圣琪多元发酵培养基-酵母培养基篇
发酵培养基ppt课件
培养基成分选择的原则 菌体的同化能力(一般只有小分子能够通过细胞膜进入细胞体内进行
代谢;许多碳源和氮源都是复杂的有机物大分子,如淀粉与黄豆饼粉等;对 于酵母,一般仅能利用2-3糖;对于氮源一样,常用的有大豆饼、花生饼粉 和毛发的水解液)
代谢的阻遏和诱导(应根据微生物的特性和培养的目的,注意快速
经营者提供商品或者服务有欺诈行为 的,应 当按照 消费者 的要求 增加赔 偿其受 到的损 失,增 加赔偿 的金额 为消费 者购买 商品的 价款或 接受服 务的费 用
广义上讲是指一切可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营 养物质和原料.同时培养基也为微生物提供除营养外的其他 生长所必需条件.
1.都必须含有合成细胞组成所必需的原料; 2.满足 一般生化反应的基本条件; 3.一定的PH条件等; 4.工业生产上选择的培养基俗称发酵培养基,还 应包括能够促进微生物合成产物所必需的成分.
合适的C、N比(氮源过多,生长过于旺盛,PH偏高,不利于代谢
产物的积累;氮源不足,则菌体繁殖量少,从而影响产量;碳源过多 则容易形成较低的PH;碳源不足则容易引起菌体的衰老和自溶;一般 工业发酵培养基的碳氮比为 100︰(0.2-2.0)
PH的要求(要保证发酵过程中PH满足工艺的要求,合理配制培养基是
灭菌(葡萄糖与含氨基的物质反应形成→5-羟甲基糖醛和棕色的类黑
精(焦化)对微生物有一定的毒性。磷酸盐与Ca2+、Mg2+、NH4+等反 应形成沉淀或络合物。 )
培养基粘度的影响
粘度是培养基物性的重要指标之一,它直接影响氧的传递、 营养成分、无机盐、生长因子等的扩散,从而影响细胞的 呼吸、营养成分的吸收,最终导致影响目标产物的形成。
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酵母培养在特定生物发酵产品中的应用及合成途径研究【圣琪酵母科研报告】
酵母培养基酵母抽提物酵母浸出物在特定生物发酵产品中的应用及合成途径研究山东圣琪生物有限公司技术研发中心杨海珍摘要:生物发酵产品生产过程中,微生物的次级代谢过程复杂,培养基的调节作用非常关键。
有机氮源中的多营养成分对次级代谢的促进作用和反馈抑制作用往往同时存在。
通过深入研究培养基发酵代谢调控理论,分析产物的生成原理,了解特定产品的应用特性,可以使培养基中的各营养成分与发酵产品的生产工艺需求及产物表达原理更匹配,达到更好的应用效果。
本文主要论述圣琪生物对培养基发酵代谢调控理论的研究成果以及在特定生物发酵产品中的应用及合成途径研究。
关键词:酵母培养基酵母抽提物酵母浸出物Abstract: In the process of Biological fermentation products, secondary metabolic process of microorganism is complex, the adjustment of the medium play a pivotal role. Many nutrients in organic nitrogen source has a promotion effect and a feedback inhibition effect at the same time for secondary metabolic. Through lucubrate the metabolism and regulate theory of medium, analysis generating principle, realize the application features of specific products, we can make the nourishment composition, manufacturing technique and product expression principle more match, to achieve better application effect. This paper mainly discusses the research achievement of Metabolic regulation theory, the application in the specific biological fermentation products and synthetic route.Keywords: yeast extract for food,yeast extract for fermentation,yeast culture medium引言:与国外酵母培养基产品相比,国内的一些培养基在某些发酵产品的应用效果上与国外还有一点差距,需要针对这些产品生产的营养需求特征来开发特定的培养基,提高产品的竞争力。
