库普弗细胞条件培养基对原代培养肝细胞的细胞毒性
库普弗细胞在肠源性内毒素血症肝损伤中的作用
６等 ） 脂 类炎症介质 、 Ｏ、 、 Ｎ 内皮素、 自由基、 活性氧等损伤肝 脏血管 内皮细胞 和肝 实质细胞 Ｌ 】 …。近年 来研 究发现 ， 多 在 种重症疾病状态下机 体都存 在 内毒 素 血症和 Ｋ Ｃ过 度激 活
的 问题 ， 制 或 增 强 Ｋ 功 能 可 减 轻 或 加 重 肝 脏 损 伤 和 抑 Ｃ
形成核 心， 可通过产生各种介质 ， 触发 、 重或调 节 炎症反应 加
和 趋 化 其他 炎症 细胞 ， 成 机 体 炎 症 损 伤 。 由 于 Ｋ 造 Ｃ的 特 殊
化在肠 源性 内毒素血 症 （ｎｅｔ ａ ｅｄ ｔ ｉ ｉ，Ｅ Ｍ） 病 ｉ ｓｎｌ ｎ ｏ ｘ ｍ ａ ＩＴ 发 ｔ ｉ ｏｅ
楚， 常包 括 内毒 素 识 别、 号 转 导 和 细胞 效 应 等 关键 环 信 节 ＬＪ １ 。内毒素 受体是 由 Ｔ ｌ样 受体 一 （ ｏｌｉｅｒ ｅｔｒ ３ ｏ ｌ ４ Ｔ ｌｌ ｃｐｏ ｋ ｅ ４，
Ｔ Ｒ ） 其辅助 分子 Ｃ １ Ｌ４及 Ｄ ４和 ＭＤ一２组 成 复 合 受 体 Ｃ １／ Ｄ４
的最强激活剂 ， 激 Ｋ 刺 Ｃ产 生 大 量 的 细 胞 因子 （ Ｎ ０、 Ｔ Ｆ一 【 Ｌ一 Ｉ
ｌ 肠源性内毒素 血症 的形成
大量 的研 究认 为 胃肠 常 为脓毒 症 （ ｅｓ ） ｓｐｉ 首发 打 击脏 ｓ 器， 如何 维护 胃肠屏障及功 能的完整 性 ， 长期 以来针 对脓 是 毒症 治疗 的核心 问题之一＿－］ 胃肠道屏 障 包括机械屏 障、 】２。 化 学屏 障、 免疫学屏障和生物屏 障。机体在遭 受到诸 如严重 创伤 、 烧伤、 染、 感 热射 病等 多种 应激损 伤 时， 可通过缺 血再
力。在 临床各 类危 重病早期 ， 各种应激因素作 用下机体 即可
库普弗细胞在酒精性肝病发病机制中的作用研究进展
库普弗细胞在酒精性肝病发病机制中的作用研究进展代雪飞;吕雄文;李俊【摘要】酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)是由于酒精的过量摄入导致的肝脏损害及其一系列病变,给人类健康带来极大的威胁,是我国目前面临的一大医学问题.库普弗细胞(kupffer cell,KC)是一种肝巨噬细胞,在ALD过程中能够在内毒素(LPS)、氧自由基等刺激下产生一些列细胞因子和炎症介质,介导肝细胞炎症反应,导致肝脏损伤.本文综述了国内外对于KC在ALD发病机制中的作用研究进展.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2010(014)001【总页数】4页(P1-4)【关键词】酒精性肝病;库普弗细胞;内毒素;氧自由基;细胞因子【作者】代雪飞;吕雄文;李俊【作者单位】安徽医科大学药学院,安徽,合肥,230032;安徽医科大学药学院,安徽,合肥,230032;安徽医科大学药学院,安徽,合肥,230032【正文语种】中文酒文化在我国已有几千年的历史,摄入适量的酒精能够起到保健养生的功效,但酗酒则会造成肝细胞损伤,严重危害身体健康。
酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)就是一种由于长期过度饮酒引起的肝脏疾病,世界上 1500万～2000万的酗酒人群中约有 10%～20%发生了不同程度的 ALD。
近年来 ALD在我国的发病及死亡趋势仅次于病毒性肝炎,成为第二大肝病[1]。
目前 ALD的发病机制尚未完全阐明,Savas等提出以氧应激和脂质过氧化为中心的“二次打击”(two hits)假说[2],认为首次打击形成脂肪肝,再次打击导致肝细胞炎症、坏死、纤维化。
库普弗细胞(kup ffer cell,KC)能够产生氧自由基并通过释放多种细胞因子和炎症介质引起肝细胞炎症反应,在 ALD形成中扮演重要角色,因此研究 KC在ALD发病机制中的作用从而调控 KC活性对于治疗 ALD有重要意义。
大鼠肝细胞与Kupffer细胞共同培养对两者功能和形态影响(医药类)
大鼠肝细胞与Kupffer细胞共同培养对两者功能和形态影响（医药类）目的观察大鼠肝实质细胞和枯否细胞共培养对其体外生长、形态和功能的影响方法采用原位两步ⅳ型胶原灌注法和高密度离心法分离大鼠肝实质细胞和枯否细胞。
在体外，肝实质细胞和枯否细胞以6∶1的比例共培养。
观察不同条件下肝细胞的存活时间和形态。
培养36 h 后，每隔24 h检测上清液中白蛋白、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平，用放射免疫法检测上清液中白细胞介素1 (IL 1)、白细胞介素6 (IL 6)和肿瘤坏死因子α(肿瘤坏死因子α)的含量。
结果分离培养组肝细胞生长增殖迅速，并向正常肝细胞进化。
肝细胞可以培养并存活15天。
共培养组肝细胞生长和增殖缓慢，可存活10天。
24、36、48和60 h时，共培养组上清液白蛋白水平低于单培养组(t = 2.551 ~ 3.139，P0.05)；24小时、36小时、48小时和60小时血清丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶水平高于单独培养组(T = 2.446 ~ 3.108，P0.05)；共培养组的枯否细胞维持il1、il6和tnfα的分泌功能，而单培养组则未检测到il1、il6和tnfα。
