植物类黄酮检测试剂盒(比色法)
蔬菜水果中黄酮和黄酮醇含量检测
蔬菜水果中黄酮和黄酮醇含量检测检测蔬菜和水果中黄酮类化合物的含量。
方法采用反相高效液相色谱方法，选用C18色谱柱，以甲醇/0.1%磷酸水溶液（v/v，3/2）作为流动相进行洗脱，柱温30℃，流速1.0mL/min，在339nm波长下进行检测。
结果槲皮素分布最为广泛，为主要的黄酮类化合物；蔬菜和水果中槲皮素、山奈酚、芹菜素、异鼠李黄素和毛地黄黄酮的含量范围分别为0～10.65mg/100g、0～11.67mg/100g、0～13.93mg/100g、0～10.44mg/100g和0～5.72mg/100g。
结论不同蔬菜和水果中黄酮类化合物的组成和含量存在差异。
夏季蔬菜中槲皮素、山奈酚、异鼠李黄素、毛地黄黄酮、芹菜素含量最高的种类分别是紫生菜、小葱、紫色甘蓝、紫生菜、旱芹叶。
夏季水果中槲皮素、山奈酚、异鼠李黄素、毛地黄黄酮、芹菜素含量最高的种类分别是油桃、油桃、李子、油桃、圣女果（红色）。
黄酮类化合物（flavonoids），又称类黄酮，是指具有色酮环与苯环为基本结构的一类化合物的总称，是多酚类化合物中最大的一个亚类，广泛存在于蔬菜和水果中。
其基本骨架具有C6-C3-C6的特点，即由2个芳香环A和B，通过中央三碳链相互连结而成的一系列化合物（图1）。
按其结构可分为黄酮、黄酮醇、黄烷酮、黄烷酮醇、异黄酮、双黄酮、花青素、查耳酮及其苷等[1]，自然界中最常见的是黄酮芹菜素（apigenin）、毛地黄黄酮（luteolin）和黄酮醇槲皮素（quercetin）、山奈酚（kaempferol）、异鼠李黄素（isorhamntin）。
研究发现黄酮类化合物具有多种生物学作用和药理学特性，如抗氧化、抗突变、抗衰老、抗肿瘤、抗菌等生物学作用[2]。
因此，黄酮类化合物对健康的影响已引起人们广泛的关注，成为营养学及药理学研究的热点。
尽管大多数的研究均已经证实了黄酮类化合物具有多种生物学作用，但目前的观点普遍认为黄酮类化合物对人体健康促进作用的发挥主要依赖于它们的摄入量和生物利用度。
四川植物类黄酮测检测试剂盒介绍
四川植物类黄酮测检测试剂盒介绍以下是四川植物类黄酮测检测试剂盒介绍：（1）常规染色液：苏木素伊红（HE）染色液、苏木素伊红混合染色液（一步法）、Harris苏木素、Gill苏木素、Delafield苏木素、Carazzi 苏木素、Core苏木素、伊红染色液（进口水溶）；（2）结蹄组织和肌纤维染色：网状纤维染色液、Masson三色染色液、Pollak三色染色液、天狼星红染色液、Van Gieson染色液、弹力纤维染色液（Gomori醛品红法）、Russell改良Movat五色套染染色液、肌纤维染色液；（3）微生物染色：吉姆萨染色液、瑞氏-吉姆萨复合染色液、抗酸染色液、革兰氏染色液、标准鲁哥氏染色液（Lugol's碘液,1%）、Lugol's 碘液（5%,无菌）、鞭毛染色液、布氏杆菌染色液、幽门螺旋杆菌染色液、麻风杆菌染色液、乙型肝炎病毒染色液、病毒包涵体染色液（亚甲蓝伊红法）、石碳酸复红染色液、改良苯酚品红染色液、螺旋体染色液、异染颗粒染色液、乳酸酚棉蓝染色液、乳酚油、甘油-孔雀绿染色液、甘油-亚甲蓝染色液、印度墨汁、吕氏碱性美蓝染色液、亚甲基蓝染色液；（4）病理沉着物和色素染色：普鲁士蓝染色液、Masson-Fontana 黑色素染色液、脂褐素染色液、钙盐染色液、尿酸盐染色液、茜素红S染色液；（5）碳水化合物染色：糖原PAS染色液、AB-PAS染色液、黏液卡红染色液、黏液HID-AB染色液、Alcian阿利新蓝染色液（pH2.5）、黏蛋白染色液、淀粉样物质染色液、纤维素染色液；（6）神经组织染色：Luxol Fast Blue髓鞘染色液、改良Bielschowsky 神经染色液、尼氏染色液（焦油紫法）、核仁组成区嗜银蛋白染色液（AgNOR Stain）；（7）脂类和核酸类染色：油红O染色液、苏丹黑B染色液、甲基绿-派络宁染色液；（8）酶类染色：碱性磷酸酶染色液、酸性磷酸酶染色液、乙酰胆碱酯酶染色液、α-乙酸萘酚酯酶染色液（α-NAE法）、葡萄糖-6-磷酸酶染色液、ATPase染色液（钙钴法）、琥珀酸脱氢酶染色液、乳酸脱氢酶染色液（四唑盐法）、过氧化物酶染色液；（9）骨类染色：改良番红O-固绿软骨染色液、Goldner三色染色液；（10）植物染色：醋酸洋红染色液、花粉活力染色液（TTC法）、GUS染色液、亚历山大染色液；（11）细胞染色：巴氏染色液、迪夫染色液、台盼蓝染色液、中性红染色液、网织红细胞染色液、詹纳斯绿B染色液、线粒体染色液、甲苯胺蓝染色液、红细胞/白细胞/血小板/精子计数稀释液、精子活体染色液、精子形态学染色液、DAPI染色液、Heinz小体染色液、基底膜六胺银染色液、碱性蛋白染色液；（12）染色其他：硫堇染色液、脱氧胆酸钠溶液、溶液（1%）、酸性乙醇分化液（1%）等；（13）指示剂：刚果红指示剂、溴酚蓝指示剂、酚酞指示剂、绿-甲基红指示剂等。
植物类黄酮(Flavonoid)试剂盒使用说明
植物类黄酮（Flavonoid）试剂盒使用说明分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1330规格：50管/24样产品内容：提取液：60%乙醇，自备。
试剂一：液体3mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体3mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：类黄酮是一类多苯化合物，属于植物次生代谢物，对人体具有消炎，抗菌，降血脂，清除体内羟自由基，预防癌症等作用。
在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成在502nm处有特征吸收峰的红色络合物，测定样品提取液在502nm处的吸光值，即可计算样品类黄酮含量。
自备实验用品及仪器天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