《发酵培养基》课件
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参考文献
参考文献
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发酵培养基PPT课件概述
介绍发酵培养基PPT课件的基本概念、特点和作 用,以及其在发酵工程领域的应用价值和发展趋 势。
发酵培养基PPT课件内容
详细介绍发酵培养基PPT课件的内容,包括发酵 培养基的组成、制备方法、影响因素以及优化策 略等方面的知识。
发酵培养基PPT课件制作技巧
未来发酵培养基的研究重点与展望
未来发酵培养基的研究重点将主要集中在以下几个方面:提高发酵效率、产物产量和降低生产成本; 研发新型微生物资源;利用合成生物学技术构建高效、环保的新型发酵培养基;研究培养基的营养组 分和代谢调控机制等。
展望未来,随着生物技术的不断进步和环保意识的提高,发酵培养基的研究将更加注重绿色、高效、 可持续发展的理念。同时,随着大数据、人工智能等新技术的应用,发酵培养基的研究将更加精准和 智能化,为行业发展带来新的机遇和挑战。
01
02
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根据用途
生产菌体培养基、产物合 成培养基、分离培养基等 。
根据物理状态
固体培养基、液体培养基 。
根据成分
天然培养基、合成培养基 。
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发酵培养基的选择与优化
发酵培养基的选择原则
适宜性原则
选择的培养基应能满足微 生物生长和产物合成的需 要,同时要易于工业化操 作。
经济性原则
在满足适宜性的前提下, 应尽量降低培养基的成本 ,提高经济效益。
介绍如何制作高质量的发酵培养基PPT课件,包 括设计思路、排版技巧、图表制作等方面的技巧 。
感谢观看
THANKS
发酵培养基的配制与灭菌
配制
按照选定的配方,将各种原料准 确称量后混合均匀,制成所需的
发酵工业产品培养基配方大全
发酵工业产品培养基配方大全1.酵母培养基配方:-加糖培养基配方:-酵母提取物10g-葡萄糖20g-氯化镁1g-磷酸二氢钾2g- H2O 1000ml-加酵母提取物培养基配方:-酵母提取物20g-葡萄糖10g-氯化镁1g-磷酸二氢钾2g- H2O 1000ml2.细菌培养基配方:-肉膏蛋白胨加入培养基配方:-肉挫3g-蛋白胨5g-NaCl5g- 纯净水 1000ml-牛肉精加入培养基配方:-牛肉精3g-NaCl10g- Agar 15g- 纯净水 1000ml3.真菌培养基配方:-绵白糖加入培养基配方:-麦芽提取物10g-蔗糖30g-K2HPO41g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml-麦芽提取物加入培养基配方:-麦芽提取物20g-FeSO40.1g-K2HPO42g-MgSO41g- 纯净水 1000ml4.菌丝体培养基配方:-淀粉加入培养基配方:-玉米粉20g-淀粉10g-NaCl5g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml-牛肉精加入培养基配方:-牛肉精3g-酵母提取物2g-NaCl5g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml5.发酵液培养基配方:-玉米加入培养基配方:-玉米粉100g-蛋白胨10g-NaCl5g-淀粉10g- 纯净水 1000ml-葡萄糖加入培养基配方:-玉米粉10g-蛋白胨5g-葡萄糖20g-淀粉10g- 纯净水 1000ml上述配方仅为其中几种常用的发酵工业产品培养基配方,不同的微生物和发酵过程需要有针对性地选择合适的配方。
在实际应用中,还需要根据具体情况进行调整和优化。
同时,培养基的制备过程中,要注意使用无菌操作,以确保微生物培养的纯净性和成功率。
准备培养基及酵母菌种的操作步骤
准备培养基及酵母菌种的操作步骤介绍:培养基是生物学实验中非常重要的一部分,它提供了微生物生长所需的营养物质。
在培养基中培养酵母菌种,既可以用于学术研究,也可以用于工业生产。
本文将介绍准备培养基及酵母菌种的操作步骤。
材料准备:1. 干净的培养皿或试管2. 称量器具3. 培养基粉末(例如,YPD培养基)4. 蒸馏水或去离子水5. 培养基加热器6. 高压灭菌器或高压高温灭菌器7. 酵母菌株操作步骤:步骤1:准备培养基1. 使用称量器具称取所需的培养基粉末,按照厂商提供的配方添加适量的粉末。
2. 在一个干净的培养皿或试管中加入适量的蒸馏水或去离子水,搅拌均匀直至溶解。
3. 将培养皿或试管放入培养基加热器中,加热至溶液达到沸腾状态。
4. 让溶液在沸腾状态下继续煮沸1-2分钟,以确保培养基已灭菌。
