植 物 组 培实验报告

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植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验一:培养基的配制学院:风景园林院学号:131001226 姓名:张晟菓一、实验目的1. 掌握植物组织培养实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。

2. 掌握培养基的配置方法。

3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法。

二、实验原理鉴于微生物种类及代谢类型的多样性,用于培养微生物的培养基的种类也很多。

培养基的配置的程序有器皿的准备,培养基的配制与分装,棉塞的制作,培养基的灭菌,以及培养基的无菌检查等。

此次配制400mL MS培养基。

三、实验材料1.药品:激素:BA 1.0L(200mg/L)NAA 0.2L(200mg/L)母液:MS1(大量元素)20mL——浓缩20倍MS2(微量元素)2mL——浓缩200倍MS3(铁盐)2mL——浓缩200倍;MS4(维生素和氨基酸)2mL——浓缩200倍琼脂:2.2g蔗糖:12g(3%)无菌水2.玻璃器皿:移液管、试管、烧杯、量筒、玻璃棒、培养皿3.仪器设备:电子天平4.其他物品:药匙、滤纸、称量纸、pH计、记号笔、棉花等四、实验步骤1.玻璃器皿清洗:将试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中,用毛刷刷洗,然后用自来水和蒸馏水冲净。

移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。

晾干后备用。

2.量取母液:MS1(20mL),MS2(2mL),MS3(2mL),MS4(2mL);加激素:BA(1.0mL),NAA(0.2mL);加蔗糖:12g。

3.加水定容至400mL。

4.搅匀后用pH计、烧碱溶液及硫酸溶液调pH值至5.8。

5.加琼脂2.2g,用电磁炉加热溶解并搅拌5-6分钟,冒泡即可拿出。

6.趁热分装,包扎,贴标签。

五、实验结果培养基配置完成。

组织培养实验报告

组织培养实验报告

植物组织培养实验报告一、实验目的1.掌握无菌操作的植物组织培养方法;2.通过配置ms培养基母液,掌握母液的配置和保存方法; 3.通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法;4.通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法; 5.了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。

二、实验原理(一)植物组织培养植物组织培养是把植物的器官,组织以至单个细胞,应用无菌操作使其在人工条件下,能够继续生长,甚至分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下,原来已经分化停止生长的细胞,又能重新分裂,形成没有组织结构的细胞团,即愈伤组织。

这一过程称为“脱分化作用”,已经“脱分化”的愈伤组织,在一定条件下,又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官,这一过程称“再分化作用”。

(二)植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因,在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。

(三)组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后,经过继代培养,可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团,然后,再分化成不同的器官原基。

有些情况下,外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。

(四)培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近,似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。

营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素(生长调节剂)和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。

三、实验器材高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。

四、实验材料豌豆种子五、实验药品药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、 84消毒液、蔗糖、琼脂等。

六、实验步骤(一)培养基母液的配制表1.ms培养基个成分的含量(单位:mg/l)表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数名称大量元素微量元素 ca盐 mg盐 fe盐有机肌醇激素扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml)500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/l20 20 20 20 20 10 10 5(注:吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积)表3.配制母液所需的药品及称取量(注:根据表1与表2计算各物质的称取量)药品名称 nh4no3 kno3 kh2po4 称取量(mg)41250 47500 4250 药品名称 kina2mno4?2h2o cuso4?5h2o 称取量(mg)20.75 6.25 0.625 cacl2?2h2o 11000 cocl2?6h2o 0.625 mgso4?7h2o 9250 肌醇 2000 feso4?4h2o 695 甘氨酸 40 na-edta 932.5 盐酸硫胺素 8 mnso4?7h2o 557.5 盐酸吡哆醇 10 znso4?7h2o 215 烟酸 10 h3bo3 155 (1) ms大量元素母液的配制参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解,定容至500ml存放于冰箱中备用。

植物组织培养实验报告

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植物组织培养实验报告学院:生命科学技术学院班级:11生物技术(制品)学号:**********姓名:**植物组织培养实验报告实验一植物组织培养母液的配制一、实验目的1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。

2.学习掌握植物组织培养MS培养基的配制方法。

二、实验原理培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。

大多数培养基的成分是有无机盐、有机化合物(碳源、维生素、肌醇、氨基酸等)、生长调节物质、水分和其他附加物等五大类物质组成。

无机盐类由大量元素和微量元素组成。

大量元素中,氮类化合物主要以硝酸类和铵类化合物的形式存在,但在培养基中多用硝酸类,也可以将硝酸类和铵类混合使用;磷和硫常用磷酸盐和硫酸盐来提供;钾是培养基中主要的阳离子;钙、钠、镁的需要量较少。

微量元素包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。

培养基中的铁离子,大多数以螯合物的形式存在,即硫酸亚铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。

有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。

培养中的植物组织和细胞的光合作用较弱,因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。

培养基中的碳水化合物通常为蔗糖。

蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起着重要的作用。

在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。

一般包括VB1、B6、烟酸、生物素、叶酸、泛酸钙、VC。

肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作用。

常用的植物生长调节物质包括以下三类:①生长素类:吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、二氯苯氧乙酸(2,4-D)②细胞分裂素:玉米素(ZT)6-苄基嘌呤(6-BA)和激动素(KT)。

③赤霉素:组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸(GA3)。

培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。

其中最为常见的为酵母提取物。

琼脂作为培养基的支持物,也是最常用的邮寄附加物,他可以是培养基呈固体状态,以利于组织和细胞的培养。

植物组织培养是否成功,在很大的程度上取决于培养基的选择之上。

植物组织培养实验报告

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摘要:以大豆子叶为外植体,在MS 培养基上附加不同浓度、不同种类的植物激素,以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响,并练习无菌操作。

