以植物组织培养室的平面图为主
植物组织培养实训指导书
植物组织培养实训指导书《植物组织培养技术》是生物技术及应用专业的工学结合核心课程之一。
本课程采取“项目引领,任务驱动”的教学模式,使学生掌握植物组织培养技术的职业知识和职业技能,能够在实际工作中具备实验方案设计能力、培养基制备能力、无菌操作能力、组培苗驯化移栽能力及组培苗工厂化生产能力。
实训一:实训室的灭菌与玻璃器皿的清洗一、目的要求1.通过实训,使学生了解各种洗涤液的特性;2.掌握酸液的配制方法和组织培养中常用器皿的洗涤技术;3.通过实训,培养学生良好的卫生习惯,建立组织培养的无菌意识;4.会配制新杰尔灭溶液。
二、材料用具1.灭菌用具:2%新洁尔灭、高锰酸钾、甲醛、70%酒精、洗涤剂、各种培养皿、工作服、口罩、手套、试管刷。
2.洗涤用具:肥皂液、洗衣粉、重铬酸钾粉末、1%HCL、70%酒精、瓶刷等。
三、方法步骤(一)培养室的灭菌1、地面、墙面和工作台的灭菌2、无菌室和培养室的灭菌(二)玻璃器皿的洗涤(酸洗)玻璃器皿的洗涤一般要经过浸泡、刷洗、浸酸和清洗四个步骤。
重铬酸钾洗涤(三种)液配制:重铬酸钾50g,加1L蒸馏水,加热溶化,冷却后再缓缓加入工业浓硫酸90ml。
1、新玻璃器皿的洗涤用1%HCL的溶液浸泡一昼夜,再用清水反复洗涤,最后用蒸馏水冲淋一遍,干燥后备用。
2、用过的玻璃器皿先将器皿中得残留物质除去,用清水冲洗,再用洗衣粉洗涤,最后用清水冲洗3~4遍,把字迹擦洗干净,干燥后使用。
3、污染的培养瓶的处理首先经高压蒸汽灭菌,再按(2)的步骤洗涤。
4、用过的吸管、滴管、容量瓶先放在重铬酸钾溶液浸泡2h以上,取出后经流水冲洗30min左右,干燥后使用。
四、实训报告①.植物组织培养室的灭菌方法步骤。
②.写出洗涤液的配置步骤。
③.记录各种培养瓶的洗涤方法。
实训二:组织培养工厂的设计一、目的要求通过实训,使同学们对现代组培苗生产模式有一个更为深刻的认识,能熟练的根据生产规模设计合理的厂房及工艺流程。
二、材料用具组培苗生产小工厂、绘图纸、绘图笔三、方法步骤(一) 组培工厂的参观1.参观组培实验中心2.组培工厂的组成:准备室、灭菌室、缓冲室、无菌室、培养室、驯化室3.各室内仪器设备的种类及摆放(二) 设计一200m2组培工厂,要求绘出大概的布局图。
植物组织培养实训指导书
植物组织培养实训指导书《植物组织培养技术》是生物技术及应用专业的工学结合核心课程之一。
本课程采取“项目引领,任务驱动”的教学模式,使学生掌握植物组织培养技术的职业知识和职业技能,能够在实际工作中具备实验方案设计能力、培养基制备能力、无菌操作能力、组培苗驯化移栽能力及组培苗工厂化生产能力。
实训一:实训室的灭菌与玻璃器皿的清洗一、目的要求1.通过实训,使学生了解各种洗涤液的特性;2.掌握酸液的配制方法和组织培养中常用器血的洗涤技术;3.通过实训,培养学生良好的卫生习惯,建立组织培养的无菌意识;4.会配制新杰尔灭溶液。
二、材料用具1.灭菌用具:2%新洁尔灭、高镒酸钾、甲醛、70%酒精、洗涤剂、各种培养血、工作服、口罩、手套、试管刷。
2.洗涤用具:肥皂液、洗衣粉、重铬酸钾粉末、1%HCL、70%酒精、瓶刷等。
三、方法步骤(一)培养室的灭菌1、地面、墙面和工作台的灭菌2、无菌室和培养室的灭菌(二)玻璃器皿的洗涤(酸洗)玻璃器血的洗涤一般要经过浸泡、刷洗、浸酸和清洗四个步骤。
重铬酸钾洗涤(三种)液配制:重铬酸钾508,加工蒸馏水,加热溶化,冷却后再缓缓加入工业浓硫酸90ml。
1、新玻璃器血的洗涤用1%HCL的溶液浸泡一昼夜,再用清水反复洗涤,最后用蒸馏水冲淋一遍,干燥后备用。
2、用过的玻璃器血先将器血中得残留物质除去,用清水冲洗,再用洗衣粉洗涤,最后用清水冲洗3—4遍,把字迹擦洗干净,干燥后使用。
3、污染的培养瓶的处理首先经高压蒸汽灭菌,再按(2)的步骤洗涤。
4、用过的吸管、滴管、容量瓶先放在重铬酸钾溶液浸泡2h以上,取出后经流水冲洗30min左右,干燥后使用。
四、实训报告①.植物组织培养室的灭菌方法步骤。
②.写出洗涤液的配置步骤。
