ZT、KT和2,4—D对香蕉胚性愈伤组织诱导的影响
不同培养基对水稻胚性愈伤组织诱导及分化的影响
不同培养基对水稻胚性愈伤组织诱导及分化的影响刘书梅;王姗姗;辛晓云;王玲玲;朱正歌【摘要】以水稻成熟胚为材料诱导愈伤组织,统计在不同基本培养基上的愈伤诱导率以及绿苗分化率,分析不同基本培养基及外源激素的含量和比例时愈伤组织生长及分化的影响.结果表明,试验材料对基本培养基具有选择性,MS培养基对籼稻种胚愈伤的诱导培养效果较好,NB培养基则更适合粳稻种胚愈伤的诱导培养;诱导继代培养基中加入多种氨基酸组合可有效提高出愈率和分化率,特别是粳稻的愈伤组织的诱导和分化需要多种氨基酸的共同作用;不同基因型水稻材料对激素和氨基酸组合的需求不同.%Rice calli of two subspecies were induced from mature seeds, callus induction and regeneration rate were analyzed in this experiment. The result showed that NB medium was most suitable for Nipponbare ( Oryza sativa L. subsp. Japonica) ; MS, NB and LS medium were all appropriate for Longtepu ( Oryza sativa L. subsp. Indica) . Some kinds of amino acids and hormone were necessary for Nippobare calli. It indicated that the rice calli induction and regeneration rate was related to rice variety.【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2011(028)004【总页数】3页(P54-56)【关键词】水稻;成熟胚;愈伤组织;愈伤诱导率;绿苗分化率【作者】刘书梅;王姗姗;辛晓云;王玲玲;朱正歌【作者单位】石家庄科技工程职业学院,石家庄,050800;河北师范大学生命科学院,石家庄,050016;河北师范大学生命科学院,石家庄,050016;河北师范大学生命科学院,石家庄,050016;河北师范大学生命科学院,石家庄,050016;河北师范大学生命科学院,石家庄,050016【正文语种】中文【中图分类】Q943.1植物基因工程及分子生物学技术的发展,为作物遗传育种开辟了一条崭新的途径。
1.5倍行距,空1行
1.5倍行距，空1行2018届 分类号:单位代码:104521.5倍行距，空2行1.5倍行距，空1行毕业论文1.5倍行距，空1行 不同浓度的2,4-D 对小麦胚性愈伤组织的诱导（小三号宋体、加粗、居中，英文用Time New Roman,不超过36个字。
只要中文题目。
）1.5倍行距，空3行姓 名 刘妍学 号 201308910240 年 级2013级 专 业 生物科学 系 （院）生命科学学院 指导教师从此页开始，所有页边距如下设置：页边距上：2.54 cm ，页边距下2.54 cm ，页边距左3.17 cm ，页边距右3.17 cm此处1.5倍行距，空3行2018年4月XX 日（中文形式，数字用times 格式，宋体，四号，居中，单月单日前，不加数字“0”，数字与中文间无空格）四号楷体GB-2312、加粗,居中，栏目线长度保持一致 数字用Time NewRoman ，小四，斜体，加粗；“届”字用宋体，加粗，斜体，小四 分类号（宋体，小四）、单位代码（宋体，小四），分类号和单位代码后，半角条件下用冒号，其余信息，数字用Times New Roman ，小四；文字用宋体，小四；英文用大写，Times New Roman ，小四。
注意对齐。
封面页不要带页码、页眉和页脚。
封面页后不要带附加页，例如，再附加一份题目页。
此处不要有“附件”两字此处1.5倍行距，空1行中文题目（居中）（小三号宋体、加粗、居中，英文用Time New Roman,不超过36个字。
）1.5倍行距，空2行英文题目（居中）（小三号宋体、加粗、居中，英文用Time New Roman,不超过36个字。
）1.5倍行距，空4行姓名XXXXXX专业 XXXXXXXX指导教师XXXXXX1.5倍行距，空4行临沂大学二〇一四年四月无页码四号楷体GB-2312、加粗,居中，栏目线长度保持一致（“摘要”二字与顶端要1.5倍行距下空2行，此页顶端不加页眉及页眉线）摘要（小三号黑体、居中，“摘要”两字间空一格）（“摘要”标题下要1.5倍被行距下空两行再写中文摘要内容。
2,4-D、NAA对甘蔗胚性愈伤组织形成及分化的影响
2,4-D、NAA对甘蔗胚性愈伤组织形成及分化的影响姚丽;曾千春;杨昆;赵培方;吴才文【摘要】以新台糖22(ROC22)、福农94-0403、云蔗03-258及P44为材料,MS 为基本培养基,研究切割厚薄不同的外植体及2,4-D浓度对甘蔗愈伤组织诱导的影响,R1、R2及R3三种不同培养基对分化不定芽的影响.结果表明:①外植体切片0.1cm时的诱导率较切段0.5cm高；②切片时最适2,4-D浓度为1～2mg/L,而切段时则以3mg/L时诱导率达最大；③R2和R3分化效果优于R1,R3分化培养基:MS+6-BA 1mg/L+NAA 1mg/L对愈伤组织分化不定芽的效果最佳.【期刊名称】《中国糖料》【年(卷),期】2013(000)002【总页数】3页(P8-10)【关键词】甘蔗;组织培养;2,4-D;NAA【作者】姚丽;曾千春;杨昆;赵培方;吴才文【作者单位】云南省甘蔗遗传改良重点实验室/云南省农业科学院甘蔗研究所,开远661600;云南农业大学农学与生物技术学院,昆明650201;云南省甘蔗遗传改良重点实验室/云南省农业科学院甘蔗研究所,开远661600;云南省甘蔗遗传改良重点实验室/云南省农业科学院甘蔗研究所,开远661600;云南省甘蔗遗传改良重点实验室/云南省农业科学院甘蔗研究所,开远661600【正文语种】中文【中图分类】S566.1;Q78甘蔗（Saccharum spp.）是重要的糖料和能源作物。
蔗糖约占世界食糖总产量的70%～80%,而在我国达90%以上[1]。
甘蔗是无性繁殖作物,用种量大、繁殖倍数低,通过组织培养快繁技术能加快品种繁殖及推广速度。
甘蔗也是第一个获得组织培养成功的禾本科植物,自1969年Babar和Nickell在斐济突破从甘蔗组织培养物中实现植株再生距今已有四十多年[2],甘蔗组织培养技术已广泛应用于健康种苗快繁及甘蔗遗传转化领域[3-6]。
但是,对于遗传基础复杂的甘蔗而言,甘蔗愈伤组织的诱导、增殖和分化能力等组织培养特性受遗传调控,不同基因型再生效率存在较大差异[7-9]。
