冷沉淀制备方法及质量影响因素

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影响冷沉淀质量的关键因素分析

影响冷沉淀质量的关键因素分析冷沉淀（cryoprecipitate）是新鲜冰冻血浆（FFP）在低温（约0~4℃）解冻后沉淀的白色絮状物，是FFP的部分凝血因子浓集制品，其中主要成分有：Ⅷ因子、纤维蛋白原以及血管性血友病因子，纤维结合蛋白、ⅩⅢ因子等。

冷沉淀因其制作工艺简单、价格低廉，临床应用广泛。

适用于先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及Ⅷ因子缺乏症患者，血管性血友病（vWD）、儿童及成年人轻型甲型血友病患者，DIC及大出血患者的替代治疗等。

因冷沉淀中的Ⅷ因子为不稳定凝血因子，受多种因素影响，所以每袋冷沉淀Ⅷ因子含量各不相同，通过查阅相关资料及跟踪验证，对影响冷沉淀质量的关键因素分析，现报告如下：1 冷沉淀的制备方法冷沉淀制品是以新鲜冰冻血浆为原料，近年来因多联采血袋的广泛应用，冷沉淀的制作工艺更加简单，安全性更强，各地中心血站均能生产。

目前国内冷沉淀的制备常用两种方法[1]：1.1 离心法取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆（FFP），置室温中约5分钟，待双联袋导管（连接管）变软后，将血浆置入2～6℃水浴箱中融化。

当血浆基本融化时，取出血浆，在2±2℃的环境下重离心，使冷沉淀凝血因子下沉于塑料袋底部。

将上清分入空袋内，血袋底部的沉淀内大约含有20～30ml血浆，即为冷沉淀凝血因子。

1.2 虹吸法取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆（FFP），置室温中约5分钟，待双联袋导管（连接管）变软后，将新鲜冰冻血浆袋置于2～6℃水浴箱中，另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋，两袋形成一定的高度落差。

新鲜冰冻血浆融化时，上清血浆随时被虹吸入空袋中，冷沉淀遗留在新鲜冰冻血浆袋中。

在融化过程中控制水浴温度在2～6℃。

待新鲜冰冻血浆融化至约40～50ml时，即为冷沉淀凝血因子。

以上两种方法制备好的冷沉淀需迅速放入速冻机中冷冻，于-20℃以下冰箱中保存，保存期不超过一年，输注前于37℃水浴融化，并于4小时内输注。

2 冷沉淀的质量标准根据《全血及成分血质量要求》GB18469-2001规定，冷沉淀外观：肉眼观察30℃~37℃融化的冷沉淀凝血因子无纤维蛋白析出、无黄疸、无气泡、无重度乳糜。

4 种方法制备冷沉淀的质量分析

4 种方法制备冷沉淀的质量分析摘要】目的通过分析离心法和虹吸法制备冷沉淀（同批次制备）的质量，选择更加优化的冷沉淀制备方法。

方法取同一制备日期的冷沉淀原料血浆，分别采用冷藏融化离心法、水浴融化离心法（两种温度条件）、水浴融化虹吸法制备冷沉淀，分别按照机械抽样法抽样样品，检测冷沉淀中F Ⅷ含量并进行统计分析。

结果 4℃冷藏融化离心法的F Ⅷ含量为65.17±27.39（IU ／袋），合格率为40%（8／ 20）；4℃水浴融化离心法的F Ⅷ含量为89.67±39.96（IU ／袋），合格率为60％（12 ／ 20）；2℃水浴融化离心法的F Ⅷ含量为84.33±30.57（I U ／袋），合格率为：55％（11 ／ 20）；4℃水浴融化虹吸法F Ⅷ含量为108.85±42.41（IU ／袋），合格率为83.3％（25 ／ 30）。

经单因素方差分析，4℃水浴融化虹吸法的质量水平明显优于其他三种方法。

结论水浴融化虹吸法制备冷沉淀操作简便、快捷，F Ⅷ合格率高，明显优于冷藏融化离心法和水浴融化离心法，值得推广应用。

【关键词】冷沉淀凝血因子Ⅷ【中图分类号】R197.38 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）36-0061-02冷沉淀是采用特定的方法将保存期内的新鲜冰冻血浆（f r e s hfrozen plasma，FFP）在1℃～ 6℃融化后，分离出大部分的血浆，并将剩余的冷不溶解物质在1 小时内速冻成固态的成分血[1]。