③.记录各种培养瓶的洗涤方法。
实训二:组织培养工厂的设计一、目的要求通过实训,使同学们对现代组培苗生产模式有一个更为深刻的认识,能熟练的根据生产规模设计合理的厂房及工艺流程。
二、材料用具组培苗生产小工厂、绘图纸、绘图笔三、方法步骤(-)组培工厂的参观1.参观组培实验中心2.组培工厂的组成:准备室、灭菌室、缓冲室、无菌室、培养室、驯化室3.各室内仪器设备的种类及摆放(二)设计一 200m2组培工厂,要求给出大概的布局图。
1 植物组织培养实验室的构建
医用手提式灭菌锅
不锈钢立式灭菌锅
3、超净工作台
陈列于操作室(接种室)内
类型:垂直式和水平式
作用:无菌操作
(二)药品贮存和配制仪器设备
1、冰箱
作用:低温保存材料,存 放药品、培养基母液、激 素、酶制剂。
2、天平
陈列于制备室中
作用:称取大量元素、微 量元素、酶制剂
3、酸度计
注意! 实际应用中要通过试验筛选。
基本培养基对西洋杜鹃增殖的影响
三、培养基的配制
(一)培养基母液的配制
1.基本培养基母液 类型:四液式(钙盐最后加入)、三液式、 五液式(钙盐和铁盐单独配制)。 成分:大量元素、微量元素、铁盐、 有机成 分。 贮藏:2~4冰箱内贮藏。 倍数:10X、100X。 标记:名称、配制倍数、日期等。
取容器(搪瓷缸),加入1/3~2/3左右的蒸馏水,加热至沸腾; 称取定量的琼脂和蔗糖加入上述煮沸的水中并不断搅拌, 直到完全溶解。 用移液管量取所需量的母液加入一只干净的烧杯中, 待琼脂完全溶解后加入 用NaOH或稀HCl调节pH值 高压灭菌,(121℃,15 min~20min) 冷却,取出,备用
植物组织培养材料移到田间前,通常 先移到温室进行练苗,待生根成活后, 再移到大田。
二、仪器和设备
(一)无菌操作设备 1、烘箱:
作用:干燥洗后的器皿
高温干热灭菌 测定培养物的干重时烘干培 养材料。
2、灭菌锅
类型:普通医用消毒锅 大的高压灭菌锅
作用:培养基、水和各种用具的消毒
(四)培养设备 1.空调
作用:控制培养温度
2.加湿器和去湿机
控制培养室内湿度状况
3.定时器
植物组织培养实验室设计及建设方案
植物组织培养实验室设计及建设方案方案一植物组织培养实验室设计及建设方案背景、目的和意义:嘿,朋友!如今植物组织培养技术可是越来越重要啦!它能快速繁殖优良品种、保存珍稀植物资源,应用那叫一个广泛。
咱们搞这个植物组织培养实验室,就是为了给科研和生产提供一个高效、精准的平台,让植物培养工作如虎添翼。
这不仅能推动相关领域的研究进展,还能为农业、园艺等产业注入新的活力,意义重大着呢!具体目标:咱可得定几个实实在在的目标。
首先,一年内成功培养出至少 10 种常见植物的组织苗,且成活率要达到 90%以上。
其次,要把实验室的设备使用率提高到 80%以上,不能让那些宝贝家伙闲置着。
最后,发表 3 篇以上与植物组织培养相关的研究论文,让咱这实验室在圈子里也有点名气。
现状分析:内部情况嘛,咱们的技术团队还算不错,有几个经验丰富的老手带着一群充满激情的新手,干劲十足。
但设备方面还有些欠缺,一些关键仪器还不够先进。
外部情况呢,市场对植物组织培养产品的需求不断增长,竞争也越来越激烈。
周边的一些实验室已经走在了前面,咱们得加把劲啦!具体方案内容:第一步,先把实验室的布局规划好。
分成准备区、接种区、培养区和观察区,每个区域都要功能明确,互不干扰。
第二步,采购一批先进的设备,比如高精度的显微镜、无菌操作台、恒温培养箱等等。
这可得精挑细选,货比三家,不能花冤枉钱。
第三步,加强人员培训。
请专家来给咱们的小伙伴们讲讲最新的技术和操作要点,提高大家的业务水平。
第四步,建立严格的质量控制体系,从原材料采购到培养过程,每个环节都要严格把关,确保培养出的植物苗质量过硬。
风险评估与应对:风险嘛,首先是技术风险。
万一遇到一些疑难杂症,培养不成功咋办?这时候就得靠咱们的技术团队集体攻关,多查资料,多请教专家。
其次是设备故障风险。
要是关键设备突然坏了,那可就麻烦了。
所以要定期维护保养设备,储备一些易损件,以备不时之需。