实验结果显示第 2 组即 MS+6-BA〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)和第 3 组即 MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 培养基中愈伤组织诱导率较高,为较佳的愈伤组织诱导组合。

关键词:大豆;植物组织培养;无菌操作;愈伤组织1.1 实验材料:大豆子叶1.2 实验试剂与仪器〔1〕试剂: 75%酒精、MS 干粉、蔗糖、琼脂、植物生长调节剂〔NAA、2,4-D、KT、6-BA〕、无菌水、升汞、 NaOH 溶液〔2〕仪器:超菌净工作台、圆纸片、培养皿、封口膜、称量纸、千分之一天平、不锈钢杯子、移液枪、试管、高压灭菌锅、注射器、酒精灯、镊子、手术刀、搁置架、烧杯、电炉。

1.3 实验方法培养基的配制与灭菌1.3.1.1 配制培养基的准备阶段〔1〕准备 80 个培养试管及封口膜, 2 个小培养皿、 1 个大培养皿,用洗衣粉、自来水洗净,再用蒸馏水把每一个培养试管、润洗一下。

带晾干后将试管编号 1-80;〔2〕在称量纸上用百分之一天平分别称取 1.5g 琼脂 4 份, 7.5g 蔗糖 4 份,在烧杯里用千分之一天平上称取 1.185g MS 干粉 4 份〔烧杯不要清洗〕;〔3〕剪小圆纸片 40,均分在两个小培养皿小能从中自由取出为宜;剪大圆纸片10,均分在两个大培养皿中。

然后分别用报纸包好。

〔4〕把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好。

1.3.1.2 配制培养基〔1〕在装有 MS 干粉的烧杯中按下表参加植物生长调节剂实验所用的所有激素浓度均为 0.5mg/mL编号培养基配置激素的加样量(ml)6-BA N A A K T2,4-D1 23 4 MS+6-BA〔1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)MS+6-BA〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L)MS+KT〔1.0mg/L)+2,4-D(2.0mg/L)0.51.00.250.50.250.50.51.0〔2〕用量筒量取250ml 〔稍多〕蒸馏水,取一个不锈钢杯子参加150ml 蒸馏水和称量好的琼脂,在电炉子加热沸腾 2min,再参加混合好的 MS 培养基 1 号和蔗糖,混合沸腾 2min,用剩余的蒸馏水定容至 250ml;〔3〕当温度降到 60℃摆布时,将溶液 pH 调至 5.8,普通加 4 滴 NaOH 溶液即可;〔4〕取编号 1-20 的培养试管,用大量注射器以每瓶 12.5ml 摆布培养基分装在培养试管中,用封口膜封口, 4 支一捆捆扎好。

组培实验报告

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植物组织培养实验报告学院:生命科学技术学院班级:10级生物技术植物班学号:2010193042姓名:高学深植物组织培养实验报告实验一母液的配制与保存一、实验目的1.学习母夜的配制方法和母液的保存方式。

2.熟悉掌握制备母液的操作。

二、实验原理培养基中提供植物生长所需的营养成分,才能满足植物正常的生长发育的需求。

主要包括水分、有机物质、盐类,而配制母液时将其分为大量、微量、钙盐、镁盐、铁盐、有机和肌醇分别配制。

配置培养基时,为了使用方便和用量准确,通常采用母液法进行配置,即按培养基配方中各试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存,使用时按比例吸取母液进行稀释配置即可。

三、实验材料、试剂和仪器设备1.试剂NH4NO3 ,KNO3,KH2PO4,CaCl2·2H2O ,MgSO4·7H2O,FeSO4·7H2O Na2-EDTA,MnSO4·4H2O,ZnSO4·7H2O,H3BO3,KI,Na2MoO4·2H2O CuSO4·5H2O,CoCl2·6H2O,肌醇,甘氨酸,盐酸硫胺素,盐酸吡哆醇,烟酸,蒸馏水。

2.仪器设备电子天平,烧杯(50ml、100ml、500ml)量筒(1000ml、100ml、25ml),容量瓶(1000ml、500ml、100ml),移液管(10ml,5ml,1ml)试剂瓶,玻璃棒数支,药芍,称量纸等。

四、实验步骤1 、计算:计算各化学成分所需要的量。

大量、微量和盐类按扩大50倍,定容500ml的配制计算。

有机和肌醇按扩大100倍,定容200ml 的配制计算。

计算后制成配方表。

2、制定标签:裁取7张适当大小的牛皮纸,用铅笔写上MS,种类,并标明此类母液所含物质,质量,定容体积,扩大倍数吸取量,制备人,制备日期。

以大量为例如图:3、大量元素母液的配制:先用量筒量取300ml蒸馏水放入 500ml 烧杯中,按照配方表中用量依次分别称取: NH4NO3 ,KNO3, KH2PO4 , 待第一种化合物完全溶解后再加入第二种化合物,溶解过程用玻璃棒搅拌,当最后一种化合物完全溶解后,将溶液转移至 500ml 容量瓶中,并用蒸馏水将烧杯和玻璃棒洗涤3次,每次约50ml,而后用蒸馏水定容至 500ml,然后转移至细口试剂瓶中,贴上标签,并置于冰箱中低温保存备用。

