评价三种方法检测超广谱β—内酰胺酶

VITEK-2检测超广谱β-内酰胺酶结果的评价

何文军，罗强，月容，颖婷，魏陈徐宁
（东省中医院芳村分院，东广州５０７）广广１３０
［摘要】目的：了解ＶＴＫ２检测肺炎克雷伯茵和大肠埃希茵产超广谱Ｂ内酰胺酶（ＳＬ）ＩＥ．一ＥＢｓ的可靠性，并明确
４讨论
考虑可能有以下几个原因：手术引起严重心律失常，包括室性
Ａ是指某支冠状动脉严重狭窄或完全闭塞而致部分心ＭＩ肌缺血性坏死。Ａ心电图的特征性改变主要是ＳＭＩＴ段的升
心动过速或室颤（壁组１例）心源性休克或低血压（前；下壁组ｌ例）心室穿孔（；下壁组１例）手术操作者技术原因等诸；多因素造成。但从总体来讲，通过手术前后资料对比发现，急诊ＰＣＴＡ对于提高Ａ患者心肌血流灌注还是有明显疗效ＭＩ
１７：６４－６９０２８２８．
急诊ＰＣＴＡ可有效降低Ａ急性病死率。从本例研究来看，ＭＩ
５７例Ａ患者急诊手术后，ＭＩ绝大部分患者ｓＴ段明显回落，
ＴＰ数值上升，Ｍ临床症状减轻，情稳定，病这些都是我们所期望的。但也有极少部分患者ｓＴ段持续上抬，症状加重，如前壁组中术后转入心外科者即是如此，还有少部分患者术后病
２０２Ｏ．３２－３６
冠状动脉成形术，用Ｓｌｉｅ法经皮穿刺股动脉，采ｅｎｒｄｇ将球囊
导管逆行送入冠状动脉病变部位，加压充盈气囊以扩张狭窄处，使血管内径扩大，从而改善心肌血流灌注、解症状并减缓少心肌梗死发生的一种导管治疗技术。从国际的研究来看，

全自动微生物鉴定仪检测超广谱β—内酰胺酶的评价

３讨论
注：固仪器检测ＥＢ（时．ＳＬ＋）药敬结果接受专家系统建议．带的药物耐药串为敬１０．际耐药率要比１００％实０％柑低
华医学检驻杂志，９，２４：８１９２（）２９２
２叶惠芬．意玲，尚文三种方法检测超陈李广谱内酰胺酶的结果比较岭南医学检验与临床，０ｌ４１：２０，（）４
表ＩＶＴＫＡ仪与确认试验检测ＩＥ－ＭＳ岱ＢＬ结果的比较株
ＮＣｓ推荐的纸片确认法检测ＥＢＣＬｓＬ时．如仪器检测阴性而确认法为阳性．合结细菌的药敏结果，果表现为多重耐药如且符合鸱ＢＬ的耐药特点，推测该菌为则产ＥＢ＇２资料显示．种方法检测ｓ表Ｌ两ＥＢｓＬ均阳性的细菌与仪器检测阴性而确
（收稿日期：０１８—２２０ —０７）
认法阳性的耐药率无差异（＝０８．Ｐ＞０ｏ）而这二者与两种方法均阴性．５，
的耐药率有显著差异（２，＜０ｙ＝１ｌＰ９．
表２两种方法产磷乱与非产ＩＢ￣ＬＳ
１７０株肠杆菌科细菌进行ＥＢＳＬ检测．具
２结果
从分离出的１株肠杆菌科细菌中．０７大肠埃希菌４株、炎克雷伯菌４株、他ｌ肺０其肠杆菌科细菌苗株。ｖＩＡ共检出产ｒ Ⅱ ＥＢ细菌剪株，ＳＬ确认试验检出甓株，菌各属检测情况见表１。对产ＥＢＳＬ与非产ＥＢＳＬ菌株的耐药性作比较，见表２。

仪器法与纸片协同法检测超广谱β-内酰胺酶的初步评价

检测方法：根据Ｖｉｔｅｋ — ＡＭＳ型全自动细菌分析系统操作步骤及ＧＮＳ一５０６药敏卡说明书操作．当药敏试
题，并引起医疗界的高度重视，ＥＳＢＬｓ是革兰阴性菌耐药的最危险的因素之－１ ” ，其特点是可通过质粒传递给其他细菌．从而导致大规模的医院感染发生。ＥＳＢＬｓ的臭鼻克雷伯菌首
次于上世纪八十年代由德国报道检出后｜２－３１，国内外不断有超
卡指示试验完成后输入相应的细菌名称。仪器会自动给出产
超广谱Ｂ一内酰胺酶结果。
１～统计学方法数据采用ＳＰＳＳ１３．０统计学处理，计量资料以）表示，组间ｔ检验，计数资料采用检验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学
中国初级卫生保健２０１３年５月第２７卷第５期（总第３２９期）
仪器法与纸片协同法检测超广谱Ｉ３一内酰胺酶的初步评价
谢海宝① ，童美琴①
关键词仪器法；纸片协同法；超广谱口一内酰胺酶
ｄ０ｉ：ｌＯ．３９６９０．ｉｓｓｎ．１００１－５６８Ｘ．２０１３．０５．００６６［中圈分类号］Ｒ９１４［文献标识码】Ｂ［文章编号］１００１ — ５６８Ｘ（２０１３）０５ — ０１２５ — ０２实验室常用的超广谱Ｂ一内酰胺酶的检测方法主要有

