植物凝集素的分子生物学研究
n-乙酰氨基葡萄糖 凝集素
n-乙酰氨基葡萄糖凝集素，又称为WGA（Wheat Germ Agglutinin），是一种源自小麦胚芽的植物凝集素，它具有特异性地与N-乙酰葡萄糖和N-乙酰半乳糖结合的能力。
在生物医学领域中，N-乙酰氨基葡萄糖凝集素被广泛应用于细胞分离、细胞标记、血型鉴定以及疾病诊断等方面。
一、N-乙酰氨基葡萄糖凝集素的特性N-乙酰氨基葡萄糖凝集素是一种球形四亚基的蛋白质，每个亚基之间通过二硫键相连接。
它在高pH值和低离子浓度下具有活性，在低温下可以被稀释，且对直链三糖苷酶以及丝氨酸蛋白酶不敏感。
二、N-乙酰氨基葡萄糖凝集素在细胞分离中的应用1. 细胞表面标记─ ─N-乙酰氨基葡萄糖凝集素可以与细胞膜表面的N-乙酰葡萄糖结合，因此被用于细胞膜标记，方便观察和研究细胞的生物学特性。
2. 分离转染细胞─ ─ 在转染细胞实验中，N-乙酰氨基葡萄糖凝集素可以用于分离已经转染的细胞，从而获得感兴趣的细胞类型。
三、N-乙酰氨基葡萄糖凝集素在疾病诊断中的应用1. 癌症诊断─ ─ 研究表明，很多肿瘤细胞表面都富含N-乙酰葡萄糖，因此N-乙酰氨基葡萄糖凝集素可以作为肿瘤标记物，用于肿瘤的诊断和治疗。
2. 自身免疫性疾病─ ─ 在一些自身免疫性疾病的诊断中，N-乙酰氨基葡萄糖凝集素可以用于检测患者血清中的自身抗体水平，辅助诊断疾病。
四、N-乙酰氨基葡萄糖凝集素在血型鉴定中的应用1. 血型鉴定─ ─ 由于N-乙酰氨基葡萄糖凝集素的特异性，它可以与不同血型的红细胞糖蛋白结合，因此被广泛应用于血型鉴定中，特别是在无典型抗体的情况下，起到了非常重要的作用。
2. 输血配型─ ─ 另外，N-乙酰氨基葡萄糖凝集素也可以用于输血配型中，确保输血的安全和有效性。
五、N-乙酰氨基葡萄糖凝集素的应用前景N-乙酰氨基葡萄糖凝集素在细胞生物学、生物医学、分子生物学等领域具有非常重要的应用前景。
随着现代生物技术的不断发展，N-乙酰氨基葡萄糖凝集素也将不断被赋予新的应用功能，并且在诊断和治疗方面将发挥更加重要的作用。
根瘤菌和植物(豆科)之间的相互作用分子机制
1.3 共生关系(Symbiosis)：
指一个以上的有机体，双方建立互利共存或 一方有利对方无害地生活在一起的一种关系，生 物之间共生关系有利于共生体对外界自然环境的 生存适应。
根瘤菌与相应的豆科植物及少数非豆科植物根系共生形成根瘤，能 将空气中的分子态氮还原为植物可利用的氨，对自然界的氮素循环起着 十分重要的作用，豆科植物为根瘤菌提供生长繁殖所需的能量和营养物 质。根瘤菌感染豆科植物形成根瘤共生体，是由根瘤菌和寄主植物2方面 的遗传因素所决定，根瘤菌具备实现固氮功能的全部遗传因子，寄主植 物提供固氮作用所需的条件。
分离纯化的结瘤因子在高于1nmol/L的浓度可以诱导其 宿主植物根毛变形。研究表明，结瘤因子的脂肪酸链是其诱 导根毛变形所必需的，而脂肪酸链的结构相对来说不是很重 要。
（3）侵染和侵染线的形成
侵染线,即在根毛卷曲部位植物细胞壁局部水解，细 胞质膜向内生长，同时新的细胞壁物质沉积在内陷的质 膜处，形成一种管状结构。细菌就是通过侵染线传递到 根内皮层的植物细胞中去的。 随着侵染线向根毛基部生长，在被侵染部位高度液泡 化的根皮层细胞被激活，这些活化的细胞进行细胞质重排， 形成横跨中央大液泡的辐射状胞质桥，这种胞质桥被认为 是“为侵染线通过作准备”，因而被称为前侵染线。
免疫细胞化学研究证明该基因编码的蛋白主要存在于侵染线中和刚释放的根瘤菌外膜上而在固氮根瘤菌中则不存有几个结瘤素基因的表达开始于固氮前区的基部而持续到固氮区比如psenod3psenod14和豆红蛋白基因lbpsenod3和psenod14的表达始于固氮前区的上部在间隔区达到最高水平而在间隔区向固氮区过渡时表达开始下降
生命科学学院 遗传学 冯刚
1.相关概念
1.1 根瘤菌(Rhizobia)：是一类广泛分布于土壤中
扁豆凝集素的分离纯化与性质描述说明书
目录一、前言 (2)1.1 凝集素的概念及其简介 (2)1.2 凝集素的分类 (3)1.3 凝集素的国内外研究现状 (3)1.4 凝集素的应用前景 (4)1.5 本设计的主要研究内容包括： (6)二、扁豆凝集素的分离纯化 (6)2.1试验材料 (6)2.2 试验方法 (7)2.2.1 扁豆凝集素粗品的制备 (7)2.2.2 扁豆凝集素的纯化 (7)三、扁豆凝集素的性质研究 (7)3.1 试验材料 (7)3.2 试验方法 (8)3.2.1 扁豆凝集素的基本性质检测 (8)3.2.2 扁豆凝集素的热稳定性测定 (8)3.2.3 碱稳定性测定 (9)3.2.4 金属离子结合特性试验 (9)3.2.5 扁豆凝集素的糖抑特性试验 (9)3.2.6 扁豆凝集素的抑菌试验 (9)3.2.7 扁豆凝集素的凝血活性 (10)参考文献 (12)扁豆凝集素的分离纯化与性质描述一、前言1.1 凝集素的概念及其简介凝集素是自然界广泛存在的一大类能凝集细胞、多糖或糖复合物的非源于免疫反应的糖蛋白，进一步被定义为非免疫球蛋白本质的蛋白质或糖蛋白，它能够特异性识别并可逆结合复杂糖复合物中的糖链，而不改变所结合糖基的共价结构。
它们广泛存在于各种各样的生物体中，并在生命活动如病毒、细菌、支原体和寄生虫感染、细胞和可溶性组分之间的寻靶作用、受精作用、癌细胞转移、生长、分化中都起着重要作用。
Peumans和Damme在1995年将植物凝集素定义为至少具有一个可与单糖或寡聚糖特异可逆结合的非催化结构域的植物蛋白。
在植物凝集素的研究中，豆科植物凝集素是最早进行研究，并且研究的最充分。
豆科凝集素尽管在糖结合专一性有不同，但它们在生物化学特性、一级结构组成方面显示出相似性，并且依据一级结构顺序和x-衍射晶体图谱分析表明：其糖结合区段也非常相似。
由于一个植物种族的凝集素有如此广泛的同源性，有力的揭示了这些蛋白质的基因编码有共同的祖先。
豆科凝集素经常作为凝集素研究的模式蛋白质与其它种类相互对照。
植物凝集素的主要生物学作用及应用
植物凝集素的主要生物学作用及应用
杨远和
【期刊名称】《生物学杂志》
【年(卷),期】1994(000)002
【摘要】一、植物凝集素简介植物凝集素(Lectin)一词,起源于拉丁语Legere。
它是非免疫起源的,能与糖类结合的一类蛋白质,具有使细胞凝集和使多糖沉淀的特性,每分子的植物凝集素至少有二个能与糖结合的位点。
一般而言。
【总页数】3页(P1-3)
【作者】杨远和
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】Q51
【相关文献】
1.植物凝集素的部分生物学作用分析 [J], 于敏;袁萍萍;章莹莹