组织培养实验报告

组织培养实验报告

目录实验一MS培养基母液的配制 (2)一.实验目的 (2)二.实验原理 (2)三.实验材料 (2)四、实验步骤 (2)五.总结分析 (3)实验二MS培养基的配制与灭菌 (4)一.实验目的 (4)二.实验原理 (4)三.实验材料 (4)四.实验步骤 (4)实验三胡萝卜愈伤组织的诱导 (5)一.实验目的 (5)二.实验原理 (6)三.实验材料 (6)四.实验步骤 (6)五.实验结果 (7)六.分析讨论 (8)实验四激素的过滤添加法及MS诱导芽培养基的制作 (8)一.实验目的 (8)二.实验原理 (9)三.实验步骤 (9)实验五栀子花茎段的侧芽快繁诱导 (10)一.实验目的 (10)二.实验原理 (10)三.实验材料 (10)四、实验步骤 (10)五、实验结果 (11)六、分析讨论 (11)实验综合总结 (12)(一)实验注意事项总结 (12)(二)实验结果总结 (13)实验一MS培养基母液的配制一.实验目的(一)掌握培养基的化学组成;掌握MS培养基的配方组成;(二)熟练掌握常用培养基母液的制备方法。

二.实验原理在植物组织培养中,配制培养基是经常性的工作。

为了准确称量和快速移取,以及便于贮藏,通常是把培养基先配制成一系列浓缩液,即母液。

母液的浓缩倍数一般为10~100倍,可分为大量元素母液、微量元素母液、有机物质母液(维生素、氨基酸等)、铁盐母液和激素类母液五种。

培养基的种类非常之多,比如White ,Heller,MS,ER,B5,Nitsch,N6等培养基。

MS培养基是使用最为普遍的培养基配,其具有较高的无机盐浓度,能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。

当培养物久不转移时仍可维持其生存。

三.实验材料配制MS培养基所需药品;电子天平1台;500 ml烧杯;100 ml烧杯;量筒(100 ml);定容瓶(1000ml);蒸馏水;95%酒精;0.1mol∕LNaOH;0.1mol∕L HCL;棕色细口母液瓶;玻璃棒;标签纸等。

培养植物的实验报告(3篇)

培养植物的实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握植物生长的基本条件和过程。

2. 熟悉植物生长的基本方法和技巧。

3. 了解植物生长过程中的生理变化。

二、实验材料1. 实验植物:小麦种子、大豆种子、花生种子2. 容器:塑料盆、玻璃瓶3. 培养基:腐殖土、河沙、珍珠岩4. 肥料:复合肥、尿素、磷酸二氢钾5. 仪器:温度计、湿度计、光照计、剪刀、镊子、天平三、实验方法1. 种子处理(1)将小麦、大豆、花生种子分别浸泡在温水中,浸泡时间分别为12小时、8小时、6小时。

(2)将浸泡好的种子用剪刀剪去种皮,然后用镊子取出种子。

2. 培养基准备(1)将腐殖土、河沙、珍珠岩按比例混合均匀。

(2)将混合好的培养基过筛,去除杂质。

3. 植物种植(1)将处理好的种子均匀撒在培养基表面。

(2)覆盖一层薄薄的培养基,用喷壶喷水,使种子与培养基充分接触。

4. 培养条件控制(1)将植物放置在光照充足、通风良好的环境中。

(2)保持温度在20-25℃之间。

(3)保持湿度在60%-80%之间。

5. 施肥与浇水(1)在植物生长过程中,每隔10天施一次复合肥。

(2)浇水要根据植物的生长情况,保持土壤湿润。

6. 观察与记录(1)每天观察植物的生长情况,记录植株高度、叶片颜色、生长速度等。

(2)定期对植物进行施肥、浇水、修剪等管理。

四、实验结果与分析1. 小麦生长情况(1)播种后第3天,小麦种子发芽。

(2)播种后第7天,小麦植株高度达到2cm。

(3)播种后第14天,小麦植株高度达到5cm,叶片颜色翠绿。

2. 大豆生长情况(1)播种后第5天,大豆种子发芽。

(2)播种后第10天,大豆植株高度达到3cm。

(3)播种后第20天,大豆植株高度达到7cm,叶片颜色深绿。

3. 花生生长情况(1)播种后第4天,花生种子发芽。

(2)播种后第8天,花生植株高度达到2cm。

(3)播种后第15天,花生植株高度达到4cm,叶片颜色淡绿。

通过本次实验,我们了解了植物生长的基本条件和过程,掌握了植物生长的基本方法和技巧。

植物组培实验报告

植物组培实验报告

植物组培实验报告一、实验目的本实验旨在通过植物组培技术培育出按需选择的完整植株,并探究植物组培技术的应用。

二、实验材料试验材料:百香果种子、消毒酒精、无菌培养基、干燥器、灭菌器、显微镜、组织培养器具。

三、实验方法1.种子外壳处理将百香果种子先用消毒酒精处理5min,再用盐酸(1~2mL/L)处理1min,最后用净水清洗3~5次,使种子壳子软化。

2.种子表面消毒将处理后的种子放入75%乙醇,浸泡2mins,在无菌条件下进行消毒处理。

然后在滤纸上用双倍浓度的漂白粉水溶液进行消毒2~4min,之后用无菌水洗3次,每次20~30s。

3.种子萌发将消毒处理好的种子放入含有生长调节剂的MS培养基中进行培育。

培养条件为25℃,光照强度为1500lx,每天进行16小时的光照和8小时的黑暗,培养30天之后,进行观察和筛选。

4.植株分化将萌发出来的幼苗转移到含有植物生长调节剂和培养素的组织培养基上。

在培养的过程中,由于组织培养的原理是通过植物生长调节剂和培养素激活其分裂能力,以实现大规模繁殖,因此在培养时一定要注意调节生长调节剂和培养素的浓度。

5.植株转化和生长将组织培养出来的未成熟小植株转移到含有特定基因和生长调节剂的培养基上进行转化培育,并在之后进行细胞壁硬化,以使小植株具备专门应用的性状。

之后,将已转化和生长成熟的植株经过移栽成功地种植到土壤中。

四、实验结果分析1.种子处理是组织培养成功的关键处理好了种子,百香果的发芽率可达65%~80%。

可见,用酒精消毒、盐酸处理和漂白粉消毒的方法可有效控制种子的杀菌,同时软化外壳,达到提高发芽率的预期目的。

2.多种因素会影响百香果的组培成功率影响百香果组培成活率的因素很多,包括培养条件、培养液质量、培养基配方、营养成分等。

调整不同参数来探究其合理性,比如控制不同光照强度,不同的基质等。

3.尝试不同的分化方法以提高分化率在组织培养出来的小植株进行分化时,可以通过一些策略来提高分化度,如预处理再接种、生长调节剂和营养因子酵素等,以及锌、铜等金属元素。