操作步骤：一、类黄酮提取将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.1g，加入2.5mL提取液，用超声提取法进行提取，超声功率300W，破碎5s，间歇8s，60℃，提取30min。
10000g，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至2.5mL，待测。
二、测定操作表对照管测定管样本待测液（μL）200200试剂一（μL）5050混匀，25℃静置5min试剂二（μL）50混匀，25℃静置5min试剂三（μL）40040060%乙醇（μL）350350。
混匀，25℃静置15min，对照管调零，1mL玻璃比色皿，测定A502三、类黄酮含量计算公式标准曲线：y=6.2096x+0.0008，R2=0.9996类黄酮含量（mg/g）=（A502-0.0008）÷6.2096×V反总÷(V样÷V样总×W)=2.013×A502÷WV样总：加入提取液体积，2.5mL；V反总：反应总体积，1mL；V样：反应中样品体积，0.2mL；W：样品质量，g注意事项：1、吸光值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
黄酮含量测定实验报告
黄酮含量测定实验报告1. 实验目的本实验旨在探究不同食材中黄酮含量的差异，并利用比色法测定黄酮的含量。
2. 实验原理比色法是利用物质对可见光的吸收特性进行定量分析的方法。
黄酮是一类具有广泛生物活性的天然化合物，常常用作药物和食品添加剂。
黄酮的浓度可以通过其在特定波长下的吸光度来确定。
3. 实验步骤3.1 准备工作- 准备所需食材样品，如黄芩、枸杞、山楂等。
- 准备试剂：甲醇、石油醚、2N盐酸、硼酸溶液、盐酸。
3.2 提取黄酮1. 将所选食材样品粉碎，并称取3克样品。
2. 将样品加入25mL石油醚，室温条件下搅拌30分钟，以去除油脂。
3. 过滤样品，将滤液收集入锥形瓶中。
4. 再加入25mL甲醇，室温条件下搅拌30分钟，以提取黄酮。
5. 过滤后，用甲醇定容至100mL。
3.3 构建标准曲线1. 取黄酮标准品，分别称取0.1g、0.2g、0.3g、0.4g和0.5g，置于50mL锥形瓶中。
2. 分别加入25mL石油醚和25mL甲醇，按上述方法提取黄酮。
3. 过滤后，用甲醇定容至50mL，得到浓度分别为2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL和10mg/mL的黄酮溶液。
3.4 测定样品黄酮含量1. 将提取得到的样品溶液取5mL，并用甲醇定容至25mL。
2. 取适量样品溶液置于比色皿中，以甲醇为对照组。
3. 在波长为380nm的紫外可见光谱仪中测定吸光度。
4. 实验结果与分析4.1 标准曲线根据所得的吸光度数据，绘制出黄酮浓度与吸光度之间的标准曲线。
4.2 样品含量计算根据所测得的样品吸光度值，利用标准曲线可得到样品中黄酮的浓度。
5. 实验讨论与结论本实验利用比色法测定了不同食材中黄酮的含量。
通过对标准曲线的测定和样品吸光度的测量，可以准确计算出样品中黄酮的含量。
本实验的结果对于食品科学和药物研发具有重要意义。
黄酮作为一种天然化合物，具有多种生物活性，可以抗氧化、抗炎和抗肿瘤等。
因此，了解黄酮含量对于评估食材的营养价值和药物疗效具有指导意义。
中药总黄酮的含量测定方法
中药总黄酮的含量测定方法
中药总黄酮的含量测定方法常用的有以下几种：
1. 酸碱比色法：先将中药样品提取，然后加入酸性试剂，使黄酮化合物转化为黄色络合物，再通过比色法测定黄色染色的强度，从而计算出黄酮的含量。
2. 高效液相色谱法（HPLC）：中药样品经过适当溶剂提取后，利用高效液相色谱仪对黄酮进行分离和检测，通过峰面积或峰高与标准品进行比较计算黄酮的含量。
3. 紫外分光光度法：根据黄酮化合物在紫外可见光区域的吸收特性，在一定波长范围内测定样品的吸光度，通过比较吸光度与标准曲线计算黄酮的含量。
4. 荧光法：将黄酮溶液与适当溶剂混合后，在特定波长下激发，并测定荧光强度，通过标准曲线计算黄酮的含量。
以上方法可根据实际研究需求和条件选择适合的方案进行测定。
值得注意的是，不同的中药样品可能有不同的成分和浓度，因此在具体测定过程中需根据样品特点进行方法优化和验证。
黄酮提取修改
植物中黄酮化合物的提取与测定一、实验目的：学习植物中黄酮化合物的提取的一般方法；学习植物中黄酮化合物含量测定的方法，以及紫外分光光度计的使用方法。
二、实验原理：黄酮类化合物的提取主要是根据被提取物的性质及伴存的杂质来选择适合的提取溶剂，苷类和极性较大的苷元，一般用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇、水或某些极性较大的混合溶剂(如甲醇－水：1∶1)进行提取。
大多数苷元宜用极性较小的溶剂如乙醚、氯仿、乙酸乙酯等来提取。
但乙醇和甲醇是最常用的黄酮类化合物的提取溶剂。
银杏叶与桔子皮中的黄酮来化合物大部分属于苷类，故此次试验选用乙醇作为溶剂。
三、实验仪器：紫外分光光度计、电子天平、超声波提取机、漏斗、滤纸、三角瓶、50ml移液管、容量瓶、移液枪、烧杯等。
四、所配试剂：实验试剂：橘子皮、银杏叶、95%乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠。
配制试剂：30%乙醇：准确移取16ml 95%乙醇放置于50ml容量瓶中并定容至刻线。
5%NaNO2溶液：准确称取5g NaNO2放置于烧杯中溶解，移至100ml容量瓶中并定容至刻线。
10% Al(NO3)3溶液：准确称取10g Al(NO3)3放置于烧杯中溶解，移至100ml容量瓶中并定容至刻线。
1mol/L NaOH溶液：准确称取4gNaOH放置于烧杯中溶解，移至100ml容量瓶中并定容至刻线。
五、实验步骤：1、准确称取橘子皮、银杏叶各1克，分别放置于三角瓶中，并分别加95%乙醇溶液50ml，塞上棉塞，放置于超声波提取机中，在45℃时提取2h。
