麦氏比浊法确定细菌浓度的原理和操作步骤

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麦氏比浊管 悬液中细菌浓度估计

麦氏比浊管 悬液中细菌浓度估计

麦氏比浊管悬液中细菌浓度估计麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。

具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。

麦氏比浊管的配比如下:这是传统的麦氏比浊管的配制方法,目前也有市售的商品化产品,不需要自己配制,并且还有由乳胶粒子悬浮液制成的麦氏比浊管,与传统的麦氏比浊管相比,保存时间更长也更稳定。

但麦氏比浊管具体应该怎么使用呢?麦氏比浊管估计悬液中的细菌浓度具体操作方法1、轻摇标准试管。

2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

4、直接用眼睛看(需要经验,误差较大)。

5、找张白纸,打上平行直线,然后观察读数(如图示,利用光在不同浓度液体折射不同)。

例如,需配大约100cfu/mL 的细菌菌液浓度:1.无菌操作用接种环挑取测试细菌的纯培养物到盛有一定量无菌生理盐水管中,混悬。

2.以比色卡作为背景目测,直到浊度与0.5 麦氏比浊标准管的浊度相一致,如上图所示。

3.0.5 号麦氏浊度标准管相当于1×108CFU/mL 浓度,以此为参照值,取1mL 浊度跟0.5 号麦氏浊度标准管相一致的菌悬液到9mL 无菌生理盐水管中,作10 倍梯度稀释107、106、105……,102 稀释度含菌量大约为100cfu/mL。

注:1. 测试菌的纯培养物可以是冻干菌株复苏后纯培养物。

2.本法仅供细菌液浓度的粗略计算。

注意事项:1、如果测定的肉汤培养物不澄清,由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。

2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。

3、测定好的细菌,最好做一下梯度稀释涂布计数。

4、此种方法测定的准确性不是很高,如果是对细菌数量要求较精确的,请用紫外分光光度计。

麦氏比浊法

麦氏比浊法

麦氏比浊法制作细菌悬液麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。

具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。

麦氏比浊管的配比如下:(1.175%w/v BaCL2·2H2O)操作方法:1、轻摇标准试管。

2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

使用技巧:1、直接用眼睛看(需要经验,误差较大)。

2、找张白纸,打上平行直线,然后看(如图示,利用光在不同浓度液体折射不同)。

注意事项:1、如果测定的肉汤培养物不澄清,由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。

4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)。

2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。

编者注:1、测定好的细菌,最好做一下梯度稀释涂布计数。

2、此浓度是对应的大肠杆菌的浓度,如果是其他细菌,会有一定的差别,但编者做过的几个菌差别都在一个数量级之内,适合于普通实验。

3、此种方法测定的准确性不是很高,如果是对细菌数量要求较精确的,请用紫外分光光度计=================在临床微生物学检验中,麦氏比浊法常用于细菌鉴定、药敏实验前配置菌液时大致判断菌液浓度的一种方法,通常认为,如将配菌液浓度配成0.5麦氏比浊管时,相当于1.5×108细菌数/ml,由于方法本身就是一种估计的方法,所以尽管不同细菌大小差异很大,除了真菌孢子,细菌的差别不大,结果不会有影响。

但是,标准比浊管的浓度,是药敏实验结果的影响因素之一。

K-B法药敏试验时接种物配制有两种方法,第一种是肉汤增菌法(对数生长法),是用接环挑取3-5个细菌菌落入肉汤增菌管中进行增菌4-6小时,然后用生理盐水或肉汤对增菌管中的培养物进行稀释校正使其浓度达到0.5麦氏比浊标准(因为经过增菌培养其培养物浓度一般都高于此标准)。

麦氏比浊管

麦氏比浊管

麦氏比浊管【产品名称】通用名:麦氏比浊管英文名:McFarland Standard【包装规格】5支/盒【预期用途】麦氏比浊管的一系列不同的标准,用于评价菌液的浓度。

对于微生物学方法的标准化是非常必要的。

菌液浊度的判定依据原始麦氏比浊管的标号【检验原理】菌液浓度是通过与已知同一直径安瓿瓶中菌悬液浊度比较得到的。

【主要组成成分】6支直径17.5mm的麦氏标准管(0.5,1,2,3,4,5)标准成分:BaSO4 BaSO40.5号标准管 2.40 10-5 mol/l 3号标准管 1.44 10-4mol/l1号标准管 4.80 10-5 mol/l 4号标准管 1.92 10-4mol/l2号标准管 9.60 10-5 mol/l 5号标准管 2.40 10-4mol/l【储存条件及有效期】●安瓿瓶必须于2-30℃避光保存,有效期为6个月●不要打开麦氏标准安瓿:标准悬液实在原始、密封的安瓿内使用【检验方法】●取出选择的比浊管●用同一直径安瓿内制备菌悬液,混匀。