植物组织培养实验报告

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植物组织培养实验报告目录1. 引言1.1 研究背景1.2 研究目的1.3 研究意义2. 实验方法2.1 材料准备2.2 实验步骤2.3 实验设计3. 结果与讨论3.1 实验结果3.2 结果分析3.3 结果讨论4. 结论引言研究背景植物组织培养是一种重要的生物技术手段,可用于植物繁殖、种质改良、病毒检测等方面。

通过培养植物的组织和细胞,可以实现对植物特定性状的调控和改善。

研究目的本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作步骤,研究不同培养条件下植物组织生长情况,为植物生物技术的研究提供参考。

研究意义植物组织培养技术可以加快新品种选育的速度,提高植物的遗传改良效率,对于传统育种技术的完善和植物种质资源的保存具有重要意义。

实验方法材料准备- 植物组织样品- 培养基- 生长室- 培养瓶- 剪刀、消毒酒精等无菌操作工具实验步骤1. 准备培养基,对其进行灭菌处理。

2. 取样品进行无菌处理,切取植物组织。

3. 将植物组织置于培养基上,放入生长室进行培养。

4. 定期观察植物组织的生长情况,记录数据。

5. 根据实验设计,对不同处理组进行相应操作。

实验设计本实验设计了对照组和不同处理组,比较不同处理条件对植物组织生长的影响,以验证植物组织培养的有效性。

结果与讨论实验结果经过一段时间的培养,观察到植物组织在培养基上出现生长现象,不同处理组的生长情况有所不同。

结果分析通过对实验结果的分析,可以得出不同培养条件下植物组织生长的规律性,为进一步研究提供了重要依据。

结果讨论在讨论部分,对实验结果进行解释和归纳,总结出植物组织培养的特点和应用前景,为相关研究领域提供参考和启示。

结论植物组织培养是一种重要的生物技术手段,可以在植物繁殖、种质改良等领域发挥重要作用。

本实验结果表明,植物组织培养具有可行性和有效性,对于植物生物技术的发展和应用具有重要意义。

植物组培 实验二

植物组培   实验二

植物组培实验报告实验二、培养基的配制及灭菌一、实验目的1、熟悉植物组织培养的一般工作流程。

2、了解培养基的成分、类型及特点。

3、能正确进行培养基的配制及灭菌操作。

二、实验原理植物组织培养是一项技术性强、无菌条件要求高的工作,对场地有一定的要求,需配备必要的仪器设备和器皿、器械,还必须熟练掌握每个环节的操作技术。

植物组织培养的一般程序包括拟定培养方案、初代培养、继代扩繁、生根壮苗培养及驯化移栽,其基本操作技术包括培养基的配制及灭菌、外植体的选择与消毒、无菌接种与培养、试管苗生根与驯化移栽等。

三、实验内容1、培养基的成分以MS培养为例,其成分可以分为水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。

1.水作用:原生质体的组成成分,代谢过程的介质和溶媒。

它是生命活动过程中。

配制:培养基母液时要用蒸馏水:配培养基时可用自来水。

但在少量研究上尽量用蒸馏水。

2.无机元素大量元素,指浓度大于0.5mmol/l的元素,有N、P、K、Ca、Mg、S等。

其作用是:(1)N功能:是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分,是生命结构和功能物质不可缺少的。

供应形式:含有NO3-N又含NH4-N。

NH4-N对植物生长较为有利。

在制备培养基时以这两种形式供应。

供应的物质有KNO3、、NH4NO3等。

有时,也添加氨基酸。

(2)P功能:是磷脂的主要成分,而磷脂又是细胞膜、细胞核的重要组成部分。

磷也是核酸、ATP、辅酶等的组成成分。

组织培养中,磷不仅增加养分、提供能量,而且也促进对N的吸收,增加蛋白质在植物体中的积累。

供应形式:常用的物质有KH2PO4或NaH2PO4等。

(3)K功能:K对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系,它具有活化酶的作用。

K增加时,蛋白质合成增加,维管束、纤维组织发达,对胚的分化有促进作用。

但浓度不易过大,一般为1~3mg/l 为好。

供应形式:制备培养基时,常以KCl、KNO3 等盐类提供。

植物组织培养实验(1)

植物组织培养实验(1)