还有就是市场风险。
万一培养出来的产品市场不认可,那不是白忙活了?所以要提前做好市场调研,根据市场需求来调整培养方案。
植物组培自测题与参考答案(简)
第1章复习测试卷二、填空题1.根据外植体的不同,一般可以将植物组织培养分为:植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养。
2.在植物组织培养中,外植体脱分化后,再分化形成完整植株的途径有两条:一是器官发生途径,二是胚状体途径。
3.通过器官发生再生植株的方式有三种:第一种最普遍的方式是先分化芽,再分化根;第二种是先分化根,再分化芽,这种方式中芽的分化难度比较大;第三种是在愈伤组织块的不同部位上分化出根或芽,再通过维管组织的联系形成完整植株。
4.体细胞胚发生的途径可分为间接途径和直接途径。
5.植物组织培养的整个历史可以追溯到19世纪末和20世纪初。
一个多世纪来,植物组织培养的发展大致可以分为探索、奠基和迅速发展三个阶段。
6.在Schleiden和Schwann所发展起来的细胞学说推动下,1902年德国植物生理学家G.Haberlandt提出了细胞全能性的设想,并成为用人工培养基对分离的植物细胞进行培养的第一人。
7.White、Gautheret和Nobecourt在1939年确立的植物组织培养的基本方法,成为以后各种植物组织培养的技术基础,他们三人被誉为植物组织培养的奠基人。
8.1958年英国人Steward等将胡萝卜髓细胞培养成为一个完整植株,首次通过实验证明了植物细胞的全能性,成为植物组织培养研究历史中的一个里程碑。
9.1960年Cocking等人用酶分离原生质体获得成功,开创了植物原生质体培养和体细胞杂交工作。
同年Morel培养兰花的茎尖,获得了快速繁殖的脱毒兰花。
其后,国际上相继把组织培养技术应用到兰花的快速繁殖上,建立了“兰花工业”。
10.花药培养在20世纪70年代得到了迅速发展,获得成功的物种数目不断增加,其中包括很多种重要的栽培物种。
烟草、水稻和小麦等的花培育种在我国取得了一系列举世瞩目的成就。
三、是非题(×)1.从理论上说,所有的植物细胞与组织材料都能培养成功,其培养的难易程度基本相同。
组培实验
实验一:组培室的设计及仪器设备的使用一、实验目的1.了解普通植物组织培养实验室和工厂育苗植物组织培养室的差别;2.掌握植物组织培养实验室的组成及各分室的功能;3.学会分析各种类型植物组织培养实验室的优点和缺点;4.学会常见植物组织培养设备的使用方法。
二、试验原理1.物组织培养实验室是完成植物组织培养的重要场所,植物组织培养实验室设计合理与否直接影响着植物组织培养的成败。
2.植物组织培养实验室有:准备室药品储藏室、洗涤室、培养基配制室、灭菌室)、接种室、培养室、温室。
(1)准备室在准备室主要进行一些常规实验操作,如各种药品的储备,称量,器皿洗涤,培养基配制,培养基和培养器皿的灭菌,培养材料的预处理等。
为了方便管理还可以将准备室进行适当的分区,如划分为药瓶储藏室,洗涤室,培养基配制室及灭菌室等。
①药品储藏主要用于存放各种化学药品,要求室内干燥、通风、避光、应配制、备药品柜、冰箱等。
各类化学试剂应按要求分类存放,需要低温保存的药剂应置于冰箱内保存,有毒药品应按规定存放和管理。
②洗涤室用于玻璃器皿、用具及实验用具的洗涤、干燥和存放;;培养材料的预处理与清洗:组培苗的出瓶、清洗与整理等。
要求有电源、自来水和水槽,上下水道畅通,排水良好,地面耐湿、防滑,便于清洁。
应配备工作台、烘箱、晒瓶架、周转筐、毛刷等。
③培养基配制室用于培养基的配制,还可以分为称重分室和配制分室。
药品称量需配制各种规格的天平,包括普通天平和分析天平。
培养基配制需要配备工作台、蒸馏水器、电炉(电饭锅或微波炉)、水浴锅、磁力搅拌器、过滤装置、酸度计、分注器、各种试管、三角瓶、烧杯、量筒、吸管、移液管及移液管架以及贮藏母液的冰箱、移动式载物台(医用小推车)、周转筐等。
④灭菌室用于培养基、器皿、用具、及其它物品的灭菌。
