州铁路中心医院1991年7月～1992年6月住院的460名病毒性肝炎患者,采用RIA、ELISA、Dig HBv-DNA探针及PCR技术进行乙肝病原学诊断,结果表明:460例患者中289例为乙肝感染,占62.83%,其中176例为单纯感染,113例为混合感染.289例中男性191人,女性98人,男女之比为1.95∶1.患者中半年内有输血、手术或注射、针刺史者共计161例,占总数的55.71%.随机抽取62份乙肝患者尿液,采用Dig HBv-DNA探针,检出阳性10例,检出率16.13%.【总页数】3页(P359-361)【作者】薛韶华;梁继新;赵连珠;李建启;吴瑞【作者单位】郑州铁路局中心卫生防疫站,450052;郑州铁路局中心卫生防疫站,450052;郑州铁路局中心卫生防疫站,450052;郑州铁路局中心卫生防疫站,450052;郑州铁路局中心卫生防疫站,450052【正文语种】中文【中图分类】R1【相关文献】1.慢性病毒性乙型肝炎患者病耻感及其影响因素的调查与分析 [J], 刘凌云;王若梅;白玛取次2.慢性病毒性乙型肝炎合并戊型肝炎病毒感染的临床及实验指标变化 [J], 李亚琴;张俊;贺春娥;刘芳;江秀娟3.脑卒中吞咽困难合并肺部感染的病原学诊断及相关因素分析 [J], 刘莹; 陈卓4.乙型病毒性肝炎病原学诊断及其感染因素调查 [J], 薛韶华;梁继新;赵连珠;李建启;吴瑞5.丙型肝炎病原学诊断及感染因素探讨 [J], 赵连珠;梁继新;薛韶华;李建启;吴瑞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
132例家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染者自然病程进展与相关因素的分析的开题报告
132例家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染者自然病程进展与相关因素的分析的开题报告一、研究背景慢性乙型肝炎病毒感染是全球公共卫生领域的一个重要问题。
根据世界卫生组织（WHO）发表的数据显示，全球约有2.4亿人口感染慢性乙型肝炎病毒（HBV），而且每年有逾100万人死于因乙型肝炎病毒引起的疾病并发症（如肝硬化和肝癌）。
目前，慢性乙型肝炎病毒感染的自然病程仍然不完全清楚。
尤其是家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染者的自然病程的进展及相关因素的研究相对较少。
因此，开展这方面的研究具有重要的临床意义。
二、研究目的本研究旨在探讨家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染者的自然病程的进展及相关因素，并为制定合理的预防措施和治疗方案提供参考。
三、研究方法1. 研究对象：收集132例家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染者作为研究对象。
2. 数据收集：采用问卷调查和医学记录等方式收集其患病情况、临床症状、实验室检查结果等资料，并对这些数据进行统计学分析。
3. 研究内容：(1) 家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染患者的流行病学特征；(2) 家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染患者的临床症状及肝功能指标的变化；(3) 家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染患者的肝内外病变情况；(4) 家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染患者的HBV DNA和HBsAg 的变化；(5) 家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染患者自然病程的进展及相关因素的分析。
4. 研究分析方法：采用SPSS19.0统计软件对数据进行描述性统计分析，应用生存分析和多因素分析等方法分析自然病程及相关因素。