香蕉雄花和组培苗假茎胚性愈伤组织诱导的初步研究
ｏ ｈ Ｓ ａ ｈ ｒ ｓ ｎ ｅ ｏ ，－ ４ ｍｇＬ ＋ Ｉ ｎ ｔ ｅ Ｍ ｔ ｅ ｐ ｅ ｅ ｃ ｆ ４ Ｄ ／ ｔ ２ ＡＡ ／ ＋ ＮＡＡ ／ ｎ ｃ ｂ ｔｄ ｉ ｅ ｄ ｒ ｔ １ ｍｇＬ １ ｍｇ Ｌ ａ ｄ ｉ ｕ ａｅ ｎ ｔ ａｋ ａ ｎ ｈ ２ ￣ Ｔ ｅ ｃ ｌ ｓｉ ｄ ｃｎ ａ ｅ ｒ ％～ ％ ｆ ｒ ｉ ６ Ｃ． ｈ ａｌ ｎ ｕ ｉｇ ｒ ｔｓｗｅ ｅ ３ ４ ｕ ｏ ｍｍａｕ ｅ ｍａ ｅ ｆ ｗｅ ｓ Ｉ ｅ Ｍ Ｓ＋ ２４ Ｄ ． ｍｇ Ｌ＋ ｔ ｒ ｌ ｌ ｏ ｒ． ｎ ｔ ｈ ，－ ０７ ／
２１ ０ ２年 １月
Ｊ ｎ ２ １ ａ． ０ １
热 带 农 业 科 学
ＣＨＩ Ｓ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＴＲＯＰ ＣＡＬ ＡＧＲＩ ＵＬ ＮＥ Ｅ Ｊ Ｉ Ｃ ＴＵＲＥ
第３ ２卷 第 １ 期
Ｖｏ ． ２ １３ ，Ｎｏ． １
香蕉雄花和组培 苗假 茎胚性 愈伤组织诱导的初步研究①
林 志 聪 ２ 赵 辉 ，② ） 曾会 才 ③ ）
（ １海 南 大学 海 南海 口 ５ １０ ７１１
２ 中国热 带农 业科 学 院热 带生 物技 术研 究所／
农业部 热 带作 物 生物技 术 重点 开放 实验 室 海 南 海 口 ５ １ ０ ） ７ １１
摘 要 从 外 植 体 来 源 、 生 长 调 节 剂 种 类 及 浓 度 等 方 面研 究 影 响 巴 西 蕉 胚 性 愈 伤 组 织 诱 导 的 因素 。结 果 表 明 ，
提高香蕉胚性愈伤诱导成功率的可能途径
提高香蕉胚性愈伤诱导成功率的可能途径常胜合;徐立;李敬阳;孙威;王甲水;许桂莺;孙佩光;吴琼;金志强【摘要】香蕉是我国重要的热带亚热带农作物.由于绝大多数食用香蕉是三倍体,不能通过授粉进行遗传改良,转基因技术就变得尤为重要.建立胚性悬浮细胞系是进行香蕉遗传转化的第1步.但是,建立香蕉胚性悬浮细胞系的成功率极低,直到现在多数实验室还不能自己建立香蕉胚性悬浮细胞系.然而,为什么香蕉胚性悬浮细胞系如此难以建立,在香蕉体细胞向胚性细胞转化的过程中,发生了哪些关键事件,如何提高香蕉胚性愈伤诱导的成功率,关于这些问题,目前还未见到报道.文中对近年来香蕉胚性悬浮细胞系建立方面的工作进行综述,针对香蕉胚性悬浮细胞系建立过程中发生的关键事件进行阐述,对香蕉胚性悬浮细胞系建立困难的原因进行讨论,并提出了若干提高香蕉胚性愈伤诱导成功率的可能途径.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2013(041)019【总页数】4页(P8103-8105,8113)【关键词】香蕉;胚性悬浮细胞系;体细胞;机制【作者】常胜合;徐立;李敬阳;孙威;王甲水;许桂莺;孙佩光;吴琼;金志强【作者单位】中国热带农业科学院海口实验站,海南海口570102;海南省香蕉遗传改良重点实验室,海南海口570102;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,海南儋州571737;中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,海南儋州571737;中国热带农业科学院海口实验站,海南海口570102;海南省香蕉遗传改良重点实验室,海南海口570102;中国热带农业科学院海口实验站,海南海口570102;海南省香蕉遗传改良重点实验室,海南海口570102;中国热带农业科学院海口实验站,海南海口570102;海南省香蕉遗传改良重点实验室,海南海口570102;中国热带农业科学院海口实验站,海南海口570102;海南省香蕉遗传改良重点实验室,海南海口570102;中国热带农业科学院海口实验站,海南海口570102;海南省香蕉遗传改良重点实验室,海南海口570102;中国热带农业科学院海口实验站,海南海口570102;海南省香蕉遗传改良重点实验室,海南海口570102;中国热带农业科学院海口实验站,海南海口570102;海南省香蕉遗传改良重点实验室,海南海口570102【正文语种】中文【中图分类】S668.1中国种植香蕉已有2 000多年的历史［1］。
小麦论文范例
小麦组织培养研究进展摘要:小麦组织培养是利用基因工程改良小麦品种的重要基础和保证。
对不同小麦外植体 (幼胚、幼穗、成熟胚、幼叶、根、小孢子、花药、原生质体等)组织培养研究现状进行了综述。
关键词：小麦，外植体，组织培养Abstract :Wheat tissue culture is the foundation and assurance of improving wheat by plant gene engineering. different wheat explants, such as immature embryo, inflorescence, mature embryo, young leaf, root, microspore,anther, protoplast,were cultured to obtain regenerative plants, the advances of study on which were summarized in this paper.Keywords: Wheat ，Explant，Tissue culture;1. 前言小麦是世界上分布范围和栽培面积最广，总产量最多的粮食作物，在我国种植面积仅次于水稻，是我国人民的主要粮食作物之一。
随着生物技术的发展，运用基因工程进行小麦品种改良越来越受到国内外育种家的重视，并已成为世界各国作物遗传育种优先研究的课题之一。
而外源基因通过基因工程技术向小麦的转移要求建立高效的离体培养系统，这种系统必须对广范围的基因型而言是快速、可靠和适用的。
因此，小麦高效组织培养系统的建立仍是许多研究者关注的科学问题之一。
2. 小麦组织培养研究现状2.1 幼胚组织培养自1978 年Shimada成功地通过小麦幼胚培养获得再生植株以来，幼胚被共认为是小麦组织培养最有效、最理想的外植体来源之一。
在小麦幼胚培养中，如何确定胚龄是一个令人困惑的问题，首先是如何确定胚龄的衡量标准问题，一些学者选用“一定长度”或“直径”的胚作为衡量胚龄的标准。
棉花组织培养过程中外植体所需的激素浓度及配比的研究
棉花组织培养过程中外植体所需的激素浓度及配比的研究摘要：本文研究了以下胚轴为外植体材料的棉花组织培养过程中，愈伤组织诱导、胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎（胚状体）的诱导所需要的最佳激素浓度及配比。
