实验3液泡系的超活染色与观察
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线粒体和液泡系的超活染色与观察(分析“染色”文档)共9张PPT
Fra bibliotek五、作业
• 1 ．绘出人口腔上皮细胞示线粒体的形态与 分布并简要分析。
• 2 ．绘出绿豆幼根根尖组织液泡系的形态与 分布并简要分析 。
• 2 ．洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察 3 ．材料：人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞、绿豆幼根根尖
1/5000詹纳斯绿Ｂ1-2滴，口腔上皮细胞（牙签刮取），载玻片于３７℃恒温染色10-15min，显微镜下观察．
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．．洋口葱腔•鳞上茎皮1内细/表胞5皮线0细粒0胞体0线的詹粒超体活纳的染超色斯活染绿色与Ｂ观察溶液１-2滴，洋葱鳞茎内表皮，载玻片于
察1/5．000詹• 纳斯1绿/Ｂ510-20滴，0口詹腔上纳皮斯细胞绿（牙Ｂ签刮1取-2）滴，载，玻片口于３腔７℃上恒皮温染细色10胞-15（min，牙显签微镜刮下观取察．），载玻片于３
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．．绘了出解人细口胞７腔和上细℃皮胞细器恒胞的示超温线活粒染染体色色的技形术1态0与-分1布5并m简要in分，析。显微镜下观察．
（一）线粒体的超活染色与观察
中性红对液泡3系7的℃染色恒具有温专一水性，浴将活染细胞色中的1液0泡-系1染5成m红i色n。，显微镜下观察．
1 ．观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、发育和分布；
• （二） 绿豆幼根根尖液泡系的中性红染色观察 实验三 线粒体和液泡系的超活染色与观察
1 ．观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、发育和分布；
实验三 线粒体和液泡系的超活染色 与观察
一、实验目的
• 1 ．观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的 形态、发育和分布；
• 2 ．了解细胞和细胞器的超活染色技术
二、实验原理
• 詹纳斯绿Ｂ可专一性地对对线粒体进行活染,这是由于 线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保
• 1 ．绘出人口腔上皮细胞示线粒体的形态与 分布并简要分析。
• 2 ．绘出绿豆幼根根尖组织液泡系的形态与 分布并简要分析 。
• 2 ．洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察 3 ．材料：人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞、绿豆幼根根尖
1/5000詹纳斯绿Ｂ1-2滴，口腔上皮细胞（牙签刮取），载玻片于３７℃恒温染色10-15min，显微镜下观察．
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．．洋口葱腔•鳞上茎皮1内细/表胞5皮线0细粒0胞体0线的詹粒超体活纳的染超色斯活染绿色与Ｂ观察溶液１-2滴，洋葱鳞茎内表皮，载玻片于
察1/5．000詹• 纳斯1绿/Ｂ510-20滴，0口詹腔上纳皮斯细胞绿（牙Ｂ签刮1取-2）滴，载，玻片口于３腔７℃上恒皮温染细色10胞-15（min，牙显签微镜刮下观取察．），载玻片于３
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．．绘了出解人细口胞７腔和上细℃皮胞细器恒胞的示超温线活粒染染体色色的技形术1态0与-分1布5并m简要in分，析。显微镜下观察．
（一）线粒体的超活染色与观察
中性红对液泡3系7的℃染色恒具有温专一水性，浴将活染细胞色中的1液0泡-系1染5成m红i色n。，显微镜下观察．
1 ．观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、发育和分布；
• （二） 绿豆幼根根尖液泡系的中性红染色观察 实验三 线粒体和液泡系的超活染色与观察
1 ．观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、发育和分布；
实验三 线粒体和液泡系的超活染色 与观察
一、实验目的
• 1 ．观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的 形态、发育和分布；
• 2 ．了解细胞和细胞器的超活染色技术
二、实验原理
• 詹纳斯绿Ｂ可专一性地对对线粒体进行活染,这是由于 线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察课件
熟酸性强且液泡
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
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•2、分离出的线粒体立即用詹纳斯绿B染色和放置2h后再染色，比 较
两者着色的差异。
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
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线粒体不会亮得那么明显. 因为詹纳斯绿B染色,利用的是氧化线粒体,使得线粒体的能量表现出 来。使得化学能转化成光能,让你发现.放置一段时间后,由于线粒体 失去的活性,所以氧化效果不明显,因而不会亮得那么明显.