根据冷沉淀在低温条件下不融化的特性，可制定不同的制备方法，目前血站常用的制备方法主要有：离心法，原料血浆放置于4±2℃冰箱或在4±2℃恒温水浴箱中融化，待基本融化后，在4±2℃重离心，分离出上层血浆，剩下少量血浆和沉淀物，制成冷沉淀；虹吸法，在4±2℃恒温循环解冻箱中放入原料血浆，转移空袋置于箱体外低位，松开止血夹，启动循环水流和震荡摇摆，血浆融化过程中，随时被虹吸至转移空袋中，当融化至剩下约少量血浆与沉淀物时，闭合导管，阻断虹吸，定量，制成冷沉淀[2]。

影响冷沉淀质量的关键因素分析

冷沉淀因其制作工艺简单、价格低廉，临床应用广泛。

当血浆基本融化时，取出血浆，在2±2℃的环境下重离心，使冷沉淀凝血因子下沉于塑料袋底部。

将上清分入空袋内，血袋底部的沉淀内大约含有20～30ml血浆，即为冷沉淀凝血因子。

新鲜冰冻血浆融化时，上清血浆随时被虹吸入空袋中，冷沉淀遗留在新鲜冰冻血浆袋中。

在融化过程中控制水浴温度在2～6℃。

待新鲜冰冻血浆融化至约40～50ml时，即为冷沉淀凝血因子。

以上两种方法制备好的冷沉淀需迅速放入速冻机中冷冻，于-20℃以下冰箱中保存，保存期不超过一年，输注前于37℃水浴融化，并于4小时内输注。

冷沉淀的制备及应用范围

冷沉淀的制备及应用范围冷沉淀是新鲜冰冻血浆在1~6℃条件下不溶解的白色沉淀物，它是P00l博士在1964-1965年期间发现的，被加热37℃时呈溶解的液态，主要含有第Ⅷ因子、纤维蛋白原、血管性血友病因子(VWF)、第ⅩⅢ、以及纤连蛋白等成分。

现就冷沉淀的制备、临床应用及效果给大家介绍一下。

1 冷沉淀的制备与质量1.1 冷沉淀的制备选取健康无偿献血者,各项检查指标合格,采集400mL全血后6~8h内经分离新鲜液体血浆于-50℃冻成型后的新鲜冰冻血浆放置-30℃保存。

制备冷沉淀时,将-30℃保存血浆放置于1~6℃环境下溶解、分离出冷不溶物,放置-30℃冻存或直接应用于临床。

1.1.1离心法(Pool)1.1.1.1原料血浆的融化1.1.1.1.14℃冷藏箱法：将原料血浆从-30℃冰箱内取出，置于1~6℃冷藏箱内缓慢融化。

1.1.1.1.2水浴融化法：将原料血浆从-30冰箱取出，值室温5分钟，待双联袋间的塑料管变软后，放入15℃水浴箱内，启动摇摆装置，约30分钟后温度调至4℃，当原料血浆袋全部融化时(约60~90分钟)，然后把水温调至0~2℃。

1.1.1.2融化后的原料浆于0~4℃以离心力2000g离心10分钟，使冷沉淀下沉于塑料袋底部，快速去除上清液,剩20~30mL左右即为冷沉淀。

1.1.2连续融化虹吸法(Mason),将原料浆袋置于1~6℃水浴装置中，另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋，两袋之间形成一定的落差，血浆溶化后随时被虹吸至空袋内，当融化至剩下40~50ml时，闭合导管，阻断虹吸，将冰冻血浆袋和冷沉淀热和断离。