研究结果表明：以上三个诱导过程所需要的最佳激素浓度及配比分别为IAA 、KT（激动素）、2,4-D 各0.1 mg/L或者ZT（玉米素）0.1 mg/L、0.05mg/L IAA +0.1 mg/L KT 或者0.1 mg/L ZT、不加入任何种类的激素或者尽量加入低浓度的激素。
关键词：棉花；下胚轴；胚性愈伤组织（EC）；胚状体1引言激素在细胞生长与个体发育中具有重要的调控作用，它可以严重影响棉花愈伤组织诱导、分化及体细胞胚胎发生等一系列过程。
王清连等[1]研究发现，激素的浓度及不同种类激素的搭配是影响棉花外植体诱导获得胚性愈伤组织和胚状体的主要因素之一[2-3]。
因此，本文就以下胚轴为外植体材料的棉花组织培养过程中愈伤组织诱导、胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎（胚状体）的诱导所需要的最佳激素浓度及配比进行了一系列的讨论。
2材料和方法2.1材料棉花品种为“珂字棉312”，由上海交通大学农业与生物学院左开井博士提供。
2.2研究方法2.2.1愈伤组织诱导的最佳激素浓度及配比选取生长状况相同的棉花无菌苗下胚轴，分成九份，分别接种到含有1.对照（不添加任何激素）、2.KT（激动素）0.1 mg/L、3.IAA 0.1 mg/L、4.2,4-D 0.1 mg/L、5.ZT（玉米素）0.1 mg/L 、6.IAA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L、7.IAA 0.1 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L、8.KT 0.1 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L、9.IAA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L的九种不同的愈伤组织诱导培养基上。
每隔3周左右对培养基继代一次。
约2个月后，分别统计各培养基上下胚轴的出愈率情况，并记录（数字1-10分别为图1对应的横坐标）。
不同透气性容器对西洋参胚性愈伤组织诱导的影响及与乙烯的关系研究
Ｌ Ｉ Ｓ Ｈ Ｉ Ｚ Ｈ Ｅ Ｎ Ｍ Ｅ Ｄ Ｉ Ｃ Ｉ Ｎ Ｅ Ａ Ｎ Ｄ Ｍ Ａ Ｔ Ｅ Ｒ Ｉ Ａ Ｍ Ｅ Ｄ Ｉ Ｃ Ａ Ｒ Ｅ Ｓ Ｅ Ａ Ｒ Ｃ Ｈ ２ ０ １ ３ Ｖ Ｏ Ｌ ． ２ ４ Ｎ Ｏ ． １ １
Ｆ Ｅ ／ 硅 胶拧盖和透气较好 的塑料膜 两种封 口方式进行 处理 ， 定期观 察并利 用 岛津 ２ ０ １ ０气相 色谱仪 对培 养瓶 中的 乙烯
进行检 测。结果 培养 ３ ２ ｄ后 结果显示 ： 在 透气的 ２ ， ４一Ｄ、 Ｎ Ａ Ａ培 养基 中， 种胚 的胚性愈伤 率分别为 ９ ７ ． ７ ％、 ９ ４ ． ４ ％， 而
密闭 中的则分别为 ２ ３ ． ３ ％、 １ ６ ． １ ％； 乙烯浓度在 透 气容 器 中分别为 ０ ． ７ ７ ， ０ ． ２ ５ ｌ ・ Ｌ＿ 。 ， 密闭 中分 别为 ７ ． ３ ７ ， ５ ． １ ５ １ ・ Ｌ～。结论 透气性较好 的容器胚性愈伤 率显著 高于透 气差 的； 密闭容器 中内源 乙烯积 累浓度 明显 高于透气容器的 ， 显示
２ ． ３ 乙烯测定 的方 法 选取 ５个培 养时期检测 培养容器 中乙烯 本文分别使用密封硅胶拧盖和透气塑料膜两种封 口方式 ， 获 的浓 度 ， 每个 时 期 取 五 瓶 试 样 ， 用 进 样 针 在 样 品 瓶 的 上 部 空 间 抽 得透气性不 同的培养容器对材料进行处理 ， 同时检测培养过程 中 取气体 ２ ０ ０ ， 直接 注入仪器 的进样 口。
的器官 、 组织和细胞 都具 有产 生 乙烯 的 能力 。 乙烯 生物 合成
等 过程 都 会 产 生 不 同 的影 响 Ｊ 。
温度 ： 进样 口温度 ２ ０ ０ ℃， 不 分 流进 样 ； 柱温 ６ ０ ℃保留 ３ ． ５ 的调节对外 植体不定根 ， 不定芽 ， 花 芽分 化 ， 原 生质体 、 花药培养 ｍｉ ｎ ， 以３ ０ ℃／ ａ ｒ ｉ ｎ升温至 ２ ６ ０ ℃； 检测器 温度 ： ２ ６ ０ ℃。
内源激素对橡胶树花药体细胞胚发生的影响
内源激素对橡胶树花药体细胞胚发生的影响高等植物体细胞胚发生是离体生长发育中一个复杂的科学问题，受内外多种因素的影响，目前人们尚未掌握其离体发育规律。
植物离体培养过程中植物激素起着重要的调控作用，它们的调控是引起各细胞组织和器官分化的基础，从而维持植物正常的离体发育过程，植物激素对形态发生起着重要的作用，外植体离体培养形态建成往往需要很多外源激素的诱导[1-2]。
对于植物离体培养中体细胞胚发育过程，只有胚性愈伤才能形成正常胚，畸形胚难以形成正常的组培苗，这种情况严重制约了组培苗工厂化的生产和育种的应用。
因此，本试验对橡胶树花药组织培养过程中非胚性愈伤和胚性愈伤、畸形胚和正常胚不同内源激素含量进行研究，对建立高效巴西橡胶树体细胞胚再生体系以及种质资源保存具有一定意义。
1 材料与方法1.1 材料植物材料以巴西橡胶树优良无性系热研7-33-97花药为外植体，花药培养参照Hua 等的方法，然后分别取培养60 d的胚性愈伤组织（简称a）、非胚性愈伤组织（简称b）、子叶胚时期的正常胚（简称c）和畸形胚（简称d）用液氮速冻，置于-80 ℃冰箱中保存待测。
1.2 方法内源激素的测定采用酶联免疫法，采集4种类型材料，重复3次，1次10个样品材料，于液氮中速冻；用80%甲醇溶液匀浆，4 ℃提取8 h，4 000 r/min离心15 min；沉淀用80%甲醇提取，重复3次；合并上清液，然后用氮气吹干，由中国大学生物技术实验室提供测试服务，每个指标的测定均重复3次。
应用DPS软件对试验数据进行统计分析，利用Excel 2007作图。
2 结果与分析2.1 内源激素含量的变化如图1所示，在花药愈伤再生过程中，ZT在非胚性愈伤组织（b）和畸形胚（d）中含量相对较高，在胚性愈伤组织（a）和正常胚（c）中含量相对较低；IAA在畸形胚中含量最高，在非胚性愈伤组织中含量最低；ABA在非胚性愈伤组织中含量最高，在畸形胚中含量最低；GA3含量在各组织中变化趋势与ZT相似，在非胚性愈伤组织和畸形胚中含量相对较高，在胚性愈伤组织和正常胚中含量较低。
愈伤组织制作实验
摘要水稻成熟种子具有细胞全能性。
本实验以错误!未找到引用源。
+2,4-D为基本培养基，添加NAA和6-BA为分化培养基，对水稻种子材料进行体外培养，诱导形成愈伤组织，并进行分化。
在培养基中添加一定量的激素给种子形成愈伤组织提供动力。
结果表明，在合适的培养条件下愈伤组织的分化程度很高，但培养基因素或光照条件使得褐化现象严重。
