液相色谱专家系统

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有机化合物的分离和提纯方法

有机化合物的分离和提纯方法

有机化合物的分离和提纯三、色谱法色谱法chromatography色谱法又称“色谱分析”、“色谱分析法”、“层析法”,是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。

色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。

色谱法起源于20世纪初,1950年代之后飞速发展,并发展出一个独立的三级学科-色谱学。

历史上曾经先后有两位化学家因为在色谱领域的突出贡献而获得诺贝尔化学奖,此外色谱分析方法还在12项获得诺贝尔化学奖的研究工作中起到关键作用。

历史色谱法从二十世纪初发明以来,经历了整整一个世纪的发展到今天已经成为最重要的分离分析科学,广泛地应用于许多领域,如石油化工、有机合成、生理生化、医药卫生、环境保护,乃至空间探索等。

将一滴含有混合色素的溶液滴在一块布或一片纸上,随着溶液的展开可以观察到一个个同心圆环出现,这种层析现象虽然古人就已有初步认识并有一些简单的应用,但真正首先认识到这种层析现象在分离分析方面具有重大价值的是俄国植物学家Tswett。

Tswett关于色谱分离方法的研究始于1901年,两年后他发表了他的研究成果"一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用,提出了应用吸附原理分离植物色素的新方法。

三年后,他将这种方法命名为色谱法(Chromatography),很显然色谱法(Chromatography)这个词是由颜色(chrom)和图谱(graph)这两个词根组成的,派生词有chromatograph(色谱仪),chromatogram(色谱图),chromatographer(色谱工作者)等。

由于Tswett的开创性工作,因此人们尊称他为"色谱学之父",而以他的名字命名的Tswett奖也成为了色谱界的最高荣誉奖。

色谱法发明后的最初二三十年发展非常缓慢。

液相色谱实验报告

液相色谱实验报告

液相色谱实验报告姓名:XXX 专业:有机化学学号:312070303004 时间:2012.11.11一、实验目的:1 .了解液相色谱仪的基本构造、工作原理。

2. 掌握液相色谱的操作方法和分析方法,能够通过高效液相色谱(HPLC)对目标化合物进行分析鉴定。

二、实验原理:液相色谱法采用液体作为流动相,利用物质在两相中的吸附或分配系数的微小差异达到分离的目的。

当两相做相对移动时,被测物质在两相之间进行反复多次的质量交换,使溶质间微小的性质差异产生放大的效果,达到分离分析和测定的目的。

被分离成单个组分后依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪。

三、液相色谱法的特点:高压——压力可达150~300 kg/cm2。

色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。

高速——流速为0.1~10.0 mL/min。

高效——塔板数可达5000/米。

在一根柱中同时分离成份可达100种。

高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。

同时消耗样品少。

高效液相色谱(HPLC)与经典液相色谱相比有以下优点:速度快——通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。

分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。

灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。

色谱柱可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。

样品量少,容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

四、液相色谱仪的组成:液相色谱仪主要包括输液系统、进样器、分离柱、检测器和数据处理系统等几部分。

1 输液系统:包括贮液及脱气装置、高压输液泵和梯度洗脱装置。

贮液装置用于存贮足够量、符合HPLC要求的流动相。

高效液相色谱柱填料颗粒比较小,通过柱子的流动相受到的流动阻力很大,因此需要高压泵输送流动相。

2 进样系统:将待测的样品引入到色谱柱的装置。

液相色谱进样装置需要满足重复性好、死体积小、保证柱中心进样、进样时引起的流量波动小、便于实现自动化等多项要求。

高效液相色谱仪组成及检测器种类

高效液相色谱仪组成及检测器种类

高效液相色谱仪组成及检测器种类HPLC主要由四个核心组成部分:溶剂系统、进样系统、分离柱和检测器。

下面将详细介绍HPLC的组成部分及常见的检测器种类。

1.溶剂系统:溶剂系统是HPLC的基础部分,主要由溶剂瓶、溶剂泵和混合器组成。

溶剂系统的主要功能是提供流动相,使待分离物质在分离柱中迅速传递,并保持色谱的稳定。

常见的溶剂选择有水、有机溶剂(如甲醇、乙醇)和酸碱溶液等。

2.进样系统:进样系统主要由进样装置和进样口组成。

进样系统的主要功能是将待测样品溶液精确地进样到分离柱中,进行分离分析。

常见的进样方式有手动进样、自动进样和微量进样等。

3.分离柱:分离柱是HPLC用于分离待测物质的核心部分,其主要作用是将混合物中的化合物按照其化学性质进行分离。

分离柱通常由不同类型的填料填充而成,包括反相色谱柱、离子交换色谱柱、凝胶过滤柱等。

根据填料粒径的不同,分离柱可以分为常规柱和超高效柱。

4.检测器:检测器是HPLC中用于检测分离柱中物质浓度的装置。

根据不同的原理和应用要求,常见的HPLC检测器包括:(1) 紫外可见检测器(UV-Vis Detector):紫外可见检测器是HPLC常用的检测器之一,主要通过测量样品在紫外或可见光区域的吸收来确定成分的浓度。

该检测器具有灵敏度高、通用性强、操作简单等特点。

(2) 荧光检测器(Fluorescence Detector):荧光检测器主要通过测量分析物在激发光源作用下发射出的荧光信号来确定成分的浓度。

该检测器具有灵敏度高、选择性好、检测限低等特点,广泛应用于药物分析、环境分析、食品安全等领域。

(3) 折射率检测器(Refractive Index Detector):折射率检测器主要通过测量分析物引起的溶剂折射率变化来确定成分的浓度。

该检测器适用于不含色团的非极性物质的检测,具有灵敏度较低、通用性强的特点。

(4) 质谱检测器(Mass Spectrometer):质谱检测器将柱前的液相分离与质谱技术相结合,可实现化学物质的分离和结构表征。

全新一代UHPLC系统,重新界定超高效液相色谱

全新一代UHPLC系统,重新界定超高效液相色谱

全新一代UHPLC系统,重新界定超高效液相色谱作者:申海鹏来源:《食品安全导刊》2015年第04期近日,科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技,发布了全新一代超高效液相色谱系统,该系统不论是单独使用还是与最新的质谱仪联用都具有更高水平的性能、生产率和易用性。

