细胞活体染色技术

取小鼠腹腔水细胞于洁净载玻片上 ↓
滴加1%台盼蓝1滴 ↓
盖上盖玻片于显微镜下进行镜检
thanks
谢谢
清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的 金属板上 ↓
滴2滴1/5000 Janus green B染液 ↓
用牙签口腔颊粘膜处稍用力刮取上 皮细胞 ↓
刮下的粘液状物放大载玻片的染液 滴中 ↓
染色10~l5min(注意不可使染液干 燥，必要时可再加滴染液)
口腔黏膜上皮细胞及线粒体
•在实验过程中 务必保持所取的 材料的活性。通 常，需要把生物 材料置于０℃～ ４℃的冰水浴低 温中，并且操作 要迅速。
细胞活体染色技术
活体染色是利用某些无毒或毒 性较小的染色剂，在不影响细胞生 命活动的情况下显示细胞的天然构 造，更具真实性。活性染色又分为 体内活体染色和体外活体染色。
活体染色分为体内活染和 体外活染两种。前者是将 染料注射于生物体ห้องสมุดไป่ตู้，染 色后再取材观察。后者是 取材后，对离体的活细胞 进行染色。为保持离体细 胞的正常存活，染色时需 供给细胞以正常的温度， 渗透压，PH等。
中性红是液泡系的特殊活体染
色剂，它可将不同发育时期的液 泡染成不同深度的红色，在细胞 处于生活状态下细胞质和核不被 染色，该染料对液泡系具有一定 专一性。
台盼蓝(trypan blue)是一种 偶氮类酸性染料，它可以通过 死亡细胞的质膜而使细胞着色， 但不能通过活细胞的质膜，故 可用台盼蓝鉴别活细胞与死细 胞。
材料：黄豆根尖、洋葱、小鼠。
器械：显微镜、镊子、刀片、’剪刀、解 剖针、 表面皿、载玻片、盖玻片、吸管 、收水纸等。
试剂：Ringer氏液
1／3000中性红溶液
1／5000詹纳斯绿B
台盼蓝染色液
香柏油、二甲苯、蒸馏水等
1. 液泡系的中性红活体染色
撕取洋葱鳞茎内表皮一小块 ↓
于载玻片上的1/5000 Janus green B染色30min ↓
詹纳斯绿B(Janus green B) 中性红 台盼蓝(trypan blue)
能够染活线粒体为蓝色，主要是由 于线粒体内膜上的细胞色素酶系使染 料始终保持在氧化状态(即有色状态) ，在周围的细胞质内，这些染料被还 原为无色的色基(即无色状态)。
一定要注意，只有具有活性的细 胞色素C氧化酶才能够把詹纳斯绿B氧 化，从而使它显出颜色
吸去染液，滴一滴Ringer液 ↓
盖上盖玻片进行镜检
⑵ 用动物细胞观察线粒体的活体染色
取鼠肝边缘较薄的肝组织一小块 ， 放入盛有Ringer氏液的表面 皿中洗去血液。将肝组织洗净后吸 去血液，加入1／5000詹纳斯绿B染 液染色30分钟，注意不可将组织块 完全淹没。染色后撕开组织块，这 样溶液中就会有一些细胞或细胞群 。用吸管吸取溶液，放在载玻片的 Ringer氏液中。垫两根短头发，加 盖玻片，即可镜检。用油镜观察活 染色的线粒体标本，要不断地来回 转动细调焦螺旋，使盖玻片上下慢 慢移动。使材料总是得到氧气，线 粒体的染色才显得非常清楚。