●充分混匀标准比浊管。

●立即在黑背景下比较出2个比浊管的浊度。

●如果必要,调整菌液浊度,混匀标准比浊管后重新比浊。

【检验结果的解释】等效标准比浊管细菌浓度(1)×106/ml 650nm 理论光密度(2)0.5 150 0.1251 300 0.252 600 0.503 900 0.754 1200 1.005 1500 1.251.细菌浓度取决于微生物大小。

效量代表细菌的平均有效值。

对于大分子量的酵母菌,细菌的数量大约除以30。

2.比浊管数值相当于菌液的光密度。

因为细菌大小和颗粒的不同,光的衍射不同,因此BaSO4没有同样的光密度。

【检验方法的局限性】不要用这些安瓿瓶管检测DENSIMAT【注意事项】●仅用于体外诊断●仅用于专业人员●使用前,检查安瓿是否完整。

基于麦氏比浊原理的细菌浊度分析仪校准方法探讨

基于麦氏比浊原理的细菌浊度分析仪校准方法探讨

万滔:基于表氏比浊原嫂的细菌浊歲分祈仪校准方法稼讨117基于麦氏比浊原理的细菌浊度分析仪校准方法探讨万滔(绵阳市计量测试所,四川绵阳625100)摘要:本文对基于麦氏比浊原理的细菌浊度分析仪进行了简要概述,探讨了该类仪器零点漂移、示值稳定性、重复性、示值误差的测量方法以及示值误差测量值的不确定度评定,并进行了实验验证,为该类仪器的校准和测试提供了合理方法,保证了仪器量值的准确性。

关键词:麦氏比浊原理;细菌浊度分析仪;示值稳定性;重复性;示值误差;不确定度评定中图分类号:TB9文献标识码:A国家标准学科分类代码:410.55DOI:10.15988/ki.1004-6941.2018.07.043Discussion on Calibration Metliod of Bacterial Turbidity AnalyzerBased on McFarland Turbidity PrincipleW a n T a oAbstract:T h is thesis gives a b rie f overview o f the ba cteria tu rb id ity analyzer based on the p rin c ip le o f M cF a tu r b id ity.T he m easurem ent m ethods o f zero d r if t,in d ic a tio n s ta b ility,r e p e a ta b ility,in d ic a tio n e rro r instrum ents are discussed.T he u n ce rta in ty o f in d ic a tio n e rro r o f m easurem ent results is assessed and ve rifie d by ex­perim ents,w h ich provides a reasonable m ethod fo r the ca lib ra tio n and testing o f the in s tru m e n ts,and ensures theaccuracy o f the in stru m e n ts.Keywords:M cF arla nd tu rb id ity p r in c ip le;ba cteria tu rb id ity a n a lyze r;in d ic a tio n s ta b ility;re p e a ta b ility;in d ic a tio n e r­ro r;u n ce rta in ty assessment0引言麦氏比浊法(M c fa la n d)是一种简单而经典的 细菌浓度计算方法,其核心原理是细菌溶于水中会 造成与浓度相关的混浊度。

比浊法测定菌浓度的原理

比浊法测定菌浓度的原理

比浊法测定菌浓度的原理比浊法是一种用于测定液体中菌量的有效方法,它经常被用于检测各种致病菌和乳酸菌的浓度。

比浊法的基本原理是利用菌产生的浊度来检测菌的数量,从而计算出菌的浓度。

比浊法的基本原理是,当添加细菌到液体中时,细菌将产生浊度,即颗粒性物质的浓度增加。

这将导致液体变得混浊,并且浊度与菌的数量成正比。

因此,可以通过测量液体的浊度,来推算出菌的数量。

比浊法的测定菌浓度的具体步骤如下:首先用液体中的细菌培养一定的时间,使细菌的数量及浊度达到一定的水平;其次,在灭菌的情况下,称取一定体积的液体;然后,根据液体的浊度,推算出菌的数量;最后,把结果乘以测试液体的体积,即可计算出菌浓度。

比浊法虽然简单,但是它的测定结果还是很可靠的。

它可以快速、准确、灵敏地检测出菌浓度,使得很多实验可以得到精确的测定结果。

比浊法能够快速检测各类致病菌和乳酸菌的浓度,为疾病的预防和控制提供了有效的技术手段。

比浊法的基本原理就是利用细菌产生的浊度来检测菌的数量,从而计算出菌的浓度。

比浊法可以快速、准确、灵敏地检测出菌浓度,使得很多实验可以得到精确的测定结果。

然而,比浊法有时也可能出现误差,比如细菌的浊度变化太小,以致计算出的浓度偏低,这时就需要借助其他方法进行检测,以保证检测结果的准确性。

综上所述,比浊法是一种用于测定液体中菌量的有效方法,它基本原理是利用细菌产生的浊度来检测菌的数量,来推算出菌的浓度。

它可以快速、准确、灵敏地检测出菌浓度,使得很多实验可以得到精确的测定结果,为疾病预防和控制提供了有效的技术手段。

然而,比浊法也存在一定的误差,所以除了比浊法,还可以借助其他方法来检测菌量,以确保检测结果的准确性。

比浊法测定菌浓度的原理

比浊法测定菌浓度的原理

比浊法测定菌浓度的原理
比浊法测定菌浓度的原理
1、定义:比浊法(turbidimetric method)是根据尘悬浮液发散时表现
出的比浊度变化,来测定测样中悬浮液含量的一种方法。

