微生物实验室菌株保存、使用、销毁记录

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微生物保存销毁记录

微生物保存销毁记录

数量 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 1支 ห้องสมุดไป่ตู้支 1支
手提式高压灭 菌器销毁条件 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 121℃ 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟 30分钟
标准菌株销毁记录表
何氏眼科医院化验室
时间
实验名称 微生物实验室
菌株名称 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌 粪肠球菌

检定菌保存、传代、使用、销毁标准操作规程

检定菌保存、传代、使用、销毁标准操作规程

检定菌保存、传代、使用、销毁标准操作规程1.目的:规范药品微生物学检定用菌的管理,最大限度降低变异率,确保菌种的溯源性与稳定性,从而确保微生物学检验结果的准确可靠。

2.依据:ChP2010版(一部)、《中国药品检验标准操作规范》(2010年版)。

3.范围:本规程适用于检定用菌种的管理,包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。

4.责任:4.1.QC主管负责菌种的申购、接受、保存、分发。

4.2.微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。

5.相关文件及术语:5.1.术语标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。

传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种,用于传代及制备工作用菌种。

工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后,作为日常工作使用的菌种。

菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内,每萌发一次即称为一代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。

6.标准:6.1.检定菌的申购QC主管每年根据检定菌种的使用情况(包括临时检验需要),提出购买计划,交由质量管理部部长审批后,向中检所菌种保藏中心或省(市)药检所购买冻干菌种(标准菌种);也可以直接向省(市)药检所购买传代用菌种,购买时,需询问与确定菌种的代数,以便传代时控制代数。

6.2.检定菌的接收菌种到达实验室后,由QC主管接收菌种,检查其名称和数量,以及每一支的完整性,同时将菌种的所有信息,填写在《检定菌接收记录》(附表1)上,内容包括:名称、数量、编号(无编号者按检定菌种的编号原则编号)、代数、来源、接收日期、接收人等,并将其暂贮存于4~8℃冰箱中,在一周内必须完成转种。

6.3.检定菌的保存6.3.1.工作用菌种的保存工作用菌种采用斜面低温保存法。

将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌生长充分以后,转移至4~8℃冰箱中保存。

此法仅用于工作用菌种的短期保存,并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,发现异常情况,经应灭活处理后销毁。

实验室菌(毒)种、运输、保存、使用与销毁管理制度

实验室菌(毒)种、运输、保存、使用与销毁管理制度

实验室菌(毒)种、运输、保存、使用与销毁管理制度1、实行“双人双锁”管理办法2、指定管理人员统一登记、保存、发放,按时传代,定期鉴定:2.1.普通琼脂斜面保存法肠道杆菌、葡萄球菌等一般细菌可接种于不含糖的普通琼脂斜面上,斜面底部应加少许无糖肉汤膏,以防干涸(但变形杆菌“OX”及伤寒沙门氏菌“O”菌株的保存,则不加肉汤膏)。

经35℃培养18—24小时后,移于4℃冰箱中,一般可保存1个月,每月传代1次。

2。

2。

血琼脂斜面保存法链球菌、肺炎链球菌应接种于血琼脂斜面上,35℃培养生长后,放4℃冰箱中保存,链球菌须半个月至1个月移种一次,肺炎链球菌的新分离菌株须2—4天移种一次,以后逐渐延长移种时间,在适应后可延至半个月移种一次. 2.3.脑膜炎奈瑟氏菌宜用巧克力斜面,并在35℃孵箱中保存,一般每2日移种一次,其他特殊细菌,则分别选用各自适宜培养基。

2。

4。

半固体穿刺保存法将细菌穿刺接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内,经35℃培养18—24小时,再以无菌手续加入灭菌液体石蜡约1cm厚度,移放于4℃冰箱中保存。

