附录3 常用培养基配方
培养基的配方
营养琼脂（普通琼脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤）100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。
用途：作普通琼脂平皿。
血琼脂平板（BA）制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。
用途：1．一般棉拭子均接种此培养基。
2．尿液，脓液3．分离细菌标本用。
基础培养基（肉膏汤BB）成份：蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。
用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
血液培养基（大管肉汤培养基）成份：1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕）1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升4 枸椽酸钠0．3g制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。
用途：作血，骨髓培养用。
肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂）成份：蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25（22）克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0．5%美兰溶液20毫升制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0．5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟），冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。
（高压以后方可再加乳糖）用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。
1罗文斯坦培养基成份：磷酸二氢钾2．4克硫酸镁0．24克枸椽酸钠0．6克天门冬素3．6克纯甘油（丙三醇）12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升（约3公斤）2%孔雀绿水溶液20毫升制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿）。
培养基的配方
营养琼脂（普通琼脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤）100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。
用途：作普通琼脂平皿。
血琼脂平板（BA）制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。
用途：1．一般棉拭子均接种此培养基。
2．尿液，脓液3．分离细菌标本用。
基础培养基（肉膏汤BB）成份：蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。
用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。
2 作普通琼脂斜面。
血液培养基（大管肉汤培养基）成份：1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕）1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升4 枸椽酸钠0．3g制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。
2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。
用途：作血，骨髓培养用。
肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂）成份：蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25（22）克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0．5%美兰溶液20毫升制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0．5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟），冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。
（高压以后方可再加乳糖）用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。
1罗文斯坦培养基成份：磷酸二氢钾2．4克硫酸镁0．24克枸椽酸钠0．6克天门冬素3．6克纯甘油（丙三醇）12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升（约3公斤）2%孔雀绿水溶液20毫升制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿）。
几种培养基的配方
几种培养基的配方培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物。
根据微生物的特性和应用需求，可以设计出不同成分和配方的培养基。
以下是几种常见的培养基配方：1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）的配方：-牛肉膏：5g-蛋白胨：5g-水解酵母膏：1.5g-纯化琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将牛肉膏、蛋白胨和水解酵母膏溶解在蒸馏水中，添加纯化琼脂，混合并加热直至溶解，然后倒入培养皿中。