5. 关闭加热器,让培养基冷却至室温。
步骤2:准备酵母菌种1. 从酵母菌培养基上选择一颗酵母菌斑点,用无菌的酒精酒精烟灭菌火柴沾取少量酵母菌斑点。
2. 将沾取的酵母菌点均匀涂抹在新准备的培养基表面。
3. 用洁净的无菌钢圈将酵母菌点轻轻均匀地划过培养基表面。
4. 重复上述步骤,直到所有酵母菌斑点均匀分布在培养基表面。
5. 使用无菌技术,在无菌环境中将培养皿或试管密封。
步骤3:培养酵母菌种1. 将密封好的培养皿或试管置于高压灭菌器或高压高温灭菌器中,进行高压灭菌。
2. 设定灭菌温度和时间,通常为121℃,15-20分钟。
3. 灭菌后,使用无菌技术将培养皿或试管移至无菌操作台上。
4. 将培养皿或试管倒置保存,以避免营养物质沉积在口部,导致污染。
注意事项:1. 操作过程中保持无菌环境,使用无菌器皿和器具,避免外界细菌和微生物的污染。
2. 严格按照配方准确称取培养基粉末,避免因质量误差导致培养基制备不准确。
3. 培养基在加热过程中要达到沸腾状态,并保持一定时间,以确保培养基的灭菌效果。
4. 在培养酵母菌种时要使用无菌环境,避免细菌的污染。
圣琪多元发酵培养基-酵母培养基篇
P602/P604/P687
赖氨酸发酵
x
x
Leu-、Thr-黄色短杆菌生产赖氨酸
氨基酸发酵属于典型的代谢 调控发酵,为了减少产物的 反馈阻遏和反馈抑制作用, 赖氨酸的生产菌种多为某些 氨基酸的营养缺陷型菌株, 因此对培养基的要求也比较 高。
推荐使用的酵母浸出物型号:
P603/P604/P608
VB2的发酵
VB2的合成从葡萄糖经磷酸戊糖途 径合成5-磷酸核糖开始,进一步生 成L-3,4-二羟基-2-丁酮-4-磷酸( DHBP),同时由核酸从头合成途 径生成三磷酸鸟苷(GTP)。 DHBP和GTP作为前体进入VB2合 成途径。国外一般使用营养更为丰 富的酵母抽提物作为VB2的发酵培 养基,国内还在使用酵母粉。
芳香族氨基酸发酵
L-苯丙氨酸的发酵是利用磷酸烯 醇式丙酮酸羧化酶的活性被高浓 度的葡萄糖强烈抑制的原理。当 培养基中的初始糖浓度较高时, 菌体中的烯醇式丙酮酸和赤藓糖 得到大量积累,被用来生成L-苯 丙氨酸,根据苯丙氨酸的合成途 径:
推荐使用的酵母浸出物型号:
P604/P608/L602/L800
乳酸链球菌素的氨基酸合成途径
左图所示为合成乳酸链球菌素的组氨酸、 脯氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、 天冬酰胺、亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、 丝氨酸、甘氨酸等的生物合成途径。 由图可知,合成乳酸链球菌素的大部分 氨基酸属于天门冬氨酸族氨基酸;另外 需要经糖酵解途径合成甘氨酸和丝氨酸; 需经过磷酸戊糖途径合成组氨酸;需经 TCA循环途径合成脯氨酸;
推荐使用的酵母浸出物型号:
L601/P601/L800/P800
透明质酸的发酵
如图所示,透明质酸是经磷酸戊糖途径生 成的乙酰基葡萄糖和葡萄糖醛酸双糖单位重复 连接构成的线性多糖。每合成1 moL二糖单 位 ,消耗 5 moLATP 、 2 moLNADH和1 moL 乙酰CoA,所以透明质酸的合成是一个耗能过 程,需要维持菌体的快速生长供能。
酵母菌培养基
麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。
马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。
豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。
察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。
麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。
培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。
(一)麦芽汁培养基的配制1.培养基成分新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
2.配制方法(1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。
(2)取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。
(3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。
(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。
如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。
