代谢工程与合成生物学作业-生物元件
合成生物学中的代谢工程与合成途径
合成生物学中的代谢工程与合成途径合成生物学是一门以细胞为基本单元,通过运用基因工程和交叉学科技术,设计新型合成途径、合成系统的生物学学科。
其中,代谢工程和合成途径是合成生物学的重要方向,它们能够对生产生物物质的效率和产量进行调控和优化,实现大规模的生产。
一、代谢工程代谢工程是指通过对细胞代谢途径中的关键反应进行调控,优化代谢流程,从而达到生产特定物质的目的。
它主要包括三个方面的内容:基因敲除、基因过表达和基因调控。
基因敲除是指通过基因编辑技术,将某些影响细胞代谢的基因删除、失活或改变它们的表达量。
这种方法常用于消除代谢产物的反应途径,减少代谢产物的分解,从而提高对应产物的合成效率。
基因过表达则是通过增加关键基因的表达量,促进代谢途径中对应物质的合成。
例如,将其它生物合成具有商业价值的物质的产生基因导入生产目标某物种细胞中,增加细胞合成目标物质的能力。
基因调控在代谢工程中也扮演了重要角色。
通过增加或降低转录因子或结合蛋白等对基因的调控,可以增加或降低特定代谢途径的反应速率,改变代谢产物分配的比例,从而实现对特定代谢途径进行调控和优化。
二、合成途径合成途径是实现目标物质生产的具体途径。
其中最常用的策略是通过代谢工程的手段,设计新的代谢途径来实现特定物质的生产。
比如,曾经有一些研究者尝试将辣椒中产生辣味的化学物质香辣素转化为生物合成代谢途径中的物质,从而实现了在大肠杆菌中合成香辣素的目标。
这样不仅节约了合成香辣素的成本,而且减轻了合成香辣素时对环境的污染。
另外,还有许多利用合成生物学的手段开发新的代谢途径,从而实现低成本、高效率合成某些生物物质的例子。
例如,利用毒素素(toxoflavin)的生物合成途径,设计新型的代谢途径来合成氨基酸苯丙氨酸或丁二酸等,从而实现对上述物质的生产。
再如,一些研究者利用代谢工程的手段,通过改变乳酸种类和质量进行调控,设计了乳酸生物合成工程,成功合成了其他有机物质。
总的来说,代谢工程和合成途径是合成生物学中的两个重要方向,它们的研究对于生物制药、生物材料生产和生物能源产业的发展都有着重要的推动作用。
合成生物学与代谢工程及系统生物学
合成生物学与代谢工程及系统生物学合成生物学是研究如何利用生物系统中的组件和原理,以设计和构建新的生物系统的学科。
它涉及到对生物学、工程学和计算机科学的交叉应用,旨在创造出具有特定功能和性能的生物体。
代谢工程是合成生物学的一个重要分支,它关注的是通过改造生物体的代谢途径,以实现对特定化合物的高效生产。
在合成生物学中,研究人员利用生物体内的基因调控机制和信号传导网络,设计并合成出新的生物体或改造现有的生物体,以实现特定的功能。
例如,通过改造细菌的代谢途径,可以使其具有产生特定药物或化合物的能力。
这种方法不仅可以提高药物和化学品的生产效率,还可以降低生产成本,减少对环境的污染。
代谢工程是合成生物学中的一个重要研究方向,它着重于对生物体的代谢途径进行优化和改造,以实现对特定化合物的生产。
代谢途径是生物体内化学反应的网络,涉及到许多酶催化的反应。
通过改变酶的表达水平、调控酶的催化活性或改变底物供应等手段,可以改变代谢途径的通量,从而实现对目标化合物的高效生产。
在代谢工程中,研究人员通常利用基因工程技术对代谢途径中的关键基因进行改造,以提高目标产物的产量或质量。
例如,通过引入额外的代谢途径或增强关键酶的活性,可以提高目标产物的合成效率。
此外,研究人员还可以通过调控信号传导网络,实现对代谢途径的精确调控,从而实现对特定产物的选择性合成。
系统生物学是合成生物学的另一个重要分支,它研究生物系统的整体行为和相互作用。
系统生物学利用数学模型和计算方法,对生物体内的基因调控网络、代谢途径和信号传导网络进行建模和分析,以揭示生物系统的内在规律和机制。
通过对生物系统进行建模和分析,可以预测生物体对环境变化的响应,设计和优化生物体的功能和性能。
在合成生物学和代谢工程中,系统生物学的方法被广泛应用。
通过对生物体的基因组、转录组和代谢组进行全面的测序和分析,可以获取大量的生物学数据,用于构建数学模型和预测生物系统的行为。
这些模型可以用于优化合成生物学系统的设计和构建,提高目标产物的生产效率和质量。
合成生物学与代谢工程
生物工程学报 Chin J Biotech 2009, September 25; 25(9): 1296-1302 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2009 Institute of Microbiology, CAS & CSM , All rights reservedReceived : March 10, 2009; Accepted : July 2, 2009Supported by : National Natural Science Foundation of China (No. 30870022), National Basic Research Program of China (973 Program) (No. 2007CB707803), National High Technology Research and Development Program of China (863 Program) (No. 2006AA02Z218). Corresponding author : Qingsheng Qi. Tel: +86-531-88365628; Fax: +86-531-88565610; E-mail: qiqingsheng@国家自然科学基金(No. 30870022), 国家重点基础研究发展计划(973计划)(No. 2007CB707803), 国家高技术研究发展计划(863计划) (No. 2006AA02Z218)资助。
合成生物学与代谢工程王俊姝1, 祁庆生1, 21 山东大学 微生物技术国家重点实验室, 济南 2501002 山东大学 国家糖工程技术研究中心, 济南 250100摘 要: 随着DNA 重组技术的日趋成熟, 代谢工程的理论和应用已经得到了迅速发展。
国自然面上项目 基于代谢工程与合成生物学
国家自然科学基金项目是国家为了支持基础研究而设立的一项重要资助计划,旨在推动科学领域的发展,促进科技创新。
代谢工程与合成生物学作为生物技术领域的研究热点,近年来受到了广泛关注和支持。
本文将围绕国家自然科学基金项目在代谢工程与合成生物学领域的应用展开深入探讨,以期能够为相关科研工作者提供一定的参考与借鉴。
一、代谢工程的理论基础代谢工程是一种利用基因工程技术对生物体内代谢途径进行调控和优化的方法,其理论基础主要包括代谢途径的建立与调控、代谢产物的合成与优化等方面。
通过对生物体内代谢途径的深入研究和理解,可以有效地改造细胞代谢网络,实现生物体代谢通路中特定产物的高效合成和产量增加。
