最新宫颈癌Hela细胞株培养

宫颈癌H e l a细胞株

培养

本科学生综合性

实验报告

姓名：学号：

学院：专业、班级：

实验课程

指导教师及职称

开课学期至学年上学期

云南师范大学教务处编印

胰酶溶液，并加入适量培养液终止消化，吹打分散。

细胞计数：取5ul细胞悬浮液加入等量台盼蓝染液，混匀后用血球计数板计算细胞的成活率。如果样本成活率高，无污染即可用于传代。 (计数结果：4.5×106个/ml)。

将细胞分装至新鲜的培养液中，使细胞的最终数量调节至1×105～3×105个/mL。

置于37℃二氧化碳培养箱中继续培养。

具体操作：

每两个小组共用一个培养瓶配制100ml的生长培养基

每人取10ml培养基到自己的细胞培养瓶内

向细胞培养瓶内接种400ul的HeLa细胞株原液

放入二氧化碳培养箱，旋松瓶盖

根据细胞的数量看细胞瓶是否平放或直立放置

（四）、死活细胞的鉴别

将细胞悬液充分混匀后取20ul放入干净的离心管中，加入等体积的0.4%的台盼蓝染液混合，放置2min。

取一干净的血球计数板，盖上盖片，从盖片两边滴入细胞悬液使之充满计数板和盖片之间。注意滴液勿有气泡，也不能太多（约10ul），否则会使盖片浮起而是细胞计数不准。

低倍镜下观察，活细胞不着色，台盼蓝着色的细胞呈深蓝色，是不健康或已死亡的细胞，不能计数。找出计数板上的方格，计算四角大格内总的细胞数，压着大格线者只计左侧或上方，不计右侧或下方。

五、实验结果分析与讨论：

六、参考文献：