(5)如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。
(6)分装、加塞、包扎。
(7)高压蒸汽灭菌100 Pa灭菌20 min。
(二)马铃薯葡萄糖培养基的配制1、培养基成分马铃薯20g葡萄糖 2 g琼脂 1.5-2g水100ml自然pH2.配制方法(1)配制20%马铃薯浸汁取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000m1。
80℃浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。
100 Pa灭菌20 min。
即成20%马铃薯浸汁,贮存备用。
(2)配制时,按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。
发酵培养基的分类、主要原料及其处理方法
发酵培养基的分类、主要原料及其处理方法一、发酵培养基的分类培养基(medium)是一种人工配制的、适合微生物生长、繁殖或产生代谢产物用的混合养料。
因此,任何培养基都应具备微生物所需要的六大营养要素,且比例应是合适的。
培养基一旦配成,必须立即进行灭菌,否则很快引起杂菌丛生,并破坏其固有成分和性质。
目前自然界中只有一部分微生物能够人工培养,主要有病毒、细菌、放线菌、真菌等。
应全面、准确地了解微生物细胞的生命规律,根据微生物的种类和对营养的需求来配制合适的培养基,以提高微生物可培养性,并达到代谢产物高产的目的。
由于各种微生物所需要的营养不同,培养基的种类很多。
据估计目前约有数千种不同的培养基,这些培养基可根据所含成分、物理状态及不同的使用目的等而分成若干类型。
1、按照培养基的成分分类培养基按其所含成分,可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基。
⑴合成培养基也称基本培养基合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,但价格较贵,而且微生物在这类培养基中生长较慢,如高氏1号培养基、察氏培养基等。
(2)天然培养基也称复合培养基由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,因此常被采用。
⑶半合成培养基在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或者在台成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养长基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2、按照培养基的物理状态分类培养基按其物理状态可分为固态培养基、液态培养基和半固态培养基3类。
⑴固态培养基在液态培养基中加入凝固剂(如琼脂、明胶、硅胶等)制备成固态培养基。
该类培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
止匕外,另一类固志培养基,一般采用天然谷物原料或纤维素类原料,培养基中加水较少,培养基中固形物含量较高。
酵母菌培养基的配置流程
酵母菌培养基的配置流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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在配置酵母菌培养基之前,需要做好充分的准备。
酵母菌培养 (2)
酵母菌培养简介酵母菌是一种单细胞真核生物,属于真菌门中的一类,广泛存在于自然环境中,包括空气、土壤和水中。
酵母菌在生物学研究和工业生产中有着重要的应用价值,比如酿酒、面包发酵等。
酵母菌培养是指在适宜的培养基和条件下,将酵母菌进行繁殖和生长的过程。
通过酵母菌培养,可以获取大量的酵母菌细胞,用于进一步研究和应用。
培养基的选择酵母菌培养基是进行酵母菌培养的基础,选择适合的培养基对于酵母菌的生长和繁殖至关重要。
常用的酵母菌培养基包括:1.YPD培养基:由酵母粉、蔗糖和蛋白胨组成,是常用的通用培养基,适用于绝大多数酵母菌的培养。
2.SD培养基:由葡萄糖和氨基酸组成,适用于需要特定营养物质的酵母菌。
3.SC培养基:是一种简化的SD培养基,只包含必需营养物质,适用于基因互补实验等研究。
选择合适的培养基需要考虑酵母菌的菌株特性、培养条件和所需实验目的等因素。
培养条件的优化除了合适的培养基,合适的培养条件也非常重要。
常用的优化培养条件包括温度、pH值、氧气供应和搅拌速度等。
1.温度:一般酵母菌的适宜生长温度在25-30摄氏度之间,不同酵母菌菌株可能有所差异。
2.pH值:不同酵母菌对于pH值的适应能力不同,一般在酸性pH(如pH 4.0)至中性pH(如pH 7.0)之间培养效果较好。