灭菌室根据工作量的大小决定其面积的大小,一般控制在30~50m²。
要求、通风、明亮,墙壁和地面应防潮、耐高温。
应配置高压电源和排水设施、高压蒸汽灭菌装置、干热消毒柜或烘箱、细菌过滤装置及移动式载物台、周转筐等。
植物组织培养实验室设计方案
植物组织培养实验室设计方案植物组织培养实验室设计图
实验室经费预算说明:表格中的经费仅包含了主要的设备及试剂费用,实验室建造费用大约为37000元,所以总的实验室建造经费为636613、85元。
本实验室设计方案根据要求公司要求而设计,实验室的设计根据实际生产需要,紧凑方便。
实验设备及试剂的购买数量均根据实验室的规模而定,实验试剂尽量购买经济的替代品,但一些关键设备如移液枪采购的就是口碑极好的高质量的品牌,所以本实验的建造将科学的严谨与经济相结合,希望本实验室建造好后能造福人类。
第一章植物组织培养实验室构建
2020/12/1
第一章植物组织培养实验室构建
教学目标:
(1)理解组织培养实验室的设计原则; (2)掌握组织培养基本布局以及相应仪器设备; (3)了解组培苗生产规模与实验室组建经费预算; (3)能够根据需要和实际情况科学设计组织培养实
验室。 重点:组织培养实验室设计与经费预算 难点:组织培养实验室的设计
施肥机等。 3、设计要求:面积视生产规模而定,要求环境清洁无菌,具
备控温、控湿、遮荫、防虫和采光良好等条件。
第一章植物组织培养实验室构建
第三节、组培基本仪器和设备
一、玻璃器皿 1、培养器皿:试管、三角瓶、培养皿、果酱瓶等。 2、分注器:漏斗、移液管、量筒等。 3、其它玻璃器皿:烧杯、容量瓶、试剂瓶等。
••办办公公 室室
••培培养养 室室
第一章植物组织培养实验室构建
红河学院植物组织培养实验室平面图
第一章植物组织培养实验室构建
•第二节 实验室的功能及要求
一、准备室
1、功能:完成培养基配制所使用的各种药品的贮备、称量、 用品洗涤、培养基配制与分装等工作。
2、主要设备用具: 药品柜、冰箱、电子天平、蒸馏水器、酸 度计及常用的培养基配制用玻璃仪器。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
洗涤室 药品室 称量室 培养基制备室 灭菌室 无菌培养基储放室 无菌操作室(区) 培养室(区) 细胞学观察室 驯化移栽温室
•化学实验室 (准备室)
•▼
•可以根 据实际条 件进行合
并
第一章植物组织培养实验室构建
•三、组培实验室的设计
• 1、实验室选址要求
(1)地理位置要求:地形开阔,地势高燥,交通运输、水 电方便。环境清洁,空气清新,周围50米以内要 没有酱 醋作坊、牧场、畜禽圈舍及饲料库和“三废”排放的工厂。
植物组织培养实验室组培室规划设计
植物组织培养实验室组培室规划设计一、实验室要求理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方,最好在常年主风向的上风方向,尽量减少污染。
规模化生产的组织培养实验室最好建在交通方便的地方,便于培养产品的运送。
实验室的建设均需考虑两个方面的问题:一是所从事的实验的性质,即是生产性的还是研究性的,是基本层次的还是较高层次的;二是实验室的规模,规模主要取决于经费和实验性质。
无论实验室的性质和规模如何,实验室设置的基本原则是:科学、高效、经济和实用。
一个组织培养实验室必须满足3个基本的需要:实验准备(培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌)、无菌操作和控制培养。
此外,还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施,使实验室更加完善。
在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。
实验室的大小取决于工作的目的和规模。
以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。