琼脂半固体适用于肠道杆菌及葡萄球菌等一般细菌的保存,一般可保存3-6个月。

血清琼脂半固体适用于链球菌、肺炎链球菌及脑膜炎奈瑟氏菌的保存。

2。

5。

菌种应由指定的专人负责保管,并由部门负责人经常督促检查,工作调动时,应及时作好全面交接工作。

2.6.菌种应存放于安全的地方,所用冰箱和柜应加锁 2。

7.菌种传代时,必须在无菌室或接种罩内进行,以防污染.2。

8.菌种必须每种设一记录卡,其内容包括:菌种名称、菌种编号、来源、分离日期、鉴定日期、鉴定者、鉴定结果、传代情况及所用培养基、保存方法、温度、使用转移及销毁情况、保存者、部门负责人等。

2。

9。

所保存的菌种应于规定时间定期移种,每移种三代作一次鉴定。

干燥菌种时,应于干燥前先行鉴定.如发现污染或变异,应及时处理。

2-22.10.用培养基保存菌种时,应有两套,其一供保存传代用,另一供日常使用时引种用。

微生物实验室菌种保存运输使用和销毁操作规程

微生物实验室菌种保存运输使用和销毁操作规程

微生物实验室菌种保存、运输、使用和销毁操作规程1目的正确保存菌种,防止菌种的流失,达到生物安全防护目的。

2范围适用于微生物室。

3责任经过培训合格并经授权的专业检验人员可进行本程序操作。

4菌种的保存4.1质控菌种的保存在中国菌种保存中心等合法的菌种中心购得标准菌株后,并填写《菌种购买记录》(附表1)。

将菌株转种于相应的培养基上,35℃培养24~48小时后,再转种二次,然后将纯菌种转入EP管(OXOID5g/L的胰蛋白+150ml甘油溶液分装与EP管中,每个EP管中分装菌种保存液1.5ml,高压灭菌后备用)中,菌种的浓度尽量高且研磨均匀。

放-80℃冰箱中冻存.可保存20年左右,并填写《质控菌种保存记录》(附表2)。

4.2临床菌种的保存临床分离株在分离鉴定后,若为非高致病性病原微生物,将纯菌种转入EP管(OXOID5g/L的胰蛋白+150ml甘油溶液分装与EP管中,每个EP管中分装菌种保存液1.5ml,高压灭菌后备用中,菌种的浓度尽量高且研磨均匀。

在EP 管管壁上写好标本号后放入-80℃的专用冰柜(配备双锁)中保存,可保存20年左右,并填写《微生物室菌种保存原始记录》(附表3)。

4.3临床疑难菌株的保存临床分离的疑难菌株在分离鉴定后,若为非高致病性病原微生物,将纯菌种转入EP管(OXOID5g/L的胰蛋白+150ml甘油溶液分装与EP管中,每个EP管中分装菌种保存液 1.5ml,高压灭菌后备用中,菌种的浓度尽量高且研磨均匀。

