愈伤组织和试管苗的培养

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愈伤组织和
试管苗的培养
愈伤组织的培育一般来说,从接种外植体到消失愈伤组织,需
要经过2周时间。

2周之内就可以看到外植体上渐渐长出乳白色或黄白色的瘤状
愈伤组织。

首次培育愈伤组织时,恒温箱的门应当关闭,不必见光,由于
在无光条件下愈伤组织长得更快。

2周以后,由于培育基中的养分成分已接近耗尽,必需更换培
育基,进行继代培育。

愈伤组织的继代培育进行继代培育所用的培育基,和培育愈伤
组织所用的培育基相同。

在严格的无菌条件下(接种箱内)将愈伤组织连同原来的外植体,一起移到新的培育基上。

愈伤组织的继代培育,一代为20天。

假如延长培育时间,培育基中的养分物质会削减,外植体也会
分泌一些有毒物质,造成自身中毒。

20天以后,可以依据愈伤组织的大小,打算是连续进行继代培育,还是进行试管苗培育。

假如愈伤组织长到直径为1-15cm时,就可以进行试管苗培育,
否则还需要进行其次次继代培育。

在愈伤组织进行继代培育期间,可以将恒温箱的门打开,让愈
伤组织见光。

愈伤组织见光后,颜色可以转为绿色。

试管苗的培育当愈伤组织长到肯定大小后,可以更换培育基,
进行试管苗的培育。

试管苗的培育分为生芽培育和生根培育。

要想培育出一株完整的试管幼苗,必需先进行生芽培育,然后
进行生根培育。

假如挨次颠倒,先诱导生根,就不好诱导生芽了。

生芽大约需要4~6周的时间,而生根培育时,1周以后就可以
见到幼根了。

留意,试管苗应当进行见光培育。

下面列出继代培育和试管苗培育的培育基配方。

①继代培育和生芽培育的培育基配方是:MS培育基+6BA(质量
浓度为0.5-1.0 mg/L)+NAA(质量浓度为0.1-0.15 mg/L)。

即在1 L MS培育基中加入5-10 mL6BA和1-1.5 mL的NAA母液。

NAA协作6BA,可以促进不定芽的生长。

②生根培育的培育基配方是:MS培育基+NAA(质量浓度为0.1-
0.5 mg/L)。

即在1 L MS培育基中加入1-5 mL的NAA母液。

NAA起促进生根的作用。

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