在设计组织培养实验室时,应按组织培养程序来没计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。
植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。
要做到无菌的条件,需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。
二、实验室组成(一)基本实验室基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,是组织培养实验所必须具备的基本条件。
如进行工厂化生产,年产4万-20万,需3-4间实验用房,总面积60平方米。
1、准备室(化学实验室)功能:又叫化学实验室,进行一切与实验有关的准备工作:完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。
要求:最好有20平方米左右。
要求宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备,方便多人同时工作;同时要求通风条件好,便于气体交换;实验室地面应便于清洁,并应进行防滑处理。
第一章植物组织培养的基本知识及操作技术
第三节 植物组织培养的一般技术
一、外植体的选择和处理 二、培养基及制备 三、无菌技术 四、培养环境
一、外植体的选择和处理
1. 外植体的类型 分生组织 带芽外植体 胚 雌雄配子体
2. 外植体的选择和处理 取材植株预栽培 取材植株的预处理 培养材料的贮藏 外植体的预处理 外植体的消毒、灭菌 外植体的切离和接种
搁 4.0m 架
实 验 台 准备室 4.5m
无菌台
培养架
无菌室 缓冲室 3.0m
架 培养室
培 养 架 培 养 架
电 炉
门
3.5m
组织培养准备实验室
缓冲室
培养室
无菌室(一)
无菌室(二)
二、主要单元功能介绍: 1. 准备室:
洗涤区:排水良好、地板耐湿 灭菌区:地面、墙面防潮、耐高温;绝缘 化学实验区:器皿洗涤、干燥、保存;药品称量、 溶解;培养基配制;材料预处理;培养材料观察 分析等。主要设备包括:工作台、药品柜、冰箱、 烘箱、天平、蒸馏水器等。
2. 无菌操作室: 要求:无菌;光照好;墙面尽可能光滑、易消毒; 防止空气对流;具有消毒措施(甲醛熏蒸、紫外 灯照射) 设备:超净工作台;接种箱
3. 培养室:满足植物材料的生长 要求:采光;保温;隔热;控温;控光;暗室 设备:培养架;控温设备 4. 细胞学实验室:培养材料的分析、照相 设备:显微镜、解剖镜、染色设备
2、有机化合物(organic compound)
(1)碳水化合物 最常用的碳源是蔗糖,葡萄糖和果糖也是较好的 碳源。 使用浓度在1%-7%,常用3% 作用:碳源;维持培养基渗透压。
(2)维生素(vitamin)
组织培养原理及组培室的设计
洗涤剂detergent
自然晾干
烘箱干燥
洗涤区
2、药品室
存放常用的化学试剂
无机盐类、有机物、生长调节剂等 Inorganic salts, organic matter, PGR
3、制备室
培养基的配制medium 生理生化测定
Physiological and biochemical measurement
4、贮存室(区)
存放配后的 培养基或未 用完的培养 基
5、灭菌室
消毒室disinfection
培养基、玻璃器皿、塑料器皿和其它物品
• 数量多; • 速度快; • 结构完整
五、Establishment of a lab
• Designing of a lab • Equipment of a lab
一、Designing of a lab
标准组织培养室 洗涤室(区)washing 制备室(区)preparation 灭菌室(区)sterilization 贮放室(区)storage 操作室(区)manipulation 培养室(区)culture room 观察室(区)observation 药品室(区)chemicals