关键词水稻成熟种子组织培养愈伤组织诱导分化激素1前言细胞工程是指应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法，按照人们的需要和设计，在细胞水平上的遗传操作，重组细胞的结构和内含物，以改变生物的结构和功能，即通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。
其常用技术手段有植物组织培养，植物体细胞杂交、动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。
根据细胞类型的不同，可以把细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程两大类。
本实验主要综述细胞工程中植物细胞工程的植物组织培养这一技术手段。
植物组织培养技术的应用范围包括快速繁殖、培育无病毒植物，通过大规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。
植物组织培养，诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织在分化形成植物体。
在植物组织培养中，由于植物细胞具有全能性，即植物的体细胞具有母体植株全部遗传信息并会发育成为完整的个体。
因而，每一个植物细胞可以像胚胎细胞一样，经离体培养再生成为植株。
随着细胞工程技术的不断发展，植物细胞和组织培养这一细胞工程技术也无例外地得到发展，目前已在许多植物上，特别是在农林生产实践中得到了广泛应用。
尤其在林木优良品种和无性系的快速繁殖方面进展较快。
本实验旨在利用NAA和6-BA的组合调控来诱导水稻成熟种子的愈伤组织，加深对外植体消毒、接种的无菌操作技术，学习外植体愈伤组织诱导的方法。
不同培养基及激素配比对小麦幼胚离体培养的影响（精品）
2 结果分析
2. 1 不同基本培养基对幼 胚愈伤组织诱导和分化的 影响
品种 V ariety
表 1 不同基本培养基对小麦幼胚离体培养的影响 Table 1 Effects of d ifferen t m ed ia on em bryos in v itro
Abstract: In o rder to estab lishm en t a h igh ly efficien t p lan t regeneration system that su ited to gene gun tran sfo rm ation, tw o w in ter w heat cu ltivars includ ing J ing 841 and Zhongm ai 9 w ere u sed as testing m aterials. T he facto rs affecting the p lan t regeneration, such as m ed ium and ho rm one p ropo rtion s, w ere stud ied. T he resu lt show ed that L 3 m ed ia w as the m o st idealm ed ium fo r inducing callu s and d ifferen tiation am ong the 4 u sed m ed ia includ ing M S, L 3, N 6B 5M S and B 5, the average inducing callu s frequency of tw o cu ltivars w as 88. 9% , d ifferen tiation frequency w as 36. 6%. T he op tim um ho rm one concen tration added to L 3 m ed ium fo r callu s d ifferen tiation w as NAA 1 m g L and ZT 3 m g L w ith a callu s d ifferen tiation frequency m o re than 50%. Key words: W heat (T riticum aestivum L. ) ; Imm atu re em b ryo s cu ltu re; M ed ium ; Ho rm one p ropo rtion s
KT和2,4-D对黄独3年组培苗带芽茎段生长发育的影响
KT和2,4-D对黄独3年组培苗带芽茎段生长发育的影响张宗良;王莉【摘要】@@%以黄独3年组培苗带芽茎段为材料,采用植物组织培养和单因子试验的方法,探讨不同浓度的KT、2,4-D组合对黄独带芽茎段生长发育的影响.结果表明:黄独带芽茎段芽增殖的最佳培养基为MS；黄独带芽茎段生根的最佳培养基为MS；黄独带芽茎段茎增粗的最佳培养基为MS +4.0 mg/L KT +0.5 mg/L 2,4-D；黄独带芽茎段茎增长的最佳培基为MS.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2012(040)006【总页数】2页(P217-218)【关键词】黄独;3年组培苗;带芽茎段;KT;2,4-D;生长发育【作者】张宗良;王莉【作者单位】上饶师范学院生命科学学院,江西上饶334001;上饶师范学院生命科学学院,江西上饶334001【正文语种】中文【中图分类】Q945.39黄独(Dioscorea bulbifera L.)为薯蓣科(Dioscoreaceae)薯蓣属(Dioscorea L.)植物，是世界广泛分布品种，在中国主要分布于浙江、江西等地［1］，其肉质块茎可入药，性味苦、平，具有散结消瘿、清热解毒、凉血止血、抗癌的功效［2］。
临床用于治疗各种甲状腺疾病和多种肿瘤，均有一定疗效［3］。
中药黄独的成分复杂，其中主要活性成分包括表儿茶素、异香草酸、香草酸和杨梅素［4］。
由于国内尚无关于黄独组织培养的研究，2008年起，我们通过带芽茎段的培养建立了黄独的无菌体系，获得了黄独的无菌苗，并对黄独试管苗生长发育的影响因子(KT、2，4-D和NAA)进行了初步的研究［5］，但在该研究中，我们只研究了2.0mg/L KT+0.5 mg/L 2，4-D 及 2.0 mg/L KT+1.0 mg/L 2，4-D的组合对黄独试管苗生长发育的影响。
本试验将继续研究不同浓度的KT和2，4-D组合对黄独试管苗生长发育的影响，探索黄独试管苗再生的条件，旨在为黄独种苗的快速繁殖及工厂化生产提供技术支持，也为今后进一步对其进行提纯复壮和采用现代生物工程技术选育新品种奠定基础。
2,4-D对香瓜种子萌发特性的影响
２２ ２４一Ｄ对香瓜 根生 长状 况的影 响 ． ， 从 表 ２可 以看 出 ， 的长 度 受 到 明 显 的抑 制 ， 根 随着浓 度 升 高 ， 制 作 用 增 强 ． 与 韩 玉 波 等 抑 这