结论大鼠枯否细胞和肝实质细胞可以在合适的培养条件下共培养。
这两种细胞能保持良好的分泌功能，可用于实验研究。
[关键词]肝细胞；枯否细胞；共培养技术；白蛋白；细胞因子。
大鼠[摘要]目的观察生长情况。
和肝细胞功能的影响。
方法采用原位ⅳ型胶原酶两步灌注法和超临界流体低速离心法分别分离大鼠肝实质细胞(PHC)和枯否细胞。
PHC细胞和库普弗细胞按6∶1的比例进行体外共培养。
观察细胞在不同条件下的存活时间和形态。
培养上清中丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸氨基转移酶在24小时检测一次，36小时用放射免疫法测定白细胞介素1、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的浓度。
结果单独培养组肝细胞生长迅速，发育成正常肝细胞，可存活15天；对于共培养组，细胞生长和生成缓慢，存活10天。
【智慧测评】2019高考生物(人教版)总复习作业：选修1 第4讲 生物技术在其他方面的应用
选修①第四讲一、选择题1．下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验，叙述正确的是( )A．前者选择鸡血细胞作为材料较好，后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好B．样品预处理时，前者静置1天处理除去上清液；后者需要加入清水，反复低速短时间离心洗涤，至上清液无黄色C．在DNA粗提取实验中，往2 mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应该缓慢加入，直到出现黏稠物为止D．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等解析：鸡血细胞有细胞核，适于提取DNA；哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，适于提取血红蛋白。
提取血红蛋白的实验中，洗涤红细胞时，不能加清水，应该加入生理盐水，否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合，加大提取难度。
DNA初次析出时，加清水至黏稠物不再增加为止。
洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于血红蛋白的分离和纯化。
答案：A2．(2018·泰州质检)玫瑰精油素有“液体黄金”之称，下面是提取玫瑰精油的实验流程，相关分析不正确的是( )A．提取玫瑰精油的方法是水蒸气蒸馏法B．①和②操作要求分别加入氯化钠和无水硫酸钠C．③操作是萃取，以除去固体硫酸钠D．该实验流程也可用于从薄荷叶中提取薄荷油解析：加入氯化钠是为了增大盐水的浓度，利于玫瑰油与水的分层，加入无水硫酸钠是为了吸收精油中残留的水分。
③操作是利用过滤的方法除去固体硫酸钠。
答案：C3.右图为胡萝卜素的纸层析结果示意图，属于标准样品的层析点的是( )A．①②B．③④C．⑤⑥ D．③④⑤⑥解析：标准样品中的色素种类单一，在滤纸上扩散得速度相同，因此只出现一个色素圆点。
此类题目解题的方法是掌握纸层析法的原理，同时注意实验的注意事项，图中A、B、C、D四点为样品原点，层析的结果是色素在滤纸上向上扩散，样品中色素的种类和颜色都能反应在色素点中。
答案：B4．(2018·浙江高考理综)将无根的非洲菊幼苗转入无植物激素的培养基中，在适宜的温度和光照等条件下培养一段时间后，应出现的现象是( )解析：植物组织培养过程中，由外植体脱分化形成愈伤组织需要一定量的生长素和细胞分裂素，愈伤组织再分化形成根、芽的过程也需要一定浓度的生长素和细胞分裂素，且生长素和细胞分裂素的不同配比对形成根、芽的影响不同。
库普弗细胞功能异常在重症中暑中的作用
１ 肠源性 内毒素血症与重 症中暑
中暑 是 一 种 严 重威 胁人 民群 众 生 命 的 疾病 ， 现 为 中 心 表 体 温 升 高超 过 ４ ℃ 以 及 中枢 神 经 系统 功 能 障 碍 而 引起 谵 ０ 妄、 惊厥 或 者 昏迷 等 症 状 。 临床 上 实施 积 极 的 降 温和 脏 器 支
和肝 实质 细 胞 ＿ 。 近 年 研 究发 现 ， 多 种 重 症 疾 病 状 态 下 ｊ 在
而一旦发展 为重症 中暑合 并 多 器官功 能障碍 综合征 （ ｕｔ ｍ ｌ ｉ ｐｅｏｇｎｄ ｓ ｎｔ ｎｓｎ ｒｍ ， Ｄ ） 病死 率则可达到 ４ ％ ｉ ｒａ ｙｆ ｃ ｏ ｄｏ ｅ ＭＯ Ｓ ， ｕ ｉ ｙ ０
的启动 因素． 肠源性 内毒素 需经 门脉 系统 回流到肝 脏 ， 扩散
至全 身形成 内毒 素血症 。生理情况下 ， 由于宿主防御机制 未受损 ， 即使肠道 细菌过度 生长或 肠黏 膜屏 障破 坏 ， 也不会 发生 茵群移位 和全身炎症反应 …。 由于 胃肠道和肝 脏之 间
种继发性损害 因素对肝脏 的再 次损伤 可能更为重要 ， 而肠 源
・
２６ ０ ６・
广东 医学
２１ ０ １年 ８月 第 ３ ２卷第 ｌ ５期
Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ｄｃｌ ｏ ｒ ａ Ａ ｇ ０ １ ｏ．３ ，Ｎ ．１ ａ ｇ ｏ ｇＭｅ ｉ ｕ ｎ ｌ ｕ ．２ １ ，Ｖ １ ２ ｏ ５ ａＪ