全新的Thermo Scientific Vanquish UHPLC在外观上与标准的UHPLC系统不同,这归功于其简洁的设计。

整机兼具一体式系统的耐用性和模块化系统的灵活性、便于维修性。

在设备高度上,Vanquish系统比类似的模块化系统要矮25%,从而提高了实验室的安全性和仪器的便利性。

赛默飞副总裁,HPLC事业部总经理Fraser McLeod表示,“赛默飞并不是在现有的UHPLC基础上进行改进,而是完全从头开始设计这一全新的系统。

这种做法的结果是,我们得到了兼备高分离效率、样品通量、易用性、重现性和方法转换效率等诸多优点的系统。

”Vanquish的核心是全新的Thermo Scientific Accucore Vanquish UHPLC色谱柱,该色谱柱专为优异性能而设计。

Accucore Vanquish UHPLC色谱柱由1.5μm表面多孔硅胶颗粒构成,该色谱柱采用了增强的核壳技术,具有超短的色谱扩散路径和高效的分离能力,使用该色谱柱,可以将Vanquish系统耐压1500 bar(22000psi)、最高流速达5mL/ min的优点发挥的淋漓尽致。

Vanquish系统还具有很多其他的特性,这些特性都可以使该系统分离效率更高、通量更高、易用性更高。

(1)泵采用了SmartFlow技术,可以使保留时间的重现性更高,基线噪音更低,检测灵敏度更高。

(2)控温能力:柱温箱包含直接加热模块和强制空气温控模块,进一步提高分离效率和选择性,同时保证保留时间的重现性。

(3)具有隔热性能的自动进样器,使用全新的空气-空气冷却技术,可以防止样品瓶中的液体挥发并冷凝——即使在高温和高湿度的环境中,也不用担心。

Waters Alliance高效液相色谱系统操作规程

Waters Alliance高效液相色谱系统操作规程

Waters Alliance高效液相色谱系统操作规程1 仪器组成及开机1.1 仪器组成本系统由Waters 2695分离单元,Waters 2996二极管阵列检测器,Waters Empower 色谱工作站和打印机组成。

各部件均备有电源插头。

1.2 开机使用时,依次接通2695分离单元、检测器、打印机和计算机的电源。

2 配置2.1 2690分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统,四通道在线真空脱其机,可容纳120个样品瓶的自动进样系统,柱温箱,内置的住塞杆密封垫清洗系统,溶剂瓶托盘,液晶显示器,键盘用户界面及软盘驱动器。

2.2 打开电源开关,接通2695分离单元,约20秒,仪器开始自检,约1分钟后,显示主屏幕,此时继续各部件的初始化,待主屏幕上方标题区显示时,仪器进入待命状态。

2.3 溶剂管理的准备(下述的内容为操作面板键,为屏幕键)2.3.1 流动相脱气按Menu/Status,进入“Status(1)”屏幕,游标选“Degasser”,按Enter,显示选项屏幕,游标下移选“on”,按Enter。

2.3.2 启动溶剂管理系统2.3.2.1 干启动在“Status(1)”屏幕下,按Direct Function,游标选“Dry Prime”,按Enter,显示“Dry Prime”屏幕,按欲启动的溶剂管路的屏幕键,如Open A,游标选“Duration”,按数字键输入5分钟,按continue,待限定时间结束后,重复操作,使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并冲满流动相。

2.3.2.2 湿启动在“Status(1)”屏幕下,游标选“composition”中欲使用的流动相,输入100%,按“Direct Function”,游标选“Wet Prime”,按Enter,显示“Wet Prime”屏幕,输入7.5毫升/分和6分钟,按OK,待限定时间结束后,对每种流动相重复操作。

2.3.2.3 平衡真空脱气机在“Status(1)”屏幕下,游标选“composition”,输入流动相的组成,按Enter,再用游标选“Degasser”中的“Normal”,按Enter,按Direct Function,游标选“Wet Prime”,输入0.000毫升/分和10分种,按OK。