（０ ３年） ２０ 的研究 结果不 一致 ． 因此 ， ， ２ ４一Ｄ对 香 瓜
２ 结 果 与分 析
分别提高 ５９ ．％和 ４３ 而 １～ ｌ ｇ ．％； ０ Ｏ ／ ２４ ￣ Ｌ的 ， 一
Ｄ则 明显 抑 制 香 瓜 种 子 的发 芽 率 ． 即在 较 低 浓 度 （Ｏ 一ｌ ｇＬ条件下 有一定 的促 进作 用 ， １一 Ｏ ，） 在较 高
浓度 （Ｏ 一ｌ￣／） 件 下 有 明 显抑 制 作 用 ． 结 １ ～ ＯｇＬ 条 该
表 １ ２４ 。 一Ｄ对香 瓜种 子发 芽率 的影 响
１ 材 料 与方 法
１ １ 材料 ．
香瓜 品种 ： 高糖一号 ， 自吉林省 扶余 县双 吉 早 来
种业有 限公司 ； ， 一Ｄ为上 海化 学试剂总厂产 品 ． ２４
１２ 方 法 ．
取健壮 、 饱满 的香瓜种子 ，．％高锰酸钾溶液 ０２ 浸泡表 面灭 菌 ２ｒｉ， ０ ｎ 用蒸 馏 水 冲洗 干 净 后 吸 干 表 ａ 面水 分 ， 取 ５ 各 Ｏ粒 ， 分别 放在 以双层滤 纸 做支 持 物
摘
要 ： 利 用不 同浓度 的 ２４ ， 一Ｄ处理 香 瓜 种 子 ， 察种 子 萌发 时发 芽率及根 的 生长 状 况 ． 果表 观 结
明 ，， ２４一Ｄ提 高香瓜 种 子发 芽率 的 浓度 在 ｌ一 一１ －ｇＬ范 围 内， 于 １－ｇＬ则 有 明 显抑 制 作 用 ；１－ Ｏ ０ ２／ 高 ０２／ ０４
试 验探讨 了 ２４一Ｄ对 香 瓜种 子 萌 发特 性 的影 响 ， ，
长白落叶松胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生
长白落叶松胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生宋跃;甄成;张含国;李淑娟【摘要】Objective]Immature zygotic embryos of Larix olgensis were usedas explants to study induction, proliferation and somatic embryogenesis of embryogenic callus in order to reveal the key factors affecting Larix olgensis embryogenic callus induction,and at the same time,to explore the effects of growth regulators of different types and concentrations on proliferation and somatic embryogenesis of embryogenic callus, in subculture process. [Method]Embryogenic callus was induced using immature seeds from superior individuals of three families of Larix olgensis,and the effects of seed collection time,family,concentration of 2,4-D and basic medium on the induction of embryogenic callus were studied. Subsequently,the embryogenic callus subculture on the proliferation medium containing different kinds and concentrations of growth regulators,and the somatic embryos were obtained by the processof somatic embryogenesis. Finally,morphologically normal somatic embryos were selected and germinated,and transplanted after rooting of the somatic embryos. [Result]There was significant differences in induction rate of embryonic callus of immature embryos with different collection times. The induction rate was 5. 61% 63 days after pollination,the induction rate was 22. 35%70 days after pollination,and the induction rate was zero80 days after pollination. In this experiment,the average induction rate of embryogenic callus from the families of‘77-22’,‘77-37 ’ and‘73-50 ’was 6. 69%,11. 17% and 3. 11%,respectively. The concentration of 2,4-D had a certain effect on the induction of embryogenic callus,the induction rate was increased with the proliferated of 2,4-D concentration in a certain range. It was up to 11. 11% when the concentration of 2 ,4-D reached 1. 5 mg·L -1 . The induction rate began to decrease when the concentration of 2 ,4-D exceeded 1. 5 mg·L -1 . The medium of BM,MS and S were able to induce embryogenic callus,the induction rate in BM medium was the highest,followed by S medium,and the induction rate in MS medium was the lowest. Embryogenic callus culturing for 15 days on BM medium which containing 2 ,4-D 0. 