拟穴青蟹Sp-Sox14基因在胚胎发育和性腺发育过程中的表达

卯黄发 生前期（０２）的表达量 显著高于卵巢其他发育阶段 ；而在精巢发育过程 中胞期（Ｔ１）和精 子细胞期（Ｔ２）。推测其参 与卵巢的前期发育
以及 精 子 成 熟 等 过 程 。整 胚 原 位 杂 交结 果 显 示 ，ｓｐ．Ｓｏｘｌ４在 青 蟹胚 胎 复 眼 色 素 形 成 期 阳
收 稿 日期 ：２０１７－０２．１２ 修 回 日期 ：２０１７－０４—０９ 资助 项 目 ： 国家 自然 科 学 基 金 （３１４７２２６６，４１６７６１６１， ３１６７２６８１１ 通 信 作 者 ：王 艺 磊 ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｉｌｅｉｗａｎｇ＠ｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
ｈｔｔｐ：／／ｗｗ ｗ．ｓｃｘｕｅｂａｏ．Ｃｌｑ
２期
梁 可 蓥 ，等 ：拟穴 青蟹Ｓｐ—Ｓｏｘｌ４基 因在 胚胎 发育 和性 腺发 育过 程 中 的表 达
化 。ＳｏｘＢ基 因 除 了被发 现 在神 经 祖 细胞 有 表 达 以外 ，在 神 经 嵴 及 其 衍 生 的 组 织 细 胞 也 有 表 达 ，神 经 嵴 在 胚 胎 随后 的 发 育 过 程 中 ，可 迁 移 至 特 殊 区域 ，进 一 步 发 育形 成 外 周 神 经 系 统 以 及 眼 睛等重 要器 官结 构 ［２”。与脊 椎 动物 相 比 ，无 脊椎 动 物ＳｏｘＢ基 因的研 究甚 少 。有 文献 指 出 ，在 黑 腹果 蝇 （Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）胚 胎 形成 过 程 中 ，Ｓｏｘｌ４基 因广 泛 且 微 量地 表 达 ；三 角 涡 虫 （Ｄｕｇｅｓｉａｊａｐｏｎｉｃａ）的ＳｏｘＢ基 因特异 表 达 于头 部 和 肠道 ，且 对 三角 涡虫 头部进 行 切除后 ，ＳｏｘＢ基 因 的表 达可 参 与促进 头 部和 神经 再生 ；中华绒 螯 蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓ￣）中发 现一个 ＳｏｘＢ２基 因在性 腺 中特 异表 达 【２ 。有 关 拟穴 青 蟹 （Ｓｃｙｌｌａｐａｒａｍａｍｏ— ｓａｉｎ）Ｓｏｘｌ４基 因在性 腺 发 育 和胚 胎 发育 中可 能作 用 的研究 尚未报 道 。
性 信 号定 位 于 头 部 以及 鄂 足 附 近 ，在 近 孵 化 期 定位 于 复 眼 附近 ，幼体 孵 出期 则 在 头 部 仍
有少量信号 ，暗示其 与青蟹神经器官的形成 以及体节附肢 的发生有关。
关键 词：拟穴青蟹；Ｓｐ—Ｓｏｘｌ４；胚 胎发育；性腺发 育；基 因表达
中图分 类号 ：Ｑ ７８６；Ｓ ９６８．２５
第４２卷第２期
水 产 学 报
Ｊ０ＵＲＮＡＬ ０Ｆ ＦＩＳＨＥＲＩＥＳ ０Ｆ ＣＨ１Ｎ Ａ
— ＝＝ ＝＝＝ ＝ ＝＝ ＝＝ ＝＝＝ ＝＝ ＝＝＝ ＝＝ ＝＝＝ ＝＝ ＝＝＝ ＝＝ ＝＝＝ ＝＝ ＝＝＝ ＝＝ ＝＝ ＝＝ ＝＝ ＝— ＝＝ ■ ＝ ＝
文章 编号 ：１０００ ０６１５（２０１８）０２—０２０４—１２
肢动物 的Ｓｏｘｌ４亲缘关 系较近。实 时定量ＰＣＲ结果显示 ，ｓｐ—Ｓｏｘｌ４在成蟹雌雄各 组织 中均
有不 同程度的表达 ，其 中在 卵巢 和雄 蟹心脏 中的表达量 最高。在胚胎发 育过 程 中，Ｓｐ— Ｓｏｘ１４在复眼色素形成期的表达量显著高于其他 时期。在性腺不同发育阶段 ，Ｓｐ．Ｓｏｘｌ４在
摘 要 ：为 了解Ｓｏｘ１４基 因在 拟穴青蟹胚 胎 发育和性腺 发育过程 中可 能起 到的调 控作用 ，
