第9章-二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析

2. 缩合反应
异烟肼 香草醛 H2O、异烟腙（黄色） 测定熔点
CONHNH2
+ N
CHO
H2O OCH3 OH
CONH N CH
N
OCH3
OH
鉴别试验
异烟肼 ChP（2000） 【鉴别】 （1）取本品约0.1 g，加 水5 ml溶解后，加10％香草醛的乙醇 溶液1 m1，摇匀，微热，放冷，即析 出黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶， 在105℃干燥后，测定熔点，其熔点为 228～231℃，熔融时同时分解。
尼莫地平 ChP (2010)
[鉴别] 取本品约20mg，加乙醇2ml溶解后，加新制的5% 硫酸亚铁铵溶液2ml，1.5mol/L硫酸溶液1滴与0.5mol/L 氢氧化钾溶液1ml,强烈振摇，1分钟内沉淀由灰绿色变 为红棕色。
鉴别试验
化学鉴别法
与氢氧化钠试验反应
R
1
N
CH3
R2OOC
COOR3 丙酮＋NaOH
含量测定
紫外－可见分光光度法
标示量％＝
A供 A对

C对

D
粒数 标示量
100％＝
0.562 0.576

10.0210
100 50 1010

100100 2
100％＝97.8％
含量测定
高效液相色谱法
尼莫地平分散片（20mg/片）的含量测定：避光操作。 取本品20片，精密称定为3.9672g，研细，精密称取 0.1022g，置50ml量瓶中，加流动相适量，超声处理15min 使尼莫地平溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，离 心10min，精密量取上清液5ml，置50ml量瓶中，用流动相 稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，尼 莫地平峰面积为428654；精密取尼群地平对照品10.14mg， 置100ml量瓶中，流动相溶解并稀释至刻度，精密量取 10ml，流动相稀释至50ml,同法测定得尼莫地平峰面积为 436219，按外标法以峰面积计算本品含量。
含量测定
紫外－可见分光光度法
尼群地平软胶囊（10mg/粒）的含量测定：避光操作。 取本品10粒，置于小烧杯中，用剪刀破囊壳，加无水乙醇 少量，振摇使溶解后，将内容物与囊壳全部转移至具塞锥 形瓶中，用无水乙醇反复冲洗剪刀及小烧杯，洗液并入锥 形瓶中，将锥形瓶密塞，置40℃水浴中加热15min，并不 断振摇，将内容物转移入100ml量瓶中，用无水乙醇反复 冲洗囊壳和锥形瓶，洗液并入量瓶中，用无水乙醇稀释至 刻度，摇匀，精密量取2ml，置100ml量瓶中，用无水乙醇 稀释至刻度，摇匀，在353nm的波长处测定吸光度为0.562； 精密称取尼群地平对照品10.02mg，置100ml量瓶中，无水 乙醇溶解并稀释至刻度，精密取10ml，无水乙醇稀释至 50ml，同法测吸光度为0.576，计算本品含量。
供试品溶液所显主斑点的位置与颜色应与对照品溶液的 主斑点一致。
有关物质的检查
HPLC
硝苯地平
CH3
H N
CH3
光
CH3
H N
CH3
光
CH3
H N
CH3
CH3OOC
COOCH3
CH3OOC
NO2
O
COOCH3
CH3OOC
NO2
O
COOCH3 NO
杂质I
杂质II
铈量法
原理
CH3
H N
CH3
CH3OOC
橙红色
NO2
硝苯地平 ChP (2010)
[鉴别] 取本品约25mg，加丙酮1ml溶解，加20%氢氧化 钠溶液3～5滴，振摇，溶液显橙红色。
鉴别试验
化学鉴别法
与氢氧化钠试验反应
药物 硝苯地平 尼群地平
尼索地平
试剂 丙酮、氢氧化钠 丙酮、氢氧化钠
丙酮、氢氧化钠
现象 橙红色 橙黄色
橙红色
鉴别试验
化学鉴别法
异烟肼：
CONHNH2 KMnO4或溴水
N
COOH N
鉴别试验
（2）二硝基氯苯反应
异烟腙 ChP（2010）
[鉴别] 取异烟腙约50 mg，加2,4－二硝基氯苯 50 mg与乙醇3 m1，置水浴中煮沸2～3 min，加 10％氢氧化钠溶液2滴，静置后，即显鲜明的红 色。
鉴别试验 （二）酰肼基团的反应 1. 还原反应
异烟肼 尼可刹米
HgCl2
白色