1.2 冷沉淀的质量冷沉淀质量受温度、时间以及其他各种因素影响。

从采血到制备过程中室温制备原料浆会使第Ⅷ因子含量偏低;说明温度对冷沉淀质量有影响。

经研究使用亚甲蓝光照法(MB)进行病毒灭活的冷沉淀与原血浆比较,Ⅷ因子和血管性血友病因子(Vwf)活性分别别下降30%和11%,纤维蛋白原浓度下降40%。

冷沉淀制备过程中的关键因素探讨

血因子时，用于补充相应的凝血因子。冷沉淀是采用特定
的方法，将保存期内的新鲜冰冻血浆在１Ｃ～６ ℃融化，经离
层１２（１Ｕ、１．５Ｕ各３袋、２ｕ放入６袋）袋重叠摆放，与前
【中图分类号１Ｒ４５７．１２
【文献标识码】Ｂ
【文章编号１１６７１ — ２５８７（２０１５）０２ — ０１７２ — ０２分成２组，一组按规格放入不同的冰箱，每层放置９袋互不重叠，且各规格按２Ｕ、１．５Ｕ、１Ｕ顺序先后放人不同的４ ℃ ±２Ｃ冰箱，时间间隔分别相差１ｈ，融化１Ｏ～１４ｈ至原料浆成带小冰碴的糊状半流质；另一组不同规格混合放置，即每
现报告如下。
材料与方法
度４＇Ｃ，时间１０ｍｉｎ），将留下的２Ｏ～３０ｍｌ血浆与沉淀物混合，１ｈ内速冻，制成冷沉淀凝血因子。３冷沉淀质量标准参照中华人民共和国国家标准ＧＢ１８４６９－２０１２｛全血及成分血质量要求》，符合要求，视为合格。
现冷沉淀溶解的状况，进而影响ＦⅦ 因子含量；而原料浆分规格、分时段不重叠摆放方法，可保证每袋血浆均匀同步融化，有利于保证冷沉淀产品的质量。综上所述，制备冷沉淀时应注意把握好原料新鲜冰冻血浆在冰箱融化时的摆放方式这个关键控制点，对提高产品质量有一定的意义。

影响冷沉淀质量的因素分析

是指血浆冷沉淀中含有Ⅷ 因子及纤维蛋白原，可治疗缺乏Ⅷ 因子及纤维蛋白原而出血不止的患者及甲型血友病患者。融化后４ｈ输完，输速度不低于２００ｍＬ／ｈ，以患者所能接受的最大速度进行输注。５注意事项５．１不需要交叉配血，只需按ＡＢＯ血型相容原则输入。５．２输注前在３７℃水浴箱中１０ｍｉｎ内融化，以无冰晶为主，超过３７℃ 可能血浆纤维蛋白原析出，血浆中将出现条索状不容物，影响血液质量，因此，融化过程中轻轻摇动，避免局部温度过高。
冷沉淀即采用特定的方法，将保存期限内的新鲜冰冻血浆在１－６
子，Ⅷ 因子的含量受血液采集，制备，及速冻环节的影响。８ｈ２＿内制备的ＦＦＰ比１８ｈ制备的Ⅷ 因子高一半。可见，制备时间严重影响冷沉
℃融化后，分离出大部分的血浆，并将剩余的冷不溶解物在ｌｈ内速冻呈固态的成分血［１］。采集的全血在６－８ｈ，最迟不超过１８ｈ，进行分离
血液成分以达到治疗的目的，冷沉淀即为其中一项。冷沉淀ｃｒｙｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅ是新鲜冰冻血浆ＦＦＰ在低温约５。ｃ解冻后沉淀的白色絮状物，冷沉
淀因其制作工艺简单、价格低寐临床应用广泛。冷沉淀是指血浆冷沉淀中含有凝Ｊ￣－ＶＩＩＩ因子及纤维蛋白原，可治疗缺乏凝＿￣ＶｌＩＩ因子及纤维蛋白原
２９６・管理・教育・教学・
Ｍａｒｃｈ２０１７，Ｖｏｌ。

冷沉淀制备的关键控制环节

冷沉淀制备的关键控制环节目的：控制影响冷沉淀质量的关键环节，提高冷沉淀的质量。

方法：筛选从采集到制备间隔时间短、FⅧ损失少的全血制备的血浆留做冷沉淀原料浆。

保持良好的冷链系统，尽快低温分离成分血，控制好设备和环境温度，把握好制备的最佳时间等环节。

结果：2010年2-5月份冷沉淀质量控制结果显示，有25%不合格，不合格原因均为FⅧ因子含量达不到80 IU。

通过对上述各个环节的不断改进和控制，2010年6-9月份冷沉淀质量控制抽检全部合格。

结论：冷沉淀制备的质量控制涉及到全血的采集、储存和运输、分离以及新鲜冰冻血浆的融化、分离、入库等诸多环节，任何一个环节的失控，都会影响到冷沉淀的最终质量。

因此，要求心中有关部门加强沟通、紧密协作。

质量控制的关键是减少冷沉淀中的不稳定成分FⅧ因子的损失，而FⅧ因子的活性随温度的升高破坏很大，所以控制的核心内容是保持血液的冷链系统，最大限度地减少血液/血制品在常温下的时间。

