雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪性能评价方法研究

雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪性能评价方法研究
目的对雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪的性能进行了评价。

方法参考《YY/T 1155-2009全自动发光免疫分析仪》医药行业标准和国家质量监督检验检疫总局颁布的有关医疗器械检定校准计量技术规范，阐述了准确度、重复性、线性范围、交叉污染等指标的评价方法和选取理由。

结果准确度：197 pmol/L 胰岛素标准品测定结果误差为6 pmol/L，20 pmol/L胰岛素标准品测定结果误差为2 pmol/L；重复性：对20 pmol/L的胰岛素标准品重复测定6次，6次测定的相对标准偏差为2%；稳定性：开机4 h后和8 h后的相对偏差分别为3%和4%；线性范围：20～197 pmol/L的胰岛素范围内，其线性相关系数可达到0.997；交叉污染：从低到高交叉污染率为1%，从高到低交叉污染率为0.2%。

结论提出的方法可用于日常全自动免疫分析仪性能的评价和校准，有助于检测结果的准确和可比。

[Abstract] Objective To evaluate the performance of ARCHITECT i2000 automatic chemiluminescence immunoassay analyzer. Methods With refer to the YY/T 1155-2009 automatic chemiluminescence immunoassay analyzer and related regulations published by the State Administration of Quality Supervision，Inspection and Quarantine，the protocols for accuracy，reproducibility，linear range，cross-contamination and so on were described in detail. Results Accuracy：the bias was 6pmol/L for 197pmol/L insulin sample and 2 pmol/L for 20 pmol/Linsulin sanple. Reproducibility：the standard deviation was 2% for 6 times analyses of 20 pmol/Linsulin sample. Stability：the relative bias was 3% and 4%，respectively，after 4 and 8 hours from power on. Linear range：the linear coefficient factor was 0.997 from 20 to 197pmol/L of insulin. cross-contamination：1% from low level to high level and 0.2% from high level to low level. Conclusion The proposed protocols can be used for routine performance evaluation of automatic chemiluminescence immunoassay analyzer and can benefit the accuracy and comparability of clinical diagnostic results.[Key words] Automatic chemiluminescence immunoassay analyzer；Evaluation；Calibration；Accuracy；Reproducibility；Linear range；Cross-contamination
全自动化学发光免疫分析仪是一种利用化学发光原理结合免疫技术对样本中痕量物质进行定性和定量分析的仪器，它结合了化学发光和免疫两方面的优势，从而具有灵敏度高、准确度高、特异性好、背景干扰小的优点，近几年在临床检验和食品安全等领域得到了广泛的应用[1-2]。

仪器的准确可靠是获得良好数据的前提和基础，为了保证全自动化学发光免疫分析仪的准确，国家制定了《YY/T 1155-2009全自动发光免疫分析仪》行业标准，但是该标准主要用于仪器的注册检验，用于日常的计量校准则较为严格和繁琐。

本研究在该标准及相关文献的基础上[3- 4]，参考国家颁布的《半自动生化分析仪》等医疗器械检定规程中类似指标的计量方法
以及相关文献的基础上[5-7]，对雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪的准
确度、重复性、线性范围、交叉污染等进行了评价。

此方法可用于日常全自动免疫分析仪性能的评价和校准，有助于检测结果的准确和可比。

1 仪器与试剂
全自动化学发光免疫分析仪（美国雅培i2000）；试剂为胰岛素测定试剂盒及定标液（美国雅培）；质控品来自美国雅培公司；采用系列胰岛素标准溶液作为样本（中国计量科学研究院）。

2 实验方法
首先采用厂家提供的检测试剂盒和胰岛素定标液对雅培i2000仪器进行定标，定标通过后测定质控，当质控符合要求后进行以下实验。

2.1 准确度评价
分别采用雅培i2000对标准值为197 pmol/L和20 pmol/L的胰岛素标准溶液进行测定，每个水平的标准品分别测定3次取其平均值作为测定结果。

根据下面的公式计算测量误差，作为准确度的评价指标。

Δx=x-x0
其中，x为三次测量平均；x0为相应浓度水平的标准值。

2.2 重复性评价
采用雅培i2000对标准值为20 pmol/L的胰岛素标准溶液进行测定，重复测定6次，计算测定结果平均值的相对标准偏差作为重复性指标的评价。

2.3 稳定性评价
采用雅培i2000对标准值为20 pmol/L的胰岛素标准溶液进行测定，重复测定3次取平均值；4 h和8 h以后重复此过程，分别计算相对起始时刻的相对偏差作为稳定性的评价。

其中，x为4或8 h后测定结果的平均；x0为起始时刻测定结果的平均值。

2.4 线性范围评价
采用雅培i2000对标准值分别为20、59、97、137、177、197 pmol/L的胰岛素标准溶液进行测定，每个浓度水平的平行测定3次取平均值作为测量结果，对浓度水平和测定结果进行线性拟合并计算线性相关系数r2作为线性范围的评价。

