疟疾血片制作

薄 血 膜 制 作
▲将推玻片向1的方向稍抽回，当 血液充满推玻片适当宽度（约 2cm）后，以一定均匀的速度 向2的方向滑动（约2.5cm）。
制作薄血膜：
制作薄血膜：
◆血涂片质量评价： 血膜均匀、厚薄度合适、无空泡、无划痕
薄血膜头体尾位置和形状好、无停顿起伏、 两侧留出空间
注意： 血滴大，速度快、角度大 血滴小，速度慢、角度小
血片的制作续…
2、采血时间：症状发作后数 小时至10小时之内。
3、采血部位消毒：用沾有碘 酒的棉棒在患者手指末端、 耳垂、拇趾或足跟（婴幼 儿）从内向外画同心圆。
4、采血：将采血针迅速刺入 取血部位1~2mm深，用大 拇指、食指协同挤出血滴。 第一滴血因含有酒精，用 棉签擦去。再挤出第二滴 血用于制作血片。
二、血片染色
▲血片染色在血片的制作过程中是 一个重要的环节，染色质量的好坏， 直接影响到疟原虫的检出率，也是 直接影响疟疾病例确诊与否的关键。
▲ 疟疾血片的染色有瑞氏染液和吉 氏染液两种，我们现在重点介绍吉 姆萨染液染色法。
血片染色续…
▲ 染液为省寄生虫病防治所统一配制的吉
姆萨染液；为方便开展工作，经省寄生虫 病防治所反复试验，缓冲液选择市面上供 应的娃哈哈矿泉水为佳（在条件允许时配 制pH7.0~7.2的缓冲液为最佳选择）。 ■注：珠海贝索生物技术有限公司生产的 Baso姬姆萨染液：
疟疾血片制作
临沧市疾病预防控制中心
史爱军 2016年3月
主要内容
■血片的制作 ■血片的染色 ■影响血片制作质量的因素及
注意事项
◆重点应掌握的要点：
▲疟疾血片厚、薄血膜的制作要领。 ▲疟疾血片制作注意事项。
▲掌握血片制作技巧、反复练习。
一、血片的制作
（一）采血：
1、使用的器材准备：
◆一次性采血针 ◆75%酒精 ◆棉棒（球） ◆载玻片 ◆推片 ◆记号笔或铅笔。
血膜厚 血膜薄
薄血膜血球分布情况：
厚血膜制作：
推好薄血膜后，再 用推片一角由内向 外划圈涂制直径 0.8~1cm的圆形厚 血膜（厚度以一个 油镜视野内可见到 5~10个白细胞为 宜）。
血片的制作续…
3、编号：血膜制成后，立即 用特种蜡笔或水笔于玻片 面上写上受检者的号码， 以防差错，待薄血膜干后 再用铅笔于薄血膜中写上 血片种类的代号和受检者 的个人编号，依次顺序插 入标本盒内。每张载玻片 上可做1个薄血膜和1个厚 血膜，如图：
——A液为染液 ——B液为稀释液
血片染色续…
▲染色方法： 1.标准染色方法
——1滴原液+1ml缓冲液，染20～30分钟
2.快速染色方法 ——2滴原液+1ml缓冲液，染10～15分钟
血片染色续…
▲染色时，用吸管吸取配好的染液，以一定高度自
由滴下染液。禁止用吸管搅拌玻片上的染液或者 接触血膜。染色结束后将玻片浸入盆水中，使玻 片保持水平并左右轻轻移动，至干净时从水中轻 轻抽出。或者使用自来水冲洗，冲洗时，水平拿 起载玻片（不要先倒掉染液），从载玻片无血膜 区域（磨边处）用无冲击力的缓慢流水轻柔地把 染液冲掉，在确保厚血膜不掉的前提下，从玻片 另外一边再冲洗，直到确认冲洗干净。晾干时注 意薄血膜一端向下放置（用晾片板晾干）。
血片染色续…
▲未染色血片的保存
※未染色的血膜放置时间，夏季不 宜超过48小时，冬季不宜超过72 小时。若送省级或国家检测，应待 厚血膜干后，先用蒸馏水溶血，再 用甲醇固定薄血膜，晾干包好后放 入干燥的容器或自封袋中送检。
三、影响血片制作质量的因素及注意事项
※采血针一人一针； ※载玻片脏：有油脂、污迹； ※推片不规格； ※取血不适度； ※薄血膜过厚； ※厚血膜制作不均匀； ※染液杂质；
血片的制作续…
（二）涂制血片
1、取血: 将载玻片平均划分为2等份，用推片的一 角从患者刺血部位沾取血样放在载玻片上，或用 载玻片直接沾取血样。于载玻片中央偏右3mm处 粘取4~5ul（相当于一个火柴头大小）血液用于涂 制厚血膜，在玻片中央偏左3-5mm处粘取1~1.5 ul血液（相当于1/4火柴头大小）用于涂制薄血膜。
各种不同的疟疾血片涂制法：
标准血片 门诊发热病人血片
居民普查血片
血片的制作续…
4、干燥：可自然干燥，也可在手掌大鱼际肌 上摩擦干燥。或者使用酒精灯或电吹风加 热干燥，但需当心过度加热，烤伤血片。 而且，加热后必须待冷却至室温方能染色 或固定，否则染色冲片血膜会脱落。
5、固定：干燥后的血片用甲醇固定薄血膜。 固定时，注意薄血膜一端朝下，避免固定 厚血膜。
影响血片制作质量的因素及注意事项续…
※染液PH值不合适（适宜：7.0-7.2）； ※过度染色或染色不够； ※厚血膜溶解不够； ※血膜脱落； ※新鲜血膜由于保存不当被苍蝇或蚂蚁蚕食。 ※不要让所采集的血液触及到破损的皮肤。
◆染色质量
吉氏染色血片外观
偏酸 标准 偏碱
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要求:先沾取厚血膜血样，再沾取薄血膜血 样。
血片的制作续…
2、制片：左手拇指和食指托住载玻片的两个短边， 右手拇指和食指同时捏住推片和载玻片，使推片 保持25度~35度角，用推片短边的下缘平抵血样 前3-5mm处，然后推片顺着载玻片缓慢地向后退， 边退边观察血液在推片的扩展情况，当血液向两 侧扩展至距载玻片边缘2mm时，停止后退，然后 匀速向前推，直至推片抵到拿载玻片的手指。推 片时，右手拇指和食指要贴紧载玻片，避免推歪。 薄血膜要成舌状，厚度应以红细胞之间互相接触 而不重叠为佳。