天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠相关基因mRNA表达的影响
天麻及其活性成分药理作用研究进展
天麻及其活性成分药理作用研究进展--刘金美摘要：天麻及其活性成分在药理上具有镇静催眠、镇痛、改善记忆、益智健脑等作用，本文就最近五年的天麻及其活性成分的药理作用的研究进行了综述。
关键词：天麻；活性成分；药理；研究天麻为天麻属兰科植物天麻的干燥块茎，为常用名贵中药。
中医药认为天麻具有熄风定惊、镇静催眠、镇痛、抗血小板聚集、抗氧化、延缓衰老、降压、抗惊厥、抗癫痫等药理作用。
其有效成分为天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、香草醛和天麻多糖等多种成分。
一、镇静催眠的作用何芳雁等[1]对昭通天麻催眠作用活性成分进行了筛选,天麻乙酸乙酯萃取后的水层部分及腺苷腹腔注射给药均能显著提高小鼠入睡率,具有显著的催眠作用.其在腹腔注射高剂量（20g/kg）的入睡率分别是100%和60%，其催眠的主要成分是腺苷。
齐丽娟等[2]研究了天麻对小鼠睡眠的改善作用。
天麻在低剂量时，可以增加戊巴比妥钠阈下剂量动物的入睡率；能缩短小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期。
说明天麻与巴比妥钠具有协同作用，天麻具有改善睡眠的作用。
杨蕾等[3]以含与不含镇静药、安神药对天麻钩藤饮进行拆分，以灌胃的方式给药，研究天麻钩藤饮全方和拆分组与阈剂量戊巴比妥钠的协同作用。
结果显示，天麻钩藤饮全方和去夜交藤、茯神均能显著抑制小鼠自主活动、延长阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠的时间。
且天麻钩藤饮去夜交藤、茯神后，具有与原方等效的镇静、催眠的作用。
陈鹏等[4]运用光电管发评价天麻醒脑胶囊对小鼠自主活动的影响及对中枢兴奋药和抑制药的协同与拮抗作用。
结果表明：2g/kg的天麻醒脑胶囊可明显延长小鼠戊巴比妥钠的睡眠时间；1g/kg天麻醒脑胶囊具有明显的镇痛作用；均与2g/kg的安神补心丸有相似。
二、神经保护作用聂晶等[5]探讨了天麻素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制，以线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，缺血2h、再灌注24h后检测大鼠的神经功能，取大脑用红四氮唑染色后测定脑梗死面积和脑含水量，生化法测定大鼠脑组织匀浆中丙二醛 (MDA) 的含量，超氧化物歧化酶和 Na+-K+-ATP 酶的活性。
天麻素对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清内皮素-1水平的影响
天麻素对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清内皮素-1水平的影响哈玲梅;董化江;单娜娜;臧照辉;何文彤【期刊名称】《新乡医学院学报》【年(卷),期】2015(032)005【摘要】目的探讨天麻素对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清中内皮素-1(ET-1)水平的影响.方法Wistar大鼠50只随机分为5组:假手术组、模型组、天麻素低剂量组、天麻素中剂量组、天麻素高剂量组,每组10只.假手术组大鼠开胸不结扎冠状动脉前降支;模型组大鼠开胸结扎前降支;天麻素低、中、高剂量组大鼠开胸结扎冠状动脉前降支,术前给予相应剂量的天麻素,经舌下静脉给药.放射免疫法测量ET-1血清学水平;反转录-聚合酶链反应、蛋白质免疫印迹法检测各组大鼠心肌组织中ET-1的表达情况.结果与假手术组比较,模型组及天麻素低、中、高剂量组大鼠血清ET-1水平、心肌组织ET-1 mRNA及蛋白水平显著升高(P＜0.05);天麻素低、中、高剂量组大鼠血清ET-1水平、心肌组织ET-1 mRNA及蛋白水平均较模型组显著降低(P＜0.05),且天麻素剂量越高其水平降低越明显(P＜0.05).结论天麻素进行干预后可有效降低心肌缺血再灌注损伤后内皮素-1表达.【总页数】3页(P395-397)【作者】哈玲梅;董化江;单娜娜;臧照辉;何文彤【作者单位】武警后勤学院附属医院急诊科,天津300162;武警后勤学院人体解剖学与组织胚胎学教研室天津市遗体防腐与整形整容重点实验室,天津300162;武警后勤学院教育技术中心,天津300162;武警后勤学院研究生处,天津300162;武警后勤学院人体解剖学与组织胚胎学教研室天津市遗体防腐与整形整容重点实验室,天津300162【正文语种】中文【中图分类】R542.2【相关文献】1.加兰他敏对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清 CK-MB活性及TNF-α和IL-6水平的影响 [J], 李卉;马敏;咸淑悦;王焱林2.维拉帕米对心肌缺血再灌注损伤状况下血浆内皮素水平的影响 [J], 王嵘;苏晓灵;周白丽;龙启福3.姜黄素对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠内皮素-1水平的影响 [J], 曲雅静;董化江;臧照辉;单云官;王志梁;何文彤4.丹红注射液对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清一氧化氮合酶、内皮素-1的影响 [J], 龚跃波;齐国先;李戈;李轶鹏;高明宇;孙雪岩5.脑缺血再灌注损伤大鼠血清细胞因子和内皮素水平变化及小牛血去蛋白注射液的干预作用 [J], 隋汝波;李熙东;杨波;闵连秋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
天麻素对新生大鼠缺氧缺血合并低血糖脑损伤前列腺素代谢影响的研究
天麻素对新生大鼠缺氧缺血合并低血糖脑损伤前列腺素代谢影响的研究发表时间：2011-12-15T14:01:40.250Z 来源：《中外健康文摘》2011年第34期供稿作者：牛延军金正勇许春花[导读] 目的探讨天麻素对新生大鼠缺氧缺血合并低血糖脑组织的保护作用。
牛延军金正勇许春花（延边大学附属医院新生儿疾病研究室吉林延吉 133000）【中图分类号】R699【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）34-0081-03【摘要】目的探讨天麻素对新生大鼠缺氧缺血合并低血糖脑组织的保护作用。
方法将天麻素注射液按1g/kg于制备模型后即刻干预，用放射免疫分析法测量新生大鼠脑组织中前列腺素TXB2，6-K-PGF1ɑ含量变化。
结果缺氧缺血合并低血糖模型组脑组织中6-K-PGF1ɑ TXB2含量显著增高，分别28.56±10.30（pg/mg.pr）,16.87±3.76 (pg/mg.pr）P＜0.001。
制备模型后即刻干预组（天麻组）脑组织中6-K-PGF1ɑ含量14.67±0.54（pg/mg.pr）差异明显，TXB2含量9.12±1.70（pg/mg.pr）与模型组有差异P＜0.01。
结论天麻素对缺氧缺血合并低血糖脑组织TX及PG代谢方面有保护作用，早期干预尤为重要。
【关键词】天麻素注射液新生大鼠缺氧缺血合并低血糖模型血栓素B2 6—酮-前列腺素F1ɑ【Abstract】 Objective To explore the afficetion of Gastrodin Injection on the change of prostaglandin metabolites in the brain of newborn rats with hypoxic-ischemic and Hypoglycemia brain damage.Methods Gastrotion Injection dosage （1g/kg）was adminiatrated immediately to the rat pups.Then we tested the changes ofTXB2，6-K-PGF1ɑ of prostaglandin metabolites in the brain，TXB2，6-K-PGF1. Result The level of 6-K-PGF1ɑ TXB2 content in the brain of newborn rats with hypoxic-ischemic and Hypoglycemia increased significantly which compared with normal group.6-K-PGF1ɑ is 28.56±10.30（pg/mg.pr），TXB2 is 16.87±3.76（pg/mg.pr）.P＜0.001. The level of 6-K-PGF1ɑ content in the brain of Gastrodin Injection immidiate group is14.67±0.54（pg/mg.pr），which is significantly，the level of TXB2 content in the brain of Gastrodin Injection immidiate group is 9.12±1.70（pg/mg.pr），which increased siginificantly compared with HIBD.P＜0.01. Conclusions Gastrodin Injection has effect for the brain of newborn rat with hypoxic-ischemic and Hypoglycemia brain damage on the level of TXB2 and 6-K-PGF1，especialy used before.【Key words】Gastrodin Injection brain of newborn rats with hypoxic-ischemic and Hypoglycemia brain damage TXB2 6-K-PGF1ɑ 围产期窒息导致新生儿脑组织缺氧缺血损伤（HIE）是新生儿期危害最大的常见病，常导致新生儿死亡和幸存者不良后果，迄今对HIE 的确切发病机理尚认识不多尤其对损伤的治疗仍无根本性措施。