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
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•3、分离叶绿体时应注意什么问题？
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
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分离过程最好在0～4℃的条件下进行；如果 在室温下,要迅速分离和观察
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
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液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
液泡系、线粒体的超活染色与观察 叶绿体的分离与观察
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
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一、实验目的
• 1、观察植物活细胞内液泡系的形态、数量、分布及演进过程 • 2、观察线粒体的形态 • 3、学习超活染色技术 • 4、掌握叶绿体的离心方法以及离心机的使用 • 5、观察叶绿体的形态
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
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• 二、线粒体的超活染色
• 取洋葱鳞茎内表皮细胞和人口腔黏膜上皮细胞，用1/5000的詹那 斯绿B染色15min(注意不可使染液干燥，必要时可再滴加几滴染 液），吸去染液，加一滴Ringer液，盖片观察。
液泡系线粒体的超活染色与观察及叶绿体的分离与观察
实验四线粒体和液泡系的超活染色与观察
实验三：线粒体和液泡系的超活 染色与观察
【课前预习】 1．什么是液泡系？ 2．为什么不能用一种活体染料同时观察 多种细胞器？
【目的要求】 1. 观察动植物活细胞内线粒体、液泡系 的形态、发育和分布 2. 了解细胞和细胞器的超活线粒体是细胞内一种重要细胞器，细胞的各项活动所 需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。 活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示 活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种 染色方法。詹纳斯绿 B（Janus green B）是线垃体的专 一性活细胞染色剂，毒性很小，属于碱性染料，解离 后带正电，由电性吸引堆积在线粒体膜上。线粒体中 细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，从而 使线粒体显色，而在周围的细胞质中染料被还原，成 为无色状态。细胞中的线粒体呈蓝绿色的颗粒。 中性红对液泡系的染色具有专一性，将活细胞中的液 泡系染成红色。
【实验结果】
口腔上皮细胞的线粒体分布
洋葱内表皮细胞线粒体分布
植物根尖液泡的中性红染色
【实验报告】 1．绘出人口腔上皮细胞示线粒体的形态 与分布并简要分析。 2．绘出小麦幼根根尖组织液泡系的形态 与分布并简要分析
【方法步骤】 1．线粒体的超活染色与观察 1）口腔上皮细胞线粒体的超活染色：1/5000詹纳斯绿 B1-2滴，口腔上皮细胞（牙签刮取），载玻片于37℃ 恒温染色10-15min，显微镜下观察。 2）洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察： 1/5000詹纳斯绿B溶液1-2滴，洋葱鳞茎内表皮，载玻 片于37℃恒温水浴染色10-15min，显微镜下观察。 2．小麦（或绿豆）幼根根尖液泡系的中性红染色观察 小麦（或绿豆）幼苗根尖（1-2cm）纵切面切片， 1/3000中性红溶液1滴染色5-10min，载玻片于37℃恒温 水浴，盖上盖玻片压扁根尖，显微镜下观察。
【课前预习】 1．什么是液泡系？ 2．为什么不能用一种活体染料同时观察 多种细胞器？
【目的要求】 1. 观察动植物活细胞内线粒体、液泡系 的形态、发育和分布 2. 了解细胞和细胞器的超活线粒体是细胞内一种重要细胞器，细胞的各项活动所 需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。 活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示 活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种 染色方法。詹纳斯绿 B（Janus green B）是线垃体的专 一性活细胞染色剂，毒性很小，属于碱性染料，解离 后带正电，由电性吸引堆积在线粒体膜上。线粒体中 细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，从而 使线粒体显色，而在周围的细胞质中染料被还原，成 为无色状态。细胞中的线粒体呈蓝绿色的颗粒。 中性红对液泡系的染色具有专一性，将活细胞中的液 泡系染成红色。
【实验结果】
口腔上皮细胞的线粒体分布
洋葱内表皮细胞线粒体分布
植物根尖液泡的中性红染色
【实验报告】 1．绘出人口腔上皮细胞示线粒体的形态 与分布并简要分析。 2．绘出小麦幼根根尖组织液泡系的形态 与分布并简要分析