2. EMB（Eosin Methylene Blue）培养基的配方：-蛋白胨：17g-明胶胨：3g-乳糖：10g-酵母提取物：3g-果糖：1g- Eosin Y：0.4g-亚甲蓝：0.065g-纯化琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将蛋白胨、明胶胨、乳糖、酵母提取物和果糖溶解在蒸馏水中，加热并搅拌至溶解，然后添加Eosin Y和亚甲蓝，最后加入纯化琼脂，混合并倒入培养皿中。
3. 铡锰培养基（Sabouraud Agar）的配方：-葡萄糖：40g-酵母膏粉：5g-水解麦粉：15g-纯化琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将葡萄糖、酵母膏粉和水解麦粉溶解在蒸馏水中，加热并搅拌至溶解，然后添加纯化琼脂，混合并倒入培养皿中。
4.胰蛋白酶-大豆酪蛋白肉汤培养基（TRYPTICASE™SOYBROTH）的配方：-胰蛋白酶胨：15g-大豆酪蛋白胨：5g-食盐：5g-葡萄糖：20g-蒸馏水：1000mL将胰蛋白酶胨、大豆酪蛋白胨、食盐和葡萄糖溶解在蒸馏水中，混合并加热至溶解，然后冷却至室温。
5. M9盐碱培养基（M9 minimal medium）的配方：-磷酸一氢二钾：3g-硫酸镁：0.5g-氯化钠：0.5g- 氨氯化铁：7.5mg-葡萄糖：4g-去离子水：1000mL将磷酸一氢二钾、硫酸镁、氯化钠和氨氯化铁溶解在去离子水中，混合并加热至溶解，然后冷却至室温后添加葡萄糖。
这只是几种常见的培养基配方，实际上还有很多不同成分和配方的培养基。
常用培养基配置的配方
常用培养基配置的配方问题补充：不好意思没有交代清楚培养对象了我想要常用的微生物培养基的配方只要配方和培养对象的名字比如：放线菌培养基高氏一号琼脂培养基可溶性淀粉20g，硝酸钾1g,氯化钠0.5g，K2HPO4 ?3H2O 0.5g，MgSO4?7H2O 0.5g，FeSO4?7H2O 0.01g，琼脂20g，水1000ml，pH7.2～7.4。
谢谢！最佳答案什么培养基啊？动物植物微生物先说清楚啊，还有你要哪种类型的培养基啊，固体液体半固体？干吗用啊，筛选还是扩大培养？说清楚先1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克，蛋白胨1.0克，氯化钠 0.5克，琼脂 1.5克，水 1000毫升在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。
过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。
配方四根瘤菌培养基葡萄糖 10克磷酸氢二钾 0.5克碳酸钙 3克硫酸镁 0.2克酵母粉 0.4克琼脂 20克水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。
2、放线菌培养基配方一淀粉琼脂培养基（高氏培养基）可溶性淀粉 2克硝酸钾 0.1克磷酸氢二钾 0.05克氯化钠 0.05克硫酸镁 0.05克硫酸亚铁 0.001克琼脂 2克水 1000毫升先把淀粉放在烧杯里，用5毫升水调成糊状后，倒入95毫升水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质，能够为微生物提供所需的营养和环境条件。
不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件，因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。
下面是几种常见的培养基配方。
1.大肠杆菌液体培养基配方：-蛋白胨或复合氮源：10g-酵母浸出物：5g-葡萄糖：1g-NaCl：5g-K2HPO4：2g-MgSO4：0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方：-牛心提取物：3g-高级琼脂糖：15g-葡萄糖：10g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方：-玉米浸出物：4g-高级琼脂糖：15g-酵母浸出物：1g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方：-液体LB培养基：10mL-高级琼脂糖：15g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方：-羊血：50mL-肉浸出物：3g-酵母浸出物：3g-肉汤培养基：1L-红细胞素：5g-高级琼脂糖：3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方：-肉浸出物：5g-酵母浸出物：5g-NaCl：5g-蒸馏水：900mL- 加入0.1%的L-cysteine：10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项：-培养基中的成分应严格按照配方比例加入，并保持无菌。
-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。
-不同的微生物可能对一些成分非常敏感，需要根据实际情况进行微调。
-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整，一般在7.0左右。
-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中，避免阳光直射以防止成分分解。
这只是一些常见的培养基配方，不同的微生物有不同的需求，可以根据具体的情况进行配方的调整。
在实际使用中，还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。
常用培养基概念及配方
LB培养基：是微生物学实验中最常用的培养基，用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
用于培养大肠杆菌、枯草杆菌等细菌，分为液态培养基和加入琼脂制成的固态培养基。
加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。