二、合成生物学的研究内容合成生物学是一门多学科交叉的新兴学科,主要研究生物系统的设计、构建和调控。
在代谢工程领域,合成生物学的研究内容包括基因调控的设计与优化、代谢途径的重构与合成生物学评台的构建等方面。
通过合成生物学的研究,可以实现对生物体内代谢通路的精准调控,进而实现特定代谢产物的高效合成。
三、国家自然科学基金项目在代谢工程与合成生物学领域的应用国家自然科学基金在代谢工程与合成生物学领域的资助项目涵盖了代谢途径的重构与调控、油脂合成代谢通路的研究、生物柴油生产等多个方面。
其中,一些重要项目的研究成果在相关领域产生了重要的影响和推动作用。
四、代谢工程与合成生物学的未来发展趋势随着生物技术和基因工程技术的不断发展,代谢工程与合成生物学领域的研究将得到更广泛的应用和推广。
未来,代谢工程与合成生物学将更加注重绿色、环保、高效的生产方式,推动生物制造技术的发展和应用。
国家自然科学基金在代谢工程与合成生物学领域的资助项目对于推动科学研究,促进科技创新发挥了积极的作用。
代谢工程与合成生物学作为生物技术领域的热点研究方向,其相关项目的研究成果将为相关领域的发展和应用带来重要的推动作用。
希望国家自然科学基金未来能够继续加大对代谢工程与合成生物学领域的资助力度,推动相关科研工作取得更加突出的成果和社会效益。
生物化学中的代谢工程和合成生物学
生物化学中的代谢工程和合成生物学代谢工程是一门综合运用生物、化学、生物化学和工程学等知识的学科,可以改造微生物、植物、动物体内代谢途径,实现新代谢途径的构建,优化代谢产物的合成。
代谢工程通过调控代谢通路中的酶、途径、调节子和表达,以提高产物生成量、转化效率和减少副产物生成。
而合成生物学则是利用生物系统的组成和原理来构建生物部件、生物系统、以及生物学的应用。
代谢工程和合成生物学结合起来,可以为生物产业的发展提供更深入的支持和推动。
代谢工程的基本原理是根据生物体内代谢途径的特点,通过调控关键酶的活性或者转录水平,来实现特定代谢产物的合成。
通过改造代谢途径,可以提高微生物或植物的产物合成能力,达到工业化生产的目的。
代谢工程可以应用于微生物的酵母、大肠杆菌等,也可以应用于植物的水稻、玉米等。
合成生物学则是以生物体为平台,通过设计、组装和调控基因等手段,让生物体实现特定功能。
合成生物学在药物生产、材料合成、环境修复等领域有着广泛的应用前景。
通过合成生物学技术,可以创造出具有特定功能的“人造微生物”,实现人类理想的科技前景。
代谢工程和合成生物学的结合,可以更好地实现生物产业的发展和生产目标。
通过代谢工程技术的引入,可以调控生物代谢产物的生成途径,提高产物的产量和纯度。
通过合成生物学技术的应用,可以实现对生物体内部的精准调控,使生物体产生特定功能的代谢产物。
这种结合的模式,将为生物产业的发展开辟新的发展方向,为人类社会的可持续发展做出更大的贡献。
综上所述,生物化学中的代谢工程和合成生物学在生物产业的发展中起着至关重要的作用。
通过不断地探索、研究和应用这两门学科,可以实现对生物体内代谢途径的精准调控,提高产物的合成效率和质量。
代谢工程和合成生物学的结合,将为生物产业的发展开创新的可能性,推动生物科技产业的不断发展。
希望未来在生物领域的研究和应用中,代谢工程和合成生物学能够发挥更大的作用,促进生物科技的飞速发展和生物产业的持续繁荣。
化学生物学研究中的代谢工程与合成生物学
化学生物学研究中的代谢工程与合成生物学化学生物学是将化学和生物学的研究相结合,通过理解和操纵生物分子的化学性质和反应来解决生物学问题。
代谢工程和合成生物学是化学生物学领域中的两个重要分支,它们通过设计和优化生物反应网络,以实现对代谢物的生产和改造,对于生物医药、绿色能源和可持续化学等领域的发展具有重要意义。
一、代谢工程代谢工程是利用基因工程和代谢途径工程等手段来改造和优化代谢物生产的过程。
通过对生物代谢途径中相关基因的调控和代谢途径的重新设计,可以提高目标化合物的产量和选择性。
代谢工程不仅可以用于生物制药领域的生产,还可以应用于产能化学品的合成等领域。
代谢工程的关键在于对代谢途径的深入理解和精确调控。
研究人员可以通过对代谢途径的计算模拟和实验验证,寻找合适的调控策略和目标基因。
例如,可以通过基因敲除、基因表达调控和底物供应调节等手段来调整代谢网络的流量和方向,从而实现对代谢产物的合理优化。
二、合成生物学合成生物学是将工程学的思路和方法应用于生物系统的设计与构建。
通过对生物学元件(如基因、酶和信号通路)的拆分、重组和调控,可以创造出新的功能生物系统,实现对生物体的精确控制。
合成生物学中的关键技术包括基因合成、高通量筛选和计算模拟等。
合成生物学的发展已经在生物领域引起了广泛的关注和应用。
在化学生物学研究中,合成生物学提供了一种全新的思路和工具,可以用于设计和构建人工合成途径,实现对代谢产物的定向合成和改造。
同时,合成生物学也为解析生物系统的复杂性和开发新的治疗方法提供了重要的研究平台。
三、代谢工程与合成生物学的应用代谢工程和合成生物学在许多领域都有广泛的应用。
在生物医药领域,通过代谢工程可以提高药物产量和纯度,降低生产成本,同时还可以开发新的药物。
例如,通过对青霉素合成途径的优化,可以大幅提高青霉素的产量和质量,进而满足临床需求。
在绿色能源领域,代谢工程和合成生物学可以用于生物能源的生产与转化。
例如,通过优化生物质转化途径,可以实现高效的生物乙醇产生。
代谢工程与合成生物学作业-生物元件
合成生物学之生物部件622(山东大学生命科学学院,济南,250100)摘要:合成生物学强调“设计”和“重设计”,其目的是通过人工设计和构建自然界中不存在的生物系统来解决能源、材料、健康和环保等问题,其工程化的思想和标准化的工具一经兴起变得到全世界范围的广泛关注。
生物系统的层次化结构是合成生物学本质化的典型体现,合成生物学系统中最简单最基本生物模块被称为生物部件(part),它是自下而上的研究策略中基础部分,本文回顾了合成生物学中常用的生物部件级标准化使用方法,着重介绍了启动子和核糖开关的相关研究进展。
关键词:合成生物学生物部件生物元件1953年,年轻的和F. Crick从DNA的X射线的X衍射图上解读了双螺旋结构,隐藏了几十亿年的生物密码逐渐露出端倪。
2003年人类基因组计划顺利完成,此后包括人类在内的各种生物的图谱纷纷出炉,生物遗传密码的神秘面纱正在被迅速揭开。
生物学由定性描述转向定量计算,从分析到设计,进入系统和合成生物学(synthetic biology)的的时代。
目前合成生物学的定义还处于多元化阶段,比较全面地可以概括为:合成生物学是指按照一定的规律和现有的知识,设计和建造新的生物部件、装置和系统,或重新设计已有的天然系统为人类的特殊目的服务。
从这个定义来看,合成生物学包含自下而上的研究策略和自上而下的研究策略,对于前者的探索是艰深而富有划时代意义的。
