原生质体融合进技术与基因改组技术
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
从基因组改组技术的原理来看，进行基因组改组，首先要运用诱变育种的方法，以获得目的性状得到改进的正向突变菌株的基因组库
（3）温度 ，并作为首轮多亲株融合的直接亲株。
诱变育种的具体操作要根据不同菌种的特性而异。 基因组改组技术是建立在原生质体融合技术基础之上的一种菌种选育新技术，首先选择一个原始亲株，通过经典的诱变育种方法获得
融合后的原生质体在加稳定剂的再生培养基上能重 新形成细胞壁，恢复正常的细胞形态，并能生长繁 殖，形成菌落。
影响原生质体再生的因素 （1）菌种本身特性 （2）原生质体制备条件 （3）再生培养基成分 （4）再生培养条件
基因组改组技术
基因组改组技术是建立在原生质体融合技术基础 之上的一种菌种选育新技术，首先选择一个原始亲 株，通过经典的诱变育种方法获得合的直接亲株，然后进行 多亲株融合，使其全基因组进行随机重组，获得第 一代融合株；再从中选择表型获得进一步提高的菌 株作为下一轮融合的直接亲本，依此类推进行多轮 的多亲株融合，最终从获得的突变体库中筛选出性 状被提升的目的菌株
Genome shuffling 技术的具体方法
从基因组改组技术的原理来看，进行基因组改组， 首先要运用诱变育种的方法，以获得目的性状得到 改进的正向突变菌株的基因组库，并作为首轮多亲 株融合的直接亲株。诱变育种的具体操作要根据不 同菌种的特性而异。然后进行多亲株的递推式融合 （recursive fusion） 。
（4）亲株的亲缘关系的直接亲株，然后进行多亲株融合，使
其全基因组进行随机重组，获得第一代融合株；
（5）原生质体的活性 影响原生质体制备的因素
影响原生质体制备的因素 融合后的原生质体在加稳定剂的再生培养基上能重新形成细胞壁，恢复正常的细胞形态，并能生长繁殖，形成菌落。
制备好的二亲本原生质体可通过融合剂的作用进 诱变育种的具体操作要根据不同菌种的特性而异。
诱变育种的具体操作要根据不同菌种的特性而异。
行融合，融合剂有化学融合剂和物理融合剂。现在 影响原生质体再生的因素
制备好的二亲本原生质体可通过融合剂的作用进行融合，融合剂有化学融合剂和物理融合剂。
普遍采用的是PEG（聚乙二醇）介导的化学融合法。 影响原生质体再生的因素
原生质体融合进技术与基 因改组技术
原生质体融合技术
原生质体融合技术是一种通过人为的方法，是遗传 性状不同的体细胞的原生质体发生融合，并发生遗 传重组以产生同时带有双亲性状的、遗产性状稳定 的融合子的过程。 真核细胞和原核细胞都可以进行原生质体融合。原 生质体融合可以在不同种、属、科，甚至更远缘的 微生物之间进行。
的、遗产性状稳定的融合子的过程。 再从中选择表型获得进一步提高的菌株作为下一轮融合的直接亲本，依此类推进行多轮的多亲株融合，最终从获得的突变体库中筛选
原生质体融合 出性状被提升的目的菌株
再从中选择表型获得进一步提高的菌株作为下一轮融合的直接亲本，依此类推进行多轮的多亲株融合，最终从获得的突变体库中筛选 出性状被提升的目的菌株 再从中选择表型获得进一步提高的菌株作为下一轮融合的直接亲本，依此类推进行多轮的多亲株融合，最终从获得的突变体库中筛选 出性状被提升的目的菌株
（6）细胞浓度 真核细胞和原核细胞都可以进行原生质体融合。
主要是在高渗溶液中加入细胞壁分解酶，将细胞壁分离剥离，结果剩下由原生质膜包住的类似球状的细胞，它保持原细胞的一切活性 影响原生质体融合的因素 原生质体融合进技术与基因改组技术 原生质体融合可以在不同种、属、科，甚至更远缘的微生物之间进行。
原生质体再生
递推式融合的操作方法与原生质体融合技术基本 相同，首先要进行原生质体制备，随后是原生质体 融合、再生、鉴定和挑选等 。
，并作为首轮多亲株融合的直接亲株。 从基因组改组技术的原理来看，进行基因组改组，首先要运用诱变育种的方法，以获得目的性状得到改进的正向突变菌株的基因组库
（1） PEG ，并作为首轮多亲株融合的直接亲株。
影响原生质体制备的因素 原生质体融合可以在不同种、属、科，甚至更远缘的微生物之间进行。
（2）无机离子 融合后的原生质体在加稳定剂的再生培养基上能重新形成细胞壁，恢复正常的细胞形态，并能生长繁殖，形成菌落。
再次融合
细胞壁
细胞 壁溶 细胞膜 解酶
营养细胞
原生质体
原生质体融合
融合细胞
原生质体形成 原生质体融合 细胞壁再生
原生质体制备
主要是在高渗溶液中加入细胞壁分解酶，将细胞壁分离 剥离，结果剩下由原生质膜包住的类似球状的细胞，它 保持原细胞的一切活性
影响原生质体制备的因素 （1）菌体的前处理 （2）菌体的培养时间 （3）酶浓度 （4）酶处理温度 （5）破壁时的ph值 （6）渗透压稳定剂
原生质体融合技术是一种通过人为的方法，是遗传性状不同的体细胞的原生质体发生融合，并发生遗传重组以产生同时带有双亲性状 的、遗产性状稳定的融合子的过程。 （2）原生质体制备条件 真核细胞和原核细胞都可以进行原生质体融合。