在EP管管壁上写好标本号后放入-80℃的专用冰柜(配备双锁)中保存,可保存20年左右,并填写《疑难菌种保存记录》(附表4)。

做好疑难菌株相关信息的登记。

钥匙由专人保管(双人双锁),如其中一名工作人员未在岗应将钥匙交给第三名在岗人员保管。

本室不保存高致病性病原微生物,若分离到该类病原微生物,应立即就地高圧灭菌销毁,并通知医院保健科和其他相关卫生防疫部门,严禁将该类病原微生物流传出本室。

菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程

菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程

菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程传代用菌种采用甘油冷冻管保存法。

将菌种接种在适宜的琼脂培养基上,待菌生长充分后,将菌液混合甘油并分装至冷冻管中,冷冻管标注菌种名称、代数、保存日期等信息,然后放置于-80℃冰箱中保存。

每年进行一次复苏和传代,保存时间不超过5年。

5.3.2.2液体石蜡保存法对于一些难以保存的菌种,采用液体石蜡保存法。

将菌种接种在适宜的琼脂培养基上,待菌生长充分后,将菌液混合液体石蜡并分装至玻璃瓶中,瓶口用铝箔密封,标注菌种名称、代数、保存日期等信息,保存温度为-70℃。

每年进行一次复苏和传代,保存时间不超过5年。

5.4菌种的传代传代用菌种每年进行一次复苏和传代。

复苏后,将菌种接种至适宜的琼脂培养基上,待菌生长充分后,按照规定的传代代数制备传代用菌种,并及时更新菌种库存记录。

5.5菌种的使用使用菌种前,应先确认菌种的品质和纯度,并按照规定的传代代数制备工作用菌种。

使用后,应及时更新菌种库存记录,并进行相应的消毒处理。

5.6菌种的销毁菌种在使用过程中,如出现变异或污染等情况,应及时进行应灭活处理,并填写《菌种销毁记录表》,经主管部门审核同意后,进行销毁处理。

菌种库存中长期未使用的菌种,应定期进行清理和销毁处理。

菌复苏、复壮;Sabouraud葡萄糖琼脂培养基:用于白色念珠菌复苏、复壮;青霉素-链霉素琼脂培养基:用于铜绿假单胞菌复苏、复壮。

5.4.1.1.3复苏步骤:1.取出保存好的菌种管,用接种针在酒精灯上消毒;2.将接种针在75%酒精中消毒,再用酒精棉球擦拭消毒;3.用接种针在相应的培养基上进行接种;4.置于适宜温度下孵育,待菌落出现后进行传代或进行实验。

5.4.1.2标准菌株的确认通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法进行鉴定,确认菌株的纯度和种属。

5.4.1.3标准菌株的传代将菌株从原始保存方式中转移到新的保存方式中,确保菌株的保存和传承。

传代次数不宜过多,一般不超过10代。

菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程

菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程

菌种管理制度1、目的建立菌种保存、传代、使用、销毁标准操作规程,规范微生物学检定用菌种的管理,最大限度降低变异率,确保菌种的溯源性与稳定性,从而确保微生物学检验结果的准确可靠。

2、适用范围本规程适用于检定用菌种的管理,包括菌种的购买、保存、传代、使用及销毁等。

3、定义➢标准菌株是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。

➢传代用菌种是指用标准菌株制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种,用于传代及制备工作用菌种。

➢工作用菌种是指用标准菌株或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后,作为日常工作使用的菌种。

➢菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内,每萌发一次即称为一代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。

4、职责4.1部门主管负责菌种的申购、接收、保存分发。

4.2微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。

5、规程5.1菌种的申购部门主管根据菌种的使用情况,提出年度购买计划(包括临时检验需要),填写申购流程,经审批后,向中检所菌种保藏中心或省(市)药检所购买冻干菌种(标准菌株)或传代用菌种,购买时,需确定菌种的代数,以便控制传代代数。

5.2菌种的接收菌种到达实验室后,由部门主管接收菌种,检查其名称和数量,以及每一支的完整性,同时将菌种的所有信息,填写在《标准菌株库存记录》上,内容包括:名称、数量、编号(无编号者按检定菌种的编号原则编号)、代数、来源、接收日期、接收人等,并将其暂贮存于4~8℃冰箱中,在一周内必须完成转种。

5.3菌种的保存5.3.1工作用菌种的保存工作用菌种采用斜面低温保存法。

将菌种接种在适宜的琼脂斜面培养基上,待菌生长充分以后,转移至4~8℃冰箱中保存。

此法仅用于工作用菌种的短期保存,并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,发现异常情况,经应灭活处理后销毁。

保存时间根据菌种种类而不同,细菌:每个月转种一次;酵母菌及芽胞:3~6个月转种一次;丝状真菌每年转种一次。

标准菌株的购置、验收、复活、确认、转代、储存、使用、废弃等

标准菌株的购置、验收、复活、确认、转代、储存、使用、废弃等

标准菌株的购置、验收、复活、确认、转代、储存、使用、废弃等1标准菌株的概念及其应用1.1标准菌株概念1)GB/T27405-2008实验室质量控制规范食品微生物检测:①标准培养物:标准菌株、标准储备菌株和工作菌株的统称。