库 普 弗 细胞 功 能 异 常 在 重 症 中暑 中 的作 用
ｄｏ ｅ ＳＲ ） 引 发 ＭＯ Ｓ的过 程 Ｊ 而 这 种 ＳＲ ｒｍ ，Ｉ Ｓ ， Ｄ 。 Ｉ Ｓ反 应 被 认
为是肠道所启 动： 应激打 击下， 体肠黏膜屏 障遭到破 坏 ， 热 机
肝脏毒理学试验课件
25ml
待用
待肝脏由红变白，完 整取下肝脏称重，生 理盐水清洗，取0.2g ，1.8ml生理盐水匀
浆
26
肝脏毒理学----- 概 述
肝脏毒理学：利用毒理学的基本原理和方法，研究外源化学 物对肝脏的损害作用及其机制的学科。
化学性肝损害：化学物引起的各种急性和慢性肝损害。
概述
肝脏毒理学：利用毒理学的基本原理和方法，研究外源因子 对肝脏的损害作用及其机制的学科。
化学性肝损伤：化学物引起的各种急性和慢性肝损伤
。 急性暴露：脂质蓄积、 坏死、 肝胆功能障碍
慢性暴露： 纤维化、 肝硬化 瘤样改变
School of Public Health 1
解剖位置
School of Public Health 2
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组 织 结 构
人正常肝细胞，HE，低倍
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肝的基本单位
肝小叶是肝结构和功能的基本单位，呈多面棱柱状。在肝小叶 中央有 一纵行中央静脉。
肝细胞以中央静脉为中心，向四周略呈放射状排列，形成肝细 胞素（板）。
肝细胞素之间是肝血窦。肝血窦腔内有库普弗细胞，具有吞噬 功能。
相邻两肝细胞之间有胆小管。胆小管可将肝细胞分泌的胆汁汇
白 3. 物质和能量代谢 4. 解毒和吞噬防御 5. 造血
School of Public Health 35
第二节 肝对外源化学物的毒性反应与机制
根据损伤发生的快慢
1
2
急性肝损害：
肝细胞坏死、 脂肪变性、 胆汁淤积
慢性肝损害：
肝纤维化、 肝硬化、 癌变
School of Public Health 36
库普弗细胞的研究进展
第４ｌ卷第２期２０１０年４月解剖学报ＡＣＴＡＡＮＡＴＯＭＩＣＡＳＩＮＩＣＡＶ０１．４１，Ｎｏ．２Ａｐｒ．２０１０‘３３１。
库普弗细胞的研究进展张强伟１’２徐存拴１’２。
（１．河南师范大学生命科学学院；２．河南省－科技部共建细胞分化调控国家重点实验室培育基地，河南新乡４５３００７）［摘要］库普弗细胞（ＫＣｓ）是肝脏的非实质细胞。
具有分泌细胞因子及吞噬、免疫等功能，亦与多种肝脏疾病，如肝损伤、肝纤维化、肝硬化等密切相关。
本文简要总结了近几年有关库普弗细胞的生理功能及与肝病关系等方面的研究进展。
［关键词】库普弗细胞；细胞因子［中图分类号】Ｑ２８［文献标志码］Ａ［ＤＯＩ］１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．０５２９—１３５６．２０１０．０２．０３５ＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎＫｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌｓＺＨＡＮＧＱｉａｎｇ．ｗｅｉ。
・２．ＸＵＣｕｒｔ．ｓｈｕａｎｌｆ２。
（Ｊ．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｅ如ｔｗｅ，胁’ｉｌａｒｔＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；２．研ＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＣｅｌｌＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎＲｅｇｕｌａｔｉｏｎ，肌’ｌｌａｌｌＸｉｎｘｉａｎｇ４５３００７，Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｋｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌｉｓａｍｅｍｂｅｒｏｆｔｈｅｌｉｖｅｒｎｏｎｐａｒｅｎｅｈｙｍａｌｃｅｌｌｓ，ｉｔｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｓｉｎａｖａｒｉｅｔｙｏｆｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｔｈｒｏｕｇｈｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓ，ｓｅｃｒｅｔｉｎｇｃｙｔｏｋｉｎｅｓ，ａｎｔｉｇｅｎ—ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ，ａｎｄｉｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏａｖａｒｉｅｔｙｏｆｄｉｓｅａｓｅｓｓｕｃｈａｓｌｉｖｅｒｃａｎｃｅｒ，ｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ，ｌｉｖｅｒｉｎｊｕｒｙ．Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｐｒｅｓｅｎｔｓｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｋｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌｓａｎｄｉｔｓｒｅｌａｔｉｏｎｓｗｉｔｈｌｉｖｅｒ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ＬｉｖｅｒＫｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌ；Ｃｙｔｏｋｉｎｅ自１８７６年发现库普弗细胞（ｋｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌｓ，ＫＣｓ）以来，至今已有１３０多年。
大鼠肝细胞与Kupffer细胞共同培养对两者功能和形态影响
大鼠肝细胞与Kupffer细胞共同培养对两者功能和形态影响作者：寇晨光曹成波燕晓雯罗兵周岩冰【摘要】目的观察大鼠肝实质细胞与Kupffer细胞体外共同培养时对两者生长、形态及功能的影响。
方法采用原位二步Ⅳ型胶原灌注法、Percoll液密度梯度离心法分离Wistar大鼠肝实质细胞与Kupffer细胞;体外将肝实质细胞与Kupffer细胞按6∶1比例共同培养。
观察不同情况下肝细胞生存时间和形态，每隔24 h检测培养上清液中清蛋白和谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的水平，并在培养36 h用放免法检测上清液中白细胞介素1(IL1)、白细胞介素6(IL6)、肿瘤坏死因子α (TNFα)含量。
结果单独培养组肝细胞的生长、增殖迅速，并向正常肝细胞的形态演变，肝细胞可培养存活至15 d;共同培养组肝细胞生长增殖缓慢，细胞可培养存活至10 d。
共同培养组上清液中清蛋白水平在24、36、48、60 h比单独培养组低(t=2.551～ 3.139，P<0.05);ALT、AST水平在24、36、48、60 h 比单独培养组高(t=2.446～3.108，P<0.05);共同培养组Kupffer 细胞保持IL1、IL6、TNFα分泌功能，而单独培养组未检测到IL1、IL6、TNFα。
结论大鼠Kupffer细胞和肝实质细胞在适宜的培养条件下可进行共同培养，二者可以保持良好的分泌功能，可用于实验研究。
【关键词】肝细胞;枯否细胞;共同培养技术;清蛋白类;细胞因子类;大鼠[ABSTRACT] Objective To observe the growth, morphology, and function of hepatocytes when cultured in vitro with Kupffer cells in rats. Methods In situ Ⅳcollagenase two step perfusion method and low speed gradient centrifugtion by percoll fluid were used to isolate parenchymal hepatic cells (PHC) and Kupffer cells in Wistar rat, respectively. Cocultivation of PHC and Kupffer cells was done in vitro according to 6∶1 ratio. The live time and form of the cells under different circumstances were observed. ALT and AST levels in culture supernatant were detected at 24hour interval, and the concentration of IL 1, IL 6 and TNFα measured by radioimmunoassay at 36 hours. Results In solitary culture group, the hepatocytes grew quickly and deve loped to the form of normal liver cells, which could survive 15 days; for those in co culture group, the cells grew and generated slowly, which survived 10 days. The levels of albumen in supernate of co culture group, at 24 h, 36 h, 48 h and 60 h, were lower than that in solitary culture group(t=2.551-3.139,P<0.05), and that of ALT and AST, at the same time points as above, were higher (t=2.446-3.108,P<0.05). In co culture group, the secretory function of IL1, IL6, and TNFα was retained, and in solitary culture group, no IL1, IL6, and TNFαwere detected. Conclusion Hepatocytes and Kupffer cells of rat can be cultured together under a suitable condition, and the favourable secretory function of the cells be maintained for empirical study.