要保证各个环节的的严格受控，制备优质的冷沉淀，除了配备必要的设备外，还要提高员工的质量意识和效率意识，提高专业技能，两个方面缺一不可。

冷沉淀是新鲜冰冻血浆在1 ℃~4 ℃条件下不溶解的白色沉淀物，其中主要含有五种成分：纤维蛋白原(Fg)、FⅧ、血管性假血友病因子(vWF)、凝血因子X Ⅲ、纤维结合蛋白(Fn)等多种成分。

冷沉淀是存在于血液中的一种功能性成分，具有广泛的生理功能和很高的临床应用价值。

近年来，冷沉淀的应用已突破传统的用于甲型血友病、纤维蛋白原及凝血因子缺乏所致的出血性疾病的治疗，在临床肿瘤手术、多发伤和手术创伤、弥散性血管内凝血(DIC)、深度烧伤、黏膜和皮肤疾病、自发性气胸、糖尿病足等方面得到广泛应用，并且取得了显著的效果。

冷沉淀中FⅧ因子极其不稳定，FⅧ的体内生物半衰期变化较大，一般为8~12 h，其活性易丧失[1-2]。

新鲜速冻血浆(FFP)融化后，FⅧ因子活性随着时间的延长而有明显的降低，其活性衰减了41.17％[3]。

虹吸法制备冷沉淀质控不合格原因分析

虹吸法制备冷沉淀质控不合格原因分析目的探讨虹吸法制备冷沉淀不合格发生率及不合格的原因，为采供血机构制备出高质量的冷沉淀提供理论依据。

方法回顾性分析2011年1月～2014年1月期间我血液中心质控科对我科采用虹吸法制备的冷沉淀质量控制结果，统计不合格原因，计算不合格率，并从各个环节探讨影响冷沉淀质量的因素。

结果每个月随机抽检4袋，连续36个月，共抽检144袋，不合格产品共计17袋，不合格率为11.8%；不合格产品中，均为Ⅷ因子含量不足。

结论冷沉淀不合格原因主要为Ⅷ因子含量不足，从原料血、原料血浆及冷沉淀制备等多个环节进行控制可以减少或预防不合格产品的出现。

标签：冷沉淀；虹吸法；不合格原因；质量控制冷沉淀是从新鲜冰冻血浆中提取、低温下不溶解的血浆蛋白部分，主要含有第Ⅷ因子、纤维蛋白原、血管性血友病因子、第XⅢ因子以及纤维结合蛋白等成分。

近年来随着对冷沉淀临床应用领域的研究不断深入，冷沉淀临床应用范围也在扩大，不仅用于血液病的治疗，而且越来越多地用于各种外科手术及创伤引起的凝血机制异常等出血性疾病[1-5]。

因此，冷沉淀的需求量也在不断增加。

制备出足量、高质量的冷沉淀制品是采供血机构的职责。

我们通过对2011年1月～2014年1月期间用虹吸法制备的冷沉淀质控结果进行分析，从各个环节探讨影响冷沉淀质量的因素，现报道如下。

1材料与方法1.1 仪器设备及试剂大容量低温离心机（德国贺利氏）、CT-4T-6C型数字控制水浴血液融化箱、热合机、DXJ-1型血浆速冻机（郑州）、因子Ⅷ活性测定试剂盒（凝固法）（德国希森美康公司）、纤维蛋白原检测试剂盒（德国希森美康公司）。

1.2 冷沉淀原料血浆河南省红十字血液中心2011年1月～2014年1月期间制备的200 mL新鲜冰冻血浆，由400 mL新鲜全血在采集后6 h内经大容量低温离心机离心后分离并置-65℃冰箱速冻而成。

1.3 冷沉淀制备方法我血液中心采用虹吸法制备冷沉淀，具体步骤：①全自动低温循环水浴融化箱预温至6℃，将新鲜冰冻血浆置于融化箱内，每次不超过30袋；②10 min后，将转移袋移至融化箱外的托盘中，并打开止流夹，调整至虹吸状态；③当血浆融化至剩余40～50 mL血浆及白色冷不融物时，关闭止流夹，热合断开，并迅速将其置于血浆速冻机中。

