核蛋白内参

核蛋白内参
我们知道，内参蛋白是指由管家基因（house keeping gene）编码表达的一类蛋白，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在实验中检测蛋白的表达水平变化时常用它们来做参照物。

这些内参蛋白常应用于 Western Blot 中，Western Blot 不仅能证明样品中是否含有某种蛋白，还能比较不同条件、不同组织和细胞中目的蛋白的相对含量，从而衡量蛋白的表达水平。

内参蛋白作为一种参照物，在其中的作用为确定样本使用量的一致性，以及校正实验过程中可能出现的操作误差，从而进一步保证实验结果的准确性。

那么对于不同的蛋白，内参蛋白该如何选择呢？
前两节介绍了几种常见内参蛋白的选择和应用。

本节将系统介绍不同内参蛋白的选择以及云克隆公司现有的内参蛋白抗体。

对于内参蛋白的选择首先是考虑分子量。

一般情况下，内参蛋白和检测的目的蛋白最好相差在 5kDa 以上。

如分子量为
45kDa 的检测蛋白，我们可以选择 Tubulin Beta（54kDa），Lamin B1（66kDa）等，而不选择 ACTa2（42kDa）或者 beta-actin（45kDa）。

其次对于不同的组织，应选择不同的内参。

如肌动蛋白是一种细胞骨架蛋白，有六种不同的亚型，包括： alpha-skeletal muscle actin、alpha-cardiac muscle actin、alpha-smooth muscle actin、gamma-smooth muscle actin、beta-actin (β-non-muscle) 和 gamma-non-muscle actin。

其中常用作Western Blot 内参的 beta-actin 在肌肉和脂肪组织中分布较少，那么若样本是心肌或脂肪组织来源的，就可以考虑分别
用 alpha-cardiac muscle actin (ACTC1) 和 GAPDH 作为内参蛋白。

最后，提取蛋白的部位不同，选择的内参蛋白也不同。

比如有时胞质、胞核分开提取而不提取总蛋白时，就要选择相应部位表达的内参蛋白。

如 PCNA 在细胞核中高效稳定表达，理论上在细胞质不表达，那么对于胞质提取的蛋白，就不能选用PCNA 作为内参蛋白，而应该选择细胞质中表达的 Tublin Beta、Actin Beta 等作为内参蛋白。

云克隆针对不同细胞部位、不同组织、不同分子量的蛋白质表达推出了一系列内参抗体，以满足用户的不同需求。

见表1。

表 1. 各种内参蛋白抗体
货号 1货号 2目标蛋白目标蛋
白的亚
细胞定
位
目标蛋
白的分
子量
目标蛋白
的组织表
达部位
CAB932 Hu22CAB932
Hu01
甘油醛-3-磷酸脱
氢酶 (GAPDH)
胞质，
核，膜
36kDa
胰腺，乳
腺，胃等
CAB357 Hu22CAB357
Hu01
细胞外信号调节
激酶 1(ERK1)
胞质，
核
43kDa
脑，小
肠，食道
等
CAA930 Hu22CAA930
Hu01
细胞外信号调节
激酶 2(ERK2)
胞质，
核
41kDa
肾，乳
腺，睾丸
等
CAA285 Hu22CAA285
Hu01
组蛋白
H3(Histone H3)
核17kDa
肝，肾，
肺，睾
丸，胃等
CAA591 CAA591 抗增殖细胞核抗核35kDa睾丸，小
Hu22Hu01原 (PCNA)肠，甲状
腺等
CAF548 Hu22CAF548
Hu01
核纤层蛋白
B1(LMNB1)
核66kDa脑，肝等
CAF550 Hu22CAF550
Hu01
核纤层蛋白
A/C(LMNA)
核74kDa平滑肌
CAB342 Hu22CAB342
Hu01
平滑肌肌动蛋白
α2(ACTa2)
胞质42kDa
平滑肌，
乳腺等
CAB341 Hu22CAB341
Hu01
心肌肌动蛋白
α1(ACTC1)
胞质42kDa肌肉
CAB340 Hu22CAB340
Hu01
肌动蛋白
β(ACTb)
胞质45kDa
阑尾，脾
扁桃体，
胃，乳腺
等
CAB870 Hu22CAB870
Hu01
微管蛋白
β(TUBb)
胞质54kDa
脑，睾
丸，皮
肤，结肠
等
CAB081 Hu22CAB081
Hu01
70kDa 热休克蛋
白 1A(HSPA1A)
胞质70kDa
食道，甲
状腺等
CAB021 Hu22CAB021
Hu01
连环蛋白
β1(CTNNb1)
胞质85kDa
结肠，皮
层神经元
等
CAB839 Hu22CAB839
Hu01
纽蛋白 (VCL)胞质124kDa肌肉
CAG901 Hu22CAG901
Hu01
电压依赖性阴离
子通道蛋白
1(VDAC1)
线粒体
外膜
31kDa
肺，肝，
睾丸，胎
盘等
CAA280 CAA280 钙联蛋白 (CNX)内质网90kDa脑，胃，
Hu22Hu01肾等
CAB171 Hu22CAB171
Hu01
转铁蛋白受体
(TFR)
细胞膜84kDa肝
CAG369 Hu22CAG369
Hu01
钠/钾离子转运
ATP 酶α1 肽
(ATP1a1)
细胞膜100kDa
甲状腺，
胰腺，前
列腺等
CAC060 Hu22CAC060
Hu01
血小板衍生生长
因子受体
α(PDGFRa)
细胞膜123kDa
血小板，
脑，心。