基因工程原理练习题及其答案
基因工程习题+答案
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第一章绪论名词解释:1.基因操作:将在细胞外产生的核酸(物质)分子插入到病毒,质粒或其它载体系统中,再整合到特定的宿主中,从而形成一种新的可连续繁殖的有机体。
2.间断基因:序列中间插入有与氨基酸编码无关的DNA间隔区,使一个基因分隔成不连续的若干区段。
我们称这种编码序列不连续的基因为间断基因。
3.启动子:DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位。
4.亚克隆:当初始克隆中的外源DNA片段较长,含有许多目的基因以外的DNA片段时,在诸如表达、序列分析和突变等操作中不便进行,将目的基因所对应的一小段DNA找出来,这个过程叫“亚克隆”。
填空题:1.基因操作的核心部分是基因克隆,基因克隆的基本要点有(克隆基因的类型),(受体的选择)和(载体的选择)。
2.(基因)是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的,也可以是(不连续的);可以是(DNA),也可以是RNA;可以存在于染色体上,也可以(存在于染色体之外如质粒、噬菌体)。
3.基因操作并不是一个法律概念,除了包括基因克隆外,还包括基因的(表达)、(调控)、(检测)和(改造)等与基因研究相关的内容。
4.启动子是指(基因转录过程中控制起始的部位)。
通常一个基因是否表达,(转录起始)是关键的一步,是起决定作用的。
在转录过程中,启动子还是(RNA聚合酶)的结合位点。
5.原核生物的RNA聚合酶主要由两部分组成:(核心酶)和(σ因子),其中σ-因子并不参与RNA的合成,它的作用主要是(识别要转录的起始位点)。
6.从(启动区)到(终止区)的这一段距离称为一个转录单位,或者一个转录产物,其中可包括一个或者多个基因。
7.转录终止子主要有两种,一种是(依赖ρ因子),另一种是(不依赖ρ因子)。
8.基因的书写方式,通常是写出的DNA序列总是与(mRNA)相同的那条链,方向是从(5')到(3')。
对于碱基的位置,一般自转录起始点向两个方向编号,其中转录起始点定为(+1),(在起始点上游第一个碱基)定为-1。
(完整版)基因工程原理练习题及其答案
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基因工程原理练习题及其答案一、填空题1.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2.基因工程的两个基本特点是:(1)____________,(2)___________。
3.基因克隆中三个基本要点是:___________;_________和__________。
4.碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。
5.同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。
6.部分酶切可采取的措施有:(1)____________(2)___________ (3)___________等。
7.第一个分离的限制性内切核酸酶是___________;而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。
8.限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同,但识别的序列都是_________,它们属于_____________。
9.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段,具有两种酶活性:(1)____________;(2)________________的活性。
10.为了防止DNA的自身环化,可用_____________去双链DNA__________________。
11.EGTA是____________离子螯合剂。
12.测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶,它只有_____________酶的活性,而没有_______酶的活性。
13.切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。
14.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式,通常可采用_________或_______________。
基因工程的原理及技术练习题
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基因工程的原理及技术练习题1.下列关于限制酶的说法正确的是()A.限制酶广泛存在于各种生物中,但微生物中很少B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键【答案】B【解析】限制酶主要从原核生物中分化出来,A错误;一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,B正确;不同的限制酶切割DNA后会形成黏性末端、平末端,C错误;限制酶的作用部位是磷酸二酯键,D错误,故选B。
2.下列叙述不正确的是()A.质粒在宿主细胞内可整合到染色体DNA上B.质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器C.基因工程操作中的质粒一般都是经过人工改造的D.烟草花叶病毒可作为基因工程中的运载体【答案】B【解析】质粒是细胞中的小型环状DNA,进入细胞后可以整合到宿主细胞的染色体DNA上,A正确。
质粒是DNA,不是细胞器,B错误。
质粒一般不能直接用于基因工程,所以需要人工的改造,C正确。
在基因工程中可以做运载体的有:质粒、动植物病毒、λ噬菌体衍生物,烟草花叶病毒是植物病毒,可以做运载体,D正确。
3.下列有关基因工程的相关叙述,不正确的是()A.目的基因主要指编码蛋白质的结构基因B.基因表达载体的构建是基因工程的核心C.限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸D.DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键【答案】D【解析】目的基因要表达目的性状,故A正确。
目的基因依赖基因表达载体导入受体细胞,故B正确。
目前发现的限制酶都是切割DNA的酶,不能切割烟草花叶病毒的RNA,故C正确。
DNA连接酶可催化脱氧核糖和磷酸之间形成磷酸二酯键,故D错误。
4.下列技术中,不是依据DNA分子杂交原理的是()A.检测目的基因是否导入了受体细胞B.检测目的基因是否转录出了mRNAC.检测目的基因是否翻译合成蛋白质D.快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量【答案】C【解析】用目的基因制成基因探针,依据碱基互补配对原则,检测目的基因是否导入了受体细胞、是否转录出了mRNA、快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量,而目的基因是否翻译合成蛋白质的检测是用抗原-抗体的杂交实验,虽然也属于分子水平的检测,但不是依据DNA分子杂交的原理。
基因工程习题及答案
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第二章习题一、单选题1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指( B )A.I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶E. RNAase2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B )A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。
