抗肝癌人源化单链抗体hscFv_(25)的体外亲和力成熟
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抗肝癌人源化单链抗体hscFv_(25)的体外亲和力成熟
孙志伟;王双;杜威世;俞炜源
【期刊名称】《世界华人消化杂志》
【年(卷),期】2004(12)11
【摘要】目的:提高人源化抗肝癌单链抗体hscFv25的亲和力. 方法:设计并合成人源化抗肝癌单链抗体hscFv25重链及轻链CDR3的半随机突变引物,构建突变体抗体库,竞争筛选亲和力更高的突变体抗体,对所得到的高亲和力的候选抗体,在大肠杆菌中进行可溶性表达,并采用细胞ELISA、细胞涂片免疫组织化学染色的方法,对该抗体进行初步的活性鉴定. 结果:得到了3株候选高亲和力突变体抗体,其中的一株在大肠杆菌中获得了可溶性表达后,进一步的活性检测结果表明,该抗体的相对亲和力比亲本单链抗体提高了60倍左右,同时该抗体对肝癌细胞(SMMC-7721)的免疫组织化学染色呈强阳性,着色情况与亲本抗体相一致,而对正常肝细胞(HL-02)染色呈阴性. 结论:成功地构建了人源化抗肝癌单链抗体hscFv25的突变体抗体库,并筛选到了一株亲和力更高的突变体抗体.
【总页数】4页(P2568-2571)
【关键词】抗肝癌人源化单链抗体;hscFv25;体外亲和力;候选抗体;大肠杆菌
【作者】孙志伟;王双;杜威世;俞炜源
【作者单位】军事医学科学院生物工程研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R735.7
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