实 验 从 青 蟹 性腺 转 录 组 数 据 库 中得 到全 长为 ２５５８ ｂｐ的Ｓｐ—Ｓｏｘ１４ ｃＤＮＡ序 列 ，该 序 列编 码
一 个包含４２７个 氨基酸 的蛋 白，包含 一个ＨＭＧ－ｂｏｘ。进化树分析表 明 ，Ｓｐ—Ｓｏｘｌ４－￣其他节
Ｖ ０１．４２．Ｎ ｏ．２ Ｆｅｂ一 ２Ｏ１８
ＤＯＩ：１０．１ １９６４￣ ．２０１７０２１０７１２
拟 穴青蟹 ．Ｓｏｘｌ４基 因在胚胎 发 育和性腺 发 育过 程 中的表达
梁可蓥 ， 张子平 ， 廖佳倩 ， 邹志华 ， 王艺磊
（１．集 美 大 学 水 产 学 院 ， 农 业 部 东 海 海 水 健 康 养 殖 重 点 实 验 室 ， 福 建 厦 门 ３６１０２１； ２．福 建 农 林 大 学 动 物 科 学 学 院 ，福 建 福 州 ３５０００２）
或缺 的作 用 。基 于 对Ｓｏｘ基 因 的完 整 ＨＭＧ．ｂｏｘ、 基 因结 构 、氨基 酸 序 列 及 其 在 不 同 发 育过 程 的 广泛 表 达 功 能 的 比较 ，可将 Ｓｏｘ基 因分 成 Ａ～Ｊ共 １０个 亚 族 ［１ ４－１ ６］，其 中 ，ＳｏｘＢ又 可分 为 ＳｏｘＢ１和 ＳｏｘＢ２两个 亚族 。ＳｏｘＢｌ（Ｓｏｘｌ、Ｓｏｘ２和Ｓｏｘ３）作 为 转 录激 活 子 ，而 ＳｏｘＢ２（Ｓｏｘｌ４和 Ｓｏｘ２１）作 为 转 录 抑制 子 。ＳｏｘＢ２中 的ＨＭＧ．ｂｏｘ结 构 域 的Ｃ末 端 中 含有一 个转 录抑 制域 ，且 Ｓｏｘｌ４ＬＬＳｏｘ２１的转 录抑 制 效 果 更 为 强 烈 。 通 过 该 Ｃ末 端 转 录 抑 制 域 ， ＳｏｘＢ２与 ＳｏｘＢ１竞 争 结合 ＤＮＡ或者 与其 他 蛋 白相 互 作用 ，来 调节 神经 系统 的发育 和分 化［１ ７２。神经 发 生（神 经元 发育 ）始 于胚 胎期 ，此 时神 经前 驱蛋 白 能 使 Ｓｏｘ １ ４和 Ｓｏｘ２ １基 因 上 调 表 达 ，干 扰 ＳｏｘＢ１转 录激 活子 的活性 。Ｓｏｘ１４作 为转 录阻遏 物 ，可 能 在 脊 髓 和 脑 神 经 的腹 侧 中 间神 经 特 化 中产生 作用 ，与Ｓｏｘ１．３拮抗 从 而促 进神 经 细胞分
文献标 志码 ：Ａ
早 在 １９９０年 ，Ｇｕｂｂａｙ等 ［１ 在 小 鼠体 内第一 次 发现 了ｓ，ｙ（Ｙ染 色体 上性 别决定 区域 ，ｓｅｘ ｄｅｔｅｒｍ— ｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ Ｙ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ）基 因 ，之 后 与其 序 列 中保 守 的ＨＭＧ．ｂｏｘ（高 迁移率 结构 域 ，ｈｉｇｈ ｍｏ— ｂｉｌｉｔｙ ｇｒｏｕｐ ｂｏｘ）具 有 高 度 相 似 性 的 Ｓｏｘ（ｓｒｙ—ｌｉｋｅ ｈｉｇｈ—ｍｏｂｉｌｉｔｙ ｇｒｏｕｐ ｂｏｘ）基 因家族 相 继被 发现 与证 实 ］。ＨＭＧ结 构 域 蛋 白 中 含 有 ２到 多 个 典 型 ＨＭＧ结 构 域 ，该 结 构 域 一般 含 有 ８０个 左 右 的氨 基酸 残 基 ，形 成一 个 Ｌ型 ，并 且 含有 ３个 ａ螺旋 和 一 个 Ｎ端 的Ｂ片层 ］，使 得 Ｓｏｘ蛋 白能 以空 间特 异 性 的方 式与ＤＮＡ结合 ，从 而调 节靶基 因的转录［２１。 对 脊 椎 动 物 的 不 同 细胞 及 不 同 组 织 的Ｓｏｘ基 因 的 突变 和 敲 除 的大 量研 究 表 明 ，Ｓｏｘ基 因 编码 的 蛋 白作 为 一 类 重 要 的转 录 因 子 ，对 胚 胎 发 育 、 器 官形 成 、性别 决定 、神 经系 统形 成 ］、骨 骼 发 育 和血 细胞 生成 。 等 多个 过程 起 着不 可