2、基本原理:比浊法测定菌浓度时,所以悬浮微生物必须具足量的荧
光及Homtra闪光测定试剂,以有效地放射入射小|粒子和液滴的荧光;
在进行比浊法测定时,先将样品及比较标准液搅匀,然后以精密的荧
光比对仪,测量比对液的比浊度,然后根据测量结果计算出菌体的含量,这就是比浊法测定菌浓度的基本原理。

3、作用:比浊法是用以判断菌浓度的一种简便方法,既可以用于分析
大批量膜生物,也可以用于分析少量菌浓度,从而实现快速准确地测定,可以替代传统的休止、活性测定或培养。

4、优点:比浊法测定菌浓度的优点是,1、实时准确 ;2、操作简单,
可以在极短的时间内快速自动测定,为菌浓度的检测提供准确的数据;
3、准确度高,重复性强,拥有更高的精度,可更好地检测菌浓度,保
证结果的可靠性;4、可以检测病菌和有效细菌;5、低成本易于控制。

5、缺点:比浊法检测菌浓度有一定的局限性,不适用于低悬浮微生物
含量的测定。

比浊法也不具有检测活性微生物含量的能力,因此无法
准确反映微生物的活性状态。

同时,比浊法测定的准确性和精确性也
受到试验流程的影响,受操作水平的限制。

6、用途:比浊法测定菌浓度广泛应用于医学微生物实验室中,用于观
察菌株的增殖状况,及各种分析、比较实验中,还可以利用比浊法测
定温和、中度蓄积型毒菌、恶性真菌的毒性,方便快捷,并可反映亚细菌群的变化,为医学研究和病原研究提供便利。

比浊法测定菌浓度的原理

比浊法测定菌浓度的原理

比浊法测定菌浓度的原理比浊法是一种常用的微生物检测方法,可用来测定微生物的菌浓度。

这种方法可以测出特定微生物的菌群数量,是比较有效的方法之一。

比浊法是利用菌群生长及其产生的悬浮液来测定菌浓度的方法,它基本上是建立在菌体能够因其自身存在而改变液体浊度和颜色的特性上。

一般来说,比浊法采用比较液体的浊度来测定菌浓度。

在比浊法的过程中,先用一定的消毒剂对样本中的微生物进行杀菌,然后在被杀菌的样品中添加测定菌的抗原,并将样品加入到特定的培养基中培养,直到浊度达到一定的数值。

在比浊法中,可以获得两种不同的样品,一种是未被杀菌的“原始样本”(原始浊度),一种是被杀菌后的“杀菌样本”(杀菌浊度)。

湮没样本(原始浊度)和杀菌样本(杀菌浊度)的浊度比值就是菌群数量的测定值。

比浊法可以用来测定菌群的菌浓度,它主要用于清洗送食物、准备食品添加剂或添加化学消毒剂时,检测出消融液中的细菌浓度,也可以用来检测水份或受污染的土壤中的微生物浓度。