[KEY WORDS] hepatocyte; Kupffer cell; coculture technique;albumins; cytokines; rats肝细胞分离、培养是研究肝脏和肝细胞的良好方法。
临床执业医师消化系统-试卷39
临床执业医师（消化系统）-试卷39（总分：64.00，做题时间：90分钟）一、A1型题（总题数：15,分数：30.00）1.原发性肝癌定位诊断下述哪个检查最敏感（分数：2.00）A.X线肝血管造影B.CT肝动脉碘油造影VC.CT肝动脉造影D.放射性核素肝显像E.X线门静脉造影解析：解析：肝动脉碘油造影较肝动脉造影对于肝癌的诊断更敏感。
2.鉴别水肿型和出血坏死型胰腺炎最有价值的是（分数：2.00）A.上腹剧痛向左背腰部放射B.黄疸C.发热D.Cullen 征VE.呕吐解析：解析：坏死型胰腺炎有Grey. Turner征和Cullen征。
3.急性重症胰腺炎的临床表现一般不包括（分数：2.00）A.休克B.呼吸衰竭C.发热D.腹泻VE.消化道出血解析：解析：急性重症胰腺炎的临床表现为腹痛、黄疸、休克、高热、呼吸异常,神志改变,消化道出血、腹水、皮肤黏膜出血、脐周及腰部皮肤改变,部分病人的脐周或腰部皮肤可出现蓝紫色斑,提示腹腔内有出血坏死及血性腹水。
脐周出现蓝紫色斑者称为Cullen征，腰部皮肤出现蓝紫色斑者则称为Grey-Tumer 征。
4.急性胃炎的临床表现不包括（分数：2.00）A.黄疸VB.消化道出血C.呕吐D.上腹痛E.恶心解析：解析：急性胃炎的临床表现包括：①上腹痛，正中偏左或脐周压痛，呈阵发性加重或持续性钝痛，伴腹部饱胀、不适，少数病人出现剧痛；②恶心、呕吐，呕吐物为未消化的食物，吐后感觉舒服，也有的病人直至呕吐出黄色胆汁或胃酸；③腹泻，伴发肠炎者出现腹泻，随胃部症状好转而停止，可为稀便和水样便；④脱水，由于反复呕吐和腹泻，失水过多引起，皮肤弹性差，眼球下陷，口渴、尿少等症状，严重者血压下降，四肢发凉；⑤呕血与便血，少数病人呕吐物中带血丝或呈咖啡色，大便发黑或大便潜血试验阳性。
说明胃黏膜有出血情况。
5.肝硬化食管静脉曲张大出血后,可能出现的表现不包括（分数：2.00）A.血尿素氮增高B.脾脏缩小C.腹水减少VD.意识障碍E.少尿解析：6.GU与溃疡型胃癌x线表现最主要的区别是（分数：2.00）A.胃壁软硬程度B.黏膜皱襞中断C.周围有无结节状D.溃疡直径是否大于2. 5cmE.溃疡是否位于胃轮廓之内V解析：解析：X线钡餐检查良性溃疡时，龛影直径＜2. 5cm,壁光滑，位于胃腔轮廓之外，龛影周围壁柔软，可呈现聚合征。
免疫学与微生物学方法与技术智慧树知到答案章节测试2023年浙江中医药大学
第一章测试1.正常人血清中含量最高的免疫球蛋白是答案是（）A:IgAB:IgDC:IgGD:IgM答案:C2.提示新近发生感染，可用于感染的早期诊断的抗体是（）A:IgDB:IgMC:IgAD:IgG答案:B3.抗体与抗原特异性结合的部位是（）A:恒定区B:轻链C:骨架区D:高变区答案:D4.单克隆抗体的特点是（）A:特异性不高B:不易大量制备C:只识别某一特定抗原表位D:易发生交叉反应答案:C5.在单克隆抗体制备过程中，聚乙二醇的作用是（）。
A:纯化抗体B:产生抗体C:促进细胞融合D:筛选杂交瘤细胞株答案:C第二章测试1.抗原-抗体反应形成明显沉淀物的最佳条件为（）。
A:抗原显著多于抗体B:抗原略多于抗体C:抗原抗体比例合适D:抗体略多于抗原答案:C2.抗原抗体结合力中作用最大的是（）。
A:范德华引力B:氢键C:疏水作用力D:静电引力答案:C3.根据抗原抗体反应的特点,正确的说法是（）。
A:解离后的抗体生物学活性改变B:抗体与抗原结合后仍可与其他抗原结合C:抗原抗体结合牢固,不易受环境因素影响D:解离后抗原的生物学活性不变答案:D4.以下因素中,不影响免疫凝集反应发生的是（）。
A:温度B:湿度C:酸碱度D:离子强度答案:B5.不能用于可溶性抗原检测的是（）。
A:反向间接凝集试验B:直接凝集试验C:间接凝集试验D:间接凝集抑制试验答案:B第三章测试1.患者,62岁。
近一年来经常感冒，自觉乏力，活动后加剧，消瘦明显，常有口腔溃疡、白斑。