生物被膜大肠埃希菌AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶的检测

ｂｏｉｏｃｅｉｈｉｏｉｉｆｌｍｆＥｓｈｒｃａｃｌ
ＬｉＮａ—ｉｇ，ＨｅＰｉｇａｄＬｈｎ — ｉｉｊｎｎｎｉＳｅｇｑ
（ｅＳｃｎｆｉｔｄＨｏｐｔｌＴｈｅｏｄＡｆｉａｅｓｉａ，ＣｈｎｅｉａｉｅｓｔｌｉａＭｄｃｌＵｎｖｒｉｙ，Ｓｅｙｎ０４ｈｎａｇ１０）１０
中图分类号：Ｒ３８２７．１文献标识码：Ａ
Ｂ的形成和产生ＥＢｓＡｍｐＦＳＬ及Ｃ酶的协同作用是大
ＩｅｔｇｔＯｎｔｎＶｓｉａｉｎｏｈｅＡｍｐａｄＥＳＣｎＢＬｓｐｏｃｄｉｈｒｄｕｅｎｔｅ
３．（２４）１．（／０；Ｆ大肠埃希菌（０Ｏ１／０和２５５４）ＢＢ组）产Ａｍｐ酶，产ＥＢｓ及同时产ＥＢｓ和ＡｍＣ酶的菌株分别为单Ｃ单ＳＬＳＬｐ１．％（／０、５Ｏ（８４）２．％（／０。对Ａ组和Ｂ组的检出率两两分别进行检验，果均为Ｐ＜００。产酶有Ｂ０Ｏ４４）４．％１／０和２５９４）结．５Ｆ大肠埃希菌对１Ｏ种抗生素（亚胺培南全部敏感外）耐药率均较高。结论除的肠埃希菌耐药的主要原因之一。关键词：大肠埃希菌；生物被膜；超广谱内酰胺酶；ＡｍｐＣ酶
李乃静何平 ‘ 李胜岐

什么是超广谱β内酰胺酶

什么是超广谱β内酰胺酶超广谱β-内酰胺酶（也称为ESBLs）是一类由质粒介导的2be类β-内酰胺酶，能水解氧亚氨基- β内酰胺抗生素，大多数能被β-内酰胺酶抑制剂如克拉维酸(CA)所抑制。

临床药师建议，根据加用甲基苯丙胺患者血友病感染指数增高情况，停用头孢菌素-舒巴坦和阿莫西林；根据痰培养结果，建议放弃糠醛，继续使用美洛戊烷；根据患者临床症状的改善，ESBLS引起的肺炎推荐继续使用头孢菌素舒巴坦治疗，同时停用醋曲沙明。

结果：医生遵循了临床药师的建议。

治疗后，患者体温、化验指标恢复正常，痰培养结果为阴性。

胸部CT显示感染源较之前明显吸收。

出院后，经随访发现患者预后良好。

什么是超广谱β内酰胺酶第一，超广谱β-内酰胺酶的耐药性特征：如果临床出现产ESBL菌株，则对第三代头孢菌素（如头孢他啶、头孢克肟、头孢曲松等）和单环酰胺类抗生素（铵盐）耐药。

实验室有专门的ESBL检测方法。

如果患者的药敏报告表明是产ESBL菌株，MIC>=2μg/ml，或CAZ=<22mm，ATM=<27mm，CTX=<27mm，Cro=<25mm，则说明该菌株产ESBL酶。

在这种情况下，即使是实验室报告“敏感”的第三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素也不推荐用于临床。

