免疫比浊法定量测定制糖过程中的葡聚糖
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管道死角或滤网空隙可见 ， 俗称“ 蔗饭” 。
葡 聚糖 的实 时 监 测 成 为 甘 蔗 制 糖 生 产 控 制 的
一
样 品若干 ， 葡聚糖单 克隆抗体检测试剂盒 （ 广州甘 蔗糖业研究所研制） 。
１ ． ２ 主要 仪器 设 备
Ｍ Ｃ Ａ 浊度仪 ， 精密移液器 ， 手持式锤度计 ， 电子
一
糖单体构成 的多糖 高分子聚合物 ， 可由某些细菌例
如明串珠菌 （ Ｌ ｅ ｕ ｃ ｏ ｎ ｏ ｔ ｏ ｍ ｅ ｓ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｏ ｉ ｄ ｅ ｓ ）发酵蔗糖产
葡聚糖Ｔ 一 ２ ０ ０ ０ 标准品 ， 蔗汁 、 糖浆及 白砂糖
生。 右旋糖酐在蔗汁中浓度通常为几十到上千ｐ ｐ ｍ， 在空气作用下可产生交联而析出白色固体 ， 通常在
２ ０ １ ３ 年 １ ２月
广 西 蔗 糖
ＧＵＡＮＧ ＸＩ Ｓ ＵＧ ＡＲＣ ＡＮＥ ＆ Ｃ ＡＮＥ Ｓ ＵＧＡＲ ＮＯ． ４ ． Ｄ ｅ ｃ ． ２ ０ １ ３
第 ４期 （ 总第 ７ ３期 ）
文章编号 ： １ ０ ０ ７ — ４ ７ ３ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ４ — ０ ６
摘
要： 本文用最近研制成功的单 克隆抗体试剂盒定量检测甘蔗制糖过程 中的葡聚糖 ， 对广东 、 广西 、 云南 多间糖厂 的
甘蔗原料及生产 线上的葡 聚糖含量进行 调查 ， 并在制糖工艺中进行 添加葡聚糖酶 的试验 。结果表 明： 机收甘蔗在收获 后３ ２ ｈ 葡 聚糖含量 远高于人工收获甘蔗 ； 添加葡 聚糖酶 可有效分解炼 糖各环节的葡聚糖 ， 从而 降低 白砂糖 中的葡 聚糖
免疫 比浊法定量测定制糖过程 中的葡聚糖
蚁细苗 柳 颖・ 林荣珍 曾练 强 黄 曾慰 马 步 梁达 奉 ｚ
（ － 广州甘蔗糖业研究所 广东省甘蔗改 良与生物炼制重点实验室 ， 广东广州 ５ ３ ０ ０ ０ ２ ） ５ １ ０ ３ １ ６ ； ｚ 广西糖业研发中心 ， 广西南宁
间， 在收割后１ ６ ｈ 人榨 ； 由于各个 时间点抽取 的是
同一 时间收割的不 同甘蔗 ，试验 出现６ ４ ｈ 、 ８ ０ ｈ 、 ９ ６ ｈ 的波动可视为由研究对象的差异导致 ； 后期甘蔗 中 的葡聚糖含量没有继续上升而是趋于稳定 ， 可能是
葡聚糖含量测定采用免疫 比浊法 ［ ４ ］ 。
收稿 日期 ： ２ ０ １ ３ — １ １ － ２ ２
基金项目： 现代农业产业技术体系建设专项（ Ｃ Ａ Ｒ Ｓ 一 ２ Ｏ － ４ — ５ ） ； 国家科技支撑计划项目（ ２ ０ １ １ Ｂ Ａ Ｅ １ ６ Ｂ ０ ３ ） ； ／ ｋ 桂学者建设工程专 项经费资助。 作者简介 ： 蚁细苗（ １ ９ ７ ５ 一 ） ， 女， 高级工程师 ， 主要从事食品生物技术 和制糖工艺研究及 检测工作 。 通讯作者 ： 梁达奉（ １ ９ ６ ４ 一 ） ， 男， 博士 ， 教授级高级工程师 ， 八桂学者。