PDA培养基：马铃薯葡萄糖琼脂培养基，即Potato Dextrose Agar （Medium）,依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
改良MC培养基:用于乳酸菌饮料中乳酸菌的菌落计数；原理：大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源；乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解，以辨别乳酸菌；琼脂是培养基的凝固剂；中性红为pH指示剂。
MRS培养基：乳酸菌培养基,由多种成分组成，适用于乳酸菌的生长,用来分离培养乳酸菌的一类培养基，一种常用的培养基，宜培养分离乳酸菌。
由于该培养基十分适于乳酸菌的生长，而且抑制其他菌的生长，因此具有分离乳酸菌的功能。
当乳酸菌长成后在培养基上显黄色，之后会变淡黑色。
以此分离乳酸菌。
乳酸菌:凡是能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。
这是一群相当庞杂的细菌，目前至少可分为18个属，共有200多种。
除极少数外，其中绝大部分都是人体内必不可少的且具有重要生理功能的菌群,其广泛存在于人体的肠道中。
目前已被国内外生物学家所证实，肠内乳酸菌与健康长寿有着非常密切的关系。
乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。
常见菌种有双歧杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌等自配高浓度污水：葡萄糖5550 mg／L+（NH4）2SO4,1170 mg／L+KH2PO4，170 mg／L+COD为5000 mg／L。
自配污水：葡萄糖555 mg／L+(NH4）2SO4，117mg／L+KH2PO417 mg／L+CaC12 0,08 mg／L+MgSO4,1，534 mg／L+NaHCO3 550．8 mg／L+FeC13·6H2O 0．25 mg／L+C0D 500 mg／L+氨氮为30 mg／L．一、LB培养基配制1升LB培养培养基需:蛋白胨10g/L；酵母粉5 g/L、Nacl10 g/L、单/双去离子水、琼脂15～20g/L(配制液体培养基不需要加，配制固体培养基时加入)。
培养基配方及配制方法
培养基配方1 斜面菌种保存培养基1.1PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸0.5h，纱布过滤，滤液补足1000ml，再加15g葡萄糖和15-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
1.2麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备：干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。
太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度），按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37℃左右浸泡1小时，然后缓缓加温至55~63℃（在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温4~6小时（用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。
在糖化过程中，应每小时搅拌一次。
取过滤后的清液，加1.8%琼脂，分装试管，每试管约5-10ml （视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
2基菌落总数检测2.1平板计数琼脂培养基将胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g加入蒸馏水1000ml中，煮沸溶解后，调pH，然后在121℃下灭菌15min，取出，稍微冷却后，带热倒入培养皿中。
3志贺氏菌检测3.1 GN增菌液成分：胰蛋白胨：20g，葡萄糖：1g，甘露醇：2g，柠檬酸钠：5g，去氧胆酸钠0.5g，磷酸二氢钾4g，磷酸氢二钾1.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。
pH7.0制法：将上述物品加入蒸馏水中，加热溶解煮沸，调pH为7.0，分装，在115℃高压灭菌15min。
3.2 HE琼脂成分：胨：12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖12g，水杨素2g，胆碱20g，氯化钠5g，琼脂18~20g，蒸馏水1000ml0，0.4%溴麝香草酚蓝溶液16ml，Andrade指示剂20ml.，甲液20ml，乙液20ml。
pH7.5 制法：将上述前七种成分加入400ml蒸馏水中作为基础液，将琼脂加入到600ml蒸馏水中加热溶解，加入甲液乙液到基础液中，调pH，再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷却至50~55℃，倾注浇平板。
常用培养基配方
十七常用培养基配方17.1 营养琼脂培养基成分蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15~20g蒸馏水1000mL制法：将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2ML，校正PH7.2—7.4，加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。
分装在三角锥瓶中，在121℃下高压灭菌15分钟。
17.2 乳糖胆盐发酵管培养基（单料）成分蛋白胨20g猪胆盐5g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mlPH7.4制法将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正PH值，加入指示剂分装，每支管10ml，并放入一个小倒管（产气管），在115℃下高压灭菌15分钟。
注：双料乳糖胆盐发酵管培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。