【方法步骤】 1．线粒体的超活染色与观察 1）口腔上皮细胞线粒体的超活染色：1/5000詹纳斯绿 B1-2滴，口腔上皮细胞（牙签刮取），载玻片于37℃ 恒温染色10-15min，显微镜下观察。 2）洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察： 1/5000詹纳斯绿B溶液1-2滴，洋葱鳞茎内表皮，载玻 片于37℃恒温水浴染色10-15min，显微镜下观察。 2．小麦（或绿豆）幼根根尖液泡系的中性红染色观察 小麦（或绿豆）幼苗根尖（1-2cm）纵切面切片， 1/3000中性红溶液1滴染色5-10min，载玻片于37℃恒温 水浴，盖上盖玻片压扁根尖，显微镜下观察。
高中生物 实验三线粒体和液泡系的超活染色与观察
间期：即未进行细胞分裂的时期，又叫静止
期。在切片上这个时期的细胞数目最多，细 胞核无变化，具纯一构造核内染色质分布均 匀、核膜、核仁均存在。
前期：染色体形成时期。
细胞由不分裂状态逐渐转变为分裂状态，最 显著的是细胞核内的染色质。由分散状态形 成许多小颗粒[染色质粒]，进而连成细丝状， 最后成一条条的棒状。带状物即染色体，前 期之未。每一个染色体纵裂为二，但并不立 即分开，仍然互相靠拢，同时核膜，核仁逐 渐消失。
二、植物根尖分生组织压片法
1、取材
切取根长2－3厘米的洋葱根尖1厘米。洋 葱根尖的分裂高峰为夜间12点[一般在上午10 －11时、下午3 －4时取材最好]
2、固定解离
将切下的根尖立即投入盐酸酒精解离液
（浓盐酸和95%酒精各半混合）中，固定离 析，经10－20分钟取出，然后用流水冲3次， 或将材料放入水中。
[作业]
绘出有丝分裂各时期简图
药品： 盐酸酒精液：浓盐酸和95%酒精各半混合。 醋酸洋红染液：
实验三 植物细胞的 有丝分裂
[目的要求]
1、观察植物细胞的有丝分裂过程 2、学习根尖分生组织的压片技术
[材料用品]
洋葱或蚕豆根尖、显微镜、载玻片、盖 玻片、镊子、解剖针、醋酸洋红或改良 碱性品红、酒精灯。
[实验内容]
一、植物细胞的有丝分裂程
分为以下几个时期： 间期、前期、中期、后期、末期。
二、植物根尖分生组织压片法
1、取材 2、固定解离 3、染色与压片 4、镜检
[方法与步骤]
一、植物细胞的有丝分裂过程
取洋葱或蚕豆根尖压片（或已制好的洋葱根 尖纵切片）置显微镜下观察。仔细找出分裂的 细胞或正在分裂中各期细胞。正在分裂的细胞 内部发生了十分复杂的变化。在显微镜下可以 观察到显著的变化是细胞核。所以，平时着重 观察细胞核变化中的几个阶段。变化过程的连 续的，为了便于说明，分为以下几个时期
线粒体和液泡系的超活染色与观察实验报告
线粒体和液泡系的超活染色与观察实验报告实验目的：
1. 了解超活染色的原理；
2. 掌握超活染色的方法；
3. 观察线粒体和液泡系的结构特点；
4. 学习常用的显微镜操作技巧。
实验步骤：
1. 取一份新鲜叶片，用透明胶带轻轻压住叶片，将透明胶带带上的叶片剥离下来。
2. 将剥离下的叶片放在载玻片上，加一滴超活染色溶液，并用盖玻片盖住。
3. 用粗目显微镜观察叶片上染色体的变化情况，观察细胞器的数量和形态特征，用细目显微镜进行进一步观察和记录。
实验结果：
经过超活染色处理后，我们可以清晰地观察到叶片细胞的结构特点。
其中，线粒体是细胞内重要的细胞器之一，其形态大小各异，常常呈圆柱状，且有许多线粒体。
而液泡是细胞内的囊状体，它可以储存水分、营养物质、色素等，体积大小不一，可见度较低，需要用高倍显微镜进行观察。
实验分析：
超活染色是一种能够使细胞有机物分解的过程中的酶不会破坏细胞结构和细胞器的染色方法。
该方法对细胞膜和细胞器的染色效果非常好，有助于观察和研究细胞的生理和功能，尤其是在细胞形态变化研究和药物筛选方面有着广泛的应用。
实验总结：
本次实验，通过超活染色，我们成功地观察到了植物叶片细胞内线粒体和液泡系的形态特点。
同时，我们也掌握了常用的显微镜操作技巧，对现代生命科学领域中细胞结构和功能的研究提供了帮助。
高中生物 实验八、线粒体和液泡系的超活染色与观察
（二）液泡系的超活染色与观察
1、小麦或黄豆根尖细胞液泡系的中性红染色与观察
1) 实验前，将小麦或黄豆种子培养在培养皿内潮湿的滤 纸上，使其发芽，胚根伸长到1cm以上。
2) 取初生的小麦或黄豆幼苗根尖（约1—2cm长）,置于载 波片上,滴一滴Ringer液，用镊子或刀片小心将根尖 压成一薄片，吸去Ringer液，在材料上滴一滴1/3000 中性红染液，染色5—10分钟。
玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸 2. 试剂： Ringer液、1/5000詹纳斯绿B、1/3000中性红
3. 材料：人口腔上皮细胞、小白鼠肝细胞、洋葱 鳞茎内表皮细胞、小麦或黄豆幼根根尖。
四、实验方法
（一）线粒体的超活染色与观察
1、人口腔黏膜上皮细胞线粒体的超活染色观察 1）取清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上，滴两
滴1/5000詹纳斯绿B染液。 2）实验者用牙签宽头在自己口腔颊粘膜处稍用力刮取上
皮细胞，将刮下的粘液状物放入载玻片的染液滴中， 染色10——15分钟（注意不可使染液干燥，必要时可 再加滴染液），盖上盖玻片，用吸水纸吸去四周溢出 的染液，置显微镜下观察。
3）在低倍镜下，选择平展的口腔上皮细胞，换高倍镜或 油镜进行观察。可见扁平状上皮细胞的核周围胞质中， 分布着一些被染成蓝绿色的颗粒状或短棒状的结构， 即是线粒体。
2、洋葱表皮细胞液泡系的活体染色与观察：
1）撕取洋葱鳞茎内表皮
2）置于加有一滴1/3000的中性红染液的载玻片中，染色 5—10分钟
3）用吸水纸吸去染液，换上Ringer液，盖上盖玻片
4）显微镜下观察，可见被染成砖红色的中央大液泡。
六、注意事项：
1、在对口腔上皮细胞进行染色时不可使染液干燥， 可适当补加染液。
液泡系的超活染色与观察PPT课件
2020/1/5
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六、讨论与思考题
