刀豆蛋白A诱导Wistar大鼠肝纤维化模型的建立

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八种肝纤维化造模方式PPT

八种肝纤维化造模方式PPT

CCl4法造模途径多样,有单纯性皮下注射、灌胃、腹腔注射及在此基础上加以不同喂饲手段的复合法 。造模时间因给药途径、剂量及饲喂方法的不同而异,一般为6~16周不等。 1.皮下多点注射: 给大鼠皮下注射60% CCl4植物油溶液0.3mL/100g,2 次/周,发现大鼠肝脏炎症和纤维 组织增生程度随实验时间延长逐渐加重,20 周后正常肝小叶结构消失,假小叶形成。 2.灌胃法: 用60% CCl4植物油液给大鼠灌胃。首次0.5mL/100g,以后0.2mL/100g,2次/周,共6周,同 时给与5%乙醇。见广泛肝细胞变性坏死,纤维组织明显增生,形成假小叶。 3.腹腔注射: 40% CCl4橄榄油溶液,首次腹腔注射3 mL/kg,其余2 mL/kg,每周注射2次。8 周后部分 标本肝脏假小叶形成,达到早期肝硬化。 目前研究表明 CCl4腹腔注射造模优于其他方法。 4.复合法: 在上述方法基础上配以高脂低蛋白、高胆固醇低胆碱食物或以酒精灌胃的造模方法即为复 合法。
与CCl4造模相比, 该模型中肝细胞无脂肪变性、肝纤维化形成相对稳定,但DMN 易引起肝细胞坏死出 血,引起肝功能衰竭,从而导致复制模型过度。DMN 所致肝内出血性病变与CCl4所致肝内凝固性病 变不同, 其肝损伤比较严重。因此在评价药物对伴有凝血障碍、纤溶亢进的慢性肝病致纤维化的防 治效果时,采用 DMN肝纤维化模型较为合适。此模型的缺陷是难以全面反应人肝纤维化的发病机制。
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乙醇诱导肝纤维化模型
肝脏是酒精代谢的主要场所,进入肝脏的酒精转化为乙醛。乙醛及其转化物乙酸通过增加肝细胞膜 的通透性、增加肝细胞细胞膜的磷脂、脂质过氧化产物及电荷量、激活线粒体中caspase-9 和-3等 多种途径损伤肝脏的结构及功能从而导致持续炎症反应。同时,使肝内脂肪氧化减弱,长时间形成 脂肪肝,最终形成肝纤维化 。 造模方法:40% 乙醇按照大鼠体重2mL/100g灌胃,每周3次,持续29周, 可复制酒精性肝纤维化模型 此模型制作方法简单易行,肝纤维化病变率高, 可用于酒精性肝纤维化发病机理、以及筛选有效抗酒 精性肝纤维化药物的研究。

大鼠肝纤维化模型的建立及给药方法等试验内容 2

大鼠肝纤维化模型的建立及给药方法等试验内容 2

一种治疗肝纤维化的多糖类药物——低分子壳聚糖研究目的:低分子壳聚糖对大鼠肝纤维化的治疗作用研究意义:肝纤维化(hepatic fibrosis, HF)是各种慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段,是所有慢性肝病的共同病理基础,是导致肝衰竭、门脉高压的重要病变。

目前认为,在各种致病因素作用下,肝细胞、Kupffer细胞、内皮细胞、肝星状细胞(HSC)等可产生多种细胞因子、氧化应激活性产物等。

表现为细胞外基质(extracellular matrix ECM)的合成大于降解。

肝纤维化形成的中心环节是肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)的活化及其向肌成纤维样细胞(m yofibroblastic-like cell, MFLC)和成纤维细胞(fibroblastic cell, FC)的转化,导致大量细胞外基质的合成;另一方面细胞外基质的降解减少加速了肝纤维化的形成。

在HF 的恢复期,有与肝脏瘫痕降解一致的广泛的HSC凋亡,因此,诱导活化HSC的凋亡可使HF发生逆转。

在正常情况下,HSC处于静止状态。

静止状态的HSC内含大量维生素A胞浆脂滴,又称肝脏贮脂细胞、Ito细胞。

HSC主要具有以下功能:①储存脂肪,以供给肝细胞能源,并储存大量维生素A;②在肝脏中合成一定量的ECM,主要有I、III, VI型;③ HSC突起包绕在SEC外表,对内皮细胞起支撑作用,并有调节肝窦膜大小的作用[f}l.④合成非胶原糖蛋白和蛋白多糖等功能。