B. 它们的识别序列完全相同。
C. 它们的切割方式可以相同,也可以不同。
D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样,但切割位点间的序列一样。
E. 两种同裂酶的切割产物连接后,可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。
3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是( A )A. 37℃B.30℃C.25℃D.16℃E.33℃4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B )A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。
B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。
C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP,S-腺苷蛋氨酸能促进反应,但不是绝对需要。
D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性,II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。
E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点,具有高度精确性。
5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D )A. 1/44B. 1/66C. 1/64D.1/46E. 1/1066. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C )A. PH:2-4B. PH:4-6C. PH:6-8D. PH:8-10E. PH:4-107. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D )A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后,可能会阻碍限制酶的酶解活性。
B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。
C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。
D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液,是由于磷酸根会抑制限制酶反应。
E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用,所以酶切反应中常加入一定量的BSA。
基因工程试题及答案解析
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基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是:A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案:D2. 基因工程中,用于将目的基因导入植物细胞的方法是:A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案:C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤?A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案:C二、填空题1. 基因工程中,常用的运载体有____、____和____。
答案:质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中,常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案:抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案:基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中,基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物;在医学领域,基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等;在工业上,基因工程可以用于生产酶、疫苗等;在环境保护方面,基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中,如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达?答案:确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面:首先,目的基因需要有合适的启动子和终止子,以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止;其次,需要考虑目的基因的密码子偏好性,以确保其在宿主细胞中能被高效翻译;再次,需要考虑目的基因的稳定性,避免其在宿主细胞中被降解;最后,还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案:基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病;基因治疗可以用于治疗遗传性疾病;疾病诊断可以通过基因检测来实现;基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而,基因工程的应用也带来了伦理问题,如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)
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高中生物《基因工程》练习题题号一二总分得分一、单选题(本大题共20小题,共20.0分)1.如图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次为()A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是()A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C. 选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。
下列有关基因工程的说法错误的是()A. 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B. 任何基因表达载体的构建都是一样的,没有差别C. 图中启动子和终止子不同与起始密码子和终止密码子D. 抗生素抗性基因的作用是作为标记基因,用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者,而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限制酶的降解。
下列在动物体内发生的过程中,与上述细菌行为相似的是()A. 巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B. T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C. 组织液中抗体与抗原的特异性结合D. 疫苗诱导机体产生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示,最好应选用下列哪种质粒作为载体()A. B.C. D.6.下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。