2、配置空白对照：准确吸取30%乙醇5ml，在吸取5% NaNO2溶液0.3ml，放置6min；再加10% Al(NO3)3溶液0.3ml，放置6min，最后加1mol/LNaOH溶液4ml，放置15min。
备用。
3、溶液用漏斗过滤，取滤液备用。
4、.黄酮化合物的鉴定：吸取5ml的滤液，加入少量镁粉，再滴加2-3滴浓盐酸，摇匀，放置2min，溶液颜色呈橙色，即说明该溶液中含有黄酮化合物。
黄酮含量测定的方法
黄酮含量测定的方法黄酮是一类具有丰富生物活性的化合物，广泛存在于植物中。
黄酮化合物在医药、保健品、食品等领域有着重要的应用价值。
因此，黄酮含量的测定方法成为研究者们关注的焦点。
目前，常用的黄酮含量测定方法主要有色谱法、光谱法、色度法和电化学法等。
1. 色谱法：色谱法是目前应用最广泛的黄酮测定方法之一，包括高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）。
（1）HPLC法：该方法利用高效液相色谱仪，以色谱柱为分离介质，通过调节流动相的组成和流速，完成黄酮化合物的分离和检测。
此外，还可以采用紫外检测器（UV）或荧光检测器（FL）对黄酮进行定量分析。
（2）GC法：该方法适用于挥发性和具有一定蒸汽压的黄酮化合物的分析。
通过进样、分离柱和检测器的配合，实现黄酮的分离和检测。
常用的检测器有火焰离子化检测器（FID）、氮磷检测器（NPD）等。
2. 光谱法：光谱法是测定黄酮含量的快速方法之一，包括紫外-可见吸收光谱法（UV-Vis）、荧光光谱法和红外光谱法等。
（1）UV-Vis：该方法利用黄酮化合物在紫外-可见波段对特定波长光的吸收性能进行测定。
测定前可以进行适当的前处理，如提取、纯化等。
（2）荧光光谱法：该方法基于黄酮化合物的固有荧光特性，通过检测黄酮在激发光作用下发出的荧光信号强度，完成黄酮的定量分析。
（3）红外光谱法：该方法基于黄酮分子中的特定基团（如羟基、酚羟基等）对红外光的吸收特性进行测定。
测定中可以采用透射光谱法或者反射光谱法。
3. 色度法：色度法是根据黄酮化合物于酸性或碱性条件下与金属离子或其他有色试剂形成络合物，并通过比色法测定络合物的光密度来确定黄酮含量的方法。
常见的色度法包括铝盐试剂法、铁盐试剂法等。
4. 电化学法：电化学法是指利用黄酮化合物的电化学性质进行测定，包括循环伏安法（CV）、方波伏安法（SWV）等。
这些方法利用某些黄酮化合物的氧化还原反应，在电化学电极上形成电流信号，并通过电流的大小和形状进行定量分析。
黄酮含量测定知识讲解
黄酮含量测定一、黄酮含量的测定方法1、样品的处理取材料地上部分洗净，晾晒至表面无水分，置于干燥箱中，80℃下干燥至恒重，磨成粉末，过筛待用。
2、标准曲线的绘制准确称取芦丁对照品20mg，置于100ml容量瓶中，加体积分数70%乙醇溶解至刻度，摇匀得0.2mg/ml的对照品溶液。
然后，分别吸取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4ml，分别置于7支试管中，加水补齐至2.4ml，分别加入5%亚硝酸钠0.4ml，摇匀，放置6min。
再加入10%硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6min。
加入4.3%氢氧化钠溶液4ml，然后分别加2.2ml水，摇匀，放置15min。
以空白试剂为参比，用紫外分光光度计在500nm波长处测定吸光度。
3、黄酮的提取（微波提取法）准确称取干燥至横重的野生马齿苋粉末3份，每份1g，分别置于锥形瓶中，喷洒适量蒸馏水润湿，用中高火微波处理90s。
加入一定量体积分数为70%的乙醇溶液，于80℃恒温水浴加热提取1.5h，趁热过滤，洗涤残渣，用70%乙醇定容于50ml容量瓶中，摇匀，得黄酮提取液。
4、黄酮含量的计算吸取分别黄酮提取液1ml，加1.4ml蒸馏水，摇匀，加入5%亚硝酸钠0.4ml，摇匀，放置6min。
再加10%硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6min。
加入4.3%氢氧化钠溶液4ml。
加入蒸馏水2.8ml，摇匀放置15min。
以蒸馏水代替黄酮提取液的空白试剂为参比，用紫外分光光度计在500nm波长出测定吸光度。
带入标准曲线中，计算黄酮含量。
总黄酮含量（mg/g）= c*v/m式中：c为1ml样品中测得的黄酮含量（mg）；v为提取液总体积（ml）；m为叶片干重。
二、矿质元素的测定每份需0.2g。
南京建成 产品目录及价格表 17-3-22
抗坏血酸过氧化物酶（APX）测试盒（紫外 比色法） 抗坏血酸氧化酶（AAO）活性测试盒（比色 抗坏血酸（AsA）含量测试盒（紫外比色 γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（GCL）测试盒 （比色法） 硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）测试盒（比 色法） 硫氧还蛋白过氧化物酶（TPX）测试盒（紫 外比色法） NAD激酶（NADK）测试盒（比色法） NADH氧化酶（NOX）测试盒（比色法） 辅酶ⅡNADP（H）含量测试盒（比色法） 辅酶ⅠNAD（H）含量测试盒（比色法） 腺苷脱氨酶（ADA）测试盒（酶比色法） （微板法） 游离脂肪酸（NEFA）测试盒（酶法，双试 剂）（微板法） 5’－核苷酸酶（5’-NT）测试盒（酶比色法） （微板法） 糖化血清蛋白（GSP）试剂盒（NBT法） （微板法） 胆碱酯酶（CHE）测试盒（速率法）(微板 白蛋白（ALB）测定试剂盒（带标准：溴甲 酚绿法） 柠檬酸合成酶（CS）测定试剂盒（微板法） 柠檬酸合成酶（CS）测定试剂盒（微板法） 植物提取液 蔗糖测定试剂盒（国标法） 蔗糖测定试剂盒（紫外比色法） γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）测定试剂 盒（速率法） 糜蛋白酶测定试剂盒 谷氨酸测定试剂盒（紫外比色法） 超微量ATP酶测试盒（Na+K+、Ca2+Mg2+、 T－ATP酶） 超微量ATP酶测试盒（Na+K+、Ca2+Mg2+、 T－ATP酶） 超微量ATP酶测试盒（Na+K+、Ca2+Mg2+、 T－ATP酶） 超微量ATP酶测试盒（Na+K+、Ca2+Mg2+、 T－ATP酶） 超微量ATP酶测试盒（Na+K+、Ca2+Mg2+－ ATP酶） 超微量ATP酶测试盒（Na+K+、Ca2+Mg2+－ ATP酶）