HSC功能正常,胶原代谢处于一种动态平衡,ECM就不会大量沉积,肝纤维化就不会形成。

本实验充分利用壳聚糖易溶解,易吸收和无毒,无抗原性的特点,开发阻断TNF-α激活HSC的,高效治疗HF产品,搞清其作用机制,该研究丰富了中药多糖抗HF作用,扩大了壳聚糖的应用范围。

实验方案:1.材料与试剂:2.实验步骤:2.1 大鼠肝纤维化模型的建立组、甘利欣组、120只Wistar雄性大鼠随机分为6组,即:空白组、CCL450mg/kg LMCTS组(低剂量组)、100mg/kg LMCTS组(中剂量组)和150mg/kg LMCTS诱导大鼠肝纤维化模型的方法,组(高剂量组)。

浅述异甘草酸镁治疗肝脏疾病的临床应用进展

浅述异甘草酸镁治疗肝脏疾病的临床应用进展

认识与理解,最大限度地减少患者自行调整药物剂量 或改变治疗方案而导致的药物不良反应或药源性
疾病。
参考文献
ll缪晓丽,王丽嫒,张桂荣,等.3例磷霉索钠肝损伤分析.中国实验诊
断学,2007。ll(8):1128 12何健,刘利艳.药源性肝炎临床研究进展.医学信息,2011(1):350
1叶维法.临床肝胆病学.天津:天津科学技术出版社,1994:718—729
代,第一代甘草酸制剂甘草甜素片及第二代以B体甘
草酸单铵盐为主要成分的复方甘草酸制剂,因为其各 自的局限性限制了临床广泛应用。随着研究者对甘草
甘草酸为甘草的主要成分,甘草酸由一分子甘草
苦质酸和两分子葡萄糖醛酸组成,以180r—GA和
酸的深入研究,发现甘草酸中含量较少的仅体甘草酸, 具有亲脂性好、抗炎活性强、肝脏靶向性高、不良反应
疾病危害性的认识,加强对药品知识的学习,提高临床 合理用药水平,保护患者的用药安全。加强对患者的
用药指导,提高患者对用药及治疗方案依从性的正确
8王林,张人凤,金鸿,等.药物性肝损害90例临床分析.临床荟萃, 2011,26(2):162
9韩海啸,李军祥,江义墩,等.左氧氟沙星致严重肝损害.药物不良 反应杂志,2009,11(1):49 lO沈巧芬,陈芳.氨曲南致严重肝损l例.抗感染药学,2008,5(2):125
阳转率均明显高于对照组(P<0.01);肝纤维化指标 明显下降(P<0.05)。MgIG联合拉米夫定,其抗病 毒、改善肝功能、抗肝纤维化治疗作用明显提高瞄J。 临床研究者用MgIG治疗原发性胆汁性肝硬化,治疗后
肝功能各项指标均明显改善,同时外周血中调节性T 细胞的比例上升,推测MdG可能通过改善调节性T
天津药学Tianjin

镇江市第三人民医院“十二五”发展规划

镇江市第三人民医院“十二五”发展规划

镇江市第三人民医院“十二五”发展规划2011年-2015年是实现全面建设小康社会奋斗目标的关键时期,是深入贯彻落实科学发展观、构建社会主义和谐社会的重要时期,也是深化重点领域和关键环节改革的攻坚时期。

在“十二五”期间,医疗市场面临更激烈的竞争,医院要大踏步发展才能应对这一挑战。

因此,我们要坚持科学的发展观,不断深化医院改革,强化人才梯队建设,优化学科结构,完善医院管理体制,全面提高我院的竞争力,向“三级甲等传染病医院”快速迈进。

现制订我院“十二五”发展规划如下:一、“十一五”期间我院的发展概况“十一五”期间,我院全面贯彻落实省、市卫生工作会议的各项方针政策与任务,在市委、市政府的统一领导下,积极探索和大胆开拓,不断深化医院内部改革,鼓励技术创新、培养团队学习文化、强化岗位责任意识、打造新型的医疗运营体系等一系列举措,取得了较为显著的成效:完成医院整体搬迁,建成负压病房;医院门诊量、出院人次和业务收入明显增加;特色优势进一步发挥,重点专科专病建设得到加强;人才队伍素质进一步提高,教学科研水平有所突破;顺利通过三级传染病医院评审;对外交流和社会影响进一步扩大,医院知名度和品牌形象获得提升。

