园艺植物遗传实验技能训练教程是园艺技术专业的主要专

前言
园艺植物遗传实验技能训练教程是园艺技术专业的主要专业基础课。

为使学生将课堂所学理论知识应用于实践，加深对理论知识的理解，增强学生解决实际问题的能力，根据专业要求安排不同的实训内容。

通过各种专业技能训练使学生能熟练掌握制片、压片、染色、固定技术，熟练使用电泳仪、显微镜、离心机等的使用方法，掌握常用的植物遗传分析技术，如：数理统计法、有机溶剂提取法、组织培养法、带型分析法等，明确染料的种类和正确使用，了解并掌握园艺植物遗传基本理化性质的分析方法与原理，学会实验数据的处理与分析，并根据实验结果得出结论。

通过综合实训使学生了解园艺植物的基础理论知识，掌握细胞分裂与染色体行为、遗传物质的分子基础、植物细胞的组织分化、经典的遗传规律、染色体数目的变异等。

掌握显微镜的使用与维护方法、细胞固定与细胞染色方法、孚尔根染色法、植物染色体分带技术、遗传物质的鉴定及提取方法。

通过具体单项的训练，提高学生实践技能，具有指导农业生产的实际能力，同时培养学生良好的职业素质和科学发展观。

为体现高职教育特色，增强学生的动手能力，使学生对所学知识融会贯通，培养他们独自解决生产问题的能力，洋葱根尖中DNA的鉴定、植物细胞减数分裂的观察、大麦中期染色体的组型分析、植物多倍体的诱发、植物材料中DNA的分离提取、实训十植物细胞的脱分化和分化培养等12个实训技能训练，增强了指导生产的能力。

目录
第一部分植物遗传的基本理论 (2)
1-1细胞分裂与染色体行为 (2)
1-2 遗传物质的分子基础 (6)
1-3 植物细胞组织分化 (7)
1-4孟德尔遗传规律 (9)
1-5染色体数目的改变 (13)
第二部分园艺植物遗传实验基本知识 (19)
2-1 实验室安全管理制度 (19)
2-2显微操作技术 (20)
2-3显微鉴定的方法 (21)
2-4生物显微镜常见故障的修理 (23)
第三部分植物遗传实验基本操作 (25)
3-1显微镜的使用与维护 (25)
3-2细胞固定 (25)
3-3细胞染色 (27)
3-4常用染料 (28)
3-5孚尔根染色法 (29)
3-6植物染色体分带 (31)
3-7 DNA的提取方法简介 (32)
第四部分园艺植物遗传实验技能训练 (35)
实训一植物根尖石蜡切片的制作——石蜡制片法 (35)
实训二花粉管生殖细胞有丝分裂的观察——固定染色法 (36)
实训三洋葱根尖中DNA鉴定——孚尔根核染色法 (37)
实训四植物细胞减数分裂的观察——染色体玻片法 (38)
实训五孟德尔遗传规律的验证——数理统计法 (38)
实训六大麦中期染色体的组型分析——染色体分析法 (40)
实训七植物多倍体的诱发——秋水仙素法 (42)
实训八植物材料中DNA的分离提取——有机溶剂提取法 (43)
实训九植物中过氧化物酶的提取——电泳染色法 (45)
实训十植物细胞的脱分化和分化培养——组织培养法 (47)
实训十一植物单倍体的诱发——花药培养法 (49)
实训十二植物染色体的分带——C带分析法 (50)
第一部分植物遗传的基本理论
1-1细胞分裂与染色体行为
1-1-1简介
一个细胞分裂为两个细胞的过程。