四、研究意义通过对132例家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染者的自然病程的进展及相关因素的分析，可以深入了解慢性乙型肝炎病毒感染的发展规律、转归情况和影响因素，为制定相应的诊疗和预防措施提供科学的依据和理论支持，有利于推广科学防治和诊疗方法，提高社会大众健康水平，降低社会和个体的医疗负担。
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的关 系。方 法 采 用 荧光标 记 杂交双探针 Ｐ Ｒ融解 曲线 法 ，检 测 了 １ 经及 未 经拉 米 夫定治 Ｃ ８例 ４
疗 的慢 性 乙肝 患者 的 Ｈ Ｖ Ｍ Ｄ 变异 ， 同时观察 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ含 量及谷 丙转氨酶 （ Ｌ Ｂ Ｙ Ｄ Ｂ －Ｎ Ａ Ｔ）水平 的变 化 。结果 经拉米 夫定治 疗 １ 月 ，Ｙ Ｄ ２～２ ４个 Ｍ Ｄ变异的总检 出率 为 ２ ． ％ ７ ，未经拉 米 夫定治疗 ４ 的变异的检 出率 为 ５ ６ ，两组相 比具有显著 性差异 （ ．％ Ｐ＜ Ｏ Ｏ 。经拉米 夫定治疗 １ 、１ 及 ２ ． １） ２ ８ ４ 个 月，其血 清 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ Ｂ Ｎ 含量及 Ａ Ｔ水平 明显低于用 药前 水平 ，差异具有 显著性 意义 （ Ｌ Ｐ＜ Ｏ Ｏ ） ．５。 拉 米夫定治 疗组 中，发 生变异者 与 未发 生变异者 ，其 用药前 的 Ｈ Ｖ Ｎ Ｂ Ｄ Ａ含 量及 Ａ Ｔ水平无显著 Ｌ
发 生率随治 疗时 间的延长 而明显增加 。拉米 夫定 治疗有助 于 降低 乙肝 患者 Ｈ Ｖ Ｎ Ｂ Ｄ Ａ含量及 Ａ Ｔ Ｌ
水平 ，拉 米 夫定 引起 的 Ｙ Ｄ Ｍ Ｄ变异 与用 药前 Ｈ Ｖ Ｎ Ｂ Ｄ Ａ及 Ａ Ｔ水平 无明显 的关 系。 Ｌ 关键 词 乙型肝 炎病毒 （ Ｂ Ｈ Ｖ）Ｄ Ａ Ｙ Ｄ Ｎ Ｍ Ｄ变异 拉 米 夫定 Ａ Ｔ Ｌ
性 差异 （ Ｐ＞ Ｏ Ｏ ） ． ５ 。拉 米夫定用 药 １ 、１ 、２ 个 月的变异检 出率分 别为 ３ ９ 、１ ． ％ ４ ６ 。 ２ ４ ８ ． ％ ６ 、３ ． ％ ５
结论 乙型 肝 炎病毒 Ｐ区存 在 Ｙ Ｄ Ｍ Ｄ自然 变异 ，拉 米 夫定可促使 病毒 产生 Ｙ Ｄ Ｍ Ｄ变异 ，其 变异
．
ｒ ｓ ｅ ｔ ｖ ｌ ， ｗ ｃ ｈ ｄ ｔ ｔ ｓ ｉ ａ ｓ ｇ ｉ ｉ ａ ｔ ｅｐ ｃ ｉｅ ｙ ｈｉ ｈ ａ ｓ ａ ｉ ｔ ｃ ｌ ｉ ｎ ｆ ｃ ｎ ｄｉ ｆ ｒ ｎ ｅ（ ｆ ｅ ｅ ｃ 尸＜ ０ ０ ） Ｔ ｅ ｅ ｕ ． １ ． ｈ ｓ ｒ ｍ
ｌ ｅｌ ｏ Ｈ Ｖ ＮＡ ｅｖ ｓ ｆ Ｂ Ｄ ａｎ Ａ ｉ ｐ ｉ ｎｔ ｗｉ ｈ ａ ｖｕ ｎｅ ｒｅ ｍｅ ｆ ｒ ２ １ ａ ２４ ｄ ＬＴ ｎ ａｔ ｅ ｓ ｔ ｌ ｍｉ ｄｉ ｔ ａｔ ｎｔ ｏ １ ８ ｎｄ
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乙型肝炎病毒基 因变异的检测及相关 因素 的分析
喻 晶 黄 君 美 张银 汉 邹德 学 彭黎 明
北京大学深圳 医院检验科 广东深圳 ５ ８ ３ １０ ６
摘
要 目的
探 讨 乙型肝 炎病毒基 因变异 与血 清 Ｈ Ｖ Ｎ 含 量 、Ａ Ｔ水平及拉 米夫定 治疗疗程 ＢＤ Ａ Ｌ
Ｄ ｐ ｒ ｍ ｎ ｏ ａ ｏ ａ ｏ ｙ ｍ ｄ ｃ ｎ ， Ｂ ｉ ｉ ｇ Ｕ ｉ ｅ ｓ ｔ Ｓ ｅ ｚ ｅ Ｈ ｓ ｔ ｌ Ｓ ｅ ｚ ｅ ｅ ａ ｔ ｅ ｔ ｆ ｌ ｂ ｒ ｔ ｒ ｅ ｉ ｉｅ ｅ ｎ ｎ ｖ ｒ ｉ ｙ ｈ ｎ ｈ ｎ ｏ ｐｉ ａｕ ｏｎ ＢＶ Ｈ ＹＭ Ｄ ｕ ｔ ｉ ａｎ Ｉ Ｃ ｒ ａ ｏｎ Ｄ Ｍ ｔａ ｏｎ ｄ ｔｓ ｏｒ Ｉ ｔ ｉ Ｆａ ｔｏｒ ｅ ｃ ｓ
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