拟作HIV抗原检测,可选择（）A:细胞毒试验B:ELISAC:溶血空斑试验D:MTT比色法答案:B2.2检测可溶性抗原可采用（）A:补体依赖细胞毒试验B:ELISAC:直接凝集反应D:免疫组化技术答案:B3.测定淋巴细胞功能可采用（）A:沉淀反应B:凝集反应C:免疫酶技术D:淋巴细胞转化试验答案:D4.T淋巴细胞能形成E花环是因为细胞膜表面有（）A:CD3B:CD4C:CD2D:CD8答案:C5.不能用于可溶性抗原检测的是（）A:间接凝集抑制试验B:直接凝集试验C:间接凝集试验D:反向间接凝集试验答案:B第四章测试1.定居于神经组织巨噬细胞称为（）A:小胶质细胞B:破骨细胞C:肺泡巨噬细胞D:库普弗细胞答案:A2.以下不是选择鸡红细胞检测巨噬细胞的吞噬功能的原因（）A:清晰可见的细胞核B:无细胞核C:梭形D:个体大答案:B3.M1型巨噬细胞作用为（）A:抗感染B:促进组织修复C:抗炎D:促肿瘤答案:A4.树突状细胞起源于体内的多能造血干细胞。
西南大学网络教育2020年春1176]《药物毒理学》作业标准答案
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1、哌醋甲酯可引起肝细胞的. E. 广泛性坏死.灶状坏死.炎症.带状坏死2、理化或生物物质对机体产生的任何有毒作用指.毒素.有毒.毒物.毒性3、肾上腺皮质激素对肺的毒性作用可导致.肺栓塞.肺癌.肺炎.肺纤维化4、氟烷可导致.类系统性红斑狼疮.免疫性溶血.免疫性肝炎.荨麻疹5、“氧化性”药物非那西汀可引起.贫血.高铁血红蛋白血症.氧化性溶血.白血病6、短期用药后常见的肝毒性是.肝癌.肝硬化.脂肪变性.肝炎7、药物对肝脏毒性作用的主要靶点是.肝细胞.库普弗细胞.内皮细胞.星行细胞8、药物对肝脏毒性作用的最初靶位是.区带2.区带1.区带3.中央静脉9、研究药物过敏性最理想的动物是.豚鼠.小鼠.家兔.大鼠10、典型的自身免疫综合征是.免疫性肝炎.免疫性溶血.荨麻疹.类系统性红斑狼疮11、药物对肾脏最常见的毒性反应是.急性肾功能衰竭.慢性肾功能衰竭.急性肾小球肾炎.慢性肾小球肾炎12、甲基多巴免疫系统的靶位是.红细胞.白细胞和血小板.红细胞和血小板.白细胞13、肾脏毒性最大的氨基苷类抗生素是.链霉素.庆大霉素.卡那霉素.新霉素14、链霉素和异烟肼合用治疗结核病时可导致.过敏性肺炎.肺纤维化.红斑狼疮样肺炎.间质性肺炎15、肝脏毒性的早期事件为.内质网肿胀.线粒体形态改变.质膜起泡.溶酶体增多16、碳酸锂可使甲状腺激素的释放.增加.不变.减少.增加或不变17、氯丙嗪对垂体的毒性作用可导致生长素分泌.减少.不变.增加.减少或不变18、毒物最有效的排泄器官是.肺脏.肾脏.乳腺.肝脏19、乙醇对肝脏的毒性作用主要可引起. C. 大泡性脂肪肝.肝炎.肝硬化.肝癌20、有机磷酸酯类对神经系统的毒性作用主要损害.髓鞘.神经元B.CD..神经递质.轴索21、氯丙嗪对垂体的毒性作用可导致催乳素分泌.增加.减少.不变.增加或不变22、链脲佐菌素可导致.糖尿病.睾丸萎缩.甲状腺增生.肾上腺萎缩23、有机磷酸酯类对神经系统的毒性作用可导致.能量需求障碍.返死式神经病.神经元损害.神经递质释放减少24、对乙酰氨基酚引起肝坏死，仅特征性地损害.区带2.中央静脉.区带1.区带325、使用对乙酰氨基酚3年以上，可导致不可逆的.慢性肾功能衰竭.镇痛剂肾病.肾间质性肾炎.急性肾小球肾炎26、气体产生毒性作用的吸收部位是.皮下.肺泡.皮肤.胃肠道27、糖皮质激素对肾上腺的毒性作用导致肾上腺.嗜铬细胞瘤.萎缩.增生.坏死28、对乙酰氨基酚产生肾毒性的原因主要通过.γ-氨基丁酸转移酶.谷胱甘肽S-转移酶.细胞色素P450氧化酶.碱性磷酸酶29、青霉素的毒性作用主要是通过. F. Ⅳ型变态反应.Ⅳ型变态反应.Ⅳ型变态反应。
库普弗细胞在内毒素血症致肝损伤中的作用
国 际 消 化病 杂 志
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３ ・ ５１
库 普 弗 细胞 在 内毒 素血 症 致肝 损 伤 中 的作 用
重庆 医科大 学 附属第 二 医院肝 胆外 科 （０ ０ ０ 罗 玉政 综述 宋林 学 ４０１） 龚 建平 审校
摘 要 内毒 素血 症 是导 致肝 损伤 的一 个 重要 因素 。近 年 来研 究证 实 ， 内毒 素 血 症 所 致肝 损 伤 与 内毒 素
肝 脏 的清 除能力 ， Ｐ Ｌ Ｓ就 进 入 体循 环而 形成 内毒 素
血症 。
（ ＭＡＰ 途 径 ， Ｋ） 顺序 激活 了一 系列转 录因子 ， ＮＦ 如 —
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小鼠肝Kupffer细胞使用说明
小鼠肝Kupffer细胞小鼠肝Kupffer细胞产品说明：为使客户能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠肝Kupffer细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠肝Kupffer细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
注意事项：1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
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5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
小鼠肝Kupffer细胞产品简介：产品名称：小鼠肝 Kupffer 细胞（Mouse Hepatic Kupffer Cells）组织来源：小鼠肝组织产品规格：5×105cells/25cm2 培养瓶小鼠肝Kupffer细胞细胞简介：小鼠肝 Kupffer 细胞分离自小鼠肝脏组织，细胞呈圆形或多角形。