合成生物学最终期望是借鉴电子学的方法能能像“搭积木”一样构建基因线路,而这最基本的就是模块化元件。
我们称具有标准接口、功能相对独立生物大分子、信号转导路径、基因线路等为“模块”(module)或生物积块(BioBrick),模块的规模可大可小,大致可分为部件(part)、装置(device)、系统(System)及多细胞体系等几个层次,其中最基础的就是生物部件。
模块化设计体现了合成生物学的精髓,模块往往具有信息隐藏,内聚耦合,封闭性开放性的特性。
如何在生物化学中进行代谢工程
如何在生物化学中进行代谢工程生物化学中的代谢工程是一门充满活力和挑战的学科,它旨在通过对细胞代谢网络的理性设计和改造,实现生物体系的优化和创新。
这不仅有助于提高生物生产过程的效率和产量,还为解决能源、环境和医疗等领域的问题提供了新的思路和方法。
那么,如何在生物化学中进行代谢工程呢?首先,我们需要深入了解代谢途径和代谢网络。
代谢途径是一系列酶催化的化学反应,它们协同作用,将底物转化为产物。
而代谢网络则是由众多代谢途径相互连接形成的复杂体系。
要进行代谢工程,就必须清楚地知道目标产物在代谢网络中的生成途径,以及与之相关的其他代谢途径的关系。
这需要我们掌握生物化学、微生物学、分子生物学等多学科的知识,并运用各种实验技术和分析方法,如酶活性测定、代谢物分析、基因测序等,来获取代谢网络的信息。
在了解代谢网络的基础上,我们可以运用数学模型来模拟和预测代谢过程。
数学模型可以帮助我们定量地描述代谢网络中各物质的流动和变化规律,从而更好地理解代谢过程的动态特性。
通过建立数学模型,我们可以预测不同基因操作或环境条件对代谢产物产量的影响,为代谢工程的设计提供理论依据。
目前,常用的数学模型包括基于代谢物平衡的稳态模型、基于动力学方程的动态模型以及基于基因组规模的代谢网络模型等。
接下来,就是确定代谢工程的目标和策略。
目标可以是提高某种代谢产物的产量、改变代谢产物的比例、合成新的代谢产物等。
策略则包括基因工程、蛋白质工程、发酵工程等多种手段。
例如,如果我们的目标是提高某种代谢产物的产量,可以通过增强相关代谢途径中关键酶的基因表达,或者敲除竞争途径中的关键基因,来增加目标产物的合成通量。
此外,还可以对关键酶进行蛋白质工程改造,提高其催化效率和稳定性。
基因工程是代谢工程中最常用的手段之一。
通过基因克隆、基因敲除、基因过表达等技术,可以对细胞内的基因进行精确的操作。
在进行基因工程操作时,需要选择合适的载体和宿主细胞,并优化基因的表达调控元件,以确保基因能够在宿主细胞中高效表达。
代谢工程与合成生物学
代谢工程与合成生物学代谢工程与合成生物学是一种科学技术,将基因工程与生物制造结合起来,以生物学为基础,综合应用化学、物理、数学等知识,旨在构建高效的代谢途径,实现生物产物的生产和优化。
下面我们将探讨代谢工程和合成生物学的定义和基本原理。
一、代谢工程的定义代谢工程是一种利用基因工程和代谢途径优化的技术,以改善微生物、植物和动物细胞的生产能力,实现生物制品的生产和提高复杂代谢途径的合成能力。
代谢工程将代谢途径的生物合成过程分为不同的步骤,设计和改造关键代谢途径的基因和代谢调节机制,增强生产物合成能力,减少消耗物合成代谢产物的副产物的生成,提高产物的产率和纯度,从而实现大规模、高效、可持续的生物生产。
二、代谢工程的基本原理1.代谢途径的构建与优化代谢途径是指生物生产物质的合成途经,包括细胞质内、叶绿体或线粒体内部或跨膜转运等。
代谢途径的构建基于对生物基因组与代谢途径的深入了解,选择合适的基因作为代谢途径的起始点,采用基因叠加、基因重新排列和新基因的添加等方法,构建符合需要的代谢途径。
同时,进行代谢途径的优化,通过对基因工程方式和调节机制的选择,使代谢途径的产率更加高效和可控。
2.基因工程的实现基因工程是将DNA分子在体外可控条件下进行重组与编辑,进而实现生物代谢途径的重组、优化和塑造。
通过基因工程手段,有可能将新代谢途径的基因组嵌入到细胞生物中,并使细胞负载新合成代谢物,提高代谢物的产量。
3.代谢工程的应用代谢工程应用于发酵工业、医药生产、食品加工等多个领域。
发酵工业中,代谢工程可用于发酵精制和发酵生物反应的优化。
医药行业中,代谢工程可用于新药和疫苗制造、代谢物提取和分离、治疗和预防疾病等领域。
食品行业中,代谢工程可用于改良食品味道、色泽和营养结构。
三、合成生物学的定义合成生物学是在生物学、化学、物理学的交叉领域中,研究设计合成新生命体、合成生物元件、模块和系统的新型科学技术。
合成生物学是一种综合性的学科,涵盖生物、电子工程、化学、数学、物理、计算机科学等多个领域,旨在打造一套标准化、可再生的生物元件和系统,以协同或代替天然科系,实现生物制造的可持续和高效。
化学合成生物学中的代谢工程技术
化学合成生物学中的代谢工程技术化学合成生物学是一种将生物学和化学合成相结合的新兴学科。
代谢工程技术是化学合成生物学中的重要分支,它通过改造生物体内的代谢网络,使得生物体能够高效地生产有价值的化合物。
在这篇文章中,我们将探讨代谢工程技术在化学合成生物学中的应用。
1. 代谢工程技术的基本原理代谢工程技术的基本原理是在生物体内调节代谢网络,以增强目标产物的合成效率。
在代谢网络中,代谢产物和代谢途径之间存在着复杂的相互作用。
通过了解代谢网络的结构和功能,可以设计出针对目标代谢途径的基因工程策略,从而优化代谢产物的合成效率。
代谢工程技术主要包括基因编辑、信号传导调节、细胞工程和代谢调节等技术。
其中,基因编辑技术是最为常见的代谢工程技术之一,它通过改变生物体内目标基因的DNA序列,来改变目标产物的合成效率。
信号传导调节技术则是通过调节细胞内的信号传递通路来改变代谢途径的活性。
细胞工程技术则是通过改变细胞内的状态和环境,来优化代谢产物的合成效率。
而代谢调节技术则是通过调节代谢网络内不同代谢路线之间的平衡关系,来优化目标产物的分配比例。
2. 代谢工程技术的应用范围代谢工程技术在化学合成生物学中的应用范围非常广泛,可以涉及到从单细胞生物到高等真核生物,从生物制药到工业化学品的生产等诸多领域。
例如,代谢工程技术可以应用于生物制药领域。
在过去的几十年中,由于研究人员对代谢工程技术的不断发展,已经有许多生物制药品种得到了大规模生产。
比如,在遗传工程疫苗的生产中,代谢工程技术可以调节生物体内的代谢网络,使得生物体能够产生有效的疫苗免疫原,来使人体产生相应的免疫能力。
同时,代谢工程技术还可以优化生长条件和工艺参数等关键因素,以实现对生产过程的精细控制和优化。
除了生物制药领域之外,代谢工程技术还可以应用于其他诸多领域。
比如,在工业生产中,代谢工程技术可以优化微生物的代谢途径,促进生物体内目标产物的合成效率。
例如,在乙酸乙酯的生产过程中,代谢工程技术可以通过改变琼脂糖的种类和浓度来调节微生物体内的代谢平衡,以实现琼脂糖生产的高效和规模化。