①标准菌株:至少定义至属或种水平的菌株。

按其特征进行分类和描述,有明确的来源。

①标准储备菌株:标准菌株经过一代转接后获得的同种菌株。

①工作菌株:由标准储备转接后获得的同种菌株。

1.2标准菌株的应用:各种国际标准、国家标准、行业标准及企业标准等的相关微生物检测,用于验收培养基(包括试剂盒)、验证方法和评估实验操作。

2微生物菌种管理的相关流程2.1菌株的采集:实验室用菌种一是到国家法定机构采购,二是购买ATCC菌种,三是科研中菌种交流。

不管是哪种来源,均统一采集。

采集中严格按照规范执行。

要求包装可靠,采集迅速,不泄漏不污染。

保证菌种合格和环境安全。

采集中要有菌种传代标识。

选择有资质的标准菌株的合格供应商,每批标准菌株必须附带有供应商的合格证或检测报告或说明书,来证明所采购的标准菌株是合格的。

2.2标准菌株和验收实验室收到标准菌株,首先应进行符合性感官检查,记录菌株号和标准菌株来源途径信息,确保溯源性清楚。

同时还应记录标准菌株名称和数量、生产日期、接收日期和有无破损等情况。

2.3冻干标准菌株的复活①开启产品包装:先用70%酒精棉擦拭外包装,从凹口处撕开产品外包装,撕掉标签上的拉片,将其贴于菌株接收、保存记录序号前面。

①复活:选择合适的培养基和培养条件(根据生产商说明或有关技术通则见附录)进行复活。

菌种的首次活化最好是在非选择性琼脂培养基上,除非特殊情况或特别推荐,一般不用液体培养基。

冻干菌株的传代次数不得超过5代,从标准菌株保藏中心购买的冻干标准菌株为第F0代。

捏管帽处安瓿瓶(仅一次)使其释放水合液体。

垂直握住安瓿瓶并轻拍之,使液体流入含小球的管底。

通过挤捏压碎小球使其与液体混合,立即将拭子浸于水合液体。

205菌种复苏、传代、保存、使用、销毁标准操作规程

205菌种复苏、传代、保存、使用、销毁标准操作规程

1 目的规范微生物学检定用菌的管理,最大限度降低变异率,确保菌种的溯源性与稳定性,从而确保微生物学检验结果的准确可靠。

2 适用范围本规程适用于检定用菌种的管理,包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。

3 术语3.1 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。

3.2 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种,用于传代及制备工作用菌种。

3.3 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后,作为日常工作使用的菌种。

3.4 菌种的传代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内,每萌发一次即称为一代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。

4 职责4.1 品管部主管负责菌种的申购、接收、保存、分发。

4.2 微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。

5内容5.1冻干菌种的复苏菌种复苏、接种在超净工作台内按无菌操作要求进行。

准备好菌种安瓿管(安瓿管从冰箱取出后首先置室温30分钟)、灭菌的毛细滴管、培养皿、镊子、1ml注射器(配有长针头)、营养肉汤培养基、灭菌水及琼脂斜面,将以上物品移入菌种室,用75%乙醇棉球擦净安瓿管外壁放在无菌培养皿内晾干,点燃酒精灯,将安瓿管的封口一端在火焰烧灼红热,用毛细管吸取灭菌水少许滴在灼热处,使其骤冷而炸裂。

在不离开火焰圈内,迅速用1ml注射器抽取0.3ml肉汤培养基加入安瓿管内并摇动使冷冻块溶解,摇匀。

用注射器吸取该安瓿管中内溶物分别接种至1支肉汤培养基、2支琼脂斜面培养基。

将接种后的肉汤及培养基斜面根据菌种特性分别置于菌种相适宜的温度培养,培养完毕,取出培养物,用无菌接种环蘸取少许肉汤培养物,然后在平皿接种处进行划线使其形成单菌落,根据菌种特性分别置于适宜的温度下培养18-24小时,进行革兰染色镜检及相应的生化试验或采用细菌鉴定条对其进行确认。