实验报告内容
实验名称 实验目的 实验原理 实验材料和用具 实验步骤 实验结果与分析
2. 分装。将培养基分装到8个50ml三角瓶中,培养 三角瓶中, 分装。将培养基分装到8 50ml三角瓶中 基厚度约为5mm。做好标记。 基厚度约为5mm。做好标记。 3. 灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在121℃、 0.1MPa条件 灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在121℃ 0.1MPa条件 下灭菌15~20min。操作按仪器操作步骤进行。 下灭菌15~20min。操作按仪器操作步骤进行。 灭菌后待压力下降到0Pa时取出 凝固后待用。 时取出, 灭菌后待压力下降到0Pa时取出,凝固后待用。
(三)实验材料和用具
实验材料: 实验材料:黄瓜种子 实验药品:灯用酒精、 70%酒精、 95%酒精、 实验药品:灯用酒精、 70%酒精、 95%酒精、 0.1%氯化汞,吐温-80,无菌水。 0.1%氯化汞,吐温-80,无菌水。 灭菌培养基: 灭菌培养基:MS 实验用具:无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、 实验用具:无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧 解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、 杯、解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、 滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养箱。 滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养箱。
当植株的其他部位难以消毒时,可以选用 当植株的其他部位难以消毒时, 种子, 种子,消毒后的种子在无菌条件下播种到 含有水-琼脂培养基上或1/10 MS培养基上 含有水-琼脂培养基上或1/10 MS培养基上 使其发芽。将无菌培养的幼苗切成小片, 使其发芽。将无菌培养的幼苗切成小片, 作为外植体。 作为外植体。
作业
1. 1 周后观察灭菌培养基有无污染 , 计算污 周后观察灭菌培养基有无污染, 染率(染菌瓶数/总瓶数×100% 染率(染菌瓶数 /总瓶数 ×100% ),分析 染菌原因。 染菌原因。 2. 1 周后观察初代培养体系有无污染 , 计算 周后观察初代培养体系有无污染, 每一瓶内染菌外植体数和外植体外的菌落 分析染菌原因。 数,分析染菌原因。 3. 1 周 后 观 察 种 子 发 芽 情 况 , 计 算 发 芽 率 (发芽种子数/种子总数×100%)。 发芽种子数/种子总数×100%

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告一、实验目的通过植物组织培养的实验,了解植物组织培养的基本原理和操作技术,进一步加深对植物生长发育过程的理解。

二、实验过程1、材料准备:细菌清洁大气箱、琼脂、化学药剂、手套、移液管、离心管、耗材、显微镜等。

2、实验步骤:1)将无性系别品种叶片、幼茎和根部按照不同的方式处理,如用药物浸泡和切成小块备用。

2)选用适合无菌培养的营养基质,如MS培养基、B5培养基、WPM培养基等,加入琼脂并调整pH值至5.8。

3)将处理过的植物组织放入含有培养基的离心管中,并密封后在细菌清洁大气箱内进行培养。

4)观察培养物的生长情况,记录培养物的数量、形态及生长周期等指标,以得出结论。

5)实验完成后,清洗实验器材,消毒措施要做到位,以防止污染环境和传染病菌。

三、实验结果1、不同植物组织的培养结果:对叶片、幼茎和根部不同组织进行组织培养后,叶片的成活率最高,幼茎次之,根部最低,一定比例药物处理的组织培养效果要更好。

2、不同营养基质的培养效果:不同种类的营养基质对于组织培养效果有较大的影响。

在MS培养基中,叶片和幼茎的生长速度较快,根系生长周期更长;在B5培养基中,叶片和幼茎的生成周期较长,根系生长速度更快;在WPM培养基中,叶片和幼茎的生长效果较好,根系生长速度和周期一般。

3、同一营养基质对于不同植物组织的培养效果:同一营养基质对于不同植物组织的生长效果有所差别。

例如在MS培养基中,处理过药物的叶片组织培养效果最优,成活率高,而未处理过的幼茎组织生长速度较快,成活率也较高。

四、实验结论1、植物组织培养技术是一种重要的植物生物技术,可以通过组织培养的方法扩大繁殖种类,为植物栽培和遗传改良提供基础。

2、在植物组织培养中,药物处理和不同营养基质的选取可以影响组织的生长效果,必须根据不同的需要来选择合适的培养方法。

3、在实验操作过程中,要加强对实验器材和环境的消毒措施,以保证实验过程的无菌性,减少实验中的污染和误差,得到更为准确的实验结果。

植保试验技术实验报告(3篇)

植保试验技术实验报告(3篇)

第1篇一、实验背景随着农业现代化进程的加快,植物保护技术在农业生产中扮演着越来越重要的角色。

为了提高农作物产量和品质,减少化学农药的使用,保护生态环境,本研究旨在通过植保试验技术,探索一套高效、低毒、环保的病虫害防治方法。

二、实验目的1. 研究不同植保技术的防治效果。

2. 评估植保技术的经济、生态和社会效益。

3. 为农业生产提供科学合理的植保技术方案。

三、实验材料与方法1. 实验材料(1)试验作物:小麦、水稻、玉米等主要农作物。

(2)病虫害:小麦纹枯病、水稻稻瘟病、玉米螟等。

(3)植保技术:生物防治、物理防治、化学防治、综合防治等。

2. 实验方法(1)生物防治:选用不同生物防治剂,如苏云金杆菌、阿维菌素等,进行田间试验,观察防治效果。

(2)物理防治:采用黄板、杀虫灯、性信息素等物理方法,观察防治效果。

(3)化学防治:选用不同化学农药,如高效氯氰菊酯、多菌灵等,进行田间试验,观察防治效果。

(4)综合防治:将生物防治、物理防治、化学防治等方法结合,进行田间试验,观察防治效果。

四、实验结果与分析1. 生物防治通过生物防治试验,发现苏云金杆菌对小麦纹枯病、阿维菌素对水稻稻瘟病、生物农药对玉米螟等病虫害具有较好的防治效果,平均防治效果分别为80%、75%、70%。

2. 物理防治物理防治试验结果显示,黄板对小麦纹枯病、杀虫灯对水稻稻瘟病、性信息素对玉米螟等病虫害具有较好的防治效果,平均防治效果分别为85%、90%、80%。

3. 化学防治化学防治试验结果显示,高效氯氰菊酯对小麦纹枯病、多菌灵对水稻稻瘟病、其他化学农药对玉米螟等病虫害具有较好的防治效果,平均防治效果分别为75%、70%、65%。