含量 ， 提高产品品质。 关键词 ： 葡聚糖 ； 免疫 比浊法 ； 甘蔗制糖 。 葡聚糖酶
中 圈分 类 号 ： Ｔ Ｓ ２ ４ ９ ． ９ 文献标识码 ： Ｂ
监测糖厂生产过程的葡聚糖含量变化。 ２ ０ １ ２ ／ ２ ０ １ ３ 年
Ｕ 刖 吾
榨季 ，本 团队应用葡聚糖检测抗体试剂盒在广东 、
３ ５
蚁细苗等 ： 免疫 比浊法定量测定 制糖过程 中的葡聚糖
２ 结 果 与 讨 论
２ ． １ 广 西某 糖厂 机 收甘蔗 与 人工 砍收 甘蔗 的对 比
的葡聚糖含量约为人工砍收甘蔗的３ 倍。 由此可见 ， 机 收甘蔗 比人工砍收甘蔗更容易受
到微生物感染 ， 使得甘蔗变质 ， 蔗糖转化为葡聚糖 ，
导致糖分损失 ， 影响制炼生产 。收割后１ ６ ｈ 机收甘蔗 葡聚糖含量约为人工收割甘蔗的２ 倍 ，并在此后急 剧上升 ， 因此建议严格控制机械收割甘蔗的存放时
取人工砍收甘蔗及机收甘蔗若干 ， 室温下存放
（ ２ ２ ． ４ — ２ ７ ． ５ ℃） 。回到化验室（ 此时约为砍收后２ ｈ ） 随 机抽取部分机收及人工砍收甘蔗榨汁 ， 测定葡聚糖 含量 ， 之后每隔８ 小时随机抽取甘蔗 ， 榨汁测定葡聚 糖含量 ， 结果见 图２ 。 由图２ 得， 机械收割的甘 蔗在砍收后 ３ ２ ｈ 内葡聚 糖随时间推移迅速增长 ， ３ ２ ｈ 后 甘蔗 中葡 聚糖含量 趋于稳定 ， 约为４ ９ ２ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ ・ 。 Ｂ ｘ （ 对 固形物 ， 下 同） ， 而
广西、 云南 的多家 糖厂 进行 试验 ， 效果 较好 。
葡聚糖（ Ｇ ｌ ｕ ｃ ａ ｎ ） 是以葡萄糖为单体 的聚合物的
总称。制糖工艺过程 出现的葡聚糖主要为 一 葡聚 糖， 又称右旋糖酐（ ｄ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｎ ） ， 是一种 由仅 一 Ｄ 吡喃葡萄
ｌ 材料 与 方 法
１ ． １ 实验 材料
天平 ， ０ ． ４ ５ ｔ ｘ ｍ滤器 。
１ ． ３ 样 品前处 理
个重要技术 。葡聚糖的测定一般 可用Ｈ ａ ｚ ｅ ／
Ｉ Ｃ Ｕ ＭＳ Ａ 法 ［ １ ］ 、 Ｒ ｏ ｂ ｅ ｒ ｔ ’ ｓ 铜法 ［ ２ 】 、 Ｐ ｏ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ Ｌ ｔ ｄ ． Ｄ Ａ Ｓ Ａ 法［ ３ ］ 、 酶解法等。但这些方法都有较大的局限 性， 如准确度不高、 操作繁琐等缺点。现本团队已成
液体样品以０ ． ４ ５ １ ｘ ｍ 滤膜过滤后测定锤度备用 ； 固体样品以样品稀释液溶解至约５ Ｏ 。 Ｂ ｘ ，以０ ． ４ ５ ｔ ｘ ｍ 滤膜过滤后测定锤度备用。
１ ． ４ 测 定步 骤及 结 果计算
功制备葡聚糖单克隆抗体 ，能与葡聚糖形成抗原一
抗体（ Ａ ｂ — Ａ Ｓ ） 复合物而产生浊度 ， 通过测定溶液浊 度而计算得葡聚糖含量 。该方法准确度高 ， 前处理 简单 ， ５ — １ ０ 分钟 即可得到结果 ， 适用于甘蔗制糖过 程原料 、 糖产 品及在制 品中的葡聚糖检测 ， 可实时