Kupffer 细胞是位于肝窦内表面的吞噬细胞，能够清除血液中的外来抗原、抗原－抗体复合物和细胞碎片等物质。
Kupffer 细胞是全身单核-吞噬细胞系统的重要组成部分，也是肝脏防御系统主要成员，在全身和肝脏疾病发生发展中起到重要作用。
kupffer细胞培养注意事项
kupffer细胞培养注意事项1. 注重无菌操作：在进行kupffer细胞的培养过程中，保持实验环境的无菌状态是非常重要的。
使用无菌操作技术，如穿戴无菌手套、操作在无菌工作台下进行，以避免细菌和真菌的污染。
2. 选择合适的培养基和补充物：选择适合kupffer细胞生长的培养基，并根据实验需求添加适当的补充物，如生长因子、血清等。
培养基和补充物的选择将直接影响到细胞的生长和功能。
3. 细胞的处理和传代：处理kupffer细胞时，要避免对细胞造成过度机械和化学刺激，以免影响细胞的功能。
同时，在进行传代时，注意细胞的浓度和细胞悬液的稀释比例，以确保细胞的正常生长和传代效果。
4. 适当的温度和湿度：细胞培养的温度和湿度对细胞的生长和代谢具有重要影响。
维持适当的培养温度（一般为37°C）和湿度（通过培养皿内添加适量的水）有助于提高细胞的生存率和生长速度。
5. 注意培养皿的处理：培养皿的表面应保持洁净，避免污染细胞培养。
在进行细胞移植或处理时，避免过度摇动或振动培养皿，以减少细胞的机械损伤和静电影响。
6. 定期检测细胞污染：在培养过程中定期检测细胞的纯度和污染情况，避免细菌、真菌或其他污染物的存在。
使用合适的方法如细胞培养物中添加抗生素等，以确保细胞培养的质量和纯度。
7. 注意培养液的更换和配制：定期更换培养液，并遵循合适的配制方法和储存条件。
避免使用过期的培养液和补充物，以免影响细胞培养。
8. 增加培养时间的控制：根据实验需要，控制kupffer细胞的培养时间。
过长的培养时间可能会引起细胞的老化或功能的改变，因此及时收取和处理细胞培养物是重要的。
9. 严格遵守实验守则：在进行任何实验操作之前，首先熟悉并遵守实验守则和操作规程。
不得盲目进行实验操作，保证自己和他人的安全。
注意：本回答仅供参考，具体操作应根据实验室和研究要求进行，并按照相应实验守则和机构的规定进行操作。
高考生物(人教版)总复习作业：选修1 第4讲 生物技术在其他方面的应用
1选修① 第四讲一、选择题1．下列关于DNA 的粗提取实验和血红蛋白的提取实验，叙述正确的是( )A ．前者选择鸡血细胞作为材料较好，后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好B ．样品预处理时，前者静置1天处理除去上清液；后者需要加入清水，反复低速短时间离心洗涤，至上清液无黄色C ．在DNA 粗提取实验中，往2 mol/L 氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA 时，应该缓慢加入，直到出现黏稠物为止D ．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等解析：鸡血细胞有细胞核，适于提取DNA ；哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，适于提取血红蛋白。
提取血红蛋白的实验中，洗涤红细胞时，不能加清水，应该加入生理盐水，否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合，加大提取难度。
DNA 初次析出时，加清水至黏稠物不再增加为止。
洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于血红蛋白的分离和纯化。
答案：A2．(2013·泰州质检)玫瑰精油素有“液体黄金”之称，下面是提取玫瑰精油的实验流程，相关分析不正确的是()A ．提取玫瑰精油的方法是水蒸气蒸馏法B ．①和②操作要求分别加入氯化钠和无水硫酸钠C ．③操作是萃取，以除去固体硫酸钠D ．该实验流程也可用于从薄荷叶中提取薄荷油解析：加入氯化钠是为了增大盐水的浓度，利于玫瑰油与水的分层，加入无水硫酸钠是为了吸收精油中残留的水分。
③操作是利用过滤的方法除去固体硫酸钠。
答案：C3.右图为胡萝卜素的纸层析结果示意图，属于标准样品的层析点的是( )A ．①②B ．③④C ．⑤⑥D ．③④⑤⑥2解析：标准样品中的色素种类单一，在滤纸上扩散得速度相同，因此只出现一个色素圆点。
此类题目解题的方法是掌握纸层析法的原理，同时注意实验的注意事项，图中A 、B 、C 、D 四点为样品原点，层析的结果是色素在滤纸上向上扩散，样品中色素的种类和颜色都能反应在色素点中。
答案：B4．(2011·浙江高考理综)将无根的非洲菊幼苗转入无植物激素的培养基中，在适宜的温度和光照等条件下培养一段时间后，应出现的现象是()解析：植物组织培养过程中，由外植体脱分化形成愈伤组织需要一定量的生长素和细胞分裂素，愈伤组织再分化形成根、芽的过程也需要一定浓度的生长素和细胞分裂素，且生长素和细胞分裂素的不同配比对形成根、芽的影响不同。
一种简便经济的肝库普弗细胞分离方法