4. 综合防治综合防治试验结果显示,将生物防治、物理防治、化学防治等方法结合,对小麦纹枯病、水稻稻瘟病、玉米螟等病虫害具有显著的防治效果,平均防治效果分别为90%、85%、80%。

五、结论与讨论1. 生物防治、物理防治、化学防治和综合防治等方法对农作物病虫害具有较好的防治效果。

植物组织培养实验

植物组织培养实验

植物组织培养实验室基本设备:超净工作台;培养室、;洗涤、消毒室,卧式高压消毒锅;温室(培养大棚);常用仪器:1.蒸馏水器(学习操作),2.手提式高压消毒锅、卧式高压消毒锅(学习使用、操作),3.天平:⑴药物天平(工业天平)、粗天平、(精密度1/10)⑵分析天平(精密度1/10000),4.超净工作台(学习、使用、操作),5.电热干燥箱(烘箱),6.恒温光照培养箱(学习、操作),7.电冰箱,8.显微镜和解剖镜:①手提式解剖镜(学习、使用、操作)②立体解剖镜③普通显微镜,9.旋转培养机,10. 离心机(学习、使用、操作),11. 酸度测定仪:⑴精密PH4-7 试纸;⑵笔型袖珍酸度计。

必要的器皿:(一)玻璃器皿:1.培养器皿:①试管②三角烧瓶(锥形瓶)③圆形高形培养瓶(罐头瓶)④培养皿⑤扁身培养瓶⑥L 型和T 型管⑦凹面载玻片,2.盛装器皿:①试剂瓶②烧杯,3.计量器皿①量筒②容量瓶③吸管,4.其它器皿滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器皿。

(二)金属器械:1.镊子类:① 20-25cm 长型镊子(接种或转移愈伤组织)②尖端弯曲“枪型”镊子(镊取较小的植物组织)③尖头钟表镊子和鸭嘴镊子(剥离表皮用)④尖端为小铲状镊子(挖取带琼脂培养基的培养物),2.解剖刀和刀类:①眼科用刀种牛痘疫苗的菱形刀(切割柔软组织中小细胞团)②解剖刀(手术刀)③双面刀片焊接在玻棒上(切取茎尖用)④锋利小刀、大刀和小铁锹,3.剪刀类:①解剖剪②眉剪③眼科剪④18-25cm 弯头剪⑤俢枝剪,4.接种针。

几种常用药剂的配制:(一)用95%尝试酒精配比不同浓度的酒精的配制。

学习配制70%和75%酒精。

(二)消毒剂:1. 20%次氯酸钠溶液:称取20g 次氯酸钠用少许水溶解,100ml 水定容。

2. 0.1%升汞(HgCl2)溶液:称取0.1g HgCl2少许水溶解,100ml水定容。

(三)洗涤剂:1. 2HCl酒精:95%酒精100ml 加入2mlHCl,2.硫酸-重铬酸钾洗液:取10g 重铬酸钾加入蒸馏水90ml,加热溶解冷却后,逐渐加入浓硫酸175ml,放入棕色玻璃瓶备用,(注意:切记不可将盛过洒精,甲醛等原剂的药品玻璃器皿直接泡入洗液在,因为重铬酸钾是一种强的氧化剂,一旦被还原氧化,洗液变绿,失去洗涤作用)。

植物组培母液实验报告

植物组培母液实验报告

一、实验目的1. 理解植物组织培养母液在植物细胞培养中的重要作用。

2. 掌握植物组织培养母液的配置、保存及使用方法。

3. 通过实验验证不同植物组织培养母液对植物细胞生长和分化效果的影响。

二、实验材料1. 材料:拟南芥叶片、MS培养基、琼脂糖、葡萄糖、琼脂、植物激素(生长素、细胞分裂素、赤霉素等)。

2. 仪器:无菌操作台、超净工作台、显微镜、移液器、培养箱、冰箱、天平等。

三、实验方法1. 植物组织培养母液的配置(1)称取一定量的MS培养基母液,加入去离子水溶解,配制成一定浓度的母液。

(2)将母液加入适量的琼脂糖,溶解后倒入培养皿中,制成固体培养基。

(3)将固体培养基放入培养箱中,于适宜温度下固化。

2. 植物细胞培养(1)将拟南芥叶片表面消毒后,剪成小块,接种到固体培养基上。

(2)将培养皿放入培养箱中,于适宜温度下培养。

(3)观察细胞生长和分化情况,记录实验数据。

3. 植物组织培养母液对细胞生长和分化效果的影响(1)将不同浓度的植物激素加入植物组织培养母液中,制成实验组。

(2)将对照组和实验组进行对比,观察细胞生长和分化情况。

(3)记录实验数据,分析不同植物组织培养母液对细胞生长和分化效果的影响。

四、实验结果与分析1. 植物组织培养母液的配置成功配制了不同浓度的植物组织培养母液,并制作了固体培养基。

2. 植物细胞培养在适宜的条件下,拟南芥叶片细胞在固体培养基上成功生长和分化。

3. 植物组织培养母液对细胞生长和分化效果的影响实验结果表明,不同浓度的植物组织培养母液对细胞生长和分化效果有显著影响。

(1)生长素浓度对细胞生长和分化有促进作用,但过高浓度会导致细胞死亡。

(2)细胞分裂素浓度对细胞生长和分化有促进作用,但过高浓度会导致细胞分化不良。

(3)赤霉素浓度对细胞生长和分化有促进作用,但过高浓度会导致细胞畸形。

五、实验结论1. 植物组织培养母液在植物细胞培养中起着重要作用,其浓度和成分对细胞生长和分化效果有显著影响。

浙大植物生理学报告植物组织培养

浙大植物生理学报告植物组织培养

实验报告课程名称:植物生理学实验 指导老师:翁晓燕 成绩:实验名称:植物组织培养 实验类型: 定量同组学生姓名:胡季宏一、实验目的和要求 三、实验材料和主要仪器 五、实验数据记录和处理 七、实验讨论和心得 二、实验内容和原理四、实验方法和步骤六、实验结果和分析一、实验目的和要求掌握植物组织培养的基本理论和技术,明确组培的作用与应用。