• 绘制洋葱根尖示意图，示细胞中液泡系的动 态变化（每个区绘3个以上细胞）。
• 简述从根尖的生长点到成熟区，根尖细胞中 的液泡发生了哪些变化？
的目光集中在细胞器研究层面上。
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二、实验原理
2020/1/5
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• 活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种 染色方法。
• 目的 显示生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的生命活动和产生任何
理化变化以致引起细胞死亡。 研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。
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二、实验原理
一般的生物材料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后，细胞膜被破坏，染 料才能进入细胞内部。但是，有一些染料(称"活体染料")却能进入活细胞， 它们是一些无毒或毒性很小的染色剂，能使细胞中某些特定结构着色。
活体染料多为碱性染料，如中性红、健那绿、次甲基蓝、甲苯胺蓝、亮焦油 紫及其它荧光结构有 专一性接合。
例如，中性红染液泡系，健那绿染线粒体。
2020/1/5
2020/1/5
转p35S::Naa10-GFP基因拟南芥幼苗的根尖进行活体染色
二、实验原理
低浓度的中性红染液是对植物细胞液 泡进行超活染色的最重要也最常用的弱 碱性染料。 中性红对液泡系的染色具有专一性， 只能将活细胞中的液泡系染成红色。
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实验 2 液泡系的超活染色与观察
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细胞（Cell）是由膜包围，并且能进行独立繁殖的原生质团，是最基本的结构和 功能单位。
细胞器是细胞质内具有独立的生理功能和一定化学组成的形态结构单元。 20世纪以来，随着细胞生物学和分子生物学研究的不断深入，科学工作者将更多
实验三 线粒体和液泡系的超活染色与观察
实验三线粒体和液泡系的超活染色与观察实验目的一、观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布。
二、学习一些细胞器的超活染色技术。
实验原理活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种染色方法。
它的目的是显示生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞舶死亡。
活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。
根据所用染色剂的性质和染色方法的不同，通常把活体染色分为体内活染与体外活染两类。
体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内，染料的胶粒固定、堆积在细胞内某些特殊结构里，达到易于识别的目的。
体外活染又称超活染色，它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块，以染料溶液浸染，染料被选择固定在活细胞的某种结构上而显色。
活体染料之所以能固定、堆积在细胞内某些特殊的部分，主要是染料的“电化学，，特性起重要作用。
碱性染料的胶粒表面带阳离子，酸性染料的胶粒表面带有阴离子，而被染的部分本身也是具有阴离子或阳离子，这样，它们彼此之间就发生了吸引作用。
但不是任何染料皆可以作为活体染色剂之用，应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料，而且总是要配成稀淡的溶液来使用。
一般是以碱性染料最为适用，可能因为它具有溶解在类脂质(如卵磷脂、胆固醇等)的特性，易于被细胞吸收。
詹纳斯绿B（Janus green B）和中性红（neutral red）两种碱性染料是活体染色剂中最重要的染料，对于线粒体和液泡系的染色各有专一性。
实验用品一、器材显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、双面刀、载玻片、凹面载玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。
二、试剂1．Ringer溶液氯化钠0.85g(变温动物用0.65g)氯化钾0.25g氯化钙0.03g蒸馏水100ml2. 10％、1／3 000中性红溶液称取0.5g中性红溶于50 ml Ringer液，稍加热(30~40'C)使之很快溶解，用滤纸过滤，装入棕色瓶于暗处保存，否则易氧化沉淀，失去染色能力。
实验三 线粒体和液泡系的超活染色与观察
实验用品
一、器材 显微镜、 恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、双面刀、载玻片、凹
面载玻片、表 面皿、吸管、牙签、吸水纸。
二、试剂 1．Ringer溶液
氯化钠
0.85g(变温动物用0.65g)
氯化钾
0.25g
氯化钙
0.03g
蒸馏水
100ml
2. 10％、1／3 000中性红溶液
称取0.5g中性红溶于50 ml Ringer液，稍加热(30~40'C)使之很快溶
作业
一、绘口腔上皮细胞示线粒体形态与分布。 二、绘蟾蜍胸骨剑突软骨细胞示液泡系形态与分布。
思考题
1. 用一种活体染色剂对细胞进行超活染色，为什么不能同时观察到线 粒体、液泡系等多种细胞器?