一种简便经济的肝库普弗细胞分离方法周琎;詹志林;张磊;雷海鸣;张蕴春;卞建民【期刊名称】《山西医药杂志》【年(卷),期】2008(037)011【摘要】目的介绍一种简易、经济、高效的肝库普弗细胞分离方法,为研究库普弗细胞在肝病及全身性疾病中的作用提供细胞模型.方法参照国内外文献方法加以改良,采用前灌流液在体灌流肝脏后,再用Ⅳ胶原酶离体灌流消化,Percoll分离液行密度梯度离心分离库普弗细胞,贴壁培养;锥虫蓝测定细胞活度,并用荧光显微镜、免疫组织化学以及吞噬功能实验行细胞纯度鉴定.结果肝库普弗细胞的获得量为(5～10)×107/肝,细胞活度为90%以上,细胞纯度95%以上.贴壁后细胞呈典型的星型或三角型,免疫组织化学染色显示CD163(ED2)阳性,显微镜下可见细胞质内被吞噬的碳素颗粒.结论本方法简便、高效,不需要特殊的设备,便于推广使用;获得的细胞活度和纯度较高,可用于库普弗细胞进一步的实验研究.【总页数】4页(P504-507)【作者】周琎;詹志林;张磊;雷海鸣;张蕴春;卞建民【作者单位】南京医科大学附属南京第一医院,210006;南京医科大学附属南京第一医院,210006;南京医科大学附属南京第一医院,210006;南京医科大学附属南京第一医院,210006;南京医科大学附属南京第一医院,210006;南京医科大学附属南京第一医院,210006【正文语种】中文【相关文献】1.一种简便又经济的肝脏贮脂细胞分离方法 [J], 张艺军;杨希山;吴平生;刘树人2.一种简便经济的肝星状细胞分离方法 [J], 吕晓霞;许伟华;孙向阳3.一种改进的简便经济的大鼠胰腺腺泡细胞分离提纯方法 [J], 王连才;马清涌;陈香丽4.一种简便、经济的肝星状细胞分离方法 [J], 许伟华;吕晓霞;朱菊人5.一种高效、经济的肝星状细胞分离方法 [J], 吕晓霞;许伟华;朱菊人因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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（ Ｋ Ｃ Ｃ Ｍ） 并作用于肝细胞 ， 检 测 肝细 胞 培 养 基 丙 氨 酸 转 氨 酶 （ Ａ ） 、 天 门冬氨酸转 氨酶 （ Ａ Ｓ Ｔ ） 、 乳酸脱 氢酶（ Ｌ Ｄ Ｈ ） 的含量 ，
四 甲基 偶 氮 唑 蓝 （ Ｍ １ Ｔ ） 法检测 Ｋ Ｃ Ｃ Ｍ 对 大 鼠原 代 肝 细 胞 活 性 的影 响 。 结 果 Ｋ Ｃ Ｃ Ｍ作 用 于 肝 细 胞 ２ ｈ后 ， 肝 细 胞 培 养 基
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姚 景宏 贺 永文 揭盛 华
【 摘要 】 目的 探讨 内毒素血 症时库普弗细 胞激 活对 肝细胞损 伤的作用机制 。方 法 用链霉 蛋白酶 和胶 原酶原 位
灌流 ， Ｐ ｅ ｒ ｃ ｏ ｌ ｌ 密度梯度离心分离 、 纯化 ｓ Ｄ大 鼠肝 细 胞 和 库 普 弗 细 胞 ， 制 备 内毒 的条 件 培 养 基
Ｙ Ａ Ｏ Ｊ ｉ ｎ ｇ ｈ ｏ ｎ ｇ， ＨＥ
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中Ａ Ｌ Ｔ 、 Ａ Ｓ Ｔ及 Ｌ Ｄ Ｈ含 量 均 明显 升 高 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） ， 在２ ～４ ｈ内 随 时 间 延 长 Ａ Ｌ Ｔ 、 Ａ Ｓ Ｔ及 Ｌ Ｄ Ｈ含 量 均 逐 渐 增 加 ， 呈 明显 的 时
间． 效应关系 ； Ｍ １ Ｔ结 果 显 示 ， Ｋ Ｃ Ｃ Ｍ作用后 １ ２ ｈ 、 ２ ４ ｈ时 间点 对 肝细 胞 具 有 明 显损 伤作 用 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） 。 结 论 内毒 素 诱 导 库 普 弗 细 胞 释 放 的 可 溶 性 因子 作 用 一 定 时 间 后 可 直 接 对 肝 细 胞 造 成 损 伤 。
维普资讯
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２５ ４ ・
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ，Ａ ｕ ｇ ２０ ０ ７， Ｖ ｏ １ １ ２， Ｎ ｏ． ４
．
・
论 著 ・
库 普弗 细胞 条 件 培 养 基对 原代 培 养 肝 细 胞 的细胞 毒性
【 关键词】 内毒素 ；库普弗细胞 ； 肝细胞
Ｔ ｈ ｅ ｃ ｙ ｔ ｏ ｔ ｏ ｘ ｉ ｃ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ Ｋｕ ｐ ｆ ｅ ｒ ｃ ｅ ｌ ｌ － ｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｅ ｄ ｍｅ ｄ ｉ ｕ ｍ ｏ ｎ ｐ ｒ ｉ ｍａ ｒ ｙ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｄ ｒ ａ ｔ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｃ ｙ ｔ ｅ ｓ
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