天麻苷的药效分析
天麻苷的药效分析作者：贾银珠来源：《健康必读·下旬刊》2011年第04期【中图分类号】 R917 【文献标识码】A【文章编号】1672－3783(2011)04－0350－02【摘要】基础研究和临床应用证明了天麻素的药理作用有：镇静、催眠、抗惊厥、镇痛作用，对缺血再灌注及脑细胞的损伤有保护作用，可以增加心脑血管血流量，降低外周血管阻力，增加动脉血管顺应性，还有增强免疫和抗遗忘抗衰老等作用。
【主题词】天麻素药效分析天麻属兰科植物，从天麻中提炼出的化学成分有天麻素、天麻苷元、香荚兰醇、香荚兰醛、天麻醚苷、对羟基苯甲醛、柠檬酸、琥珀酸等。
其中活性成分含量最高的有效单体成分是天麻素（化学名为对羟甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷，又称天麻苷）。
一镇痛作用天麻连续给药，采用电击鼠尾法和扭体法，观察到天麻素有明显的镇痛效果，且镇痛作用与剂量相关。
二抗惊厥作用小鼠腹腔注射天麻素30 mg/kg，30 min后静脉滴注0.5%戊四氮溶液30 mg/kg，结果显示天麻素能够延长戊四氮阵挛性惊厥的潜伏期，具有明显对抗戊四氮阵挛性惊厥的作用。
天麻素有延长马桑内脂致家兔癫痫发生的潜伏期，减轻大发作程度，缩短大发作时程，加快其恢复过程和降低死亡率的趋势。
三镇静催眠作用实验猴采用静脉注射天麻素50 m g/kg，20 min后即出现安静、无紧张样，持续时间达2 h。
给实验小鼠皮下注射天麻素的结果显示，天麻素明显有协同戊巴比妥钠、水合氯醛及硫喷妥钠等的作用。
天麻素能对抗咖啡因所致的中枢兴奋作用和明显延长小鼠戊巴比妥钠催眠剂量的睡眠时间。
恒河猴、兔及鸽静脉注射天麻素后均产生镇静作用。
天麻素可透过血脑屏障，在脑组织中以较高速度降解为天麻苷元，天麻苷元为脑细胞膜Bz受体的配基。
因此天麻苷元作用于γ氨基丁酸/Bz受体，从而显示镇静、抗惊厥的中枢抑制效应。
四对脑细胞损伤的保护作用1 拮抗兴奋性氨基酸的神经毒性对新生大鼠大脑皮层进行体外神经细胞培养，用谷氨酸建立离体神经元损害模型，观察天麻素对兴奋性氨基酸神经毒性的影响。
天麻素抗大鼠离体心肌缺血_再灌注损伤的作用_周敏
180第11卷 第12期 2009 年 12 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 11 No. 12 Dec .，2009天麻是一种功效很多而效果显著的名贵中药，天麻素（化学名为对羟甲基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷，又称天麻苷）是天麻的有效单体。
近年来研究发现，天麻素具有镇静、抗惊厥、抗癫痫、镇痛，增加脑血流量，改善椎基底动脉、小脑前下动脉、迷路动脉及内耳供血不足，保护神经细胞，促进心肌细胞能量代谢的功能。
心肌缺血再灌注 I/R 损伤是导致心肌损害的常见原因,深入研究心肌 I/R 损伤的发病机制、不断寻找有效的治疗药物一直是国内外医药界的重要研究领域之一[5]。
本实验采用 Langendorff 灌流的大鼠心脏，探讨天麻素的抗心肌 I/R 损伤作用及可能的作用机制。
1 材料和方法1.1 药品及试剂天麻素购于中国药品生物制品检定所；超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；其它化学药品均为国产分析纯。
1.2 动物和实验分组健康wistar 大鼠雌雄各半 ,体重 180~260g ,由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供。
大鼠被随机分成4组 ,每组10只，分别给予以下药物: ①正常灌流组; ②模型组; ③天麻素高剂量组0.1mmol/L;④天麻素低剂量组0.025mmol/L。
1.3 实验操作腹腔注射肝素750U/kg 麻醉后、制备Langendorff心脏[7],恒温（37.5℃）恒压（60 cmH 2O ）灌流。
灌流液成分为：118mmol/L NaCl，4.7mmol/L KCl，2.5mmol/LCaCl 2，1.2mmol/L MgSO 4，1.2mmol/L KH 2PO，11mmol/L Glucose，25mmol/L NaHCO 3, PH 7.35~7.45,持续通入混合气体（95%O 2和5%CO 2）[7]。
天麻素注射液通过NGFTrkA通路减轻大鼠脑缺血所致肺损伤
J South Med Univ,2022,42(1):116-122doi 10.12122/j.issn.1673-4254.2022.01.14天麻素注射液通过NGF/TrkA 通路减轻大鼠脑缺血所致肺损伤产翠翠，马同军，王继胜，张雨微，龚鑫皖南医学院人体解剖学教研室，安徽芜湖241002摘要：目的基于神经生长因子（NGF ）/酪氨酸激酶受体A （TrkA ）通路探讨天麻素注射液治疗局灶性脑缺血致肺损伤大鼠的作用机制。
方法将40只SD 大鼠随机分为4组：正常组、假手术组、模型组和天麻素治疗组（10只/组）。
采用栓塞大鼠右侧大脑中动脉复制局灶性脑缺血模型，造模成功后，用天麻素注射液腹腔注射10mg/kg ，1次/d ，持续14d ；假手术组和模型组大鼠不予治疗。
治疗结束后，测定大鼠肺组织湿/干重比值，HE 染色检测肺组织病理变化，ELISA 法检测动脉血液中炎性因子（IL-10、TNF-α）的含量，Western blot 检测肺组织NF-κB p65、TNF-α的表达，免疫组织化学染色法及蛋白质免疫印迹试验检测肺组织NGF 、TrkA 的表达。
结果与正常组和假手术组相比，模型组呈现出明显的炎症性肺损伤病理表型，肺湿/干重比值增加（P <0.01），动脉血中TNF-α浓度增高（P <0.01），肺组织内NF-κB p65（P <0.01）、TNF-α（P <0.01）、NGF （P <0.05）和TrkA （P <0.05）蛋白表达水平上升；与模型组相比，天麻素治疗组肺部炎性病理变化减轻，肺湿/干重比值降低（P <0.05），动脉血中TNF-α浓度降低（P <0.01），IL-10浓度增高（P <0.01），肺组织内NF-κB p65和TNF-α蛋白表达水平降低（P <0.05），肺组织内NGF 和TrkA 蛋白表达水平增加（P <0.05）。
不同麻醉下电针对全脑缺血再灌注大鼠脑MDA、SOD及PPAR-γmRNA表达的影响
电针
能使脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中的 Ｓ Ｄ含量明显增加 ， Ｏ 而丙泊酚可以显著降低 Ｐ Ａ — Ｒ Ｐ Ｒ ｍ ＮＡ表达及 ＭＤ Ａ含量 ， 具有 氧
Ｅｆ ｅ ｔ ｆ ｅ ｅ ｔ ０ ｃ ｐ ｎｃ ｕ ｅ ｏ ｅ ｅ ｓ ｏ ＯＤ ｆ ｃ ｓ ０ Ｉｃ ｒ ａ ｕ ｕ ｔ ｒ ｎ ｌ ｖ ｌ ｆＳ
雄性 Ｓ Ｄ大 鼠 ４ ０只 ， 机 分 为 ５组 ， ： 随 即 水
达 的 变 化 ， 不 同麻 醉 下 电针 对 ＭＤ Ｓ Ｄ及 Ｐ ＡＲｍ ＲＮ 以及 Ａ、 Ｏ Ｐ — Ａ表 达 的 影 响 。 方 法
合氯醛 ＋脑缺血一 再灌 注组 （ Ａ组 ）水合氯醛 ＋脑缺血— 、 再灌注 十电针组 （ Ｂ组 ）丙泊酚 ＋脑缺血一 、 再灌注 组（ Ｃ组） 丙泊酚 ＋脑 、 缺血一 再灌注 ＋电针组 （ Ｄ组 ）假手术组 （ 、 Ｅ组 ）每组 ８只。采用四血管阻塞法建立大鼠全脑缺血模 型， ， 于再灌流开始后 ， 和 Ｂ组 Ｄ组 电针“ 百会 ”命 门” 足三里 ” ， “ 和“ 穴 电针参数 ： 频率 ３ －５ ｚ ０ ０Ｈ ，问断疏密波 ， 电流强度 １ｍＡ，以局部肌 肉轻微震颤 为度 ， 时
ＴＩ ＡＮ ｅ —ｑｉ ｎ，ＣＵＩＳ Ｗ ｉ ａ ｕ—ｙ ｎ ａ ｇ，ＹＡＯ ｎｇ—ｚ ｅ Ｆｅ ｈ ｎ，ＬＩ Ｂａ ｏ—ｇ ｉ ｕ
（ ．Ｎａ ｊ ｇ Ｍｅ ｉ ｌ ｎ ｖｒｉ Ｃ ， ｎ ｉｇ Ｊａ ｇｕ， １ ０ ９ １ ｎ ｉ ｄｃ ｉｅｓ ｙｏ ｎ ａ Ｕ ｔ ｆＴ Ｍ Ｎａ ｊ ， ｉｎ ｓ ２ ０ ２ ； ｎ