第二，超广谱β内酰胺酶的传播：导致ESBL出现和传播的主要因素是第三代头孢菌素的过度使用。

如果ESBL产生的菌株出现在临床环境中，它们将在医院和不同病区之间传播，导致高临床死亡率和高可持续性培养，应引起应有的重视。

一旦ESBL产生菌株，应立即停止使用第三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素治疗。

对于产ESBL菌株，碳青霉烯类如：亚胺培南西司他汀，是首选治疗方法。

其次是选用头霉素类，如头孢美唑等，再次，β内酰胺酶的抑制剂复方制剖，如头孢哌酮钠舒巴坦钠。

如何治疗超广谱β内酰胺酶由产生ESBL的细菌产生的诱导物被去除。

这些措施包括及时拔除各种侵入性导管、尽量缩短住院时间、严格使用抗生素以防止产生ESBL的细菌在医院内传播。

对仪器法检测产超广谱β—内酰胺酶的评价

陈淑贞
（头＿学医学院第一跗倡医院检验科汕＾广汕头５５４］０］
提要
目的：了解 ⅥⅡ＿Ａ检测革兰氏刚性杆菌产超广谱由酰胺酶（ｓＬ的可靠性和本科单兰氏阴性杆菌产ＥＢＫＭ｝＿ＥＢ）ＳＬ的
．
情况。方法：用ＶＴＫＡ药敏卡ＧＵ５６进行ＥＢＩＥ－ＭＳＮ０ＳＬ检测，并纸片确认法作对照。结果：ＥＢｓＬ捡出率仪器法为３％８０
酰胺类和单酰胺类抗生素，因此给临床治疗带来了
极大困难。ＥＢＳＬ可通过多种形式进行耐药性扩散，
ＡｓａｔＯｊｔｅｏｉｅｉｔｔｅａｉｔｏＶＴＫＡＳｆｅｄｔｔｎｏｔｉｆ＇ｎｎｇｔｅｂｃｌｂｔｃｒｂｉ：Ｔｖｓｇｅｈｒｉｌｙｆ１Ｅ — Ｍｒｈｅｉｆｒｎｏ￣ｒｅａｖａｉｉｃｅｖｎｔａｅｌｂｉｏｔｃｅｏｓａｓａｉｌ
而纸片确认法检出率为６％，０１后者检出率比前者高（＝４０ｘ３．，Ｐቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 】、２Ｏ００）结论：ＩＫ．ｔ榆涮ＥＢ的特异性为ＶＥ－ｖＴＭＳＳＬ
ｔＯ０．而敏感性只有６．％，为坊止漏榆，建议检测Ｅ＿Ｏ％３２ｓＪ时用纸片确认法Ｂ
ｔａｐｏｕｅＥＢｎｏｄｔｒｎｅｐｅａｅｃｆｔｅｅＥＢｒｄｃｎｔｉｓｉｈｅａ￣ｅｔＭｅｏｓｈｔｒｄｃＳＬａｄｔｅｅｍｉｅｔｒｖｌｎｅｏｈｓＳＬｐｏｕｉｇｓａｎｎｅｄｐｒｎｎｈｒｔｈｔｄ．

超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析莫志航;宁炎【摘要】目的了解临床产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(E.coli)和肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)的发生率、耐药性,以便于对ESBLs进行监测和治疗.方法对102株E.coli和78株K.pneumoniae采用美国临床实验室标准委员会(NCCLS)规定的ESBLs表型筛选和确证试验确定ESBLs的发生率,并检测产ESBLs的E.coli 和K.pneumoniae的耐药性.结果 13.7％ (14/102)的大肠埃希菌和26.9％ (21/78)的肺炎克雷伯菌产ESBLs;产ESBLs菌株对亚胺培南耐药率为0％,除对阿米卡星、头孢西丁、替卡西林/克拉维酸联合酶抑制剂耐药率较低外,对三代头孢菌素、磺胺类和喹诺酮类药物均出现较高耐药.结论对产ESBLs菌株引起的感染,亚胺培南为首选.%Objective To investigate the prevalence of strains producing extended spectrum beta-lactamases (ESBLs) among Escherichia coil and Klebsiella pneumoniae, and to determine the drug resistance of the strans for better control and treatment of ESBLs. Methods One hundred and two strains of E. coli and 78 strains of K. pneumoniae were investigated for production of ESBLs by phenotypic screening and confirmatory test provided by the NCCLS. The drug resistance of ESBLs-producing strains was also investigated. Results 13.7% (14/102) of E. coli and 26.9% (21/78) of K. pneumoniae investigated were found to produce ESBLs. All ESBLs-producing strains were found to be susceptible to imipenem, relatively lowly resistant to of amikacin, cefoxitin, cefoperazone/β-lactamase inhibitor com-binations, and highly resistant to third generation cephalosporins, sulfonamides and quinolones. Conclusion Imipen-em isthe premium antibiotics for the treatment.of infection caused by ESBLs-producing strains.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2012(023)018【总页数】2页(P78-79)【关键词】超广谱β-内酰胺酶;大肠埃希菌;肺炎克雷伯菌;耐药性【作者】莫志航;宁炎【作者单位】增城市新塘医院检验科,广东增城511340;增城市新塘医院检验科,广东增城511340【正文语种】中文【中图分类】R446超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)主要由大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生，能水解青霉素类、头孢菌素类和单酰胺类抗生素，从而使之失效[1]。

