淫羊藿不同部位有效成分含量比较研究

陕西农业科学2021,67(04)：35-39Shaanxi Journal of AgDcultural Sciences
淫羊0不同部位有效成分含量比较研究
邓寒霜▽，杨文怡3,贺博3，李月1
(1.商洛学院生物医药与食品工程学院，陕西商洛726000；
2.陕西秦岭特色生物资源产业技术研究院，陕西商洛726000；
3.陕西天士力植物药业有限公司，陕西商洛726000)
摘要：为探索增加淫羊餐药材药用部位的可行性，验证药典关于淫羊餐药材来源的规定
是否合理，为拓宽淫羊餐药材资源奠定基础，随机采集8批淫羊餐药材样晶，按根、茎、叶
柄、叶片分为4个不同部位，应用HPLC法对其中的淫羊｝K、朝｝定A、朝｝定B、朝｝定
C、宝I等5种成分进行含量测定。

发现淫羊｝叶片中淫羊｝K、朝｝定B、朝｝定
C、宝I4种成分含量在各部位中最高，其平均值分别为1.60%，1.10%，2-14%，
0.16%，各叶片样晶中淫羊｝K、朝｝定A、朝｝定B、朝｝定C含量之和均高于药典标
准;朝｝定A的含量在淫羊｝根中最高，其平均值为1.46%，根中相关有效成分含量之和
也高于药典标准；淫羊｝茎及叶柄中各有效成分的含量大多＜0.10%。

研究结果表明，现
行药典关于淫羊｝药用部位的规定有一定的合理性，但淫羊｝根具有药用开发的潜力。

关键词：淫羊｝;药用部位;有效成分;含量比较
中图分类号：R282.6文献标识码:A文章编号：0488-5368(2021)04-0035-05
Comparative Study on Contert of Active Components
in Differeet Parts of Epimedium
DENG Hanshuang1,2,YANg Wenyi3,HE Bo3,LI Yue1
(1.College of Biopharmaceutal and Foof Enginering,Shangluo University,Shangluo, Shaanxi726000,China；
2.Shaanxi Qinling Industrial Technology Research Instituta o Special Biological Resources,Shangluo,Shaanxi726000,China；
3.Shaanxi Tasly Plant Pharmaceutical Co.,Lti,Shangluo Shaanxi726000,China)
Abstract:In order ta explore the feasibility for incmasing the medicinal pots of epimedium,ta veDfy source of epimedium in Phamiacopoeia,and lay a foundation for expanding the source of epimedium.Eight batches of epimedium were randomly collected and divided into4pots according ta tUeir mots,stems,petioles and Naves. The content of icaDin,epimedin A,chaohuoding B,chaohuoding C and baohuoside I were detemiined by HPLC.The results showed that tUa cenmnts of icaDin,chaohuoding B,chaohuoding C and baohuo/n I in the Navas of Epimedium were the highest,which tUa average value was1.60%, 1.10%,2.14%and0.16%,re­spectively.The total cenmnts of icaDin,chaohuoding A,chaohuoding B and chaohuoding C in the Naves were higher tUan those in the Phamiacopoeia.The content of epimedine A in the mot of epimedium was the highest, its ayerge value was1.46%.The total content of active components in tUe mot of epimedium was higher tUan tUat of Phomacopoem.The content of active components in stems and petioles of epimedium was basical l y less tUan0.10%-The results showed tUat the current Phamiacopoeia about the medicinal parts of epimedium is rea­sonable,but the mot of epimedium has tUa potential for medicinal development.
Key woris:Epimedium；Medicinal parts；Efective components；Content compaDson
收稿日期：2020-07-02修回日期：2020-07-20
基金项目：中央引导地方科技发展专项(2019ZY-FP-02)；商洛市科技项目(SK2019-79)；商洛学院科技专项(JY2019-01)(
第一作者简介:邓寒霜(1977-),男,湖南怀化人,副教授，硕士，主要从事中药质量控制研究。