冷沉淀的制备及应用范围-推荐下载

现就冷沉淀的制备、临床应用及效果给大家介绍一下。

1　冷沉淀的制备与质量1.1　冷沉淀的制备　选取健康无偿献血者,各项检查指标合格,采集400 mL全血后6~8 h内经分离新鲜液体血浆于-50℃冻成型后的新鲜冰冻血浆放置-30℃保存。

制备冷沉淀时,将-30℃保存血浆放置于1~6℃环境下溶解、分离出冷不溶物,放置-30℃冻存或直接应用于临床。

1.1.1离心法(Pool) 1.1.1.1原料血浆的融化1.1.1.1.1 4℃冷藏箱法：将原料血浆从-30℃冰箱内取出，置于1~6℃冷藏箱内缓慢融化。

1.1.1.1.2 水浴融化法：将原料血浆从-30冰箱取出，值室温5分钟，待双联袋间的塑料管变软后，放入15℃水浴箱内，启动摇摆装置，约30分钟后温度调至4℃，当原料血浆袋全部融化时(约60~90分钟)，然后把水温调至0~2℃。

1.1.1.2融化后的原料浆于0~4℃以离心力2000g离心10分钟，使冷沉淀下沉于塑料袋底部，快速去除上清液,剩20~30 mL左右即为冷沉淀。

1.2　冷沉淀的质量　冷沉淀质量受温度、时间以及其他各种因素影响。

从采血到制备过程中室温制备原料浆会使第Ⅷ因子含量偏低;说明温度对冷沉淀质量有影响。

经研究使用亚甲蓝光照法(MB)进行病毒灭活的冷沉淀与原血浆比较,Ⅷ因子和血管性血友病因子(Vwf)活性分别别下降30%和11%,纤维蛋白原浓度下降40%。

冷沉淀制备及其对过敏原检测的影响

含量
纤维蛋白原含量应不低于 150mg/袋，血管性血友病因子活性应不低于80IU/袋。
微生物限度
应符合《中国药典》对血液制品的微生物限度要求，无细菌、霉菌等污染。
安全性
应无热原反应、过敏反应等不良反应。
02
过敏原检测方法及原理
常见过敏原种类介绍
吸入性过敏原
如花粉、尘螨、动物皮屑等，通过呼吸道进入人体引起过敏反应。
储存和运输条件对结果影响
80%
储存温度
冷沉淀应在适宜的低温条件下储存，温度过高会导致其融化，温度过低则可能引起成分活性降低。
100%
光照条件
过强的光照会使冷沉淀中的某些成分发生光化学反应，影响其活性和稳定性。
80%
运输过程中的震荡
运输过程中的剧烈震荡可能导致冷沉淀中成分的重新分布或损失。
感谢聆听
选择合适样本
收集不同来源的血液样本，包括健康人和过敏患者。
设定对照组
未经过冷沉淀处理的样本作为对照组。
实验操作规范
严格按照冷沉淀制备流程操作，确保实验结果的准确性。
数据收集和处理方法
数据记录
详细记录实验过程中的各项数据，包括样本处理前后的变化、检测结果等。
统计分析
采用适当的统计方法对数据进行分析，比较冷沉淀处理前后的差异。
02
推动冷沉淀制备技术的创新和发展
随着科技的进步和新技术的不断涌现，我们可以期待更加高效、便捷的
冷沉淀制备技术的出现，以满足日益增长的临床需求。
03
加强多学科合作与交流
冷沉淀制备及其在过敏原检测中的应用涉及多个学科领域的知识和技术
，因此需要加强多学科之间的合作与交流，共同推动相关研究的深入发