影响原生质体融合的因素 从基因组改组技术的原理来看，进行基因组改组，首先要运用诱变育种的方法，以获得目的性状得到改进的正向突变菌株的基因组库
（3）温度 ，并作为首轮多亲株融合的直接亲株。
诱变育种的具体操作要根据不同菌种的特性而异。 基因组改组技术是建立在原生质体融合技术基础之上的一种菌种选育新技术，首先选择一个原始亲株，通过经典的诱变育种方法获得
融合后的原生质体在加稳定剂的再生培养基上能重 新形成细胞壁，恢复正常的细胞形态，并能生长繁 殖，形成菌落。
影响原生质体再生的因素 （1）菌种本身特性 （2）原生质体制备条件 （3）再生培养基成分 （4）再生培养条件
基因组改组技术
基因组改组技术是建立在原生质体融合技术基础 之上的一种菌种选育新技术，首先选择一个原始亲 株，通过经典的诱变育种方法获得合的直接亲株，然后进行 多亲株融合，使其全基因组进行随机重组，获得第 一代融合株；再从中选择表型获得进一步提高的菌 株作为下一轮融合的直接亲本，依此类推进行多轮 的多亲株融合，最终从获得的突变体库中筛选出性 状被提升的目的菌株
Genome shuffling 技术的具体方法
从基因组改组技术的原理来看，进行基因组改组， 首先要运用诱变育种的方法，以获得目的性状得到 改进的正向突变菌株的基因组库，并作为首轮多亲 株融合的直接亲株。诱变育种的具体操作要根据不 同菌种的特性而异。然后进行多亲株的递推式融合 （recursive fusion） 。
（4）亲株的亲缘关系的直接亲株，然后进行多亲株融合，使
其全基因组进行随机重组，获得第一代融合株；
（5）原生质体的活性 影响原生质体制备的因素
影响原生质体制备的因素 融合后的原生质体在加稳定剂的再生培养基上能重新形成细胞壁，恢复正常的细胞形态，并能生长繁殖，形成菌落。
制备好的二亲本原生质体可通过融合剂的作用进 诱变育种的具体操作要根据不同菌种的特性而异。
诱变育种的具体操作要根据不同菌种的特性而异。
行融合，融合剂有化学融合剂和物理融合剂。现在 影响原生质体再生的因素
制备好的二亲本原生质体可通过融合剂的作用进行融合，融合剂有化学融合剂和物理融合剂。
普遍采用的是PEG（聚乙二醇）介导的化学融合法。 影响原生质体再生的因素
原生质体融合进技术与基 因改组技术
原生质体融合技术
原生质体融合技术是一种通过人为的方法，是遗传 性状不同的体细胞的原生质体发生融合，并发生遗 传重组以产生同时带有双亲性状的、遗产性状稳定 的融合子的过程。 真核细胞和原核细胞都可以进行原生质体融合。原 生质体融合可以在不同种、属、科，甚至更远缘的 微生物之间进行。
的、遗产性状稳定的融合子的过程。 再从中选择表型获得进一步提高的菌株作为下一轮融合的直接亲本，依此类推进行多轮的多亲株融合，最终从获得的突变体库中筛选
原生质体融合 出性状被提升的目的菌株
再从中选择表型获得进一步提高的菌株作为下一轮融合的直接亲本，依此类推进行多轮的多亲株融合，最终从获得的突变体库中筛选 出性状被提升的目的菌株 再从中选择表型获得进一步提高的菌株作为下一轮融合的直接亲本，依此类推进行多轮的多亲株融合，最终从获得的突变体库中筛选 出性状被提升的目的菌株
（6）细胞浓度 真核细胞和原核细胞都可以进行原生质体融合。
主要是在高渗溶液中加入细胞壁分解酶，将细胞壁分离剥离，结果剩下由原生质膜包住的类似球状的细胞，它保持原细胞的一切活性 影响原生质体融合的因素 原生质体融合进技术与基因改组技术 原生质体融合可以在不同种、属、科，甚至更远缘的微生物之间进行。
原生质体再生
递推式融合的操作方法与原生质体融合技术基本 相同，首先要进行原生质体制备，随后是原生质体 融合、再生、鉴定和挑选等 。
，并作为首轮多亲株融合的直接亲株。 从基因组改组技术的原理来看，进行基因组改组，首先要运用诱变育种的方法，以获得目的性状得到改进的正向突变菌株的基因组库
（1） PEG ，并作为首轮多亲株融合的直接亲株。
影响原生质体制备的因素 原生质体融合可以在不同种、属、科，甚至更远缘的微生物之间进行。
（2）无机离子 融合后的原生质体在加稳定剂的再生培养基上能重新形成细胞壁，恢复正常的细胞形态，并能生长繁殖，形成菌落。
再次融合
细胞壁
细胞 壁溶 细胞膜 解酶
营养细胞
原生质体
原生质体融合
融合细胞
原生质体形成 原生质体融合 细胞壁再生
原生质体制备
主要是在高渗溶液中加入细胞壁分解酶，将细胞壁分离 剥离，结果剩下由原生质膜包住的类似球状的细胞，它 保持原细胞的一切活性
影响原生质体制备的因素 （1）菌体的前处理 （2）菌体的培养时间 （3）酶浓度 （4）酶处理温度 （5）破壁时的ph值 （6）渗透压稳定剂
原生质体融合技术是一种通过人为的方法，是遗传性状不同的体细胞的原生质体发生融合，并发生遗传重组以产生同时带有双亲性状 的、遗产性状稳定的融合子的过程。 （2）原生质体制备条件 真核细胞和原核细胞都可以进行原生质体融合。
影响原生质体融合的因素 从基因组改组技术的原理来看，进行基因组改组，首先要运用诱变育种的方法，以获得目的性状得到改进的正向突变菌株的基因组库