36陕西农业科学2021年第67卷第4期
中药淫羊董具有悠久的应用历史,具有补肝肾、袪风湿、强筋骨等功效，在我国最早的药学专著《神农本草经》中就有收录，列为上品我国是淫羊董属植物地理分布中心,分布有40余种淫羊｝, 2005年版《中华人民共和国药典》（以下简称"药典"）收载淫羊｝药材的来源有5种小糜科植物，分别是淫羊｝（Epimedium brevicornu M—ini）、朝鲜淫羊霍（Epiinedium koreanum Nakai）、箭叶淫羊霍（Epi­medium sagittatum（Sieb-/Zucc）M—ini）、柔毛淫羊｝（Epiinedium pubescenc M—ini）以及巫山淫羊｝（Epiniedium wushanensc T.S-Ying）的干燥地上部分⑷。

从2010年起，巫山淫羊｝因为与其他几种来源的淫羊｝药材在化学成分上有较大的区别，而被单独作为一味中药收录于药典中。

自此，药典关于淫羊｝药材的植物来源开始减少成4种，分别是淫羊｝、箭叶淫羊｝、柔毛淫羊｝、朝鲜淫羊｝;同时,将淫羊｝药用部位由"干燥地上部分"变更为"干燥叶"[5]。

至目前最新发行的2020年版药典,淫羊｝药材来源一直沿用2010年的相关规C[6,7]（为验证淫羊｝药用部位划分的合理性，比较淫羊｝植物不同部位中药用成分含量的差异，以期为扩大淫羊｝药材来源,减少自然资源的浪费提供依据,本文对来自淫羊｝不同部位的样品材料中几种有效成分的含量进行了对比分析。

1材料与方法
1.1材料与设备
淫羊｝原植物，采集自陕西、甘肃等地，由商洛学院执业药师李筱鉴定为小糜科植物淫羊｝（Epi-medium brevicornu Maxini）或柔毛淫羊霍（Epfnedi-um pubescenc Maxi），样品来源详细信息见表1。

淫羊霍昔对照品（批号201516）,购自中国药品生物制品检验所;朝霍定A（批号1804027）、朝霍定B（批号19071403）、朝霍定C（批号190625）、宝霍昔I（批号1804026）等对照品购自北京世纪奥科生物技术有限公司。

表1淫羊0样品产地信息
样品编号品种产地
1柔毛淫羊｝丹凤窑沟
2淫羊｝甘肃陇南
3柔毛淫羊｝洛南古城
4淫羊｝甘肃西河
5柔毛淫羊｝丹凤庚岭
6淫羊｝西
7柔毛淫羊｝丹凤赵川
8柔毛淫羊｝丹凤土门
检测使用的仪器为日本岛津公司出品的LC-20A型HPLC仪，配有在线脱气机、高压泵、四元低压梯度混合装置、二极管阵列检测器、原装自动进样器、原装柱温箱、岛津LabSolutions色谱工作站等。

1.2方法
1-2.1样晶处理将淫羊霍原植物除去杂质,按根、茎、叶柄、叶片等不同部位分成4类供试品，干燥后粉碎，过3号药典筛（24目，筛孔内径355.m ±13.m）,即得供试品粉末（
1.2.2含量测定色谱条件采用十八烷基键合的硅胶色谱柱（250mm X4.6mm,填料粒度5.m）,以乙猜（A）、水（B）为流动相，按表2中规定进行梯度洗脱，检测波长270nm,柱温30m,进样量10.L,记录60min内色谱流出曲线。

表2淫羊0样品含量测定梯度洗脱顺序
时间/m in A/%B/%
0-22.5
10#3090#70
22.5-40
3070
40-50
30#5570#45 50-55
5545
55-58
55#1045#90供试品溶液的制备取粉碎后通过三号药典筛的样品0.2g左右，用万分之一的电子天平准确称量样品的质量，将样品粉末装于具塞磨口瓶中，加A20mL稀乙醇作为提取溶剂后，立即塞密，称取并记录其重量，采用超声波提取法提取样品（功率400W,频率50kHe），提取时间为1h。

提取完成后，取出样品溶液放冷，再次带塞称取瓶中提取溶液的重量与前述记录比较，补充损失的稀乙醇，将样品提取溶液摇匀后，用微孔滤膜过滤，取续滤液,即得供试品溶液
对照品溶液的制备取朝霍定A、B、c,宝霍昔I以及淫羊霍昔等5种待测组分的对照品适量，准确称取其质量，用甲醇作为溶剂溶解并转移至体积为25mL的容量瓶内，再以甲醇为溶剂定容至刻度，即得对照品溶液。