17.3 乳糖发酵管培养基（单料）成分蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25ml蒸馏水1000mlPH7.4制法将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正PH，加入指示剂分装，每支管3ml，并放入一个小倒管（产生气），在115℃下高压灭菌15分钟。
注：双料乳糖发酵管培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。
17.4 伊红美琼脂（EMB）培养基成分蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂2g2%伊红溶液20ml0.65%美兰溶液10 ml蒸馏水1000mlPH7.1制法将蛋白胨，磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于三角锥瓶内，在121℃下高压灭菌15分钟后备用。
临用时加入乳糖并加热熔化琼脂，冷却至50—60℃，加入伊红和美蓝溶液摇匀，浇注平板。
17.5 远藤氏培养基配方：蛋白栋10.0g乳糖10.0g磷酸氯二钾 3.5g亚硫酸氢钠 2.5g碱性品红0.4g琼脂10.0g蒸馏水100ml制备：配料放入蒸馏水中，搅拌15分钟，使其溶解，分装到三角瓶或试管，121℃灭菌20分钟，冷却后贮于暗处，最佳温度为4—8℃以保持浅粉红色。
17.6 UBA培养基酵母浸膏 6.1g蛋白胨15g番茄汁（244ml）12.2g葡萄糖16gK2HPO4 0.31gKH2PO4 03.1gMgSO·7H2O 0.12gNaCl 0.006gFeSO4·7H2O 0.006gMnSO4·H2O 0.006g琼脂12g蒸馏水750ml啤酒250g将上述配料加入水中，加热至沸，搅拌至完全溶解，趁热加入未脱气的啤酒，轻轻搅拌混合，用HCI 或NaOH调pH为6.0+0.1，分装于三角瓶中，，121℃蒸汽灭菌20min。
常见植物培养基的配制配方
2015-4-16常见培养基的制备LB；G AUSE I;P AD培养基[]LB培养基LB（lysogeny broth）培养基是微生物学实验中最常用的培养基，用于培养大肠杆菌等细菌，其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。
加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。
LB培养基的配制：成分：胰蛋白胨(tryptone) 10g酵母提取物(yeast extract) 5g氯化钠(NaCl) 10g固体培养基另加琼脂粉(15-20)g加双蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH（约0.2ml）调pH至7.2，121℃灭菌30min。
配制方法：✓称量分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl，置于烧杯中。
✓溶化加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中，用玻棒搅拌，使药品全部溶化。
✓调pH 用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2。
✓定容将溶液倒入量筒中，加水至所需体积.✓加琼脂加入所需量琼脂，加热融化，补足失水。
✓分装、加塞、包扎。
✓高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
培养细菌：大肠埃希氏菌(Escherichia coli)天然培养基；Gause′s Synthetic Agar （高氏合成一号琼脂）成分：✓KNO3 1g✓Soluble starch（可溶性淀粉）20g✓K2HPO40.5g✓MgSO4 .7H2O 0.5g✓NaCl 0.5g✓FeSO40.01g✓Agar （琼脂）20g✓water （水） 1000ml✓pH 7.2-7.4方法：加入蒸馏水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管或三角瓶，121℃高压灭菌20分钟备用.。
性状：干燥粉末，易吸潮。
PDA培养基制作PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA 培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
培养基大全
实验用培养基配制1．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g, 水1000mL,pH7.4～7.62. 高氏 1 号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g , KNO3 1g, NaCl 0.5g,K2HPO4-·3H2O 0.5g, MgSO4·7H2O 0.5g, FeSO4·7H2O 0.01g, 水1000mL, pH7.4～7.6。
配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3．马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO4 1g, MgSO4·7H2O 0.5g,蛋白胨5g, 葡萄糖10g, 1/3000 孟加拉红水溶液100mL,水900mL, 自然pH, 121℃湿热灭菌30min. 待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL).4. 马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养) 马铃薯(去皮)200g, 蔗糖(或葡萄糖)20g, 水1000mL, 配制方法如下: 将马铃署去皮,切成约2cm2 的小块,放入1500mL 的烧杯中煮沸30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液加糖,再补足至1000mL, 自然pH. 