比浊法测定菌浓度的原理是微生物的存在会改变液体的浊度和颜色。

其基本原理是,测定在一定条件下,杀菌前和杀菌后液体的浊度比值,可以用来测定菌浓度。

比浊法测定菌浓度还需要准备一些硬件设备,如:可以同时测定多种悬浮液浊度的浊度仪、溴化钾灯、温度控制器、细菌孢子夹及相关的实验室材料和装备。

比浊法测定菌浓度的步骤如下:1.准备样品:根据检测的内容,准备可检测的样本。

2.加入消毒剂:将消毒剂加入样本中,用于杀菌。

3.添加测定菌:将测定菌添加到样本中,以形成新的混合液。

4.培养:将混合液培养到一定浊度。

5.监控样品:定期监测样品,以定期比较原始样本和杀菌样本的浊度比值,从而获取悬浮液中菌浓度值。

以上是比浊法测定菌浓度的原理和步骤,比浊法是一种比较有效的微生物检测方法。

它可以用来测定水中、食物中和受污染的土壤中的细菌浓度,从而保证我们的饮食健康。

0.5麦氏比浊标准

0.5麦氏比浊标准

0.5麦氏比浊标准麦氏比浊是用于评价水体浑浊度的一种测量指标,可以反映水体中悬浮颗粒物的数量和大小。

0.5麦氏比浊标准是指当水体的麦氏比浊度达到0.5时,水体可被认为浑浊。

本文将介绍0.5麦氏比浊标准的背景、应用以及对水质评估的重要性。

背景:麦氏比浊是由美国化学家麦克法兰(McFarland)于1887年提出的,用于评估革兰氏染色中细菌悬浮液的浓度。

后来,麦氏比浊被应用于评价水体浑浊度,成为了一种常用的水质测量方法。

0.5麦氏比浊标准是在这个基础上发展而来的。

应用:0.5麦氏比浊标准广泛应用于水质监测、环境保护和饮用水处理等领域。

在水质监测中,通过测量水样的麦氏比浊度可以了解水体中悬浮颗粒物的浓度,进而判断水体的清澈程度。

在环境保护中,对于一些需要保护的水生生物而言,水体的浑浊度对它们的生存环境和繁殖状况有着直接的影响。

因此,通过0.5麦氏比浊标准可以评估水体的生态状况,为环境保护提供依据。

在饮用水处理中,0.5麦氏比浊标准也是评估水体处理效果的重要指标,可以确保饮用水的质量符合相关标准和要求。

重要性:麦氏比浊标准中的0.5是一个重要的界限,超过这个值就意味着水体已经变得浑浊。

浑浊的水体容易造成视觉疲劳,同时也会降低水体的透明度。

对于饮用水而言,浑浊度的增加可能会导致水味变差,并且悬浊物中可能存在一些对人体健康有害的物质。

此外,浑浊的水体还可能影响水中的生物群落和水生态系统,对水生生物的生存和繁殖造成影响。

因此,通过监测和控制水体的麦氏比浊度,可以提高水体的质量,保护人类健康和生态环境。

在实际应用中,测量0.5麦氏比浊度的方法多种多样,可以使用光度法、显微镜法或者激光散射等技术手段。

这些方法在测量结果的准确性和重复性上都有一定的差异,因此在实际应用中需要选择适合的方法来进行测量,并对测量结果进行准确的判读。

总结:0.5麦氏比浊标准是评价水体浑浊度的一种重要标准,它在水质监测、环境保护和饮用水处理等领域有着广泛的应用。

麦氏比浊标准

麦氏比浊标准

麦氏比浊标准麦氏比浊标准是一种用于衡量液体清澈度的标准,通常用于测定化学反应中生成物的浓度。

它是以浊度单位“麦氏单位”来衡量的。

麦氏比浊标准是一种相对标准,即与一个标准浊度溶液进行比较,从而确定待测液体的浊度。

一、麦氏比浊标准的定义麦氏比浊标准是一种以浊度单位“麦氏单位”来衡量液体清澈度的方法。

麦氏单位是通过比较待测溶液与标准浊度溶液的透光率来确定待测溶液的浊度。

具体来说,麦氏比浊标准是将待测溶液与标准浊度溶液进行比较,以确定待测溶液的浊度。

标准浊度溶液通常是一种高浓度的悬浮液,其浊度被定义为1麦氏单位。

二、麦氏比浊标准的用途麦氏比浊标准通常用于化学反应中生成物浓度的测定。

例如,在生物化学和医学领域中,经常需要测定酶反应生成物的浓度。

通过使用麦氏比浊标准,可以将不同实验条件下生成物的浓度进行比较,从而为研究提供参考。

此外,麦氏比浊标准还可以用于水质检测、药品质量控制等领域。

三、麦氏比浊标准的优点1.相对标准:麦氏比浊标准是一种相对标准,即与一个标准浊度溶液进行比较,从而确定待测液体的浊度。

这种方法可以避免不同实验条件下的误差传递,提高测量精度。

2.操作简便:麦氏比浊标准的操作相对简单,只需将待测溶液与标准浊度溶液进行比较即可。

这种方法的可重复性和可操作性较高,适合于大规模的实验研究。

3.精度较高:麦氏比浊标准通过比较透光率来确定浊度,因此精度较高。

此外,现代的浊度计可以自动测定浊度和透光率,进一步提高了测量精度。

4.应用广泛:麦氏比浊标准在多个领域都有广泛的应用,如生物化学、医学、水质检测、药品质量控制等。

这使得该方法具有较高的实用价值。

四、麦氏比浊标准的应用举例1.酶反应中生成物浓度的测定:在生物化学实验中,经常需要测定酶反应生成物的浓度。

通过使用麦氏比浊标准,可以快速准确地测定生成物的浓度,从而为研究提供参考。

例如,在糖酵解实验中,可以使用麦氏比浊标准测定产物乳酸的浓度。

2.水质检测:在水质检测中,使用麦氏比浊标准可以快速测定水样中的悬浮物和有机物含量。

细菌浊度实验方法

细菌浊度实验方法

细菌浊度实验方法全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:细菌浊度实验方法是一种用于测定水样中细菌浓度的常见实验方法。