3 mg·L -1 ,6-BA 0. 1 mg·L -1 and KT 0. 1 mg·L -1 can obtain more embryogenic callus,the proliferation rate was up to 345. 93%. Culturing for 14 days on BM medium which containing 2,4-D 1. 5 mg·L -1 ,6-BA 0. 5 mg·L -1 and KT 0. 5 mg·L -1 ,the number of somatic embryos per gram embryogenic callus was up to 179. 87 on average. The germination rate of somatic embryo and regeneration rate of plantlets was up to 75% and 66. 67%,respectively. The survival rate of transplanting was 27. 08%.[Conclusion]The embryos of L. olgensis seeds collected 70 days after open-pollination was suitable to induce embryogenic callus,the basic medium BM contains2 ,4-D 1. 5 mg·L -1 . Embryogenic callus was prone to lose the ability of somatic embryogenesis in the medium with high concentration of exogenous hormones,and the proliferation speed was slow,but the number and the germination rate of somatic embryo were relatively high. An appropriate decrease of the concentration of the growth regulator was beneficial to keep the ability of somatic embryogenesis andproliferation of callus,but the quantity and the germination rate of somatic embryogenesis were somewhat decreased. It was not conducive to the proliferation of callus when the concentration of the growth regulator in the medium was low,but the ability of somatic embryogenesis was maintained for a long time. The proliferation of embryogenic callus can be improved by using NAA 0. 15 mg·L -1 instead of 2,4-D 0. 5 mg·L -1 ,andthe germination rate of somatic embryos can be improved to a certain level. Therefore,according to different purposes at different stages,it was necessary to select the medium containing different types and concentrations of exogenous hormones for subculture.%【目的】以长白落叶松的未成熟合子胚为外植体，进行胚性愈伤组织的诱导、增殖培养及体细胞胚胎发生的相关研究，揭示影响长白落叶松胚性愈伤组织诱导的关键因素，并探讨继代培养过程中添加不同种类、浓度的生长调节剂对胚性愈伤组织增殖及体胚发生的影响。
KT和2,4-D对知母愈伤组织再分化的影响
KT和2,4-D对知母愈伤组织再分化的影响尹明华;吴绍霞【摘要】本文探讨KT和2,4-D组合对知母愈伤组织再分化的影响.结果表明:知母愈伤组织再生芽和促进再生苗长高以及愈伤组织增殖的最佳培养基均为MS+KT4.0 mg/L.单独使用KT或KT与2,4-D组合均可抑制知母愈伤组织生根.【期刊名称】《亚热带植物科学》【年(卷),期】2011(040)002【总页数】3页(P39-41)【关键词】知母;愈伤组织;KT;2,4-D;再分化【作者】尹明华;吴绍霞【作者单位】上饶师范学院生命科学学院,江西上饶334001;上饶师范学院生命科学学院,江西上饶334001【正文语种】中文【中图分类】Q943.1知母（Anemarrhena asphodeloides）为百合科知母属多年生草本植物，以根状茎入药，有清热除烦、泻肺滋肾的作用[1]。
目前，对于知母组织培养尤其是愈伤组织研究尚欠深入，而对植物生长调节剂影响知母愈伤组织再分化的报道较少见。
愈伤组织具有易于繁殖、生长同步、细胞组成均一等优点，可通过愈伤组织为离体条件下的各种生理生化研究提供良好的试材[2]。
本实验以知母愈伤组织为试材，就KT和2，4-D对知母愈伤组织再分化的影响进行研究，以期为知母的工厂化生产提供依据。
1 材料与方法1.1 材料知母分蘖愈伤组织（由上饶师范学院生命科学学院植物组织培养室提供）。
1.2 方法将知母愈伤组织切成0.5 cm×0.5 cm小块，接种于愈伤组织再分化培养基上。
愈伤组织再分化培养基成分如下：①MS（CK）；②MS + KT 4.0 mg/L（单位下同）；③MS + KT 8.0；④MS + KT 4.0 + 2，4-D 0.5；⑤MS + KT 4.0 + 2，4-D 1.0。
每种培养基重复3次，每重复接种15个愈伤组织块。
所用培养基中添加蔗糖30 g/L、冷凝脂7.5 g/L，pH 5.8～6.0。
光照时间14 h/d，光照强度1 000～2 000 lx，温度25±1℃，湿度70％～80％。
2,4-D对石刁柏愈伤组织诱导的影响
2,4-D对石刁柏愈伤组织诱导的影响
2,4-D对石刁柏愈伤组织诱导的影响
以石刁柏嫩茎为材料,研究了2,4-D对其初始愈伤组织诱导和胚性愈伤组织发生的影响.结果表明:仅仅只有2,4-D不能诱导石刁柏初始愈伤组织的发生;胚性愈伤组织的诱导需要高浓度的2,4-D,其最佳激素组合为2,4-D 10 mg/L+NAA 0.5 mg/L.