ｄａ ｅ ｙ ｅＭＤＡ）ａｄ Ｐ Ａ 一 ７ Ｎ ｅｐｅ ｉｎ ｉ ｈ ｒｉ ｉ ｕｓｏ ａｓｗｉ ｅｅｒＩｉ ｉ ｄｈ ｄ（ ｌ ｎ Ｐ Ｒ ｍＲ Ａ ｘ ｒｓ ｏ ｔｅｂ ａ ｔ ｓｅ ｆｒｔ ｔ ｃｒｂａ Ｓ ｎ ｎ ｓ ｈ —
天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡的抑制作用
天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡的抑制作用聂晶;杜亮;陆远富;石京山【摘要】Objective To investigate the potential mechanisms of gastrodine on the focal cerebral ischemic reperfusion damage in rats. Methods The SD rats were administered with gastrodine by gavage once a day for 7 days. The animals were then subjected to right-middle cerebral artery occlusion for 2 h and reperfusion for 24 h. Brain tissues were stained with hematoxylin-eosin. The number of neuronal apoptosis was assessed by terminal oxynucleotidyl transferase mediated Dutp biotin nick end labeling(TUNEL). The Mrna level of caspase-3 was detected by Real time RT-PCR. Results Compared with the model group,gastrodine significantly attenuated the apoptosis and the expression of caspase-3 of rats(P<0. 05). Conclusion Gastrodine can improve the brain injury induced by focal cerebral ischemia-reperfusion in rats. The mechanisms appear to be partly due to the inhibition of apoptosis through the suppression of caspase-3 expression.%目的探讨天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用机制.方法采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h,再灌注24 h后取大鼠大脑组织进行HE染色观察病理改变,TUNEL法计数凋亡细胞,Real time RT-PCR检测胱天蛋白酶3(casepase-3)mRNA的表达.结果天麻素能明显改善中动脉闭塞所致局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织病理变化,减少细胞凋亡(P<0.01),降低caspase-3 mRNA的表达(P<0.05).结论天麻素可通过下调caspase-3 mRNA的表达减少大脑神经细胞凋亡,对缺血再灌注损伤大鼠脑组织发挥保护作用.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2012(041)018【总页数】3页(P1841-1842,后插2)【关键词】天麻属;脑缺血;再灌注损伤;细胞凋亡;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶【作者】聂晶;杜亮;陆远富;石京山【作者单位】遵义医学院药理学教研室,贵州遵义,563000;贵州省基础药理重点实验室,贵州遵义,563000;贵州省基础药理重点实验室,贵州遵义,563000;遵义医学院药理学教研室,贵州遵义,563000;贵州省基础药理重点实验室,贵州遵义,563000;遵义医学院药理学教研室,贵州遵义,563000;贵州省基础药理重点实验室,贵州遵义,563000【正文语种】中文缺血性脑血管病是一种常见病和多发病,是目前严重危害人类健康的主要疾病之一,因具高发病率､高死亡率､高致残率和高复发率等特点而引起国内外医学界的广泛关注与高度重视｡脑缺血再灌注后以神经元为主的坏死与细胞凋亡是脑损伤中重要的病理生理过程,其中细胞凋亡的重要作用日益受到重视｡抑制细胞凋亡,可以减轻脑梗死的体积,这已成为缺血性脑血管病的治疗靶点之一[1]｡既往研究发现天麻素可明显改善中动脉闭塞所致局灶性脑缺血大鼠的神经功能,明显缩小梗死面积,降低脑含水量,对大鼠脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用[2],因此,本研究拟在此基础上观察天麻素对大鼠凋亡诱导因子——胱天蛋白酶3(caspase-3)及神经细胞凋亡的影响,进一步探讨其作用机制｡1.1 实验动物､主要试剂及仪器 SD大鼠36只,雄性,体质量(250±10)g,清洁级,购自第三军医大学大坪医院动物中心[合格证号:SCXK(渝)2007-0005],颗粒饲料饲养,自由饮水,适应性喂养1周后进行实验｡天麻素购自西安冠宇生物技术有限公司(纯度:99.12%,批号:GY20080822);尼莫地平片购自山西亚宝药业集团股份有限公司(20毫克/片,批号:080510);RNA纯化试剂盒､Real time RT-PCR试剂盒,以及βactin和caspase-3引物均购自宝生物(大连)工程有限公司;原位末端标记细胞凋亡试剂盒由德国Boehringer Mannheim公司提供｡iMark通用酶标仪和Icycler IQ型Real time RT-PCR为美国BIO-RAD公司产品｡1.2 实验方法1.2.1 模型制备及给药将36只大鼠随机分为假手术组､模型组､天麻素低剂量组(15mg/kg)､天麻素中剂量组(30 mg/kg)､天麻素高剂量组(60mg/kg)及尼莫地平组(12mg/kg),每组6只大鼠｡各组均于手术前1周每日上午09:00灌胃给药,假手术组给予生理盐水｡采用大脑中动脉闭塞和再灌注的方法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型[2]｡1.2.2 HE染色观察脑组织病理形态大鼠缺血2h,再灌注24h后麻醉断头取脑,以视交叉前后两点冠状切片,片厚约4 mm,将脑切片放入40g/L甲醛溶液中固定｡常规梯度脱水,透明,包埋,浸蜡,切片(厚6μm),HE染色,中性树胶封片,显微镜下观察组织学变化｡1.2.3 TUNEL法检测细胞凋亡情况[3] 切片常规脱蜡至水,按试剂盒说明书操作,DAB显色2～5min,苏木素复染,封片｡于光镜下观察,TUNEL染色阳性并伴有核染色质浓聚,核染色质靠边凝集或凋亡小体形成者为凋亡细胞;TUNEL染色阳性但呈弥漫着色为坏死细胞;TUNEL染色阴性为正常细胞｡光镜下随机选取每张切片梗死周边组织5个视野(×400)计数凋亡细胞数｡1.2.4 Real time RT-PCR检测按照说明书提取总RNA并纯化,用 Real-time RT-PCR试剂盒检测脑组织中casepase-3 mRNA的表达｡各基因引物序列,β-actin,上游:5′-TGG CAC CCA GCA CAA TGA A-3′,下游:5′-CTA AGT CAT AGT CCG CCT AGA AGC A-3′;caspase-3,上游:5′-AGG TCC AAG TTG CGC GTT TC-3′,下游:5′-CAG AAT GAG GAC TGG GTG AG-3′;总反应体积为15μL｡反应条件为:95℃,10min→(95℃10s,60℃1min)×40个循环｡目的基因的相对表达量以目的基因/内参基因表示｡1.3 统计学处理计量资料以±s表示,采用单因素方差分析进行组间检验,两组间样本均数比较采用t检验,以P0.05为差异有统计学意义｡2.1 天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织病理改变的影响假手术组脑组织形态结构基本正常,细胞密度大;模型组缺血侧脑组织结构较疏松,间质水肿,有散在空腔形成,且出现不同程度的神经元变性､坏死,细胞间隙增宽,神经元胞核形态不规则,细胞核固缩;天麻素低､中､高剂量组及尼莫地平组脑组织形态结构大致正常,病理改变轻微,坏死细胞和凋亡细胞减少,海马区可见锥体细胞,见插Ⅱ图1｡2.2 天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织凋亡细胞的影响模型组大鼠可见大量TUNEL染色阳性的神经细胞,天麻素高､中剂量组和尼莫地平组能明显减少脑缺血再灌注损伤大鼠TUNEL染色阳性细胞数(P 0.01),见表1｡