下列相关叙述正确的是()A. 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B. Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C. 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D. 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法,正确的是()A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下,在试管中进入物质X和物质Z,可得到相应产物Y.下列叙述正确的是()A. 若X是DNA,Y是RNA,则Z是逆转录酶B. 若X是DNA,Y是mRNA,则Z是脱氧核苷酸C. 若X是RNA,Y是DNA,则Z是限制性内切酶D. 若X是mRNA,Y是核糖体上合成的大分子,则Z是氨基酸9.下图表示的是三种黏性末端,下列说法正确的是A. 甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B. 若甲中的G处发生突变,限制酶可能无法识别该切割位点C. 乙中的酶切位点在A与G之间D. 目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
大学基因工程试题及答案
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大学基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶属于哪一类酶?A. 核酸酶B. 蛋白酶C. 脂肪酶D. 淀粉酶答案:A2. 以下哪个不是基因工程的基本步骤?A. 目的基因的克隆B. 目的基因的表达C. 目的基因的检测D. 目的基因的复制答案:D3. 基因工程中常用的运载体有哪些?A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 所有以上答案:D二、填空题1. 基因工程中常用的_________技术可以用于目的基因的检测。
答案:PCR2. 基因工程中,_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。
答案:转化3. 在基因工程中,_________是将目的基因插入到运载体中形成重组DNA分子的过程。
答案:克隆三、简答题1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案:基因工程在医学领域的应用包括生产重组药物、基因治疗、疾病诊断和疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的克隆过程。
答案:目的基因的克隆过程包括提取目的基因、构建基因文库、筛选含有目的基因的克隆、目的基因的扩增和纯化等步骤。
四、论述题1. 论述基因工程技术在农业中的应用及其可能带来的问题。
答案:基因工程技术在农业中的应用包括改良作物品质、提高作物产量、增强作物抗病虫害能力等。
可能带来的问题包括生态平衡的破坏、基因污染、食品安全问题等。
2. 分析基因工程中目的基因表达调控的重要性及其策略。
答案:目的基因表达调控在基因工程中至关重要,它决定了基因工程产品的功能和产量。
调控策略包括启动子的选择、增强子的应用、转录后调控等。
基因工程原理习题与答案
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基因工程原理习题集1、DNA分子克隆技术:克隆,指含有单一的DNA重组体的无性繁殖系,或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程。
DNA分子克隆技术也称基因克隆技术,是在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接,转入细胞获得大量拷贝的过程。
其基本步骤包括:制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接,制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。
载体在细胞内自我复制,并带动重组的分子片段共同增殖,从而产生大量的DNA分子片段。
主要目的是获得某一基因或DNA 片段的大量拷贝,有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆,就可以深入分析基因的结构与功能,随着引入的DNA片段不同,有两种DNA库,一种是基因组文库,另一种是cDNA库.2、分子杂交:两条不同来源的DNA(或RNA)链或DNA与RNA之间存在互补顺序时,在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子,这种分子称为杂交分子。
形成杂交分子的过程称为分子杂交。
3、限制性片段长度多态性:从不同个体制备的DNA,使用同一种限制性内切酶酶切,切得的片段长度各不相同。
酶切片段的长度可以作为物理图谱或者连接图谱中的标记子.通常是在酶切位点处发生突变而引发的。
4、报告基因:一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个表达产物非常容易被鉴定的基因、5、多聚酶链式反应(PCR):一种体外扩增DNA的方法.PCR使用一种耐热的多聚酶,以及两个单链引物。
以过高温变性将模板DNA分离成两条链。
低温退火使得引物和一条模板单链结合,然后是中温延伸,反应液的游离核苷酸紧接着引物从5/端到3/端合成一条互补的新链。
而新合成的DNA又可以继续进行上述循环,因此DNA的数目不断倍增。
6、核酸的凝胶电泳:将某种分子放到特定的电场中,它就会以一定的速度向适当的电极移动。
某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的迁移率,它与电场强度成正比,与该分子所携带的净电荷数成正比,而与分子的摩擦系数成反比(分子大小、极性、介质的粘度系数等)。
基因工程测试题(附解析)
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基因工程测试题(附解析)一、基础题点练1.(2019·徐州模拟)已知限制性内切酶Xma Ⅰ和Sma Ⅰ的识别序列分别为C CCGGG 和CCC GGG。
有关这两种酶及应用的叙述,错误的是()A.这两种酶作用的底物都是双链DNAB.DNA 中出现这两种酶识别序列的几率不同C.Xma Ⅰ切割DNA 形成的黏性末端是—GGCCD.使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等解析:选B 限制酶作用的底物是双链DNA 分子;这两种限制酶作用的核苷酸序列相同,所以这两种识别序列在DNA 中出现的的几率相同;根据碱基互补配对原则,CCCGGG 的互补链是GGGCCC,并根据Xma Ⅰ的切割位点可知,切割后的黏性末端是—CCGG;温度能影响酶的活性,所以使用酶时需要注意控制反应温度和时间等。