作者：鲁旭东萧浪涛刘素纯刘华英陈小飞作者单位：鲁旭东(湖南农业大学湖南省植物激素与生长发育重点实验室,湖南长沙,410128;孝感学院生命科学技术学院,湖北孝感,432000) 萧浪涛,刘素纯,刘华英,陈小飞(湖南农业大学湖南省植物激素与生长发育重点实验室,湖南长沙,410128)
刊名：安徽农业科学ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES 年，卷(期)：2006 34(21) 分类号：Q945.51 关键词：石刁柏植物激素胚性愈伤组织。
不同植物生长调节物质对杂种落叶松胚性愈伤组织增殖的影响
ｃｅ ｓｎ ｆ ４ 一Ｄ ｃ ｎ ｅ ｔａｉ ｎ ．Ｍｅ ｉ ｍ ｔ ｉ ｅ ｅ ｔ ｏ ｉ ａｉ ｎ ｆｐ ａ ｔ ｏ ｈ ｒ ｇ ｌ ｔｒ ａ ｅ ｒ ａ ｌ ｆ ｃ ｎ ｒ ａ ｉ ｇ ｏ ２． ｏ ｃ ｎｒｔ ｓ ｏ ｄ ｕ ｗｉ ｄ ｆ ｒ ｎ ｍｂｎ ｔ ｓｏ ｌｎ ｗ ｅ ｕ ａｏ ｈ ｓｒ ｍａｋ ｂ ｅ ｅ ｅ ｔ ｈ ｃ ｏ ｒ ｇ ｔ ｓ ｏ
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第 ３ ６卷 第 ９期
２０ ０ ８年 ９月
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ZT、KT和2，4—D对香蕉胚性愈伤组织诱导的影响
摘要以香蕉未成熟雄花序为外植体，以MS为基本培养基，对外植体进行表面消毒、不同切割长度处理、不同植物生长调节剂（ZT、KT、2，4-D）在不同浓度情况下进行胚性愈伤组织诱导的试验。
结果表明：外植体表面消毒以选用10% H2O2溶液处理效果最好，成功率为83.3%；切割长度以1.0 cm较为合适；胚性愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L ZT+0.5 mg/L KT+4.0 mg/L 2，4-D，胚性愈伤组织诱导率为12.3%。
关键词香蕉；胚性愈伤组织；诱导
香蕉是芭蕉科（Muaceae）芭蕉属（Musa）多年生常绿大型草本单子叶植物，是热带、亚热带重要的经济作物。
绝大多数香蕉品种都是三倍体，且多为Musa spp.，AAA群[1]。
它们具有高度不育性，不能通过传统的杂交育种方式获得优质高抗性的香蕉新品种，利用基因工程、体细胞突变和体细胞杂交等方法，有望克服传统育种的限制，而生物技术的应用都需要高效稳定的植株再生体系。
其中，香蕉的胚性细胞悬浮系的建立就成为香蕉实现转移基因、细胞融合、植株再生的关键技术[2-3]。
因为胚性愈伤组织作为转化受体并诱导胚状体而再生的转基因香蕉可降低嵌合体发生，但是香蕉的胚性愈伤组织诱导率过低成为影响香蕉的胚性细胞悬浮系建立的关键因素。
已有研究表明[4-5]，不同的激素种类及配比、外植体类型、培养条件对香蕉胚性愈伤组织的诱导有较大影响。
研究ZT、KT和2，4-D在以香蕉未成熟雄花序为外植体诱导胚性愈伤组织过程中的最适配比，以达到有效缩短香蕉胚性细胞悬浮系建立时间和提高其转化效率的目的，为进一步开展香蕉的遗传转化奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试香蕉品种为桂蕉B6（Musa spp.，AAA），由广西植物组培苗有限公司提供，取自国家香蕉产业技术体系常规育种岗位示范基地的无病、无虫、长势良好的香蕉植株。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体表面消毒。
以未成熟雄花序为外植体材料，剥除花序的苞叶，直至未成熟雄花序长3 cm左右，进行以下3种处理。
处理1：在70%酒精中浸泡90 s后取出，用无菌水冲洗4～5次，切取花序尖端1.5 cm材料接入培养基；处理2：在70%酒精中浸泡30 s，再用1 g/L升汞（HgCl2）浸泡60 s后取出，用无菌水冲洗4～5次，切取花序尖端1.5 cm材料接入培养基；处理3：在70%酒精中浸泡30 s，再用10% H2O2溶液处理60 s后取出，用无菌水冲洗4～5次，切取花序尖端1.5 cm材料接入培养基。
每个处理100个样品，7 d后统计消毒情况，3次重复。
成功率（%）=1-污染率-死亡率
1.2.2 不同长度外植体对愈伤组织诱导的影响。
以未成熟雄花序切段为外植体材料，按切割长度设3个处理，即切割成0.5 cm（A）、1.0 cm（B）、1.5 cm（C）。
平放于愈伤组织诱导培养基MS+1.0 mg/L IAA+4.0 mg/L 2，4-D+1.0 mg/L NAA+40 g/L蔗糖[6]，每个处理100个样品，30 d转接1次，150 d后统计愈伤组织的诱导情况，3次重复。
1.2.3 不同培养基对愈伤组织诱导率的影响。
以MS为基本培养基，设计以ZT添加浓度0、0.5、1.0 mg/L；KT添加浓度0、0.5、1.0 mg/L；2，4-D添加浓度0、2.0、4.0、6.0 mg/L；以上3个植物生长调节剂组合的36个配方，另加NAA 0.01 mg/L、谷氨酰胺100 mg/L、生物素1.0 mg/L、甘露醇20 g/L、蔗糖40 g/L、琼脂6.5 g/L，灭菌前pH值调至5.8，按每瓶30 mL进行分装，在121 ℃灭菌20 min后，进行香蕉愈伤组织诱导试验。