不定芽增殖Adventitious buds
在高等植物正常的个体发育中,芽一般是只从茎尖 或叶腋等的一定位置生出。在顶芽、腋芽、副芽等 均在一定部位生出的芽,称为定芽. 从现存芽以外的任何器官、组织上通过器官发生重 新形成的芽称为不定芽 特点:繁殖系数高,遗传稳定性较好genetically stable。但继代次数有限。
芽变选种和杂交育种
补 充
组织培养
细胞水平上进行突变体筛选 试管授精克服杂交不亲和 胚培养克服胚败育 胚乳培养得到三倍体 原生质体培养与融合 种质资源离体保存 细胞水平上转基因
植物组培试验室简介
植物组培实验室简介一、实验室说明:植物组织培养是现代生物科学技术之一,为快速繁殖、培育为无病毒植株,保存和运输种质提供了可能。
为配合选修一教学,特建立该实验室。
二、实验室建设:(1)组培实验室:按标准组培实验室配备,分为准备室、缓冲室、无菌操作室、植物培养室。
各区域间采用塑钢隔断,既使组培的各个功能区域得以区划,又使整个实验室显得宽敞明亮,使实验室整体感得以保留,美观大方。
①整体图:其中准备室可作植物组培和微生物培养共用,在准备室内配置一台恒温培养箱即可实现微生物培养。
无菌操作室配备无菌空气净化系统和紫外杀菌系统。
无菌空气净化系统可以有效过滤室外空气,使无菌操作室空气达到有效净化;紫外杀菌系统配备紫外警示灯,使用更加安全,避免误操作对人体带来的损伤。
该室可以做组织培养的无菌操作,也可以做微生物的培养接种使用。
培养室供植物组培苗培养和观察使用,严禁微生物培养和观察使用,避免被污染。
序号名称规格数量单位1 智能光照培养架培养架尺寸(高×宽×深)180cm×45 cm×130cm,HST层,每层实用面积125cm×45cm ,每层配6 台24 双管净化灯40W 4 套25 配电箱PZ-6路分支 1 套26 中效净化风机箱10万级 1 套27 紫外灭菌系统带有紫外警示装置 3 套28 地胶板运动型地胶板,耐磨,防紫外腐蚀60 ㎡29 环氧底漆环氧地留坪60 ㎡30 塑钢隔断8mm钢化玻璃,塑钢隔断47 ㎡31 塑钢门塑钢结构,5mm钢化,带锁 3 扇32 吊顶铝塑板60 ㎡33 墙面处理涂刷界面剂一遍,批刮防水腻子,砂纸打磨、涂刷多乐士三合一、采用人工涂刷、底漆1遍、面漆3遍92 ㎡34 高压灭菌控制箱独立控制高压灭菌锅 1 个35 空调格力1.5P,安装于培养室 1 台36 室内水\电路改造\系统集成优质PPR及管件,国标铜芯线和阻燃管铺设,主线为4平方,支线为2.5平方,品牌墙插插座18个、品牌桌插7个,品牌地插6个,开关面板等1 项37 其他赠送教室内有关组培的文化布置(组培标识、标牌、横条等)1 套③立体图:④主要功能:在该实验室中学生可以动手实践,进行植物组织培养实验、微生物培养基的配制、细菌的培养等实验。
植物组织培养的基本知识及操作技术
氨基酸 (almino acide)
3、有机附加物 (天然复合物)
10%—20%
150-200ml/L
150—200g/L
0.01%-0.05%
浓度:
有机附加物
椰乳
香蕉
马铃薯
酵母提取液
植物生长调节物质(hormone)
01
赤霉素(gibberellic acid)
02
细胞分裂素类 ( cytokinin )
第一节 植物组织培养的一般原理
器官发生
胚胎发生
细胞全能性的实现 实现条件:离体;培养条件 经历的过程:脱分化----再分化---- 再分化的方式
离体的植物组织在组培条件下形成吴根苗、根、芽等器官的过程称为器官发生。
发生类型
发生方式
直接途径
间接途径
先芽后根
先根后芽
根芽同时发生
植物细胞未经过性细胞的融合而通过与合子胚发生类似的途径形成完整植物的过程称为胚胎发生。
缓冲室
培养室
无菌室(一)
无菌室(二)
主要单元功能介绍:
准备室:
洗涤区:排水良好、地板耐湿
灭菌区:地面、墙面防潮、耐高温;绝缘
化学实验区:器皿洗涤、干燥、保存;药品称量、溶解;培养基配制;材料预处理;培养材料观察分析等。主要设备包括:工作台、药品柜、冰箱、烘箱、天平、蒸馏水器等。