2.植物凝集素的分子生物学研究 [J], 高莹;瞿礼嘉;陈章良
3.应用植物凝集素研究鱼类寄生虫病原生物学的进展 [J], 赖晓健;熊静;于海振
4.生物学自主设计型实验探索——以植物凝集素为例 [J], 吴智华; 刘虹
5.植物凝集素的生物学功能与应用 [J], 王钰清; 邢雪聪; 柴许然; 杨耀宇; 王振义; 吴传芳; 鲍锦库
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植物生理学考研真试题24套[1]
![植物生理学考研真试题24套[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/a6a00ff0ba0d4a7302763a53.png)
植物生理学考研真试题：2000年南开大学硕士研究生入学考试植物生理学试题一、名词解释(每个3分，共计30分)1.胞饮作用2. 光补偿点3. 光合磷酸化4. 顶端优势5. TCA循环6.永久萎蔫系数7.呼吸链 8. C02补偿点 9. 爱默生效应 10.乙醛酸循环二、填空题(每空0．5分，共计10分)l、 1摩尔葡萄糖完全氧化时，净得__-个摩尔ATP。
2、植物细胞中参与氧化还原的主要酶辅助因子有三种______.______和________3、细胞分裂素的生理作用__________.______________、______________。
4、种子休眠的原因大致有__________、____________、______________和________四个方面的原因。
5、作物抗病的生理基础主要表现在下列三点：____________、__________及________.6. DNA主要存在于______-中。
RNA按其在细胞内存在的位置及功能，分为________、________和__________三种类型。
7、韧皮部内主要运输组织是________和____________。
三、问答题(每题6分，共计30分)1、种子萌发过程中的生理生化变化是怎样的2、简述生物固氮的机理3、简述C3植物、C4植物和CAM植物的生理特征及光合特征的异同4、简述光敏素在开花中的作用5、种子成熟时的生理生化变化是怎样的?四、论述题(每题15分，共计30分)1、从光化学步骤和物质转化角度详述光合作用机理2、详细论述植物体内存在的调节代谢的机能2OO2年浙江大学攻读硕士学位研究生人学考试植物生理学试题一、填空题（每题0.25分，共20分）1．温带或高山植物，其膜脂中的______含量较高，这有利于避免膜在低温时发生______。
2．植物感受光周期刺激的部位是______，其所产生的光周期效应是通过成花素_____向_____部位传递。
凝集素的分类和功能【范本模板】
凝集素的分类和功能彭健鹏2012141242048摘要：由于凝集素在现在研究发现其特异性的识别功能可以用于肿瘤和HIV的治疗，所以学者们对于凝集素的关注有了极大提高。
本文就尝试关于凝集素的分类与其功能做一个综合性的概述.关键词：凝集素分类功能研究Classifications And Functions Of LectinsAbstract：Researchers were very interested in lectins ，because lectins’ the specific distinguishing would be used to cure tumors and HIV. I’d like to try to summary the classifications and functions of lectins in this article。
Keyword：Lectin Classification Research of Function凝集素（lectin）是一类具有高度糖结合特异性的一类糖蛋白。
通常这类糖蛋白都具有至少一个非催化结构域,而且专一结合单糖或者寡糖的过程是一个可逆的过程,且这类蛋白不具有免疫源性和酶的性质【1】。
最早发现凝集素是在1888年，当时,Stillmark在蓖麻子中发现了一种蛋白酶细胞凝集因子【2】。
至今，人们已经发现了接近1000余种,而且随着分子生物学、生物化学和生物信息学的发展，对这些糖蛋白的生物学特性、蛋白质结构与功能和基因序列都有了很大的了解。
1.凝集素的分类系统随着凝激素种类的增多，人们需要将已经发现的凝集素进行整理和归纳以便于人们可以更为方便直接地选找到自己所需要的凝集素，或者将新发现的凝集素进行功能或者结构比对。
所以就有了不同的凝集素分类系统。
有的按照凝集素的亚基特征来分类;有的按照凝集素的来源物种来划分；有的按照凝集素的糖结合特异性来划分。
植物血凝素的药理作用
一、药物构成及规格：本品又称植物血球凝集素，通过超低温萃取技术从红芸豆中提取得到的植物蛋白，主要成分为D－甘露糖、氨基葡糖醛酸衍生物所构成的低聚糖辅基与蛋白质复合物，并通过冷冻干燥技术制成。
二、理化特性1. 本品为一种植物蛋白质；2. 分子量大约为128KDa；3. 本品为白色至类白色团粉末，性质稳定；4. 本品易溶于水，溶液呈乳浊状。
三、药物特点1. 本品通过超低温提取，并通过包被制剂技术，增强了本品抗热变性能力，同时不会被动物或昆虫胃肠的蛋白酶降解，在很大的pH范围内稳定。
因而不但延长了储存周期，而且在使用时，不受胃肠道中蛋白酶的影响。
2. 本品与聚肌胞诱导干扰素有所不同。
本品主要诱导产生γ-干扰素，而聚肌胞诱导机体产生α-干扰素。
γ-干扰素有自己独有的受体，同时γ-干扰素可以发挥“抗原定位”作用，使免疫系统能够为特殊的病毒筛选出特殊的抗体，并且可以对那些能够吞噬和消灭病原体的免疫细胞产生活化作用。
本品同样对于不同动物使用都可有效诱生干扰素，无种属限制，避免了直接使用干扰素的缺陷。
3. 本品因其独特的糖蛋白复合结构，在体内可迅速代谢掉，不会造成残留危害人类健康，符合当今用药要求。
四、效果分析：1. 本品口服可以与小肠上皮细胞结合，从而促进幼仔畜胃肠道的发育和胃肠道功能成熟，减少肠道大分子的吸收，增加胰腺蛋白和胰岛素的含量，促进了仔畜的食欲，从而减弱了大多数仔畜都会发生的断奶后生长抑制；而注射给药PHA与肠外其他组织结合，增加了肝脏和脾脏的重量。
瑞典农业大学( Swedish University of Agricultural Sciences)的研究小组在2004年国际猪兽医学会(IPVS)猪健康代表大会上报告说：现已证实植物血凝素可促进哺乳仔猪和大鼠肠道的成熟。
Thomsson等研究了植物血凝素是否能促进断乳小猪肠道的发育。