植物类黄酮-3’,5’-羟化酶（F3 ’ ,5 ’H ）试剂盒（ELISA）使用说明书
植物类黄酮-3’,5’-羟化酶（F3 ’ ,5 ’H ）试剂盒（ELISA）使用说明书⚫本试剂盒用于体外定量检测组织、细胞及相关液体样本中植物类黄酮-3’,5’-羟化酶（F3 ’ ,5 ’H ）的含量。
⚫有效期：6个月⚫保存条件：2-8℃⚫本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被植物类黄酮-3’,5’-羟化酶（F3 ’ ,5 ’H ）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的植物类黄酮-3’,5’-羟化酶（F3 ’ ,5 ’H ）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。
最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
类黄酮糖基转移酶（UFGT）试剂盒说明书
类黄酮糖基转移酶（UFGT）试剂盒说明书紫外分光光度法：50管/48样注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：类黄酮是植物次生代谢产物，糖基化是类黄酮基本结构形成的最主要的修饰反应之一，提高了类黄酮苷元的化学稳定性，这一过程主要由类黄酮糖基转移酶催化的，使类黄酮-OH与UDPG反应，是黄酮合成途径中的关键酶。
测定原理：类黄酮糖基转移酶催化花青素与尿苷二磷酸葡萄糖反应产生花青苷，主要以矢车菊素3-葡萄糖苷（C3G）形式存在，用HPLC检测产物可反映类黄酮糖基转移酶的酶活性。
自备实验用品及仪器：天平、研砵、离心机、恒温水浴锅、100目筛、高校液相色谱、针头过滤器（水系、0.22μm）、滤膜（水系、0.45μm）、耐水C18柱（4.6×250mm）、样品瓶、甲酸、甲醇（色谱级）、超纯水试剂组成和配制：提取液：液体50m L×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加全部试剂三溶解。
试剂二：液体5m L×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体8m L×1瓶，4℃保存。
标准品：标准品×1支，-20℃保存。
样本处理：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：2~5的比例（建议称取约0.5g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。
10000g ，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
实验前的准备工作：1、检测产物制备对照管测定管样本（μL）100 100试剂二（μL）100试剂一（μL）150充分混匀，30℃反应30min试剂一（μL）150试剂二（μL）100 充分混匀，10000g，4℃，离心10min，取上清过0.45μm水系滤头，待检测。
2、将500 mL超纯水和500 mL甲醇用0.45 μm的滤膜抽滤，以除去溶剂中的杂质，防止堵塞色谱柱。
（注：蒸馏水用水系滤膜抽滤，甲醇用有机系滤膜抽滤）。
3、流动相的配制：流动相A为1.6%甲酸水溶液；流动相B为1.6%甲酸甲醇溶液。
植物类黄酮(Flavonoid)试剂盒说明书
货号：MS1506 规格：100管/96样植物类黄酮（Flavonoid）试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：类黄酮是一类多苯化合物，属于植物次生代谢物，对人体具有消炎，抗菌，降血脂，清除体内羟自由基，预防癌症等作用。
测定原理：在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成在510nm处有特征吸收峰的红色络合物，测定样品提取液在510nm处的吸光值，即可计算样品类黄酮含量。
自备实验用品及仪器：天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制：提取液：60%乙醇，自备。
试剂一：液体1mL×1管，4℃保存。
试剂二：液体1mL×1管，4℃保存。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
类黄酮提取：将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.02g，加入2mL提取液，60℃振荡提取2h，10000g，25℃，离心10min，取上清待测。
测定操作表：1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至510nm，蒸馏水调零。
类黄酮含量计算公式：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y = 5.02x+0.0007，R2 = 0.9996类黄酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷5.02×V样÷(V样÷V样总×W)第1页，共2页= 0.398×（ΔA -0.0007）÷WV样总：加入提取液体积，2.5mL； V样：反应中样品体积，0.108mL； W：样品质量，g b.用96孔板测定的计算公式如下标准曲线：y = 2.51x+0.0007，R2 = 0.9996类黄酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷2.51×V样÷(V样÷V样总×W)= 0.797×（ΔA -0.0007）÷WV样总：加入提取液体积，2mL；V样：反应中样品体积，0.108mL；W：样品质量，g最低检出限为10µg/g。