产超广谱β—内酰胺酶细菌的检测

［摘要］目的：价产超广谱内酰胺酶（ｓＩ）菌的２种检测方法。法：６评ＥＢ细ｓ方１９株大肠埃希氏茵和７３株肺炎克雷伯氏菌用复合纸片法做表型确证试验及双纸片协同法进行对照监测。结果：证法检测ＥＳ１确Ｂｓ茵株阳性率为１．，纸片法阳性率８６双为１。结论：择准确快速的检测方法，高ＥＢ３选提ＳＩＳ菌株的阳性检出率，具有十分重要的・意义。临床
．ＣｏｎｃｕｏｎＣｈｏｉｌｓｉｏｓｎｇ
ａａｃａｅｎｄａｔｔｓｉｍｅｔｏｄｏｒｈｉｎｃｕｒｔａｆｓｅｔｎｇｈｆａｇｈｅｄｅｅｔｌｐｏｓｔｖｅａｅｆｒｔｃａｂｅｉｉｒｔｏＥＳＢＬｓｐｏｄｉｓｒｉｉｏｇｒａｔｌｎｉａ — ｒｕｓｎｇｔａｎｓｓｆｅｃｉｃｌｓｇｆｃｎｃ．ｉｎｉｉａｅ
Ｋｅｒｓ：ｘｅｄｄｓｅｔｕｌｌｅａｓｓ（ＢＬ）ｙｗｏｄｅｔｎｅｐｃｒｍ－ｔｍａｅＥＳｓ；Ｅｓｈｒｃｉｃｉ；ｄｔｒｎｔｎｏｅｓｅｌｎｕａａｃｅｉｈａｏｌｅｅｍｉａｉｆＫｌｂｉｌｐｅｍｏｉｅｏａｎａ
ＡｂｔａｔＰｕｐｓｖｌａｅｔｉｆｒｎｉｄｆｔｅｔｓｓｆｒＥＳＢ — ｒｄｃｎａｔｒａＭｅｈｄｎｔｉｓｕｙ６ｓｒｃ：ｒｏｅＴｏｅａｕｔｗｏｄｆｅｅｔｋｎｓｏｈｅｔｏＩＳｐｏｕｉｇｂｃｅｉ．ｔｏｓＩｈｓｔｄ１９

对产超广谱β—内酰胺酶细菌的三年监测分析

卢德国，朱德全
（临沂市人民医院，山东２６０）７０３
摘要：目的
法
对１９－２０９８－００年超广谱－内酰胺酶（ＳＬ）ＥＢｓ阳性细菌进行检测，并对其耐药情况作分析。方
１９９８年阳性率为１％，９９年为１％，００年为２．％。结论３４１９８５２０５１超广诺
法较敏感。
文献报道ｌ衣原体抗原检测（采用英国１如Ｃｅｒｉ板时）敏感性低限为１Ｏｌｖｅａｗ，Ｏ一１个衣原体数／，症状患者尤其男性尿道衣原体数常少于ｍｌ无
胞内、外无棕褐色衣原体免疫复合物。三、ＡＣ法阴性对照取正常男性尿道柱状ＳＢ
论上可不漏过１衣原体。个参考文献
［．张学军．维达，建中现代皮肤性病学进展［］１刘秦Ｍ安徽科学技术出版社，９７１９－５１９．４－１９（稿日期：０１０Ｓ收２０５２）
ｂｏｒｕｌＭｅｉｘ公司ＶＩＥ一２ｓｓｍ鉴定。ｅＴＫ３ｙｔｅ二、敏试验（ — 法）片环丙沙星药ＫＢ纸
ＥＢｓＳＬ的菌株对所有青霉素类、头孢类抗生素及氨曲南临床耐药，以免延误治疗。为了解常见产Ｅ — ＳＢｓＬ菌株的分布及耐药情况，临床合理用药提供为
ＳＢＡＣ法，要取材正确，色得当，检仔细，只染镜理

三种超广谱β-内酰胺酶手工检测方法的比较

１资料与方法
抑菌环直径相减的差值／５ｌＴ确定为产ＥＢＳ菌株。＞ｌ／／ｉＳＬ１３２双纸片增效法．．在平板上分别贴上ＣＸ、ＡＴＣＺ单一纸片及ＣＸｃ、Ａ／ｌ复合纸片，５Ｅ下培养过夜后判读Ｔ／ｌＣＺｃａａ３＇结果。若任一复合纸片抑菌圈直径与相应单一纸片抑菌圈
・
８・８
中国现代药物应用２００９年４月第３卷第７期
ＣｉＭｏｒｇＡｐ，ｔ０，ｏ．Ｎ．２
有患者康复良好，中改良筋膜内组患者无肠粘连、其腹痛、盆
腔坠胀感，大小便无异常。术后３个月调查显示性生活不受影响，心理恐惧小。
１２药敏纸片与培养基．头孢他啶（Ａ０昏片）头孢ＣＺ３／，
是头孢他啶（．－０５３２ｇｍ）＋／１４
２结果
ｍ）另一端是头孢他啶（．２－１，０１５８
ｍｌ酸。如单独头孢他啶ＭＣ与头孢他啶棒Ｉ
３讨论
瘤之可能］。改良筋膜内子宫全切术切除了官颈外口柱状
上皮与鳞状上皮交界处宫颈癌好发部位，只保留了宫颈外层筋膜，无发生残端平滑肌瘤及残端癌可能。
笔者体会该术式具有以下优点：保留子宫大部分主韧 ① 带、子宫骶韧带，筋膜缝合形成了新的中心腱，维护了盆底支撑结构，使其他脏器保持在正常位置；消除了宫颈残端癌 ②
底组织张力及阴道完整性。筋膜内子宫全切术式即在筋膜内切除子宫，不需离断子宫骶韧带及主韧带，量减少了对尽