结果显示，使用PHA的断乳小猪在断乳后第一周生长较快（P=0.013），腹泻指数比对照组减少（P=0.10），且采食量增加（P=0.028），小肠屏障特性增加，小肠总长度长于对照组（P=0.063）。
7种菜用豆中凝集素活性的比较
验 ,结果表明 ( 表 1) , 当稀释溶液的浓度为原来样品溶液的
1/ 2 、 1/ 4 时 ,凝集素的血凝效果十分明显 ,血凝板上各个稀释
35 卷 15 期 季建刚等 7 种菜用豆中凝集素活性的比较
4621
样品的第 8 孔仍然是全凝集或多半凝集 ,无法判断出稀释样 品的凝集效价。当稀释溶液的浓度为原来样品溶液的 1/ 8 时 ,血凝板上各个稀释样品在适当的孔出现了半凝集 ,可初 步判断出各个稀释样品的凝集效价。当稀释溶液的浓度为 原来样品溶液的 1/ 16 、 1/ 32 时 ,血凝板上最后 1 个稀释样品 在第 1 孔出现了半凝集 ,这样无法判断出它的凝集效价。因 此 ,稀释溶液的浓度为原来样品溶液的 1/ 8 是合适的稀释浓 度 ,即选择的稀释次数为 3 。
不同稀释浓度对凝集程度的影响
样品
1 2 3 4 5 6 7
血凝板孔数
1 # # # # # # # # # # # # # # # # 2 # # # # # # # # # # # # # # # # 3 # # # # # # # # # # # # # # 4 # # # # # # # # # # # + + # # 5 # # # # # # # # # 6 # 7 # 8 #
1. 2 . 4 最适稀释度的选择。取备用样品溶液 1 ml ,进行倍比
。笔者拟测定 7 种菜用豆科植
物样品中凝集素的活性[7 ] ,并进行比较 ,为确定各种菜用豆 的安全加工方法提供依据 ,也为研究菜用豆食品的监测和安 全控制措施建立基础 ,以减少或避免相关中毒事件的发生。
1 材料与方法 1. 1 试验材料 ① 新鲜豆类。样品 :1 利马豆 ,2 红花菜豆 ,3
n 为血凝板上该样品产生凝集现象的最大稀释倍数。
花生种子中凝集素的凝集活性及性质研究
2 结果与分析
2.1 花生种子凝集素凝集效价的测定
分别测定了唾液酸酶处理之前和之后的人 A、 B、O 型血细胞对花生种子凝集素的血凝活性，结果 见表 1。花生种子中凝集素对于没经过处理的各种 血细胞没有凝集活性； 对唾液酸酶处理后的 A、B、O 型血细胞都 具 有 较 强 的 凝 集 特 性，其 中 对 唾 液 酸 酶 处理后的 O 型血的凝集活性最强。凝集素最大的特 点是能促使 细 胞 凝 集，比 较 直 观 的 表 现 是 使 红 血 球 凝集，但来源 不 同 的 凝 集 素 能 凝 集 的 红 血 球 也 不 一 样。而所有这些作用都与凝集素最重要的性质——— 糖结合性有关。例如，王庆忠等［18］报道，豌豆（ Pisum setivum L ） ，芸 豆 （ Passels vulgaris ） ，黑 豆 （ Dumasia cordifolia L） ，黄豆（ Glycine Inax） 均可以凝集人的 A、 B、O 型血细胞，豇豆（ Vigna sinnsis） 不能凝集人的血 细胞，但是 可 以 凝 集 家 兔 和 鸡 的 血 细 胞。 不 同 血 细 胞表面的糖 类 是 不 同 的，不 同 种 类 的 凝 集 素 的 糖 类 结合特性不一样，因此能够识别不同种类的血细胞。 花生种子中的凝集素不 能 结 合 未 处 理 的 人 的 血 细 胞； 但是用唾液酸酶将血细胞表面多糖中的唾液酸 酶解后，花生种子中的凝集素就可以结合人的 A、B、 O 型血细胞表面所暴露出的多糖，而且对处理后的 O 型血细胞凝集活性最强。这可能是三种血细胞表面 的细微差异造成的。
种子，豆科凝集素还存在于叶片、茎、皮、根等营养器官 中［13－15］。虽然凝集素的生化活性方面有大量的研究报 道，但是，结构和功能研究的比较明确的只有少数几种 凝集素［16－17］。本文对花生种子中凝集素的基本理化性 质，糖结合特点进行了研究，为深入研究花生种子凝集 素的性质、特点提供了前提，为阐明其生理功能奠定了 基础。
豆类凝集素的功能及其种类分析
关键词:豆类凝集素ꎻ抗菌活性ꎻ抗虫活性ꎻ作用机制
性ꎬ以及更多的家养种ꎬ如普通豆科植物和球根豆科
１ 豆类凝集素
豆类凝集素是最大的碳水化合物结合蛋白家
族ꎬ其理化和生物学特性已被广泛研究ꎮ 使用更新
逆转录酶活性
尽管有相当数量的凝集素已被鉴定ꎬ只有少数
多种复杂碳水化合物能够相互作用ꎮ 人们认为ꎬ植
物凝集素不会改变膜结构或者膜的通透性ꎬ也不会
干扰被微生物入侵的细胞内正常生理过程ꎬ而是会
基于与细胞壁碳水化合物或细胞外多糖的相互作用
对其产生间接影响
[９]
ꎮ 电子显微镜研究表明ꎬ用南
芥菜凝集素处理促进了革兰氏阳性菌细胞膜上的毛
２０２０ 年第 ４ 期
基金项目:国家大学生创新创业训练项目(２０１９１０３８９００９)
作者简介:方妍ꎬ 本科生ꎬ研究方向:分子改造研究ꎮ Ｅ － ｍａｉｌ:
ｆａｎｇｙａｎ００２８＠ １６３. ｃｏｍꎮ
７８
相互作用的 [８] ꎮ 因此ꎬ植物凝集素被认为在植物免
疗候选药物ꎮ
２. １ 细菌
凝集素的抗菌活性是由于它们与细菌细胞壁的
与菌丝结合ꎬ菌丝肿胀ꎬ细胞内容物空泡化ꎬ增强了菌丝对渗透
性休克诱导的细胞壁溶解的敏感性ꎬ产生对其他胁迫条件的敏
感性ꎮ 这种情况会导致营养物质吸收不良ꎬ干扰孢子萌发和细
胞壁破裂
病毒
病毒包膜成分:糖蛋白 ｇｐ１２０ / ｇｐ４１ꎬ唾液酸
与糖基化的包膜蛋白结合并阻止细胞进入( 干扰与复制周期)
孔的增多ꎬ以及革兰氏阴性菌细胞壁上气泡的存在
的生长和萌发ꎮ 用大豆和普通扁豆凝集素进行的研
食用豆科植物皂苷和植物凝集素毒性试验
预防医学 2019 年 7 月第 31 卷第 7 期 Prev Med，Jul. 2019，Vol.31，No.7
· 实验技术 ·
食用豆科植物皂苷和植物凝集素毒性试验
张静，姜淑卿，张书婧，王晓军，钱智勇
天津市疾病预防控制中心毒理室，天津 300011
摘要：目的 检测常见豆科植物豆角中皂苷和植物凝集素的毒性，为豆科植物食物中毒的实验室诊断提供方法和依据。
DOI：10.19485/ki.issn2096-5087.2019.07.032 作者简介：张静，硕士，副研究员，主要从事卫生毒理学与分子生物学
研究工作 通信作者：钱智勇，E-mail：qzyong@