2结果与分析
2.1系统适应性考察结果
2.1.1精密度考察结果准确量取上述对照品的溶液10.L注入HPLC仪进行分析,记录各组分色谱峰的峰面积，连续进样5次以上，经计算后得到淫羊霍昔,朝霍定A、B、C和宝霍昔I等5个组分
邓寒霜,等:淫羊｝不同部位有效成分含量比较研究
37
各自色谱峰峰面积的RSD 值分别为0. 21%) 0. 32%)0-24%)0- 31%)0- 35%，考察结果证明了
仪器
的 。

2.1.2
复性考察结果利用同一个淫羊｝
的样品
，依据
的方 品成为
试品 ，重 品
5份以上，准确量
：
品
10 .L HPLC 仪进行分析,记录各
组分 的 积，经计 淫羊｝昔，朝
｝定A )B )C 和宝｝昔I 等5个组分各自色谱峰
积的 RSD 值分别为 0. 83%)0- 87%)0- 74%、
0.86%、1.01%,表明研究所
品 方 •有良好的重复性。

2.1.3稳定性考察结果 取同一供试品溶液,照 1-2.2项中色谱条件，分 0 h 、4 h 、8 h 、12 h 、
24 h , 确量
品 10 .L HPLC
进 分析, 记录 组分 的 积, 经计
淫羊｝昔，朝｝定A 、B 、C 和宝｝昔I 等5
个组分各自
积的RSD 值分别为
2.03%、
3.46%、2.81%、3.27%、3.79%，稳定性考
明 品的
内在品质在24 h
内不会发生较大变化。

2.1.4校准曲线绘制分别吸取淫羊｝昔、朝｝
定A 、朝｝定B 、朝｝定C 、宝｝ I 不同浓度的对 照品
进样分析，记录
据，以 分
的浓度为横 (X ),以
积为
(Y ),绘
线，对照品曲线方程如下。

淫羊｝昔:Y =22 990 302- 7778X - 35 033- 3333,
R 2 =0.9999,线性范围 0 -0.36 mg - mL -。

朝｝定 A ：Y=17 058 760- 7143X + 3 577- 9524, R 2 =0.9996,线性范围 0 -0.32 mg - mL -。

朝｝定 B ：Y=19 818 696- 4286X - 17 005- 0000, R 2 =0.9999,线性范围 0 -0.28 mg - mL -。

朝｝定 C ：Y=17 023 549-2611X + 24 658- 8571, R 2 =0.9991,线性范围 0 -0.29 mg - mL -。

宝｝昔I : Y =29 157 312- 4286X +20 219- 6640, R 2 =0.9998,线性范围 0 -0.28 mg - mL -(
对照品
线见图1, 对照品及空白
对照
图见图2(2.2
量测定结果
淫羊｝ 不同部位HPLC 分析色谱图见图
2,淫羊｝ 不同部位
分含量测定
表
a
1
32
55
20
30
40
50
60
20
30
40
50 60
保留时间/min
保留时间/min
2
1：
10
20
30
40
50
60
保留时间/min
C
10 20
30
40
50 60
保留时间/min 5
3
20
30
40 50 6020
30 40
50 60
保留时间/min
保留时间/min
/淫羊｝根'b.淫羊｝茎'a 淫羊｝叶柄'd.淫羊｝叶片；/混合对照品；a 空白对照.
1•朝｝定A ； 2.朝｝定B ； 3.朝｝定C ； 4.淫羊｝昔；5.宝｝昔I
2淫羊0药材不同部位HPLC 分析色谱图
5
38陕西农业科学2021年第67卷第4期
由图2可知,空白对照色谱图的基线平稳,对样品分析无干扰。

相较于淫羊董根和淫羊董叶片，淫羊董茎、淫羊董叶柄色谱图中色谱峰的数目少、峰面积小，表明淫羊｝此2个部位中含有的化学物质较少。

淫羊｝根、淫羊｝叶片色谱图中色谱峰的数目更多、峰面积更大，表明淫羊｝根、叶片两个部位中含有更丰富的化学物质，有效成分的含量更高。

淫羊｝根样品色谱图在保留时间26~28min 间，出现了3个较为明显，且在其它样品色谱图中未出现的色谱峰，表明淫羊｝根中的化学成分种类与其它部位不同，淫羊｝根与淫羊｝叶片的药理作用有区别。