2.5 交叉污染率评价
采用雅培i2000对标准值为20 pmol/L的胰岛素标准溶液连续测定4次，然后对197 mol/L的胰岛素标准溶液连续测定4次。

按照上述方法依次循环对20 pmol/L和197 pmol/L的测定，测得4组低浓度值与3组高浓度值，然后按照下面公式将每相邻两组数值进行计算，得到3个低浓度到高浓度的交叉污染率和3个从高浓度到低浓度的交叉污染率，以各自的最大值报告评价结果。

其，为从低浓度到高浓度的交叉污染率；
为从高浓度到低浓度的交叉污染率
L1，L2，L3，L4为每组低浓度的测量值
H1，H2，H3，H4为每组高浓度的测量值。

3 结果
依据上述实验方法对雅培i2000全自动化学发光免疫分析仪准确度、重复性、稳定性、线性范围和交叉污染指标进行评定，结果如下。

准确度：197 pmol/L胰岛素标准品测定结果误差为6 pmol/L，20 pmol/L胰岛素标准品测定结果误差为2 pmol/L；
重复性：对20 pmol/L的胰岛素标准品重复测定6次，6次测定的相对标准偏差为2%。

稳定性：开机4 h后和8 h后的相对偏差分别为3%和4%。

线性范围：20～197 pmol/L的胰岛素范围内，其线性相关系数可达到0.997。

交叉污染：从低到高交叉污染率为1%，从高到低交叉污染率为0.2%。

4 讨论
4.1 准确度评价
测量仪器的准确度是指测量仪器给出接近于真值的响应能力。

《YY/T 1155-2009全自动发光免疫分析仪》中没有对全自动化学发光免疫分析仪的准确度进行评价，可能主要是因为测量过程中采用相对测定方法，通过标准品定标实现未知样品的测定，测定结果的准确度在很大程度上取决于试剂盒定标液的准确与否。

但是在实际使用过程中也希望了解仪器的准确度，通过对已知浓度标准品的测定可以间接反应出仪器的准确度，测定结果与标准值之间的误差可以作为准确度的表征。

测试项目原则上应当选取结构简单、有可用于免疫测定标准物质或标准品的分析对象。

在本项研究中，我们采用的是中国计量科学研究院提供的胰
岛素标准品，对高值和低值标准品分别测定并计算误差作为准确度的评价指标，其中高值胰岛素标准品测定结果误差为6 pmol/L，低值胰岛素标准品测定结果误差为2 pmol/L。

4.2 重复性评价
测量仪器的重复性是指测量仪器在相同的测量条件下为相同的被测物的重复应用提供非常近似示值的能力。

《YY/T 1155-2009全自动发光免疫分析仪》的行业标准规定重复性评价至少应当对同一份样品重复测定20次，这是一个较为严格的要求，在日常校准评价中重复测定20次带来的时间、试剂消耗太高。

在国家颁布的检定规程、校准规范等計量技术规范中，重复性实验往往不超过10次。

实验中，采用雅培i2000对20 pmol/L的胰岛素标准品重复测定6次，6次测定的相对标准偏差为2%，可作为重复性评价的结果。

4.3 稳定性评价
测量仪器的稳定性是指测量仪器保持其计量特性随时间恒定的能力，实验设计上参照了《YY/T 1155-2009全自动发光免疫分析仪》中稳定性评价方法。

开机4 h后和8 h后的相对偏差分别为3%和4%，都达到了标准的要求。

4.4 线性范围评价
一般检测结果的正常范围跨度超不过一個数量级，因此评价中我们重点对一个数量级跨度的线性进行了评价，从而保证正常和异常状态能够准确区分。

临床上正常人空腹基础血浆胰岛素水平为35～145 pmol/L，因此实验中我们对20、59、97、137、177、197 pmol/L的胰岛素标准品进行测定，其线性相关系数可达到0.997，证明仪器在一个数量级信号跨度范围内线性良好。

4.5 交叉污染评价
交叉污染率，即携带污染率主要反映了加样系统在吸取高低值不同的样品时由于吸附等引起的样品沾污导致测定结果偏离真值的情况。

为了真实的反映出交叉污染率，必须使用同一根加样针吸取样品，所以在配置有多组加样针的系统中应当禁止使用其他加样针，一只一只分别做测试。

在交
叉污染率评价方法选择上，参考比较了《YY/T 1155-2009全自动发光免疫分析仪》医药行业标准和《JJG 464-2011 半自动生化分析仪》检定规程中交叉污染率的评定方法。

《JJG 464-2011 半自动生化分析仪》的评价方法与《YY/T 1155-2009全自动发光免疫分析仪》中的评价方法相比简单易行，能够满足日常情况下仪器评价校准的用途，所以实验过程中对雅培i2000交叉污染率的评价按照《JJG 464-2011 半自动生化分析仪》中的评价方法进行。

经实验，雅培i2000从低到高交叉污染率为1%，从高到低交叉污染率为0.2%。

本文阐述了全自动化学发光免疫分析仪准确度、重复性、线性范围、交叉污染等指标的评价方法和选取理由，提出的方法可用于日常全自动免疫分析仪性能的评价和校准，有助于检测结果的准确和可比。

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