2.如图表示的是三种黏性末端,下列说法正确的是( ) ↓↓A.图中所示黏性末端是由同种限制酶切割形成B.若图甲中的G 碱基处发生突变,限制酶可能无法识别该切割位点C.图中所示黏性末端是限制酶断开氢键形成D.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物GAATTC 解析:选B 产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG =====,产生乙黏性末端的限制酶CAATTG CTTAAG 的识别序列为GTTAAC =====,产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为GAATTC =====,可见甲、乙、丙黏性末端是由3种限制酶作用产生的;限制酶具有专一性,能够识别双链DNA 分子的某种特定核苷酸序列,如果甲中的G 发生突变,限制酶可能无法识别该切割位点;图中所示黏性末端是限制酶断开磷酸二酯键形成的;质粒是环状DNA 分子,噬菌体和动植物病毒都没有细胞结构,它们都不属于原核生物。
3.下列关于蛋白质工程的叙述,错误的是()A.蛋白质工程的基础是基因工程B.蛋白质工程遵循的原理包括中心法则C.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构D.蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子解析:选C 蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造,或合成新的蛋白质,故蛋白质工程的基础是基因工程;蛋白质工程遵循的原理包括中心法则;蛋白质工程是通过改造基因来实现对蛋白质分子的改造的;蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
基因工程练习题带答案
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基因工程练习题一、单项选择题1.在基因工程中,切割载体和含有目的基因的DNA片段中,一般需使用A.同种限制酶B.两种限制酶C.同种连接酶D.两种连接酶2.基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞A.①②③④B.①②③C.②③④D.①②④3.有关基因工程的叙述正确的是A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C.质粒都可作为载体D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料4.下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA5.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。
在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的是A.人工合成目的基因B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的检测表达6.不是基因工程方法生产的药物是A.干扰素B.白细胞介素C.青霉素D.乙肝疫苗7.在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶8.下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或多个限制酶切点9.水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中有三种氨基酸构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中,这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达10.应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。
这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子10/ 1C.合成β—球蛋白的DNAD.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段11.基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。
第18讲 基因工程(练习)(解析版)
![第18讲 基因工程(练习)(解析版)](https://img.taocdn.com/s3/m/c1d8ac7f59fb770bf78a6529647d27284b7337a0.png)
第18讲基因工程目录01 基因工程101 基因工程1.(不定项)聚合酶链式反应(PCR)是一种体外扩增DNA片段的技术。
某DNA片段的PCR反应程序如图所示。
下列叙述错误的是()A.预变性可促进模板DNA边解旋边复制B.退火是让解旋状态模板DNA恢复双螺旋C.延伸结束后,新片段中的引物将被切除D.终延伸可使目的基因的扩增更加充分【答案】ABC【分析】PCR过程为①变性,当温度超过90①时,氢键断裂,双链DNA解聚为单链;①复性,当温度降低到50①左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;①延伸,温度上升到72①左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
【详解】A、预变性的目的是破坏DNA中可能存在的较难破坏的复杂二级结构,使DNA充分变性,A错误;B、退火是让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,B错误;C、延伸结束后,新片段中不会切除引物,C错误;D、终延伸过程是为了让引物完全延伸并让单链产物完全复性形成双链结构,可使目的基因的扩增更加充分,D正确。
故选ABC。
2.R型细菌生长至一定阶段会分泌感受态因子,诱导感受态特异蛋白质的表达;使细胞表面的DNA结合蛋白及核酸酶裸露,具有与DNA结合的活性。
S型细菌中控制荚膜形成的S基因吸附在R型细菌上即可整合到R型细菌的基因组中,完成转化。
据此解释格里菲思实验中只有少数R型细菌发生转化的原因,错误的是()A.S基因只有从加热杀死的S型细菌中释放出来才能促成R型细菌的转化B.只有少数的S基因可吸附在R型细菌上,完成部分R型细菌的转化C.蛋白质和DNA对高温的耐受力不同是导致蛋白质不是转化因子的原因D.R型细菌的转化与S基因的数量、R型细菌的状态有关【答案】A【详解】A、S基因从获得S型细菌中释放出来也能促成R型细菌的转化,A错误;B、因为R型细菌只有进入感受态才相对比较容易接受外源基因,而即使进入了感受态,也会受到外源基因大小等各种因素的影响,从而只有少数的S基因可吸附在R型细菌上,完成部分R型细菌的转化,B正确;C、蛋白质空间结构不稳定容易受到高温等因素的影响而变性,DNA空间结构为双螺旋结构较稳定;蛋白质和DNA对高温的耐受力不同是导致蛋白质不是转化因子的原因,C正确;D、转化效率受外源基因大小、数量、细菌密度及生长状况等因素的影响,故R型细菌的转化与S基因的数量、R型细菌的状态有关,D正确。
基因工程习题及答案.doc
![基因工程习题及答案.doc](https://img.taocdn.com/s3/m/e39f79fa77eeaeaad1f34693daef5ef7ba0d12da.png)
基因工程习题及答案.doc1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指(B ) A ? I 类限制酶 B. II 类限制酶111类限制酶 D.核酸内切酶2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是(BA.是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。
B. 它们的识别序列完全相同。
C. 它们的切割方式可以相同,也可以不同。
D. E. 两种同裂酶的切割产物连接后,可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。