医院先后荣获“省级文明单位”、“市级文明单位”,“省五一劳动奖章”、“省精神文明建设先进单位”、“市节水型单位”、“市百家诚信单位”和“园林式医院”等称号。

较好地完成了“十一五”规划制定的各项目标任务。

为“十二五”规划的制定和实施奠定了良好的基础。

(一)抓住机遇,深化改革,医院规模不断扩大“十一五”期间,我院各项工作得到全面发展,整体水平显著提高。

医院规模不断扩大,医院编制床位360张,其中新院总投资1.2个亿,床位240张;综合部床位120张;医院固定资产由3131万元增长到1.8亿元,年门急诊工作量由人次增至约16万人次,年出院人次由人次增至约5000人次,年业务收入由3984万元增长到6300万元;医疗服务条件和诊疗技术得到明显改善,医疗设备总额800万增至约3000万元,医院内部机构日趋完善,设有行政、临床及医技科室35个,职工457人,专业技术人员358人,其中:副高以上职称48人,中级职称118人,硕士研究生 7人,169人才4人,市科技骨干4人。

甘草酸苷作用机制的研究进展

甘草酸苷作用机制的研究进展

甘草酸苷作用机制的研究进展王颖;韩秀萍【摘要】Glycyrrhizin is the main active ingredient of licorice, which is widely used in the treatment of hepatocyt injury, and also in the adjuvant therapy of acute and chronic inflammatory and autoimmune diseases, empirically. Glycyrrhizin has the functions of protecting cytomembranes, inhibiting the activation of complements and down-regulating the level of inflammatory factors. In recent years, with the in-depth study on the mechanism of glycyrrhizin, researchers find that glycyrrhizin can improve the mitochondrial and endoplasmic reticulum stress, directly binding to HMGB1 and down-regulating cytokines levels to ameliorate cell damage and apoptosis; by regulating T cell subsets and dendritic cells it can balance the immune situation of the body. This paper reviews the recent research progresses in the mechanism of glycyrrhizin effects.%甘草酸苷是甘草的主要活性成分, 多用于治疗各种原因所致的肝细胞损伤, 同时也经验性地用于急、慢性炎症和免疫性疾病的辅助治疗.目前, 已知甘草酸苷具有非特异性的细胞膜保护作用, 可抑制补体激活和下调多种炎症因子水平等.近年来, 随着对甘草酸苷作用机制的深入研究, 发现甘草酸苷可以改善线粒体和内质网应激状态, 直接与HMGB1 结合下调多种炎症因子的水平, 进而减轻细胞损伤和凋亡, 并能通过对T 细胞亚群及树突状细胞的调节起到平衡机体免疫功能的作用.本文就近年来甘草酸苷作用机制的研究进展进行综述.【期刊名称】《实用药物与临床》【年(卷),期】2018(021)001【总页数】5页(P109-113)【关键词】甘草酸苷;作用机制;研究进展【作者】王颖;韩秀萍【作者单位】中国医科大学附属盛京医院皮肤科, 沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院皮肤科, 沈阳 110004【正文语种】中文0 引言甘草酸苷(Glycyrrhizin,GL)又称甘草酸、甘草皂苷或甘草甜素,是甘草的主要活性成分,具有保护肝细胞、抗炎、抗病毒、免疫调节以及抗肿瘤等多种药理作用和生物学功能。

药理实验方法学

药理实验方法学

另外,免疫性肝纤维化模型的建立目前常使用的异种 血清有猪血清、牛血清、人血清、血吸虫血清等。猪血清 以其中的白蛋白作为异种抗原物质,通过免疫反应活化枯 否细胞而诱导发生肝纤维化。形态学和免疫组化显示,免 疫复合物在血管和连接组织沉积先于肝纤维化的发生,而 肝细胞无显著改变。猪血清诱导的免疫性肝纤维化与人类 肝纤维化的原因有一定相似之处,纤维化形成率虽不太高, 但纤维化持久,停止注射3个月,对先前形成的肝组织改 变无影响,在研究肝纤维化产生机制和筛选抗肝纤维化药 物方面有一定的优势。因此,猪血清反复腹腔注射模型一 直用于研究吞噬细胞、贮脂细胞与肌纤维变性细胞在肝纤 维化中的作用及肝纤维化过程中微循环的改变。
方法:
将小鼠经尾静脉注射12.5 mg/kg剂量的1 mol/L刀豆素 蛋白A,每周1次,连续6周。
模型特点:
该方法所产生肝纤维化系免疫损伤所致,有利于从免 疫学角度探讨发病机制及评价药物。
与其他肝纤维化动物模型相比较,Con A诱导的肝纤 维化模型的方法成功率较高,动物死亡率较低,方法简便易 行。
一个理想的肝纤维化动物模型应该符合以下 条件: ①与人类肝纤维化疾病的基本病变特征相似; ②病变有一定发展过程,即明显分期,以及病程发展存 在一个可逆与不可逆的阶段性演进过程; ③形成率高,死亡率低,重复性好; ④造模方法简便易行和动物易获得,经济实用。
中医症候动物模型:
中医学研究认为肝纤维化多是湿热、疫毒、痰瘀、饮 食失节、情志失调、劳逸失当、正虚所致,对肝纤维化的 主要病理认识多数建立在“血瘀”基本病机之上,认为血 瘀是其主要病机,治疗也以疏肝化瘀通络贯穿始终。
方法:
对雌性Wistar大鼠采用胆管结扎与切断和逆行性注入 N-丁基-2氰基丙烯酸盐胆管粘堵的方法导致胆管阻塞,建 立肝纤维化模型。