在水质监测和研究中,细菌浊度实验方法被广泛应用,它能够快速准确地测量水样中细菌的数量,为水质评估和控制提供重要数据。

本文将详细介绍细菌浊度实验方法的原理、步骤及注意事项。

一、细菌浊度实验方法的原理细菌浊度实验方法利用了细菌在水样中产生的浑浊度来间接反映细菌的数量。

细菌在水样中繁殖会形成一种混浊的胞外物质,使水样的透明度下降,产生浑浊度。

通过测量水样的光学密度(OD值)或浑浊度值,可以计算出水样中的细菌数量。

1. 样品采集:首先需要采集水样,注意保持样品的卫生和无菌。

2. 样品预处理:如果水样中含有固体颗粒或悬浮物,需对样品进行预处理,如过滤或离心。

3. 制备标准曲线:首先需要准备一系列不同浓度的细菌标准溶液,然后根据标准曲线测量其OD值或浑浊度值。

4. 处理样品:将处理后的水样与细菌培养基混合,使细菌在样品中繁殖。

5. 测量浑浊度:使用光学密度计或浊度计测量水样的OD值或浑浊度值。

6. 计算细菌数量:根据水样的OD值或浑浊度值与标准曲线的对照,计算出水样中细菌的数量。

7. 结果分析:根据实验结果评估水样中细菌的浓度,为水质评估提供数据。

1. 样品处理要求严格,避免污染和外源细菌的干扰。

2. 操作过程中需严格遵守实验室操作规范,保证实验数据的准确性和可靠性。

3. 标准曲线制备应该注意标准溶液的配制精确和标定操作的准确性。

4. 测量时需注意仪器的校准和环境条件的控制,以确保测量结果的准确性。

5. 实验结果应该与其他方法相互验证,提高数据的可信度。

第二篇示例:细菌浊度实验是一种用于检测水质净化效果的常见方法。

通过测量水样中细菌的数量来判断水质的好坏,从而评估不同处理方法的清洁效果。

这种方法可以帮助我们了解水质的卫生状况,为改善水环境提供科学依据。

细菌浊度实验的基本原理是利用细菌的生长特性,通过在富含营养物质的培养基上培养细菌,并观察细菌的数量和种类来评估水样的卫生情况。

比浊法操作手册

比浊法操作手册

⽐浊法操作⼿册⽐浊法操作规程⼀、准备⼯作:(⼀)培养基的制备:1、III号培养基的制备胨 5 g 葡萄糖 1 g⽜⾁浸出粉 1.5 g 磷酸氢⼆钾 3.68g磷酸⼆氢钾 1.32 g 氯化钠 3.5 g酵母浸出粉 3 g ⽔1000 ml 除葡萄糖外,混合上述成分,加热溶化后滤过,加葡萄糖溶解后,摇匀,调节pH值使灭菌后为7.0~7.2,在115℃灭菌30分钟。

2、营养琼脂培养基的制备按照营养琼脂培养基上标注的⽐例系数,进⾏营养琼脂培养基和纯化⽔配制。

或者按照药典进⾏配制。

胨10 g 氯化钠 5 g琼脂15~20 g ⾁浸液1000 ml 除琼脂外,混合上述成分,调节pH值使⽐最终的pH值略⾼0.2~0.4,加⼊琼脂,加热溶化后滤过,调节pH值使灭菌后为7.2~7.4,分装,在115℃灭菌30分钟,趁热斜放使凝固成斜⾯。

3、注意事项(1)含有葡萄糖的培养基应在各成分加热溶解后再加⼊,其⽬的是防⽌葡萄糖加热被破坏。

(2)配制的培养基必须调节pH值,保证培养基灭菌后其pH值在规定范围之内;测定硫酸庆⼤霉素的培养基pH值灭菌后最好在7.15~7.20。

pH值的测定使⽤酸度计或其它准确度较⾼的仪器,使⽤20%的氢氧化钠溶液或浓盐酸进⾏调整;调节pH时应避免反复调节。

(3)配制的培养基应透明、⽆沉淀。

应先调节pH再分装后灭菌。

(4)配制好的培养基应储存在冷处,出现浑浊后不能继续使⽤。

(⼆)缓冲液的制备:1、pH7.0磷酸盐缓冲液(BP)磷酸⼆氢钾13.6 g 氢氧化钠 2.37 g 灭菌⽔2000 ml2、pH7.8磷酸盐缓冲液磷酸氢⼆钾 5.59g 磷酸⼆氢钾0.41 g ⽔1000ml3、注意事项(1)所⽤化学药品规格不低于⼆级试剂(AR)规格。