3.多数限制酶消化DNA 的最佳温度是37 °C B. 30 °C C. 25 °C D. 16 °C E. 33 °C4. 下列关于限制酶的叙述错误的是(5.A. B.C.D.E. [类限制酶反应需要Mg2+、 II 类限制酶反应需要Mg2+、111类限制酶反应需要Mg2+、 ATP 和S-腺昔蛋氨酸。
ATP oATP , S-腺昔蛋氨酸能促进反应,但不是绝对需要。
I 、III 类限制酶对DNA 有切割和甲基化活性,II 类限制酶对DNA 只有切割活性而无甲基化活性。
TT 类限制酶要求严格的识别序列和切割点,具有高度精确性。
如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA 上识别6bp 的切割概率为(D )A. 1/44C. 1/64D. 1/46E. 1/1066.多数II 类限制酶反应最适PH 是(C )A. PH:2-4B. PH:4-6C. PH:6-8D. PH:8-10E. PH:4T07.下列关于限制酶反应的说法错误的是(D )A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嗜嚏、腺噂吟或尿嗜嚏被甲基化后,可能会阻碍限制酶的酶解活性。
B. 许多限制酶对线性DNA 和超螺旋DXA 底物的切割活性是有明显差异的。
8. C. D. E.有些限制酶对同一 DNA 底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。
限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液,是由于磷酸根会抑制限制酶反应。
BSA 对许多限制酶的切割活性都有促进作用,所以酶切反应中常加入一定量的BSA oII 类限制酶反应中必须的阳离子是(C )单选题E. RNAase有些同裂酶识别的完整序列不完全一样,但切割位点间的序列一样。
基因工程练习题(附答案)
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基因⼯程练习题(附答案)基因⼯程练习题1、在基因⼯程中使⽤的限制性核酸内切酶,其作⽤是( )A、将⽬的基因从染⾊体上切割出来B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列C、将⽬的基因与运载体结合D、将⽬的基因导⼊受体细胞2、基因⼯程中常⽤细菌等原核⽣物作受体细胞的原因不包括( )A、繁殖速度快B、遗传物质相对较少C、多为单细胞,操作简便D、DNA为单链,变异少3、基因⼯程是DNA分⼦⽔平的操作,下列有关基因⼯程的叙述中,错误的是( )A、限制酶只⽤于切割获取⽬的基因B、载体与⽬的基因可以⽤同⼀种限制酶处理C、基因⼯程所⽤的⼯具酶是限制酶,DNA连接酶D、带有⽬的基因的载体是否进⼊受体细胞需检测4、运⽤现代⽣物技术,将苏云⾦芽孢杆菌的抗⾍基因整合到棉花细胞中,为检测实验是否成功,最⽅便的⽅法是检测棉花植株是否有( )A、抗⾍基因B、抗⾍基因产物C、新的细胞核D、相应性状5、转基因动物转基因时的受体细胞是( )A、受精卵B、精细胞C、卵细胞D、体细胞6、基因⼯程中常见的载体是( )A、质体B、染⾊体C、质粒D、线粒体7、⽔母发光蛋⽩由236个氨基酸构成,其中Asp、Gly、Ser构成发光环,现已将这种蛋⽩质的基因作为⽣物转基因的标记,在转基因技术中,这种蛋⽩质的作⽤是( ) A、促使⽬的基因导⼊宿主细胞中B、促使⽬的基因在宿主细胞中复制C、使⽬的基因容易被检测出来D、使⽬的基因容易成功表达8、运⽤现代⽣物技术的育种⽅法,将抗菜青⾍的Bt基因转移到优质油菜中,培育出转基因抗⾍的油菜品种,这⼀品种在⽣长过程中能产⽣特异的杀⾍蛋⽩质,对菜青⾍有显著抗性,能⼤⼤减轻菜青⾍对油菜的危害,提⾼油菜产量,减少农药使⽤,据以上信息,下列叙述正确的是( )A、Bt基因的化学成分是蛋⽩质B、Bt基因中有菜青⾍的遗传物质C、转基因抗⾍油菜能产⽣杀⾍蛋⽩是由于具有Bt基因D、转基因抗⾍油菜产⽣的杀⾍蛋⽩是⽆机物9、⼈的糖蛋⽩必须经内质⽹和⾼尔基体进⼀步加⼯合成,通过转基因技术,可以使⼈的糖蛋⽩基因得以表达的受体细胞是( )A、⼤肠杆菌B、酵母菌C、T噬菌体 D、质粒DNA410、不属于质粒被选为基因运载体的理由是()A.能复制 B.有多个限制酶切点C.具有标记基因D.它是环状DNA11.下列关于各种酶作⽤的叙述,不正确的是()A.DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接B.RNA聚合酶能与基因的特定位点结合,催化遗传信息的转录C.⼀种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列,切割出多种⽬的基因D.胰蛋⽩酶能作⽤于离体的动物组织,使其分散成单个细胞12、治疗⽩化病、苯丙酮尿症等⼈类遗传疾病的根本途径是A、⼝服化学药物B、注射化学药物C、利⽤辐射或药物诱发致病基因突变D、采取基因疗法13.下列与基因⼯程⽆关的是( )A、培养利⽤“⼯程菌”⽣产胰岛素B、基因治疗C、产⽣⼈胰岛素的⼤肠杆菌D、杂交育种14.基因⼯程的设计施⼯是在什么⽔平上进⾏的 ( )A.细胞B.细胞器C. 原⼦D.分⼦15.⼈胰岛细胞能产⽣胰岛素,但不能产⽣⾎红蛋⽩,据此推测胰岛细胞中()A.只有胰岛素基因B.⽐⼈受精卵的基因要少C.既有胰岛素基因,也有⾎红蛋⽩基因和其他基因D.有胰岛素基因和其他基因,但没有⾎红蛋⽩基因16、能够使植物体表达动物蛋⽩的育种⽅法是()A、单倍体育种B、杂交育种C、基因⼯程育种D、多倍体育种17、要彻底治疗⽩化病必须采⽤()A.基因治疗 B.医学⼿术C.射线照射 D.⼀般药物18、下列哪项不是基因⼯程中经常使⽤的⽤来运载⽬的基因的载体()A、细菌质粒B、噬菌体C、动植物病毒D、细菌核区的DNA19、在基因⼯程中,作为基因运输⼯具的运载体,下列特征除哪项外,都是运载体必须具备的条件()A、能够在宿主细胞中复制,并稳定地保存B、具有多个限制酶切点C、必须是细菌的质粒或噬菌体D、具有某些标记基因20、1993年,我国科学⼯作者培育成的抗棉铃⾍的转基因抗⾍棉,其抗⾍基因的来源()A.普通棉花的基因突变B.棉铃⾍变异形成的致死基因C.寄⽣在棉铃⾍体内的线⾍D.苏云⾦芽孢杆菌体内的抗⾍基因21.正确表⽰基因操作“四步曲”的是()①提取⽬的基因②⽬的基因导⼊受体细胞③⽬的基因与运载体的结合④⽬的基因的检测和表达A.①②③④B.④①③②C.①③②④D.③①②④22.现有⼀长度为1000碱基对(bp)的DNA分⼦,⽤限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分⼦仍是1000bp,⽤KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分⼦,⽤EcoRI、KpnI同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分⼦。
基因工程测试题及答案
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基因工程测试题及答案一、选择题(每题2分,共10分)1. 基因工程中常用的限制酶主要来源于:A. 病毒B. 细菌C. 真菌D. 植物答案:B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤?A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的降解答案:D3. 基因工程中常用的载体不包括:A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 病毒答案:D4. 基因工程中,用于连接目的基因和载体的酶是:A. 限制酶B. DNA连接酶C. DNA聚合酶D. 反转录酶答案:B5. 基因工程中,用于将重组DNA导入受体细胞的方法不包括:A. 转化B. 转染C. 转导D. 转录答案:D二、填空题(每题2分,共10分)1. 基因工程中,将外源基因导入植物细胞的方法主要有______和______。
