2019届高中生物一轮复习方案课件：第12单元+2+第40讲微生物的培养与应用

答案：(1)琼脂 (4)稀释
淀粉
(2)C
(3)搅拌
高压蒸汽灭菌 扩大
稀释涂布平板
(5)淀粉酶
考向 2
微生物的纯化技术
2．(2017· 高考江苏卷)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中， 对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理 废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：
(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚 和水，其中可作为碳源的有______________。
(2)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐 渐________，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落 过于密集，应进一步________，以便于菌落计数与分离。制备 平板培养基时除了需要水、 营养物质外， 还必须添加________。 (3) 如 图 为 连 续 划 线 法 示 意 图 ， 在 图 中 ________(填图中序号)区域更易获得单菌落。 (4) 采用比色测定法 ( 使用苯酚显色剂 ) 检测降解 后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应， 下表中 1～5 号比色管的苯酚浓度应分别为_____________。
答案：不是。微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等 方法，其核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
考向 1
培养基及其制备方法及无菌技术的操作
1．(2018· 湖南长沙浏阳四中一模 )高温淀粉酶在大规模工业生 产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出了能高效生产高 温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示。回答下列问题：
5.菌种的保藏方法 (1)临时保藏法：对于
频繁
使用的菌种，先接种到试管的
固体斜面 培养基上培养，然后放入 4 ℃的冰箱中保藏。 ____________
(2)甘油管藏法：对于需要 长期保存 的菌种，先将菌液转入灭 菌后的 甘油 中，混匀后放在 －20 ℃冷冻箱中保存。
(选修 1 P18“旁栏小资料”改编)微生物的接种方法只有平板 划线法和稀释涂布平板法吗？微生物接种的核心是什么？
(1)Ⅰ号培养基从物理状态来看，属于固体培养基，配制时要加 入 ________ 作为凝固剂，从用途来看属于选择培养基，应以 ________作为唯一碳源。 (2)配制固体培养基的基本步骤是( )
A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板
营养物质 的不同需求，配制
生长繁殖 的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有 水、碳源、氮源 和无机盐。此外， 还需要满足微生物生长对 pH、 氧气以及 特殊营养物质 的要求。
固体 (3)分类 液体
培养基：含凝固剂 培养基：不含凝固剂
2．无菌技术的主要方法及适用对象[连一连]
3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
管号 苯酚浓度(mg/L)
1
2
3
4
5
6 1
如果废水为 50 mg/L 苯酚溶液，降解后约有 21%的苯酚残留， 则需将残留液稀释________(填序号：①5 ②10 ③20)倍后，再进行比色。
解析：(1)富集培养基中蛋白胨、苯酚都是含 C 的有机物，可作 为碳源。(2)欲富集酚降解菌，需随转接次数增加逐渐增加培养 基中苯酚的含量；若接种培养后平板上菌落过于密集，则应进 一步稀释后再进行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落计 数与分离；平板培养基是固体培养基，除含有水、营养物质(碳 源、氮源、无机盐等 )外，还需添加琼脂作为凝固剂。 (3)利用 连续划线法接种时， 最后的划线区域(③)中， 菌体的密度较小， 容易获得单菌落。(4)因系列浓度梯度中 6 号比色管中苯酚浓度 为 1 mg/L，故 1～5 号比色管中的苯酚浓度应分别为 0 mg/L、 0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L；根据题意，废水为
解析：固体培养基通常加入琼脂作为凝固剂。本实验的目的是 获得产生高温淀粉酶的嗜热菌，故其选择培养基中应以淀粉作 为唯一碳源。 配制固体培养基的基本步骤是计算、 称量、 溶化、 灭菌、倒平板。配制培养基加热溶化时，要注意加入琼脂后要 不断搅拌，防止琼脂糊底和溢出。对培养基的灭菌一般采用高 压蒸汽灭菌。仔细观察题图可知，过程①是菌液稀释，过程② 是采用涂布法接种。能产生淀粉酶的部分细菌能分解利用淀粉， 其菌落周围会出现透明圈，取这样的菌落再分离纯化可获得相 应菌种，以后可以扩大培养用于生产。
4．纯化大肠杆菌 (1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成 单个 细胞，使其长成 单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。 (2)主要方法及纯化原理 主要方法 平板示 意图
平板划线 法
稀释涂布平板 法
梯度 通过 连续划线 操作 将菌液进行一系列的______ 纯化原理 稀释 实现的 ____和涂布平板操作实现的
50 mg/L 苯酚溶液，降解后约有 21%的苯酚残留，要使稀释后 的苯酚残留液浓度介于 0～1 mg/L， 需将残留液稀释 20 倍左右。 答案：(1)蛋白胨、苯酚 (4)0、0.2、0.4、0.6、0.8 (2)增加 ③ 稀释涂布 凝固剂 (3)③
第十二单元 生物技术实践
第40讲 微生物的培养与应用
第十二单元 生物技术实践
考纲点击
1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的 应用
培养基及微生物的纯化培养技术
1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对 出供其
(3)溶化时，烧杯中加入琼脂后要不停地________，防止琼脂糊 底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的方法一般为 ________________。 (4)① 过 程 是 ________ ， ② 过 程 所 使 用 的 接 种 方 法 是 ____________法。 (5) 部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放 ________ 分解培 养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，挑选相应的菌落，接 种到Ⅱ号培养基上进一步分离纯化后，再对菌种进行________ 培养。