临床微生物标本采集规范

ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
2.小儿取痰法 用弯压舌板向后压舌，用棉 拭子深入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时， 可喷出肺部和气管分泌物，粘在棉拭子上 送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方， 以诱发咳痰。 3.支气管镜采集法 –-经支气管镜直接吸引 –-支气管肺泡灌洗 –-防污染样本毛刷
（三）注意事项
1. 痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。室温 下耽搁数小时，定植于口咽部的非致病菌过度生 长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌检出 率则明显降低。 2. 在临床上咳痰仍是诊断肺部感染最常用的标本， 但咳痰也最易被口咽部正常菌群污染。痰液标本 的细菌学检验，必须区分是病原菌还是来自上呼
（二）血培养检测消毒程序
1.皮肤消毒程序：严格执行三步法（防止皮肤寄生菌污染） （1）用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上； （2）然后用1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒， 从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上； （3）最后用75%酒精脱碘，待酒精挥发干燥后采血。 新生儿及对碘过敏的患者，只能用75%酒精消毒60s， 待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。 2.培养瓶消毒程序： （1）用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用60秒。 （2）用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒 精，然后注入血液。

临床上约半数咳痰标本不合格！
咳痰途经口咽部 不可避免地受到污染
唾液中口咽部定植菌的浓度可达108 ～ 109/ml。 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在 唾液严重污染现象。


合格标本的判断标准
外观：观察颜色、粘度、有无血丝
或脓。若标本为水状且很明显是唾 液，则应拒收。
为了判定是否来自下呼吸道的痰，

6.血培养标本的运送 要求：（1）采集后的血培养瓶应在1小时之内 送往实验室。 （2）血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏和 冷冻。 说明：血培养瓶冷藏或冷冻会将一些微生物杀 灭，将装着液体的容器冰冻也会使容器破裂。
7.血培养的培养周期 要求：自动化血培养仪的标准血培养周期为5天。 说明：有研究表明，95%-97%的有临床价值的 细菌会在3-4天内被自动血培养系统检出，目 前仍推荐5天的培养周期。特殊情况可适当延 长培养时间。如临床怀疑布鲁菌感染，可延 长培养至28天等。
5.血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配 要求：一个需氧瓶和一个厌氧瓶为一套血培养， 作为常规血培养的组合。 说明：采用一对需氧瓶+厌氧瓶组合，比采用 二个需氧瓶的组合可检出能更多的葡萄球菌、 肠杆菌科细菌和厌氧菌。而且，采两瓶可以 保证足够的采血量。当被用来做培养的采血 量少于推荐值时，血必须首先接种需氧瓶， 然后将剩余的血液接种入厌氧瓶。因为多数 菌血症是由需氧和兼性需氧细菌造成的，而 这些细菌从需氧瓶中更好的被分离。
由于婴幼儿患者厌氧菌所致菌血症比较罕见， 婴幼儿血培养可以仅用需氧瓶，为提高检出 率、区分污染菌，应采用两只需氧瓶为一组 血培养。仍然采用双侧双瓶的采血方式。 真菌血培养采用需氧血培养瓶采集标本。采 用中和/灭活抗菌药物的血培养瓶可提高真菌 的检出率。自动化血培养系统不能用于双相 真菌的检测。
4.采血量 要求： 成年患者推荐的采血量为每瓶不少于5ml。 婴幼儿患者推荐的采血量为每瓶不少于2ml。 说明：血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。 成人血培养采血量在2~30ml之间，病原菌检出率与 采血量成正比例增长。每增加1ml的血液，病原菌 的检出率增加3.2%。儿童患者因为血液中病原菌浓 度较高，血培养量无需等同于成人。对血液病患者 或者血容量相对较低的患者建议使用儿童瓶来减少 血液的采集量增加病原菌的检出率。
我们应该追求： “准确的病原学诊断” “针对性病原学治疗” 正确的微生物标本采集和运送， 是准确的病原学诊断的前提！
标本规范化采集的重要性



正确采集、处理与运送细菌培养的标本直接关系到 致病菌培养的正确性与阳性率的高低，是临床细菌 检验成功的关键。 标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误，不当的 标本可导致假阴性、假阳性结果的出现，因此标本 采集与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重 要的临床感染信息的基础。 好的微生物检验标本可提升实验室工作效率及病患 照顾质量，降低医疗成本。
吸道的正常菌群。经过洗涤处理的痰液或自气管
镜采集及气管穿刺所获标本，结果比较可靠。
3.由于口腔和咽部存在大量的革兰阳性和革兰阴性厌
氧细菌，而且缺乏可靠的方法区分它们究竟是致病
菌还是定植菌，因此不主张对咳痰标本进行厌氧菌 培养。 4. 约有1/4～1/2肺部感染患者可能发生菌血症，应 同时做血培养。
要求： 严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手按 压静脉，除非带有无菌手套。 不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头， 采用真空采血装置能降低污染率。 说明：无论采用何种采血方法，血培养可接受 的污染率通常是≤3%。研究表明，经过专门 培训的熟练抽血者采集血培养的污染率为3%， 而未经培训的住院医生和护士污染率则达 11%。因此对临床护士就血培养标本采集进 行专门的、严格的培训是非常必要的。
合格痰液标本
需检查是否为合格的痰标本。白细
胞＞25个/低倍镜视野、鳞状上皮细 胞＜10个/低倍镜视野为合格标本。 采集合格标本对细菌的诊断极为重 要。
不合格痰液标本
（一）采集指征