液相色谱选择优化专家系统推理机的构建

液相色谱选择优化专家系统推理机的构建
理 规 则按 层 次存 储在树 型 数据 结构 中,设计 了基 于产 生式模 式 的 系统推 理 机的 框架结 构 、工作 流程和 用户界 面。该 系统 能 兼顾 计算 机和 用 户 的可读性 、 交互性 ,不 仅提 高 了 理机 的推 理 效率 , 同时表 明该 系统具 有可行 性和 实际 应 用前景 。 推
28 . 4
【】 梁孝梅, 2 郑秀珍, 迟晓玲, 负压进针法在老年患者静脉输液中 等.
的作Y [ . 护理杂 志,06 ( :1 OJ 齐鲁 ] 2 0, 7 3 . 7)
参考文献 [】 李小寒, 1 尚少梅. 基础护理学【 . 北京: M] 版. 4 人民卫生出版社, 0: 2 6 0
虱 | — 同 眶 匿 国
2 1 年1 第 1 卷 第 1 02 月 0 期
・管理 ・ 教育 ・ 教学 ・ 2 6 5
液相色谱选择优 化专家 系统推理机 的构建
姜 楠 董 鸿 晔
( 沈阳药科大学 , 辽宁 沈阳 10 1 ) 10 6
【 摘要】本文以构建液相色谱选择性优化专家系统推理机作为崭究对象,论述了 产生式系 统的结构特点及正向推理机制, -  ̄-家系统的  ̄ - 推
【】 杨梅. 3 改进静脉穿刺方法的研究[ 护 理研究, 0 ,77: J ] 2 31() . 0 8
识表示及系统结构之一。经过多年的实践,产生式系统无论在理论上
还 是应 用上都 有了很大进展并 日趋成熟 】 。
为 了提高 推理机推理 的效率 ,设计合理 的推理机 的数据结 构是至 关重要的 。根据 专家系统的推理策 略和 逻辑推理过程可 知,推理过程 是阶段性 或顺 序性 的特点 。液相色谱 选择性优化 专家系统它 的推理 】 过程的顺序是先 确定推理范 围 ( 化合 物方法或一般方 法) ,之后再 按 按推理过程 的阶段性即样 品预处理 方法优化 ,固定相 优化、流动相优 化 、辅助条件 优化四个阶段逐步进 行更细节的推理判 定,直至得 出结 论 以样品预处理一般优化方法为例 ,其推理顺序如 图2 所示 。 针对 图2 推理 顺序 ,依据 其产生 式规则及正 向推理 特性 ,本系统 推理机采用树结 构来描述推理规则 , 于 同一层次 的规 则 ( 对 例如超声 法或 回流法 )用一个结点来存储 ,结点 中的每个实体对 应于一条产生

液相色谱系统的组成及保养知识

液相色谱系统的组成及保养知识

液相色谱系统的组成及保养知识一套液相色谱系统大致分为以下几个部分:流动相前处理部分、输液部分、进样部分、分离部分、检测部分。

一、流动相前处理流动相前处理主要包括过滤和脱气,使用设备主要为溶剂过滤器、真空泵和超声波。

1、过滤。

HPLC所用流动相必须预先过滤和脱气,过滤的作用是防止颗粒性的杂质堵塞系统,或影响单向阀的正常工作。

过滤时需要注意滤膜的选择,油膜和水系膜必须分开使用。

水膜易有机溶剂溶解而进入系统导致泵流路和色谱柱头的堵塞。

2、超声。

超声的作用是去除流动相中的气泡。

超声时间一般在20min即可。

超声后,液体温度会升高,应冷却到室温再使用。

超声后的流动相若需隔天使用再次超声。

二、输液系统输液系统即是指高压恒流泵,其作用是能提供稳定准确的流速。

1、溶剂过滤头。

吸液过滤头,或称沉子,主要作用是过滤流动相中可能存在的颗粒性杂质。

长时间使用后,杂质有可能阻塞溶剂过滤头上的过滤板孔隙;或长时间使用缓冲液,过滤头表面容易产生一层膜,阻碍流动相正常通过。

严重时,即使是已超声过的溶剂,泵吸液时也会有气泡在四氟输液管里产生,因此应经常对过滤头进行清洗。

清洗溶剂可以选择乙醇或者30%稀硝酸溶液,正相系统需注意滤头的烘干处理。

2、单向阀。

单向阀的作用是确保液体向一个方向流动,是高压恒流泵稳定输液的保证。

日常使用过程中,可以通过观察压力的情况,初步判断流量是否正常。

如果系统已经平衡一段时间,压力应该是稳定的。

但如果压力存在波动,则表明流量不稳定;如果无压力,则表明无流量。

这两种情况大多是因为单向阀里混入了气泡或杂质。

混入气泡的情况,应把放空阀打开,按冲洗键将里面的气泡排出。

单向阀混入杂质的情况,须对其进行清洗。

清洗溶剂可以选择乙醇,安装时注意标记环的方向。

单向阀装配图及剖面图1带标记环阀外套;2陶瓷座;3宝石球;4带密封垫限位套;5密封垫3、密封圈。

密封圈是固定在柱塞杆上防止泵腔内的液体泄漏,是保证泵头输液正常的关键部件。

Waters2695HPLC系统操作规程

Waters2695HPLC系统操作规程
对整个系统进行控 制和监测,保证系 统的正常运行。
系统配置与选件
Waters2695系统可根据用户需 求进行配置,包括输液泵、自动
进样器、色谱柱、检测器等。
用户可根据实际需求选择不同类 型的色谱柱和检测器,以满足不
同分析要求。
Waters2695系统还支持多种附 件和选件,如柱温箱、二极管阵 列检测器等,以扩展系统功能和
批处理功能
支持对多个数据文件进行批处理,提高数据 处理效率。
报告输出格式和内容要求
报告格式
报告应以清晰、简洁的格式呈现,包括图表 、数据和结论等部分。
结论分析
根据数据处理结果对样品进行定性和定量分 析,并给出相应结论。
报告内容
报告应包含样品信息、色谱条件、数据处理 结果和结论等内容。
审核与签字
报告应经过审核人员审核并签字确认后方可 发出。
数据存储和备份策略
数据存储位置
数据应存储在安全可靠的位 置,如服务器或专用数据存
储设备。
1
数据备份频率
应定期备份数据,以防数据 丢失或损坏。
备份数据恢复
在数据丢失或损坏时,应能 够及时恢复备份数据。
数据保密性
对涉及商业机密或隐私的数 据,应采取加密等安全措施 进行保护。
07
仪器故障排除与维护保养计划
Waters2695系统支持多种检测器和分析方法,可 满足不同领域的应用需求。
主要部件及功能
自动进样器
实现样品的自动进 样和清洗,提高分 析效率。
检测器
检测分离后的组分 ,输出信号进行数 据处理和记录。
输液泵
提供稳定的流动相 流速,保证分离效 果。
色谱柱
填充有固定相,用 于实现混合物的分 离。