巴斯），ario Skan Flash 光栅型多功能酶标仪 （美国 Threom） ， Centrifuge 5810 高 速 离 心 机 （ 德 国 Eppendorf），CO2 培养箱 （美国 Threom），多功能果蔬 料理机，皂苷快速定性试剂盒，48 孔聚苯乙烯血凝 板，新鲜兔血、鸡血。 1.2 方法 1.2.1 受试物处理 平行称取 50 g 豆角 4 份，150 g 豆角 4 份，分别于沸水中煮沸 0、3、5、10 min，冰 盒降温，吸去表面水分，果蔬料理机制成匀浆，并加 入生理盐水 30 mL，为不同煮沸时长Ⅰ号匀浆和Ⅱ号 匀浆。平行称取 150 g 豆角 4 份，同法制成匀浆，4 层纱布过滤，并加入生理盐水 30 mL，为不同煮沸时 长Ⅲ号滤液。 1.2.2 大鼠体内毒 性试验 参照 GB 15193.3—2014 《急性经口毒性试验》［4］，人用量按 200 g/60 kgbw 计 算。大鼠随机分为 8 组，每组 10 只，雌雄各半，状 态良好，同性别大鼠个体间体重差异不超过 15%。 大鼠经口灌胃 0、3、10 min 组Ⅰ号匀浆，剂量分别 为 20.0 g/kgbw （记为低剂量组，相当于人用量的 6 倍 ， 灌 胃 量 为 36、 30、 29 mL/kg） 和 40.0 g/kgbw （记为中剂量组，相当于人用量的 12 倍，灌胃量为 71、 60、56 mL/kg）；经 口 灌 胃 0、 3 min 组 Ⅲ 号 滤 液，剂量为 75.0 g/kgbw （记为高剂量组，相当于人 用量的 22 倍，灌胃量为 73、63 mL/kg；受试物 5 h 内分 2～3 次给予，观察 2 周内大鼠中毒症状和死亡
凝集素
凝集素(lectin)凝集素（Lectin）是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球（含血型物质），故名凝集素。
常用的为植物凝集素（Phytoagglutin，PNA），通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A（C onconvalina，ConA）、麦胚素（Wheat germ agglutinin，WGA）、花生凝集素（Peanut agglutinin，PNA）和大豆凝集素（Soybean agglutinin，SBA）等，凝集素是它们的总称。
凝集素是动物细胞和植物细胞都能够合成和分泌的、能与糖结木菠萝凝集素合的蛋白质,在细胞识别和粘着反应中起重要作用,主要是促进细胞间的粘着。
凝集素具有一个以上同糖结合的位点，因此能够参与细胞的识别和粘着,将不同的细胞联系起来。
凝集素（Lectin）是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球（含血型物质），故名凝集素。
其常见种类见表6-1。
常用的为植物凝集素（Phytoagglutin, PNA），通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A（Conconvalina,ConA）、麦胚素（Wheat germ aggluti nin, WGA）、花生凝集素（Peanut agglutinin, PNA）和大豆凝集素（Soybean agglutinin, SBA）等，凝集素是它们的总称。
凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，它们之所以被收入本书，是由于凝集素具有的某些“亲合”特性，能被免疫细胞化学技术方法所应用。
因此，Ponder（1983）提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。
凝集素的特性凝集素具有多方面的特性，在此我们仅简要提及其与免疫细胞化学技术方法应用有关的某些特性。
我们知道，生物膜中含有一定量的糖类，主要以糖蛋白和糖脂的形式存凝集素的标记技术在。
凝集素最大的特点在于它们能识别糖蛋白和糖肽中，特别是细胞膜中复杂的碳水化合物结构，即细胞膜表面的碳脂化合物决定簇。
神经生物学第二章 神经生物学研究的方法
*Ag+Ab *Ag.Ab +
Ag ↓↑ Ag.Ab? 当*Ag固定时，Ag含量越高，所得到的*Ag.Ab就越 少。 所用仪器：r-计数器，液体闪烁计数仪
4、放射受体测定受体法
利用标记能作用于不同靶组织内各 种受体的递质和激素，从而达到直接测 定配体与其受体形成络合物的过程和理 化特性。
l 双重免疫组织化学染色：主要是为了研究 两种物质在同一细胞或突起内的共存现象， 或两种不同化学物质的相互关系。
免疫组化的类型:直接法和间接法
３、原位杂交法
在形态学研究中，主要用于显示细胞内功能 蛋白或多肽的mRNA。
４、受体定位法：研究受体在神经 系统内的定位
配体法：主要在组织切片上进行，利用标记的配 体和受体结合以示踪其部位
逆行冲动记录法(Antidromic impulse recording)： 逆行冲动记录法即电刺激神经元的轴突主干或末 梢，在同一神经元胞体记录反相传导的动作电位。
电压钳技术(Voltage Clamp)： 通过插入细胞内的一根微电极向细胞内补
充电流，补充的电流量正好等于跨膜流出的反向 离子流，这样即使膜通透性发生改变时，也能控 制膜电位数值的不变。
5、免疫印迹法（immunoblotting 或western blotting）鉴 定生物分子
将电泳凝胶分离出来的电泳带移到特殊的滤膜上，再利 用标记抗体与滤膜上某一蛋白质或肽的特异结合，使其显 色。
优点：一是将传统的电泳凝胶染色法的敏感度提高了 100~1000倍，二是与RIA相似，能从多种蛋白质中选择鉴 定出一种特异的蛋白质，其敏感性可达1ng，同时能知道 这一蛋白质的分子量，这又是RIA无法达到的。
14种蔬菜中凝集素的提取和生物活性研究
万方数据７５０ＣＨＩＮＡＴＲＯＰＩＣＡＬＭＥＤＩＣＩＮＥＶｏＬ８Ｎｎ５Ｍａｙ２００８中国热带医学２００８年第８卷第５期匀浆。
４。
Ｃ５０００ｒｐｍ离心２０ｍｉｎ，取上清液。
加入硫酸铵达到６０％饱和度，４。
Ｃ过夜。
４０Ｃ，５０００ｒｐｍ离心３０ｍｉｎ后收集沉淀，用ＰＢＳ（ｐＨ７．４０）溶解，４０００ｒｐｍ离心１０ｒａｉｎ除去硫酸铵中的不溶物，取上清液在ＰＢＳ中透析过夜，之后继续在蒸馏水中透析２—４ｌｌｒ，置于聚乙二醇中吸水浓缩，得到粗品溶液。
采用Ｆｏｌｉｎ一酚试剂法Ｈ３测蛋白浓度，以牛血清白蛋白作对照。
１．２．２２％血细胞样品的制备取人的Ａ型、Ｂ型、ＡＢ型、Ｏ型血及家兔、鸡、蛤蟆等７种新鲜血，以９：１的量加入３．８％的柠檬酸钠，用０．９％的生理盐水反复洗涤２—３次，每次２０００ｒｐｍ，５ｍｉｎ，弃去上清液，配成２％（ｖ／ｖ）的血细胞悬浮液。
