抗安氏隐孢子虫单克隆抗体的制备与鉴定

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经３～５次有限稀释克隆化，选出４株持续分泌抗体的杂交瘤细胞株．过ＥＩＡ，Ａ和ＥＴ筛通ＬＳＩＦＩＢ测其反应性．结
果表明，杂交瘤细胞培养上清效价为１１０～１１０，生腹水效价为１６４０～１１２４０４株单抗均特４株：０：２８０诱：０：００；
ｔｖｅｅａｉｎｆｃｏｉｇｆｕｙｒｄｍａｃｌｃｏｅｒｂａｎｄ．Ｔｅｃａａｔｒｚｔｎ０ＡｂｓｏｆｅｇｎｒｔｏｓｏｌｎｎｒｈｂｉｏｅｌｌｎｓｗｅｅｏｔｉｅｉｏｈｈｒｃｅｉａｉｆＭｃｏ
ｗａｔｄｅｙＥＬＩＡ．ＩＡｎＴｓｓｕｉｄｂＳＦａｄＥＩＢ．Ｒｅｕｔｎｉａｅｈｔｔｅｓｐｒａｔｔｔｒａｇｄｆｏ１１０ｔｓｌｓｉｄｃｔｄｔａｈｕｅｎｎｉｓｒｎｅｒｍ：ｏｅ０
ＹＡＮＧｎｙＨｏｇ—ｕ，ＬＡＮＧｎ，ＺＩＮａＨＡＮＧｕｍｅ，ＪＡＮ — ｈｎ，ＺＨＡＮＧｎ — ｉｎ，ＮＩＳ— ｉＩＦｕｃｕＬｏｇｘａＮＧａｇ－ｈｎＣｈｎｓｅｇ
（ｎｉｅｒｎｏｌｇｆＡｎｍａｓａｄｙａｄＶｔｒａｃｅｃ，Ｈｅａｒｕｔｒｌｉｅｓｙ，ＥｇｎｅｉｇＣｌｅｏｉｌＨｕｂｎｒｎｅｅｉｒＳｉｎｅｅｎｙｎｎＡｇｉｌａｖｒｉｃｕＵｎｔ
ｄｎｉｅｏｙｔｗａｌａｔｅｅｔｉｄｏｅｓｌｎｉｎ．ＷｅｔｒｌｔｐｏｉｈｗｓｔａｈｏｒＭｃｓｃｕｌｅｒｃｇｚｄｒ — ｆｇｓｅｎｂｏｏｆｅｓｏｈｔｔｅｆｕＡｂｏｄｂｅｏｎｉｅｅｌ
ｌ０ｎｄａｃｔｓｔｅｓｆｏ１６４０ｔ１２４０．ＥｘｍｉｄｗｉｈＩＡ．ａｌｍｏｏｌｎｌａｃｔｓｉ：１８０ａｓｉｅｉｒｒｍ：０ｏ１：００２ｔａｎｅｔＦｌｎｃｏａｓｉｅ－
异性识别安氏隐孢子虫卵囊壁抗原；疫印迹表明，免４株单抗分别与３．９．Ｄ的主要抗原蛋白条带起反８０～７２ｋ
应．
关键词：氏隐孢子虫；克隆抗体；ＬＳＩＡ；ＩＢ安单ＥＩＡ；ＦＥＴ中图分类号：８２７￥５．２文献标志码：Ａ
Ｐｒｐｒｔｏｎｈｒｃｅｉａｉｎｏｏｏｌｎｌａｔｂｄｅｅａａｉｎａｄｃａａｔｒｚｔｏｆｍｎｃｏａｎｉｏｉｓ
ａａｎｔＣｒｐｔｓｒｄｕａｄｒｏｉｇｉｓｙｏｐｏｉｉｍｎｅｓｎ
抗安氏隐孢子虫单克隆抗体的制备与鉴定
杨红玉，梁楠，素梅，复春，龙现，张菅张宁长申
（河南农业大学牧医工程学院，南郑州４００）河５０２
摘要：纯化的安氏隐孢子虫卵囊超声波破碎，复冻融后免疫ＢＬ／将反ＡＢＣ小鼠，其脾细胞与Ｓ２０细胞融合．取Ｐ／
ｓｌｃｅｏｆｅｗｉｈＳ２ＯｃｌｓＴｏｉｖｌｓｗｅｅｓｌｃｅｙｉｄｒｃＩＡ，ａｄａｔｒｔｒｅｅｅｔｄｔｕｓｔＰ／ｅｌ．ｈｅｐｓｔｅｗｅｌｒｅｅｔｄｂｎｉｅｔＥＬＳｉｎｆｅｈｅ
第４４卷
２１００年
第１期
２月
河南农业大学学报
ＪｕｎｌｏｎｎＡｇｉｕｔｒｌＵｎｖｒｉｙｏｒａｆＨｅａｒｃｌｕａｉｅｓｔ
Ｖｏ．４１４ＮＯ．１
Ｆｅｂ．
２ＯＯ１
文章编号：００— ３０２１）ｌ０６０１０２４（０００一０５— ４
Ｚｅｇｈｕ４００，ｈｎ）ｈｎｚｏ５０２Ｃｉａ
Ａｂｔａｔｓｒｃ：ＢＡＬＢ／ＣｍｉｅｗｅｅｉｃｒｍｍｕｉｅｗｉｈｐｒｆｅｏｃｓｎｉｅｓｏｎｚｄｔｕｉｄｏｙｔａｔｎｆＣ．ａｄｒｏｉｗｈｉｈａｉｇｎｅｓｎｃｈｄ
ｂｅｒｅｅｎｈｗｅｏｅｅａｉｓａｄｔｅｔｄｂｌａｏｉｖ．Ｓｌｅｅｌｆｔｅｍｉｅｗｅｅｅｎｆｅｚｎａｄｔａｄｆｒｓｖｒｌｍｅｎｒａｅｙｕｔｓｎｃｗａｅｔｒｐｅｎｃｌｓｏｈｃｒ