3.氧气供应:酵母菌是好氧生物,需要充足的氧气供应,可以通过适当的通气量和搅拌速度来增加氧气的供应。
4.搅拌速度:适当的搅拌速度有助于均匀分散培养基中的氧气和营养物质,促进酵母菌的生长和繁殖。
优化培养条件可以提高酵母菌细胞的生长速度和细胞产量,在短时间内获得更多的酵母菌细胞。
酵母菌培养的步骤酵母菌培养一般包括以下几个步骤:1.感染:首先,将酵母菌的母菌保存液接种到含有适宜培养基的试管中或培养皿上。
培养基中应包含适量的营养物质和合适的培养条件。
2.培养:将已感染的培养基放置在恰当的温度下,进行培养。
培养时间根据实验需求而有所不同,一般为数小时至数天。
酵母液体培养基配方
酵母液体培养基配方
酵母是一种单细胞真菌,广泛应用于食品、饮料、医药和工业等领域。
酵母液体培养基是酵母生长和繁殖的基础,其配方的优劣直接影响到酵母生长的效果和产物的质量。
以下是一种常用的酵母液体培养基配方:
1. 酵母营养素:10克/升
2. 柠檬酸:5克/升
3. 葡萄糖:20克/升
4. 氯化镁:1克/升
5. 柠檬酸钠:5克/升
6. 酵母提取物:1克/升
以上配方在水中充分溶解混合后,以121°C高压灭菌30分钟即可使用。
此配方可支持大多数酵母生长和繁殖。
需要注意的是,不同的酵母种类对营养素的需求有所不同,因此在实际应用中,可以根据具体情况调整培养基的配方,以获得更好的生长效果和产物质量。
- 1 -。
发酵工程培养基课件
85
37.5 75
菌体得率/
(g细胞/g碳源) 0.83 0.50 0.43
1.40
0.67 0.88
发酵工程培养基课件
17
例:地衣芽孢杆菌生产α-淀粉酶 碳源对生长和产酶的影响
碳源 葡萄糖 蔗糖 糊精 淀粉
细胞量 4.2 4.02 3.06 3.09
α-淀粉酶 0 0
38.2 40.2
发酵工程培养基课件
乳糖
淀粉质类:山芋粉、马铃薯粉、
多糖:淀粉、糊精
玉米粉、燕麦粉、
及其水解液
木薯粉
速效碳源
其 、
碳源物质的易利用顺序:
它:纤维素水解液、乳清 迟效碳源
(单)葡萄糖→ (双)蔗糖、麦芽糖、乳糖→ (多)糊精→淀粉
6
发酵工程培养基课件
葡萄糖是工业发酵中最常用的单糖,它是由淀 粉加工制备的,有固体粉状和葡萄糖糖浆两种 产品形式。
发酵工程培养基课件
无机氮源的影响: 硫酸铵>硝酸铵>硝酸钠>尿素
发酵工程培养基课件
2、有机氮源
来源:工业上常用的有机氮源都是一些廉价的原料,花生饼 粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋 白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒 糟。
成分复杂:除提供氮源外,有些有机氮源还提供大量的无机 盐及生长因子。
葡萄糖是碳源中最容易利用的单糖,所以常作 为培养基的主要成分,并且也作为促进细胞快 速生长的一种有效的糖类物质。
它被广泛用于抗生素、氨基酸、有机酸、多糖、 甾体转化等发酵产品的生产中。
7
发酵工程培养基课件
但葡萄糖过多会加速菌体的呼吸,在通气不足、 溶解氧不能满足需要的情况下,其代谢中间产物 如丙酮酸、乳酸、乙酸等不完全氧化而积累在菌 体或培养基中,会导致培养基的pH值下降,影响 某些酶的活性,从而抑制微生物的生长和产物的 合成。
酵母表达培养基介绍
毕赤酵母表达的培养基配制[5]2.1 LB(Luria-Bertani)培养基:Trypton l%Yeast Extract 0.5%NaCl l%PH 7.0制作平板时加入2%琼脂粉。
121℃高压灭菌20min。
可于室温保存。
用于培养pPICZαA原核宿主菌TOP10F’时可加入Zeocin 25ug / ml。
2.2 LLB(Low Salt LB)培养基:Trypton l%Yeast Extract 0.5%NaCl 0.5%PH 7.0制作平板时加入2%琼脂粉。
121℃高压灭菌20min。
可于室温保存数月。
用于培养pPICZαA 原核宿主菌TOP10F’时,加入Zeocin 25ug / ml,可以4℃条件下保存1~2周。
2.3 YPD (又称YEPD)Yeast Extract Peptone Dextrose Medium,(Yeast Extract Peptone Dextrose Medium,酵母浸出粉/胰蛋白胨/右旋葡萄糖培养基)Trypton 2%dextrose (glucose) 2%+agar 2%+Zeocin 100 μg/ml液体YPD培养基可常温保存;琼脂YPD平板在4℃可保存几个月。
加入Zeocin 100ug / ml,成为YPDZ培养基,可以4℃条件下保存1~2周。