分裂前的细胞称母细胞，分裂后形成的新细胞称子细胞。

细胞分裂通常包括核分裂和胞质分裂两步。

在核分裂过程中母细胞把遗传物质传给子细胞。

在单细胞生物中细胞分裂就是个体的繁殖，在多细胞生物中细胞分裂是个体生长、发育和繁殖的基础。

细胞分裂（cell division）是活细胞繁殖其种类的过程。

通常包括核分裂和胞质分裂两步。

在核分裂过程中母细胞把遗传物质传给子细胞。

在单细胞生物中细胞分裂就是个体的繁殖，在多细胞生物中细胞分裂是个体生长、发育和繁殖的基础。

1855年德国学者魏尔肖（R.Virchow）提出“一切细胞来自细胞”的著名论断，即认为个体的所有细胞都是由原有细胞分裂产生的。

现在除细胞分裂外还没有证据说明细胞繁殖有其他途经。

1-1-2种类
一、原核细胞的分裂。

现在还了解不多，只对少数细菌的分裂有些具体认识。

原核细胞既无核膜，也无核仁，只有由环状DNA分子构成核区，又称拟核，具有类似细胞核的功能。

拟核的DNA分子或者连在质膜上，或者连在质膜内陷形成的质膜体上，质膜体又称间体。

随着DNA的复制间体也复制成两个。

以后，两个间体由于其间的质膜的生长而逐渐离开，与它们相连接的两个DNA分子环于是被拉开，每一个DNA环与一个间体相连。

在被拉开的两个 DNA 环之间细胞膜向中央长入，形成隔膜，终于使一个细胞分为两个细胞。

二、真核细胞的分裂。

按细胞核分裂的状况可分为3种：即有丝分裂、减数分裂和无丝分裂。

有丝分裂是真核细胞分裂的基本形式。

减数分裂是在进行有性生殖的生物中导致生殖母细胞中染色体数目减半的分裂过程。

它是有丝分裂的一种变形，由相继的两次分裂组成。

无丝分裂又称直接分裂。

其典型过程是核仁首先伸长，在中间缢缩分开，随后核也伸长并在中部从一面或两面向内凹进横缢，使核变成肾形或哑铃型，然后断开一分为二。

差不多同时细胞也在中部缢缩分成两个子细胞，由于在分裂过程中不形成由纺锤丝构成的纺锤体，不发生由染色质浓缩成染色体的变化。

1-1-3细胞的演化
一、无丝分裂 amitosis
无丝分裂时由于不经过染色体有规律的平均分配,故存在遗传物质不能保证(但是不是没有可能)平均等分配的问题,由此有些人认为这是一种不正常的分裂方式. 无丝分裂是最早发现的一种细胞分裂方式，早在1841年德马克（R.Remak）于鸡胚血球细胞中见到。

在无丝分裂中，核仁、核膜都不消失，没有染色体的出现，在细胞质中也不形成纺锤体，当然也就看不到染色体复制和平均分配到子细胞中的过程。

但进行无丝分裂的细胞，染色体也要进行复制，并且细胞要增大。

当细胞核体积增大一倍时，细胞就发生分裂。

至于核中的遗传物质DNA时如何分配到子细胞中的，还有待进一步研究。

无丝分裂是最简单的分裂方式。

过去认为无丝分裂主要见于低等生物和高等生物体内的衰老或病态细胞中，但后来发现在动物和植物的正常组织中也比较普遍地存在。

无丝分裂在高等生物中主要是高度分化的细胞，在动物的上皮组织、疏松结缔组织、肌肉组织和肝组织中，在植物各器官的薄壁组织、表皮、生长点和胚乳等细胞中，都曾见到过无丝分裂现象。

二、无性分裂生殖时核的分裂方式
分裂生殖又叫裂殖，是无性生殖中常见的一种方式，即是母体分裂成2个(二分裂)或多个(复分裂)大小形状相同的新个体的生殖方式。

这种生殖方式在单细胞生物中比较普遍，但对不同的单细胞生物来说，在生殖过程中核的分裂方式是有所不同的，可归纳为以下几种方式：
（一）以无丝分裂方式营无性分裂生殖
无丝分裂又称直接分裂，是一种最简单的细胞分裂方式。

整个分裂过程中不经历纺锤丝和染色体的变比，这种方式的分裂在细菌、蓝藻等原核生物的分裂生殖中最常见。

原核细胞的分裂包括两个方面：(1)细胞DNA的分配，使分裂后的子细胞能得到亲代细胞的一整套遗传物质；(2)胞质分裂把细胞基本上分成两等分。

复制好的两个DNA分子与质膜相连，随着细胞的生长，把两个DNA分子拉开，细胞分裂时，细胞壁与质膜发生内褶，最终把母细胞分成了大致相等的两个子细胞。

（二）以核的有丝分裂方式营无性分裂生殖
有丝分裂的过程要比无丝分裂复杂得多，是多细胞生物细胞分裂的主要方式，但一些单细胞如：甲藻、眼虫、变形虫等，在分裂生殖时，也以有丝分裂的方式进行：
(1)甲藻细胞染色体的结构和独特的有丝分裂，兼有真核细胞和原核细胞的特点，细胞开始分裂时核膜不消失，核内染色体搭在核膜上，分裂时核膜在中部向内收缩形成凹陷的槽，槽内细胞质出现由微管按同一方向排列的类似于纺锤丝的构造，调节核膜和染色体，分离为子细胞核，最终分裂成两个子细胞(甲藻)。

