麦氏比浊法确定细菌浓度的原理和操作步骤
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麦氏比浊法确定细菌浓度的原理和操作步骤
以麦氏比浊法确定细菌浓度的原理和操作步骤为标题
一、原理
麦氏比浊法是一种常用的确定细菌浓度的方法,其原理是利用细菌悬浮液对光的散射作用,通过测量光的透射度来确定细菌的浓度。细菌悬浮液越浓,对光的散射就越强,透射度就越低。
二、操作步骤
1. 准备工作
a. 准备所需材料:细菌悬浮液、比色皿、比色计、移液器、离心机等。
b. 将比色皿用去离子水清洗干净,确保无杂质。
c. 打开比色计,进行预热,使其达到工作温度。
2. 准备细菌悬浮液
a. 选择需要测定浓度的细菌液体培养物。
b. 用移液器取适量的细菌液体培养物,加入一定量的去离子水,制备一系列不同浓度的细菌悬浮液。
c. 将细菌悬浮液进行均匀摇匀,确保细菌分布均匀。
3. 开始测定
a. 将比色皿放入比色计中,调整为透射模式。
b. 在比色皿中加入一定量的去离子水作为空白对照组。
c. 将细菌悬浮液加入另一个比色皿中,确保液面平整,避免气泡产生。
d. 将比色皿放入比色计,调整为透射模式,记录下透射度数值。
e. 重复上述步骤,分别测定不同浓度的细菌悬浮液的透射度。
4. 统计数据
a. 将测得的透射度数值记录下来,建立细菌浓度与透射度之间的对应关系。
b. 绘制透射度-浓度曲线图,根据图像确定未知浓度细菌悬浮液的浓度。
5. 计算浓度
a. 根据绘制的透射度-浓度曲线图,找到未知浓度细菌悬浮液对应的透射度数值。
b. 根据透射度和对应关系,计算出未知浓度细菌悬浮液的浓度。
6. 结果分析
a. 根据计算结果,得到未知浓度细菌悬浮液的浓度。
b. 将测定结果与实际浓度进行比较,评估测定的准确性和可靠性。
总结:
通过麦氏比浊法可以快速、简便地测定细菌悬浮液的浓度。其原理是利用细菌悬浮液对光的散射作用,通过测量光的透射度来确定细
菌的浓度。操作步骤包括准备工作、准备细菌悬浮液、开始测定、统计数据、计算浓度和结果分析。通过该方法可以得到准确的细菌浓度,为后续的实验和研究提供可靠的数据支持。