鉴别试验
（2）与铜盐的反应 尼可刹米 ChP（2010）
[鉴别]（3）取本品 2 滴，加水 1 ml，摇匀，加硫酸 铜试液2滴与硫氰酸胺试液3滴，即生成草绿色沉淀。
尼可刹米 CuSO4 NH4SCN 草绿色
鉴别试验
2. 吡啶环的开环反应 适用于吡啶 、′未取代，以
尼伐地平
NO2
（Nilvadipine）
主要理化性质
如何利用物理方法区别阿司匹林与 硝苯地平？
主要理化性质
二氢吡啶环
还原性 氨基质子解离性 稳定性：应避光操作 旋光性
硝基氧化性 苯环取代基
UV
鉴别试验
化学鉴别法
与亚铁盐反应
R1 N CH3
R2OOC
＋ COOR3 氢氧化亚铁
氢氧化铁
NO2
尼莫地平片 ChP2010
[鉴别](2)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶 液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
鉴别试验
色谱鉴别法
薄层色谱法 硝苯地平 BP2010
[鉴别]取本品加甲醇制成每1ml中约含1mg的溶液，作为 供试品溶液；另取硝苯地平对照品适量，加甲醇制成每 1ml约含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶 液各5μl，分别点于同一硅胶F254薄层板上，以乙酸乙 酯－环己烷（40:60）为展开剂，展开，晾干，置紫外 光灯（254nm）下检视，要求？
异烟肼 AgNO3 Ag（黑色 、银镜） N 2
鉴别试验
异烟肼 ChP（2010） 【鉴别】 （1）取异烟肼约10 mg， 置试管中，加水2 ml溶解后，加氨制 硝酸银试液1 m1，即发生气泡与黑色 浑浊，并在试管壁上生成银镜。
异烟肼 SeO2 Se （红色）
鉴别试验
含量测定
标示量％＝
A A
供 C对 D
对
W 标示量
W
10.14 100％＝100 5