兽医临床超广谱β-内酰胺酶的表型检测方法

的工具，工艺难度大，适应临床实验室开展。故尽快建但不
立一种合适的检测方法是十分必要的。我们相信，着各随
维普资讯
种检测技术的断发展及相应标『建监，ＥＢｓ的检伟的对ＳＬ测将会更加完善．．
现就目前国内外使用的ＥＢ的表型检测方法，ｓＬ结
合近期笔者对兽医临床致病菌的ＥＢｓ的检测方法研究综ＳＬ
述如下。１肉汤培养稀释法
生素抑制该细菌生长的最低浓度（Ｃ。该法结果易于判Ｍ１）断，需预先制备试纸条，本过高，对ＳＶ型ＥＢｓ但成且ＨＳＬ检
协同现象，说明待测菌产ＥＢｓＳＬ．
３ＮＣＳ推荐法 … ＣＬ
按美国临床试验室标准化委员会（ＣＬ）９９年标准，ＮＣＳ１９
用头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸、孢噻肟和头孢噻肟加头克拉维酸，别测量两种纸片单独及加克拉维酸的抑菌环直分径：头孢他啶 ≤２ｍ、２ｍ头孢噻肟 ≤２ｍ、孢曲松 ≤２ｍ、７ｍ头５ｍ氨曲南 ≤２７ｍｍ为可疑产酶菌株，克拉维酸和不加克拉维加酸的抑菌环直径相差 ≥５ｍｍ，可确认为ＥＢｓ株。该试即ＳＬ菌
出率较低；外，酶抑制剂的ＥＢｓＥ—ｔｓ法所用的克拉此耐ＳＬ，ｅｔ

超广谱β内酰胺酶测定标准操作规程

超广谱β内酰胺酶测定标准操作规程1．目的规范肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）筛选和确证试验。

2．适用范围本操作规程适用于肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌。

3．选药原则在本规程所列受试抗菌药物主要根据现行版本的CLSI M02和M100选择ESBLs筛选和确证试验所需的药敏纸片。

4．质控纸片药敏试验应使用大肠埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见现行版本的CLSI M100-A19。

肺炎克雷伯菌ATCC 700603可接受的抑菌圈范围为：头孢泊肟（10µg）抑菌环9~16mm头孢他啶（30µg）抑菌环10~18mm氨曲南（30µg）抑菌环9~17mm头孢噻肟（30µg）抑菌环17~25mm头孢曲松（30µg）抑菌环16~24mm5．材料和仪器M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、测量尺。

6．操作步骤参见《药物敏感性试验标准操作规程》。

7．判断标准见表5-53.表5-53 纸片法检测克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶方法初步筛选试验表型确证试验培养基Mueller-Hinton琼脂Mueller-Hinton琼脂抗微生物药物纸片浓度肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌：头孢泊肟10μg或头孢他啶30μg或氨曲南30μg或头孢噻肟30μg或头孢曲松30μg奇异变形杆菌：头孢泊肟10μg或头孢他啶30μg或头孢噻30μg使用一种以上的药物进行筛选将会提高检测的敏感性头孢他啶30μg，头孢他啶/克拉维酸30/10μg和头孢噻肟30μg，头孢噻肟/克拉维酸30/10μg确认试验需要同时使用头孢噻肟和头孢他啶，单独和联合克拉维酸的复合制剂接种按标准纸片扩散法的规定进行按标准纸片扩散法的规定进行孵育条件35℃空气35℃空气孵育时间16~18h 16~18h判读结果肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌：2个药物中有任何一个，在加克拉维酸后，抑菌环头孢泊肟抑菌圈直径≤17mm头孢他啶抑菌圈直径≤22mm氨曲南抑菌圈直径≤27mm头孢噻肟抑菌圈直径≤27mm头孢曲松抑菌圈直径≤25mm奇异变形杆菌：头孢泊肟抑菌圈直径≤22mm头孢他啶抑菌圈直径≤22mm头孢噻肟抑菌圈直径≤27mm上述抑菌环直径提示菌株可能产生ESBLs 直径与不加克拉维酸的抑菌环相比，增大值≥5mm时，判定为产ESBLs （例如，头孢他啶的抑菌环=16mm；头孢他啶/克拉维酸的抑菌环=21mm）质控意见当执行ESBL筛选试验时，肺炎克雷伯菌ATCC 700603被用于质量评估（如训练，能力或试验评价），肺炎克雷伯菌ATCC700603或大肠埃希菌ATCC 25922用于常规QC（如每周或每日）大肠埃希菌ATCC 25922（应在敏感范围）肺炎克雷伯菌ATCC 700603头孢泊肟抑菌环9~16mm头孢他啶抑菌环10~18mm氨曲南抑菌环9~17mm头孢噻肟抑菌环17~25mm头孢曲松抑菌环16~24mm 当执行ESBL确认试验时，肺炎克雷伯菌ATCC 700603和大肠埃希菌ATCC 25922用于常规QC（每周或每日）大肠埃希菌ATCC 25922：所测试药物联合克拉维酸后的抑菌环直径与单药抑菌环相比，增大≤2mm肺炎克雷伯菌ATCC 700603：头孢他啶/克拉维酸抑菌环直径增大≥5mm头孢噻肟/克拉维酸抑菌环直径增大≥3mm 8．注意事项只有确定分离到的奇异变形杆菌与临床感染性疾病有关，才需要进行ESBLs 的筛选和确证试验。