(2)配制后若出现沉淀或浑浊应⽤耐酸滤过漏⽃滤过,使溶液澄清。

(3)缓冲液配制后应澄明⽆⾊、⽆菌、⽆浑浊沉淀,应避免被⽑点、纤维污染。

(4)配制后应灭菌保存使⽤。

比浊法在测定发酵液菌体浓度中的应用

比浊法在测定发酵液菌体浓度中的应用
[ 2 ] Xiao Yanfan (肖衍繁) , Li Wenbin (李文斌) . Physical Chemistry (物理化学) [ M ] . Tianjin : Tianjin University Press , 1997. 426
[3 ] Ke Yikan (柯 以 侃) , Dong Huiru (董 慧 茹) . Analytical Chemistry Handbook (分 析 化 学 手 册) [ M ] . Beijing : Chemical Industry Press ,1998. 48
表 1 比浊法准确度
样品编号 测量值 3 / (g·L - 1) 已知浓度/ (g·L - 1)
误差/ (g·L - 1)
相对误差 , %
1
1. 36
1. 33
0. 03
2. 26
2
4. 84
4. 80
0. 04
0. 01
3
7. 46
7. 54
- 0. 08
- 0. 01
3 测量值为 5 次测定结果的平均值 。
长时 , 质点对入射光产生散射作用[1波长须是菌粒直径的 1~1. 5 倍 。
菌粒直径可由粒子测定公式[2 ]求得 。即 :
r3
=
3 4
×ncπVρ′
式中 : V ′———溶胶的体积 ,L ;
n ———体积为 V′的溶胶中的粒子数 ;
c ———分散相的质量浓度 ,kg·L - 1 ;
Application of Nep helometry on Determining t he Cell Concentration in Fermentation Liquid
Yan Yimin

麦氏比浊法确定细菌浓度

麦氏比浊法确定细菌浓度

麦氏比浊法确定细菌浓度
麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。

具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。

麦氏比浊管的配比如下:
操作方法
1、轻摇标准试管。

2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

使用技巧
1、直接用眼睛看(需要经验,误差较大)。

2、找张白纸,打上平行直线,然后看(利用光在不同浓度液体折射不同)。

注意事项
1、如果测定的肉汤培养物不澄清,由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。

4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)。

2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。

补充说明
1、测定好的细菌,最好做一下梯度稀释涂布计数。

2、此浓度是对应的大肠杆菌的浓度,如果是其他细菌,会有一定的差别,做过的几个菌差别都在一个数量级之内,适合于普通实验。

3、此种方法测定的准确性不是很高,如果是对细菌数量要求较精确的,请用紫外分光光度计。

麦氏比浊法

麦氏比浊法

麦氏比浊法制作细菌悬液麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。

具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,有表可查,这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。

麦氏比浊管的配比如下:(1.175%w/v BaCL2·2H2O)操作方法:1、轻摇标准试管。

2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

使用技巧:1、直接用眼睛看(需要经验,误差较大)。

2、找张白纸,打上平行直线,然后看(如图示,利用光在不同浓度液体折射不同)。

注意事项:1、如果测定的肉汤培养物不澄清,由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。

4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)。

2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。

编者注:1、测定好的细菌,最好做一下梯度稀释涂布计数。

2、此浓度是对应的大肠杆菌的浓度,如果是其他细菌,会有一定的差别,但编者做过的几个菌差别都在一个数量级之内,适合于普通实验。

3、此种方法测定的准确性不是很高,如果是对细菌数量要求较精确的,请用紫外分光光度计=================在临床微生物学检验中,麦氏比浊法常用于细菌鉴定、药敏实验前配置菌液时大致判断菌液浓度的一种方法,通常认为,如将配菌液浓度配成0.5麦氏比浊管时,相当于1.5×108细菌数/ml,由于方法本身就是一种估计的方法,所以尽管不同细菌大小差异很大,除了真菌孢子,细菌的差别不大,结果不会有影响。

但是,标准比浊管的浓度,是药敏实验结果的影响因素之一。

K-B法药敏试验时接种物配制有两种方法,第一种是肉汤增菌法(对数生长法),是用接环挑取3-5个细菌菌落入肉汤增菌管中进行增菌4-6小时,然后用生理盐水或肉汤对增菌管中的培养物进行稀释校正使其浓度达到0.5麦氏比浊标准(因为经过增菌培养其培养物浓度一般都高于此标准)。