愈伤组织诱导在黑暗条件下进行，培养室温度为28 ℃。
每个处理100个样品，30 d转接1次，150 d后统计愈伤组织的诱导率，3次重复。
诱导率（%）=愈伤组织诱导数/接种外植体数×100
2 结果与分析
2.1 不同处理方法对外植体消毒效果的比较
同种外植体应用不同的处理方法，其结果相差较大：处理1的污染率最高，但外植体的死亡率比处理2低，处理1的成功率略高于处理2；处理2的污染率较低，但是由于使用升汞进行消毒，所以出现了较高的死亡率，致使最后的成功率最低；处理3选择10% H2O2溶液对外植体材料进行处理，效果最佳，污染率最低，成功率最高。
2.2 不同长度外植体对香蕉胚性愈伤组织诱导的影响
幼嫩的未成熟雄花序接种到培养基14 d后开始膨大，50 d后在外植体的表面产生黄色的愈伤组织并出现大量褐化死亡情况。
在接种150 d后进行观察统计，不同处理均获得了较高的愈伤组织诱导率，处理B的愈伤组织诱导率和胚性愈伤组织诱导率均略高于其他2个处理，分别为35.3%、5.3%。
结果说明切割长度以1.0 cm较为合适。
2.3 不同培养基对香蕉胚性愈伤组织诱导的影响
香蕉细胞内含有大量的酚类物质导致愈伤组织褐化死亡，在培养基中添加适量的甘露醇（20 g/L）可以降低胚性愈伤组织的褐化程度[7]，保持愈伤组织能正常诱导及增殖生长。
在添加甘露醇的培养基中，出现的愈伤组织褐化死亡现象明显减少，120 d后极少数愈伤组织表面出现黄白色、松脆、透明的胚性愈伤组织，
随着培养时间的延长，胚性愈伤组织逐渐增多，对其进行组织学观察，在接种150 d后统计结果。
在诱导香蕉胚性愈伤组织过程中，当2，4-D浓度低于4.0 mg/L 时，香蕉胚性愈伤组织诱导率随着2，4-D浓度增大而升高；当2，4-D浓度高于4.0 mg/L时，香蕉胚性愈伤组织诱导率随着2，4-D浓度增大而下降，结果说明，2，4-D在诱导香蕉胚性愈伤组织形成中也起着非常关键的作用，最适宜浓度为4.0 mg/L。
从表4可以看出，随着培养基中ZT的加入，香蕉愈伤组织诱导率和胚性愈伤组织诱导率得到显著提高，说明ZT对诱导香蕉胚性愈伤组织形成起到较好的促进作用，最适宜浓度为0.5 mg/L。
而在培养基中加入KT后，香蕉愈伤组织诱导率和胚性愈伤组织诱导率无明显变化，但愈伤组织出现的时间提前7～10 d，说明KT对诱导香蕉愈伤组织形成起到一定的促进作用。
筛选出诱导胚性愈伤组织最适培养基为MS+0.5 mg/L ZT+0.5 mg/L KT+4.0 mg/L 2，4-D+1.0 mg/L生物素+100 mg/L谷氨酰胺+20 g/L甘露醇+40 g/L蔗糖，愈伤组织诱导率为53.7%，胚性愈伤组织诱导率为12.3%。
3 结论与讨论
研究结果表明，外植体不同消毒方法、不同切割长度[8]均对愈伤组织诱导产生一定影响。
在香蕉胚性愈伤组织诱导过程中，当2，4-D浓度在4.0 mg/L时，能从香蕉未成熟雄花序诱导出愈伤组织，这一结果与朱军等[9]诱导巴西蕉愈伤组织时所用的2，4-D浓度相吻合；在添加的3个植物生长调节剂中，2，4-D在香蕉愈伤组织的诱导中起着关键的作用[3]。
ZT具有高效、稳定等特点，在该研究中对愈伤组织和胚性愈伤组织诱导过程中起到较好的促进作用，同2，4-D配合使用后效果更佳，与赵辉等[10]对巴西香蕉吸芽进行胚性组织诱导结果相符。
在诱导香蕉胚性愈伤组织过程中，KT起到使愈伤组织出现的时间提前的作用。
通过探讨不同外植体表面消毒方法、不同外植体接种长度、不同植物生长调节剂在不同浓度情况下对香蕉胚性愈伤组织诱导的影响，进一步改进香蕉胚性细胞悬浮系建立时间及转化率。
如能在此基础上建立起高效、重复性好的香蕉胚性细胞悬浮培养技术体系，将对香蕉转基因技术的研究起到推动作用。
4 参考文献
[1] 胡永华，黄惠琴.香蕉转基因研究进展[J].中国生物工程杂志，2004，24（5）：34-37.
[2] 徐春香，PANIS B，STROSSE H，等.香蕉胚性愈伤组织的诱导及胚性细胞悬浮系的建立[J].华南农业大学学报：自然科学版，2004，25（1）：70-73.
[3] 魏岳荣，黄学林，李佳，等.贡蕉胚性细胞悬浮系的建立和植株再生[J].生物工程学报，2005，21（1）：58-65.
[4] 冯新富，谢丽君，陈厚彬，等.香蕉愈伤组织及体细胞胚诱导过程中的组织学观察[J].果树学报，2007，24（6）：788-791.
[5] 林志聪，赵辉，曾会才.香蕉雄花和组培苗假茎胚性愈伤组织诱导的初步研究[J].热带农业科学，2012，32（1）：31-35.
[6] 张秀枝，叶惠玲，叶锦华.香蕉、大蕉、粉蕉胚性愈伤组织的诱导[J].农业与技术，2007，27（5）：66-69.
[7] 温睿婷，王汉宁，杨如涛，等.降低玉米成熟胚愈伤组织褐化的初步研究[J].分子植物育种，2010，8（3）：483-487.
[8] 严华兵，方锋，卜朝阳，等.魔芋组培苗叶柄切段愈伤组织诱导及植株再生[J].南方农业学报，2011，42（2）：121-123.
[9] 朱军，胡永华，黄惠琴，等.巴西蕉愈伤组织的诱导[J].热带农业科学，2006，26（3）：15-17.
[10] 赵辉，彭明，曾会才，等.巴西香蕉吸芽高效胚性再生体系研究[J].果树学报，2011，27（5）：730-734.。