2.3 天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织caspase-3mRNA表达的影响与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中caspase-3mRNA表达增加(P0.05);与模型组比较,天麻素中､高剂量组和尼莫地平组caspase-3mRNA表达降低(P0.05),见表2｡脑缺血再灌注损伤后缺氧､水肿和神经代谢产物释放等病理改变引起的继发性损伤是影响缺血性脑血管病患者预后的关键因素｡缺血半暗带内神经元和胶质细胞的凋亡是反映继发性损伤程度的重要标志,由于这些细胞仍然保留了部分蛋白合成能力并表达某些相关基因,如能及时给予保护治疗,该部位的能量代谢及神经组织则可能被挽救｡否则就转为不可逆损伤,使梗死灶扩大｡因此,治疗重点在于挽救缺血半暗带神经组织,即如何保护受损神经组织,减少细胞凋亡[4]｡凋亡是细胞自然杀伤过程,是保证细胞正常生长和维持稳态的重要条件,其目的是去除各种异常､受损和癌变的细胞,在脑缺血再灌注损伤后,神经元凋亡显著增加｡在脑缺血过程中,缺血半暗带区的多种病理生理过程,包括自由基､钙离子超载､炎性反应及线粒体损伤都可以触发细胞凋亡[1]｡本研究中HE染色及TUNEL结果均显示模型组凋亡细胞显著增多,而天麻素能够抑制细胞凋亡,凋亡可能决定梗死灶的体积,既往研究中发现天麻素可显著减少脑缺血再灌注损伤大鼠的脑梗死灶面积,提示其减少梗死灶面积可能与其抑制细胞凋亡有关｡细胞凋亡过程可以大致分为起始期､执行期和死亡期3个时期｡(1)起始期:细胞通过受体等途径,接受内外环境发出的凋亡信号,将其传递给执行器的过程;(2)执行期:caspase-8､caspase-9､caspase-10激活,通过蛋白酶组成的级联反应激活效应子——caspase-3､caspase-6､caspase-7,后者通过激活DNA酶等导致DNA 的断裂;(3)死亡期:DNA破坏的不断增加,导致细胞进入不可逆的死亡｡从理论上讲,凡能阻断细胞凋亡信号传递通路的每一个环节均有可能影响细胞凋亡的发展[5]｡caspase参与细胞凋亡的信号传导,其中caspase-3是凋亡过程中最重要的蛋白酶,是细胞凋亡蛋白酶级联反应的必经之路｡脑缺血后,神经元caspase-3mRNA表达增加､酶活性增强,本研究中模型组大鼠脑组织中caspase-3mRNA表达明显增高,而天麻素可降低caspase-3mRNA的表达,抑制神经细胞的凋亡｡综上所述,天麻素可能是通过下调caspase-3的表达减轻脑组织细胞凋亡,从而缩小脑梗死面积,对缺血再灌注大鼠脑组织发挥保护作用｡【相关文献】[1] 陈东丽,陈旭东,夏翠英.天麻对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(3):148-150.[2] 聂晶,杜亮,黄燮南,等.天麻素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用[J].华西药学杂志,2010,25(4):423-425.[3] 王伟,景桂霞,赵新京,等.瑞芬太尼预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响[J].西安交通大学学报:医学版,2011,32(1):128-130.[4] 吴中亮,任宁.天麻素注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响[J].解放军药学学报,2008,24(3):204-207.[5] 贾士奇,王军,张红霞,等.生姜对局灶性脑缺血大鼠海马神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(3):163-166.。
天麻素对缺血再灌注损伤星形胶质细胞的保护作用及其对一氧化氮合成酶活性的影响
天麻素对缺血再灌注损伤星形胶质细胞的保护作用及其对一氧化氮合成酶活性的影响3①胡建军 洪庆涛 唐一鹏 孙承琳(北京中医药大学中西医结合研究所 北京100029)Ξ摘要:观察天麻素对脑缺血再灌注损伤星形胶质细胞胶原纤维酸性蛋白(GFA P)表达、乳酸脱氢酶(L D H)漏出量以及一氧化氮合成酶(N OS)活性的影响。
结果:天麻素大、小剂量组GFA P纤维样改变减轻,强阳性反应细胞数减少;L D H漏出量下降;N OS活性减弱。
提示:天麻素对模拟脑缺血再灌注损伤星形胶质细胞有良好的保护作用,其途径之一可能是通过抑制N OS活性的反应性增强来实现的。
关键词:天麻素;细胞培养;星形胶质细胞;胶原纤维酸性蛋白;乳酸脱氢酶;一氧化氮合成酶中图分类号:R285.5 星形胶质细胞(astrocyte)是脑内数目最多的细胞,但长期以来未曾受到足够的重视;近年研究表明,星形胶质细胞可表达表面分子并可分泌多种营养因子和细胞因子;星形胶质细胞与神经元的交互作用,对于中枢神经系统(CNS)内环境稳态、可塑性以及神经信息传递有相当大的影响。
在脑缺血再灌注引起的迟发性神经元死亡(delayed neuronal death,DND)的发生及药物治疗引起的修复过程中,星形胶质细胞本身的变化及其参与的环节与作用,非常值得重视。
本实验选取体外培养的星形胶质细胞为研究对象,建立其体外脑缺血再灌注损伤模型;观察此种损伤导致其细胞内GFAP、LDH漏出量的变化、NOS活性的变化以及天麻素对这些变化的干预,为进一步探讨缺血性脑损伤的病理机理和天麻素的临床应用提供更多的实验依据。
1 材料与方法1.1 动物与试剂新生2～3d Wistar大鼠,雌雄兼用,由中国中医研究院医学实验动物中心提供。
DM EM培养基,美国AB I公司;尼莫地平,德国BA YER公司; GFAP一抗(兔抗鼠)及ABC盒,美国Santa Crutz公司。
天麻素,北京中医药大学中药学院药化室提供。
天麻素注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响
天麻素注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响吴中亮;任宁【期刊名称】《解放军药学学报》【年(卷),期】2008(024)003【摘要】目的研究天麻素注射液对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡、脑组织梗死体积的影响.方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,TUNEL及TIC染色法分别检测凋亡细胞数目及脑梗死体积.结果天麻素注射液组再灌注后24h凋亡细胞数目明显低于对照组(P<0.05),主要出现于大脑皮质及尾壳核病变中心区的周围,且脑梗死体积较对照组明显缩小(P<0.05).结论天麻素注射液能显著抑制缺血半暗带细胞凋亡的发生,阻止脑梗死范围进一步扩大,对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,可能的作用机制是通过拮抗谷氨酸而阻断缺血再灌注后细胞凋亡.【总页数】4页(P204-207)【作者】吴中亮;任宁【作者单位】第四军医大学西京医院神经内科,陕西,西安,710032;第四军医大学西京医院综合诊疗中心,陕西,西安,710032【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.CoQ10预处理对高血糖大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡及相关蛋白表达的影响 [J], 贺岭风;马贤;常越;马艳梅;郭永真;王娟;刘红梅;张玉玲2.七氟烷预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤时\r细胞凋亡以及能量代谢的影响 [J], WANG Zeng-tao;ZHANG Jie;GUO Tao3.七氟烷预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤时细胞凋亡以及能量代谢的影响 [J], 王增涛; 张洁; 郭涛4.银杏叶对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡、bcl-2和Bax表达的影响 [J],张春军; 董琦; 董凯5.腺苷预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-3的表达及细胞凋亡的影响 [J], 庞艳利; 许二妮; 尉娜; 殷闯; 谭军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
天麻素药理作用研究进展
天麻素药理作用研究进展作者：秦晶晶钱慧琴秦影影来源：《科教导刊·电子版》2017年第31期摘要天麻素（gastrodin，gas）是天麻提取物种的一种最重要的有效成分，天麻素又称天麻苷。
其分子式为；C13H18O7，化学名称：4-羟基苯-b-D吡喃葡萄糖苷。
天麻素具有镇静、镇痛、抗惊厥、抗癫痫，降压，抗血小板，增加脑血流量，改善椎基底动脉、小脑前下动脉、小脑后下动脉、迷路动脉及内耳供血不足，保护神经细胞，促进心肌细胞能量代谢的功能。