霉菌用蔗糖, 酵母菌用葡萄糖.5. 察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养) 蔗糖30g, NaNO3 2g, K2HPO41g,MgSO4·7H2O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4·7H2O 0.1g, 水1000mL, pH7.0～7.26. Hayflik 培养基(用于支原体培养) 牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g, NaCl5g,琼脂15g, pH7.8～8.0, 分装每瓶70mL, 121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL 中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL, 15 醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素G 钾盐水溶液(20 万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意:醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作.7．麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基)葡萄糖0.1g, KCl 0.18g，酵母膏0.25g，醋酸钠0.82g, 琼脂l.5g，蒸馏水l00mL。
微生物学实验三 培养基的配制及灭菌
实验三培养基的配制及灭菌培养基是指利用人工方法将适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的各种营养物质混合配制而成的营养基质。
主要用于微生物的分离、培养、鉴定以及菌种保藏等方面。
培养基一般应含有微生物生长繁殖所需要的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水等营养成分。
此外，为了满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的要求，还必须控制培养基的pH。
一般细菌、放线菌适于生长在中性或微碱性的环境中，而酵母菌和霉菌则适于生长在偏酸性的环境中。
因此，在配制培养基时，须将培养基调节在一定pH的范围内。
迄今为止，培养基的种类极其繁多。
按培养基的成分，可将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
天然培养基是指利用动物、植物、微生物或其它天然有机成分配制而成的培养基。
其优点是营养丰富、价格便易；缺点是成分不能准确确定且不稳定。
实验室常用的牛肉汁或麦芽汁培养基即为天然培养基。
合成培养基是指完全利用已知种类和成分的化学试剂配制而成的培养基。
优点是各成分均为已知且含量稳定，缺点是价格较贵。
实验室常用的高氏一号培养基即为合成培养基。
半合成培养基是指由天然有机成分和已知化学试剂混合组成的培养基。
实验室常用的马铃薯葡萄糖培养基即为半合成培养基。
按培养基的物理状态，可将培养基分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。
固体培养基是指在液体培养基中加入一定量的凝固剂（常加1.5％～2％的琼脂）经融化冷凝而成；半固体培养基是指在液体培养基中加入0.2％～1％左右的琼脂，经融化冷凝而成；液体培养基是指培养基中不加凝固剂琼脂，培养基呈液体状态。
按培养基的用途，可将培养基分为加富培养基、选择培养基和鉴别培养基。
加富培养基是指在培养基中加入某些特殊营养物质，促使某种持殊性能的微生物迅速生长，有利从混合菌群中分离出所需种类微生物。
例如为了分离能够利用石蜡的微生物，常在培养基中加入石蜡作为碳源。
选择培养基是指在培养基中加入某些微生物生长抑制剂，抑制那些不需要的微生物的生长，以达到从混杂微生物菌群的环境中分离到所需的微生物。
培养基配方
培养基配方一、哺乳动物培养基1、DMEM培养基DMEM培养基低糖(干粉) D2902 10X1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L的葡萄糖。
不含酚红和和碳酸氢钠。
50L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5523 10×1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L葡萄糖，不含碳酸氢钠。
2×5L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
5L50L DMEM培养基低糖（干粉）D5030 10×1L 不含L-谷氨酰胺，葡萄糖，酚红，丙酮酸钠和碳酸氢钠。
10L每升培养基含8.3g干粉。
配制时每升加1.0g葡萄糖，0.584g 50L L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5280 10×1L 可以高压消毒。
10L含1000 mg/L的葡萄糖。
不含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
50L每升培养基含9.6g干粉。
配制时每升加0.584g L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（液体）D5546 500ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺。
用盐6×500ML 酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
24×500ML 1L6×1L DMEM培养基低糖（液体）D5921 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺和酚红。
500ML 用盐酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