Agilent 1100系列液相色谱系统

Agilent 1100系列液相色谱系统

Agilent 1100系列液相色谱系统Agilent 1100系列面向行业,面向法规为液相色谱制定了新的行业标准。

自1996年问世以来,在全球我们已经安装超过130,000台1100组件和55,000多套化学工作站数据处理系统,成为目前单一型号市场占有率最高的液相色谱系统。

Agilent 1100系列组件外形设计独特。

具有灵活多变的组合方式;卓越的系统性能指标;图形化的工作站友好界面;智能化维护系统和全面完善的法规认证功能;不断创新推出的新组件,完善安捷伦液相色谱的分析领域。

全系列Agilent 1100泵系统电子流控阀(EFC)控制的毛细液相泵系统,精度高,流速范围广柱流速范围:1-20ul/min;10-100ul/min(可选件)0.001-2.5ml/min(EFC关闭状态)高压制备泵系统,单元或双元高压制备泵流速范围:0.001-100ml/min分析型泵系统流速范围单元泵:0.001-10ml/min二元泵:0.001-5ml/min四元泵:0.001-10ml/min品种齐全的Agilent 1100系统进样系统标准手动进样器(分析型或制备型)标准自动进样器样品瓶容量:可达100个(2ml *100)进样量:0.1-100ml(0.1-1800ul可选件)微盘式自动进样器样品瓶容量:2 *96(孔板),2*386(孔板)或100*2ml进样量:0.1-100ul(标准件)0.1-500ul(可选件)微量标准自动进样器/微盘式自动进样器进样量:0.01-8ul(标准);0.01-40ul(可选)恒温标准自动进样器/微盘式自动进样器温度范围:4-40度可设定步进1度220型微孔板式自动进样器----组合化学样品管理系统样品瓶容量:各种规格试管多达12个微孔板(96孔板,384孔板)进样量:0.1-5ul;0.1-20ulAgilent 1100系列检测器可变波长扫描紫外检测器(VWD)波长范围:190-600nm多波长检测器(MWD)波长范围:190-950nm(双灯源)二极管阵列检测器(DAD)波长范围:190-950nm(双灯源)荧光检测器(FID)激光波长:200-700nm;发射波长:280-900nm光谱存储:全光谱示差折光检测器(RID)温控:室温+5度至55度内置自动吹扫阀和自动溶剂循环阀电化学检测器(ESD)LC/MS四级杆质量检测器(MSD)LC/MS离子阱质量检测器(Trap MSD)柱温箱和脱气机组件柱温箱温度范围:室温下10度至80度可选件:柱切换阀真空在线脱气机组分收集器可容纳4个96孔板、384孔板及各种规格试管的盘架,并可由仪器自动识别;外接管路可进行大容量收集。