如不符合要求,应及时与生产商联系。

5.2菌种传代5.2.1准备准备需用的培养基斜面,在培养基管上贴注牢固的标签,标签上注明菌名及接种日期。

菌种保存、传代、使用、销毁管理及操作规程【最新版】

菌种保存、传代、使用、销毁管理及操作规程【最新版】

菌种保存、传代、使用、销毁管理及操作规程菌种管理制度1、目的建立菌种保存、传代、使用、销毁标准操作规程,规范微生物学检定用菌种的管理,最大限度降低变异率,确保菌种的溯源性与稳定性,从而确保微生物学检验结果的准确可靠。

2、适用范围本规程适用于检定用菌种的管理,包括菌种的购买、保存、传代、使用及销毁等。

3、定义标准菌株是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。

传代用菌种是指用标准菌株制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种,用于传代及制备工作用菌种。

工作用菌种是指用标准菌株或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后,作为日常工作使用的菌种。

菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内,每萌发一次即称为一代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。

4、职责部门主管负责菌种的申购、接收、保存分发。

微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。

5、规程菌种的申购部门主管根据菌种的使用情况,提出年度购买计划(包括临时检验需要),填写申购流程,经审批后,向中检所菌种保藏中心或省(市)药检所购买冻干菌种(标准菌株)或传代用菌种,购买时,需确定菌种的代数,以便控制传代代数。

菌种的接收菌种到达实验室后,由部门主管接收菌种,检查其名称和数量,以及每一支的完整性,同时将菌种的所有信息,填写在《标准菌株库存记录》上,内容包括:名称、数量、编号(无编号者按检定菌种的编号原则编号)、代数、来源、接收日期、接收人等,并将其暂贮存于4~8℃冰箱中,在一周内必须完成转种。

菌种的保存工作用菌种的保存工作用菌种采用斜面低温保存法。

将菌种接种在适宜的琼脂斜面培养基上,待菌生长充分以后,转移至4~8℃冰箱中保存。

此法仅用于工作用菌种的短期保存,并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,发现异常情况,经应灭活处理后销毁。

保存时间根据菌种种类而不同,细菌:每个月转种一次;酵母菌及芽胞:3~6个月转种一次;丝状真菌每年转种一次。

菌种传代、保存、使用、销毁操作规程(第一版第0次修订)

菌种传代、保存、使用、销毁操作规程(第一版第0次修订)

1术语标准菌株是指由微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。

传代用菌种(标准储备菌株)是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种,用于传代及制备工作用菌种。

工作菌株是指用标准菌种或传代用菌种接种至相应固体或液体培养基后作为日常工作使用的菌种。

菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基培养上,每萌发一次即称为一代,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。

2操作程序2.1菌种接收(验收)菌种到达实验室后,由菌种管理人员接收菌种,检查其名称和数量,以及每一支的完整性,同时将菌种的所有信息,进行记录,内容包括:名称、编号、数量、代数、来源、接收日期、接收人等,并将其贮存于菌种说明书规定条件中,在有效期内完成菌种复苏。

2.2菌种复苏、复核、传代按菌种所附说明书进行复苏培养,或按检验标准中菌株的要求接种至适宜培养基内适宜温度和时间进行培养。

必要时按相应检验标准复核菌株,即接种上述培养物至适宜培养基中,适宜温度和时间进行培养后,观察菌落形态,或进行革兰氏染色及镜检,必要时进行进一步生化鉴定。

若菌种不纯或疑有污染,应查因及处理。

菌种复核后转接斜面或按冻存管说明书制备冻存液。

菌种管编号,将菌种冻存管冻存、斜面相应温度培养后适宜温度保存或使用。

菌株传代、使用不超过5代。

操作完成及时予以记录。

2.3菌种保存斜面低温保存法:将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌生长充分以后,转移至4~8℃冰箱中保存。