超广谱β-内酰胺酶的监测及临床应用

目前临床上ＥＳＢＬａ主要由肠杆菌科细菌产生，尤以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌为代表１７１，但近年来阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌所占比例也有所增加。为了解西安地区某医院产ＥＳＢＬｓ菌
的发生率和耐药情况，控制ＥＳＢＬｓ院内的交叉感染，笔者对２００７年１月至２００８年１２月该院临床标本中２２０６株革兰阴性杆菌中所分离出来的３４３株产ＥＳＢＬｓ菌进行回顾性分析，以期更好地了解该院ＥＳＢＬｓ产生菌株的流行状况及耐药情况，指导临床合理用药。１材料与方法１．１材料１．１．１菌株来源所有检测菌株均来源于２００７年１月至２００８年１２月西安地区某医院住院及门诊患者送检的痰、咽拭子、血液、尿液及分泌物等标本中分离出来的２２０６株革兰阴性杆菌。共分离到产ＥＳＢＬｓ菌３４３株。
的菌苔，充分混匀，将此菌液分装于已灭菌的螺旋小瓶中，或用胶塞密封，贴上标签，置于４℃的冰箱中保存。此法制作简单，不需要特殊设备，且不需要经常移种，而且可以保存数年，但要注意保存的时候需要将其直立放置。所以此方法适合实验室菌种的长期保存。
Ｖｏ１．２７２Ｏ０９Ｎ０．２０
超广谱ｐ一内酰胺酶的监测及临床应用
冯秋菊，李秋玲－，殷彦２
（１．西安市卫生学校，陕西西安７１００５４；２．西安铁路职工中等专业学校，陕西西安７ａ茵株的现状，以期指导临床合理用药。方法对西安地区某医院２００７年１月至２００８年１２片啦
床标本中２２０６株革兰阴性杆菌中分离出来的３４３株产ＥＳＢＬａ茵，采用纸片扩散法、筛选法、确定法及双纸片协同法进行

纸片扩散确认法与聚合酶链式反应检测超广谱β-内酰胺酶的比较

纸片扩散确认法与聚合酶链式反应检测超广谱Ｉ内酰胺酶的比较３；一
李蓉，赵林，徐小文，李文林，石小玉２甘
３东湖区卫生监督所，江西南昌３００）．３０８
泉，王 ห้องสมุดไป่ตู้薇・
（．昌大学医学院微生物学教研室，江西南昌３００；２江西省医学生物高技术重点实验室，江西南昌３００；１南３０６．３０６
【论】用ＰＲ法检测ＥＢ结ＣＳＬ更快更敏感，对指导临床合理使用抗生素和降低医院感染率和病死率有重要意义。
关键词：纸片扩散确认法：Ａ；ＰＲ；ＥＢＢＣＳＬ
中图分类号：Ｒ６９９文献标识码：Ａ文章编号：１７ — ５４２０）２０１— ５６２３５（０９０ — ２９０
Ｌｏｇ，ＺＡｉ。ＵＸｉ — ｅＩｎｌＨＩｉ－ｕ，Ｇｕｎ，ＷＡＮｉｅＩＲｎＨＯＬｎ，Ｘａｗｎ，ＬｏＷｅ — ｎ，ＳａｙＡＮＱａｉＸｏＧＬ— ｉｗ
（．ｅａｔｎｏｃｏｉｏｙＭｅｉｌｏｌｅａｃａｇＵｉｅｓｙａｃａｇ３００，Ｃｉａ．ｉｎｘＫｙＬｂｒｔｙｏ１Ｄｐｒｍｅｔｆｒｂｏｇ，ｄｃｌｇ，Ｎｎｈｎｎｖｒｔ，Ｎｎｈｎ３０６ｈｎ；２ＪｇｉｅａｏａｒｆＭｉｌａＣｅｉａｏＭｄａＢｏｃｎｌｇ，Ｎｎｈｎ３０６ｈｎ；３ＤｎｈｅｌｕｅｓｇＨｇｅｅａｃａｇ３００，ｈａｅｉｌｉｔｈｏｏｙａｃａｇ３００，Ｃｉａ．ｏｇｕＨａｔＳｐ￣ｉｎｙｉｎ，Ｎｎｈｎ３０６Ｃｉ）ｃｅｈｉｎ

