干扰实验ppt课件
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八、方法学评价
干扰试验的方法主要有“配对差异”试验及用 病人标本作偏差分析。所谓“配对差异”试验，即 将不同浓度的干扰物加入到实验标本中，然后分别 测定加与不加干扰物的标本，比较二者有无偏差， 并了解干扰物浓度与偏差的关系。
13
所谓用病人标本作偏差分析即选择病人标本， 如肝脏、肾脏或心脏疾病患者，用服用了某种可能 有干扰的药物的病人标本，以及含有高胆红素，高 血脂和血红蛋白的标本，用候选方法和参考方法同 时测定，将两方法的测定结果进行比较，以确定某 物质对候选方法是否有干扰及干扰程度。本次实验 所选用的方法为“配对差异”试验。
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2、按下表操作
加入物 （ml）
B
S
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
干基 干1 干2 干3
DDW 0.01
—
—
—
—
—
5.55mmol /糖标
—
0.01
—
—
—
—
各个样品 —
—
0.01 0.01 0.01 0.01
酶酚试剂 1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
混匀，置水浴箱37℃，15分钟，505nm空白管调 零，722型分光光度计分别测各管A值。
2．葡萄糖标准液（5.55mmol/L）
3．GOD-POD法测定葡萄糖试剂盒
4. 1g/L、2g/L 、3g/L维生素C溶液
6
五、操作步骤
1．干扰样品制备 基础样品：血清0.9ml+蒸馏水0.1ml。 干扰样品Ⅰ：血清0.9ml+1g/L维生素C溶液0.1ml 干扰样品Ⅱ：血清0.9ml+2g/L维生素C溶液0.1ml 干扰样品III：血清0.9ml+3g/L维生素C溶液0.1ml
测定浓度
基础样品 干扰样品Ⅰ 干扰样品Ⅱ 干扰样品Ⅲ
加入干扰 物浓度
干扰值
干扰率
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七、注意事项
1．干扰试验的对象有厂商研制的新产品；新建立的方 法；新引进的方法或试剂。
2．应做的主要干扰物：病人标本中常出现的黄疸、脂 血和溶血；某些药物如维生素C等；实验常用的抗 凝剂，防腐剂和稳定剂。
3．可疑干扰物浓度 加入可疑干扰物的浓度应明显高 于通常所见浓度的上限，有可能时应达到病理标本 的最高值。
8
六、结果计算
1．干扰物加入浓度计算：
干扰物加入浓度＝干扰物溶液浓度× 干扰物溶液量 ml 血清量(ml ) 干扰物溶液量 (ml )
2．干扰值计算：
干扰值(mmol/L)＝干扰样品测定浓度－基础样品测定浓度
3．干扰率计算：
干扰率＝
干扰值 基础样品浓度
×100%
9
4．计算结果请填入表内：
样品编号
11
4．无论是方法特异性差或是受干扰，都影响到测定 结果的正确性，影响的程度与与非分析物的量有 关，所以产生的误差都是恒定系统误差，常以偏 差Bias作为统计量。
5．由某些物质引起测定结果的偏差，足以影响临床 解释者谓之干扰，但各项测定的临床要求至今仍 未确定，建议将该分析方法批内测定值±1.96s作 为控制限度。
3
2、干扰实验原理：
选用维生素C做GOD-POD法测血糖的干扰试 验，维生素C可和GOD反应生成的H2O2发生反应， 使部分H2O2不能参与第二步POD催化的偶联反应， 从而降低显色强度，产生负的测定误差。
4
三、器材
微量移液器
计算器
三用水浴箱
722型可见光分光光度计
5
四、试剂
1．血清标本
含血糖6.7mmol/L的血清
15
14
这两种干扰试验各有优缺点，第一种方法的不 足之处是实验标本的介质可能与病理标本的介质不 尽致，病理标本中的干扰物可能不是原来的药物， 加入的干扰物可能与病理标本中的干扰物不完全相 同。第二种方法的不足之处是①病人通常用多种药 物，难以确定干扰物；②不是每种测定项目均有参 考方法，而且有的参考方法难以在临床实验室中开 展；③参考方法亦可能受某些物质的干扰。两种方 法同时使用，会起互补作用。
实验六：干扰试验
1
一、实验目的
1．掌握GOD-POD法测定血糖的原理及临床意义。 2．掌握干扰试验的原理和方法。
2
二、实验原理
1、GOD-POD法测血糖原理：
葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）能将葡萄 糖氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。后者在过氧化物 酶（peroxidase，POD）的作用下与色原性氧受体4-氨基 安替比林偶联酚缩合成红色醌类化合物，即Trinder反应。 该红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
八、方法学评价
干扰试验的方法主要有“配对差异”试验及用 病人标本作偏差分析。所谓“配对差异”试验，即 将不同浓度的干扰物加入到实验标本中，然后分别 测定加与不加干扰物的标本，比较二者有无偏差， 并了解干扰物浓度与偏差的关系。
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所谓用病人标本作偏差分析即选择病人标本， 如肝脏、肾脏或心脏疾病患者，用服用了某种可能 有干扰的药物的病人标本，以及含有高胆红素，高 血脂和血红蛋白的标本，用候选方法和参考方法同 时测定，将两方法的测定结果进行比较，以确定某 物质对候选方法是否有干扰及干扰程度。本次实验 所选用的方法为“配对差异”试验。