冬虫夏草多糖的药理学研究已有进展

冬虫夏草多糖的药理学研究已有进展

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1.3.3 对免疫器官的作用: 取NIH 小鼠50 只, 连续腹腔注射CP 不同多糖组分, 实验结果表明, 各组分可显著增加经地塞米松免疫抑制作用后的胸腺和脾脏的重量。说明CP 的不同组分可通过增强免疫器官的重量来增强机体的细胞免疫与体液免疫功能。
1.4 CP 的降血糖作用
1.4.1 CP 对正常动物血糖的影响: 黄志江等人报道CP 在600 mg/kg 剂量下灌胃给药对正常动物血糖没有明显影响, 提示PCS 没有明显的刺激胰岛素释放作用或胰岛素样作用。
2 CP 的评价与展望
综上所述, CP 作为冬虫夏草中的主要活性物质之一, 对机体的免疫调节、抗肿瘤、抗肝纤维化和降血糖等方面均有较为肯定的药理学作用。但由于多糖结构的复杂性, 某些方面还存在较大的差异, 对CP 的化学结构与其生物学活性间的关系研究甚少。至今国际上对虫草多糖单体的提取分离以及系统的理化性质、空间构象等尚未有深入的研究报道, 给CP 临床应用带来了一定的限制。但多糖的生物学作用与其结构特性有关, 不同来源或不同分离纯化工艺得到的CP 其组分、含量、结构等会有所不同, 其生物学活性也可能不尽相同。结构是功能的基础,搞清CP 的化学结构, 是研究CP 生物学效应的前提, 也只有这样才能更深入地认识CP。因此对CP 的研究还要在物理、化学、分子生物学等方面做大量的工作。
1.1.1 CP 对正常动物肝星状细胞的影响: 颜吉丽等采用不同浓度的CP 处理正常大鼠肝星状细胞(HSC) 后, 发现CP 对大鼠肝星状细胞增殖具有很强的抑制作用, 可明显抑制大鼠肝星状细胞核因子kB 活性并下调TNF- α 蛋白和mRNA 的表达, 且呈剂量依赖性。研究发现, NF- KB 是一个多功能的核转录因子, 具有广泛的生物学活性, 肝纤维化的发生与NF- KB 密切相关。由此提示CP 抑制HSC 的激活, 可能是通过其抑制NFKB活性, 阻断了NF- KB 与TNF- α形成的恶性循环, 从而在抑制肝纤维化中发挥重要作用。靖大道等分离、培养大鼠HSC细胞, 研究CP 对大鼠HSC 细胞增殖及I、Ⅲ型前胶原基因mRNA 表达的影响。随着CP 浓度的增加和作用时间的延长, 其抑制Ito 细胞H- TdR 和H- Pro 的掺入作用逐渐加强,并呈剂量和时间依赖性。卢春凤等也发现CP 对体外培养的HSC 细胞的增殖有明显的抑制作用, 并能减少HSC 细胞对3H- Pro 的掺入, 进而抑制胶原的合成。这些均提示CP 对HSC 细胞增殖和胶原合成的抑制可能是其体内抗肝纤维化作用的主要途径之一。