葡 聚糖 的实 时 监 测 成 为 甘 蔗 制 糖 生 产 控 制 的
一
样 品若干 ， 葡聚糖单 克隆抗体检测试剂盒 （ 广州甘 蔗糖业研究所研制） 。
１ ． ２ 主要 仪器 设 备
Ｍ Ｃ Ａ 浊度仪 ， 精密移液器 ， 手持式锤度计 ， 电子
一
糖单体构成 的多糖 高分子聚合物 ， 可由某些细菌例
如明串珠菌 （ Ｌ ｅ ｕ ｃ ｏ ｎ ｏ ｔ ｏ ｍ ｅ ｓ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｏ ｉ ｄ ｅ ｓ ）发酵蔗糖产
葡聚糖Ｔ 一 ２ ０ ０ ０ 标准品 ， 蔗汁 、 糖浆及 白砂糖
生。 右旋糖酐在蔗汁中浓度通常为几十到上千ｐ ｐ ｍ， 在空气作用下可产生交联而析出白色固体 ， 通常在
２ ０ １ ３ 年 １ ２月
广 西 蔗 糖
ＧＵＡＮＧ ＸＩ Ｓ ＵＧ ＡＲＣ ＡＮＥ ＆ Ｃ ＡＮＥ Ｓ ＵＧＡＲ ＮＯ． ４ ． Ｄ ｅ ｃ ． ２ ０ １ ３
第 ４期 （ 总第 ７ ３期 ）
文章编号 ： １ ０ ０ ７ — ４ ７ ３ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ４ — ０ ６
摘
要： 本文用最近研制成功的单 克隆抗体试剂盒定量检测甘蔗制糖过程 中的葡聚糖 ， 对广东 、 广西 、 云南 多间糖厂 的
甘蔗原料及生产 线上的葡 聚糖含量进行 调查 ， 并在制糖工艺中进行 添加葡聚糖酶 的试验 。结果表 明： 机收甘蔗在收获 后３ ２ ｈ 葡 聚糖含量 远高于人工收获甘蔗 ； 添加葡 聚糖酶 可有效分解炼 糖各环节的葡聚糖 ， 从而 降低 白砂糖 中的葡 聚糖
免疫 比浊法定量测定制糖过程 中的葡聚糖
蚁细苗 柳 颖・ 林荣珍 曾练 强 黄 曾慰 马 步 梁达 奉 ｚ
（ － 广州甘蔗糖业研究所 广东省甘蔗改 良与生物炼制重点实验室 ， 广东广州 ５ ３ ０ ０ ０ ２ ） ５ １ ０ ３ １ ６ ； ｚ 广西糖业研发中心 ， 广西南宁
间， 在收割后１ ６ ｈ 人榨 ； 由于各个 时间点抽取 的是
同一 时间收割的不 同甘蔗 ，试验 出现６ ４ ｈ 、 ８ ０ ｈ 、 ９ ６ ｈ 的波动可视为由研究对象的差异导致 ； 后期甘蔗 中 的葡聚糖含量没有继续上升而是趋于稳定 ， 可能是
葡聚糖含量测定采用免疫 比浊法 ［ ４ ］ 。
收稿 日期 ： ２ ０ １ ３ — １ １ － ２ ２
基金项目： 现代农业产业技术体系建设专项（ Ｃ Ａ Ｒ Ｓ 一 ２ Ｏ － ４ — ５ ） ； 国家科技支撑计划项目（ ２ ０ １ １ Ｂ Ａ Ｅ １ ６ Ｂ ０ ３ ） ； ／ ｋ 桂学者建设工程专 项经费资助。 作者简介 ： 蚁细苗（ １ ９ ７ ５ 一 ） ， 女， 高级工程师 ， 主要从事食品生物技术 和制糖工艺研究及 检测工作 。 通讯作者 ： 梁达奉（ １ ９ ６ ４ 一 ） ， 男， 博士 ， 教授级高级工程师 ， 八桂学者。
含量 ， 提高产品品质。 关键词 ： 葡聚糖 ； 免疫 比浊法 ； 甘蔗制糖 。 葡聚糖酶