代谢工程、反向代谢工程和合成生物学:三种改造生物系统的学科
代谢工程、反向代谢工程和合成生物学:三种改造生物系统的学科生物系统是由基因、蛋白质、代谢物等分子组成的复杂网络,具有多种功能和表型。
人类一直试图通过改造生物系统来实现自己的需求和目标,比如提高农作物的产量和品质,生产有用的药物和化学品,治疗遗传性疾病和癌症等。
随着分子生物学、基因工程、系统生物学、合成生物学等技术的发展,人类对生物系统的改造能力越来越强,也越来越精细。
本文将介绍三种利用基因工程技术改造生物系统的学科:代谢工程、反向代谢工程和合成生物学,以及它们之间的区别和联系。
代谢工程是一门利用基因工程技术改造生物系统的代谢途径,以提高某种代谢产物或消耗某种代谢底物的能力的学科。
代谢途径是指一系列化学反应的网络,由酶催化或调节,参与生物系统的能量、物质和信息的转化和流动。
代谢工程通常涉及大量的基因改造,比如增加、减少或调节某些酶的表达,以及敲除或引入某些代谢通路。
代谢工程主要应用于通过改造微生物细胞工厂来高效生产有用的生物燃料、化学品、天然产物等生物制品。
反向代谢工程是一门采用逆向思维方式进行代谢设计的新型代谢工程。
它与传统的正向代谢工程相对应,正向代谢工程是根据已知的基因或酶的功能,通过增加、减少或调节它们的表达,来改变生物系统的代谢途径和产物。
反向代谢工程则是先设定一个期望的代谢表型,比如提高某种物质的产量或消耗,然后通过计算或推理确定该表型所需要的基因或酶的变化,再通过基因改造或环境改造实现该表型。
反向代谢工程可以利用数学模型、人工进化或模块化等方法来进行代谢设计。
合成生物学是一门利用基因工程技术设计和构建新的生物系统或功能,以实现人类所需的新颖或复杂的生物学目标的学科。
合成生物学不仅关注改造已有的生物系统,也关注创造全新的生物系统。
合成生物学通常涉及设计、构建或重组一些标准化、模块化和可互换的生物元件,比如启动子、编码序列、终止子等,然后通过组合或重组这些元件,来构建具有期望功能或表型的新生物系统。
代谢工程改造微生物合成生物基单体的进展与挑战
化工进展Chemical Industry and Engineering Progress2023 年第 42 卷第 8 期代谢工程改造微生物合成生物基单体的进展与挑战高聪,陈城虎,陈修来,刘立明(江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏 无锡 214122)摘要:单体是合成聚合物所用的小分子基础原料,目前主要来源于化石燃料。
利用微生物制备生物基单体具有生产条件温和、环境友好、可持续的优势,是实现高分子材料行业绿色制造的重要途径。
借助代谢工程和合成生物学元件,目前已经实现了多种单体的微生物制造,然而与石油基生产工艺相比,这些单体微生物细胞工厂的生产性能普遍较低。
围绕代谢工程改造微生物合成生物基单体过程中存在的瓶颈问题,本文基于具体案例分析,从廉价底物的高效利用、提高生物基单体合成效率、强化细胞环境耐受性三个方面,总结了改造微生物合成单体的最新研究进展。
同时,讨论了单体微生物细胞工厂目前存在的挑战和未来发展方向。
关键词:微生物细胞工厂;塑料单体;底物利用;调控策略;环境耐受性中图分类号:Q815; TQ92 文献标志码:A 文章编号:1000-6613(2023)08-4123-13Progress and challenges of engineering microorganisms to producebiobased monomersGAO Cong ,CHEN Chenghu ,CHEN Xiulai ,LIU Liming(State Key Laboratory of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China)Abstract: Monomers are the basic raw materials used in the synthesis of polymers, which mainly come from fossil fuels. Engineering microorganisms to synthesize monomers has the advantages of mild production conditions, environmental friendliness, and sustainability, which is an important way to achieve green manufacturing in the material industry. With the help of metabolic engineering and synthetic biology parts, microbial manufacturing of various monomers has been realized at present. However, compared with petroleum-based production processes, the production performance of these microbial cell factories is limited. Focusing on the bottleneck problems in engineering microorganisms to synthesize bioplastic monomers, this review summarizes the latest research progress in the metabolic engineering of microorganisms to produce monomers from three aspects: efficient utilization of cheap substrates, improvement of monomer synthesis efficiency, and enhancement of cell environment tolerance,based on specific case studies. At the same time, the current challenges and future direction of the microbial monomer cell factory are discussed.Keywords: microbial cell factories; bioplastic monomer; substrate utilization; regulation strategy;environmental tolerance特约评述DOI :10.16085/j.issn.1000-6613.2023-0289收稿日期:2023-02-28;修改稿日期:2023-04-08。