2. 小麦或黄豆根尖经中性红超活染色，为什么看到生长点的细胞中液 泡多，而且染色深，延长区细胞中液泡数量变少，染色浅? 3. 高等动物和高等植物细胞中的液泡系(高尔基体)分布上有何不
3. 在高倍镜下，可见软骨细胞为椭圆形，细胞核及核仁清楚易 见，在细胞核的上方胞质，有许多被染成玫瑰红色大小不一的泡 状体，这一特定区域叫“高尔基区”，即液泡系”。 （二）小麦根尖细胞液泡系的中性红染色观察 1. 实验前，把小麦种子或黄豆培养在培养皿内潮湿的滤纸上，使其发 芽，胚根伸长到l cm 以上。 2. 用双面刀片把出生的小麦或黄豆幼苗根尖(约l~2cm长)小心切一纵切 面，放入载玻片上的的l/3000中性红染液滴中，染色5～10min． 3. 吸去染液，滴一滴Ringer液，盖上盖玻片，并用镊子轻轻地下压盖玻 片，使根尖压扁，利于观察。 4. 在高倍镜下，先观察根尖部分的生长点的细胞，可见细胞质中散在很 多大小不等的染成致玫红色的圆形小泡，这是出生的幼小液泡。然 后，由生长点向延长区观察，在一些已分化长大的细胞内，液泡的 染色较浅，体积增大，数目变少。在成熟区细胞中，一般只有一个 淡红色的巨大液泡，占据细胞的绝大部分，将细胞核挤到细胞一侧 贴近细胞壁处。 从以上观察的结果，想想植物细胞液泡系的形态演进情况。
一、器材 显微镜、 恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、双面刀、载玻片、凹
面载玻片、表 面皿、吸管、牙签、吸水纸。
二、试剂 1．Ringer溶液
氯化钠
0.85g(变温动物用0.65g)
氯化钾
0.25g
氯化钙
0.03g
蒸馏水
100ml
2. 10％、1／3 000中性红溶液
称取0.5g中性红溶于50 ml Ringer液，稍加热(30~40'C)使之很快溶
作业
一、绘口腔上皮细胞示线粒体形态与分布。 二、绘蟾蜍胸骨剑突软骨细胞示液泡系形态与分布。
思考题
1. 用一种活体染色剂对细胞进行超活染色，为什么不能同时观察到线 粒体、液泡系等多种细胞器?
2. 小麦或黄豆根尖经中性红超活染色，为什么看到生长点的细胞中液 泡多，而且染色深，延长区细胞中液泡数量变少，染色浅? 3. 高等动物和高等植物细胞中的液泡系(高尔基体)分布上有何不
3. 在高倍镜下，可见软骨细胞为椭圆形，细胞核及核仁清楚易 见，在细胞核的上方胞质，有许多被染成玫瑰红色大小不一的泡 状体，这一特定区域叫“高尔基区”，即液泡系”。 （二）小麦根尖细胞液泡系的中性红染色观察 1. 实验前，把小麦种子或黄豆培养在培养皿内潮湿的滤纸上，使其发 芽，胚根伸长到l cm 以上。 2. 用双面刀片把出生的小麦或黄豆幼苗根尖(约l~2cm长)小心切一纵切 面，放入载玻片上的的l/3000中性红染液滴中，染色5～10min． 3. 吸去染液，滴一滴Ringer液，盖上盖玻片，并用镊子轻轻地下压盖玻 片，使根尖压扁，利于观察。 4. 在高倍镜下，先观察根尖部分的生长点的细胞，可见细胞质中散在很 多大小不等的染成致玫红色的圆形小泡，这是出生的幼小液泡。然 后，由生长点向延长区观察，在一些已分化长大的细胞内，液泡的 染色较浅，体积增大，数目变少。在成熟区细胞中，一般只有一个 淡红色的巨大液泡，占据细胞的绝大部分，将细胞核挤到细胞一侧 贴近细胞壁处。 从以上观察的结果，想想植物细胞液泡系的形态演进情况。
实验3液泡系的超活染色与观察
• 2 ．试剂： Ringer液，0.3%中性红 • 3 ．材料：洋葱幼根根尖
四、实验步骤
2021/3/6
5
• 初生根尖（1~2cm，纵切面切片）置于载玻 片上，0.3%中性红溶液１滴染色10~15 min
• 吸去多余染液，滴一滴Ringer液，盖上盖玻 片，用拇指垂直压盖玻片，使根尖压扁
• 显微镜下观察。
一、实验目的
1 ．观察植物活细胞内液泡系的形态、发育和分布； 2 ．掌握细胞和细胞器的超活染色技术
二、实验原理
2021/3/6
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• 活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着 色但又无毒害的一种染色方法。其目的是显示 生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的生命 活动和产生任何理化变化以致引起细胞死亡。 活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结 构和生理、病理状态。
2017413注意观察液泡的形态数目体积及染色深浅渐变根尖分生区细胞的细胞质中散步很多大小不等的圆形小泡即初生的幼小液泡伸长区的液泡染色较浅体积增大数目变少成熟区细胞中央一般可见一个淡红色的大液泡2017413绘制洋葱根尖示意图示细胞中液泡系的动态变化每个区绘3个以上细胞
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Hale Waihona Puke 1实验 3 液泡系的超活染色与观察