Elabscience
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®植物类黄酮比色法测试盒Plant Flavonoids Colorimetric Assay Kit产品货号：E-BC-K284-S产品规格：50 assays(36 samples)/100 assays(86 samples)检测仪器：紫外-可见光分光光度计（510 nm）使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测植物组织样本中的类黄酮的含量。
检测原理在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成红色络合物，测定样品提取液在510 nm处的吸光值，即可计算样品类黄酮含量。
提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器：紫外-可见光分光光度计（510 nm）试剂：双蒸水或去离子水、60%乙醇试剂准备①检测前，试剂盒中的试剂平衡至室温。
②不同浓度标准品的稀释：样本准备①样本处理取新鲜植物组织(5-10 g)，用水冲洗表面，滤纸吸干，放置于真空干燥箱80o C烘干至恒重(两次称量所得质量之差不超过0.3 mg)，粉碎，过40目筛，室温密封保存。
称取0.02 g处理后的植物组织粉末，加入2 mL 60%乙醇，用恒温震荡培养箱60o C震荡2小时，25o C，10000×g离心10 min，取上清，待测；或者用超声波细胞粉碎机进行提取，超声功率300 W，破碎3 s，间歇4 s，提取30 min，25o C，10000×g离心10 min，取上清液待测。
植物根系活力检测试剂盒(萘胺比色法)
植物根系活力检测试剂盒(萘胺比色法)简介：植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和代谢水平即根系活力直接影响植物地上部的生长和营养状况以及最终产量，是植物生长的重要生理指标之一。
根系能氧化萘胺生成红色的萘胺化合物，根系对萘胺的氧化能力与其呼吸强度有密切联系。
可以根据根系表面着色深浅，通过定量溶液中未被氧化的萘胺的量，以定量测定根系活力。
Leagene 植物根系活力检测试剂盒(萘胺比色法)检测原理是在弱酸性条件下，以萘胺为底物，萘胺与对氨基苯磺酸、亚硝酸盐作用生成稳定的红色偶氮化合物，于分光光度计检测吸光度，以吸光度变化所需萘胺进行计算。
该试剂盒主要用于定量或定性测定植物根系活力。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、蒸馏水2、滤纸3、离心管或试管4、恒温箱或水浴锅5、比色杯6、分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、配制根系Assay buffer 工作液：取适量萘胺标准(100μg/ml)、根系Assay buffer，按萘胺标准(100μg/ml)：根系Assay buffer：蒸馏水一定比例混合，即为根系Assay buffer 工作液，即配即用，不宜久置。
2、稀释标准品：取萘胺标准溶液(100μg/ml)，按下表稀释。
加入物(ml)123456编号名称TP101360T Storage试剂(A):萘胺标准(100μg/ml)500ml RT 避光试剂(B):根系Assay buffer 500ml RT 试剂(C):磺胺酸显色液42mlRT 避光使用说明书1份萘胺标准(100μg/ml)0.10.20.40.60.81蒸馏水 1.9 1.8 1.6 1.4 1.21萘胺浓度(μg/ml)510203040503、准备样品：取植物须根系，洗净，用滤纸吸干，完全浸没于根系Assay buffer工作液，室温静置，取浸泡液即为待测样品。
4、加样：按照下表设置空白管、对照管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
植物类黄酮检测试剂盒(比色法)
植物类黄酮检测试剂盒(比色法)简介：类黄酮(Flavonoids)是植物重要的一类次生代谢产物，它以结合态（黄酮苷）或自由态（黄酮苷元）形式存在于水果、蔬菜、豆类和茶叶等许多食源性植物中。
Leagene 植物类黄酮检测试剂盒(比色法)检测原理是类黄酮溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提类黄酮，根据提取液的吸收光谱特性，可利用分光光度计在特定波长(325nm)处测定其吸光度，通过与标准曲线比较，计算出类黄酮含量，主要用于植物组织或果实中类黄酮的提取以及定量检测类黄酮含量。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织2、 研钵或匀浆器3、 离心管4、 滤纸或纱布5、 比色杯6、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 类黄酮提取：①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品，置于4℃预冷的研钵或匀浆器。
②加入4℃预冷的 Flavonoids Assay buffer ，充分研磨或匀浆后转入10ml 离心管中。
用Flavonoids Assay buffer 冲洗研钵或匀浆器并转移至离心管中，补加Flavonoids Assay buffer 至。