合成生物学元件设计
合成生物学元件设计合成生物学元件设计随着生物技术的快速发展,合成生物学作为新兴交叉学科,已经成为一种热门领域。
在这个领域中,元件的设计是非常重要的一个环节,因为它决定了整个生物系统的功能表现。
下面,我们就对合成生物学元件设计进行重新整理。
一、合成生物学元件的定义合成生物学元件是指一组在生物学中经常使用的模块化基本组件,能够帮助人们构建新的生物系统,或者修改或优化既有的生物系统。
这些元件可以被看作是一种独立的模块,即一个“黑匣子”,接口上遵循标准化,可被组装到较复杂的系统中。
二、合成生物学元件的分类根据功能和结构特性,可以将合成生物学元件分为四类:1.遗传调控元件:主要包括启动子、调控因子、RNA干扰元件等。
2.信号转导元件:主要包括感受器、信号传输桥梁等。
3.代谢途径元件:主要包括代谢酶、物质转运蛋白等。
4.信号输出元件:主要包括报告基因、标记物等。
三、合成生物学元件的设计思路1.选择适当的模块:要根据所需的功能,选择对应的模块,例如选择适当的启动子来进行基因表达。
2.设计合适的序列:根据模块的基本特性,设计出合适的序列,例如基因启动子的长度、核酸序列、RNA结构等。
3.进行功能验证:在实验室中,通过适当的实验验证功能,例如利用荧光素酶标记,在细胞中查看基因表达情况。
4.优化元件设计:在实验中发现问题,需要根据问题进行优化设计。
四、合成生物学元件的应用范围通过合成生物学元件的设计、改造和优化,人们可以构建新型合成微生物、改造现有微生物、定向改良生物代谢途径、制备新的抗生素、产生新型的生物燃料和生物质等。
此外,合成生物学元件还有广泛的应用于生物传感器、生物计算和生物医学研究等领域。
总之,合成生物学元件是合成生物学的核心组成部分,它的设计、制作和应用将为各领域的生物技术进步作出重大贡献。
合成生物学与代谢工程
合成生物学与代谢工程一、概述合成生物学是一门新兴的交叉学科,它将工程学原理与设计技术相结合,旨在合成和改造生物系统,以满足人类社会对化学品、药物以及解决环境和能源问题的需求。
其核心思想是将基因、代谢途径和细胞等生物组分作为可调节和优化的模块进行组合和重组,以实现人为设计的生物系统的构建。
随着DNA重组技术的成熟和生物信息学的发展,合成生物学的研究和应用取得了显著的进展。
代谢工程作为合成生物学的一个重要应用领域,旨在通过调控和优化微生物的代谢途径,实现目标化合物的高效合成。
这一领域的发展不仅有助于替代传统的化工合成路线,降低能耗和污染,还能利用微生物的天然代谢途径合成高价值的化学品,如药物、燃料和特种化学品等。
合成生物学与代谢工程的结合具有重要的科学意义和实际应用价值。
在合成生物学与代谢工程的研究中,科学家们通过基因编辑、代谢途径重构和细胞工厂构建等手段,实现了对微生物代谢过程的精确调控和优化。
这些技术不仅提高了目标产物的合成效率和产量,还拓展了微生物在生物制造领域的应用范围。
合成生物学与代谢工程的研究还促进了与其他学科的交叉融合,如生物信息学、系统生物学和计算机科学等,共同推动了生物技术的发展和创新。
合成生物学与代谢工程作为现代生物技术的重要组成部分,具有广阔的发展前景和巨大的应用潜力。
随着技术的不断进步和研究的深入,这一领域将为人类社会带来更多的创新和福祉。
1. 合成生物学与代谢工程的概念及背景合成生物学是一门新兴的交叉学科,旨在运用工程学原理和方法,设计和构建新的生物系统或改造现有的生物系统,以实现特定的功能和性能。
它融合了生物学、工程学、计算机科学等多个领域的知识和技术,通过精确调控生物体内的基因表达、代谢途径以及信号传导等过程,创造出具有预定功能的生物体或生物系统。
代谢工程作为合成生物学的一个重要分支,主要关注于通过优化和改造生物体的代谢途径,以提高特定化合物的生产效率和质量。
代谢途径是生物体内一系列化学反应的集合,涉及酶催化、底物转运等过程,最终将原料转化为所需的产品。
合成生物学与代谢工程
合成生物学与代谢工程随着科技的发展和人类对生物体的深入了解,合成生物学和代谢工程正在成为一种新兴的研究领域。
这些研究领域的目的是利用生物技术和化学技术来制造以前无法通过传统手段生产的化合物,从而实现对环境和社会的持续发展做出更多的贡献。
合成生物学合成生物学是一种新兴的交叉学科,它结合了生命科学、工程学和计算机科学的各种方法和技术,以在分子和细胞水平上构建新型生物体系为主要目标。
这些生物体系可以被用于生产食品、医药品、化学品和能源等,从而为人类创造一种更加可持续和绿色的生产方式。
在合成生物学的研究中,研究者通常会使用基因编辑技术和基因合成技术,来改变或添加生物体内的化学反应途径,从而实现对生物体系的设计和调控。
代谢工程代谢工程是利用生物化学和微生物学技术来改变生物化学反应通路,以实现对物质代谢的控制和调节。
这些技术可用于生产化学药品、食品添加剂、工业用原料和生物质能源等物质。
这种技术可以改变微生物产生的代谢产物和产率,以实现对生物体系的优化。
在代谢工程的研究中,研究者通常会使用基因组学、代谢组学、生物化学和微生物学等技术手段来设计和操纵代谢途径,从而实现对生物体系的工程化改造。
合成生物学和代谢工程的研究意义合成生物学和代谢工程的研究意义在于,利用科技手段实现对生物体系的设计和调控,从而实现对生物体系的优化和改造,打破了传统生产方式的限制,创造了新型的可持续生产方式。
这些生产方式具有更高的效率、低成本、无害性和环保性,可以应用于许多领域,如食品生产、医药生产、化工生产、能源生产等。
合成生物学和代谢工程的应用合成生物学和代谢工程的应用范围非常广泛,下面列举几种典型的应用方向:1. 生产医药品通过合成生物学和代谢工程的研究,可以设计出更加高效、经济和可靠的制药方法,从而生产出高品质和低成本的药品。
这种方法可以代替传统的化学合成方法,从而提高药品的安全性、有效性和可持续性。
2. 生产食品添加剂和食品材料利用合成生物学和代谢工程的技术,可以生产一系列新型食品添加剂和食品材料,如甜味剂、蛋白质替代品、食品颜色剂、氨基酸和多糖等。
代谢工程与合成生物学考试试题
代谢工程与合成生物学考试试题一、选择题(每题5分,共20题)1. 以下哪个不是代谢工程的核心目标?A. 提高产物产量B. 降低废物生成C. 提高反应速度D. 优化代谢途径2. 合成生物学是通过______的运作来改良生物体。
A. 基因B. 细胞器C. 代谢途径D. 物质转运3. 以下哪个是合成生物学的基本工具?A. DNA合成技术B. 功能基因组学C. 代谢工程D. 酶工程4. 下列哪个不是代谢工程领域的研究内容?A. 底物通量限制B. 代谢途径重构C. 酶动力学分析D. 基因表达调控5. 以下哪个属于合成生物学中的“顶层设计”?A. 设计反应底物和产物的合成途径B. 优化酶的催化效率C. 调控基因表达水平D. 提高生物体耐受外界环境的能力6. 代谢工程中使用的工业菌株通常具有以下特点,除了______。