五、实验结果
2021/3/6
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注意观察液泡的形态、数目、体积及染 色深浅渐变
根尖分生区细胞的细胞质中散步很多 大小不等的圆形小泡，即初生的幼小 液泡
伸长区的液泡染色较浅，体积增大， 数目变少
成熟区细胞中央一般可见一个淡红色 的大液泡
五、实验结果
2021/3/6
7
六、讨论与思考题
2021/3/6
二、实验原理
2021/3/6
四、实验步骤
2021/3/6
5
• 初生根尖（1~2cm，纵切面切片）置于载玻 片上，0.3%中性红溶液１滴染色10~15 min
• 吸去多余染液，滴一滴Ringer液，盖上盖玻 片，用拇指垂直压盖玻片，使根尖压扁
• 显微镜下观察。
一、实验目的
1 ．观察植物活细胞内液泡系的形态、发育和分布； 2 ．掌握细胞和细胞器的超活染色技术
二、实验原理
2021/3/6
2
• 活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着 色但又无毒害的一种染色方法。其目的是显示 生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的生命 活动和产生任何理化变化以致引起细胞死亡。 活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结 构和生理、病理状态。
2017413注意观察液泡的形态数目体积及染色深浅渐变根尖分生区细胞的细胞质中散步很多大小不等的圆形小泡即初生的幼小液泡伸长区的液泡染色较浅体积增大数目变少成熟区细胞中央一般可见一个淡红色的大液泡2017413绘制洋葱根尖示意图示细胞中液泡系的动态变化每个区绘3个以上细胞
2021/3/6
Hale Waihona Puke 1实验 3 液泡系的超活染色与观察
五、实验结果
2021/3/6
6
注意观察液泡的形态、数目、体积及染 色深浅渐变
根尖分生区细胞的细胞质中散步很多 大小不等的圆形小泡，即初生的幼小 液泡
伸长区的液泡染色较浅，体积增大， 数目变少
成熟区细胞中央一般可见一个淡红色 的大液泡
五、实验结果
2021/3/6
7
六、讨论与思考题
2021/3/6
二、实验原理
2021/3/6
实验五：线粒体与液泡系的超活染色与观察
线粒体的形态, 大小,数目与分布
形态：线状，颗粒状 大小：长1.5m-3 m; 直径0.5-1.0 m。 胰脏外分泌细胞中有长达10~20μm的巨线粒体。 数目：几百到几千（与细胞种类，细胞生理功能和生理 状态有关）。 肝细胞约1700个线粒体，占细胞体积的20%； 许多哺乳动物成熟的红细胞无线粒体。 分布：不均匀（与细胞能量需求有关）
外活体染色。体外活体染色又称为超活染色。活体染料主要是靠染料的
“电化学”特性。例如碱性燃料就是靠表面带有的阳离子与被染的细胞部 分的阴离子相互吸引而着色。詹纳斯绿B和中性红即是最常用的两种。前 者是线粒体的专一活性染色剂，线粒体中的氧化酶使染料氧化即有色状态 （蓝绿色），而在周围空间中染料仍保持还原即物色状态。中性红对液泡 系的染色有专一性，而对核与胞质不着色。
实验五：线粒体与液泡系的超活染色与观察
一、实验目的：
1、观察动物、植物活细胞内的线粒体、液泡系的形态、数量与分布。 色是使生活有机体的细胞或组织进行特异性着色但对样品又没 有毒害作用的一种活体染色方法，既可以显示生活细胞内的某些特定结构 又不会影响细胞的生活状态和造成细胞死亡。通常分为体内活体染色和体
三、实验用品：
1 器材：显微镜，恒温水浴锅，刀片，镊子，载玻片，盖玻片，吸管，吸水纸。 2 试剂：
Ringer溶液（NaCl 0.85g，KCl 0.25g，CaCl20.03g，加蒸馏水100ml）；
10%、1/3000中性红溶液： 称取0.5g中性红溶于50ml Ringer液，稍加热 (30~40℃)使之很快溶解，用 滤纸过滤，装入棕色瓶于暗处保存。临用前，取已配制的1%中性红溶液1ml，加 入29ml Ringer溶液混匀，装入棕色瓶备用。 1%、1/5000詹纳斯绿B溶液： 称取50mg詹纳斯绿B溶于5ml Ringer溶液中，稍加微热(30~40℃)，使之溶 解，用滤纸过滤后，即为1%原液。取1%原液l ml加入49ml Ringer溶液，即成 1/5000工作液装入瓶中备用。最好现用现配。 3 实验材料：人口腔上皮细胞，黄豆根尖。
线粒体和液泡系的超活染色与观察(共7张PPT)
(1) 实验前，把黄豆培养在培养皿内潮湿的滤纸上，使其发芽，胚根伸长到1cm以上。
观察动、植(物2活) 细实胞验内线者粒用体、牙液泡签系宽的形头态在、数自量与己分口布；腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞，将刮下的
人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察