１．２．３血细胞凝集实验在９６孔“Ｖ”型血凝板中加入２５出ＰＢＳ（ｐＨ７．４），取凝集素样品２５止，加入第一孔，混匀后取２５ｍ，加入第二孔依次进行系列倍比稀释；将血凝板置于摇床上５ｍｉｎ，每孔加入２５—２％血细胞悬液，室温放置２ｈｒ后观察，肉眼观察与显微镜检测相结合判断结果，凡是样品稀释度最高而有显著凝集现象的孔的稀释倍数，判定为该样品的凝集效价。
记录为２“，ｎ为血凝板上该样品产生凝集现象的最大稀释倍数。
以ＰＢＳ作空白对照。
１．２．４微生物细胞凝集实验大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、产气肠杆菌和枯草芽孢杆菌用牛肉膏蛋白胨培养基活化４—５代后。
以无菌生理盐水从斜面上轻轻刮洗菌苔，分别收集到内盛１００ｍｌ无菌生理盐水的小三角瓶中，用玻璃珠打散，配成终浓度约为１０５ＣＦＵ／ｍｌ的菌悬液，酿酒酵母菌和黑曲霉用马铃薯培养基活化２—３代后配成１０７ＣＦＵ／ｍＬ菌悬液。
在９６孔Ｖ型血凝板上加２０一凝集素溶液，与等量磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）倍比稀释后，加入等体积的菌悬液，振匀。
室温下放置ｌｈｒ后用显微镜（高倍镜）进行检测。
细胞生物学实验报告——凝血
图1. 凝集素介导的细胞与分子或细胞间相互作用模型（引自Chapman and Hall 1989）。
A. 同种细胞间相互作用。
B. 不同种细胞间相互作用。
在本实验中，土豆块茎凝集素介导的红细胞凝集属于A 类中由上至下数第二种类型，即凝集素可溶，可以同时与两个红细胞表面的糖蛋白寡糖链结合，在两个红细胞之间形成连接。
山东大学细胞生物学实验报告植物凝集素介导的红细胞凝集反应姜政 2012/10/6实验目的：观察凝血的过程和凝血后红细胞的聚集状态，理解细胞间凝集反应与细胞膜表面结构的关系，了解植物凝集素使红细胞凝集的基本原理和凝集素的应用领域。
实验原理：凝集素（Lectins ）是一种能与细胞膜表面糖蛋白寡糖链特异性结合的蛋白质，多数含糖，广泛存在于植物提取物、动物组织、各种微生物包括病毒中，其中以植物凝集素（Phytohemagglutinin ，PHA ）分离到的种类最多。
植物凝集素在植物体内主要参与防卫机制[1]，识别入侵微生物和愈合伤口，在豆类植物中，凝集素还与植物与特定固氮菌形成共生有关[2]；在体外，凝集素最典型的效应是引起细胞凝集。
通常认为，凝集素介导细胞凝集的基本原理是：可溶性凝集素分子能与细胞膜表面的糖蛋白寡糖链特异性结合，使不同细胞的糖蛋白通过凝集素分子彼此连结，进而引起细胞间凝集（图1）。
红细胞膜表面有大量糖蛋白，其中一些糖蛋白具有特异性，比如人类A 型红细胞表面的α-N -乙酰-D-半乳糖胺和O 型红细胞表面的α-L-海藻糖就分别决定了人类的A 血型和O 血型[3]。
本实验就是利用植物凝集素与红细胞表面糖蛋白受体的特异性结合实现红细胞凝集。
土豆块茎凝集素（potato tuber lectin ）是一种能结合几丁质的富含羟脯氨酸的糖蛋白，单体分子量约50, 000，包含至少三个不同的结构域，其中富含胱氨酸的区域与麦胚凝集素（wheat germ agglutinin ，WGA ）等几丁质结合蛋白具有同源性[1, 4]。
大蒜叶凝集素基因ASAL的克隆与表达载体的构建
植物凝集素类受体激酶参与非生物胁迫响应的研究进展
植物凝集素类受体激酶参与非生物胁迫响应的研究进展作者：王梦龙骆素微李晓诗彭小群来源：《广西植物》2023年第11期摘要：植物在生長发育过程中会受到各种胁迫因子的影响，非生物胁迫是其中极其重要的一类。
类受体激酶（receptor-like kinases， RLKs）是植物中广泛存在的一类蛋白，能够快速有效地对胁迫因子作出响应，最终引起一系列生物效应。
凝集素类受体激酶（lectin receptor-like kinases， LecRLKs）是RLKs的一个亚族，其具有细胞外凝集素结构域、跨膜结构域和细胞内激酶结构域三个结构域。
根据细胞外凝集素结构域的不同可分为L、G和C三种不同类型。
近年来，大量的研究表明植物凝集素类受体激酶在非生物胁迫响应中发挥重要作用。
LecRLKs通过识别非生物胁迫相关的信号分子，激活下游的信号通路，如MAPK通路、ROS 通路、钙信号通路等，调节基因表达和蛋白质翻译以增强植物的抗逆性。
该文概述了植物凝集素类受体激酶的结构特征及其分类，并系统综述了LecRLKs在盐胁迫、低温胁迫、干旱胁迫、机械损伤和植物激素等非生物胁迫响应中的功能和作用机制，同时也对LecRLKs的未来研究方向作出了展望。
该文不仅为深入了解植物凝集素类受体激酶参与非生物胁迫响应的功能提供了参考，而且为利用LecRLKs进行作物抗逆育种改良提供了理论依据。
关键词：植物，类受体激酶，凝集素类受体激酶，非生物胁迫，信号响应，作用机制中图分类号： Q943 文献标识码： A 文章编号： 1000-3142（2023）11-2159-11Research advances on plant lectin receptor-like kinases in abiotic stress responseWANG Menglong， LUO Suwei， LI Xiaoshi， PENG Xiaoqun*（ School of Life Sciences， Huizhou University， Huizhou 516007， Guangdong， China ）Abstract： Plants are exposed to various stress during their growth and development， and abiotic stress is one of the most significant factors. Receptor-like kinases （RLKs） are widely present in plants that can quickly and effectively respond to stress， ultimately leading to a series of biological effects. Lectin receptor-like kinases （LecRLKs） belongs to a subfamily of RLKs，which consisting of three structural domains： extracellular lectin domain， transmembrane domain， and intracellular kinase domain. Based on the