答案:农杆菌介导法;基因枪法2. 在基因工程中,______是将目的基因插入到载体DNA分子中的关键步骤。
答案:克隆3. 基因工程中,______是将重组DNA导入受体细胞的常用方法。
答案:转化4. 基因工程中,______是将目的基因表达成蛋白质的步骤。
答案:表达5. 在基因工程中,______是检测目的基因是否成功表达的重要手段。
答案:分子杂交三、简答题(每题5分,共20分)1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案:基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的获取方法。
答案:目的基因的获取方法包括从基因文库中筛选、利用PCR技术扩增、人工合成等。
3. 解释基因工程中载体的作用。
答案:载体在基因工程中的作用是携带目的基因进入受体细胞,并在其中复制和表达。
4. 阐述基因工程中转化过程的重要性。
答案:转化过程是将重组DNA导入受体细胞的关键步骤,它决定了目的基因能否在受体细胞中稳定存在和表达。
四、论述题(每题10分,共20分)1. 论述基因工程在农业领域的应用及其可能带来的问题。
基因工程习题题目练习(附答案)版
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基因⼯程习题题⽬练习(附答案)版基因⼯程原理复习题思考题考试时间:2009.06.21 上午9:00-11:00 地点5D305基因⼯程绪论1、基因⼯程的定义与特征。
定义:在体外把核酸分⼦(DNA的分离、合成)插⼊载体分⼦,构成遗传物质的新组合(重组DNA),引⼊原先没有这类分⼦的受体细胞内,稳定地复制表达繁殖,培育符合⼈们需要的新品种(品系),⽣产⼈类急需的药品、⾷品、⼯业品等。
特征:1、具跨越天然物种屏障的能⼒。
2、强调了确定的DNA⽚段在新寄主细胞中的扩增。
2、试述基因⼯程的主要研究内容。
1)、⽬的基因的分离2)、DNA的体外重组(载体、受体系统等)3)、重组DNA分⼦转移到受体细胞及其筛选4)、基因在受体细胞内的扩增、表达、检测及其分析。
3、基因⼯程在⾷品⼯业上有何应⽤发展?主要是通过基因重组,使各种转基因⽣物提⾼⽣产⾕氨酸、调味剂、酒类和油类等有机物的产率;或者改良这些有机物组成成分,提⾼利⽤价值。
4、转基因是⼀把双刃剑,请客观谈谈对转基因及转基因⾷品安全性的认识。
转基因技术所带来的好处是显⽽易见的,在⼈类历史进步和发展中起到了积极作⽤。
⾸先,通过该项技术可以提供⼈们所需要的特性,改良培育新品种;第⼆,延长⾷品保存时间或增加营养成分;第三,将抗⾍防菌基因转⼊到作物中,使作物本⾝产⽣抵抗病⾍害侵袭的能⼒,减少了农药的使⽤量,有利于环境保护;第四,转基因技术及基因⾷物在医学⽅⾯得到⼴泛研究和应⽤。
⼈们对转基因技术的主要担忧在于环境⽅⾯。
外源基因的导⼊可能会造就某种强势⽣物,产⽣新物种或超级杂草、损害⾮⽬标⽣物、破坏原有⽣物种群的动态平衡和⽣物多样性,也即转基因⽣物存在潜在的环境安全问题。
转基因作物的⼤⾯积种植已有数年,⾷⽤转基因⾷品的⼈群⾄少有10亿之多,但⾄今仍未有转基因⾷品对⽣命造成危害的实例;更何况⽬前每⼀种基因⼯程⾷品在上市前,都要经过国家法律认可,⾷品卫⽣部门和环境部门的严格检测。
《基因工程》练习
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《基因工程》练习一、选择题1.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法正确的是()A.整个提取过程中可以不使用离心机B.研磨液在4℃冰箱中放置几分钟后,应充分摇匀再倒入烧杯中C.鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变D.仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰2.如图表示构建重组质粒和筛选含人胰岛素原基因的细菌的过程,其中I和II表示抗性基因,①—⑦表示过程,其它数字表示菌落。
下列有关叙述正确的是()(注:⑦过程表示用灭菌绒布从含氨苄青霉素培养基中蘸取菌种,再按到含四环素培养基中培养)A.①②只能用同一种限制性核酸内切酶进行切割B.I表示抗氨苄青霉素基因,II表示抗四环素基因C.3、5菌落是筛选出的含有人胰岛素原基因的细菌D.该基因工程成功的标志是细菌合成具有生物活性的胰岛素3.用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段(限制酶在对应切点一定能切开),酶切位点及酶切产物分离结果如图。
下列叙述错误的是()A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B.图1中酶催化反应的化学键是氢键C.图2中②可能是用Xho I处理得到的酶切产物D.用XhoI和SalI同时处理该DNA,电泳后得到6种产物4.下列关于“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述中,正确的是()A.用鸡血作为材料,原因是鸡血红细胞有细胞核,其他动物红细胞没有细胞核B.用不同浓度的NaCl溶液进行DNA粗提取,原因是DNA在其中溶解度不同C.用酒精进行提纯,原因是DNA溶于酒精,蛋白质不溶于酒精D.用二苯胺试剂进行鉴定,原因是DNA溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色5.菊花是一种双子叶植物,易感桃蚜而影响植物生长。
某科研团队获得了转GNA基因(表达产物能有效抑制桃蚜生长)菊花,流程如图所示。
下列相关叙述错误的是()A.过程a、b分别表示逆转录和PCR,可获得大量GNA基因B.图中用到的Ti质粒是取自土壤中农杆菌的一种天然质粒C.图中c过程需要将GNA基因插入到Ti质粒的T-DNA中D.通过桃蚜接种实验可以检测图中菊花植株对桃蚜的抗性6.PCR 技术不仅可用于基础研究,还适用于日常的临床诊断、法医学调查和农业生物技术研究。
基因工程原理练习题及其答案
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基因工程复习题题型:名词解释(10个)30分;填空(每空1分) 20分;选择题(每题1分)10分;简答题(4个)20分;论述题(2个)20分.第一章绪论1。
名词解释:基因工程:按照预先设计好的蓝图,利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术,对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造,将一种生物(供体)的基因转移到另外一种生物(受体)中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程广义:指以改变生物有机体性状为目标,采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作,以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次.狭义:基因工程.克隆:无性(繁殖)系或纯系。
指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。
2.什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件.A)限制性内切酶和DNA连接酶的发现(标志着DNA重组时代的开始);B) 载体的使用;C) 1970年,逆转录酶及抗性标记的发现。
4。
基因工程研究的主要内容是什么?基础研究:基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究:基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释:限制性核酸内切酶:一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶.回文结构:双链DNA中的一段倒置重复序列,当该序列的双链被打开后,可形成发夹结构。
