生化实验室注意事项

实验室要求

1、实验室安全须知

●实验室规定在进行任何实验操作时都应尽可能穿着实验服（白大褂），若因违反此

规定而导致的衣物损伤甚至于人身伤害应自己负责。涉及挥发性、刺激性及有毒试剂的操作必须在通风橱内进行，对违反此规定者任何人都有权指出并追究责任。

注意不要戴着手套接触电脑键盘、鼠标、照明开关、电梯开关等公共区域。

●实验室的安全问题关系到每个人的切身利益。实验室危害源按大小区分如下：放

射线、病毒 >>氯仿> EB / acrylamide >臭氧。

●特别需要关注的是氯仿，会导致肝肿大、肝硬化，如果瓶子的内塞不盖，会不知

不觉中挥发，不知不觉中实验室所有人都吸入了氯仿。新开瓶的氯仿要在上面加上0.5 cm厚的离子水，防止氯仿挥发。

●EB在Ames test中显示有致突变活性，但实际上不能穿越表皮，因此即便沾在手

上也危害甚微。如果浓度比较高，可以用次氯酸钠等氧化剂擦手。

●臭氧会导致肺气肿和肺纤维化，因此要尽量缩短开石英紫外灯的时间（只有石英

灯管才会发生臭氧），并尽量避免吸入臭氧；

●向下水道倒废液，要注意将危害大的物质做适当处理：如考马斯亮兰染色液应该

加入次氯酸钠将色素破坏后确认达到中和。

●实验室所有成员都应熟悉实验室内水、电开关的分布，在遇到紧急情况的时候应

立刻关闭相应的开关。还应该熟悉大楼的各种应急措施，包括灭火器的位置及报告火情的警铃按钮

●火情紧急对策。任何时候若发现火情，应立即呼叫救援。若是由电器产生的火情

应立即关闭总电源。若火情不大，可立即到走廊取灭火器进行扑救。若火情已不能由灭火器扑灭，迅速按下走廊墙壁上的红色火情警铃并拨119报火警

●任何时间内最后离开实验室者都应检查水、电后锁门方能离开

2、实验记录

●实验数据的记录：所有实验应标明实验目的、方法、结果和结论。实验结果、图

表等均应在笔记中标注清楚。和导师讨论后要记录讨论的时间和内容以及达成的共识。铭记――好记性不如烂笔头。

●实验记录本需要妥善保存，所记录的东西应该让后面查阅的人能够看懂，不要使

用自己的“暗语”和“记号”。实验样品记录应和保存的样品相对应，并清楚标注样品名称，保存日期，载体信息等，方便日后查询。

●本实验室成员独自开发过改良过的的实验protocol，当不厌其烦地进行整理，放

在服务器的实验室工具箱中，以便其他人共享。

●所有成员在本组讨论会(Seminar)上作的演示文稿均存放在计算机

3、实验室工作细则

●实验室的任何东西都有它最应该放的地方。切记，哪里拿的放回哪里。

●实验室区域划分：实验室分公用区域和个人实验区域。个人使用区主要为指定的

实验桌和试剂架，指定的坐位，指定的4℃和－20℃使用区，冷库使用区；公用区域包括大小摇床、大小离心机、PCR仪、称量区、动物箱、破菌机、成像系统、核酸电泳区和蛋白质电泳区、灭菌室、RNA实验区等。所有公用区需要保持清洁和空闲，不能因为个人样品不收拾而影响别人的正常使用。

●任何时候都应保持实验台的清洁。实验区负责人每日负责清理实验台，可自由处

置违反规定而遗留在实验台上的任何物品并有权追究责任。

●器皿洗涤：个人使用的玻璃和塑料器皿，需要各自及时负责清洗、烘干，及时收

回；洗涤时如使用洗涤剂（如接触培养基的器皿等），则用流水刷洗15次，然后用去离子水刷洗2次；如果是盛有一般化学试剂的器皿洗涤时用流水冲洗7次，然后用去离子水冲洗2次。

●酶要尽量节省用量，还应小心使用，避免污染。由于酶在常温容易失活，因此不

管是PCR还是限制内切酶、T4DNA连接酶在使用时应尽量减少其在常温或冰上的时间，即当各种缓冲溶液和DNA等全部混合后才从冰箱取出酶进行移取，完毕尽快将酶放回冰箱（-20℃）。

●Agarose凝胶电泳的缓冲溶液如果使用超过三次以上就会影响电泳效果，应该及时

更换；如果需要从凝胶中回收DNA，则应使用新鲜的缓冲溶液。

●带盖的离心管、试剂瓶等在进行高压灭菌时，需将盖子拧松或者在瓶口插一片纸。

●移液器应按量程要求小心使用，千万不要拧过量程范围，使用完毕将其调回最大

量程，并将其挂在移液器架上，注意吉尔森（Gilson）和Eppendorf有各自的枪架，

不要混放。一旦移液器受到污染，应及时清理；注意不得将移液器颠倒放置。样

品移取时应注意减少交叉污染。

●实验室各种仪器的使用应遵守仪器操作流程，任何因个人操作不当而引起的仪器

故障应主动承担责任，及时报告并联系检修。

●废液回收：尽可能减少酚氯仿抽提时酚氯仿的用量，废液要回收。其他需要回收

的废液：乙酸乙脂、吡啶、乙醚，及其他不溶于水的有机溶剂。

●实验服只能在实验区穿，不能穿出实验区，也不得穿入生活区。

4、药品的使用、存放及购买。

●任何试剂接近用完时，或有特殊试剂需求时，必须先向实验室负责试剂定购的人

员提出，必要时向实验室负责人商量定购事宜。订购药品前应先查询药品记录本，确定实验室内没有后再买。

●药品用完后应放回原处。药品或试剂使用时一定要确认已开启瓶完全用完后再开

启新瓶。用完一瓶或购进药品应在药品记录本上登记

●所有配制的溶液都应贴有标签。标签必须写明4个要素：试剂名称、浓度（及pH）、

配制人名、日期。如果高温灭菌过，也请注明。严格禁止使用个人编号。只要是

使用时间在一天以上，就要具体写清楚这4个要素。强烈建议所使用的试剂一定

要自己配。

●试剂称量须知：从冰箱中取出来的固体试剂必须在室温放置一段时间，等试剂的

温度和室温相当后方能打开盖子称量；称毫克级试剂时，一次性往Eppendrof管

中取出适当的量，称重后就按重量进行计算该加入溶剂的量。称量纸使用后即丢

弃，称量匙应洗涤后放回原处。为避免药品交叉污染，尽量减少称量匙的使用；

如需要，则用洗净、干燥的称量匙移取药品，不同的药品需用不同的称量匙，取

出多余的药品不得放回原药品瓶（可另用干净容器盛放）。

5、有培养基的平板、斜面、摇瓶的存放及标记。

●铺好的平板可在超净台内保留不超过24小时，及时收至4℃保存，必须标有明确

的标记（培养基、配制者姓名、配制日期）。任何人发现超净台内有污染的平板，

都应立即丢弃。培养基的灭菌温度：121℃，25min，如果其中含有葡萄糖等热敏

性物质，则为115℃，20min。