different types of extracellular lectin domains， LecRLKs can be classified into three subclasses： L， G and C types. In recent years，numerous studies have shown that plant lectin receptor-like kinases play a vital role in responses to abiotic stress. By recognizing abiotic stress-related signal molecules， LecRLKs can activate downstream signaling pathways， such as the MAPK pathway， the ROS pathway， the calcium signaling pathway， as well as to regulate gene expression and protein translation to enhance plant stress resistance. In this review， we summarize the structural characteristics and classification of LecRLKs. Meanwhile， the functions and mechanisms of LecRLKs in response to abiotic stress such as salt stress， low temperature stress， drought stress， mechanical damage and plant hormones are systematically reviewed. Furthermore， prospects are made for the future research directions of LecRLKs. This review not only provides new insights into the functions and mechanisms of LecRLKs in abiotic stress responses， but also provides a theoretical basis for using LecRLKs to improve crop resistance breeding.Key words： plants， receptor-like kinase， lectin receptor-like kinase， abiotic stress， signal response， mechanism of action自然界植物会受到因各种环境因素影响而引起的胁迫，为了应对多种多样的生物或非生物胁迫，植物在进化的过程中演变出许多有效机制来抵御外界环境胁迫。
植物凝集素的主要生物学作用及应用
植物凝集素的主要生物学作用及应用
植物凝集素是一类在植物中广泛存在的蛋白质，具有凝集作用。
它们能与糖类或脂类结合，形成聚集体，从而影响细胞或组织的结构和功能。
植物凝集素在植物的防御、生长和发育、营养供给、交配和种子形成等生物学过程中发挥重要作用。
此外，植物凝集素还可以用于生物学研究、医学诊断、药物开发等方面。
例如，它们可以用于分离不同类型的细胞、诊断某些癌症、治疗糖尿病、感染等疾病以及开发新型药物。
因此，植物凝集素的生物学作用及应用具有重要的研究和应用价值。
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植物凝集素的研究进展
第48卷第2期2003年4月武汉大学学报(理学版)J．W uhan Univ．(Nat．Sci．Ed．)V0_-48 No 2ADr．2002．232～ 238文章编号：0253—9888(2002’)02—0232—07植物凝集素的研究进展梁峰，常团结(商丘师范学院生物系，河南商丘476000)摘要：综述了有关植物凝集紊的研究进展，介绍了植物凝集紊的分类、糖结合特性、近年来有关植物凝集隶蛋白晶体结构的研究，以及其与糖结合能力相关的生物学功能．关键词：植物凝集紊{糖结合活性；晶体结构；功能{抗虫植物基因工程中图分类号：Q 946．L 文献标识码：A植物凝集素是一类具有高度特异性糖结台活性的蛋白，存在于许多植物的种子和营养器官中．第一个植物凝集素是在蓖麻籽中发现的，到目前为止，已经发现了多种不同的植物凝集素，在生理生化及分子生物学方面对它们进行了许多研究，特别是近年来，克隆了许多植物凝集素基因，对多种植物凝集素进行了蛋白质晶体结构的研究，对植物凝集素的生物学功能有了更深的认识．随着抗虫植物基因工程的研究进展，植物凝集素在抗虫基因工程上的应用受到了越来越多的重视，获得了许多转植物凝集素基因的抗虫转基因植物．本文介绍植物凝集素近年来的研究进展及其应用．1 植物凝集素的发现植物凝集素最早发现于1888年，Stillmark在蓖麻(Ricinus COYT"t1"YtU~ti$L．)籽萃取物中发现了一种细胞凝集因子，它具有凝集红细胞的作用．以后多种植物凝集素不断得到发现，在单子叶和双子叶植物中都发现有植物凝集素的分布，存在于许多植物的储藏器官和繁殖器官中．植物凝集素长期被认为是一种典型的种子蛋白，这是由于许多凝集素是在种子里发现的．现在许多植物营养器官中均发现了凝集素，非种子来源的凝集素和种子来源的凝集素同样分布广泛．植物凝集素在种子、营养器官中的丰度、分布的部位不尽相同．例如，种子来源的凝集素主要分布在子叶、胚乳和胚轴中．非种子来源的凝集素在营养器官如叶片、茎、茎皮、鳞茎、块茎、球茎、根状茎、根、果实、花子房、韧皮部汁液和花蜜中均有分布 ]．2 植物凝集素的定义随着植物凝集素分子生物学的研究，对凝集素蛋白纯化及其结构的研究表明，植物凝集素是一组高度异质性的具有特异糖结合活性的蛋白．1888年凝集素被发现时，根据它的特性被命名为血细胞凝集素(haemagg|utinln)，在随后的很长时期内一直沿用这个名称直到发现一些植物凝集素选择性地凝集ABO血型系统中某些类型的血细胞，lectin一词被提出，用以说明植物凝集素凝集反应的选择性特征 leetin一词来源于希腊语legere，意思是选择，但是这个名称并不十分严格，因为它同时包括了某些具有凝集活性丽非凝集素的蛋白质．从严格意义上说血细胞凝集素(haemagglutinin)一词更准确地说明了糖结合蛋白凝集红细胞的能力，但是由于血细胞凝集素同时具备凝集其他细胞的能力，所以，凝集素(agglutinin)一词更为台适．