人口腔粘膜上皮细粘胞液线粒状体物的光放镜观入察载。 玻片的染液滴中，染色10~l5min(注意不可使染液干燥，
线粒体和液泡系的超活 染色与观察
第1页，共7页。
实验目的
1. 观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分 布；
2. 学习一些细胞器的超活染色技术。
第2页，共7页。
实验原理
1. 活体染色
体内活染 体外活染
2. 詹纳斯绿B 3. 中性红
第3页，共7页。
实验用品
1. 材料：人口腔上皮细胞，黄豆幼根根尖。 23.. 器试材剂：：➢➢➢显R11微//in镜35g00、e00r恒溶00 液中温詹性水纳红浴斯溶锅绿液、B剪溶刀液、镊子、双面刀 观学(黄 学人材(学人((人线(材((1人人线观1人人人学 人学(13133111//53))))))))察习豆习口料习口口粒料口口粒察口口口习口习00取 在 实 吸 在 取 实 取00动 一 根一 腔 ： 一 腔 腔 体 ： 腔 腔 体 动 腔 腔 腔 一腔 一清低验去低清验清00、些尖 些粘人些粘粘和人粘粘和、粘粘粘些 粘些詹中洁倍前染倍洁前洁植细细 细膜口细膜膜液口膜膜液植膜膜膜细 膜细纳性载镜，液镜载，载物胞胞 胞上腔胞上上泡腔上上泡物上上上胞 上胞斯红玻下把，下玻把玻活器液 器皮上器皮皮系上皮皮系活皮皮皮器 皮器绿溶片，黄滴，片黄片细的泡 的细皮的细细的皮细细的细细细细的 细的液B放选豆一选放豆放溶胞超系 超胞细超胞胞超细胞胞超胞胞胞胞超 胞超在择培滴择在培在液内活的 活线胞活线线活胞线线活内线线线活 线活平养平养3R33线染超染粒，染粒粒染，粒粒染线粒粒粒染粒染777in展在展在℃℃℃粒色活 色体黄色体体色黄体体色粒体体体色 体色g的培的培e恒恒恒体技染 技的豆技的的与豆的的与体的的的技 的技r液口养口养温温温、术色 术光幼术光光观幼超超观、超光光术 光术，腔皿腔皿水水水液。与 。镜根。镜镜察根活活察液活镜镜。 镜。盖上内上内浴浴浴泡观 观根观观根染染泡染观观观上皮潮皮潮锅锅锅系察 察尖察察尖色色系色察察察盖细湿细湿的的的的。。。。。与与的与。。。玻胞的胞的金金金形观观形观片，滤，滤属属属态察察态察，换纸换纸板板板、、并高上高上上上上数数用倍，倍，，，，量量镊镜使镜使滴滴滴与与子或其或其222分分滴滴滴轻油发油发布布111轻镜芽镜芽///；；555地进，进，000000下行胚行胚000詹詹詹压观根观根纳纳纳盖察伸察伸斯斯斯玻。长。长绿绿绿片到到BBB，11染染染cc使mm液液液以以根。。。上上尖。。压扁，利于观察。
观察动、植(物2活) 细实胞验内线者粒用体、牙液泡签系宽的形头态在、数自量与己分口布；腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞，将刮下的
人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察
人口腔粘膜上皮细粘胞液线粒状体物的光放镜观入察载。 玻片的染液滴中，染色10~l5min(注意不可使染液干燥，
线粒体和液泡系的超活 染色与观察
第1页，共7页。
实验目的
1. 观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分 布；
2. 学习一些细胞器的超活染色技术。
第2页，共7页。
实验原理
1. 活体染色
体内活染 体外活染
2. 詹纳斯绿B 3. 中性红
第3页，共7页。
实验用品
1. 材料：人口腔上皮细胞，黄豆幼根根尖。 23.. 器试材剂：：➢➢➢显R11微//in镜35g00、e00r恒溶00 液中温詹性水纳红浴斯溶锅绿液、B剪溶刀液、镊子、双面刀 观学(黄 学人材(学人((人线(材((1人人线观1人人人学 人学(13133111//53))))))))察习豆习口料习口口粒料口口粒察口口口习口习00取 在 实 吸 在 取 实 取00动 一 根一 腔 ： 一 腔 腔 体 ： 腔 腔 体 动 腔 腔 腔 一腔 一清低验去低清验清00、些尖 些粘人些粘粘和人粘粘和、粘粘粘些 粘些詹中洁倍前染倍洁前洁植细细 细膜口细膜膜液口膜膜液植膜膜膜细 膜细纳性载镜，液镜载，载物胞胞 胞上腔胞上上泡腔上上泡物上上上胞 上胞斯红玻下把，下玻把玻活器液 器皮上器皮皮系上皮皮系活皮皮皮器 皮器绿溶片，黄滴，片黄片细的泡 的细皮的细细的皮细细的细细细细的 细的液B放选豆一选放豆放溶胞超系 超胞细超胞胞超细胞胞超胞胞胞胞超 胞超在择培滴择在培在液内活的 活线胞活线线活胞线线活内线线线活 线活平养平养3R33线染超染粒，染粒粒染，粒粒染线粒粒粒染粒染777in展在展在℃℃℃粒色活 色体黄色体体色黄体体色粒体体体色 体色g的培的培e恒恒恒体技染 技的豆技的的与豆的的与体的的的技 的技r液口养口养温温温、术色 术光幼术光光观幼超超观、超光光术 光术，腔皿腔皿水水水液。与 。镜根。镜镜察根活活察液活镜镜。 镜。盖上内上内浴浴浴泡观 观根观观根染染泡染观观观上皮潮皮潮锅锅锅系察 察尖察察尖色色系色察察察盖细湿细湿的的的的。。。。。与与的与。。。玻胞的胞的金金金形观观形观片，滤，滤属属属态察察态察，换纸换纸板板板、、并高上高上上上上数数用倍，倍，，，，量量镊镜使镜使滴滴滴与与子或其或其222分分滴滴滴轻油发油发布布111轻镜芽镜芽///；；555地进，进，000000下行胚行胚000詹詹詹压观根观根纳纳纳盖察伸察伸斯斯斯玻。长。长绿绿绿片到到BBB，11染染染cc使mm液液液以以根。。。上上尖。。压扁，利于观察。