ACQUITYUPLC系统央速入门指南

ACQUITYUPLC系统央速入门指南

ACQUITYUPLC系统央速入门指南ACQUITYUPLC系统是一种高效液相色谱(UPLC)系统,可以在较短的时间内实现高分辨率、高灵敏度的分析。

本文将为你介绍ACQUITYUPLC系统的基本原理、操作流程以及常见的故障处理方法,帮助你快速入门。

一、基本原理1.更小的粒径:UPLC柱的颗粒粒径通常为1.7-2.5μm,而传统液相色谱柱的颗粒粒径通常为5-10μm。

这样可以获得更高的分离效率和灵敏度。

2.更高的线性范围:UPLC系统的线性范围通常为几个数量级,可以扩展到更广泛的浓度范围内进行分析。

3.较短的分析时间:由于颗粒粒径更小,流速可以提高,从而减少分析时间。

二、操作流程1.样品准备:根据需要选择适当的样品处理方法,如固相萃取、气相萃取、液液萃取等,将样品准备成可注射的样品溶液。

2.系统准备:开机前,检查系统的电源、液相泵、进样器及检测器等设备是否工作正常。

根据分析需要设置分析方法。

3.柱的安装:选择合适的柱,将柱连接至液相流动系统,并确保连接紧固。

4.进样:将准备好的样品溶液使用自动进样器自动注入进样环中,或手动使用微量注射器进行注射。

5.运行分析:启动分析方法,进行样品的分离与检测。

分析过程中可以监控色谱峰的形状、信号强度等参数进行实时调整。

6.数据处理:分析结束后,根据需要导出、处理数据,并进行结果分析。

三、常见故障处理方法1.泵压不稳定:检查泵的连接管路是否松脱或堵塞,或检查是否有气泡进入系统中。

2.色谱峰形状不对称:检查柱温度是否稳定,柱是否受损,或检查是否有杂质污染样品溶液。

3.信号强度低:检查检测器的灵敏度设置是否正确,检查样品进样量是否足够,或检查柱是否老化需要更换。

4.样品丢失:检查进样针是否堵塞,或检查进样器的封口情况。

5.系统噪声大:检查所有连接部位,确保紧固连接,检查结果是否被电磁干扰。

以上是ACQUITYUPLC系统央速入门指南的简要介绍,希望能够帮助你快速了解ACQUITYUPLC系统的基本原理、操作流程以及常见的故障处理方法。

液相色谱仪原理

液相色谱仪原理

液相色谱仪原理液相色谱仪(HPLC)是一种高效、精确的色谱分析仪器,广泛应用于化学、生物、药物等领域。

它通过对物质在液相中的分配、分离和检测,实现对复杂混合物的分析和定量。

液相色谱仪的原理主要包括进样系统、流动相系统、柱温控系统、检测系统和数据处理系统。

首先,进样系统是液相色谱仪的重要组成部分,它负责将待分析样品引入色谱柱中。

通常采用自动进样器,通过精确的体积控制,将待测样品按照一定的时间间隔引入色谱柱中,保证分析的准确性和重复性。

其次,流动相系统是液相色谱仪中的核心部件,它包括溶剂槽、泵、混合器和柱温控系统。

流动相系统的主要功能是将溶剂以一定的流速和比例送入色谱柱中,实现对待测物质的分离和洗脱。

柱温控系统可以控制色谱柱的温度,提高分离效果和分辨率。

接着,检测系统是液相色谱仪的另一个重要组成部分,它负责检测色谱柱中分离出的物质,并转化为电信号输出。

常见的检测器包括紫外-可见光谱检测器、荧光检测器、电化学检测器等,根据不同的检测需求选择不同的检测器。

最后,数据处理系统是液相色谱仪中的关键部分,它负责对检测到的信号进行处理和分析,得出样品中各成分的含量和浓度。

数据处理系统一般包括数据采集、数据处理和结果输出等功能,可以实现对样品的定性和定量分析。

总的来说,液相色谱仪通过以上几个部分的协同工作,实现对复杂混合物的分离和检测,具有高灵敏度、高分辨率、高选择性和高效率的特点。

它在化学、生物、药物等领域的应用越来越广泛,成为科研和生产中不可或缺的分析工具。

液相色谱仪的原理和技术不断得到改进和完善,将为人类的科学研究和生产活动带来更多的便利和贡献。

二维液相色谱系统的组成

二维液相色谱系统的组成

二维液相色谱系统的组成
二维液相色谱系统主要由两个液相色谱系统组成:一维液相色谱系统和二维液相色谱系统。

一维液相色谱系统主要包括以下组成部分:
1. 柱:液相色谱柱,负责分离样品中的化合物。

2. 泵:提供流动相的压力,将样品溶液按流速送入柱中。

3. 注射器:用于将样品溶液从样品瓶中取出并注入柱中。

4. 检测器:检测样品中的目标化合物,并转化为电信号输出。

5. 收集器:将分离的目标化合物收集起来。

6. 控制系统:用于控制液相色谱系统的运行参数,如流速、柱温等。

二维液相色谱系统主要包括以下组成部分:
1. 二维阀:用于调节一维色谱柱和二维色谱柱之间的连接,实现采样、转向和洗脱等功能。

2. 二维色谱柱:将一维色谱柱的洗脱液导入。

3. 二维泵:提供流动相的压力,将洗脱液按流速送入二维色谱柱中。

4. 二维检测器:检测二维色谱柱洗脱液中的目标化合物,并转化为电信号输出。

5. 控制系统:用于控制二维液相色谱系统的运行参数,如流速、柱温等。

通过一维液相色谱系统和二维液相色谱系统的组合,可以实现对样品中的复杂混合物进行更为高效和全面的分离和分析。

液相色谱仪的3大系统

液相色谱仪的3大系统

液相色谱仪的3大系统液相色谱仪是一种常用的检测仪器,也是化学分析实验室中不可或缺的工具。

它能够在非常短的时间内对复杂混合物进行高效的分离、识别和定量分析,并且因为其高精度、高灵敏度和高重复性而备受科研人员的青睐。

在理解液相色谱仪的原理之前,必须先了解液相色谱仪的3大系统。

这些系统是液相色谱仪正常运行的基础。

下面我们将逐一介绍这3大系统,以帮助您更好的了解液相色谱仪的工作原理。

1. 洗脱系统液相色谱仪中的洗脱系统起着非常重要的作用,它能够在分分离过程中将不同化合物分解开,最终得出更为准确的实验结果。

这个系统包括两种主要的注入方式,就是脉冲注入和梯度注入。

脉冲注入方法一般是在准备洗脱系统的样品前做好混合物,将混合物注入在线管道中。

在样品输入口处,可以用注射器手动送样。

随后,将混合物送至柱子上进行进样操作。

而梯度注入方法则需要通过自动混合器来混合不同性质的溶液。

它能够较准确地控制注入的速率,从而保证实验的准确性。

值得注意的是,注入方式的选择取决于所进行的实验内容以及液相色谱仪的规格和型号。

2. 色谱柱液相色谱仪中的色谱柱是实现分离物化合物的中心环节。

一个色谱柱主要由两个部分组成。

第一部分是填充物,它是由吸附剂和分散剂组成的,可以将溶液中的化合物吸收、分散和解离。

第二部分是柱壁,它用于分隔分子,从而达到分离的效果。

在选择色谱柱时,需要根据所要分离化合物的性质而选择相应的材料。

例如,如果希望分离一个电离程度高的有机物质,就需要选择具有较高的不极性的分离柱。

而在分离电离程度弱的物质时,则需要选择相应的弱阴离子交换柱。

3. 检测器液相色谱仪的检测器也是非常关键的一部分,通过检测分离柱中的化合物,可以得到精确的结果。

目前,市场上主要有以下几种类型的检测器,包括紫外检测器、荧光检测器、电导检测器、电化学检测器和质谱检测器等。

其中,紫外检测器是目前最常用的检测器之一。

它能够检测化合物的吸收光谱和发射光谱,并且很容易使用和操作。

高效液相色谱仪组成及检测器种类

高效液相色谱仪组成及检测器种类