尽管haemag一收藕B期：2001-03-06作者简介：粱嶂(1966一)，男讲师，现从事强生物学和细胞生物学研究．维普资讯 第2期粱峰等：植物凝集素的研究进展 233glutinin、lectin、agglutinin的准确含义并不相同，它们通常被用以描述同一类蛋白质，在3个名词中，leetin一词使用相对较多．凝集素最初的定义是指非免疫来源的糖结台蛋白，可以凝集细胞或沉淀糖缀合物．最近凝集素的分子生物学研究进展要求根据凝集素的结构和功能对其进行重新定义．因此，Peumans和Van Damme在1 995年将植物凝集素定义为至少具有一个可与单糖或寡聚糖特异可逆结合的非催化结构域的植物蛋白口]．根据这个定义，一大类具有不同凝集和沉淀糖缀合物能力的植物蛋白均被包括在凝集素的范畴内．3 植物凝集素的种类及其糖结合特异性根据植物凝集素亚基的结构特征，植物凝集素被分成4种类型：部分凝集素(merolectins)、全凝集素(hololectins)、嵌台凝集素(chimerolectins)和超凝集素(superlectins) ．根据氨基酸序列的同源性及其在进化上的关系，植物凝集素可以分为7个家族：豆科凝集索、几丁质结合凝集素、单子叶甘露糖结合凝集素、Ⅱ型核糖体失活蛋白、木菠萝素(ja—ealin)家族、葫芦科韧皮部凝集素和苋科凝集素 ]．本文按后一种分类方法进行介绍．3．1 豆科凝集素豆科凝集素是来自豆科植物的一类同源蛋白，目前已经从7O多种植物中纯化了豆科凝集素，其中大部分来自种子，豆科凝集素还存在于叶片、茎皮、根等营养器官中口’．目前还发现一些豆科植物具有两种或多种凝集素，例如荆豆(Ulex europaeusL．)的种子含有两种具有不同糖结合活性的凝集素，扁豆属(Dotichos biftorus L．)的种子、茎、叶片、根中至少有4种具有不同糖结合活性的凝集素 ]．豆科凝集素的糖结合特异性差异很大，大部分属于甘露糖／葡萄糖和半乳糖／N 乙酰半乳糖胺结台凝集素，有些识别L岩藻糖、Neu5Aca(2，3)Gal／Gal—NAc，还有的不结台单糖，仅识别寡聚糖．3．2 几丁质结合凝集隶许多几丁质结台凝集素均包含有一个或多个橡胶素(hevein)结构域．橡胶素是从橡胶树的乳液中分离的、由43个氨基酸组成的小分子质量蛋白质，属于具有一个几丁质结合位点的单凝集素．目前已经在禾本科、荨麻科、罂粟科、商陆科和茄科中发现了几丁质结台凝集素的存在，它们具有高度的序列同渌性。
常见荧光探针标记的扁豆凝集素辣根过氧化物酶标记的刀豆凝集素（HRP-ConA）
常见荧光探针标记的扁豆凝集素辣根过氧化物酶标记的刀豆凝集素（HRP-ConA）常见荧光探针标记的扁豆凝集素/辣根过氧化物酶标记的刀豆凝集素(HRP-ConA)凝集素的应用前景凝集素的特殊的生物学功能，使其具有广泛的利用前景。
特别是随着生物工程的研究手段和研究领域的不断扩大，凝集素的各种实际应用也展现了新的途径。
凝集素在生命机体中识别外来物，在体内<外)起调理作用。
因此它在认识和解决集约化、半集约化的养殖生物的防病治病中有重要作用。
对凝集素认识的普及和研究的深入将提高我国养殖业总体水平。
对凝集素开发、利用和生化工程技术的拓展，将会使养殖业及其病害防治转化为高技术类型。
凝集素的防卫作用可应用于抗虫基因工程，为抗虫育种提供新的途径。
雪花莲外源凝集素(GNA)对某些咀嚼式和刺吸式昆虫均有抗性，如烟草夜蛾、豇豆象、飞虱、叶蝉和蚜虫，但对高等动物没有毒性。
将编码雪花莲外源凝集素成熟蛋白的eDNA GNA 12和其前体蛋白eDNA GNA 34插入到二元载体pBin438的双倍增强子CaM V 35S启动子或二元载体pBcop l的CoYMV启动子下游，分别构建成植物表达载体pBGnal2、pBGna34、pBCGnal2和pBCGna34。
凝集素由于能和糖专一性识别，而且糖的专一性范围又广，加上易于分离纯化，所以经常作为免疫学和糖生物学的分子探针，对生理、生化过程进行研究。
先用标记物将凝集素标记，再利用标记的凝集素来研究糖复合物的结构、在生物体内的分布，也可用于研究生理、病理过程。
比如研究精子在与卵子结合过程中，其细胞表面受体的种类和分布的变化：研究细胞分化发育过程中，糖结构发生的变化和蛋白质糖基化；恶性病变细胞表面糖类结构变化及转移过程中糖类结构特征等等。
由于凝集素可与糖分子专一性可逆结合，从而被广泛用于分离纯化糖分子、糖蛋白、糖脂。
利用凝集素分离糖蛋白开始于ConA分离酵母蔗糖酶。
现在已有商品化的ConA、扁豆凝集素、PNA等亲合层析柱出售。
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超凝集素与全凝集素类似， 至少含两个以上的糖结 合结构域， 而与全凝集素不同的是， 超凝集素的糖结 合结构域不完全相同或相似， 它们识别结构不同的 糖类。 从进化和结构相关性来分， 凝集素可分成 6 个 豆科凝集素； （!） 单子叶植物甘露糖结 不同家族： （7） 合凝集素； （1 ） 包含 8*(*’+ 结构域的壳多糖结合蛋 白； （5） （ ./0） ； （ 9） 葫芦科韧皮 ! 型核糖体失活蛋白 部凝集素； （:） 木菠罗素 （ ;)3)$’+） 家族； （ 6） 苋科凝集 素。
5 植物凝集素的分类
根据最早的定义， 凝集素是指非免疫来源的碳 水化合物结合蛋白， 可凝集细胞或沉淀糖聚合物。 随着越来越多相关蛋白的发现以及对蛋白质结构和 功能的深入研究， 凝集素的定义也得到了不断的扩
作者简介： 高莹， 女， 北京大学生命科学院生物化学及分子生物学专业在读硕士生。 NKWW 年 N5 月生，
［75］ 存在于苋科一些植物种中， 它们在氨基酸序列 和
它们仅存于豆科植物中。所有的豆科凝集素都由 ! 个或 5 个 1<=>) 的原体 （ -?2&2"*?） 组成， 在双链豆 科凝集素这一亚类中， 原体又被分为 ! 个多肽链。 虽然它们的氨基酸序列相近， 但糖结合特异性相差 极大。 单子叶植物甘露糖结合凝集素存在于石蒜科、 天南 星 科、 兰 科、 百 合 科、 凤梨科这些单子叶植物 ， 共同的特点是由 7， !， 1 或 5 个 7!=>) 的亚基 组成， 可特异结合甘露糖。序列比较表明它们属于 同一个进化相关蛋白的超家族， 分子模型的总体结 构也非常相似 点。 8*(*’+ 是从橡胶树的乳液中分离到的一种由 为含一个单 51 个氨基酸残基组成的小分子量蛋白， 一壳多糖结合域的单凝集素