冷沉淀在临床生化分析中的重要作用

纤维蛋白原含量测定方法
免疫比浊法
利用特异性抗体与纤维蛋白原结合形成复合物，通过检测复合物的浊度来测定纤维蛋白原含量。
凝血酶法
在受检血浆中加入一定量的凝血酶，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，通过检测凝固时间来推算纤维蛋白原含量。
血管性血友病因子活性评估
瑞斯托霉素辅因子活性检测
利用瑞斯托霉素诱导血小板聚集时，需要血管性血友病因子（vWF）作为辅因子的原理，通过检测血小板聚集程度来评估vWF活性。
凝血因子消耗过多
在大量输血、手术、创伤等情况下，凝血因子可能被大量消耗，此时补充冷沉淀可迅速提高血液中凝血因子水平，防止出血。
肝功能衰竭导致的凝血障碍
肝脏是合成凝血因子的主要器官，肝功能衰竭时凝血因子合成减少，冷沉淀可提供必要的凝血因子以改善凝血功能。
纤维蛋白原缺乏症替代治疗
先天性纤维蛋白原缺乏症
尊重献血者和受血者权益，保护其隐私和个人信息安全。
加强人员培训和管理
提高工作人员的专业素质和安全意识，确保工作质量和血液安全。
总结与展望：提高冷沉淀利
06
用效率
当前存在问题和挑战
01 冷沉淀制备技术不成熟
目前冷沉淀制备技术尚不成熟，制备过程中存在损失大、纯度低等问题，导致冷沉淀利用效率低下。
注意事项
在制备、储存和使用过程中，应严格遵守无菌操作原则，防止细菌污染。同时，对于不同批次的冷沉淀应进行交叉配合试验，以避免输血反应的发生。
冷沉淀在临床生化分析中应
02
用概述
凝血因子补充治疗适应症
先天性或获得性凝血因子缺乏症
如血友病、血管性血友病等，冷沉淀可作为凝血因子浓缩物，提供必要的凝血因子以纠正凝血障碍。