无菌操作室:
灭菌锅
普通医用灭菌锅 大的高压灭菌锅 培养基、水、各种器皿的消毒灭菌
烘箱(干燥箱) 80℃ 测定植物组织干重 80-100 ℃ 烘干物品 150-160 ℃ 干热灭菌
冰箱 试剂和母液的贮藏;细胞及其他材料的冷藏保存;植物材料的处理等。
酸度计 培养基及酶制剂的pH值调整
植物组织培养基本操作图解
8、瓶口在火焰上烧过
第十二页,共45页。
9、铝箔纸的放法
第十三页,共45页。
11、镊出苗
第十四页,共45页。
12、放入培养皿中
第十五页,共45页。
——
13 、 幼 苗 形 态 生 长 点
第十六页,共45页。
14、剪取茎段
第十七页,共45页。
15、剪好的苗
第十八页,共45页。
培养皿的拿法
第十九页,共45页。
16、茎段接种a
第二十页,共45页。
17、茎段接种b
第二十一页,共45页。
18、接种好的苗a
第二十二页,共45页。
19、接种好的苗b
第二十三页,共45页。
20、重新封好瓶口a
第二十四页,共45页。
21、重新封好瓶口b
第二十五页,共45页。
22、重新封好瓶口c
第二十六页,共45页。
二 愈伤组织的培养
1、挑选生长健康的无菌叶或茎,在 灭菌的培养皿中→剪成0.5-1cm2的小
块或相当大小的茎段(造成伤口), → 接种在盛有MS培养基的培养皿中→将 培养皿用封口膜封住。 2、在光照培养箱中,25℃下,16小时 光照,培养两周,可形成愈伤组织。
第二十七页,共45页。
3、在光照培养箱中,25℃,16小时光照条件下培 养4周,可长成完整植株。
第五页,共45页。
1、点着酒精灯
第六页,共45页。
2、双手擦拭消毒
第七页,共45页。
3、剪刀灭菌
外焰
第八页,共45页。
4、酒精中冷却
第九页,共45页。
5、把酒精烧去
第十页,共45页。
6、打开三角瓶——铝箔纸的拿法a
以植物组织培养室的平面图为主
任务一 认识植物组织培养室
反馈与评价
1
根据要求完成任务,提交工作总结报告(以植物 组织培养室的平面图为主)
老师对各组的任务完成情况进行点评,最后对此 任务完成情况依据工作考核标准进行评分。
2
项目一 认识组培室与仪器设备
任务一 认识植物组织培养室
任务提出(认识植物组织培养室) 任务分析(相关知识点)
任务
任务实施
反馈与评价
任务一 认识植物组织培养室
任务分析(相关知识点)
缓冲室 灭菌室 无菌操作室
实验室组成
准备室 驯化室 培养室
任务一 认识植物组织培养室
无菌操作室
水槽 天平
冰 箱
超净 工作 台 工 作 台 超净 工作 台
培养架
培 养 瓶 架
培调
培养架 培养架
高压 灭菌 锅
烘箱
缓冲室
培养架
培 养 室
准备室
注:
为推拉门
任务一 认识植物组织培养室
任务实施
工作前准备
成立、划分课程兴趣小组或根据班级具体情况进行合理分组
工作实施
以小组为单位,根据任务单,联系相关的知识点绘制出一幅比较 合理的植物组织培养室的平面图
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任务
任务提出(认识植物组织培养室) 任务分析(相关知识点) 任务实施 反馈与评价
任务一 认识植物组织培养室
任务分析(相关知识点)
灭菌室 准备室
缓冲室
实验室组成
驯化室
无菌操作室 培养室
水槽
培 养 瓶 架
任务一 认识植物组织培养室
无菌操作室
天平 冰
箱 超净 工作
培养架 驯
台
任务一 认识植物组织培养室
反馈与评价
1
根据要求完成任务,提交工作总结报告(以植物 组织培养室的平面图为主)
老师对各组的任务完成情况进行点评,最后对此
任务完成情况依据工作考核标准
作
培养架
仪
台
工 作 台
器 药 品 柜
超净 工作 台
空调
培养架
高压 灭菌 锅
烘箱
准备室
缓冲室
培养架 培 养 室
培养架
注:
为推拉门
任务一 认识植物组织培养室
任务实施
工作前准备
成立、划分课程兴趣小组或根据班级具体情况进行合理分组
工作实施
以小组为单位,根据任务单,联系相关的知识点绘制出一幅比较 合理的植物组织培养室的平面图