凡是发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性， 并伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音，外周白细 胞总数及中性粒细胞比例明显增高，X线检查提 示肺部有炎性浸润或胸腔积液，甚至出现感染性 休克和呼吸衰竭等患者，应采集痰液或下呼吸道 标本。 对可疑烈性呼吸道传染病（如SARS、肺炭疽、肺 鼠疫等）患者采集检验标本时必须注意生物安全 防护。
临床微生物标本 采集规范
世界人口死因 感染性疾病：25％
抗生素时代，感染仍是人 类健康的主要“杀手”
提高感染样本送检率 加强细菌耐药监测
关注细菌性疾病的病原学诊断，已成为
临床工作者、临床微生物与微生态工作者、
药学家和从事感染控制的工作者共同关注的
热门焦点。
成功治疗感染症的因素
‧成功分离病原菌 –标本收集、运送、保存 –标本处理方法 –检验医师专业知识 ‧医师判读病原菌培养结果 ‧选择适当治疗方法


病毒
支原体、衣原体与立克次体 原虫 寄生虫
我国痰培养现状
标本送检率低
苛养菌检出率极低
结果重复性差
报告速度慢
感染菌与污染菌不易区分
药敏结果与治疗反应存在差距

标本采集方法
医师或护士直视下采集标本
咳痰标本
病人先漱口，去除表面的菌群
教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液
（三）血培养标本采集和运送
1.采集时间 要求：对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用 抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。必须同时 或间隔短时间内采集2套（每套包括1只普通血培养 瓶及1只厌氧血培养瓶）以上血培养标本。 说明：实验数据表明细菌入血后约1小时，寒战和发 烧开始出现2小时内，此时为采集血培养标本进行 病原菌培养的最佳时机。在不同的时间点采血只有 在以下情况才有必要：疑似感染性心内膜炎或其他 血管内（如导管相关性感染）感染患者的连续性菌 血症。
如何提高细菌阳性检出率
标本采集时机
标本采集方法
标本的质与量
标本的运送与保存
镜检筛选合格标本
高质量、多种分离培养基
培养环境
微生物样本采样基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检甚至床旁接种尤其是厌氧培养 5.棉拭子标本宜用运送培养基 6.混有正常菌群污染标本，不可置肉汤培养 7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂 8.送检标本应注明来源和检验目的
“正确的微生物学检验始自正确的 标本采取。临床医师、护师及检 验技师都必须通晓其要领。”
标本采集和运送是细菌培养成 功的最最重要的关键
但由于标本的采集和运送常由护士或医 生或病人自己完成，所以也是最不容易做好 的事情，而且不知道问题所在之处，造成的 后果是: 临床医生最不能接受的问题:阳性率低
三、
尿培养标本采集规范
尿路感染是指尿道内有大量微生物繁殖而引起的尿 路炎症。 根据感染部位分为： 上尿路感染（肾盂肾炎） 下尿路感染（膀胱炎、尿道炎） 男性可出现前列腺炎。
（一）尿培养标本送检指征

1. 有典型的尿路感染症状；



2. 有肉眼脓尿或血尿； 3. 尿常规检查白细胞或亚硝酸盐阳性； 4. 有不明原因的发热，无其他局部症状； 5. 留置导尿管的患者出现发热； 6. 膀胱排空功能受损； 7. 泌尿系统疾病手术前； 8. 有尿路感染症状者，前次培养结果阴性或抗菌治 疗48h后仍持续发热。 9. 抗生素停药后，感染症状再次出现。
体温 细菌量 上升幅度
时间
2.采集部位 要求：从两侧上肢静脉采血，“双瓶双侧”采血 培养。至少做到“双侧双瓶”。必要时从下肢静 脉采血做第三套血培养。 说明：不建议采集 （1）动脉血，因其诊断价值没有比静脉血更大； （2）静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果 必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采 集另外一个血培养标本，以帮助阳性结果的判读。

（二）采集方法 1. 自然咳痰法 以晨痰为佳。用清水 反复漱口，用力咳出呼吸道深部的 痰，痰液直接吐入无菌容器中，尽 快送检。否则有的细菌（如肺炎链 球菌、流感嗜血杆菌）在外界可能 死亡。不能及时送检的标本，室温 保存≤2h。要求采到肺深部的痰液， 不要唾液。




在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后1～2h内必须立即进行实验室处理； 咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 ; 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口; 深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导; 对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3 天；不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状改 变； 怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送 检。