③4℃避光静置，期间摇动2~3次，然后过滤至离心管中，滤液即为类黄酮粗提液。
2、 稀释Flavonoids 标准溶液：取适量的Flavonoids 标准(1mg/ml)，按下表进行稀释：编号 名称TP1113 50T Storage试剂(A): Flavonoids 标准(1mg/ml) 5ml 4℃ 避光 试剂(B): Flavonoids Assay buffer 500mlRT 避光 使用说明书1份加入物(ml) 1 2 3 4 5 6 Flavonoids标准(1mg/ml) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 1蒸馏水0.9 0.8 0.6 0.6 0.50 Flavonoids浓度(mg/ml) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 1 3、加样：按照下表设置空白管、对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡，小心混匀。
总黄酮的含量测定的操作流程图-分光光度法与比色法-简易图解-李熙灿-Xican-Li
总黄酮的含量测定方法:操作流程图2017。
11【简介】黄酮包括黄酮、异黄酮、黄酮醇、二氢黄酮醇、双黄酮等，他们大多同时存在于某一种中药及其他植物中。
为了测定这些黄酮的总含量,便建立了总黄酮的检测方法.其原理是:黄酮中的处于相邻羰基、羟基可以共同络合金属而显色。
根据显色之深浅(即吸光度A值之大小）,判断的总黄酮含量之高低。
常用的显色剂是亚硝酸钠-硝酸铝，检测波长是508nm。
采用分光光度计，并以某种标准品绘制工作曲线，依该曲线所建立的回归方程,计算其含量。
【检测方法与实验流程图】图1实验流程图【文献依据】Xican Li, Dongfeng Chen，Ying Mai，Bi Wen，Xiaozhen Wang。
Concordance between antioxidant activities in vitro and chemical components of Radix Astragali。
Natural Product Research。
2012;26：1050—1053.【溶液配制】1。
5%亚硝酸钠溶液配制：称取0。
5g亚硝酸钠（NaNO2）固体，加蒸馏水至10mL，即得.2。
10％硝酸铝溶液配制:称取1g硝酸铝固体，加蒸馏水至9mL,即得。
3。
4％氢氧化钠溶液配制：称取2g氢氧化钠固体，加蒸馏水至48mL,即得。
4. 芦丁标准液配制:精密称取芦丁10。
4 mg置25mL容量瓶中,加80％乙醇溶液溶解、定容。
5。
样品液配制:视样品的溶解性,可选用甲醇、乙醇、95乙醇、水作溶液.浓度尽量高,但要有精确的数值。
【标准曲线绘制】（芦丁)精密量取0。
0，0。
2，0.4，0.6，0.8，1。
0 mL 芦丁标准液，代替上图中的 “样品液0。
5mL ”，依“实验流程图”，测A 508nm 值：绘制标准曲线如下：A 508n m Concentration (mg/ml)总黄酮测定的标准曲线（芦丁）y = -0.00339 + 11。
植物丙二醛检测试剂盒(TBA比色法)
植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)简介：动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。
丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA在内的复杂化合物，此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。
植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)(Plant MDA Assay Kit with TBA)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒，是采用一种基于MDA和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应。
丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应，形成红色的MDA-TBA加合物，MDA-TBA加合物在532nm处有最大吸收，该复合物的吸光系数为155mmol/(L.cm)，并且在600nm波长处有最小吸收。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、样本处理：①制备提取液：取适量的植物根、茎、叶子、种子等，称量后剪碎，充分匀浆(一般取0.4～1g植物样品即可)。
离心，取上清液待用，该上清液即为MDA提取液。
②样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量植物样品的MDA含量。
测定蛋白浓度非必须步骤，亦可采用经验公式计算。
本试剂盒对于样品中的常见化学成分的兼容性参考下表：试剂类别化学成分是否干扰缓冲液HEPES (100mM) 否Borate (50mM) 否Phosphate (100mM) 否Tris (25mM) 否CHAPS (≤1%) 否编号名称TO102350TTO1023100TStorage试剂(A): 组织匀浆液250ml 500ml RT 避光试剂(A): TBA 0.35g 0.7g RT 避光试剂(C): 抗氧化剂0.5ml 1ml RT 避光试剂(D): MDA标准品(1mmol/L) 0.5ml 1ml -20℃避光使用说明书去垢剂 Triton X-100 (≤1%) 否 Tween 20 (≤1%)否抑制剂/螯合剂PMSF (≤200μM) 否 EDTA (≤1mM) 否 EGTA (≤1mM) 否 Antipain (≤100μg/ml) 否 Chymostatin (≤10μg/ml) 否 Leupeptin (≤10μg/ml) 否 Trypsin (≤10μg/ml)否 其他 Glycerol (≤10%) 否 Sucrose (250mM)是2、 TBA 工作液的配制：称取适量TBA ，用组织匀浆液配制成浓度为TBA 工作液3、 稀释标准品：取适量标准品用组织匀浆液稀释至1、2、5、10、20、50μM ；如果进行简易快速检测，标准品直接稀释10μM ，配制好的MDA 标准品4℃避光保存，至少3个月内有效。