二、实验内容和原理1、组织培养的理论基础——细胞全能性。

植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息,从而具备发育成完整植株的遗传能力。

在适宜条件下,任何一个细胞都可以发育成一个新个体。

2、利用母液配制培养基——防沉淀、防失活、合适pH 、高压灭菌。

3、选取无菌外植体接种。

在无菌条件下,将灭过菌的材料,经适当切割,转移到培养基上。

4、控制条件下培养,观察成苗全过程。

三.实验材料和主要仪器实验材料:花菜主要仪器设备:无菌(光照)培养室、超净工作台,高压灭菌锅、pH 计等。

四、实验方法和步骤(一)配制培养基MS + NAA 0.1mg/L + 6-BA 1.0mg/L母液配制 大量元素——N 、P 、K 、Ca 、Mg 、S微量元素——I 、B 、Mn 、Zn 、Mo 、Cu 、Co铁盐——Fe有机化合物——肌醇 、烟酸、盐酸吡哆醇 、盐酸硫胺素、甘氨酸植物生长调节剂——NAA 、 6-BA500ml 母液各组分用量及配制方法:1、先在搪瓷量杯中加入约500ml 蒸馏水,依次加入下列组份并搅拌溶解:大量元素(10×) 50ml CaCl2 (100×) 5ml微量元素 (100×) 5ml 铁盐(100 ×) 5ml肌醇 (100 ×)5ml 烟酸 0.5mg /ml 0.5ml盐酸吡哆醇(0.5mg /ml)0.5ml 盐酸硫胺素(0.1mg/ml)0.5ml甘氨酸 (2.0mg /ml) 0.5ml 专业: 生物系统工程姓名: 徐梦浙学号: 3120100203 地点:生物实验中心313NAA (0.1mg /ml) 0.5ml 6-BA(1.0mg /ml) 0.5ml蔗糖 15.0g2、定容到500ml。

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实验报告
实验名称:烟草植物组织培养班级:姓名:学号:
烟草植物组织培养
一、实验目的
1、学习植物组织培养技术的基本原理;
2、掌握培养基配制方法、步骤及培养环节中,外植体灭菌、接种、培养观察等技术环节;
3、了解外植体脱分化及再生过程。

二、实验原理
1、植物细胞全能性(totipotency)
指植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息,从而具备发育成完整植株的遗传能力。

在适宜条件下,任何一个细胞都可以发育成一个新个体。

植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础。

2、植物细胞表现出全能性的条件
(1)离体状态;
(2)有一定的营养物质,激素和其他外界条件(如无菌、温度、pH );
(3)选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型;
3、组织培养
组织培养(Tissue culture)是指在无菌条件下,分离并在培养基中培养离体植物组织(器官或细胞)的技术。

广义的组织培养:包括器官培养,组织培养,胚胎培养,细胞培养,原生质培养,花药培养等;狭义的组织培养是指植物离体快繁技术卸微型繁殖(Mieropropagation)或试管繁殖技术。

4、常用的培养基
植物组织培养常用培养基为MS基本培养基。

凝固剂常用琼脂粉,它最主要的作用是使液体培养基凝固,琼脂本身并不提供任何营养,它只是一种高分予的碳水化合物,从海藻中提取出来,仅溶解于热水,成为溶胶,冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。

琼脂的用量一般在4—10克/升之间。

琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外,还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关,长时间的高温会使凝固能力下降,过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力,存放时间过久,琼脂变褐,也会逐渐失去凝固能力。

5、植物激素
(1)培养基中添加的激素是植物激素,是植物新陈代谢中产生的天然化合物,它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、分裂、发育,影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠等许许多多的生理生化活动。

在培养基的各种成分中,植物激素所产生的影响最大。

通过对培养物营养需求的研究,可拟定出目标培养物的培养基配方,对植物生理过程的探索,可了解并获得最有成效的植物激素,这两个方面可以认为是植物组织培养不可或缺的二个层面。

基本培养基保证培养物的生成与最低的生理活动,只有配合使用适当的植物激素才能诱导细胞的分裂,愈伤组织的生长以及根、芽的分化或胚壮体的发育等。

对于培养大多数植物材料来说,选择任何一种常用的基本培养基都能得类似的效果,只有植物激素的种类和浓度搭配合理,才能生长出健壮的植株,这一点要根据瓶中培养物的表现来确定。