A. 高产量B. 高产生能力C. 高抗性D. 高复制速度7. 合成生物学与传统基因工程最大的区别是______。
A. 目标物质的不同B. 方法的不同C. 使用的生物体的不同D. 对环境的影响程度8. 哪个技术可以对基因组中的所有基因进行快速测序和分析?A. DNA合成技术B. 基因芯片技术C. CRISPR-Cas9技术D. RNA测序技术9. 以下哪个不是合成生物学中常使用的基因调控工具?A. 转录因子B. 编码RNAC. CRISPR-Cas9D. RNA干扰10. 代谢工程的研究对象主要集中在______。
A. 细菌和真菌B. 高等植物C. 哺乳动物D. 病毒11. 下列哪个不是代谢工程常用的工具?A. 基因工程B. 酶学C. 代谢网络分析D. 免疫学12. 以下哪个不是合成生物学中常见的应用?A. 生物燃料生产B. 药物合成C. 人工器官制造D. 食品生产13. 代谢网络是指______。
A. 生物体内代谢途径的连接B. 生物体内的基因网络C. 生物体的代谢产物网络D. 生物体的免疫网络14. 以下哪个不是合成生物学研究的重点之一?A. 基因调控机制B. 代谢途径重构C. 细胞工程D. 生物信息学15. 合成生物学的目标之一是______。
合成生物学的关键技术及应用
然而,与任何新兴的技术一样,合成生物学的工业应用也面临着一些挑战。 例如,对基因编辑技术的伦理和安全问题、对新的生产流程的法规和政策问题等。 这些都需要我们在推进技术的积极研究和解决这些问题。
总的来说,合成生物学是一个充满活力和潜力的领域,它在工业应用上的发 展和创新将会对人类的生产方式和生活方式产生深远的影响。我们期待着这个领 域的进一步发展,以及它为解决全球性问题如环境保护、资源短缺等做出的贡献。
四、系统生物学
系统生物学是研究生物系统在各种尺度上的结构和动态ห้องสมุดไป่ตู้为的科学。这种研 究方法有助于理解生物系统的复杂性,并为预测和优化其行为提供工具。系统生 物学在药物开发、疾病诊断和治疗以及工业应用等方面都有广泛的应用。
五、生物信息学
生物信息学是利用计算机科学和统计学的技术来分析和解读生物学数据的科 学。这包括基因组学、蛋白质组学和代谢组学等数据。生物信息学为研究人员提 供了强大的工具,使他们能够更准确地理解和解释生物系统的复杂性。
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一、基因编辑技术
基因编辑技术是合成生物学中的一项基础技术,它允许研究人员直接修改 DNA序列。CRISPR-Cas9系统是最常用的基因编辑工具之一,它能够以高精度和高 效率对特定DNA序列进行剪切和替换。这种技术已经应用于各种生物,包括人类 和农作物,用于治疗遗传性疾病以及提高作物的抗病性和产量。
二、电磁超材料的合成机理
电磁超材料的合成机理主要基于其独特的结构设计。这种材料由亚波长尺度 的元素周期性排列构成,从而产生具有特定性质的人工“元胞”。元胞的特性在 于它们可以谐振并对特定频率的电磁波产生强烈的响应。通过调整元胞的结构和 材料性质,我们可以实现对电磁波的传播行为进行精确调控。
在具体的合成过程中,通常采用光刻、纳米压印、纳米铸造等微纳米加工技 术来实现元胞的高精度制造。同时,为了获得更好的电磁性能,研究者们还积极 探索了各种新型的制备方法,如化学气相沉积、电化学沉积、分子束外延等。
生物制药技术中的合成生物学与代谢工程
生物制药技术中的合成生物学与代谢工程合成生物学与代谢工程在生物制药技术中的应用合成生物学和代谢工程是两个相互关联的领域,它们对于生物制药技术的发展起到了重要的推动作用。
这两个领域的研究和应用使得生物制药技术得以不断改进和创新,为制药行业带来了巨大的发展潜力和商业利益。
合成生物学是一门综合了生物学、工程学和计算机科学的学科,它的目标是利用基因工程技术设计和构建合成基因组,并通过改变生物体内代谢途径来生产有价值的化合物。
在生物制药技术中的应用中,合成生物学可以通过改造微生物的代谢途径,使其具有产生药物的能力。
通过对微生物的基因组进行改造,可以引入新的代谢途径、增加特定代谢途径的产物产量,甚至是设计和合成新的代谢途径。
通过这些方法,研究人员可以开发出更高效和可持续的生物制药方法。
代谢工程是研究和改造微生物代谢途径的过程,以提高生物体内目标化合物的产量和质量。
在生物制药领域,代谢工程的目标是通过改变菌株的代谢途径,使其具有更高的产量、更高的选择性以及更好的遗传稳定性。
代谢工程的方法包括基因的开关控制、代谢途径的优化和调节、代谢网络的修饰等等。
这些方法可以帮助研究人员改善生物制药过程中的瓶颈,提高产量和质量,并减少副产物的生成。
在生物制药技术中,合成生物学与代谢工程的应用已经取得了一系列的重要成果。
例如,通过合成生物学和代谢工程的方法,科学家们成功地将人类基因导入大肠杆菌,使其能够产生重要的人类蛋白质。
这为制药公司提供了一种新的生产方法,可以大规模生产这些蛋白质,用于治疗多种疾病。
此外,利用合成生物学和代谢工程的方法,研究人员还成功地开发出了多种常用的生物制药产品,如生长因子、单克隆抗体等。
另外,合成生物学和代谢工程的应用还有助于缩短药物研发时间和降低研发成本。
传统药物研发往往需要大量的试错实验和长时间的筛选,而合成生物学和代谢工程的方法可以通过基因组编辑技术和高通量筛选技术来加快药物研发的速度和效率。
这些方法不仅可以帮助研究人员准确地预测生物体对特定药物的反应,还可以有效地减少试验过程中的不确定性和失败率。
合成生物学生物制造
合成生物学生物制造在当今科技飞速发展的时代,合成生物学作为一门新兴的交叉学科,正以其独特的魅力和巨大的潜力改变着我们的生活。
其中,合成生物学生物制造领域的崛起,更是为解决全球面临的资源、环境和健康等重大问题提供了新的思路和方法。
合成生物学,简单来说,就是通过设计和构建生物元件、生物系统来实现特定的生物功能。
而生物制造,则是利用合成生物学的理念和技术,以生物为工厂,生产出各种有价值的产品。
这种创新的生产方式相较于传统的化学合成和工业制造,具有许多显著的优势。
首先,生物制造更加环保和可持续。
传统的工业制造往往依赖于不可再生的化石资源,并且在生产过程中会产生大量的污染物。
而合成生物学生物制造则可以利用可再生的生物质资源,如植物秸秆、淀粉等,通过微生物发酵等方式将其转化为有用的产品。
同时,生物制造过程中的废弃物通常也更容易被生物降解,对环境的压力较小。
其次,生物制造具有更高的效率和选择性。
合成生物学可以通过对微生物的基因进行编辑和改造,使其具备特定的生产能力。
例如,科学家们可以通过优化微生物的代谢途径,提高其生产某种物质的效率和产量。