临床应用有：治疗椎-基底动脉供血不足；治疗缺血性卒中；治疗血管神经性头痛；治疗眩晕；治疗高血压病；治疗糖尿病周围神经病变；治疗顽固性癫痫；治疗前庭神经炎；治疗中风认知障碍；治疗脑萎缩。
关键词天麻素药理作用中图分类号：R285 文献标识码：A1神经细胞的保护作用薛柳华等发现天麻素可明显降低神经细胞死亡率，减少乳酸脱氢酶的漏出。
天麻素可拮抗兴奋性氨基酸神经毒性，具有对谷氨酸致培养皮层神经细胞损伤的保护作用。
聂晶研究发现天麻素能改善中枢闭塞所致局灶性脑缺血大鼠的神经功能，明显缩小梗死面积，降低脑含水量，提高脑组织内Na+-K+-ATP酶和超氧化歧化酶（SOD）的活性，降低丙二醛（MDA）含量。
天麻素对大鼠脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用。
曾祥慧研究发现天麻素可以明显减少脑缺血造成的脑水肿范围，降低神经行为得分，可以抑制缺血导致的海马区组织的谷氨酸含量的升高，调节兴奋性/抑制性氨基酸神经递质的平衡。
天麻素可显著地抑制缺氧导致的细胞内Ca2+的升高和NO的大量产生。
2抗惊厥、抗癫痫作用沈道修研究发现预先注射天麻浸膏具有明显的对抗戊四氮阵挛性惊厥作用，且小鼠强直性惊厥的发作及死亡率亦见减少。
邓士贤等发现天麻素及其苷元能延长戊四氮阵挛性惊厥的潜伏期。
柴慧霞等在合成天麻素对抗马桑内酯所致家兔癫痫的初步观察中发现，天麻素各剂量组均有延长癫痫发生的潜伏期、减少大发作的程度、缩短大发作的时程、加快其恢复过程和降低死亡率的趋势。
天麻素注射液对慢性缺血性大鼠生物钟基因表达的影响
ｗｉ ｔ ｈ ｃ ｈ ｒ ｏ ｎｉ ｃ ｃ ｅ ｒ ｅ ｂｒ ａ ｌ ｉ ｓ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ａ
Ｑ Ｉ Ｎ Ｂ ｉ ｎ ｇ ， Ｒ Ｅ Ｎ Ｆ ｅ ｎ ｇ ， ＹＡ Ｎ Ｇ Ｓ ｈ ｕ— ｌ ｉ ， Ｄ Ｅ Ｎ Ｇ Ｙ ｕ ｎ—ｌ ｏ ｎ ｇ
Ｐｓ ｙ ｃ ｈ ｏ ｓ ｏ ｍａ ｔ ｉ ｃ Ｈｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ，ｔ ｈ ｅ Ｔ ｈ ｉ ｒ ｄ Ｘｉ ａ ｎ ｇ ｙ ａ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ，Ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｌ Ｓ ｏ ｕ ｔ ｈ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ，Ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｓ ｈ ａ，Ｈｕ ｎ ａ ｎ ４ １ ０ ０ １ ３，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
后， 灌 胃给药 ２ １ ｄ ， 测量各组 大 鼠的体重 ； Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ 和Ｒ Ｔ—Ｐ Ｃ Ｒ法分别检 测大 鼠松 果体生 物钟基 因 Ｃ ｌ ｏ ｃ ｋ 、 Ｂ ｍａ ｌ ｌ 和Ｐ ｅ ｒ １的蛋 白和 ｍＲ Ｎ Ａ表达水平 。结果 各 组大鼠体重手术前期差异无统计学意 义（ Ｐ＞ ０ ． ０ ５ ） ， 术后 ７ ｄ ， 模型对 照组 与假 手术 组差异有统计学意义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。给药结束后模型对照组较假手 术组 和天麻素组 体重 明显 降低 ， 假 手术组 与 天麻 素组 差异无统计学意义 （ Ｐ＞ ０ ． ０ ５ ） 。慢性 脑缺血下调大 鼠松果体 Ｃ ｌ ｏ ｃ ｋ基因 、 Ｐ ｅ ｒ ｌ 基 因表达 ， 对 Ｂ ｍ ａ ｌ ｌ 基 因表达无 影 响。给予天麻素后 ， 与模 型对照组相 比， Ｃ ｌ ｏ ｃ ｋ基 因表 达水 平上 调 ； 与假手 术组 相 比 ， Ｂ ｍ ａ ｌ ｌ基 因表 达水平 下降 ， Ｐ ｅ ｒ ｌ 基 因表达未见显著差异 。结论 天麻 素注射液可能通过调节 松果体 生物钟 基因的表达 ， 达 到治疗慢性脑缺 血继发 的睡
天麻治疗脑缺血再灌注损伤的研究进展
天麻治疗脑缺血再灌注损伤的研究进展作者：张光云童英杨丽萍来源：《中国民族民间医药·下半月》2020年第05期【摘要】脑缺血再灌注损伤在临床上属于常见病，因其发病机制复杂，目前在治疗上较为棘手，伴随着致残率和致死率的升高，脑缺血再灌注损伤已成为医学治疗的一大难题。
天麻为云南的道地药材，民间认为服用天麻可以治疗头痛、眩晕、癫痫、中风、偏瘫等多种心脑血管相关的疾病。
随着医学技术的不断进步，天麻的有效成分被不断分离出来，从不同溶剂的提取物到单体，天麻在脑血管疾病治疗上的优势已越来越突出。
文章通过知网、万方、sciencedirect收集整理国内外近20年来关于天麻在脑缺血再灌注损伤的相关文献，以期为天麻的进一步研究提供理论参考。
【关键词】脑缺血再灌注损伤;天麻;提取物;化合物【中图分类号】R285.6 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2020）10-0069-06Abstract：Cerebral ischemia reperfusion injury is a common disease in clinic， and its pathogenesis is complicated， leading to the treatment is difficult at present. With the increase of disability rate and mortality， cerebral ischemia reperfusion injury has become a difficult problem in medical treatment. Gastrodia elata Blume is a kind of genuine medicinal material in Yunnan. It is believed that Gastrodia elata Blume can be used to treat headache， vertigo， epilepsy， stroke，hemiplegia and other cardiovascular and cerebrovascular diseases. With the continuous progress of medical technology， the effective components of Gastrodia elata Blume have been separated， from the extracts of different solvents to monomers， the advantages of Gastrodia elata Blume in the treatment of cerebrovascular diseases have become more and more prominent. In order to provide a theoretical reference for further study of Gastrodia elata Blume， this paper collected and sorted out the literature about Gastrodia elata Blume in cerebral ischemia reperfusion injury in recent 20 years at home and abroad through HowNet， Wanfang and ScienceDirect.Keywords：Cerebral Ischemia Reperfusion Injury; Gastrodia elata Blume; The Extracts; Monomers脑缺血再灌注损伤（Cerebral Ischemia Reperfusion Injury，CIRI）是指脑组织缺血后一定时间恢复血液供应，出现的更加严重的脑机能障碍现象，是在脑缺血基础上发生的病理过程。
天麻素对脑缺血大鼠纹状体BDNF、IL-6表达的影响
◇基础研究◇摘要目的：研究天麻素对脑缺血大鼠纹状体脑源性神经营养因子（BDNF ）和白细胞介素-6（IL-6）表达的影响，探讨天麻素治疗脑缺血的可能机制。
方法：大鼠随机分为4组：正常组、假手术组、模型组、天麻素组，每组10只。
大脑中动脉栓塞法（MCAO ）造模成功后，天麻素组腹腔注射天麻素注射液10mg/kg ，1次/d ，连续14d ；Nissl 染色观察纹状体神经元的病理变化；免疫组化检测BDNF 、IL-6蛋白在纹状体的阳性表达情况；Western blot 检测BDNF 、IL-6蛋白在纹状体的表达水平。