植物凝集素存在于很多植物的种子和营养组织 中。最早发现凝集素是在 NQQQ 年， 当时， R7%44?-;I 在蓖麻子中发现了一种蛋白酶细胞凝集因子。到目 前为止， 人们已分离了几百种凝集素 （血细胞凝集素 或植物凝血素） ， 在生化、 物理化学及分子生物学水 平上对它们做了较为详尽的研究， 还克隆了许多凝 集素基因， 并且通过 S 射线衍射研究了十几种凝集 素的三维结构。
— NQ 万方数据 —
生物技术通报
C’2&*3F+2$2 G, /+H2?")&’2+
!<<< 年第 9 期 的 8*(*’+ 结构 域 组 成， 有 的 由 一 个 或 多 个 8*(*’+ 结构域和一个不相关的结构域组成。而真正的壳多 糖结合凝集素却不是那么普遍， 目前发现仅在禾本 科、 荨麻科、 桷寄生科、 商陆科、 罂粟科和茄科植物中
［ A， 7<， 77］ 存在 。它们具高度序列相似性。
糖和凝集细胞。全凝集素也只由糖结合结构域组 成， 但包含至少两个完全相同或非常相似的糖结合 结构域， 它们可以凝集细胞和沉淀复合糖。绝大多 数具凝集功能的植物凝集素属此类。嵌合凝集素是 一类融合蛋白， 由一个或多个糖结合结构域及一个 具酶活性或其它生物活性的结构域共同组成。根据 其糖结合结构域的数目， 嵌合凝集素的性质可能类 似于部分凝集素或全凝集素。例如， 多价 ! 型 （ "#$% 核糖体失活蛋白 （ ./0 ） 可以凝集 &’()$*+& & ,-* ! ） 细胞， 而单价 / 类 （ "2+2()$*+& 3$)44 /） 植物几丁质酶
［@］ ［6］
中
［:］
三维结构上都和其它植物凝集素不同。
， 每个原体有 7 至 1 个活性结合位
! 植物凝集素的性质
植物凝集素之所以引起人们的广泛兴趣是与它 们可特异结合糖类的性质有关的。植物凝集素是一 类具高度特异性糖结合活性的蛋白， 这是它们区别 于所有其它植物蛋白的标志。其糖结合特异性有这 样几个特点： 第一， 凝集素可以特异结合的糖类的范围是非 常大的， 虽然一种凝集素类型不能识别所有不同的 — 7A —
生物技术通报
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5OOO素的分子生物学研究
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高莹 瞿礼嘉 陈章良
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! 凝集素的功能
既然植物凝集素具有这些有别于其它植物蛋白 的性质， 我们可以合理地推想它们的生理功能与此 有关。许多证据表明， 凝集素在植物的防御反应中 扮演着重要的角色， 它们是参与抵抗植物病原和捕 食者的防御机制的重要组成部分， 而决定它们抗性 的就是它们的糖结合活性， 它们可以识别并结合入 侵者上的糖结构。 自然界中有一些植物凝集素介导防御反应的例 子。例如黑莲聚积有大量的茎皮凝集素， 可以引起 小鼠严重中毒， 因此啮类动物不吃它们的茎皮， 而在 同样的生境中， 不含凝集素的植物如杨树、 柳树却常 常受到这些动物的伤害。又如， 刺荨麻中分离到的 几丁质结合凝集素和石蒜科、 兰科植物中分离到的 甘露糖结合凝集素都是对人免疫缺陷病毒等逆转录
北京大学生命科学学院， 北京 566785 9-"0&’-+ 4-:&.-"&.% &2 3.&")0’ ;’10’)).0’1 -’$ 3-’" <)’) ;’10’)).0’1，566785 摘 要： 植物凝集素是一类具有高度特异性糖结合活性的蛋白， 含有一个或多个可与单糖或寡聚糖特异可逆结合
的非催化结构域。它的糖结合特异性主要针对外源寡糖， 主要生理功能是介导植物的防御反应。到目前为止已克 隆了 555 个植物凝集素基因。作者就植物凝集素的分类、 性质、 功能、 凝集素基因的克隆和凝集素的翻译后加工过程 作一综述。 关键词： 植物凝集素； 分类； 性质； 功能； 基因克隆 =:>".-,"： 64-&7 4897%&: -;8 64-&7 6;<78%&: 6<::8::%&’ -7 48-:7 <&8 &<& + 9-7-4=7%9 ><?-%& 73-7 @%&>: ;8A8;:%@4= 7< - :689%B%9 ?<&< + <; <4%’<:-993-;%>8:C D38= >%:7%&’E%:3 738?:84A8: B;<? -44 <738; 64-&7 6;<78%&: @= 738 9-;@<3=>;-78 + @%&>%&’ :689%F B%9%7= <B 64-&7 4897%&:C G<:7 4897%&: 3-A8 - ?E93 3%’38; -BB%&%7= B<; B<;8%’& <4%’<:-993-;%>8: 73-& B<; :%?648 :E’-;:，H3%93 ?-I8: 738 ?-%& 63=:%<4<’%9-4 ;<48 <B 64-&7 4897%&: %: 7< ?8>%-78 >8B8&:8 ;8:6<&:8 %& 64-&7 C " :8-;93 -’-%&:7 738 ?<:7 E6>-78> 0GJ* >-7-@-:8 :3<H: 73-7 555 4897%& ’8&8: 3-A8 @88& 94<&8>C /8;8 H8 6;8:8&7 - ;8A%8H <& 94-::%B%9-7%<&，93-;-978;:，BE&9F 7%<&: -&> ?<489E4-; 94<&%&’ <B 64-&7 4897%&:，-&> 738 6<:7 + 7;-&:4-7%<&-4 6;<98::%&’ <B 738? C ?)% @&.$>： 64-&7 4897%&；94-::%B%9-7%<&；93-;-978;；BE&97%<&；?<489E4-; 94<&%&’ 中图分类号： (KLM C N 文献标识码： " 文章编号： NOO5 + PLML （5OOO） OP + ONQ + OP
［5］ 因只有单一的几丁质结合结构域不能凝集细胞 。 ［1］
忍 冬 科、 ! 型核 糖 体 失 活 蛋 白 存 在 于 大 戟 科、 寄生科、 毛茛科、 樟科、 西番莲科、 鸢尾科和百合科的 植物中， 都是由一个多核苷酸 （腺苷酸） 糖苷酶结构 域 （称 B 链） 串联一个糖结合结构域 （称 C 链） 组成 ［1］ 的嵌合凝集素 。 B 链和 C 链由链内二硫键相连。 所有 ! 型 ./0 的序列都高度相似， 折叠和三维结构 也高度相似， 然而它们的催化活性、 底物特异性和细 胞毒性却差异极大。 木菠萝素 （ ;)3)$’+） 是从木菠萝果的种子中分离 得到的可与半乳糖特异结合的凝集素。在桑科的其