而且,生物制造还可以实现对产物的精确控制,生产出具有特定结构和功能的分子,这在化学合成中往往是难以实现的。
那么,合成生物学生物制造具体是如何实现的呢?这就涉及到一系列复杂而精妙的技术和方法。
基因编辑技术是其中的关键之一。
就像我们可以通过修改计算机程序来改变软件的功能一样,科学家们利用基因编辑工具,如CRISPRCas9 系统,可以对微生物的基因组进行精准的修改和调控。
通过删除、插入或替换特定的基因片段,改变微生物的代谢途径和生理特性,从而使其能够高效地生产出我们所需要的产品。
此外,代谢工程也是生物制造的重要手段。
代谢工程是对细胞的代谢网络进行系统分析和设计,通过改变代谢途径中的关键酶的活性、调节代谢流量等方式,优化细胞的代谢过程,提高目标产物的产量。
例如,在生产某种药物的过程中,科学家们可以通过代谢工程的方法,增加合成该药物的前体物质的供应,同时减少竞争途径的代谢流量,从而提高药物的产量。
代谢工程与合成生物学作业-生物元件
合成生物学之生物部件622(山东大学生命科学学院,济南,250100)摘要:合成生物学强调“设计”和“重设计”,其目的是通过人工设计和构建自然界中不存在的生物系统来解决能源、材料、健康和环保等问题,其工程化的思想和标准化的工具一经兴起变得到全世界范围的广泛关注。
生物系统的层次化结构是合成生物学本质化的典型体现,合成生物学系统中最简单最基本生物模块被称为生物部件(part),它是自下而上的研究策略中基础部分,本文回顾了合成生物学中常用的生物部件级标准化使用方法,着重介绍了启动子和核糖开关的相关研究进展。
关键词:合成生物学生物部件生物元件1953年,年轻的J.D.Watson和F. Crick从DNA的X射线的X衍射图上解读了双螺旋结构,隐藏了几十亿年的生物密码逐渐露出端倪。
2003年人类基因组计划顺利完成,此后包括人类在内的各种生物的图谱纷纷出炉,生物遗传密码的神秘面纱正在被迅速揭开。
生物学由定性描述转向定量计算,从分析到设计,进入系统和合成生物学(synthetic biology)的的时代。
目前合成生物学的定义还处于多元化阶段,比较全面地可以概括为:合成生物学是指按照一定的规律和现有的知识,设计和建造新的生物部件、装置和系统,或重新设计已有的天然系统为人类的特殊目的服务。
从这个定义来看,合成生物学包含自下而上的研究策略和自上而下的研究策略,对于前者的探索是艰深而富有划时代意义的。
合成生物学最终期望是借鉴电子学的方法能能像“搭积木”一样构建基因线路,而这最基本的就是模块化元件。
我们称具有标准接口、功能相对独立生物大分子、信号转导路径、基因线路等为“模块”(module)或生物积块(BioBrick),模块的规模可大可小,大致可分为部件(part)、装置(device)、系统(System)及多细胞体系等几个层次,其中最基础的就是生物部件。
模块化设计体现了合成生物学的精髓,模块往往具有信息隐藏,内聚耦合,封闭性开放性的特性。
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合成生物学之生物部件622(山东大学生命科学学院,济南,250100)摘要:合成生物学强调“设计”和“重设计”,其目的是通过人工设计和构建自然界中不存在的生物系统来解决能源、材料、健康和环保等问题,其工程化的思想和标准化的工具一经兴起变得到全世界范围的广泛关注。
生物系统的层次化结构是合成生物学本质化的典型体现,合成生物学系统中最简单最基本生物模块被称为生物部件(part),它是自下而上的研究策略中基础部分,本文回顾了合成生物学中常用的生物部件级标准化使用方法,着重介绍了启动子和核糖开关的相关研究进展。
关键词:合成生物学生物部件生物元件1953年,年轻的J.D.Watson和F. Crick从DNA的X射线的X衍射图上解读了双螺旋结构,隐藏了几十亿年的生物密码逐渐露出端倪。
2003年人类基因组计划顺利完成,此后包括人类在内的各种生物的图谱纷纷出炉,生物遗传密码的神秘面纱正在被迅速揭开。
生物学由定性描述转向定量计算,从分析到设计,进入系统和合成生物学(synthetic biology)的的时代。
目前合成生物学的定义还处于多元化阶段,比较全面地可以概括为:合成生物学是指按照一定的规律和现有的知识,设计和建造新的生物部件、装置和系统,或重新设计已有的天然系统为人类的特殊目的服务。
从这个定义来看,合成生物学包含自下而上的研究策略和自上而下的研究策略,对于前者的探索是艰深而富有划时代意义的。
合成生物学最终期望是借鉴电子学的方法能能像“搭积木”一样构建基因线路,而这最基本的就是模块化元件。
我们称具有标准接口、功能相对独立生物大分子、信号转导路径、基因线路等为“模块”(module)或生物积块(BioBrick),模块的规模可大可小,大致可分为部件(part)、装置(device)、系统(System)及多细胞体系等几个层次,其中最基础的就是生物部件。
模块化设计体现了合成生物学的精髓,模块往往具有信息隐藏,内聚耦合,封闭性开放性的特性。
常见的生物部件按照功能可以分为启动子(promoter)、核开关(Riboswithch)、RBS、终止子、操纵子、蛋白编码基因(CDS)、报告基因、标签组件、操纵子等,当然这些分类层侧不是绝对的。
1.启动子1.1启动子的结构启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,在原核生物和真核生物中是有差别的。
1.1.1 原核生物中的启动子原核生物中的启动子通常,RNA聚合酶是依靠б因子识别DNA上的特定序列,б70是发现比较早也是比较常见的б因子,它通常特异识别启动子的-10和-35两个保守DNA盒子(如图1)。
图 1 原核生物中的启动子模式图1.1.2真核生物中启动子结构相比原核生物的启动子,真核生物的启动子比较复杂,RNA聚合酶Ⅱ核心启动子是一个在转录过程中关键的但又容易被忽略的元件。
核心启动子被定义为DNA的延伸,它涵盖了RNA的起始位点,典型的核心启动子大约有40到50核苷酸的长度,它指导基因转录的起始。
在过去,人们推测核心启动子在功能上是通用的,转录起始是通过一种共享通用的机制进行的。
最近的研究表明,各种核心启动子在结构和功能上都存在相当多的差异。
存在大量的DNA元件作用于核心启动子的活性,给定核心启动子的特定性能是由这些核心启动子修饰因子的有无决定的。
已知的核心启动子元件包括TATA盒子、Inr(起始子)、BREu{ATA盒子的上游的BRE [TFⅡB(RNAⅡ聚合酶的转录因子)识别元件]}和BREd(TATA盒子下游的BRE)、MTE(十基序元件)、DCE(下游核心元件)和DPE(下游核心启动子元件)(如图2)。
图 2 真核生物中启动子模式图1.2启动子的种类在合成生物学以及以前的生物学研究中,我们已经标准化了许多启动子元件(如表格1)。