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• 2 ．试剂： Ringer液，0.3%中性红 • 3 ．材料：洋葱幼根根尖
四、实验步骤
2019/12/8
5
• 初生根尖（1~2cm，纵切面切片）置于载玻 片上，0.3%中性红溶液１滴染色10~15 min
• 吸去多余染液，滴一滴Ringer液，盖上盖玻 片，用拇指垂直压盖玻片，使根尖压扁
• 显微镜下观察。
五、实验结果
2019/12/8
6
注意观察液泡的形态、数目、体积及染 色深浅渐变
根尖分生区细胞的细胞质中散步很多 大小不等的圆形小泡，即初生的幼小 液泡
伸长区的液泡染色较浅，体积增大， 数目变少
成熟区细胞中央一般可见一个淡红色 的大液泡
五、实验结果
2019/12/8
7
六、讨论与思考题
2019/2/8
二、实验原理
2019/12/8
3
• 低浓度的中性红染液是对植物细胞液泡进行 超活染色的最重要也最常用的弱碱性染料。
• 中性红对液泡系的染色具有专一性，只能将 活细胞中的液泡系染成红色。
三、实验用品
2019/12/8
4
• 1 ．器材：显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、 解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸
2019/12/8
1
实验 3 液泡系的超活染色与观察
一、实验目的
1 ．观察植物活细胞内液泡系的形态、发育和分布； 2 ．掌握细胞和细胞器的超活染色技术
二、实验原理
2019/12/8
2
• 活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着 色但又无毒害的一种染色方法。其目的是显示 生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的生命 活动和产生任何理化变化以致引起细胞死亡。 活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结 构和生理、病理状态。
8
• 绘制洋葱根尖示意图，示细胞中液泡系的动 态变化（每个区绘3个以上细胞）。
• 简述从根尖的生长点到成熟区，根尖细胞中 的液泡发生了哪些变化？
四、实验步骤
2019/12/8
5
• 初生根尖（1~2cm，纵切面切片）置于载玻 片上，0.3%中性红溶液１滴染色10~15 min
• 吸去多余染液，滴一滴Ringer液，盖上盖玻 片，用拇指垂直压盖玻片，使根尖压扁
• 显微镜下观察。
五、实验结果
2019/12/8
6
注意观察液泡的形态、数目、体积及染 色深浅渐变
根尖分生区细胞的细胞质中散步很多 大小不等的圆形小泡，即初生的幼小 液泡
伸长区的液泡染色较浅，体积增大， 数目变少
成熟区细胞中央一般可见一个淡红色 的大液泡
五、实验结果
2019/12/8
7
六、讨论与思考题
2019/2/8
二、实验原理
2019/12/8
3
• 低浓度的中性红染液是对植物细胞液泡进行 超活染色的最重要也最常用的弱碱性染料。
• 中性红对液泡系的染色具有专一性，只能将 活细胞中的液泡系染成红色。
三、实验用品
2019/12/8
4
• 1 ．器材：显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、 解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸
2019/12/8
1
实验 3 液泡系的超活染色与观察
一、实验目的
1 ．观察植物活细胞内液泡系的形态、发育和分布； 2 ．掌握细胞和细胞器的超活染色技术
二、实验原理
2019/12/8
2
• 活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着 色但又无毒害的一种染色方法。其目的是显示 生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的生命 活动和产生任何理化变化以致引起细胞死亡。 活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结 构和生理、病理状态。
8
• 绘制洋葱根尖示意图，示细胞中液泡系的动 态变化（每个区绘3个以上细胞）。
• 简述从根尖的生长点到成熟区，根尖细胞中 的液泡发生了哪些变化？