428654 10 436219
0.1022 20
50
3.9672 20
100％＝96.7％
吡啶类药物的分析
结构特点

N
O
NHNH2
C
吡啶
O N(C2H5)2 C
N 异烟肼（isoniazid）
COOCH3
含量测定
+ 2 Ce(SO4)2 +6HClO4
NO2
CH3 N CH3
CH3OOC
COOCH3
NO2
+ 2 Ce(ClO4)3 +4H2SO4
含量测定
铈量法
条件
强酸性：高氯酸 滴定剂：硫酸铈，易提纯，稳定 指示剂：Ce4+/Ce3+，邻二氮菲指示液 空白试验校正
铈量法
含量测定
结构与常见药物
CH3
H N
CH3
CH3
H N
CH3
CH3CH2OOC
CClOOCH3 CH3OOC
COO(CH2)2N(CH3)CH2C6H5·HCl
Cl
非洛地平
（Felodipine）
NO2
盐酸尼卡地平
（Nicardipine Hydrochloride）
NC
H N
CH3OOC
CH3 COOCH(CH3)2
鉴别试验
化学鉴别法
重氮化－偶合反应
R
N CH3
R
N CH3
R2OOC
COOR3 Zn/H+ R2OOC
COOR3 NaNO2/H+
R R2OOC
NO2 N CH3
COOR3
N＋Cl－
氨基磺酸铵
NH2 ·HCl
NH2
红色
HN
盐酸萘乙二胺
鉴别试验
化学鉴别法
重氮化－偶合反应
硝苯地平注射液 BP2010
测定；
可与某些羰基试剂发生缩合反应：鉴
别或比色法含量测定；
酰胺键易水解引入特殊杂质游离肼。
结构与性质
尼可刹米 位上酰胺基 易水解，遇碱水解后，释放出具有 碱性的二乙胺，能使湿润的红色石蕊 试纸变蓝色，故可以此进行鉴别。
O N(C2H5)2 C
N
鉴别试验
（一）吡啶环的反应 1. 沉淀反应
（1）与氯化汞的反应
鉴别试验
光谱鉴别法
紫外分光光度法
尼群地平软胶囊 ChP2010
[鉴别](3)避光操作，取本品内容物约1g,置100ml量瓶 中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，取10ml，置100ml 量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，照紫外－可见分光光 度法测定，在353nm与303nm的波长处分别测定吸光度， 在353nm与303nm的吸光度比值应为2.1～2.3。
硝苯地平
（Nifedipine）
CH3
H N
CH3
(CH3)2CHOOC
COO(CH2)2OCH3
NO2
尼莫地平
（Nimodipine）
CH3
H N
CH3
CH3CH2OOC
COOCH3
NO2
尼群地平
（Nifedipine）
CH3
H N
CH3
(CH3)2CHCH2OOC
NCOO2OCH3
尼索地平
（Nisoldipine）
1. 薄层色谱法（TLC） （1） ChP（2010） 杂质对照品法
特殊杂质检查
取本品，加丙酮－水制成每 1ml 中含 100mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫 酸肼加水制成每 1ml中含 0.08mg（相当 于游离肼20µg 的溶液，作为对照溶液。 吸取供试品溶液 5µl 与对照溶液 5µl 分 别点于同一硅胶薄层板（用羧甲基纤维素 钠溶液制备）上，以异丙醇－丙酮（3∶2） 为展开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对 二甲氨基苯甲醛试液，15min后检视，在 供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位 置上，不得显黄色斑点。
鉴别试验
（三）分解产物的反应 1. 尼可刹米 ChP（2010） 【鉴别】 （1）取本品 10 滴，加氢 氧化钠试液 3 ml ，加热，即发生二 乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试 纸变蓝色。
尼可刹米 NaOH Δ二乙胺
特殊杂质检查
三、杂质检查
（一）异烟肼中游离肼的检查 杂质来源 原料引入、降解产生
[鉴别]取本品25mg，加10ml盐酸－水－乙醇混合溶液 （1.5:3.5:5）,温热，加入锌粒0.5g，放置5分钟，滤 过，滤液加亚硝酸钠溶液（10g/L）5ml，放置2分钟， 再加入氨基磺酸铵溶液（50g/L）2ml,摇匀，加入盐酸 萘乙二胺溶液（5g/L）2ml，即显红色（持续5分钟以 上）。
及 、 为烷基或羧基的衍生物 （1）戊烯二醛反应（Köning反应）
鉴别试验
尼可刹米 ChP（2010）
【鉴别】（2）取本品1滴，加水50ml，摇匀， 分取2ml，加溴化氰试液2ml与2.5%苯胺溶液3 ml，摇匀，溶液渐显黄色。
尼可刹米 溴化氰 H2O 戊烯二醛衍生物苯胺 黄色
硝苯地平 ChP2010
[含量测定]取本品约0.4g，精密称定，加无水乙醇50ml， 微热使溶解，加高氯酸溶液50ml，邻二氮菲指示液3滴， 立即用硫酸铈滴定液（0.1mol/L）滴定，至近重点时， 在水浴中加热至50℃左右，继续缓缓滴定至橙红色消失， 并将滴定结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液 （0.1mol/L）相当于17.32mg的C17H18N2O6
鉴别试验
CON(C2H5)2 BrCN
CON(C2H5)2
N
N
CN Br
2 H2O OCH
CON(C2H5)2
CHOH
+ NH2CN + HBr
鉴别试验
OCH
CON(C2H5)2 + 2 CHOH
NH2
N CH
CH NH CON(C2H5)2
鉴别试验
戊烯二醛衍生物 苯胺 黄～黄棕色 戊烯二醛衍生物 联苯胺 淡红～红色
N 尼可刹米（nikethamide）
结构与性质
吡啶环
弱碱性 pKb～8.8，
非水碱量法含量测定 或沉淀反应鉴别。
N
O
N NH2 H
异烟肼
结构与性质
吡啶环
吡啶环可发生开环反应，可用于
吡啶类药物的鉴别。
N
O
N NH2 H
异烟肼
结构与性质
取代基：
O
异烟肼 位上酰肼基
N NH2 H N
还原性：鉴别或氧化还原滴定法含量
R R2OOC
沉淀反应：与重金属离子形成沉淀
Hg/Bi
N CH3 尼莫地平 HgCl2 R N CH3 白色
COOR3
R2OOC
COOR3
尼群地平 BiI3·4KI
NO2
橙红色
NO2
鉴别试验
化学鉴别法
沉淀反应：与重金属离子形成沉淀
尼莫地平注射液 ChP (2010)
[鉴别] （1）取本品约适量（约相当于尼莫地平20mg）， 置分液漏斗中，加乙醚30ml振摇提取，静置，分取乙醚 层，置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醇2ml，搅拌使溶 解，移至试管中，加1%氯化汞溶液3ml，即发生白色沉 淀。
鉴别试验
光谱鉴别法
红Байду номын сангаас分光光度法
尼群地平片 ChP2010
[鉴别](4)避光操作，取本品（约相当于尼群地平 100mg）,研细，加丙酮10ml，振摇使溶解，滤过，滤液 暗处挥干，残渣经减压干燥，依法测定。本品的红外光 吸收图谱应与对照的图谱（光谱集600图）一致。
鉴别试验
色谱鉴别法
高效液相色谱法
教学目标
掌握二氢吡啶类药物的基本结构与 主要理化性质；
掌握二氢吡啶类药物的化学鉴别方 法及熟悉有关物质检查的方法；
掌握铈量法测定二氢吡啶类药物的 含量的原理、方法及注意事项；
结构与常见药物
R1 R2OOC
N
1
6
2
5 43
CH3
COOR3 R4
R5
结构与常见药物
CH3
H N
CH3
CH3OOC
COOCH3 NO2