优点:是一种选择性强、灵敏度高,比紫 外检测器高2 3个数量级,可达pg量级 或更低,可用于梯度淋洗。
㈢示差折光检测器
借连续测定流通池中溶液 1 折射率德方法来测定试样 浓度的检测器。分为偏转 式和反射式两种类型。
是一种通用型检测器,灵 2 敏度可达10-7 g cm-3。 缺点是对温度变化敏感, 不能用于梯度淋洗。
㈣电导检测器
是离子色谱法应用最多的检测器,依据物质在某些介质中 电离后所产生电导变化来测定电离物质的含量。受温度的
影响较大,需放在恒温箱中。pH>7时不够灵敏。
一般在分离前备有一个前置柱,前置柱内填充物和分离 柱完全一样,这样可使淋洗溶剂由于经过前置柱为其中 的固定相饱和,使它在流过分离柱时不再洗脱其中固定 相,保证分离技的性能不受影响。
柱子装填得好坏对柱效影响很大。对于细粒度的填料 (<20μm)一般采用匀浆填充法装柱,先将填料调成 匀浆,然后在高压泵作用下,快速将其压入装有洗脱液 的色谱柱内,经冲洗后,即可备用。
03
分离柱
控温 装置
进样装置
04
检测器
工作过程:
首先高压泵将贮液器中流动相溶剂经过进样器送入 色谱柱,然后从控制器的出口流出。当注入欲分离 的样品时,流经进样器贮液器的流动相将样品同时 带入色谱柱进行分离,然后依先后顺序进入检测器, 记录仪将检测器送出的信号记录下来,由此得到液 相色谱图。
一、高压 输液系统
对泵的要求:输出压力高、流量范围大、流量恒 定、无脉动,流量精度和重复性为0.5%左右。 此外,还应耐腐蚀,密封性好。
高压输液泵,按其性质可分为恒压泵和恒流泵两 大类。
恒流泵是能给出恒定流量的泵,其流量与流动相 粘度和柱渗透无关。
恒压泵是保持输出压力恒定,而流量随外界阻力变化而变化, 如果系统阻力不发生变化,恒压泵就能提供恒定的流量。

液相色谱分析仪主要有那几部分组成

液相色谱分析仪主要有那几部分组成

液相色谱分析仪主要有那几部分组成
赛默飞液相色谱分析仪主要有分析型、制备型和专用型三类。

一般由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统等五个部分组成:
1、高压输液系统:贮液装置、高压输液泵、过滤器、脱气装置等组成
①贮液器:贮液器用于存放溶剂。

溶剂必须很纯,贮液器材料要耐腐蚀,对溶剂呈惰性。

贮液器应配有溶剂过滤器,以防止流动相中的颗粒进入泵内。

溶剂过滤器一般用耐腐蚀的镍合金制成,空隙大小一般为2mm。

②高压输液泵:高压输液泵是高效液相色谱仪的重要部件,是驱动溶剂和样品通过色谱柱和检测系统的高压源,其性能好坏直接影响分析结果的可靠性。

③脱气装置:脱气的目的是为了防止流动相从高压柱内流出时,释放出气泡进入检测器而使噪声剧增,甚至不能正常检测。

2、进样器:一般要求密封性好,死体积小,重复性好,保证中心进样,进样时对色谱系统的压力和流量波动小,并便于实现自动化。

3、分离系统:色谱分离系统包括色谱柱、固定相和流动相。

色谱柱是其核心部分,柱应具备耐高压、耐腐蚀、抗氧化、密封不漏液和柱内死体积小、柱效高、柱容量大、分析速度快、柱寿命长的要求。

通常采用优质不锈钢管制成。

4、检测系统:检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。

5、数据处理系统:
早期的HPLC只配有记录仪记录色谱峰,用人工计算A或H。

随着计算机技术的发展,简单的积分仪,可自动打印出H、A和tR,作一些简单的计算,但不能存储数据。

液相色谱仪的基本构造和工作原理

液相色谱仪的基本构造和工作原理

液相色谱仪的基本构造和工作原理
液相色谱仪(Liquid Chromatography,简称LC)是一种分离和分析化合物的仪器,通过溶液作为流动相,将待测样品中的化合物分离并检测。

以下是液相色谱仪的基本构造和工作原理:
基本构造:
1. 流动相系统:包括溶剂瓶、泵、混合器等组件,用于将溶液送入色谱柱。

2. 色谱柱:是液相色谱的核心部件,通常由不同的填料构成,用于分离样品中的化合物。

3. 进样系统:用于将待测样品引入流动相系统。

进样器通常包括样品瓶、进样针和进样阀等部件。

4. 检测器:用于检测色谱柱流出的化合物,常见的检测器包括紫外可见光谱检测器、荧光检测器、光电二极管阵列检测器等。

5. 数据处理系统:用于采集和分析检测器输出的数据,通常配备计算机和专业的数据处理软件。

工作原理:
1. 样品注入:待测样品通过进样系统被引入流动相中。

2. 分离过程:样品在色谱柱中被分离。

分离的原理可以基于化合物在填料中的亲疏水性、分子大小、电荷等差异。

3. 流动相运输:流动相被泵送经色谱柱,将样品分离并传送到检测器。

4. 检测:检测器检测流出的化合物,产生信号。

不同检测器采用不同的原理,如测量紫外可见光吸收、荧光强度、电导率等。

5. 数据处理:检测器输出的信号通过数据处理系统进行记录和分析,生成色谱图谱。

液相色谱的优势在于对极性和疏水性化合物的分离能力强,广泛应用于生物化学、制药、环境监测等领域。

不同类型的液相色谱仪,如高效液相色谱仪(HPLC)、超高效液相色谱仪(UHPLC)等,有着不同的性能和应用领域。

液相色谱仪的三大系统特点

液相色谱仪的三大系统特点

液相色谱仪的三大系统特点液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。

高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统,下面将针对3大系统,叙述其各自的组成与特点。

1.进样系统液相色谱仪一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。

这对提高分析样品的重复性是有益的。

2.输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。

高压泵的一般压强为l.47~4.4X10Pa,流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。

流动相贮存器和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。

这就可使各种物质(即使仅有一个基团的差别或是同分异构体)都能获得有效分离。

3.分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。

色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管),内径为2~5mm,由优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如硅胶表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔径可达1000?)和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样),或者用化学法偶联各种基因(如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。