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2、按下表操作
加入物 （ml）
B
S
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
干基 干1 干2 干3
DDW 0.01
—
—
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5.55mmol /糖标
—
0.01
—
—
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各个样品 —
—
0.01 0.01 0.01 0.01
酶酚试剂 1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
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混匀，置水浴箱37℃，15分钟，505nm空白管调 零，722型分光光度计分别测各管A值。
2．葡萄糖标准液（5.55mmol/L）
3．GOD-POD法测定葡萄糖试剂盒
4. 1g/L、2g/L 、3g/L维生素C溶液
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五、操作步骤
1．干扰样品制备 基础样品：血清0.9ml+蒸馏水0.1ml。 干扰样品Ⅰ：血清0.9ml+1g/L维生素C溶液0.1ml 干扰样品Ⅱ：血清0.9ml+2g/L维生素C溶液0.1ml 干扰样品III：血清0.9ml+3g/L维生素C溶液0.1ml
测定浓度
基础样品 干扰样品Ⅰ 干扰样品Ⅱ 干扰样品Ⅲ
加入干扰 物浓度
干扰值
干扰率
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七、注意事项
1．干扰试验的对象有厂商研制的新产品；新建立的方 法；新引进的方法或试剂。
2．应做的主要干扰物：病人标本中常出现的黄疸、脂 血和溶血；某些药物如维生素C等；实验常用的抗 凝剂，防腐剂和稳定剂。
3．可疑干扰物浓度 加入可疑干扰物的浓度应明显高 于通常所见浓度的上限，有可能时应达到病理标本 的最高值。
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六、结果计算
1．干扰物加入浓度计算：
干扰物加入浓度＝干扰物溶液浓度× 干扰物溶液量 ml 血清量(ml ) 干扰物溶液量 (ml )
2．干扰值计算：
干扰值(mmol/L)＝干扰样品测定浓度－基础样品测定浓度
3．干扰率计算：
干扰率＝
干扰值 基础样品浓度
×100%
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4．计算结果请填入表内：
样品编号
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4．无论是方法特异性差或是受干扰，都影响到测定 结果的正确性，影响的程度与与非分析物的量有 关，所以产生的误差都是恒定系统误差，常以偏 差Bias作为统计量。
5．由某些物质引起测定结果的偏差，足以影响临床 解释者谓之干扰，但各项测定的临床要求至今仍 未确定，建议将该分析方法批内测定值±1.96s作 为控制限度。
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2、干扰实验原理：
选用维生素C做GOD-POD法测血糖的干扰试 验，维生素C可和GOD反应生成的H2O2发生反应， 使部分H2O2不能参与第二步POD催化的偶联反应， 从而降低显色强度，产生负的测定误差。
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三、器材
微量移液器
计算器
三用水浴箱
722型可见光分光光度计
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四、试剂
1．血清标本
含血糖6.7mmol/L的血清
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这两种干扰试验各有优缺点，第一种方法的不 足之处是实验标本的介质可能与病理标本的介质不 尽致，病理标本中的干扰物可能不是原来的药物， 加入的干扰物可能与病理标本中的干扰物不完全相 同。第二种方法的不足之处是①病人通常用多种药 物，难以确定干扰物；②不是每种测定项目均有参 考方法，而且有的参考方法难以在临床实验室中开 展；③参考方法亦可能受某些物质的干扰。两种方 法同时使用，会起互补作用。
实验六：干扰试验
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一、实验目的
1．掌握GOD-POD法测定血糖的原理及临床意义。 2．掌握干扰试验的原理和方法。
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二、实验原理
1、GOD-POD法测血糖原理：
葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）能将葡萄 糖氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。后者在过氧化物 酶（peroxidase，POD）的作用下与色原性氧受体4-氨基 安替比林偶联酚缩合成红色醌类化合物，即Trinder反应。 该红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。