6×500MLDMEM培养基低糖（液体）D6046 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖，L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
用盐酸维500ML 生素B6代替盐酸吡哆醛。
6×500ML1LDMEM培养基低糖（液体）D2429 100ML 1×的培养基含有1000 mg/L的葡萄糖。
常用25种培养基详细配方
常用25种培养基详细配方以下是常用的25种培养基的详细配方：1. LB培养基（Luria-Bertani medium）-天然培养基：10g蛋白胨，5g酵母粉，10gNaCl，添加适量蒸馏水，pH值调至7.0。
- 固体培养基：添加15g agar。
2. TSA培养基（Tryptic Soy Agar）-17g蛋白胨，3g酵母提取物，5gNaCl，添加适量蒸馏水，pH值调至7.3-7.5- 固体培养基：添加15g agar。
3. NB培养基（Nutrient Broth）-8g蛋白胨，2g胰蛋白胨，5gNaCl，添加适量蒸馏水，pH值调至7.4 - 固体培养基：不添加agar。
4. R2A培养基（Reasoner's 2A medium）- 0.5g peptone，0.5g casein hydrolysate，0.5g yeast extract，0.5g glucose，0.5g soluble starch，0.3g dipotassium phosphate，0.05g magnesium sulfate，0.3g sodium pyruvate，10μg m anganese sulfate，添加适量蒸馏水，pH值调至7.2-7.4- 固体培养基：添加15g agar。
5. BHIS培养基（Brain Heart Infusion with 20% Sucrose）- 37.5g BHIS培养基，10g sucrose，添加适量蒸馏水，pH值调至7.5- 固体培养基：添加15g agar。
6. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）-200g马铃薯，20g葡萄糖，添加适量蒸馏水，pH值调至5.6- 固体培养基：添加20g agar。
7. MRS培养基（de Man Rogosa Sharpe medium）- 10g peptone，10g beef extract，4g yeast extract，20g glucose，5g sodium acetate，2g dipotassium phosphate，0.02g magnesium sulfate，添加适量蒸馏水，pH值调至6.2-6.6- 固体培养基：添加20g agar。
各种培养基的制作方法
各种培养基的制作方法配方一萨氏（Sabouraud's）培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40克麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。
1.营养肉汤培养基牛肉膏 0.3克蛋白胨 1.0克NaCl 0.5克水 100毫升pH 7.0～7.2在烧杯中加水，称取牛肉膏、蛋白胨和NaCl，加热溶化后，调节pH值至7.0～7.2。
分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌即成。
常用于培养细菌。
2.营养琼脂培养基在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。
常用于培养细菌。
3.肉汁蛋白胨液体培养基牛肉 500克蛋白胨 10克NaCl 5克pH 7.1～7.2取新鲜牛肉500克，去净脂肪、筋腱后，绞碎或剁碎，加水1000毫升浸泡，15℃下放置12小时或50℃下放置半小时。
用纱布将肉汁过滤，补足失水。
向肉汁中加入蛋白胨和食盐。
将肉汁加热，放入苏打（碳酸钠）至红色，调整pH值。
分装，高压蒸汽灭菌。
将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质，制成液体培养基，如需制成固体培养基，可在每100毫升液体中加入2克琼脂，加热溶化后，分装，再次进行高压蒸汽灭菌。
常用于培养细菌。
4.高氏一号培养基（淀粉琼脂培养基）可溶性淀粉 2克K2HPO4 0.05克MgSO4·7H2O 0.05克KNO3 0.1克NaCl 0.05克FeSO4 0.001克琼脂 2克水 100毫升pH 7.2～7.4在烧杯中加水95毫升，加热至沸腾，取可溶性溶粉2克，用5毫升水调成糊状，倒入沸水中和匀。
再称取其它药品，陆续加入烧杯内（待一种药品溶解后，再加入第二种药品）。
待全部药品溶解后，停止加热，补足失水，调pH值至7.2～7.4。
分装后，高压蒸汽灭菌。
本培养基常用于培养放线菌。
5.马铃薯蔗糖培养基马铃薯 200克蔗糖 10克琼脂 20克水 1000毫升自然pH称取200克马铃薯片，加水1000毫升，煮沸半小时，用纱布过滤，补足失水。
常用培养基及添加剂的配制
1牛心脑浸汁-辅助琼脂：(BHI-S )BHI 琼脂100mL氯化血红素-维生素K11mL脱纤维蛋白血(兔血)5-10mL 2．胰蛋白水解物-大豆琼脂( TS)胰蛋白水解物 (或胰蛋白胨) 1.5g大豆胨0.5g Nacl0.5g酵母提取物0.5g盐酸半胱氨酸液0.4mL琼脂2.0g蒸馏水加至100mL 3．Gifu 厌氧培养基： ( GAM )胰蛋白胨 1.0g大豆胨0.3g 多价蛋白胨 1.0g酵母提取物0.5g 肝浸汁10mLVPI 盐溶液0.2g牛肉浸膏5mL 盐酸半胱氨酸0.4mL 旈基乙醇酸钠0.03g 葡萄糖 1.0g琼脂1.8-2.0 g刃天青 ( 0.1%)0.5g 蒸馏水加至100mL 4．Rogosa 乳杆菌选择培养基( LS )胰蛋白水解物 (或胰蛋白胨)2.0g酵母提取物 1.0g琼脂4g葡萄糖 4.0g 磷酸二氢钾1.2g枸橼酸三铵0.4g 硫酸镁( MgSo4 7H2O) 1.0g 硫酸锰( MnSo4 4H2O) 0.4g 硫酸亚铁( FeSo4 7H2O ) 0.08g 醋酸钠（CH 3COONa 3H2O）(乙酸钠) 5g冰乙酸( 99.5%) 0.264m L聚山梨酯-800.2gDH2O 200m L10mL）5．