(2)眼虫营分裂生殖时，核进行有丝分裂，分裂过程中核膜并不消失，随着细胞核中部收缩分离成两个子核，然后细胞由前向后纵裂为二(纵二分裂)，其中一个带有原来的一根鞭毛，另一个又长出一根新鞭毛，从而形成两个眼虫。

(3)变形虫长到一定大小时，进行分裂繁殖，是典型的有丝分裂，核膜消失，随着细胞核中部收缩，染色体分配到子核中，接着胞质一分为二，将细胞分裂成两个子代个体。

（三）以核的无丝分裂和有丝分裂方式营无性分裂生殖
这种方式最典型的代表就是草履虫，草履虫属原生动物纤毛虫纲，细胞内有大小两种类型的核，即大核和小核，小核是生殖核，大核是营养核，在草履虫进行无性繁殖时，小核进行核内有丝分裂，大核则行无丝分裂，接着虫体从中部横缢分成2个新个体。

植物细胞通过分裂进行繁殖。

繁殖是生物或细胞形成新个体或新细胞的过程。

植物细胞的分裂包括无丝分裂、有丝分裂和减数分裂和细胞的自由形成等不同的方式。

★有丝分裂 mitosis
有丝分裂又称为间接分裂，它是一种最普遍，是常见的分裂方式。

有丝分裂为连续分裂，一般分为核分裂和胞质分裂。

核分裂（时间长）：核分裂是一个连续的过程，为了叙述的方便，人为地把核分裂划分为前期、中期、后期作末期四个时期。

有丝分裂各期的特点如下：
前期：核内的染色质凝缩成染色体，核仁解体，核膜破裂以及纺锤体开始形成。

中期：中期是染色体排列到赤道板上，纺锤体完全形成时期。

后期：后期是各个染色体的两条染色单体分开，分别由赤道移向细胞两极的时期。

末期：为形成二子核和胞质分裂的时期。

染色体分解，核仁、核膜出现，赤道板上堆积的纺锤丝，称为成膜体。

细胞质分裂（时间短）：核分裂后期，染色体接近两极时，细胞质分裂开始。

在两个子核之间的连续丝中增加了许多短的纺锤丝，形成一个密集着纺锤丝的桶状区域，称之为成膜体。

微管的数量增加，成膜体中有来自高尔基体和内质网的泡囊（含多糖类物质），沿着微管指引方向，聚集，融合，释放出多核物质，构成细胞板，从中间开始向周围扩展，直至与母细胞壁相连，成为胞间层——初生壁，新质膜由泡囊的被膜融合而成。

新细胞壁形成后，把两个新形成的细胞核和它们周围的细胞质分隔成为两个子细胞。

有丝分裂的特点：通过细胞分裂使每一个母细胞分裂成两个基本相同的子细胞，子细胞染色体数目、形状、大小一样，每一染色单体所含的遗传信息与母细胞基本相同，使子细胞从母细胞获得大致相同的遗传信息。

使物种保持比较稳定的染色体组型和遗传的稳定性。

★减数分裂 meiosis
有性生殖要通过两性生殖细胞的结合，形成合子，再由合子发育成新个体。

生殖细胞中的染色体数目是体细胞中的一半。

(否则生物每繁殖一代，体细胞中的染色体数目就会增加一倍)。

既然在形成生殖细胞——精子或卵细胞时，染色体数目要减少一半，则原细胞必须经过减数分裂。

减数分裂是一种特殊分裂方式的细胞分裂，仅在配子形成过程中发生。

这一过程的特点是：连续进行两次核分裂，而染色体只复制一次，结果形成四个核，每个核只含单倍数的染色体，即染色体数减少一半，所以称减数分裂。

在此过程中先由有性组织（花药或胚珠）中的某些细胞分化为二倍性的小孢子母细胞或大孢子母细胞，这些细胞连续进行两次细胞分裂即减数第一分裂和减数第二分裂，结果一个小孢子母细胞形成4个小孢子，一个大孢子母细胞形成一个大孢子，它们都只具有单倍的染色体。