结果：Nissl 染色结果显示：正常组和假手术组纹状体神经元结构清晰完整，细胞排列紧密。
模型组较假手术组，细胞数量明显减少（P <0.01），出现明显的胞体萎缩情况，细胞排列疏松。
天麻素组较模型组Nissl 阳性神经元数量增多（P <0.01），细胞形态也有明显改善。
免疫组化和Western blot 结果一致：正常组与假手术组BDNF 、IL-6蛋白表达差异无统计学意义（P >0.05）。
与假手术组比较，模型组缺血侧纹状体BDNF 蛋白表达水平降低（P <0.01），IL-6蛋白表达水平升高（P <0.05，P <0.01）；与模型组比较，天麻素组缺血侧纹状体BDNF 蛋白表达水平上升（P <0.05，P <0.01），IL-6蛋白表达水平下降（P <0.05，P <0.01）。
结论：天麻素对脑缺血导致的纹状体损伤具有显著的保护作用，其机制可能与上调抗炎因子BDNF 、下调促炎因子IL-6有关。
关键词脑缺血；纹状体；天麻素；BDNF ；IL-6中图分类号：R965.2文献标志码：A文章编号：1009-2501(2024)04-0440-07doi ：10.12092/j.issn.1009-2501.2024.04.012脑卒中是全世界第三大死因，其中缺血性脑卒中占脑卒中的比例高达80%［1］。
天麻总酚抗大鼠脑缺血再灌注损伤的转录组学分析及实验验证
通过转录组学分析，我们发现冠心宁可以显著抑制与脑缺血再灌注损伤相关 的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡等生物过程。此外，冠心宁还可以上调与神经 保护、细胞再生和修复相关基因的表达，如BDNF、NGF、IGF-1等。
这些结果表明，冠心宁可以通过调控转录组学水平，保护神经细胞免受缺血 再灌注损伤。
在实验过程中，我们还发现冠心宁可以显著降低小鼠的死亡率，减轻神经功 能缺损，改善学习和记忆能力。这些结果表明，冠心宁对脑缺血再灌注损伤具有 明显的保护作用，具有临床应用价值。
总之，本研究通过转录组学方法揭示了冠心宁抗小鼠脑缺血再灌注损伤的作 用机制。结果表明，冠心宁可以通过调控炎症反应、氧化应激和细胞凋亡等生物 过程，保护神经细胞免受缺血再灌注损伤。这些发现为临床应用冠心宁治疗脑缺 血再灌注损伤提
供了理论依据，为中医药治疗神经系统疾病的研究提供了新的思路和方法。
然而，本研究仍存在一定的局限性。首先，我们在研究中未能详细探讨冠心 宁对不同类型神经细胞的保护作用，这需要进一步的研究。其次，虽然我们已经 揭示了冠心宁的部分作用机制，但仍有可能存在其他未知的作用途径，需要后续 深入研究。
TP对这些通路的调节可能是其发挥保护作用的机制之一。然而，转录组学分 析的结果仅能反映基因转录水平的变化，不能直接反映蛋白质的表达水平。因此， 后续研究可以通过蛋白质组学等方法进一步探讨TP对CIRI的保护作用及其机制。
此外，本研究仅了TP对CIRI的保护作用及其潜在机制，而对其作用的具体靶 点仍需深入研究。
1、天麻总酚对大鼠脑组织的影 响
通过转录组学分析发现，TP组与模型组比较，差异表达基因共个，其中上调 基因个，下调基因个。对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析，结果显示TP主要 通过调节细胞凋亡、氧化应激、炎症反应等通路发挥保护作用（图1）。
天麻素对局灶脑缺血再灌注海马中BDNF及TrkB的影响
天麻素对局灶脑缺血再灌注海马中BDNF及TrkB的影响贾军乐;杨霄彦;郝春光【期刊名称】《疾病监测与控制》【年(卷),期】2013()2【摘要】目的探讨天麻素对局灶性脑缺血再灌注损伤的海马脑源性神经营养因子及其受体TrkB含量变化的影响。
方法 120只SD大鼠体重200～220g,随机分为三组:假手术组(n=40),局灶脑缺血再灌注组(n=40)和天麻素治疗组(n=40)。
线栓法制备大脑中动脉梗阻(MCAO)模型,药物组在脑缺血再灌注即刻和12h腹腔注射天麻素,模型组和假手术组均注射等量生理盐水。
分别在缺血再灌注2h、4h、6h、12h和24h处死动物,运用RT-PCR技术检测缺血侧海马组织内BDNF和TrkB的mRNA的表达变化。
结果再灌注损伤后,损伤侧海马组织内BDNF和TrkB的mRNA表达均增高。
在天麻素治疗组中BDNF和TrkB的mRNA于再灌注2h上升,4h达高峰。
结论脑缺血后损伤侧海马神经元内BDNF和TrkB的mRNA含量增多,可能有利于受损神经元的修复。
【总页数】3页(P76-78)【关键词】局灶性脑缺血再灌注;天麻素;脑源性神经营养因子;TrkB【作者】贾军乐;杨霄彦;郝春光【作者单位】包钢医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R322.81【相关文献】1.山茱萸环烯醚萜苷对局灶性脑缺血模型大鼠BDNF及其受体TrkB表达的影响[J], 姚瑞芹;张丽;张兰;王文;艾厚喜;李林2.大黄酚对局灶性脑缺血再灌注小鼠脑组织p-CREB、BDNF和p-STAT3的影响[J], 房亚兰;黄语悠;赵咏梅;李锦程;段云霞;高利;罗玉敏3.人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血再灌注大鼠学习记忆及海马BDNF表达的影响[J], 唐舸航;刘乐吟;向彦霖;陈祖华;黄俊4.桑芪首乌片对局灶性脑缺血再灌注大鼠BDNF及其受体TrkB表达的影响 [J], 顾力华; 陈奇刚; 陆家龙; 魏丹霞; 杨仁华; 陈鹏; 司林阁5.氧化苦参碱对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤BDNF及其受体TrkB表达的影响[J], 付燕燕;段静雨;段昌柱因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
天麻素对脑缺血大鼠缺血侧额叶皮质中RhoA和ROCK-2蛋白表达的影响
天麻素对脑缺血大鼠缺血侧额叶皮质中RhoA和ROCK-2蛋白表达的影响李芹;殷姿;刘江品;邱金明;胡郭;刘敏【期刊名称】《右江民族医学院学报》【年(卷),期】2022(44)5【摘要】目的研究天麻素对脑缺血大鼠缺血侧额叶皮质Ras同源基因家族成员A(RhoA)和Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK-2)表达的影响。
方法大脑中动脉阻塞法(MCAO)造模后,天麻素组腹腔注射天麻素制剂治疗,其他组不加干预。
采用Nissl染色观察缺血侧额叶皮质神经细胞变化情况;免疫组化和Western blot检测缺血侧额叶皮质中RhoA、ROCK-2蛋白的表达情况。
结果与假手术组相比,模型组缺血侧额叶皮质区细胞胞体明显萎缩,胞质减少,部分胞核固缩;Nissl染色细胞数减少(P<0.001);RhoA和ROCK-2蛋白表达增加(P<0.05)。
与模型组相比,天麻素组缺血侧额叶皮质细胞萎缩程度减轻;Nissl染色细胞数增加(P<0.05);RhoA和ROCK-2蛋白表达减少(P<0.05)。
结论天麻素可对脑缺血后缺血侧额叶皮质发挥保护作用,其机制可能与抑制RhoA、ROCK-2蛋白表达有关。
【总页数】6页(P638-643)【作者】李芹;殷姿;刘江品;邱金明;胡郭;刘敏【作者单位】皖南医学院临床医学院;皖南医学院解剖教研室【正文语种】中文【中图分类】R743.3【相关文献】1.慢性脑缺血大鼠空间学习记忆能力与前额叶皮质突触相关蛋白-25表达的相关研究2.电针结合天麻素增加局灶性脑缺血大鼠额叶皮质生长相关蛋白-43以及突触素的免疫组化表达3.清脑益元汤对脑缺血损伤大鼠缺血侧皮质区神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响4.天麻素联合电针调节局灶性脑缺血大鼠额叶皮质GFAP和NSE的表达5.滋补肝肾方药对局灶性脑梗死大鼠健侧脑组织RhoA、ROCK-2表达的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
天麻素对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用研究