TPY 培养基胰蛋白胨3.0g酵母提取物0.8g葡萄糖2.0g磷酸二氢钾1.2gK 2HPO 4 3H2O0.4g NaCO30.4g NaCl0.4gDH2O200mL琼脂2.5g /200mL 6．普通血琼脂培养基 (BA )牛肉浸膏（0.5-1.0）g蛋白胨1.0g NaCl0.5g K 2HPO 42.0g酵母提取物0.5g葡萄糖1.0g琼脂1.8g蒸馏水加至100mL（储存液）12g4g10g4g0.8g50g2.64mL2g200mL （每100mL 培养基加1.0g0.5g3-5g (可根据需要将蔗糖量增至20g) 0.1g0.53g2.0g7.5mL0.8mL100mL100mL0.1mL灭菌MS琼脂50 C左右时加入杆菌肽溶液，混匀倒板9．轻唾-磺胺二甲嘧啶琼脂（MS 磺胺琼脂）MS 琼脂* 磺胺二甲嘧啶（5%）*1%的亚碲酸钾溶液灭菌MS琼脂冷却至25 C时加入* 10．TYCSB 琼脂胰蛋白酶水解物酵母提取物盐酸半胱氨酸溶液K 2HPO 43H2O 蔗糖琼脂DH2O11．Rogosa 乳杆菌选择培养基（LS）胰蛋白水解物（或胰蛋白胨）100mL1.0mL0.28mL1.0g 0.5g0.4g0.53g20g2g100mL( 200U/mL ) 0.1mL, 混匀倒板1.0g7．轻唾培养基（MS ）胰蛋白胨示胨蔗糖葡萄糖K 2HPO 4 3H2O 琼脂0.1%曲利本蓝0.1%结晶紫蒸馏水加至8．轻唾-杆菌肽琼脂（MSB ）MS 琼脂（蔗糖含量为20%）杆菌肽溶液（200U/mL ）灭菌后冷却至50-55 C时加入杆菌肽溶液酵母提取物磷酸二氢钾枸橼酸三铵葡萄糖硫酸镁（MgSo4 7H2O）硫酸锰（MnSo4 4H2O）硫酸亚铁（FeSo4 7H2O ）醋酸钠（CH s COONa 3H2O）（乙酸钠）冰乙酸（99.5%）聚山梨酯-80琼脂DH2OLS 盐溶液的组成：MgSo4 7H2OMnSo4 2H2OFeSo4 7H2ODH2O混合上述成分并加热使之溶解。
动物科学微生物实验指导
动物微生物学实验指导目录实验1 细菌的简单染色和革兰氏染色实验2 细菌的芽胞、荚膜、鞭毛染色及运动性观察实验3 微生物细胞形态及菌落特征观察实验4 培养基制作、灭菌消毒及无菌操作接种技术实验5 微生物的分离纯化与稀释平板菌落计数实验6 微生物细胞大小测定及显微镜直接计数附录1 常用培养基配方附录2 常用染色液的配制附录3 常用试剂和指示剂的配制参考书目实验1 细菌的简单染色和革兰氏染色一、实验目的1、学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法；2、学习显微镜油镜观察的方法；二、实验内容1、细菌的简单染色；2、细菌的革兰氏染色；三、实验原理简单染色法是一种最基本的染色方法，是只用一种染料使细菌着色以显示其形态的方法。
因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，而碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。
所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红、孔雀绿或蕃红）等进行染色，当这类染料解离后，染料离子带正电荷，使菌体着色。
简单染色一般难于辨别细菌细胞的构造。
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的重要鉴别染色反应。
通过革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G－）两大类。
这是因为两类菌的细胞壁结构和成分的不同，G－菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经过蕃红复染后就成红色。
G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色，即紫色。
四、实验材料1、活材料：培养12～16h的苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），培养24h 的大肠杆菌（Escherichia coli）。
常用培养基及染料的配制.doc
常用培养基的配制1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠 10g琼脂15~20gp H 7.0~7.2水1000mL121℃灭菌20min。
2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠 0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁 0.01g琼脂20g水1000mLp H 7.2～7.4配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLp H 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红（rose bengal，玫瑰红水溶液）100mL琼脂15—20gp H 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）马铃薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g琼脂15—20gp H 自然培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
附录3常用培养基配方
附录3常用培养基配方常用培养基配方附录3一、牛肉膏蛋白胨培养基(又称肉汤培养基，培养细菌)牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl 5g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1 000 mL，调节pH为7.0-7.2。
在肉汤培养基中加入15-20 g的琼脂，即制成牛肉膏蛋白胨固体培养基。
二、LB培养基(培养大肠杆菌)蛋白胨10g酵母膏 5gNaCl 10 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mL，调节pH为7。