2.4 YPDS + Zeocin 培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Medium):yeast extract 1%peptone 2%dextrose (glucose) 2%sorbitol (山梨醇)1 M+agar 2%+ Zeocin 100 μg/ml不管是液体YPDS培养基,还是YPDS + Zeocin 培养基,都必须存放4℃条件下,有效期1~2周。
2.5 MGYMinimal Glycerol Medium (最小甘油培养基)(34%YNB;1%甘油;4*10-5%生物素)。
圣琪生物赤藓糖醇发酵专用酵母培养基
圣琪生物推出赤藓糖醇发酵专用酵母培养基赤藓糖醇是一种甜度为蔗糖60%-80%的四碳糖醇,生产赤藓糖醇的菌株多为耐高渗压菌株,如假丝酵母属(Candida)、球拟酵母属(Torulopsis)、圆酵母属(Torulasp.)、Moniliella、Trichosporonoides等。
生产中,赤藓糖醇的生成与菌体生长速度有关,生长快的酵母会形成少量的甘油和大量的阿拉伯糖醇,生长不太快的酵母则形成甘油和赤藓糖醇,而生长慢的酵母会形成更多的赤藓糖醇。
这些生产菌种多以葡萄糖或蔗糖等为碳源,以酵母膏或酵母粉为有机氮源,主要通过HMP 途径,即通过磷酸戊糖途径和糖酵解途径生成大量的赤藓糖-4-磷酸,并产生足够的还原力,然后在赤藓糖还原酶的作用下脱去磷酸生成赤藓糖醇,并释放到胞外。
通过磷酸戊糖途径合成赤藓糖醇时,需要大量的高活性的转酮酶,赤藓糖醇的生成会反馈抑制该酶的活性,所以生产中,当赤藓糖醇快速积累时,该酶的活性会急剧下降。
此外,转酮酶的活力也会随着培养基中磷酸浓度的增加而显著下降,发酵过程中生成的延胡索酸盐也会抑制该酶的活性,从而降低赤藓糖醇的产量。
现在,提高赤藓糖醇产量的研究主要集中在通过育种或代谢调控,使发酵过程中的HMP 代谢途径更畅通,同时增强发酵过程中的己糖激酶、转酮酶、以及赤藓糖还原酶的活力,从而将代谢流往6-磷酸果糖和4-磷酸赤藓糖积累的方向牵引。
圣琪生物根据赤藓糖醇的发酵代谢途径,专门开发了适用于赤藓糖醇发酵的酵母培养基。
通过优化产品中的特定氨基酸的含量,从而提高菌体的耐渗透压能力和增强菌体生长过程中的HMP代谢流;通过优化特定维生素的含量,控制菌体的生长速度,增强菌体生长过程中的转酮酶和赤藓糖还原酶的活力,从而提高赤藓糖醇产量。
圣琪生物是专业生产酵母及酵母抽提物的公司,公司在技术研发中心专门组建了发酵培养基研究室来深入研究各种发酵产品的代谢途径及代谢调控原理,采用公司专门用于生产培养基的特种酵母及多种酵母水解工艺,结合大量的产品应用数据来开发更适合乳酸链球菌素、DHA、VB2、L-乳酸、赤藓糖醇、透明质酸、黄原胶、鸟苷、肌苷、赖氨酸、苏氨酸、亮氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等发酵产品所需的酵母培养基。
酵母菌表面展示操作步骤之培养基准备
酵母菌表面展示操作步骤之培养基准备背景介绍:酵母菌表面展示是一种常用的实验技术,用于研究酵母菌蛋白的表达、结构和功能。
其原理是通过将目标蛋白表达在酵母菌细胞表面,方便对其进行研究。
而要进行酵母菌表面展示实验,首先需要准备适合的培养基。
步骤一:选择合适的酵母菌培养基1. 酵母菌培养基的选择应根据实验的要求来确定。
常见的酵母菌培养基包括YPD培养基(包含葡萄糖、酵母粉和脯氨酸)、SD培养基(包含葡萄糖和氨基酸)、SC培养基(包含有机碳源和氮源)等。
根据实验需要,可以选择适当的培养基进行制备。
步骤二:准备培养基原料1. 根据所选择的酵母菌培养基的配方,准备相应的原料。
常用原料包括葡萄糖、酵母粉、脯氨酸、氨基酸等。
确保原料的质量和纯度,以保证实验的准确性和可重复性。
步骤三:称量和溶解培养基原料1. 根据所选择的酵母菌培养基配方,按照比例准确称量所需的培养基原料。
2. 将称量好的培养基原料逐一加入无菌蒸馏水中,并进行充分混合,直至完全溶解。
注意要维持无菌环境,防止细菌和其他污染物的进入。
步骤四:调整pH值1. 使用pH计测量溶解后的培养基的pH值。
酵母菌培养基通常将pH值控制在5.5-6.0之间,但具体的pH值要根据实验的要求来确定。
2. 如果需要调整pH值,可以使用无菌的酸或碱来进行微调,直至达到所需的pH值。
步骤五:高温高压灭菌1. 将调整好pH值的培养基装入培养瓶或试管中,然后加盖。
2. 将装有培养基的容器放入高压灭菌器中,设置适当的温度和时间进行灭菌。
一般要求灭菌温度为121℃,持续时间为15-20分钟。
步骤六:常温保存1. 灭菌后的培养基可以通过蒸馏水冷却到常温,然后放置于阴凉干燥的地方保存。
注意要避光防潮,以免影响培养基的质量。
总结:以上就是酵母菌表面展示操作步骤之培养基准备的内容。
准备好适合酵母菌表面展示实验的培养基是实验的基础和前提,只有培养基的配制准确、质量稳定,才能确保实验结果的可靠性和准确性。
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推荐使用的酵母浸出物型号:
P601/P686/P687
黄原胶的生物合成途径
糖原 直链淀粉 蔗糖 纤维素
葡萄糖 28
2、生物产业的竞争在加剧,高附加值和采用清洁生产工艺生产的新型发酵产品越来越多,传 统的酵母培养基已不能完全满足行业的发展需求。大部分发酵产品是微生物的初级代谢产物或次级 代谢产物,特别是微生物的次级代谢过程复杂,其中培养基的调节作用非常关键,有机氮源中的多 营养成分对次级代谢的促进作用和反馈抑制作用往往同时存在,所以培养基生产厂家需要加强对发 酵代谢调控理论的研究,通过发酵代谢调控理论来分析产物的生成原理,将培养基的生产和产品生 产紧密的结合起来,使培养基中的各营养成分与发酵产品的生产工艺需求及产物表达原理更匹配。
圣琪的酵母浸出物产品
产品型号
L601/P601
L602/P602/P603/P604 L800/P800 L801/P801
应用领域
微生态(厌氧发酵)、普鲁兰糖、谷 胱甘肽、乳酸链球菌素、透明质酸、 鼠李糖脂、部分放线菌种子培养
苏氨酸、赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、 那他霉素、辅酶Q10、ARA、DHA、 TG酶、纤维素酶、左旋肉碱,部分 抗生素种子培养、丙酸、维生素
推荐使用的酵母浸出物型号:
L800/P800/P604/P608
乳酸链球菌素的发酵
乳酸链球菌素是乳酸乳球菌在 酸性条件下产生的活性多肽, 由34个氨基酸组成,一分子乳 酸链球菌素主要由8分子丙氨 酸、4分子Abu、3分子的甘氨 酸、赖氨酸、异亮氨酸、2分 子的亮氨酸、蛋氨酸、天冬酰 胺、DHA、1分子的缬氨酸、 组氨酸、丝氨酸、脯氨酸、 DHB组成
丙酸发酵
根据丙酸的代谢途径分析,丙酸主要来自于碳源,转化方程式可简单描述为:
(1)以甘油为碳源发酵时:
甘油→丙酸+水
(2)以葡萄糖为碳源发酵时: 1.5葡萄糖→2丙酸+乙酸+二氧化碳+水
(3)以乳酸为碳源发酵时:
3乳酸→2丙酸+乙酸+二氧化碳+水
高浓度的碳源和丙酸均会抑制菌体的生长,因此,仅通过分批培养难以实现 细胞和丙酸的高产量。通过脉冲补料、恒速流加培养等培养方式可在减少碳 源抑制的同时增加培养基中的总碳源量,从而可提高菌体的生长密度和丙酸 的产量。
推荐使用的酵母浸出物型号:
L800/P800/P604
小结
从乳酸、赖氨酸、丙酸、鸟苷、肌苷、赤藓糖醇、色氨酸、苯丙氨酸、杆 菌肽、乳酸链球菌素、DHA、透明质酸、黄原胶的发酵来看,每种发酵产品 的生产都遵循特定的产物合成和表达原理,需要严格控制培养基中的营养成分 ,通过代谢调控使其进入特定的合成途径才能增加目的产物的合成。
乳酸链球菌素的氨基酸合成途径
左图所示为合成乳酸链球菌素的组氨酸、 脯氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、 天冬酰胺、亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、 丝氨酸、甘氨酸等的生物合成途径。 由图可知,合成乳酸链球菌素的大部分 氨基酸属于天门冬氨酸族氨基酸;另外 需要经糖酵解途径合成甘氨酸和丝氨酸; 需经过磷酸戊糖途径合成组氨酸;需经 TCA循环途径合成脯氨酸;
赤藓糖醇的发酵
赤藓糖醇的生产菌种为耐渗透压 酵母,菌体在高渗透压环境下通 过自适应调节,通过积累赤藓糖 来对抗高渗环境,代谢途径如图 所示,培养基中高浓度的葡萄糖 经磷酸戊糖途径转化成赤藓糖。
推荐使用的酵母浸出物型号:
P604BL/L800
阿拉伯糖醇
赤藓糖的合成图
芳香族氨基酸的发酵
大肠杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸杆菌等生产芳香族氨基酸
鸟苷、肌苷的发酵原料
鸟苷酸、肌苷酸从头合成过程
鸟苷、肌苷的合成属于核苷 酸的从头合成途径,如图所 示,在核酸的合成过程中, 天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨 酸是肌苷酸、鸟苷酸生产的 重要原料,因此,需要提供 营养丰富的培养基保持菌体 的7
1-磷酸葡萄糖 6-磷酸葡萄糖
乳糖
木糖 赤藓糖
葡萄糖醛酸 2
6-磷酸果糖
葡萄糖胺
果糖 甘露糖 3
3-磷酸甘油醛
磷酸二羟丙酮
烯醇式丙酮酸
TCA循环 中间产物
丙酮酸 0.51~0.63 乙醇
TCA 循环
乙酸 17
黄原胶是由葡萄糖:甘露糖:葡萄 糖醛酸:乙酸:丙酮酸 =28:3:2:17:0.51∽0.63所构成的 “五糖重复单元”结构聚合体,这 几大物质的合成多集中在酵解途径 和磷酸戊糖合成途径,因此发酵培 养基采用较高的碳氮比,高浓度的 葡萄糖抑制了烯醇式丙酮酸羧化酶 的活力,导致草酰乙酸含量降低, 三羧酸循坏减慢和蛋白合成受阻, 从而强化了磷酸戊糖途径和糖的异 生.