由表3、图3可知,淫羊｝昔、朝｝定A、朝｝定B、朝｝定C及宝｝昔I5种成分在淫羊｝药材不同部位中的含量差异较为明显，其中淫羊｝叶片中有效成分含量最丰富，有4种成分的含量在各部位样品中最高，淫羊｝昔、朝｝定A、朝｝定B、朝｝定C4种成分含量之和高于药典"淫羊｝、柔毛淫羊｝、箭叶淫羊｝均不得少于1.%"的规定[7]o 其次为淫羊｝根，朝｝定A在根中的含量最高;根中前述4种有效成分的含量之和，也能达到2020年版药典的要求;淫羊｝茎、淫羊｝叶柄中5种有效成分的含量均较低，几乎没有药用价值;宝
I的含量，在淫羊｝药材各部位中的含量均较低。

上述检测结果表明，药典关于淫羊｝药用部位为"干燥叶"，且生品药材中不检测宝W I的相关规定具有一定的合理性。

表3淫羊0药材不同部位有效成分含量测定结果
有效成分含量/%
编号部位
淫羊｝K朝｝定A朝｝定B朝｝定C宝｝K I
1根0.59 2.260.28 1.570.05茎0.070.030.050.080.00
叶柄0.070.030.090.110.00
叶片 1.030.34 1.48 1.250.07 2根0.220.820.16 1.130.03茎0.080.040.080.100.00
叶0.080.030.030.120.00
叶0.600.28 1.77 1.020.05 3根0.60 2.500.35 1.630.05茎0.110.040.060.080.01
叶0.110.040.060.160.00
叶0.910.36 1.46 1.140.09 4根0.66 2.290.17 2.270.06茎0.100.050.030.070.01
叶0.030.010.050.050.00
叶0.510.26 1.270.740.04 5根0.150.390.03 2.790.01茎0.030.010.030.050.00
叶0.050.020.080.090.00
叶 2.660.470.74 3.760.02 6根0.52 1.160.17 1.390.04茎0.100.040.030.110.00
叶0.100.030.06 1.420.01
叶 2.530.510.76 3.250.26
邓寒霜,等:淫羊｝不同部位有效成分含量比较研究
39
续表3淫羊0药材不同部位有效成分含量测定结果
样品编号
部位
有效成分含量/%
淫羊｝K
朝｝定A
朝｝定B
朝｝定C
}KI
7
根
0.46 1.290.11
2.35
0.01
茎0.10
0.04
0.040.120.00叶柄0.110.030.05
0.210.00
叶片
2.270.420.66
3.17
0.298
根0.370.960.13 1.590.05
茎0.090.04
0.03
0.100.01
叶0.090.030.100.15
0.00叶
2.270.45
0.66 2.76
0.43
平均根0.44 1.460.18
1.840.04茎0.090.04
0.040.090.01
叶0.08
0.030.060.290.00
叶
1.600.39
1.10
2.14
0.16
2 000 000
0 厂• I • I • I "1*1 • I • I ■ I 0 00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40
浓度/(mg ・mH)
8 000 0006 000 000B 跚
=4 000 000
▲宝鳖昔I x 淫羊餐昔•朝蕾定B ♦朝雀定C X 朝輩定A
图3 8批淫羊0样品不同部位中5种有效成
量平均值比较
3结论与讨论
研究中发现以2020 淫羊｝项目 定的色谱条件，未能使朝｝定A 、朝｝定B 、朝｝定C
以及淫羊｝昔等4种 分 分离。

为解决上问题,本文在 定方法的基础之上， 品分析的色谱条件进行了调整（在调 的 条件
，上4种分 的分离 达1.5以
上， 的论 在2.5x10"以上。

年来，淫羊｝
生产中一直视淫羊｝原植
物的根、茎、等部位为
，造了一定 上
的资源浪费,也增加了生产 源及 资源的。

为了 淫羊｝ 部位划分的 性,
本研究对淫羊｝不同部位 分的含量进行了对比分析。

由研究
以看出，淫羊｝茎、叶柄中
几乎不含
分，在生产中应作为 去，以增
品质。

但淫羊｝
化学物质含量丰富，特
是几种 定的指标性成分的含量之和可以达
要求，表明淫羊｝
一定的
发价
值。

课题组在
的工作中，将重点对淫羊｝根的
、
作用进行研究，探明其作为淫羊｝
使
的可行性，为 淫羊｝药用资源奠定基础（
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