另外一个特点是前期特别长，而且变化复杂，包括同源染色体的配对、交换与分离等。

在适当的时机采集植物的花蕾或动物的精巢，经过固定、染色、压片后，就可以在显微镜下观察细胞的减数分裂。

减数分裂在遗传上有重要意义。

性母细胞(2n)经过减数分裂形成染色体数目减半的配子(n)。

经过受精作用雌雄配子融合为合子，染色体数目恢复为2n 。

这样在物种延续的过程中确保了染色体数目的恒定，从而使物种在遗传上具有相对的稳定性。

另外，在减数分裂过程中包含有同源染色体的配对、交换、分离和非同源染色体的自由组合，这些都是遗传学分离、自由组合和连锁互换规律的细胞学基础。

在这些基本规律的作用之下，导致了各种遗传
重组的发生，而遗传重组又是生物变异的重要源泉。

1-1-4植物染色体的组型分析
染色体是遗传物质的载体，各种生物染色体的数目、形态、结构都是相当稳定的。

在二倍体生物中，配子所含有的全套染色体称为染色体组型或核型，包括染色体数目、形态、大小、着丝点位置及副缢痕、随体的有无等特征。

染色体组型分析，就是对染色体组中的染色体做上述各种形态特征的描述，对染色体标本和其照片进行测量、对比分析、配对、分组、排列和编号。

组型分析所用的材料可以是有丝分裂时期的细胞也可以是减数分裂时期的细胞。

染色体组型分析对研究遗传疾病的机理，物种的亲缘关系以及远缘杂种的鉴定，基因工程等方面都有着重要的意义。

染色体组型分析方法为两大类，一类是分析体细胞有丝分裂时期的染色体数目和形态。

另一类是分析减数分裂时期的染色体数目和形态，都能得到染色体组型。

各染色体的长臂与短臂之比称为臂率。

臂率 1.0-1.7 为中部着丝粒染色体，用M表示
1.7-3.0 近中部着丝粒染色体，用SM表示
3.0-7.0 近端部着丝粒染色体，用ST表示
7.0以上为端部着丝粒染色体，用T表示
SAT代表具有随体的染色体，计算染色体的长度时，可以包括随体也可以不包括，但是都要注明。

1-2 遗传物质的分子基础
1-2-1综述
生物性状的遗传和变异都是由遗传物质控制的，基因存在于染色体上。

染色体主要由DNA 、组蛋白、非组蛋白、以及 RNA 组成。

DNA 和组蛋白的分量大致相等，两者相加，构成了染色体的大部分。

非组蛋白的比率变化很大， RNA 含量很低。

DNA是一切生物细胞的重要组成成分，主要存在于细胞核中，盐溶法是提取DNA的常规技术之一。

从细胞中分离得到的DNA是与蛋白质结合的DNA，其中还含有大量RNA，即核糖核蛋白。

如何有效地将这两种核蛋白分开是技术的关键。

DNA不溶于0.14mol/L 的NaCl
溶液中，而RNA则能溶于0.14mol/L的NaCl溶液之中，利用这一性质就可以将二者从破碎细胞浆液中分开。

制备过程中，细胞破碎的同时就有Dnase释放到提取液中，使DNA因被降解而影响得率，在提取缓冲液中加入适量的柠檬酸盐和EDTA，既可抑制酶的活性又可使蛋白质变性而与核酸分离，再加入阴离子去垢剂0.15％的SDS，经过2h搅拌，或用氯仿－异醇除去蛋白，通过离心使蛋白质沉淀而除去，得到的是含有核酸的上清液。