天麻素对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用研究李文君;徐振田;索大琴;谢安智【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2014(000)005【摘要】目的探讨天麻素(Gastrodine,Gas)对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用及机制.方法线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血2h后再灌注.天麻素(5,10,20 mg/kg)再灌注同时腹腔给药,再灌注后24 h,测定大鼠神经功能缺失评分和脑梗死体积,伊文思蓝法观察血脑屏障破坏程度,Western blot检测梗死半暗带皮层组织炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的蛋白表达.结果天麻素(10,20 mg/kg)能改善大鼠脑缺血后神经功能缺失,减小脑梗死体积,降低血脑屏障的通透性.天麻素(20 mg/kg)对梗死半暗带皮层组织TNF-α表达的抑制率为24％,对IL-1β表达的抑制率为34％,对IL-6表达水平的抑制率为38％.结论天麻素可降低血脑屏障的通透性,其通过减低炎症反应而对局灶性脑缺血损伤发挥保护作用.【总页数】4页(P40-43)【作者】李文君;徐振田;索大琴;谢安智【作者单位】厦门大学医学院基础医学部,福建厦门361000;厦门大学医学院基础医学部,福建厦门361000;厦门大学医学院基础医学部,福建厦门361000;厦门大学医学院基础医学部,福建厦门361000【正文语种】中文【中图分类】R285【相关文献】1.黄精丸对大鼠大脑局灶性脑缺血损伤保护作用研究 [J], 周志军;肖移生2.正常大鼠、高血压大鼠局灶性脑缺血损伤及764-3的保护作用 [J], 卫国;陈飞松3.蒙药赞旦-3味对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用的研究 [J], 钱立娜;张鸿沛;李月玲;杨玉梅4.黄精丸对大鼠大脑局灶性脑缺血损伤保护作用研究 [J], 周志军;肖移生5.红霉素预适应对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用及其机制初步研究 [J], 李光宇;张伟辛;陆威成;许文龙;韩尚辰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
天麻超微粉对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用
天麻超微粉对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用陶陶;曾可斌;胡常林【期刊名称】《中医杂志》【年(卷),期】2005(46)4【摘要】目的:探讨天麻超微粉对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。
方法:采用大鼠脑缺血2小时再灌注24小时的局灶性缺血再灌注模型。
用 HE 染色、2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色、免疫组化方法分别观察使用天麻超微粉后脑片的病理改变、脑梗塞的体积和神经细胞凋亡相关蛋白 Bcl-2、Bax 表达的变化。
结果:(1)各组脑梗塞体积比较:天麻超微粉能缩小脑梗塞的体积,其低、中、高剂量组与缺血组相比差异均有显著性(P<0.05或P<0.01);(2)HE 染色结果:天麻超微粉低、中、高剂量组缺血半球纹状体残存细胞百分率与缺血组相比差异均有显著性(P<0.01);(3)各组 Bcl-2/Bax 比值比较:缺血组与假手术组相比差异有显著性(P<0.01);天麻超微粉低、中、高剂量组与缺血组相比差异均有显著性(P<0.01)。
结论:天麻超微粉具有抗脑缺血再灌注损伤的神经保护作用,其作用可能与调控凋亡相关蛋白 Bcl-2、Bax 的表达有关。
【总页数】3页(P294-296)【关键词】神经保护作用;超微粉;天麻;蛋白Bcl-2;Bcl-2/Bax;抗脑缺血再灌注损伤;缺血再灌注模型;免疫组化方法;凋亡相关;大鼠脑缺血;Bax表达;脑梗塞体积;显著性;高剂量;HE染色;病理改变;神经细胞;小脑梗塞;0.05;染色结果;相比;局灶性【作者】陶陶;曾可斌;胡常林【作者单位】重庆医科大学附属第二医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R743.31;R282.71【相关文献】1.天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡的抑制作用 [J], 聂晶;杜亮;陆远富;石京山2.天麻及电针对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用 [J], 徐坚;陶陶;何燕;唐筑灵3.川芎天麻液对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 [J], 张霄峰;王慕一;王玉华;孙庆华4.天麻酯溶性酚性成分对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用 [J], 李秀芳;孙衍鲲;张维明;段小花;代蓉;林青5.天麻超微粉与普通粉对大鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的研究 [J], 陶陶;徐坚;董佑忠;黄能慧;李玲;李诚秀因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
天麻素对新生大鼠缺氧缺血合并低血糖脑损伤影响的研究
天麻素对新生大鼠缺氧缺血合并低血糖脑损伤影响的研究正常生理条件下，葡萄糖是维持脑代谢活动的重要能源之一，尤其对胎儿脑发育脑代谢活动至关重要。
围产期缺氧缺血，易发生新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE），一旦发病易导致新生儿死亡和神经系统的后遗症，糖代谢紊乱是新生儿缺氧缺血对代谢的重要影响之一，严重时均可造成脑损伤。
目前葡萄糖对缺氧缺血脑损伤的作用日益受到关注，自20世纪80年代起国外学者先后对新生儿低血糖与脑损伤进行研究[1]，Lucas等学者的回顾性研究提示，新生儿低血糖可导致神经系统损害[1]。
本实验拟探讨缺血缺氧合并低血糖情况下，天麻对脑组织的影响，探讨脑能量衰竭方面的发病机制、脑缺血缺氧损伤程度等，新生儿缺氧缺血性脑病合并低血糖与细胞凋亡有关，寻找能阻断多种发病环节的药物，寻求对细胞凋亡有抑制作用的安全有效药物，开发传统中药对治疗本病的基础数据是急需解决的问题。
中药对脑组织的作用诸见报道[2]。
天麻作用及现代中医药学在活血化瘀、抗脂质过氧化、清除自由基、减轻脑水肿等方面进行研究，并得到肯定结果。
本研究采用新生大鼠缺血缺氧合并低血糖模型，用天麻素进行干预，观察缺氧缺血合并低血糖后脑细胞凋亡（apoptosis）及脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）含量的变化，探讨天麻素对缺血缺氧合并低血糖脑组织的保护，为临床应用提供有效的实验依据。
材料与方法一、材料：7日龄新生wistar大鼠80只，体重为8-12克，无性别选择，由延边大学医学部动物科提供。
天麻素注射液Gastrodin Injection)系广东中山市三才医药集团有限公司产品. 原位细胞凋亡检测试剂盒（TUNEL法）系ROCHEMOLECULARBIOCHEMICALS 产品，由神州迈新生物技术开发公司提供；SOD试剂盒、NO试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
随机将wistar大鼠分为4组，既正常组，模型组(HIBD)，HI前低血糖组，天麻素干预组二、模型制备[3]及给药方法除正常组外，其余大鼠乙醚吸入麻醉后取仰卧位，在手术板上四肢固定，颈中部切口，分离左侧颈总动脉，结扎，缝合，放回原饲养环境中。
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基础医学研究天麻素对脑缺血再灌注损伤大鼠相关基因mRNA表达的影响刘波1，丁利静2，李菲1，龚其海1(1．遵义医学院药理学教研室暨基础药理省部共建教育部重点实验室，贵州遵义563099;2．遵义医学院附属医院药剂科，贵州遵义563099)［摘要］目的观察天麻素对脑缺血再灌注大鼠脑组织中缺氧诱导因子－1α(HIF－1α)、血管内皮生长因子(VEGF)等基因mRNA表达的影响。
方法灌胃不同剂量天麻素7d，采用线栓法制备大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血(2h)再灌注损伤模型，造模成功后继续给药7d。
采用实时荧光定量PCR(Real Time RT－PCR)法检测缺血半暗带脑组织中HIF－1α、VEGF、BDNF、MMP2、eNOS、PPARα及SOD1mRNA的表达。
结果天麻素可上调HIF－1α、VEGF、BDNF、MMP2、eNOS、PPARα、SOD1mRNA 的表达(P＜0．05)，下调MMP2mRNA的表达(P＜0．05)。
结论天麻素可通过上调大鼠脑缺血半暗带HIF－1α、VEGF、BDNF、MMP2、eNOS、PPARα、SOD1mRNA的表达，下调MMP2mRNA的表达，产生抗局灶性脑缺血再灌注损伤的作用。
