HPV16 E6 E7SiRNA作用于人宫颈癌细胞株的实验研究

m a v ir u s e s o
n
a n
d
m a
l ig
n a n ra
t pro g re s te
s io n m a n
o
f hu
c e
—
l
c a r c in o m a
he
n
h ig h
r is
k ty pe
e
s
o
f hu
m a n
e
．
p a p il lo
n c
(H P V s )
．
u o la n
_
g
a o n
@
ya ho
o c o m
．
．
c n
a
F i r s t A f il ia t e d H o
n
p it a l
o
f Na
Ho
n c s
ha
n
g U n iv
n c
e rs n
it y N a
，
n c
ha
，
g 330006
a
，
C h in
。
J ia
gx i P
ro v
g
e n e s
(P <
0 05
)
，
y
f
e a c
h
s
iR N A
a n
d de te
a
te d th e
，
e x
p re
s s io n a n
o
le
ls
a
f
r
R NA
n s
a n c
d p r o t e in
n w
f the
ta rg
．
g
e n e s
it h R T P C R h
s
a n
d We
a
．
s te r n
w n re
，
E 7 的 s iR NA 各 3
条 经 脂 质体 包裹后 转 染两 株 细 胞 分 别 采 用
， ，
RT
—
P CR 和 W e s te
B lo t
。
方 法 通 过 对 转 染前 后 各 时 间 段 两 基 因 m R N A 及 蛋 白 的 表 达 情 况 的 检 测 验 证 R N A i 作 用 的 特 异 性 及 时 效 性
，
结 论 ：不 同 序 列 的
、
E6 E7
、
s
iR NA
，
，
对 靶 基 因 的 干 扰 效 率 不 同 ；E 6 E 7 s i R N A 分 别 作 用 于 宫
、 ，
颈 鳞 癌 细 胞 株 均 引起 了 靶 基 因 的 特 异 高 效 性 的 抑 制 而 对 非 靶 基 因 的 表 达 无 明 显 变 化
H A N J ie
a n
E H P V l 6 E 6／ 7
N IE C h u
n
iR N A
s o n
HPV l 6
一
p o s it iv
e
C e ll L in
e s
u o la n
l ia
，
n
’
r re s
po n
d in g
t h o r ：G A O G
s
u o la n
E
—
m a
il ：g
12 3 6
中国 肿 瘤 临 床
200 8
年第 3 5 卷第 2 1 期
基础 研 究
HP V l 6 E 6 E 7
s
i R NA 作 用 于 人 宫 颈 癌 细 胞 株 的 实 验 研
究米
摘要
、
目 的 ：使 用 H P V l 6 E 6 E 7
、
s
iR NA 处 理
，
表达
HPV l 6 阳 性 的人
s
宫 颈 鳞 癌 细 胞 株 Ca S k i 和 S i H a 观 察 其 对
，
HPV l 6 E 6 E 7
原 癌 基 因 的 特异 性 抑 制 作 用 为探 讨 使 用
l6 E6
、
iR NA 治
疗 宫 颈 癌 的 可 行 性 提 供 实验 基 础
，
。
方 法 ：分 别 设
r n
计 并合 成 靶 向 于 H P V
in
c ia
l Tu
m o r
p it a l N a
，
ha
g 330029
C h in
t
o bj e c tiv
m a n c e r v ic a
e ：T
E he E6／ 7 o
w
n c o
p
ro
t e in s p la y im p o r ta
-
n
r o le s
i n t h e i n it i a t io
—
1
s
iR NA
和E7 2
—
s
iR NA
对靶 基 因抑 制 作 用 较 强 著 性 降低 ( P < 0 0 5
．
。
E6—1sFra bibliotekiR NA
和
E7
—
2
s
转 染两株细 胞后 24 h 4 8h 7 2 h 及 9 6h 均 可 观
。
察 到 靶 基 因表 达 的 显
) 而 对相应 的 非
，
靶 基 因 无 明显 抑 制 作 用
a
t a r g e t in g t h e
a n
E6
o r
E7 g
o
e n e
de
s
ig
n e
d
a n c
d
s
y n the
d
s e
pa
t e ly
v e
in
m
v e s
te d th e
i n h i b it o r y
o s
e
f
e c e
e
—
t t
d t im
w
e
．
e
f ic ie
-
n c
b lo t
t 2 4 hr 4 8 hr 7 2 hr
，
d 96 hr
e t
ft e
tra
fe
．
t io
it h t h e
iR N A s
o
e
R
s u
it s
：E a c
iR N A l e d t o
do
g
u la c
t io
n n
o
f the
e s
e x
p
r e s s io n
f ta r g
in t e g
in t o h u
c e
h ro
—
m o s o m e s
．
To
e v a
lu
a
te
the
w
i n h i b it o r y
f
e c
t a n d t im
．
e
f ic i e
e
y
f
s
e ra
iR N A
s
S iH a
s m a
a n
d Ca S ki
lls
po
s
it iv
fo
且
抑 制 作 用 至 少维 持 到
转 染后 9 6 h
。
为进
s
一
步研 究 采 用 R A N 干 扰 技 术 进 行 宫 颈 癌 的 生 物 治 疗 奠 定 了 基 础
E6
Of
。
．
。
关键 词 I n h ib it o
GAO G Co
’
i R NA
E7
HPV l 6
宫颈 癌
s
r y
’
．
E f l ec t f
r
HP V l 6
w e re
tra n s fe c te d
it h H P V l 6 E 6 ／ 7 s iR N A s E
w e re
M
th o d
s iz e
s ：T
h re
pe c
．
if ic W
o e
ll i n t e r f e r i n g R N A s (s iR N A s ) t ig
结
果 ：同 对 照 组 相 比 各 E 6 E 7
， 、
s
iR NA
均 可 引 起 靶 基 因 表 达 水 平 的 显 著 性 下 降 ( P < 0 0 5 ) ；而 空 脂 质 体 组 及 阴 性 对 照
．
s
iR NA 组
的 靶 基 因表 达 水 平 则 无 明 显 变 化
iR NA
、 、
。
其 中E 6