最经典的启动子是乳糖操纵子中的乳糖启动子,它可以被乳糖诱导,实验中我们常用IPTG 诱导;色氨酸启动子引人注意的特性是有一段弱化子,可以根据细胞环境中色氨酸的浓度调控后续基因的表达;tac启动子则是上述两种启动子的融合启动子,是典型常用的强启动子;Pl、Pr是噬菌体溶源和裂解生长状态转化及维持中的重要启动子,阻遏蛋白的温度敏感突变可以使其收温度诱导;PtetA基因也是很常用启动子之一,可以被脱水四环素诱导;T7启动子则是比较特殊一种启动子,对RNA聚合酶的种类有特异性。
表格 1 常见启动子的概述启动子名称英文表示调节基因诱导物备注乳糖启动子PlacZ lacI 异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)可诱导负反馈色氨酸启动子Ptrp trpR - trp 可阻遏负反馈(!弱化子)tac启动子Ptac lacIq IPTG、乳糖、温度敏感拼合启动子启动子Pl、Pr Pl/Pr cIts857 温度敏感可诱导负反馈四环素溢出泵基因启动子PtetA tetR蛋白家族四环素(Tc)脱水四环素(aTc)可诱导负反馈T7启动子Pt7 大肠杆菌的RNA聚合酶不能识别,但噬菌体及真核生物的RNA聚合酶可以1.3启动子的调控及意义为实现一些特定目的,微生物系统工程需要一些设计工具,这些工具以某种可预测的、定量的方式起作用。
在合成生物学的领域,基因之间级联调控很多都是发生在转录水平(如图3),而这些往往是在转录起始阶段起作用,也就是说与启动子有关,因此标准化设计启动子对整个系统的运转有重要意义。
图 3 在转录水平控制基因表达的设计工具在自下而上的研究策略中,我们往往用基因线路模拟一些电子学上的逻辑开关,从简单逻辑或与非,到双稳态开关,再到震荡子(如图4)实质上都是上面提到的启动子及其调控基因按照一定次序设计排列的结果。
此外,在合成生物学学术比赛iGEM中,相当多的队伍作品的关键都是发现或者标准化了一些有特殊功能启动子及其相关组件,比如感光、温度敏感、感受重金属离子等。
图 4 双稳态开关(左)及震荡子(右)的逻辑结构2.核糖开关在1991年,人们就发现E.coli的btuB基因转录产物5’-UTR存在高度保守序列,并发现Ado-cbl和B12可以使btnB基因表达,但没有发现可以与Ado-cbl结合的蛋白因子;1990年,Andrew从随即合成的RNA序列中筛选出特异性结合有机染料配体的RNA,并命名为“aptamer”(适体);2002年,Breaker受到适体的启发,证明了这种天然适体的存在,命名为“核糖开关”。
到目前(2009年)为至已经发现了不少于12 个核糖开关(如表格2),大部分是抑制性的(当存在相应代谢物时基因关闭)。
主要参与氨基酸、核苷酸、维生素等基础物质的代谢。
表格 2 一些已知的Riboswithch的名称、调节小分子和功能核糖开关中,mRNA 本身作为传感器,直接感受环境中相应代谢物的变化,结合代谢物后发生构象变化,在转录和翻译水平调节基因的表达。
核糖开关也是一种反馈调节机制,与以往发现的调节机制的区别是:它不需要任何蛋白质(乳糖操纵子)或核糖体(色氨酸弱化子)作为中介,由RNA 直接感受环境中代谢物的变化,通过形成选择性茎环结构,在转录延伸和翻译起始水平调节基因表达。
2.1核糖开关的作用机制已发现的细菌核糖开关均位于代谢相关基因mRNA的5′UTR,由 2 个结构域组成:适体结构域(aptamer domain,AD) 和表达结构域( expression domain, EPD)。
AD 直接结合小分子代谢物,是RNA 传感器. 序列分析表明,在不同细菌的同类核糖开关中,AD 序列保守,形成高度相似的二级结构。
与配体结合后,AD 发生构象变化,信息传递至EPD ,后者通过形成选择性茎环结构,直接调节基因的表达。
不同核糖开关的EPD 可能利用不同的机制调节基因表达。
(如图5)目前发现的真核生物的核糖开关位于3′UTR 或内含子,也具有相似的AD 和EPD,可能在多个环节调节真核生物基因表达。
图 5 核糖开关的作用机制为研究核糖开关的作用机制,F.J.Isaacs等构建了人工的Riboswithch(如图6),这种转录后调控比转录水平的调控更加迅速。
基因正常表达时,启动子P控制gfp的表达。
转录形成的mRNA的RBS暴露在外,一旦核糖体识别并与之结合以后,mRNA既可以翻译成蛋白质。
而在人工构建Riboswithch中,在启动子Pcr和RBS中间插入一段与RBS互补的cr序列。
转录后mRNA5’与RBS结合形成发卡结构,将RBS掩盖阻止核糖体与之结合,从而组织翻译的进行。
另一个启动子Pta启动后表达一个短链非编码RNA——taRNA。
taRNA能以高度特异性优先定位于crRNA,共经过线性-环相互作用将crRNA的发卡环解开,taRNA的尾部与crRNA 互补配对。
此时,crRNA的RBS位点暴露在外,核糖体可与之结合重新激活翻译。
2.2核糖开关的应用2.2.1小分子抗菌药物riboswitch 在人类细菌性病原体内分布广泛(如),预示着将riboswitch 作为药靶将会有广阔的应用前景。
临床上一些常用抗菌药物的毒性机制已经被证实是以riboswitch 为药靶的.例如吡啶磺胺(pyrithiamine,PT),一种常用的硫胺代谢对抗物,是维生素B1 (Thiamine ,硫胺素)的类似物。
它在细胞内很容易磷酸化成吡啶磺胺焦磷酸盐PTPP)。
PTPP 可以与许多TPP riboswitch 结合(其亲和性与TPP 类似),从而抑制由TPP riboswitch 控制的基因表达。
图 6 用于控制转录后基因调控的人工Riboswithch系统表格 3 一些含有Riboswithch调控的人类细菌性病原体2.2.2细菌趋向运动细菌的趋向运动的研究在生物降解、生物纳米、合成生物学等领域具有重要意义。
Shana Topp等人在大肠杆菌中设计一个通过小分子和mRNA来指导细菌运动的系统。
在野生型的大肠杆菌中,鞭毛马达的旋转方向有蛋白CheY控制,当CheY没有被磷酸化时,鞭毛马达逆时针旋转;当CheY被磷酸化后,CheY-P可以和鞭毛马达蛋白FliM结合,导致细胞滚动;因此野生型大肠杆菌可以在半固体琼脂上迁移。
然而,在CheZ蛋白缺失时,CheY-P不能去磷酸化,细胞只能翻滚不能迁移。
(如图7)研究人员在CheZ蛋白的编码基因前设计了核糖开关(如图8左),它只有和茶碱结合后才能改变构型与核糖体结合翻译出CheZ使细胞运动。
所以导致了改造后的大肠杆菌只会在有茶碱存在的区域迁移(如图8右)。
图7 大肠杆菌CheY与其运动的关系图8 Riboswithch设计(左)与实验结果(右)3.生物部件的讨论生物部件是最简单、最基本的生物积块,能有通过标准化的组装方法与其他part组装成更加复杂的模块。
目前,生物部件的数量和质量都达不到合成生物学所期望的要求。