三、麦芽汁琼脂培养基(培养酵母萄)麦芽汁 20 g蛋白胨 1g葡萄糖 20 g琼脂20 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000 mL。
麦芽汁的制备：普通大麦在20℃左右用水浸泡4h，并在大麦表面覆盖一层湿布，每天冲水1-2次，至麦芽长到与麦粒长度相同时，将大麦风干、捣碎，制成大麦粉。
1 kg大麦粉加水4 kg，在55℃的水浴锅中糖化6-7 h，至加碘后不变蓝色。
用纱布过滤麦芽汁，放置一段时间，使杂质沉淀，测定糖度，然后将麦茅汁稀释到5~6波美度即可。
波美度是表示溶液浓度的一种方法，把波美比重计浸入所测溶液中，得到的度数叫波美度。
当测得波美度后，从相应化学手册的对照表中可以方便地查出溶液的质量分数。
四、马铃薯琼脂培养基（培养真菌)将200 g马铃薯去皮，切成小薄片，加水1000 mL，加热到80℃，保温1h，或煮沸20 min后，用纱布过滤。
滤液中加人20 g蔗糖或葡萄糖、15~20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL 。
五、查氏培养基(培养霉菌)蔗糖15g硝酸钠（NaNO3） 3g磷酸氢二钾(K2HPO4 ) 1g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.5g氯化钾(KCl) 0.5 g硫酸亚铁(FeSO4·7H2O ) 0.01 g琼脂15-20 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1 000mL 。
六、MY培养基(霉菌和酵母菌的传代保藏)酵母膏3g麦芽汁3g蛋白胨5g葡萄糖10g琼脂20g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000 mL。
常用培养基配方
成分:
蛋白胨5g
酵母浸膏3g
葡萄糖1g
蒸馏水1000mL
1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mL
L-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mL
pH6.8
制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶100mL,分别加入各种氨基酸:赖氨酸,精氨酸和鸟氨酸.L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入.再行校正pH至6.8.对照培养基不加氨基酸.分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min.
注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水,蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用.如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果.
08 Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)
成分:
蛋白胨2g
氯化钠5g
磷酸氢二钾0.3g
琼脂4g
葡萄糖10g
0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL
蒸馏水1000mL
59氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基
60胰蛋白胨水
61 Rustigian氏尿素培养液
62氯化钠结晶紫增菌液
63氯化钠蔗糖琼脂
64嗜盐菌选择性琼脂
65 3.5%氯化钠三糖铁琼脂
66氯化钠血琼脂
67 3.5%氯化钠生化试验培养基
பைடு நூலகம்68改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)
69 CIN-1培养基
70嗜盐性试验培养基
成分:
酵母浸膏1g
硫酸铵2g
磷酸氢二钾0.6g
磷酸二氢钾0.4g
氯化钠2g
丙二酸钠3g
0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL
蒸馏水1000mL
pH6.8
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
探究一：实验室培养酵母菌需要做些什么，提供些什 么，注意哪些因素的影响？
一.培养基：微生物生存的环境和营养物质
1.类型：
⑴物理性质 ⑵特殊作用 （3）成分
固体培养基： 菌种的分离、鉴定等
液体培养基： 工业生产等 基础培养基 选择培养基 鉴别培养基 天然培养基 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏等
合成培养基
探究二：阅读教材P83常用培养基配方： 1、哪些是天然培养基，哪些是合成培养基？ 2、查式培养基中所含的的元素有哪些？
一.培养基：微生物生存的环境和营养物质
2.基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐
⑴碳源 无机碳源：CO2、CO32-、HCO3- 自养微生物 有机碳源：牛肉膏、蛋白胨等 异养微生物
加入缓冲剂
⑵氮源
无机氮源：NH4＋、NO3微生物的碳源、氮源、能源
一.培养基：微生物生存的环境和营养物质 1.类型：
2.基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐
3.特殊营养： 维生素、碱基等（生长因子） （牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）
4.培养条件：pH、氧气的需求
牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 琼脂20.0g 牛肉膏 5g
蛋白胨 10g Nacl 5g H2O 定容至1000ml
分析营养构成？
5. 配制原则
生产 科研
⑴目的明确：根据微生物的种类、培养目的选择原料
自养型 异养型
⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当 ⑶适宜的pH值：细菌偏碱，真菌偏酸