然后用95％的预冷乙醇即可把DNA从除去蛋白质的提取液中沉淀出来。

1-2-2两类核酸及其分布
核酸（ nucleic acid）是一种高分子化合物。

构成核酸的基本单元是核苷酸（nucleotide）。

核酸是核苷酸的多聚体。

每个核苷酸又由三部分组成：五碳糖、磷酸和环状的含氮碱基。

含氮碱基共有 5种：两种双环结构的嘌呤（purine）和三种单环结构的嘧啶（pyrimidine）。

嘌呤有腺嘌呤（A）和鸟嘌呤（G）；嘧啶有胞嘧啶（C）、胸腺嘧啶（T）和尿嘧啶（U）。

在多聚体中，两个核苷酸之间由5'和3'位的磷酸二脂键相连。

核酸有两种：核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）。

此外， DNA通常以双链形式存在，RNA则多以单链形式存在。

在真核生物中，绝大部分 DNA存在于细胞核内的染色体上，少量DNA存在于细胞质中的叶绿体、线粒体等细胞器中。

RNA在细胞核和细胞质中都有，在核内，RNA主要集中在核仁上，少量在染色体上。

细菌也含有DNA和RNA。

多数噬菌体只含有 DNA；多数植物病毒只含有RNA；动物病毒有的含RNA，有的含DNA。

1-3 植物细胞组织分化
1-3-1概述
分化了的植物根、茎、叶细胞往往具有全能性，在一定条件下进行离体培养，给于一定的营养与激素，可以脱分化为愈伤组织，由愈伤组织制备成细胞悬浮液，在一定的条件下经振荡培养，逐渐形成具有两极性的胚状体，经过进一步的分化培养，给于不同的营养和激素成分，又可以生出完整的小植株。

植物的脱分化和分化培养，证明分化了的植物细胞仍具备形成全整植株所需要的全套基因。

在一定条件下，活动的基因可以关闭、已关闭的基因又可以重新启动、再行由胚到成熟植株发育过程中有关基因的先后活动程序。

脱分化培养基和分
化培养基的主要区别在于激素的成分和含量上，说明各种激素的出现和含量改变对于植物组织分化起着重要的作用。

许多植物从脱分化到分化过程对培养基里激素成份要求严格、有的还要进行液体培养才能重新分化。

例如，胡萝卜贮藏根组织，是最早用于研究植物细胞的全能性的材料，至今仍是研究脱分化的好材料，但当胡萝卜组织形成愈伤组织之后，若要它们重新分化，必须经过振荡培养和采用合适的培养基，条件较为复杂。

另一些植物，例如烟草的根、茎、叶和甘蓝的花茎等容易进行脱分化和分化培养，不需液体振荡培养可以在固体培养基上直接完成，是两类较好的实验材料。

1-3-2植物组织培养
一、愈伤组织
花药培养 anther culture 用植物组织培养技术，把发育到一定阶段的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分化，并连续进行有丝分裂，形成细胞团，进而形成一团无分化的薄壁组织——愈伤组织，或分化成胚状体，随后使愈伤组织分化成完整的植株。

亦称愈合组织或创伤组织。

植物体局部受伤后，在伤口表面形成的具有分生能力和保护作用的活的薄壁细胞群。

愈伤组织的外层细胞常可木质化或形成周皮，对其表层的细胞起保护作用。

在植物嫁接中愈伤组织促使砧木与接穗紧密结合，植物扦插能从愈伤组织分化出不定根和不定芽；在组织和细胞培养时，条件适宜也能长出愈伤组织。

利用愈伤组织诱导形成新植株已广泛应用于植物的无性繁殖。

在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织
愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式两种。

不定芽方式是在某些条件下，愈伤组织中的分生细胞发生分化，形成不同的器官原基，再逐渐形成芽和根。

胚状体方式是由愈伤组织细胞诱导分化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。

这种由愈伤组织中的薄壁细胞不经过有性生殖过程，直接产生类似于胚的结构，叫做胚状体。

不定芽方式和胚状体方式是植物组织培养中最常见和最重要的两种方式。

胚状体方式比不定芽方式有更多的优点，如胚状体产生的数量比不定芽多，胚状体可以制成人工种子，等等。

1-4孟德尔遗传规律
1-4-1概述
在孟德尔从事的大量植物杂交试验中，以豌豆杂交试验的成绩最为出色。

经过整整8
年（1856-1864）的不懈努力，终于在1865年发表了《植物杂交试验》的论文，提出了遗传单位是遗传因子（现代遗传学称为基因）的论点，并揭示出遗传学的两个基本规律——分离规律和自由组合规律。

这两个重要规律的发现和提出，为遗传学的诞生和发展奠定了坚实的基础，这也正是孟德尔名垂后世的重大科研成果。

孟德尔的这篇不朽论文虽然问世了，但令人遗憾的是，由于他那不同于前人的创造性见解，对于他所处的时代显得太超前了，竟然使得他的科学论文在长达35年的时间里，没有引起生物界同行们的注意。

