动物细胞生物制药应用
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第11讲 动物细胞生物制药应用
新民周刊
2010,5.17-23.P76-9
2010.11.2:世界肺炎日(第2个)
全球每年约有160万人死于肺炎链球菌
疾病,平均每38秒1名5岁下儿童死于此
病,1100万儿童因肺炎住院。导致儿童
死亡的头号杀手,并高致残:智力低下
、癫痫(17%)、耳聋(27.7%)。
中国是10个肺炎发病率最高的国家之一
,1/4儿童携带病菌;死亡儿童该病占
46.8%。占西太平洋区的70%。
红霉素不敏感几乎达到100%,青霉素达
86%。
1983年23价肺炎链球菌夾膜多糖疫苗
PPV23诞生。2000年针对2岁以下儿童的
7价肺炎链球菌蛋白结合疫苗PPV7问世
。目前已经接种3亿剂,世界第一大单
个疫苗。
肺炎链球菌发现100年后,真正安全有
效的PPV7疫苗才大规模使用。制造工艺
非常复杂,约需要一年左右。只有爱尔
兰、美国两家工厂。
猪流感(Swine Flu),是猪群中发现的一种可引起地方性流行性感冒的正黏液病毒,属呼吸系统疾病,由甲型流感病毒(A型流感病毒)引发。
以往曾经发生人类感染猪流感,但未有发生人传人案例。2009年4月墨西哥猪流感造成数150多死亡事
件,并在多个国家蔓延。
病毒及病毒疾病
甲型H1N1
流感病毒
H、N的意思
世界卫生组织2009年4月30日建议使用“A/H1N1流感”的名称。
病毒根据抗原性的不同,可分为A、B、C三型。根据血凝素(Hemagglutinin,H)和神经氨酸酶(Neyramidinase,N)的抗原特性,将A型流感病毒分成不同的亚型。目前,有15种特异的H亚型和9种特异的N亚型。
病毒进入细胞:血凝素(H)能和细胞膜上的蛋白结合,在细胞上打开一个通道,使得病毒能进入细胞。
病毒要钻出宿主细胞:神经氨酸酶(N)通过“水解”的方式切断病毒和宿主细胞的最后联系,使病毒脱离宿主细胞。
首批36万支甲型H1N1流感病毒疫苗抵达新疆 2009-10-16
SARS病毒
SARS病毒属于冠状病毒
科,病毒粒子多呈圆形,有囊膜,外周有冠状排列的纤突,病毒直径在80-120nm之间。
感染病毒的细胞线粒体肿
胀,部分线粒体外膜或嵴溶解,病毒颗粒主要分布在胞浆的内质网池、胞浆空泡内和细胞外,多聚集成堆。
HIV病毒-艾滋病HIV是艾滋病病毒(human
immunodeficiency virus)的缩写。
“人类免疫缺陷病毒”。逆转录病毒,遗传信息存在于两个相同的RNA 单链模板中。艾滋病是1981年发现的。
生存于人的血液中并攻击人体免疫
系统。把人体免疫系统中最重要的
T4淋巴细胞作为攻击目标,大量吞噬、破坏T4淋巴细胞,从而使整个人体免疫系统遭到破坏,最终人体丧失对各种疾病的抵抗能力而导致死亡。
2009年12月3日,国家食品药品监督管理局在监督检查中发现,江苏延申和河北福尔生物制药股份有限公司的7个批次人用狂犬病疫苗存在质量问题。
2010.3.17
:山西疫苗事件
《中国经济时报》首席记者:王克勤
高温暴露疫苗
垄断二类疫苗
标签疫苗
原山西省疾控中心信息科科长:陈涛安
本节主要内容
1.杂交瘤技术生产单克隆抗体
2.病毒疫苗生产
本节关键问题
杂交瘤生产单克隆抗体的制备原理与技术流程
一杂交瘤技术生产单克隆抗体
问题回顾:什么是细胞融合?有什么优点或作用?
细胞融合(Cell fusion)是指使用人工方法使两个
或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。
体细胞杂交:克服有性不亲和性,实现远源遗传重
组,在育种方面意义重大。
杂交瘤细胞:具有两亲本特性,生物制药。
基础知识回顾
(一)免疫学基础
1抗原
进入动物体内对肌体的免疫系统产生刺激作用
的外源物质。
包括:蛋白质、多糖、核酸、病毒、细菌、各
种细胞等。
特点:外源性、结构性(分子具有表面具有稳
定的环状结构基团作为识别位点)、特异性(抗原与抗体的反应)。
2抗体P238
动物免疫系统分泌的中和或消除
抗原物质的影响的物质,存在于血清中,本质是免疫球蛋白(Immuniglobulin,Ig)。
互补性决定区(Complementarity
determining region,CDR)VH
和VL的三个高变区共同组成Ig的抗原结合部位(Antigen-binding site)。该部位形成一个与抗原决定簇互补的表面,决定抗体的多样性与特异性。
抗体产生的途径
免疫系统:包括体液免疫和细胞免疫,参与的细
胞包括
B淋巴细胞——发育成浆细胞,分泌抗体,参与
体液免疫,脾脏可以分泌。
T淋巴细胞——发育成吞噬细胞,直接参与细胞
免疫,经胸腺分泌。不能产生抗体,帮助B淋巴细胞产生抗体。
多克隆抗体与单克隆抗体
动物脾脏有上百万个B淋巴细胞,一个细胞
就是一个克隆,它针对抗原上的一个抗原决定族产生的抗体是单克隆抗体。
一种抗原通常具有多个不同的抗原决定族,
因此能刺激多个B淋巴细胞产生相应的单克隆抗体,因此血清中的抗体是针对不同抗原决定族的单克隆抗体混合物,称为多克隆抗体。