同尾酶:来源不同、识别序列不同,但产生相同粘性末端的酶。
同裂酶:不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端:DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合,这样的DNA末端,称为粘性末端。
平末端:DNA片段的末端是平齐的。
基因工程原理作业及答案
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基因工程原理作业及答案第一章绪论1、请谈谈它的基本步骤?①源DNA 片段与载体连接论和技术两个方面谈谈础?稳定地繁殖。
理论基础:①在40因的分子载体是DNA 传的物质基础问题;②在50递的问题;③在50技术基础:①60年代-70接酶解决了对DNA ④60移杂交技术对DNA 3、基因克隆、基因操作、基因重组、基因工程的概念及其相互联系。
基因克隆(Genecloning):是指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程,其目的在于获得大量的基因拷贝,在技术上主要包括载体构建、大肠杆菌遗传转化、重组子筛选和扩大繁殖等环节。
基因工程:是通过基因操作,将目的基因或DNA 片段与合适的载体连接转入目标生物细胞,通过复制、转录、翻译外源目的基因以及蛋白质的活性表达,使转基因生物获得新的遗传性状的操作。
基因操作:对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。
基因重组:不同来源DNA 分子通过共价连接(磷酸二酯键)而组合成新的DNA 分子的过程。
2、哪些酶可用于DNA 片段的末端标记?Klenow DNA 聚合酶和T4或T7DNA 聚合酶在对DNA 片段进行末端补平反应或末端的置换反应时可引入标记的核苷酸。
3、DNA 聚合酶有哪些类型,各有什么活性?① E.coliDNApolI:5’-3’DNA 聚合酶活性;5’-3’DNA 外切酶活性;3’-5’DNA 外切酶活性。
心相印图文工作室整理luqiu910② E.coliDNApolI大片段(Klenow酶):5′→3′DNA聚合酶活性;3′→5′DNA外切酶活性;5’-3’DNA外切酶活性。
③T4噬菌体DNApol:5′→3′DNA聚合酶活性(与Klenow酶相似);3′→5′外切酶活性(Klenow酶×200):在无dNTP时只有该活性。
(常用于填平dsDNA的3′缩进末端及水解dsDNA的3′突出末端。
)④T7噬菌体DNApol酶活性;1000)。
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基因工程原理练习题及其答案一、填空题1.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2.基因工程的两个基本特点是:(1)____________,(2)___________。
3.基因克隆中三个基本要点是:___________;_________和__________。
4.碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。
5.同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。
6.部分酶切可采取的措施有:(1)____________(2)___________ (3)___________等。
7.第一个分离的限制性内切核酸酶是___________;而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。
8.限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同,但识别的序列都是_________,它们属于_____________。
9.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段,具有两种酶活性:(1)____________;(2)________________的活性。
10.为了防止DNA的自身环化,可用_____________去双链DNA__________________。
11.EGTA是____________离子螯合剂。
12.测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶,它只有_____________酶的活性,而没有_______酶的活性。
13.切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。
14.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式,通常可采用_________或_______________。
15.反转录酶除了催化DNA的合成外,还具有____________的作用,可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。
16.基因工程中有3种主要类型的载体:_______________、_____________、______________。
17.就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:_______________、_____________、______________。
另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
18.琼脂糖凝胶的分辨力与胶浓度的关系是。
19.如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率,称为________________。
20.影响限制性内切酶活性的因素________________、________________、________________、________________。
21.连接反应的实用温度为________________。
22.pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。
pUC系列的载体是通过和两种质粒改造而来。
它的复制子来自,Amp 抗性基因则是来自。
23.噬菌体之所以被选为基因工程载体,主要有两方面的原因:一是;二是。
24.野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因是和。
25.黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体,它的复制子来自、COS位点序列来自,最大的克隆片段达到kb。
26.野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体,原因是:(1)(2) (3) 。
27.噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的,其中来自质粒的主要结构是,而来自噬菌体的主要结构是。
28.λ噬菌体载体由于受到包装的限制,插入外源DNA片段后,总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。
29.在分离DNA时要使用金属离子螯合剂,如EDTA和柠檬酸钠等,其目的是。
30.用乙醇沉淀DNA时,通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子,如NaCl和NaAc,其目的是。
