高二级生物科第17周导学案

专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养编制人：梁美善审核人：黄崇继课时安排：第1课时使用班级：高二理科班
班别：姓名：学号：学习小组：
【预学案】
【学习目标】：了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。

【学习难重点】：无菌技术的操作
【自主学习】
一、培养基：
1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。

可分为培养基和培养基。

2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。

3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。

二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：
(一)获得纯净培养物的关键是，具体操作如下：
1．对实验操作的、操作者的和进行。

2．将用于微生物培养的、和等器具进行。

3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。

4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。

(二)消毒和灭菌
1．消毒是指。

常用的方法有、、消毒法。

2．灭菌是指。

常用的方法有：、、灭菌。

分别适用于那些用具？
〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？
〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？
〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止
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实验操作----大肠杆菌的纯化培养：
本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。

一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：、、、、。

〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？
溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？
〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？
2．倒平板：待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。

其过程是：
①在火焰旁右手拿，左手；
②使锥形瓶的瓶口；
③左手将培养皿，右手，立刻盖上皿盖。

④待平板冷却凝固后，将平板。

二、纯化大肠杆菌
微生物接种：最常用的是法和法。

另外还有穿刺接种和斜面接种等。

1．平板划线法是的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

其操作步骤是：①将在酒精灯火焰上灼烧直至。

②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。

③将菌种试管口通过火焰达到的目的。

④将冷却的接种环伸入到。

⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。

⑥将皿盖打开
一条缝隙，把接种环，盖上皿盖，不要划破培养基。

⑦灼烧接种环，冷却后从划线。

重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。

注意不
要将相连。

⑧将平板培养。

2．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将进行培养。

当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。

系列稀释操作：
①取盛有mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。

②用灼烧冷却的移液管吸取mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。

③从101倍液中吸取mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。

依此类推。

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课题1微生物的实验室培养【当堂训练】
编制人：梁美善审核人：黄崇继课时安排：第1课时使用班级：高二理科班
班别：姓名：学号：学习小组：
1、下列关于微生物营养的说法，正确的是 ( )
A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B．凡是碳源都能提供能量
c．除水以外的无机物仅提供无机盐 D．无机氮源也能提供能量
2、细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次
用于杀灭哪些部位的杂菌 ( )
A．接种针、手、培养基 B．高压锅、手、接种针C．培养基、手、接种针 D．接种针、手、高压锅3、以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是 ( )
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置
4、下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是（）
A.防止杂菌污染
B.消灭杂菌
C.培养基和发酵设备都必须灭菌
D.灭菌必须在接种前
5、为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制如下培养基：
伊红Y 美蓝蒸馏水PH
成分乳糖蔗糖磷酸氢
钾
含量5g 5g 2g 0.4g 0.065g 1000g 7.2
（1）该培养基所含的碳源是，其功能是。

（2）该培养基所含的氮源是，其功能是。

（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是。

（4）该细菌在同化作用上的代谢类型是
（5）该培养基用来鉴别的细菌是（）A霉菌B大肠杆菌 C 酵母菌 D 乳酸菌
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参考答案
预学案【补充1】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供
能量。

氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。

含
有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。

一、1.营养物质生长繁殖液体固体
2水.碳源氮源无机盐 PH 特殊营养物质氧气
3维生素，酸性，中性或微碱性，无氧
〖思考1〗:C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97％以上。

二（一）杂菌 1.空间衣着手，清洁和消毒 2.器皿接种用具，培养基，灭菌 3. 酒精灯火焰 4.周围的物品
（二）1.略巴氏消酒精 2.略灼烧干热高压蒸气
〖思考2〗:防止感染实验操作者。

〖思考3〗避免妨碍热空气流通。

〖思考4〗有利于锅内温度升高，100k Pa，121℃，15～30，零，容器中的液体暴沸，
实验操作、
一1计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
思考5：防止牛肉膏吸收空气中水分。

防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。

〖思考6〗糖维生素和有机氮
2：50，锥形瓶，拔出棉塞，迅速通过火焰，打开一条缝隙，将培养基倒入培养皿，倒过来放置
答案。

二、平板划线 .稀释涂布平板
1通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线，①接种环，烧红。

③，消灭试管口杂菌。

④菌液中取出一环菌种。

⑥，伸入平板内划3～5条平行线，⑦，第一区划线末端开始向第二区域内，，第五区的划线与第一区划线，⑧，倒置放在培养箱中
2不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，
①，9mL，灭菌。

②，1。

③，1
当堂训练
1解析：此题考查学生对微生物的营养和能源的理解。

对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。

CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量。

CO2和N。

是无机物，也是微生物的碳源和
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氮源。

硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。

答案：
D
启示：含C、H、o、N的化合物既是微生物的碳源，又是微生物的氮源；有机碳源能提供能量，无机
碳源不能提供能量；无机物也可提供碳源、氮源和能源。

2 解析：此题考查学生对无菌技术的掌握。

高压蒸气灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌。

用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。

火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种
环。

答案：C 启示：微生物培养过程中的无菌操作包括消毒和灭菌两大类，分别又有各种不同的方法。

对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基
等器具进行灭菌。

3解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。

牛肉膏容
易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。

待培养基冷却至50℃，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态。

平板冷却几分钟后还需倒置。

答案： A
启示：固体培养基的制作步骤是：“计算→称量→溶化→灭菌→倒平板”顺序不能颠倒。

并且在制作过程特别是倒平板时彻底做到“无菌”。

4解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。

A说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；B是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部
微生物。

C是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭
菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。

答案： B
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