(2)常用于植物组织培养的植物激素种类主要有生长素、细胞分裂素、赤霉素。

生长素的生理作用主要是促进细胞生长和细胞分裂,诱导受伤的组织表面一至数层细胞恢复分裂能力,形成愈伤组织,促进生根。

细胞分裂素的生理作用主要为促进细胞分裂与扩大,可使茎增粗,诱导芽的分化,促进侧芽萌发生长,抑制、延缓衰老,有保鲜的效果。

赤霉素(GA)的生理作用主要是诱导芽的细胞伸长。

对矮生型植物恢复成高生型特别有效:IAA/GA比值高有利于木质部分化,比值低利于韧皮部分化。

三、实验材料
1、植物材料:烟草叶片
2、实验药品:MS培养基(见表. 2-1)、蔗糖、琼脂、升汞、NAA、6-BA、NaOH。

3. 仪器设备:高压灭菌锅、光照培养箱、天平、PH计、超经工作台、酒精灯。

4. 器械及用具:镊子、手术刀、记号笔等
5. 玻璃器皿:培养瓶、量筒、容量瓶等。

四、实验步骤
1、培养基的选择及母液配制(常用的培养基MS、B5、N6、WPM等)
(1)大量元素配成10倍母液,使用时每1L培养基需要从母液中取100ml。

配制母液时应做到分别称量,充分溶解,在混合次序上应最后加入Ca2+,混合时要边加边混合。

(2)微量元素配成100倍母液,使用时每配制1L培养基从母液中取10ml,配制时应注意充分溶解后再依次混合。

(3)铁盐单独配制,与其它元素混合易造成沉淀。

一般采用鳌合铁,即FeSO4与EDTA钠盐的混合物,一般扩大100倍。

EDTA钠盐须用温水溶解,然后与FeSO4液混合,在75~80℃之间让其鳌合1h。

使用鳌合铁的目的是避免沉淀,并使培养基能缓慢不断地供应Fe2+。

有机物质可配成100倍浓缩液,使用时每1000 ml培养基加10 ml。

2、培养基的配制
取1000 ml烧杯,先加入500 ml的蒸馏水,然后根据培养基成分及用量,吸取各种母液加入烧杯,称取蔗糖(一般用量3%)、琼脂(一般6-8g/L),按需要的浓度加入植物激素,加水至800 ml,加热使琼脂融化,定容到1000 ml,用1N NaOH或HCl调PH至5.8。

3、培养基灭菌
将配好的培养基迅速分装至50 ml三角瓶中,用牛皮纸或报纸包扎封口。

放入灭菌锅121℃,灭菌20 min。

4、外植体取材、消毒及接种
自大田或温室取材时应选择无病、五虫、生长健壮的外植体。

对于难消毒的材料,如有茸毛的、粗糙不平的材料等,在消毒前,一般先用自来水冲净,在70%酒精中浸30s,再加入消毒剂。

不同的材料消毒的方式和所需时间不一样,研究者应根据不同材料确定具体消毒方案。

外植体的消毒的一般顺序为:外植体----自来水多次冲洗----消毒液处理(75%乙醇30s,消毒液x min)----无菌水冲洗----无菌滤纸吸干----接种。

5.无菌操作
操作前把准备好的接种材料用的培养基、待消毒的材料、无菌水、无菌烧杯及其它必需玻璃器皿、无菌操作工具(如镊子、解剖刀等,这些工具可用高温消毒,也可用高压高温灭菌,也可随用随消毒)、70%酒精等放到超净工作台上,然后打开超净工作台和紫外灯,让其运行20min后再进行操作,在超净工作台上打开烧杯和无菌水瓶盖,将HgCl2(0.1%)倒入有待消毒材料的烧杯中,5~10min 后取出另一盛有无菌水的烧杯中,无菌水冲洗3~4次,然后将材料取出接种在培养基中,封口,放入培养室培养。

6、烟草叶片离体培养及植物再生
(1)取烟草幼嫩叶片自来水充分洗净,经75%乙醇消毒30s,0.1% HgCl2溶液浸泡8 min,无菌水冲洗3-5次后,取叶片近中脉处,切成0.5cm2小块,接种到培养基上(MS+0.5mg/L 6-BA,附加3%蔗糖,0.8%琼脂,PH5.8),每瓶接种3-5片。

(2)放入光强2000-3000 lx,16 h/d培养室培养。

10 d后观察外植体不定芽的再生情况。

五、实验结果与分析
1、丛生芽诱导分化培养:
(1)愈伤组织的形成
将切成小块的外植体接种于MS培养基上最初植物组织在培养基上,叶片经
10 d左右叶片边缘伤口处出现少许黄色泡状,泡状形成黄绿色瘤状突起,即为愈伤组织。

(如图1)
由图片可以看出植物愈伤组织生长较快,经过4天时间愈伤组织体积明显增大(如图2)此时愈伤组织为绿色,表面粗糙,结构松脆。

由图1到图2所示的变化可以看出图1此时属于愈伤组织形成过程中的诱导期。

外植体细胞大小虽然没有太多的变化,但细胞内合成代谢活跃。

经过诱导期以后到图2所示阶段为分裂期,外植体外层细胞开始迅速分裂。

短时间内细胞数目成倍增长。

随后愈伤组织进入形成期,细胞分裂由原来的局限在组织外缘的平周分裂转为组织内部较深层局部细胞的分裂,结果形成瘤状或片状的拟分生组织,称作组织分生节。

(如图3)
10月31日
图1
11月4日
图2
11月11日图3
(2)愈伤组织再分化
经过20天左右愈伤组织开始分化出芽(如图4),并在10天左右的时间内分化出大量的不定芽,但由于培养基内未加入生长素只加入了细胞分裂素6-BA,因此植株仅分化出了芽而未分化出根。

由图(5-7)可以看出不定芽生长状况较好,数目较多。

(3)总结
经过将近1.5个月的植物组织培养实验,成功的将将烟草组织进行脱分化培育出愈伤组织,愈伤组织再分化形成大量不定芽,整个过程中并未出现污染现象。

在这个过程中我学会了植物组织培养的基本原理,掌握了植物组织培养中脱分化再分化基本操作方法。

对植物组织培养技术有了更加深入的认识。

11月21日
图4
图5
12月4日
图6
图7
12月12日
12月12日图8。

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