此法用于菌种的短期保存,使用时若发现污染杂菌和变异等异常情况,应停止使用并灭活销毁。

冻存管法:按产品说明书操作与保存。

斜面低温保存法主要用于工作菌种的保存,保存时间根据菌种种类不同而不同,细菌与酵母菌一般2个月,霉菌及芽胞一般3个月;冻存管法用于传代菌种的保存。

2.4实验室菌种的编号采用字母加数字表示:菌株保藏编号(代次)-保存年份-顺序号。

代次用G带有下标数字表示。

2.5菌种保管保存、领用与销毁菌种设双人双锁保管、领用。

菌株的保存使用_及销毁(精制甲类)

菌株的保存使用_及销毁(精制甲类)

菌株的保存使用及销毁1、新引进的菌种经形态、染色、培养性状、生化特性等的鉴别确定后作记录,并进行保存。

2、自主分离筛选的菌株经试验确定为优良菌株,并进行形态、染色、培养性状、生化特性、毒性等的鉴别确定(必要时进行分子鉴定)后作记录,并进行保存。

3、应用菌株采用斜面低温保存法。

将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌株生长充分以后,转移至 4~8℃冰箱中保存。

此法仅用于应用菌种的短期保存,并应随时检查其污染杂菌和变异等情况,发现异常情况,经应灭活处理后销毁。

保存时间根据菌种种类而不同,细菌:1个月;酵母菌:2个月;霉菌及芽胞:3个月。

4、半储存菌株以甘油冷冻管保存法或液体石腊封存的半固体琼脂为主。

甘油浓度为10%~20%,保存温度为-20~-30℃,每隔1~2年转种一代。

此种方法主要适用于需氧细菌和酵母菌的保藏5长期保存的储存菌株以冷冻干燥保藏为主,特殊要求的菌种可用其它方法进行保存,保存期可长达几年至几十年。

6菌种的传代不可超过6次。

视菌种的特性及使用情况,一般储存菌株每5年传代一次,每隔1~2年从储存菌株转接至半储存菌株,半储存菌株每1~2年传代一次,每1~3个月从半储存菌株转接接至应用菌株。

7、菌种的确认:用无菌接种环取上述培养物接种到营养琼脂培养基(细菌)或玫瑰红钠培养基(真菌和酵母菌)平板上,或相应的宜于该菌生长的鉴别培养基平板上,然后在 30~35℃下培养3天(细菌);20~25℃下培养 5 天(真菌和酵母菌)。

培养后,首先观察其是否具有典型的菌落形态,然后挑取生长旺盛的单一的纯菌落,划线于平皿培养基,每种菌划 4 个平皿,以便收集较多的生长旺盛的典型单菌落,进行保存和鉴定。

鉴定时作革兰氏染色、镜检,观察其染色特性及形态特征。

必要时再做生化实验以进一步鉴定该菌种。

若在该平板上发现有其它菌落生长,则说明操作有污染或菌种不纯,应将此被污染了的培养物灭活处理,并寻找原因。

应根据其原因采取措施重新分离挑选纯菌落。

实验室菌种、运输、保存、使用与销毁管理制度

实验室菌种、运输、保存、使用与销毁管理制度

实验室菌(毒)种、运输、保存、使用与销毁管理制度1、实行“双人双锁”管理办法2、指定管理人员统一登记、保存、发放,按时传代,定期鉴定:.普通琼脂斜面保存法肠道杆菌、葡萄球菌等一般细菌可接种于不含糖的普通琼脂斜面上,斜面底部应加少许无糖肉汤膏,以防干涸(但变形杆菌“OX”及伤寒沙门氏菌“O”菌株的保存,则不加肉汤膏)。

经35℃培养18-24小时后,移于4℃冰箱中,一般可保存1个月,每月传代1次。

.血琼脂斜面保存法链球菌、肺炎链球菌应接种于血琼脂斜面上,35℃培养生长后,放4℃冰箱中保存,链球菌须半个月至1个月移种一次,肺炎链球菌的新分离菌株须2-4天移种一次,以后逐渐延长移种时间,在适应后可延至半个月移种一次。