因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。

例如,在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。

另外,固定相基质粒小,柱床极易达到均匀、致密状态,极易降低涡流扩散效应。

基质粒度小,微孔浅,样品在微孔区内传质短。

这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。

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赛普瑞斯液相色谱

赛普瑞斯液相色谱

赛普瑞斯液相色谱
赛普瑞斯液相色谱
赛普瑞斯液相色谱是一种现代分离分析技术,它被广泛应用于生物制药、食品、环境和临床等领域。

赛普瑞斯液相色谱系统主要是由液相色谱仪、进样器、固定相系统和检测器等部分构成,其中,液相色谱仪是整个系统的核心部件。

液相色谱技术可以有效地将混合物中的化合物分离并测定其浓度。

它具有分离极性化合物的能力,尤其适用于分离生物样品中的蛋白质和多肽分子。

赛普瑞斯液相色谱系统的优点在于其高灵敏度、高分辨率和高可靠性。

同时,与传统的色谱技术相比,该系统具有更快的分离速度和更高的分辨率。

赛普瑞斯液相色谱系统的操作也比较简单。

首先,样品需要被进样器输入系统。

进样器是可以选择不同的样品输入方式,如自动进样器或手动进样器。

其次,样品通过液相色谱柱进行分离。

固定相系统是提供了各种选择,灵活地适应不同样品的要求。

最后,检测器检测和测量不同化合物从液相色谱柱中流出的时间和强度信号,并生成一个色谱图。

色谱图反映样品中各化合物的相对浓度和分离效果。

赛普瑞斯液相色谱系统的应用领域非常广泛。

在生物制药领域,它可以被用来研究重组蛋白质、特定抗体和多肽的纯度和质量控制;在食品检测领域,它可以被用来研究食品制品中的添加物和残留农药;在
环境检测领域,它可以被用来研究各种环境污染物的分离和测定;在临床检测领域,它可以被用来研究多种生理指标和药物浓度的分离和测定。