31.引物在基因工程中至少有4个方面的用途:(1) (2)(3) (4) 。
32.Clark发现用Taq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端,而是有一个突出碱基末端的双链DNA分子。
根据这一发现设计了克隆PCR产物的。
33.在cDNA的合成中要用到S1核酸酶,其作用是切除在。
34.乙醇沉淀DNA的原理是。
35.假定克隆一个编码某种蛋白质的基因,必须考虑其表达的三个基本条件:(1)________________________________ (2)_____________________________(3)_________________________________。
36.受体细胞的感受态是___________________________________。
37.DNA重组连接的方法大致分为四种:(1)_____________(2)_______________(3)___________________________(4)___________________________。
38.将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个___________,各种此类质粒的集合体称之为构建了一个_________________。
39.将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个____________,源于同一批RNA制备物的克隆群则构建了一个_________________。
40.只要知道基因组中某一特定区域的部分核苷酸组成,用___________可以将这段DNA 进行百万倍的扩增。
41.人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为___________时吸附DNA, ___________时摄人DNA。
42.目前,在重组体的筛选中,已经发展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法。
大致可以分为:(1)_______________(2)_______________(3)___________________(4)____________________________等。
43.PCR扩增筛选重组体是比较简便的筛选方法,它适合于___________________________。
44.核酸杂交探针可分为两大类:DNA探针和RNA探针。
其中DNA探针又分为__________ 探针和__________________探针。
45.RNaseH的活性为________________________________________________ 。
46.第一个用于基因克隆的天然质粒。
47.噬菌粒载体的包装需要________________的帮助下才能完成。
48.cDNA文库的特点:、、、。
49.用________________处理大肠杆菌,能增加膜的通透性。
50.在________________技术中,DNA限制性片段经凝胶电泳分离后,被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上,然后与放射性的DNA探针杂交。
51.可用T4 DNA聚合酶进行平末端的DNA标记,因为这种酶具有____________和_______的活性。
52.根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体,必需考虑三种因素:(1)_______________(2)________________________(3)______________________。
53.Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别:(1)_______________________________________________________________________(2)_______________________________________________________________________。
54.外源基因导入植物细胞的方法有:。
答案1.702.(1)分子水平上的操作;(2)细胞水平上的表达3.克隆基因的类型;受体的选择;载体的选择4.增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械力(震荡)的作用而降解。
5.超螺旋大于线性大于开环。
6.(1)减少酶量;(2)缩短反应时间;(3)增大反应体积7.EcoK;EcoRl8.GGCC;异源同工酶9.枯草杆菌蛋白酶;(1)5'-3'合成酶的活性;(2)3'-5'外切核酸酶10.碱性磷酸酶;5’端的磷酸基团11.Ca2+12.5'-3'合成;3'-5'外切13.DNA聚合酶I:5'一3'外切核酸酶;5'一3'合成酶14.S1核酸酶切割;DNA聚合酶补平15.核酸水解酶H;RNA16.质粒DNA;病毒DNA;质粒和病毒DNA杂合体17.复制区:含有复制起点;选择标记:主要是抗性基因;克隆位点:便于外源DNA的插入18.正比19,星号(*)活性20.DNA的纯度、DNA的甲基化程度、温度、缓冲液(Buffer)21. 4~16 ︒C22.pBR322和M13;pMBl;转座子23.它在细菌中能够大量繁殖,这样有利于外源DNA的扩增;对某些噬菌体(如λ噬菌)的遗传结构和功能研究得比较清楚,其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽24.没有合适的限制性内切核酸酶识别位点;选择标记25.质粒;λ噬菌体;4526.(1)分子量大,(2)酶的多切点,(3)无选择标记27.复制区;IG区28.75%~105%29.螯合Mg2+离子,抑制核酸酶的活性30.中和DNA分子的负电荷,增加DNA分子间的凝聚力31.(1)合成探针;(2)合成cDNA;(3)用于PCR反应;(4)进行序列分析32.T—载体33.第二链合成时形成的发夹环•34.乙醇使DNA分子脱水35.(1)保持正确的可读框(2)能够使其转录的启动子(3)具有翻译的起始和终止信号36.接受外源DNA的生理状态37.(1)黏性末端连接;(2)平末端连接;(3)同聚物接尾连接;(4)接头连接法38.基因组DNA克隆;基因组DNA文库39.cDNA克隆;cDNA文库40.聚合酶链式反应(PCR)41.0︒C;42︒C42.(1)遗传学方法;(2)物理筛选法;(3)核酸杂交法;(4)表达产物分析法43.插入外源片段的种类较多,大小又极为相似的重组体的筛选44.基因组DNA;cDNA45.5’→3’或3’→5’方向特异地水解RNA-DNA杂交双链中的RNA链46.pSC10147.辅助噬菌体48.(1)不含内含子序列。
(2)可以在细菌中直接表达。
(3)包含了所有编码蛋白质的基因。
(4)比DNA文库小的多,容易构建49.CaCl250.Southern印迹51.5’→3’合成酶;3’ →5’外切核酸酶52.(1)克隆的是完整的基因;(2)使用的是表达载体;(3)不含内含子53.(1)印迹的对象不同:Northern是RNA,Southern是DNA;(2)电泳条件不同,前者是变性条件,后者是非变性条件54.叶盘法、电击法、基因枪法二、选择题(单选或多选)1.因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是( )(a)A.Kornberg (b)W.Gilbert (c)P.Berg (d)B.McClintock2.第一个作为重组DNA载体的质粒是( )(a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl83.关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有( )不太恰当。