冷沉淀的制备方法

冷沉淀的制备方法嘿，咱今儿个就来讲讲冷沉淀的制备方法。

你知道吗，这冷沉淀就像是一个小小的宝藏，要把它制备出来可得费一番功夫呢！就好像你要去寻找一颗藏在深山里的珍贵宝石。

首先呢，得有优质的原料，这就好比做菜得有新鲜的食材一样。

我们要从健康人的血液中开始，这可是整个过程的基础。

然后呢，把这血液进行离心处理，让各种成分分离开来，就像把一堆混杂的东西慢慢分拣清楚。

接着，把分离出来的血浆取出来，这一步可不能马虎，得小心翼翼的，就像捧着一个易碎的宝贝。

然后把血浆放到特定的温度下，让它慢慢发生变化。

这时候啊，就会有一些奇妙的事情发生啦！一些特殊的成分会逐渐聚集、沉淀下来，这就是我们要的冷沉淀啦。

就好像是经过一场魔法，那些珍贵的东西慢慢显现出来。

你想想，这过程是不是挺神奇的？就如同一场精心编排的舞蹈，每一个步骤都要恰到好处。

在整个制备过程中，对环境的要求也很高呢！要保持干净、卫生，不能有任何杂质混进去，不然就会影响冷沉淀的质量。

这就好比你在一个安静整洁的房间里做事，才能做得又好又顺利呀！而且，制备的人得有足够的耐心和细心，不能着急，不能出错。

一个小小的失误可能就会让之前的努力都白费了。

这和我们做事不是一样的道理吗？还有哦，制备冷沉淀的设备也得是先进的、可靠的，就像战士手中的精良武器一样。

有了好的设备，才能让整个过程更加顺利、高效。

说起来，这冷沉淀可是在医学领域有着重要的作用呢！它能帮助很多需要的人，给他们带来希望和健康。

这难道不是一件很了不起的事情吗？所以啊，大家可别小看了这冷沉淀的制备方法，它背后蕴含着无数人的努力和心血。

这就像是搭建一座坚固的大厦，每一块砖、每一片瓦都有着它的位置和作用。

咱可得好好了解了解这冷沉淀的制备方法，说不定哪天就能派上用场呢！你说是不是呀？。

冷沉淀制备的工作流程

冷沉淀制备的工作流程一、前言冷沉淀制备是一种常见的化学实验方法，用于分离和纯化溶液中的物质。

本文将详细介绍冷沉淀制备的工作流程，包括原理、实验步骤、注意事项等内容，以帮助读者更好地理解和掌握这一实验方法。

二、原理冷沉淀制备是利用溶液中某些物质在温度变化或加入特定试剂后发生沉淀反应的原理，将目标物质从溶液中分离出来。

通常采用盐酸或硫酸等试剂与待分离物质反应生成不溶于水的盐类或复合物，然后通过离心或过滤等手段将沉淀分离出来。

三、实验步骤1. 准备试样：将待分离物质加入适量的水中，并搅拌均匀。

2. 加入试剂：根据待分离物质的性质选择合适的试剂，并按照比例加入到试样中。

例如，若待分离物质为铁离子，则可选择氢氧化钠作为试剂。

3. 搅拌均匀：在加入试剂后，用玻璃棒等工具搅拌均匀，使试剂和待分离物质充分反应。

4. 冷却：将试样置于冰箱或低温水浴中，使温度降至0-5℃。

5. 沉淀：在低温条件下，待分离物质与试剂反应生成的沉淀物会逐渐形成。

通过离心或过滤等手段将沉淀分离出来。

6. 洗涤：将沉淀用适量的水洗涤数次，以去除杂质和未反应的试剂。

7. 干燥：将洗涤后的沉淀放置于干燥器中或在室温下晾干，得到目标物质。

四、注意事项1. 选择合适的试剂和比例。

不同的待分离物质需要选择不同的试剂，并按照一定比例加入到试样中。

若使用过量试剂，则会影响结果准确性。

2. 严格控制温度。

冷沉淀制备需要在低温条件下进行，否则会影响沉淀生成和分离效果。

3. 注意安全。

实验过程中需戴手套、护目镜等防护用具，避免试剂溅入眼睛或皮肤。

4. 注意沉淀的保存。

得到目标物质后，应储存在干燥、密闭、避光的容器中，避免受潮或受污染。

五、总结冷沉淀制备是一种常见的化学实验方法，适用于分离和纯化溶液中的物质。

在实验过程中需注意选择合适的试剂和比例、严格控制温度、注意安全以及保存沉淀等事项。

通过掌握冷沉淀制备的工作流程，可以更好地理解和应用这一实验方法。

影响冷沉淀质量的因素浅析

192中外医疗 CH IN A F OR EI G N ME DI C AL T R EA TM EN T综述1 全血采集过程中的影响因素(1)献血者采血时,必须选择血管充盈饱满的献血者,确保血流顺畅,400mL全血在6min内采完。

若献血者血管细,血流缓慢不顺畅,全血产生一些微小凝块损失部分凝血因子而影响所制备的冷沉淀质量。

(2)全血的储存时间全血采集后立即放入4℃冰箱暂时储存,储存时间不得超过3h,若超过3h运输到血站后不能完全保证制备的FFP在6h内冰冻保存,FFP中的Ⅷ因子将衰减而影响以后制备冷沉淀的质量。

(3)全血的运输全血从采血点到成分科的运输必须放置在有隔热装置的冷藏箱中,冷藏箱根据血袋的数量放置适量的冰块,冰块和血袋之间用毛巾隔离,避免血液和冰块直接接触,并在血袋之间放置温度监控装置。

2 制备FFP过程中的影响因素(1)血液离心温度是影响血液质量的最主要因素,尤其血液温度升高时,Ⅷ因子衰减得较快。

制备血液成分前,打开大容量低温离心机预温至4℃,血液送达后立即离心分离制备FFP。

(2)制备时间制备FFP时间较长,必须熟练掌握血液成分制备的操作流程,尽最大努力在短时间内分离出FFP,保证制备的FFP 在6h内速冻成块,减少Ⅷ因子的衰减。

(3)全血分离制备温度制备FFP时,血液不能在室温下操作的时间过长,我站特此为成分科购置了3台血液低温操作台,以保证制备的FFP在2～10℃低温操作台上分离制备。

(4)FFP袋内空气制备FFP时浆袋内空气必须完全排放至另外一个转移袋内,血浆排出至2个袋子之间相连的三叉口处。

以后融化FFP制备冷沉淀时,融化的血浆才会自动流入转移袋内而不会返流入主袋内,白色絮状物的冷沉淀随着血浆的逐步融化自动沉降到袋子底部。

(5)FFP的储存制备完毕的FFP必须及时放入-50℃血浆速冻机内1h内速冻成块,再移入-30℃低温冰箱储存。

3 制备冷沉淀过程的影响因素(1)设备目前大多数血站都已采用虹吸法制备冷沉淀,但设备的质量优劣将直接对冷沉淀的质量起到决定性的作用,应选用质量较好恒温循环水溶箱。

浅谈冷沉淀制备与使用的注意事项

浅谈冷沉淀制备与使用的注意事项摘要】冷沉淀是一种重要的成分血，随着对冷沉淀研究的不断深入，其在临床上的使用也越来越广泛。

笔者就近年来关于冷沉淀制备与使用的研究作一综述，为冷沉淀的制备与临床输注提供参考。

【关键词】冷沉淀血液制备凝血因子【中图分类号】R44 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2014）22-0334-02引言冷沉淀为全血采集后6h（全血保养液为ACD）或8h（全血保养液为CPD、CPDA～1）内，在全封闭的条件下将血浆分离出并冻结制成的新鲜冰冻血浆在一定条件下制备而成的成分血。