［关键词］天麻素;脑缺血再灌注;神经保护;大鼠;mRNA［中图法分类号］R972［文献标志码］A［文章编号］1000-2715(2016)02-0139-04Effect of Gastrodin on related genes mRNA expressions in cerebral ischemia－reperfusion ratsLiu Bo1，Ding Lijing2，Li Fei1，Gong Qihai1(1．Department of Pharmacology and Key Laboratory of Basic Pharamacology of Ministry of Education，Zunyi Medical University，Zunyi Guizhou563099，China;2．Department of Pharmacy，Affiliated Hospital of Zunyi Medical University，Zunyi Guizhou563099，China)［Abstract］Objective To explore the effects of Gastrodin(Gas)on the mRNA expressions of hypoxia inducible factor－1α(HIF－1α)，vascular endothelial growth factor(VEGF)and other genes in the ischemic penumbra of rats injured by ischemia(2h)－reperfusion(I/R)．Methods Rats were pretreated with Gas for7days fol-lowed by the focal cerebral I/R and then Gas was withdrawn7days after the I/R surgery．The mRNA expres-sions of HIF－1α，VEGF，brain derived neurotrophic factor(BDNF)，matrix metalloproteinase－2(MMP2)，endothelial nitric oxide synthase(eNOS)，peroxisome proliferators activated receptors(PPARα)and superoxide dismutase－1(SOD1)in the ischemic penumbra of rats were detected by Real Time RT－PCR．Results The ex-pressions of HIF－1α，VEGF，BDNF，MMP2，eNOS，PPARαand SOD1mRNA in Gas group increased obvi-ously(P＜0．05)，while the expression of MMP2mRNA in Gas group decreased obviously(P＜0．05)．Conclusion Gas has protective effects on I/R－injured rat brain by up－regulating the expressions of HIF－1α，VEGF，BDNF，eNOS，PPARαand SOD1and down－regulating the expression of MMP2．［Key words］Gastrodin;cerebral ischemia－reperfusion;neuroprotection;rat;mRNA脑缺血具有较高的发病率、致残率、死亡率及复发率的特点，因脑卒中而死亡的人数位居全球第3位，且呈逐年上升趋势［1］。
脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury，I/R)是脑缺血发病的重要病理生理环节，其病理生理学机制十分复杂，抑制I/R是降低脑缺血死亡率和致残率的关键。
然而，迄今为止，在治疗学上尚无理想的治疗I/R的药物。
故探索新的神经保护剂具有重要意义。
天麻为贵州省道地药材，具有“息风止痉，平肝潜阳，祛风通络”等功效。
天麻素(Gastrodine，第39卷第2期2016年4月遵义医学院学报Journal of Zunyi Medical UniversityVol．39No．2Apr．2016［基金项目］贵州省社会攻关计划项目(NO:黔科合SY字20083040);贵州省科学技术基金资助项目(NO:黔科合JZ字［2014］2015)。
［通信作者］龚其海，男，博士，教授，硕士生导师，研究方向:神经药理学，E-mail:gqh@zmc．edu．cn。
Gas )是天麻的主要活性成分之一，现在药理学研究表明天麻素能够通过血脑屏障，在中枢神经系统的作用较为活跃，具有治疗心脑血管疾病、头痛、眩晕、癫痫和肌强直等作用［2－3］。
既往实验研究显示天麻素可以通过抑制γ－氨基丁酸(γ－aminobu-tyric acid ，GABA )降解酶、GABA A 受体活性、抗炎、抗氧化、抑制凋亡等机制改善中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion ，MCAO )所致局灶性脑缺血大鼠的神经功能、明显缩小梗死面积并降低脑含水量，对大鼠I /R 有显著的保护作用［4－6］，但其保护机制尚不完全明了。
因此，本研究拟在大鼠急性局灶性I /R 损伤模型基础上，探讨天麻素对脑缺血半暗带缺氧诱导因子－1α(hypoxia inducible factor －1α，HIF －1α)、血管内皮生长因子(vascular en-dothelial growth factor ，VEGF )、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor ，BDNF )、基质金属蛋白酶－2(matrix metalloproteinase －2，MMP 2)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitricoxide synthase ，eNOS )、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferators activated receptors ，PPAR α)、超氧化物岐化酶－1(superoxide dismutase －1，SOD 1)mRNA 表达的影响，旨在进一步探索天麻素保护I /R 的机制，为临床治疗脑缺血性疾病提供实验和理论依据。
1材料与方法1．1主要实验试剂天麻素(Gas )，南京泽朗医药科技有限公司，纯度≥98%;尼莫地平，山东鲁抗医药集团赛特有限责任公司;MCAO 栓线，北京沙东生物技术有限公司;转录试剂盒，宝生物工程(大连)有限公司;GAPDH 、HIF －1α、VEGF 、BDNF 、MMP 2、eNOS 、PPAR α、SOD 1mRNA 引物，宝生物工程(大连)有限公司;其它均为市售分析纯产品。
1．2仪器实时荧光定量PCR 仪，美国BIO －RAD 公司;逆转录仪，德国Eppendorf 公司。
1．3实验动物清洁级SD 大鼠90只，雄性，体重250 280g ，由第三军医大学大坪医院动物中心提供［许可证号:SCXK (渝)2007－0005］。
光照/暗时间为12h /12h 循环，自由饮食、饮水。
1．4方法1．4．1实验分组大鼠分笼饲养，适应性喂养1周，随机分为6组，分别为假手术组(Sham )、模型组(Model )、Gas 低、中、高剂量(记为Gas －L 、Gas －M 、Gas －H ，剂量分别为15、30、60mg /kg )组、阳性药组(Nim ，12mg /kg )，每组15只。
分组前预防性灌胃给药7d ，假手术组、模型组给予等体积的双蒸水，制模成功后继续灌胃给药1周。
动物饲养及实验过程均遵守实验动物管理与保护准则。
1．4．2大鼠脑缺血再灌注模型的制备7%的水合氯醛(0．5mL /100g )腹腔注射麻醉，固定，参照Longa 等［7］的方法，并加以改进制备大鼠右侧大脑中动脉阻塞模型［8］。
分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉。
MCAO 栓线圆头端从颈总动脉插入颈内动脉18 20mm ，感到阻力即表明栓线圆头已到达大脑中动脉起始端。
2h 后，外拉栓线，实现大脑中动脉血液再灌。
假手术组只结扎血管，不插栓线。
1．4．3实时荧光定量PCR (Real Time RT －PCR )检测脑缺血半暗带组织中HIF －1α、VEGF 、BDNF 、MMP 2、eNOS 、PPAR α及SOD 1mRNA 的表达每组取6只大鼠按试剂盒说明进行大鼠脑缺血半暗带RNA 的提取，紫外分光光度计测量260、280nm 处吸光度(A )值，其A 260/A 280值为1．8 2．0。
采用TaKaRa 公司的RT 试剂盒，在Eppend of Mastercy-cler Gradient PCR 仪逆转录获得cDNA 。
以GAPDH 作为内参基因，通过iCycler iQ real －time PCR 仪进行扩增。
引物序列(见表1)。
以C t 值为统计参数依次计算下列数据:①C t average =(C t1+C t2+C t3)/3(重复管)，②dC t =C t average －中间值，③基因的表达=2^(－dC t )，④以目的基因的表达/内参基因的表达进行HIF －1α、VEGF 、BDNF 、MMP 2、eNOS 、PPAR α及SOD 1mRNA 的相对定量。