麦氏比浊管使用说明

麦氏比浊管使用说明

麦氏比浊管使用说明麦氏比浊管是一种常见的实验仪器,用于测量液体的浊度。

它是通过光的透射来判断液体中悬浮物的浓度的一种方法。

本文将介绍如何正确使用麦氏比浊管,并提供一些建议以确保准确的测量结果。

一、将麦氏比浊管从包装中取出,检查是否有损坏或者杂质。

如果发现有问题,请及时联系供应商进行更换。

二、清洗麦氏比浊管。

在使用之前,将麦氏比浊管放入洗涤剂或肥皂溶液中浸泡一段时间。

然后用清水冲洗干净,并用干净的纸巾擦干。

三、准备待测液体。

将待测液体装入一个干净的容器中,并摇匀以确保悬浮物均匀分布。

确保待测液体的温度和浊度在实验要求的范围内。

操作麦氏比浊管。

使用胶头滴管或其他合适的工具,将待测液体滴入麦氏比浊管中。

注意避免空气泡困在管内,以免影响测量结果。

在填满液体后,用手指捏住麦氏比浊管的开口,并轻轻摇晃几次以确保液体和悬浮物充分混合。

五、放置麦氏比浊管。

将麦氏比浊管放置在亮度适中的背景下,例如白色纸张或光板上。

确保光线均匀而充足,以便进行准确的测量。

六、观察麦氏比浊管。

通过麦氏比浊管的侧面观察液体的浊度。

当液体越浑浊时,透射的光线越少,麦氏比浊管中液面的位置越难以辨认。

通过比较不同液体的浊度,可以估计悬浮物的浓度。

七、记录测量结果。

根据观察到的液面位置,以及之前的经验和标准曲线等信息,将测量结果记录下来。

在记录时注意准确度和完整度,以便后续的数据分析或对比。

清洗麦氏比浊管。

测量完成后,将麦氏比浊管立即清洗,以防止残留物的附着和污染下次的测量。

使用清水和合适的清洁工具彻底清洗麦氏比浊管,并确保其完全干燥后进行储存。

九、注意事项:在使用麦氏比浊管时,有一些注意事项需要注意。

首先,避免将麦氏比浊管暴露在强光下,避免光线干扰测量结果。

其次,在操作麦氏比浊管时,要注意避免刮伤或碰撞管壁,以免影响光线透过的质量。

最后,在选择待测液体时,应根据实验要求选择合适的浊度范围,以确保测量结果的准确性。

总结:麦氏比浊管是一种简单而实用的实验仪器,可用于测量液体的浊度。

麦氏比浊仪原理

麦氏比浊仪原理

麦氏比浊仪原理嘿,朋友们!今天咱来唠唠麦氏比浊仪原理。

你说这麦氏比浊仪啊,就像是个神奇的小眼睛,能看穿那些微生物的小秘密呢!它的工作原理呢,其实并不复杂,但可别小瞧了它哟!想象一下,我们把含有微生物的混悬液放进去,这麦氏比浊仪就开始发挥作用啦。

它通过测量光线穿过混悬液时的衰减程度,就好像是在给这些微生物“量身高”“称体重”一样。

这是不是很有意思呀?为啥它能这么厉害呢?这就好比我们在黑暗中看东西,光线被挡住的程度不一样,我们就能大概知道物体的大小和形状啦。

麦氏比浊仪就是利用了这个原理,只不过它更精确、更专业罢了。

它就像一个经验丰富的老中医,通过观察混悬液的“气色”,就能判断出里面微生物的情况。

而且啊,它还特别靠谱,每次给出的结果都很准呢!你说要是没有麦氏比浊仪,我们得费多大的劲去研究那些小小的微生物呀!它可真是帮了我们大忙了呢!有了它,我们就能快速、准确地知道混悬液中微生物的浓度,这对很多实验和研究来说可太重要啦!咱再想想,要是医生在治病的时候,能快速知道病菌的情况,那是不是就能更好地对症下药啦?麦氏比浊仪在这方面可起了大作用呢!它能让医生们更有把握地制定治疗方案,就像给医生们配上了一双火眼金睛。

还有啊,在食品工业中,它也能帮我们检测食品中的微生物含量,保障我们的食品安全呢!这可不是开玩笑的,要是吃的东西不安全,那可不得了哇!总之呢,麦氏比浊仪虽然看起来不大起眼,但它的作用可真是不容小觑啊!它就像一个默默工作的小英雄,在我们看不见的地方发挥着巨大的作用。

所以啊,朋友们,可别小看了这些科学仪器哦!它们可是我们探索世界、解决问题的好帮手呢!麦氏比浊仪就是一个很好的例子,它让我们对微生物的世界有了更深入的了解,也让我们的生活变得更加美好和安全。

这就是麦氏比浊仪原理的奇妙之处呀!你们说是不是很厉害呢?。

抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)的测定

抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)的测定

抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)的测定实验目的:通过采用常量稀释法, 检测几种抗菌药物对A8、A9、D5菌株的最小抑菌浓度( MIC) , 对临床诊断用药有指导作用。

【试剂与器材】1.试剂⑴主要仪器设备:三角烧瓶、高压灭菌器、内径90mm平皿、试管、0.5麦氏标准比浊管、天平、接种环、吸头、微量加样器、胶布、分光光度计、酒精灯等。

⑵试验药品:培养基基础粉(酸水解酪蛋白/酸水解酪素、牛肉浸膏粉、淀粉、琼脂)、纯水(蒸馏水)、电炉、牛皮纸、线、抗菌药物、无菌生理盐水、蒸馏水、pH6.0 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液。

⑶试验菌株:A8、A9、D5菌株、标准株大肠杆菌。

在肉汤或琼脂中将抗菌药物进行一系列(对倍)稀释后定量接种待检菌,35℃孵育一定时间后,观察抑制待检菌肉眼可见生长的最低药物浓度,即为该药物对待检菌的最低抑菌浓度(MIC)。

【试验方法】肉汤稀释法试管稀释法(常量稀释法)【原理】用MH肉汤将抗菌药物作不同浓度的稀释,再接种待检菌,定量测定抗菌药物抑制或杀灭待检菌的最低抑菌浓度(MIC)。