冷沉淀含有新鲜冰冻血浆大部分的凝血因子及血浆蛋白。

根据《中华人民共和国全血及成分血质量要求》，由200 ml 新鲜冰冻血浆制备而成的冷沉淀应含Fg≥150 mg，FⅧ ≥80 IU。

临床上主要用于单一凝血因子缺乏的补充，出血性疾病、弥漫性血管内凝血（DIC）、血栓性血小板减少性紫癜（TTP）和烧伤患者的治疗。

由于冷沉淀中的FⅧ活性极不稳定，制备过程与使用方法都容易影响凝血因子的活性，为保证临床输血效果，笔者浅谈冷沉淀制备与使用的注意事项。

1 冷沉淀的组成冷沉淀主要含有5种成分：FⅧ、Fg、vwF、纤维结合蛋白(纤维粘连蛋白，Fn)和FⅩⅢ。

FⅧ又称抗血友病球蛋白，可加速FX活化，促进血小板聚集，有助于血小板因子Ⅲ的释放和形成内源性凝血活酶，其含量增加可促进内源凝血系统激活加快。

FⅧ在体外半衰期较短，多为8-12小时，而易使其活性丧失，加之其接触异物表面时不同程度被激活，凝血酶和Xa也继续在此裂解FⅧ，导致其失活[1]。

对FⅧ缺乏患者而言，FⅧ的治疗作用无可替代。

Fn是一种粘性糖蛋白，具有促进纤维蛋白交联、细胞粘着、上皮细胞移行、修复和分化的作用，同时具有抑菌、抗感染和免疫调控作用。

Fg是凝血公共途径上的效应分子，其含量增多可使内源性和外源性凝血途径加快。

Fg还是血小板间的桥梁，含量增高可使血小板聚集功能增强。

浅谈冷沉淀制备过程中的质量控制

浅谈冷沉淀制备过程中的质量控制目的探讨冷沉淀制备过程中的质量控制。

方法将60份新鲜冰冻血浆随机分为常规制备组和质量控制制备组，每组30袋，常规制备组按照传统离心法制备冷沉淀，质量控制制备组采用冷沉淀制备仪制备冷沉淀。

结果常规制备组冷沉淀产品中抽检有28份合格，2份不合格，合格率约93%；质量控制制备组抽检30份全部合格，合格率为100%。

结论掌控好制备方案、原材料、设备和环境温度等质量控制环节，才能确保制备出优质合格的冷沉淀。

标签：冷沉淀；制备；质量控制冷沉淀（Cryoprecipitate）是临床上成分输血中的一种重要制品，该制品是新鲜冰冻血浆（fresh frozen plasma，FFP）在1～6℃条件下融化后分离出大部分血浆、剩下的冷不溶解活性物质，在1 h内速冻成固态的成分血。

冷沉淀富含纤维蛋白原（Fg）、凝血因子FⅧ、纤维结合蛋白、血管性血友病因子等多种活性成分，对于甲型血友病、先天性或获获得性纤维蛋白原缺乏症、血管性血友病等都有较好治疗效果。

此外，它对于外科患者，尤其是血友病患者的手术中出血有显著地预防和治疗作用[1-2]。

冷沉淀中FⅧ因子极其不稳定，在体内生物半衰期较短，一般为8～12 h，其活性易丧失[3]。

新鲜冰冻血浆融化后，FⅧ因子活性会随着时间的延长而明显的降低。

但是从全血采集到新鲜冰冻血浆的制备再到冷沉淀的制备中很多环节都会影响冷沉淀的最终质量，所以从采集原浆料开始，一直到临床输注过程的整个环节中都应尽量减少其中活性成分、尤其是纤维蛋白原和凝血因子FⅧ的破坏。

因此对冷沉淀制备过程中关键控制点的把握，则是制备出优质冷沉淀、保证质量的首要关键环节。

1 资料与方法1.1 仪器ZBK-LCD-A1冷沉淀凝血因子制备仪；贺利氏6000i 型大容量低溫离心机；SE250高频电子热合机；SPN1501F电子天平；MBF21血浆速冻机、4℃贮血冰箱。

1.2 原浆料来源以2016年10月—2017年3月采集的健康无偿献血者全血为原料。