超广谱β内酰胺酶测定标准操作规程

超广谱β-内酰胺酶测定标准操作规程1．目的规范肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）筛选和确证试验。

2．适用范围本操作规程适用于肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌。

3．选药原则在本规程所列受试抗菌药物主要根据现行版本的CLSI M02和M100选择ESBLs筛选和确证试验所需的药敏纸片。

4．质控纸片药敏试验应使用大肠埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见现行版本的CLSI M100-A19。

肺炎克雷伯菌ATCC 700603可接受的抑菌圈范围为：头孢泊肟（10µg）抑菌环9~16mm头孢他啶（30µg）抑菌环10~18mm氨曲南（30µg）抑菌环9~17mm头孢噻肟（30µg）抑菌环17~25mm头孢曲松（30µg）抑菌环16~24mm5．材料和仪器M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、测量尺。

6．操作步骤参见《药物敏感性试验标准操作规程》。

7．判断标准见表5-53.表5-53 纸片法检测克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶方法初步筛选试验表型确证试验培养基Mueller-Hinton琼脂Mueller-Hinton琼脂抗微生物药物纸片浓度肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌：头孢泊肟10μg或头孢他啶30μg或氨曲南30μg或头孢噻肟30μg或头孢曲松30μg奇异变形杆菌：头孢泊肟10μg或头孢他啶30μg或头孢噻30μg使用一种以上的药物进行筛选将会提高检测的敏感性头孢他啶30μg，头孢他啶/克拉维酸30/10μg和头孢噻肟30μg，头孢噻肟/克拉维酸30/10μg确认试验需要同时使用头孢噻肟和头孢他啶，单独和联合克拉维酸的复合制剂接种按标准纸片扩散法的规定进行按标准纸片扩散法的规定进行孵育条件35℃空气35℃空气孵育时间16~18h 16~18h 判读结果肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌：头孢泊肟抑菌圈直径≤17mm头孢他啶抑菌圈直径≤22mm氨曲南抑菌圈直径≤27mm头孢噻肟抑菌圈直径≤27mm头孢曲松抑菌圈直径≤25mm奇异变形杆菌：头孢泊肟抑菌圈直径≤22mm头孢他啶抑菌圈直径≤22mm头孢噻肟抑菌圈直径≤27mm上述抑菌环直径提示菌株可能产生ESBLs 2个药物中有任何一个，在加克拉维酸后，抑菌环直径与不加克拉维酸的抑菌环相比，增大值≥5mm时，判定为产ESBLs（例如，头孢他啶的抑菌环=16mm；头孢他啶/克拉维酸的抑菌环=21mm）质控意见当执行ESBL筛选试验时，肺炎克雷伯菌ATCC 700603被用于质量评估（如训练，能力或试验评价），肺炎克雷伯菌ATCC 700603或大肠埃希菌ATCC 25922用于常规QC（如每周或每日）大肠埃希菌ATCC 25922（应在敏感范围）肺炎克雷伯菌ATCC 700603头孢泊肟抑菌环9~16mm头孢他啶抑菌环10~18mm氨曲南抑菌环9~17mm头孢噻肟抑菌环17~25mm头孢曲松抑菌环16~24mm 当执行ESBL确认试验时，肺炎克雷伯菌ATCC 700603和大肠埃希菌ATCC 25922用于常规QC（每周或每日）大肠埃希菌ATCC 25922：所测试药物联合克拉维酸后的抑菌环直径与单药抑菌环相比，增大≤2mm肺炎克雷伯菌ATCC 700603：头孢他啶/克拉维酸抑菌环直径增大≥5mm头孢噻肟/克拉维酸抑菌环直径增大≥3mm8．注意事项只有确定分离到的奇异变形杆菌与临床感染性疾病有关，才需要进行ESBLs的筛选和确证试验。

超广谱β内酰胺酶测定标准操作规程

超广谱β内酰胺酶测定标准操作规程1．目的规范肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）筛选和确证试验。

2．适用范围本操作规程适用于肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌。

3．选药原则在本规程所列受试抗菌药物主要根据现行版本的CLSI M02和M100选择ESBLs筛选和确证试验所需的药敏纸片。

4．质控纸片药敏试验应使用大肠埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见现行版本的CLSI M100-A19。

肺炎克雷伯菌ATCC 700603可接受的抑菌圈范围为：头孢泊肟（10μg）抑菌环9~16mm头孢他啶（30μg）抑菌环10~18mm氨曲南（30μg）抑菌环9~17mm头孢噻肟（30μg）抑菌环17~25mm头孢曲松（30μg）抑菌环16~24mm5．材料和仪器M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、测量尺。