保健食品中黄酮含量三种测定方法研究
保健食品中黄酮含量三种测定方法研究周华生;张连龙;成恒嵩;叶科航;郭靖;蒲明清【期刊名称】《现代食品科技》【年(卷),期】2009(025)011【摘要】对比色法、紫外分光光度法、高效液相色谱法对保健食品中黄酮含量的测定进行了系统研究,其线性范围、回归方程、相关性、最低检测量、精确度、回收率均达到满意的效果,可作为定量测定依据.其中比色法在10～60μg/mL,(y=4.667×104-7.8×10-3x,r=0.9995),紫外分光光度法在5～25μg/mL(y=1.420×10-3+0.028x,r=0.9998),高效液相色谱法在10～60μg/mL(y=3.3776×104+4.03×104x,r=0.9989)范围内具有良好的线性;3种方法的回收率分别为:98.6%～108.4%,98.0%～101.2%,95.4%～99.5%:RSD为0.68%,0.24%,1.24%;最低检测量为1 μg/mL,0.5μg/mL,2 ng/mL.这些方法的建立不仅为该产品质量控制提供有效保证,也为同类产品中黄酮含量测定提供有益借鉴.【总页数】5页(P1358-1362)【作者】周华生;张连龙;成恒嵩;叶科航;郭靖;蒲明清【作者单位】无锡健特药业有限公司江苏无锡 214091;无锡健特药业有限公司江苏无锡 214091;无锡健特药业有限公司江苏无锡 214091;无锡健特药业有限公司江苏无锡 214091;无锡健特药业有限公司江苏无锡 214091;无锡健特药业有限公司江苏无锡 214091【正文语种】中文【中图分类】TS207.3【相关文献】1.三氯化铝比色法测定稻壳中总黄酮含量的方法研究 [J], 宗春燕;苏学军2.发酵天龙粉中总黄酮含量测定方法研究 [J], 王颖;王立娜;刘春雨;王静;张由芹;王彦多;张云乾;王集会3.新疆大叶补血草根茎中总黄酮含量测定方法研究 [J], 李雪梅;何春霞;鲁桂华4.三种方法测定液体型保健食品中苯甲醇的含量 [J], 邸铮;伯阳;左雪;白玉;张蓉;邬国庆5.保健食品中总黄酮含量的分光光度测定法 [J], 刘维;蒲朝文;封雷;李玉萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
花叶海棠中总黄酮含量的测定
花叶海棠中总黄酮含量的测定
花叶海棠（Pyracantha fortuneana）中总黄酮含量的测定可以通过以下步骤进行：
1. 样品准备：采集花叶海棠的新鲜叶片，并将其清洗干净，去除杂质和污垢，待干燥备用。
2. 样品提取：将干燥的花叶海棠叶片粉碎，并加入适量的提取溶剂（如乙醇、甲醇等），进行浸提。
可以选择常温浸提或者超声浸提的方式，提取时间一般为1-2小时。
3. 过滤和浓缩：将提取液过滤去除固体杂质，得到澄清的提取液。
然后使用旋转浓缩仪将提取液浓缩至一定体积。
4. 分离和纯化：使用柱层析或者其他合适的色谱技术对浓缩后的提取液进行分离和纯化，以去除干扰物质。
可以选择正相或者反相柱进行分离，使用合适的溶剂体系进行梯度洗脱。
5. 总黄酮含量测定：使用紫外-可见分光光度计或者高效液相色谱系统对分离后的样品进行测定。
常用的检测波长为280 nm或者360 nm，根据样品特点和测定目的进行选择。
通过比对标准品的标准曲线或者使用外标法，可以计算出样品中总黄酮的含量。
请注意，以上仅为一般测定总黄酮含量的方法，具体步骤可能会因实验室条件和设备不同而略有差异。
在进行测定之前，请确保了解相关仪器和试剂的使用方法，并遵循实验室的安全操作规程。
三氯化铝比色法测定中药总黄酮方法的探讨
三氯化铝比色法测定中药总黄酮方法的探讨（作者：__________ 单位： __________ 邮编：___________ ）作者：马陶陶张群林李俊孟晓明黄成陈玉璞【摘要】目的探讨以芦丁作为对照品，采用三氯化铝（A1C13 ）比色法测定中药总黄酮含量的专属性，并建立A1C13比色法测定中药总黄酮含量的最优条件。
方法通过对几类典型结构的黄酮类及多酚类化合物A1C13显色前后的吸收峰（2 0 0 〜6 00 nm）进行比较，分析以芦丁为对照品的A1C13 比色法测定中药总黄酮的合理性。
结果A1C13 显色后，部分黄酮类物质在421 nm处有较强吸收。
结论采用A1C13 比色法测定中药总黄酮的含量具有合理性，并建立了A1C13 比色法测定中药总黄酮含量的最优条件。
【关键词】A1C13比色法总黄酮芦丁Abstract : Objective To discuss the speci a1ity of A1C13 co1orimetry with rutin as reference substance fo r eva1uation on the content of totai flavonoids and investigate the optimum condition of A1C13 c olorimetry. MethodsTom ake a series of flavonoids and polyphenols with typical structure with AlCl3 and measure their absorption curves at the r ange of 2 0 0 ~600 nm. Results At the wavelength of 421 nm,some flav ono id-like compo unds showed the similar absorption with rutin . Con clusi on It is reasonabl e to determine the total flavonoi ds by using AlCl3 colorimetry wi th rutin as reference substance and establish the optimum condi tion of AlCl3 colorimetry.Key words: AlC3 c olorimetry; Total f lavonoids; Rutin黄酮类化合物(Flavonoids )是以C6 —C3-C6结构为基本母核的色原烷或色原酮的衍生物，以其广泛的药理作用倍受青睐，而中药材中总黄酮的含量测定成为近年来研究黄酮化合物所关注的焦点。