【操作步骤】①抗菌药物原液制备:配制抗菌药物原液的溶剂和稀释剂大多采用蒸馏水、pH6.0,0.1mol/L磷酸盐缓冲液等。

抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。

溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。

所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。

公式为:质量(mg)=溶剂(ml)x浓度(μg/mg)/分析效能(μg/ mg)表1 稀释法中常用的抗菌药物容积稀释法②药敏试验用抗菌药物浓度范围根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准,药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值,特殊情况例外。

表2常用药敏纸片试验方法:1.用记号笔在培养基上标记待检菌名。

2.在已分纯的待检菌培养基上取4个~5个菌落,接种在4ml~5ml水解酪蛋白(MH)肉汤中,置35℃培养4h~6h,链球菌、嗜血杆菌等需用加血的肉汤增菌并孵育过夜。

5麦氏比浊标准

5麦氏比浊标准

5麦氏比浊标准
首先,准备工作。

在进行5麦氏比浊标准的测定之前,需要准备好所需的试剂和仪器设备。

首先是标准硅酸钠溶液,其浓度为5倍标准液。

其次是玻璃比色皿、比色管、移液管等实验仪器。

另外,还需要准备好蒸馏水和待测水样。

其次,操作步骤。

首先,取一定量的标准硅酸钠溶液倒入比色皿中,然后用蒸馏水将其稀释至刻度线。

接着,将待测水样倒入另一个比色皿中,同样用蒸馏水稀释至刻度线。

然后,将两个比色皿放在白色背景下,通过比较两个溶液的浊度来确定待测水样的浊度。

最后,根据测定结果计算出水样的浊度值。

再者,注意事项。

在进行5麦氏比浊标准测定时,需要注意以下几点。

首先是标准硅酸钠溶液的浓度要准确,否则会影响到测定结果的准确性。

其次是比色皿和比色管要保持清洁,以免杂质影响测定结果。

另外,在稀释溶液时要注意按照要求稀释至刻度线,否则也会影响到测定结果的准确性。

最后,测定时要注意避免空气气泡的产生,以免影响测定结果。

综上所述,5麦氏比浊标准是一种常用的水质浊度测定方法,在实际操作中需要严格按照操作步骤和注意事项进行。

只有在严格遵守标准操作流程的情况下,才能得到准确可靠的测定结果。

希望本文所介绍的内容能够对使用5麦氏比浊标准进行水质浊度测定的人员有所帮助。

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麦氏比浊法确定细菌浓度的原理和操作步骤
以麦氏比浊法确定细菌浓度的原理和操作步骤为标题
一、原理
麦氏比浊法是一种常用的确定细菌浓度的方法,其原理是利用细菌悬浮液对光的散射作用,通过测量光的透射度来确定细菌的浓度。

细菌悬浮液越浓,对光的散射就越强,透射度就越低。

二、操作步骤
1. 准备工作
a. 准备所需材料:细菌悬浮液、比色皿、比色计、移液器、离心机等。

b. 将比色皿用去离子水清洗干净,确保无杂质。

c. 打开比色计,进行预热,使其达到工作温度。

2. 准备细菌悬浮液
a. 选择需要测定浓度的细菌液体培养物。

b. 用移液器取适量的细菌液体培养物,加入一定量的去离子水,制备一系列不同浓度的细菌悬浮液。

c. 将细菌悬浮液进行均匀摇匀,确保细菌分布均匀。

3. 开始测定
a. 将比色皿放入比色计中,调整为透射模式。

b. 在比色皿中加入一定量的去离子水作为空白对照组。

c. 将细菌悬浮液加入另一个比色皿中,确保液面平整,避免气泡产生。

d. 将比色皿放入比色计,调整为透射模式,记录下透射度数值。

e. 重复上述步骤,分别测定不同浓度的细菌悬浮液的透射度。

4. 统计数据
a. 将测得的透射度数值记录下来,建立细菌浓度与透射度之间的对应关系。

b. 绘制透射度-浓度曲线图,根据图像确定未知浓度细菌悬浮液的浓度。

5. 计算浓度
a. 根据绘制的透射度-浓度曲线图,找到未知浓度细菌悬浮液对应的透射度数值。

b. 根据透射度和对应关系,计算出未知浓度细菌悬浮液的浓度。

6. 结果分析
a. 根据计算结果,得到未知浓度细菌悬浮液的浓度。

b. 将测定结果与实际浓度进行比较,评估测定的准确性和可靠性。

总结:
通过麦氏比浊法可以快速、简便地测定细菌悬浮液的浓度。

其原理是利用细菌悬浮液对光的散射作用,通过测量光的透射度来确定细
菌的浓度。

操作步骤包括准备工作、准备细菌悬浮液、开始测定、统计数据、计算浓度和结果分析。

通过该方法可以得到准确的细菌浓度,为后续的实验和研究提供可靠的数据支持。

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