.脑膜炎奈瑟氏菌宜用巧克力斜面,并在35℃孵箱中保存,一般每2日移种一次,其他特殊细菌,则分别选用各自适宜培养基。

.半固体穿刺保存法将细菌穿刺接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内,经35℃培养18-24小时,再以无菌手续加入灭菌液体石蜡约1cm厚度,移放于4℃冰箱中保存。

琼脂半固体适用于肠道杆菌及葡萄球菌等一般细菌的保存,一般可保存3-6个月。

血清琼脂半固体适用于链球菌、肺炎链球菌及脑膜炎奈瑟氏菌的保存。

.菌种应由指定的专人负责保管,并由部门负责人经常督促检查,工作调动时,应及时作好全面交接工作。

.菌种应存放于安全的地方,所用冰箱和柜应加锁.菌种传代时,必须在无菌室或接种罩内进行,以防污染。

.菌种必须每种设一记录卡,其内容包括:菌种名称、菌种编号、来源、分离日期、鉴定日期、鉴定者、鉴定结果、传代情况及所用培养基、保存方法、温度、使用转移及销毁情况、保存者、部门负责人等。

.所保存的菌种应于规定时间定期移种,每移种三代作一次鉴定。

干燥菌种时,应于干燥前先行鉴定。

如发现污染或变异,应及时处理。

2-2.用培养基保存菌种时,应有两套,其一供保存传代用,另一供日常使用时引种用。

.培养菌种的试管和干燥菌种的安瓶上应贴纸签或胶布签,写明编号和菌名及日期。

标准菌株的购置、验收、复活、确认、转代、储存、使用、废弃等

标准菌株的购置、验收、复活、确认、转代、储存、使用、废弃等

为F3代。
2.4工作菌株确认方法及依据 用无菌接种环取上述培养物,在相应的培养基平板(营养琼脂、大豆胰蛋白 胨琼脂)上或相应的细菌鉴别平板(如伊红美蓝、麦康凯、BP等上划线分离单个 菌落,置适宜条件下培养(若该类微生物为厌氧菌,则培养条件应为厌氧条件) 以同样方法取真菌和酵母菌至SDA(萨布罗培养基)平板上或玫瑰红钠培养基平 板上,23~28℃下培养7d;培养后观察是否具有典型的菌落状态,然后挑取单一 纯菌落,进行革兰染色、镜检,观察其染色特征及菌体形态以确定菌种。 2.5 污染处理 假如在该平板上发现有其他菌落生长,则说明操作有污染或菌种不纯。要将 该污染培养物做灭菌处理,寻找原因,重新分离挑选纯菌落。
标准菌株的ห้องสมุดไป่ตู้理
标准菌株管理-目录
1 及 标准菌株概念及其应用
2
标准菌种管理的相关流程
3
实验室常用菌种保存方法
一、标准菌株的概念及其应用
1.1标准菌株概念
1)GB/T 27405-2008 实验室质量控制规范食品微生物检测: 1、标准培养物:标准菌株、标准储备菌株和工作菌株的统称。
2、标准菌株:至少定义至属或种水平的菌株。按其特征进行分类和
方法13
先接种于10B精氨酸肉汤,作系列梯度稀释35℃正常培养至
培养基变成粉红色,接入A-8琼脂。
二、微生物菌种管理的相关流程
2.3.3将TSB生长的浓菌液吸0.5mL于菌株保藏管充分混匀后将液体吸出,将保藏
管-18℃保存1-3年为标准储备菌株F2代。将平板上生长的良好菌株接种于营养琼 脂斜面(副溶血性弧菌用3%氯化钠营养琼脂)36℃培养24h当作工作菌株,记录
描述,有明确的来源。 3、标准储备菌株:标准菌株经过一代转接后获得的同种菌株。 4、工作菌株:由标准储备转接后获得的同种菌株。
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