直到1900年，他的发现被欧洲三位不同国籍的植物学家在各自的豌豆杂交试验中分别予以证实后，才受到重视和公认，遗传学的研究从此也就很快地发展起来。

1-4-2孟德尔的分离规律
豌豆具有一些稳定的、容易区分的性状，这很符合孟德尔的试验要求。

所谓性状，即指生物体的形态、结构和生理、生化等特性的总称。

在他的杂交试验中，孟德尔全神贯注地研究了7对相对性状的遗传规律。

所谓相对性状，即指同种生物同一性状的不同表现类型，如豌豆花色有红花与白花之分，种子形状有圆粒与皱粒之分等等。

为了方便和有利于分析研究起见，他首先只针对一对相对性状的传递情况进行研究，然后再观察多对相对性状在一起的传递情况。

这种分析方法是孟德尔获得成功的一个重要原因。

一、显性性状与隐性性状
大家知道，孟德尔的论文的醒目标题是《植物杂交试验》，因此他所从事试验的方法，主要是“杂交试验法”。

他用纯种的高茎豌豆与矮茎豌豆作亲本（亲本以P表示），在它们的不同植株间进行异花传粉。

如图2-4所示高茎豌豆与矮茎豌豆异花传粉的示意图。

结果发现，无论是以高茎作母本，矮茎作父本，还是以高茎作父本，矮茎作母本（即无论是正交还是反交），它们杂交得到的第一代植株（简称“子一代”，以F1表示）都表现为高茎。

也就是说，就这一对相对性状而言，F1植株的性状只能表现出双亲中的一个亲本的性状——高茎，而另一亲本的性状——矮茎，则在F1中完全没有得到表现。

又如，纯种的红花豌豆和白花豌豆进行杂交试验时，无论是正交还是反交，F1植株全都是红花豌豆。

正因为如此，孟德尔就把在这一对性状中，F1能够表现出来的性状，如高茎、红花，叫做显性性状，而把F1未能表现出来的性状，如矮茎、白花，叫做隐性性状。

孟德尔在豌豆的其他5对相对性状的杂交试验中，都得到了同样的试验结果，即都有易于区别的显性性状和隐性性状。

二、分离现象及分离比
在上述的孟德尔杂交试验中，由于在杂种F1时只表现出相对性状中的一个性状——显性性状，那么，相对性状中的另一个性状——隐性性状，是不是就此消失了呢？能否表现出来呢？带着这样的疑问，孟德尔继续着自己的杂交试验工作。

孟德尔让上述F1的高茎豌豆自花授粉，然后把所结出的F2豌豆种子于次年再播种下去，得到杂种F2的豌豆植株，结果出现了两种类型：一种是高茎的豌豆（显性性状），一种是矮茎的豌豆（隐性性状），即：一对相对性状的两种不同表现形式——高茎和矮茎性状都表现出来了。

孟德尔的疑问解除了，并把这种现象称为分离现象。

不仅如此，孟德尔还从F2的高、矮茎豌豆的数字统计中发现：在1064株豌豆中，高茎的有787株，矮茎的有277株，两者数目之比，近似于3∶1。

如图2-4A所示。

孟德尔以同样的试验方法，又进行了红花豌豆的F1自花授粉。

在杂种F2的豌豆植株中，同样也出现了两种类型：一种是红花豌豆（显性性状），另一种是白花豌豆（隐性性状）。

对此进行数字统计结果表明，在929株豌豆中，红花豌豆有705株，白花豌豆有224株，二者之比同样接近于3∶1。

三、分离规律的验证
前面讲到孟德尔对分离现象的解释，仅仅建立在一种假说基础之上，他本人也十分清楚这一点。

假说毕竟只是假说，不能用来代替真理，要使这个假说上升为科学真理，单凭其能清楚地解释他所得到的试验结果，那是远远不够的，还必须用实验的方法进行验证这一假说。

下面介绍孟德尔设计的第一种验证方法，也是他用得最多的测交法。

测交就是让杂种子一代与隐性类型相交，用来测定F1的基因型。

按照孟德尔对分离现象的解释，杂种子一代F1（Dd）一定会产生带有遗传因子D和d的两种配子，并且两者的数目相等；而隐性类型（dd）只能产生一种带有隐性遗传因子d的配子，这种配子不会遮盖。