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植物类黄酮检测试剂盒(比色法)
简介：
类黄酮(Flavonoids)是植物重要的一类次生代谢产物，它以结合态（黄酮苷）或自由态（黄酮苷元）形式存在于水果、蔬菜、豆类和茶叶等许多食源性植物中。
槲皮素(Quercetin)是最典型的类黄酮，其在C3位羟基上结合糖分子即形成植物中普遍的成分—芸香苷(Flavonoids)。
柑橘属的多种水果均含有大量的黄酮化合物，如橘红素(Tangeretin)和川陈皮素(Nobiletin)，大豆中含有一种异黄酮化合物—大豆异黄酮，茶叶中的茶多酚是由没食子酸和类黄酮—儿茶酚组成。
Leagene 植物类黄酮检测试剂盒(比色法)检测原理是类黄酮溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提类黄酮，根据提取液的吸收光谱特性，可利用分光光度计在特定波长处测定其吸光度，通过与标准曲线比较，计算出类黄酮含量。
该试剂盒主要用于植物组织或果实中类黄酮的提取以及定量检测类黄酮含量。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织
2、研钵或匀浆器
3、离心管
4、滤纸或纱布
5、比色杯
6、分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、类黄酮提取：
①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品，置于预冷的研钵或匀浆器。
②加入预冷的l Flavonoids Assay buffer ，充分研磨或匀浆后转入离心管中。
用Flavonoids Assay buffer 冲洗研钵或匀浆器并转移至离心管中，补加Flavonoids Assay
编号
名称
TP111350T Storage
试剂(A):Flavonoids 标准(1mg/ml)5ml 4℃避光试剂(B):Flavonoids Assay buffer 500ml
RT 避光使用说明书
1份
buffer。
③避光静置，期间摇动，然后过滤至离心管中，滤液即为类黄酮粗提液。
2、稀释Flavonoids标准溶液：取适量的Flavonoids标准(1mg/ml)，按下表进行稀释：加入物(ml)123456 Flavonoids标准(1mg/ml)0.10.20.30.40.51
蒸馏水0.90.80.60.60.50 Flavonoids浓度(mg/ml)0.10.20.30.40.51
3、加样：按照下表设置空白管、对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免
产生气泡，小心混匀。
如果样品中的类黄酮活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
样品的检测最好能设置2平行管，求平均值。
加入物(ml)空白管标准管测定管
Flavonoids Assay buffer1——
系列Flavonoids标准(1-6号管)—1—
类黄酮粗提液——1
4、测定：以分光光度计，1cm的比色杯，以空白调零，测定系列标准管、测定管在处吸
光度。
计算：
以1-6号管系列Flavonoids标准浓度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，直接计算直线回归方程。
组织样品的类黄酮(mg/g)={C×V T}/(W×V1)
式中：C=根据标准曲线求得的测定管Flavonoids含量(mg/ml)
V T=类黄酮粗提液总体积(ml)=8
V1=加样时所用类黄酮粗提液的体积(ml)=1
W=样品鲜重(g)
液体样品的类黄酮(mg/ml)=C×N/V
式中：C=根据标准曲线求得的测定管Flavonoids含量(mg/ml)
V=加样时所用类黄酮粗提液的体积(ml)=1
N=稀释倍数
注意事项：
1、为了避免类黄酮见光分解，操作时应尽量避光，研磨或匀浆时应尽量缩短时间。
2、取样量、试剂用量应根据类黄酮含量适当调整。
3、Flavonoids Assay buffer应密闭避光保存，避免有效成分挥发。
4、如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应考虑酶标仪的最大检测体
积。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关：
编号名称
CS0201细胞线粒体分离试剂盒
DC0032Masson三色染色液
DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液
NR0001DEPC处理水(0.1%)
PS0013RIPA裂解液(强)
TC1167尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)
TO1013丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)。