中 圈分 类 号 ： Ｔ Ｓ ２ ４ ９ ． ９ 文献标识码 ： Ｂ
监测糖厂生产过程的葡聚糖含量变化。 ２ ０ １ ２ ／ ２ ０ １ ３ 年
Ｕ 刖 吾
榨季 ，本 团队应用葡聚糖检测抗体试剂盒在广东 、
３ ５
蚁细苗等 ： 免疫 比浊法定量测定 制糖过程 中的葡聚糖
２ 结 果 与 讨 论
２ ． １ 广 西某 糖厂 机 收甘蔗 与 人工 砍收 甘蔗 的对 比
的葡聚糖含量约为人工砍收甘蔗的３ 倍。 由此可见 ， 机 收甘蔗 比人工砍收甘蔗更容易受
到微生物感染 ， 使得甘蔗变质 ， 蔗糖转化为葡聚糖 ，
导致糖分损失 ， 影响制炼生产 。收割后１ ６ ｈ 机收甘蔗 葡聚糖含量约为人工收割甘蔗的２ 倍 ，并在此后急 剧上升 ， 因此建议严格控制机械收割甘蔗的存放时
取人工砍收甘蔗及机收甘蔗若干 ， 室温下存放
（ ２ ２ ． ４ — ２ ７ ． ５ ℃） 。回到化验室（ 此时约为砍收后２ ｈ ） 随 机抽取部分机收及人工砍收甘蔗榨汁 ， 测定葡聚糖 含量 ， 之后每隔８ 小时随机抽取甘蔗 ， 榨汁测定葡聚 糖含量 ， 结果见 图２ 。 由图２ 得， 机械收割的甘 蔗在砍收后 ３ ２ ｈ 内葡聚 糖随时间推移迅速增长 ， ３ ２ ｈ 后 甘蔗 中葡 聚糖含量 趋于稳定 ， 约为４ ９ ２ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ ・ 。 Ｂ ｘ （ 对 固形物 ， 下 同） ， 而
广西、 云南 的多家 糖厂 进行 试验 ， 效果 较好 。
葡聚糖（ Ｇ ｌ ｕ ｃ ａ ｎ ） 是以葡萄糖为单体 的聚合物的
总称。制糖工艺过程 出现的葡聚糖主要为 一 葡聚 糖， 又称右旋糖酐（ ｄ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｎ ） ， 是一种 由仅 一 Ｄ 吡喃葡萄
ｌ 材料 与 方 法
１ ． １ 实验 材料
天平 ， ０ ． ４ ５ ｔ ｘ ｍ滤器 。
１ ． ３ 样 品前处 理
个重要技术 。葡聚糖的测定一般 可用Ｈ ａ ｚ ｅ ／
Ｉ Ｃ Ｕ ＭＳ Ａ 法 ［ １ ］ 、 Ｒ ｏ ｂ ｅ ｒ ｔ ’ ｓ 铜法 ［ ２ 】 、 Ｐ ｏ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ Ｌ ｔ ｄ ． Ｄ Ａ Ｓ Ａ 法［ ３ ］ 、 酶解法等。但这些方法都有较大的局限 性， 如准确度不高、 操作繁琐等缺点。现本团队已成
液体样品以０ ． ４ ５ １ ｘ ｍ 滤膜过滤后测定锤度备用 ； 固体样品以样品稀释液溶解至约５ Ｏ 。 Ｂ ｘ ，以０ ． ４ ５ ｔ ｘ ｍ 滤膜过滤后测定锤度备用。
１ ． ４ 测 定步 骤及 结 果计算
功制备葡聚糖单克隆抗体 ，能与葡聚糖形成抗原一
抗体（ Ａ ｂ — Ａ Ｓ ） 复合物而产生浊度 ， 通过测定溶液浊 度而计算得葡聚糖含量 。该方法准确度高 ， 前处理 简单 ， ５ — １ ０ 分钟 即可得到结果 ， 适用于甘蔗制糖过 程原料 、 糖产 品及在制 品中的葡聚糖检测 ， 可实时