6．操作步骤参见《药物敏感性试验标准操作规程》。

7．判断标准见表5-53.表5-53 纸片法检测克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶方法初步筛选试验表型确证试验培养基Mueller-Hinton琼脂Mueller-Hinton琼脂抗微生物药物纸片浓度肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌：头孢泊肟10μg或头孢他啶30μg或氨曲南30μg或头孢噻肟30μg或头孢曲松30μg奇异变形杆菌：头孢泊肟10μg或头孢他啶30μg或头孢噻30μg使用一种以上的药物进行筛选将会提高检测的敏感性头孢他啶30μg，头孢他啶/克拉维酸30/10μg和头孢噻肟30μg，头孢噻肟/克拉维酸30/10μg确认试验需要同时使用头孢噻肟和头孢他啶，单独和联合克拉维酸的复合制剂接种按标准纸片扩散法的规定进行按标准纸片扩散法的规定进行孵育条件35℃空气35℃空气孵育时间16~18h 16~18h判读结果肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌：2个药物中有任何一个，在加克拉维酸后，抑菌环头孢泊肟抑菌圈直径≤17mm头孢他啶抑菌圈直径≤22mm氨曲南抑菌圈直径≤27mm头孢噻肟抑菌圈直径≤27mm头孢曲松抑菌圈直径≤25mm奇异变形杆菌：头孢泊肟抑菌圈直径≤22mm头孢他啶抑菌圈直径≤22mm头孢噻肟抑菌圈直径≤27mm上述抑菌环直径提示菌株可能产生ESBLs 直径与不加克拉维酸的抑菌环相比，增大值≥5mm时，判定为产ESBLs （例如，头孢他啶的抑菌环=16mm；头孢他啶/克拉维酸的抑菌环=21mm）质控意见当执行ESBL筛选试验时，肺炎克雷伯菌ATCC 700603被用于质量评估（如训练，能力或试验评价），肺炎克雷伯菌ATCC700603或大肠埃希菌ATCC 25922用于常规QC（如每周或每日）大肠埃希菌ATCC 25922（应在敏感范围）肺炎克雷伯菌ATCC 700603头孢泊肟抑菌环9~16mm头孢他啶抑菌环10~18mm氨曲南抑菌环9~17mm头孢噻肟抑菌环17~25mm头孢曲松抑菌环16~24mm 当执行ESBL确认试验时，肺炎克雷伯菌ATCC 700603和大肠埃希菌ATCC 25922用于常规QC（每周或每日）大肠埃希菌ATCC 25922：所测试药物联合克拉维酸后的抑菌环直径与单药抑菌环相比，增大≤2mm肺炎克雷伯菌ATCC 700603：头孢他啶/克拉维酸抑菌环直径增大≥5mm头孢噻肟/克拉维酸抑菌环直径增大≥3mm 8．注意事项只有确定分离到的奇异变形杆菌与临床感染性疾病有关，才需要进行ESBLs 的筛选和确证试验。

3种金黄色葡萄球菌β-内酰胺酶检测方法的评价

3种金黄色葡萄球菌β-内酰胺酶检测方法的评价郭鹏豪;王雅丽;廖康;陈建龙【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2015(000)007【摘要】目的：对3种金黄色葡萄球菌β‐内酰胺酶检测方法进行评价，为临床实验室选择最佳的检测方法提供依据。

方法选取金黄色葡萄球菌40株，以BlaZ基因检测的结果作为β‐内酰胺酶检测的金标准，对“绝壁”试验、“三叶草”试验、头孢硝噻吩纸片法的检测性能进行评价。

结果40株金黄色葡萄球菌经PCR法检测20株BlaZ基因为阳性，20株为阴性；“绝壁”试验，“三叶草”试验，头孢硝噻吩纸片法敏感度均为100．00％，特异性为100．00％。

结论3种检测金黄色葡萄球菌β‐内酰胺酶的方法均有较好的敏感性和特异性，不同的实验室可以根据具体情况选择其中的一种方法。

【总页数】2页(P897-898)【作者】郭鹏豪;王雅丽;廖康;陈建龙【作者单位】中山大学附属第一医院检验科，广州510080;中山大学附属第一医院生殖医学中心，广州510080;中山大学附属第一医院检验科，广州510080;中山大学附属第一医院检验科，广州510080【正文语种】中文【相关文献】1.金黄色葡萄球菌β-内酰胺酶检测方法的应用比较 [J], 刘敬;王斌;沈继录2.金黄色葡萄球菌β-内酰胺酶表型检测方法比较 [J], 陆瀚文;周万青;张之烽;沈瀚3.细菌β-内酰胺酶和氨基糖苷磷酸转移酶耐药基因可视化LAMP检测方法的建立和初步应用 [J], 王豪;郭苗苗;刘昕雨;左瑶;李宁;孙薇;张涛;王令4.细菌β-内酰胺酶和氨基糖苷磷酸转移酶耐药基因可视化LAMP检测方法的建立和初步应用 [J], 王豪;郭苗苗;刘昕雨;左瑶;李宁;孙薇;张涛;王令5.对超广谱β内酰胺酶、碳青霉烯酶、甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌及其他重要耐药表型的快速检测药敏试验方法 [J], HOMBACH M;JETTER M;KELLER PM;杨洋;朱德妹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。