总的来说,赛普瑞斯液相色谱系统是一种极为重要的分析工具,可以为许多领域的研究提供有力的支持。

该系统具有快速、可靠、高灵敏度、高分辨率和操作简单等优点。

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的推论, 所以对这类组分可以只采用一个c 利用 库,
其 ac 、线性关 系加以定性[ 2
表5 列出了苯氧羧酸类及其甲酯类除莠剂在甲
醇- 水冲洗剂下 的标准 ac , 、值 在苯 氧羧酸 类组 分取
代一个甲基后所引起的参数a 、 的变化(a c 是 ) 恒定的( 参见表 5, 这种分子结构基团对参数ac 的 影响规律可以提供组分的结构信息, 以便辅助作用
便 提高检测灵敏度 。因为 只有含水 的极 性冲洗剂 才 能溶解 电解质 , 因此采 用反 相色谱分离 是 电化学检 测 的先 决条 件。图 1 显示了酸抑制反相分 离苯脲类
除莠剂类样品分析方法的推荐
除莠剂分为苯氧羧酸类、 苯脲类、 三嗪类、 醚类 和酚类等, 由于大部分除莠剂类化合物极性大、 蒸气 压低, 所以通常都采用液相色谱来分析, 而反相液相 色谱技术作为目 前最常用的分离和分析水样、 谷物、 土壤中除莠剂的方法 41 既方便又先进。 -3 ) 对于易解 离的苯氧羧酸类除莠剂, 还可采用酸抑制反相色谱 技术, 使流动相的p H值小于组分的pa 以抑制 K 值,
D SFrnt , . . ok s JH A R zk, ..arg n R G H pi . . . . uia i o n c
A a s,1 2 37 9 7 . nl t 0 ,7 y 7)
i RvrdP a L u C r a g py P C C n n ee-hs i i ho t ah ( L ) e s e d m o q r R h e Nn. a Y u& L Pc n. ln t t o o Z n u i u ia D i I ie g h g k eh g a nt f a su Ceil ss A d i S i , a a Crmo a i h c P i. e a c Nt l oagpc m h c c m ia y a n i h tr n o
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(9 6 . 17 ) JF L w ec,D T r n J C rm tg. 19 2 7 . .a rne . ut , . ho aor o 5 ,0 (9 8 . 17 )
表 1 苯脲类除莠剂 的标准 ac 、值
表 2 作用指数对苯脲类除莠剂的定 性结果
正好相反。注意到结构上P T比D T多两个亚甲 M M
基, 我们认 为文 献上 的定性结果是值得怀疑的 。
反相液相 色谱 作用指数定性与 紫外光谱 定性可
以相互补充。图3 显示了三嗪类除莠剂A ZDA T I、 D ADH A的紫外光谱图。 E IAH 从图上可见, 结构上
(96. 18)
反相高效液相色谱法( 邻苯二甲醛柱前衍生)
时测定血清胸腺因子和胸腺素 α
赵克胜
( 陕西省人民医 西安,10 ) 院, 70 8 6
F n so r cs R a ec i a
I t to Gn aPt lyCtl Uirt Rm Il ni e e r aog, hi n ei, oe y s u f e l o a o t h c v s y t) a 量分析具有 明显的应用价值。
体内外实验研究均已证明血清胸腺因子(T ) FS 和胸腺素 1 H ) ═ Y是促进淋巴细胞分化并增强其功 T 能的重要因子 。 它们在血清中水平变化受某些生 物因素和疾病的影响, 诸如肿瘤、 免疫缺陷或衰老等
均可导致 F ST Y水 平 下降[3 此外 胸腺激 素在 T H 2; ,
材料和方法
( 一 试剂 标准 F S T Y及 N 亮氨酸 ( - T H - N
采用作用指数定性是通过建立标准的ac 指数 库、 利用双柱之间的a 线性关系 2进行的。 列 - a 3 表1 出了苯 类除 剂在甲醇 水体系中的标准 。 、值 。
表2 列出了采用作用指 数对苯脲类 除莠 剂进行 定性 的结果 , 2中的预 测结果 解释 了谱 图 1 表 中各组 分
的流出顺序。图 2显示 了 1 个苯脲类组分双柱之 间 1 的 a 线性关 系。 - a
R & A Cn r D i .1 6 1 . . ee, a t a n 10 2 l I ti ppr w d cs d e cmm ne n s e, e sus t r o edd h a i e h e sprt n e o fr rids E pr Ss m r eaa o m t d h b i i x et t f i h o e c e n ye o L . e o sr e t me o o pa i nict n C W as d ci d l e b h e t d ek ti i h f d fao e fr b ie b uig eat n dx R L bs o hrids s it co i e i P C e e c y n n r i n n ad o te nad c r et n ai l' n s dr a i e n o eu t n =絘 a c B h t a , n i q o g t k + C i R L .T e er rlinhp clm pihs n C h l a aa a osi o o n r P i n - et n u a a参来自考文献
T B aman . Gr . ru n ,L H. i ,JC rm tg. 2 6 7 mme . ho aor 0 , ( 9 1. 18) N. J V r u n a. J C rma g. 2 0 2 7 M. . emel e l,. ho t r , 4 , 4 e t o (92. 18)
吻合得很好 ,组分 P T D T预测的误差较大 。 M M 从
实测的k 可以看出,MT的保留值反而比P T的 ' D M 保留值还要大, 这与我们采用作用指数预测的结果
表 3 作用指数对三嗪类除莠剂的定性结果
表 4 三嗪类除莠剂的标准 a 值* 、 c
的线性关系。 4 图 显示的
c 线性关系证实 了理论上
临床中的应用也很普遍, 因此血清及其它体液中 FST Y的定量分析对研究免疫系统疾病具有重要 T H
Lu e O A 牛血清白蛋白(S ) P、 BA 均购自S m 公司, ia g 其它试剂购自Mr 公司。 ek c ( 二) 衍生化反应 5 FST Y或处理后的 0l H T 价值。 血清标本与等量硼酸缓冲液(.m l 、H95充 04o Lp . / 由于 目前胸腺肽 的生物学检 测方 法受体液 中某 分混匀后于冰浴中加入6 OA 01gm)混匀后 l (.m / l, P 些抑制因子的影响, 为此我们利用邻苯二 甲醛 立即取5 进样分析。 0l O A 与寡肽中 - P) 甘氨酸残基反应衍生较强荧光的 ( 三) 色谱条件 H L PC系统由Ca泵、C3 l r V-0 Vot oe a l, ty及L-荧光检测器、C C4 L- 原理( 4使用O A柱前衍生法对FST Y测定条件 梯度仪(ie Rm Il , P T H 进行 了研 究, 并对血清 中 F S T Y的提取 及测定 作 10 T H 0数据处理仪(e i, l e, wl C .S ) Prn Ee rNra , UA k m o k T 了初步探讨, 表明本法对体液中游离的FST Y定 T H 组成。 激发波长30m发射波长40m C8 Bo 4n 5n 1 i 柱 -
溶质与流动相组分的相互作用能。
图 2 1个苯脲类除莠剂的双柱之间的a 线性关系 1 - a 图 1 酸抑制反相分离苯脲类除莠剂的谱图 9 E al 1 甲醇 水(0 3 电化 rs C8 b i , - 7 : 0, 学检测, - 峰定性
参见表 1 。 a a 分别为 Ebs-1 Sao -1 的 a 和 标 攴 r iC8 is bC8 al 和 l r 上 值
其解离, 增加其与中性C8 1 键合相的疏水作用力。所
以 , 柱系统推荐原则 , 色谱 是分析 除莠剂 类 根据 反相 样品的第一选 择。
品的分析方法及其定性进行验证。
检测器的选择
基于除莠剂组分大都含有强的紫外吸收基团, 故对除莠剂类样品可以采用紫外检测。而对于易解 离的除莠剂组分也可采用反相色谱电化学检测, 以
仅 区别 于烷基 的 DH 、 E A H 的紫外光谱 相差 IA D H 、 A 图 3 三嗪类除莠剂的紫外光谱图
各组 分的 化学结构如下 :
较小, 但它们的参数a 值却相差很大, 、 因此很容易 用作用指数进行定性。表 4 列出了三嗪类除莠剂甲 醇 水体系中的标准a 值。文献[1有一组三嗪类 、 1] 除莠剂的保留数据, 参见表3 。采用指数预测的三嗪 类除莠剂的保留值也一并列在表中。比较预测值和 实测值可以看出, 组分S TA Z实测 k与预测k M 、T ' '
PJne , Sae, .ho a g.3617 .adr M.pck JCrm t r 6,0 a o
(9 6. 1 8) G. h v v,C B ra n , . ho aor 3 6 39 C i ai . egmii JC rm tg. 4 ,6 a (95. 18)
Q G re vn hi e a nl hm 5 ,77 . o n N r g l d o e n t .A a C e . 8 27 .
指数定性。苯氧羧酸类除莠剂取代 甲基后 a 为常数 说 明其结构上的相关性 , 以参 数 ac 所 之间应有很好
表 5 苯氧羧酸 类除 莠剂及其甲酯的标准 ac 、值以及 a △ 值 、c
T Bam n ea , C r a g.2 13918) .ru an l J ho t r 6,2(93. t . m o .
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