金霉素、维生素
金霉素、医药中间体
下面将通过一些发酵产品 的生产菌种的特性分析和 发酵代谢途径的分析,推 荐适用于不同发酵产品的 酵母培养基产品。
主要发酵产品的生物合成途径
链霉素 新霉素 卡那霉素 巴龙霉素 壮观霉素 核糖霉素
多糖 己糖磷酸
核酸 核苷
曲酸
戊糖磷酸
丁糖磷酸
丙糖磷酸
莽草酸
新生霉素 氯霉素 绿脓菌素 四环素
推荐使用的酵母浸出物型号:
P602/P604/P687
赖氨酸发酵
x
x
Leu-、Thr-黄色短杆菌生产赖氨酸
氨基酸发酵属于典型的代谢 调控发酵,为了减少产物的 反馈阻遏和反馈抑制作用, 赖氨酸的生产菌种多为某些 氨基酸的营养缺陷型菌株, 因此对培养基的要求也比较 高。
推荐使用的酵母浸出物型号:
P603/P604/P608
VB2的发酵
VB2的合成从葡萄糖经磷酸戊糖途 径合成5-磷酸核糖开始,进一步生 成L-3,4-二羟基-2-丁酮-4-磷酸( DHBP),同时由核酸从头合成途 径生成三磷酸鸟苷(GTP)。 DHBP和GTP作为前体进入VB2合 成途径。国外一般使用营养更为丰 富的酵母抽提物作为VB2的发酵培 养基,国内还在使用酵母粉。
微生态(厌氧发酵)、赤藓糖醇、杆 菌肽、黄原胶
维生素C、D-核糖、氢化可的松、阿 维菌素、头孢(7-ACA)、曲酸、土 壤净化微生物、长链二元酸
圣琪的酵母浸出物的特色产品 产品型号
L650 P680 L681/P681
应用领域
氨基酸、鸟苷、肌苷、VB2 微生态、酶、 乳酸链球菌素
聚丙烯酰胺(腈水合酶发酵)
圣琪生物多元发酵培养基 酵母培养基篇
圣琪生物酵母培养基
圣琪生物的酵母培养基
圣琪生物结合不同发酵客户的不同的菌种特性、不同的培养基营养需求、不同的产品的发酵代 谢途径、不同产物的合成机制等多个因素生产适合不同发酵产品的不同需求的培养基。
开发背景
1、与国外酵母培养基产品相比,国内的一些培养基在某些发酵产品的应用效果上与国外还有 一点差距,需要针对这些产品生产的营养需求特征来开发特定的培养基,提高产品的竞争力。
推荐使用的酵母浸出物型号:
L601/P601/P608/P680
DHA的发酵
DHA多采用裂殖壶菌发酵生产,在高 碳氮比、高渗透压条件下菌体通过自适应 调节抗渗透压产脂肪酸。发酵前期,培养 基中氮磷含量相对丰富,碳源和氮源被优 先利用于菌体生长,脂肪酸产量低。
当氮源被逐渐耗尽后,需要进行其他 含氮物质的脱氨基、转氨基等复杂的代谢 过程来补充铵根离子,新的蛋白质和核酸 的合成因而减速甚至停止,这时脂肪酸的 合成开始加速。
应用领域
目前,酵母培养基已经被广泛应用于抗 生素、生物催化、生物防腐剂、生物有 机酸、维生素、生物多糖、酶制剂、核 酸、氨基酸、基因工程药、微生态、脂 肪酸及藻类等微生物发酵产品的生产中 。蛋白质、氨基酸、核酸、维生素、微 量金属元素等营养物质含量均衡合理的 酵母培养基能显著提升发酵产品得率。 在一些采用营养缺陷型生产菌种或基因 工程菌种类产品的生产中,加入酵母培 养基后,产品生产更稳定,可显著的提 高产品产量,缩短发酵时间。
丙酸发酵
丙酸发酵主要以葡萄糖、 甘 油、 乳糖、 乳酸等作为碳源, 产丙酸的同时还伴随有乙酸、 琥珀酸、 CO2等副产物生成。 丙酸杆菌一般由底物经 E MP 途径,再经过 Wood-We r k man循环途径、 乙酸和 CO2 合成途径、 琥珀酸合成途径、 糖异生途径, 三羧酸循环途 径等生成 。
青霉素 头孢霉素 Cephamycin
丝氨酸
半胱氨酸 缬氨酸 α -氨基己二酸
磷酸甘油酸 PEP
丙酮酸 乙酰CoA
分支酸
酪氨酸
色氨酸
放线菌素 吲哚霉素 麦角酸
苯丙氨酸 支霉粘素
新生霉素 林肯霉素
丙二酸
草酰乙酸
顺乌头酸 甲羟戊酸
谷氨酸
α -酮戊 二酸
衣康酸 麦角甾醇 赤霉素
间型霉素
类胡萝卜素
甾醇 类异戊二烯
芳香族氨基酸发酵
L-苯丙氨酸的发酵是利用磷酸烯 醇式丙酮酸羧化酶的活性被高浓 度的葡萄糖强烈抑制的原理。当 培养基中的初始糖浓度较高时, 菌体中的烯醇式丙酮酸和赤藓糖 得到大量积累,被用来生成L-苯 丙氨酸,根据苯丙氨酸的合成途 径:
推荐使用的酵母浸出物型号:
P604/P608/L602/L800
所以酵母培养基生产厂家需要加强了解生产菌种的营养缺陷特征,深入研 究产品的发酵代谢途径,准确的对酵母培养基中的某些重要营养成分进行优化 调配,从而强化或弱化微生物的某些代谢途径,使酵母培养基中的各营养成分 及含量更符合生产厂家的工艺控制需求。
圣琪生物的试剂级酵母浸粉
实验室及高档发酵产品专用
应用领域
P606/P686/P687
细菌鉴定培养、种子培养、透明 质酸、胰岛素、干扰素、鸟苷、 肌苷、虫草、新型抗生素发酵等