肝纤维化形成中MMPs_TIMPs的动态变化及治疗进展

肝纤维化形成中MMPs_TIMPs的动态变化及治疗进展

P()ckros PJ.Schiff ER,Sbjffman MI。.et aJ.oral
antiapoptotic caspase inhibjtor.
IDN一6556,an
may
lower
aminotransferase
activjty in patients with chronic hepatitis 324—329. Radaeva
细胞、库普弗细胞分泌。主要降解I、m型胶原。watanabe 等…用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,RT—PCR结果显示。
MMP-13 mRNA在正常对照组表达微弱。CCl4处理4周即肝
细胞脂肪变性明显而尚未达到纤维化时表达硅著升高,cCl4 处理8周和12周形成明显的纤维化时表达显著下降。Leroy 等|21观察到慢性丙型肝炎患者的纤维化过程中MMP一1水平 显著下降。与METAVlR纤维化分期呈明显负相关。动物实 验与临床观察均显示,在肝纤维化过程中.MMP_1(MMP一13) 水平下降,活性减低。从而不能有效降解沉积的间质胶原。 MMP一2、MMP一9和MMP一3对正常肝脏基底膜有降解作 用。MMp2在正常人肝脏中很少或几乎监测不到,主要由激 活的HSC产生。朱跃科等【’】用DMN诱导大鼠肝纤维化,结
MMP—u在肝脏中主要由库普弗细胞分泌。与MMP一2一 起维持肝脏修复过程中细胞环境结构完整及肝宴基底膜的正 常形态。I。eroy等在临床研究中发现.慢性丙型肝炎患者血清 中MMP一9水平与纤维化分期旱明显负相关。即随疾病进展其 水平逐渐降低。但wang等¨用DMN诱导大鼠肝纤维化时。 发现正常大鼠MMP—u活性极低,在造模的第2、3天时镀著升 高。至1、2和4周时仍处于高水平。说明MMP—u的表达在肝 炎患者和肝纤维化动物模型中存在差异。 MMP一3在HSC激活早期阶段表达,相关I临床研究屁示, 与健康个体相比,各种慢性肝病患者血清中MMP一3蛋白水平 均卜.降5()%。但注射(:C1.后4周的大鼠.肝组织MMI。3 mRNA的表达增加.在胆管结扎大鼠模型中未得出此结论。 总之,虽然MMP-3降解Ⅸ:M的作用没有其他MMPs强.但体 内MMP一3在其他MMPs的激活中扮演蕈要角色,町激活 MMP一1、3、7、9、8、13,因此它在肝纤维化形成中的作用不可忽

肝纤维化大鼠模型的研究进展_王宪东

肝纤维化大鼠模型的研究进展_王宪东

世界最新医学信息文摘 2016年 第16卷 第94期39重视中医药在大肠癌治疗方面的研究,探索新思路,研讨新治法,增加新疗法,提高大肠癌患者生存率。

参考文献[1] 关彤.《金匮要略》理论在大肠癌防治中的运用[J].中华中医药学刊,2007,25(2):371-372.[2] 余胜珠,杨光华,陈连生,付相建.补中益气汤联合四神丸加减治疗老年大肠癌术后腹泻18例[J]. 中国药业,2013,22(8):99-100.[3] 王学中,季秀海.健脾补肾活血方改善大肠癌术后化疗毒副作用临床观察[J].新中医,2015,47(8):210-211.[4] 薛建章,王瑞敏.中医药联合化疗对大肠癌根治术后复发、转移以及生存期的影响研究[J].中国现代药物应用,2016,10(5):259-260.[5] 黄耀,唐晓玲.熊墨年教授治疗大肠癌的临证经验初探[J].江西省2 0 1 4年中医、中西医结合肿瘤学术交流会暨中医苗治疗肿瘤新进展培训班,184-187.[6] 李晓琳,冯 妮.复方苦参注射液联合化疗治疗大肠癌术后319例患者的疗效分析[J].中医中药,2015 ,13(14):199-200.[7] 陈爱飞.清肠消癌方灌肠联合化疗治疗晚期大肠癌56例观察实用[J].中医药杂志,2011,27(12):842-843.・综述・肝纤维化大鼠模型的研究进展王宪东1,石安华2(导师),陈文玲3(通讯作者)(1.云南中医学院 基础医学院,云南 昆明 650500;2.云南中医学院 继续教育学院,云南 昆明 650000;3.云南中医学院 临床医学院,云南 昆明 650000)摘要:肝纤维化动物模型是研究肝纤维化发病机制的重要途径,本文对目前常用的肝纤维化大鼠模型进行阐述,主要综述了四氯化碳、二甲基亚硝胺、猪血清、刀豆蛋白、乙醇及胆管阻塞手术方等造模方法,同时探讨了每一种模型的造模方法和优缺点。

关键词:肝纤维化;动物模型;大鼠;机制中图分类号:R657.3+1 文献标识码:A DOI:10.3969/j.issn.1671-3141.2016.94.0280 引言肝纤维化是肝脏内弥漫性纤维结缔组织沉积,机体对炎症组织损伤修复的反应[1]。

探讨不同浓度刀豆蛋白A对小鼠肝损伤的影响

探讨不同浓度刀豆蛋白A对小鼠肝损伤的影响
mo e fa u el e a g . eh d 6 d lo c t i rd ma e M to s 0 BALb cmieweern o ydvd d it r u s n ldn o ma o to r u n v / c r a d ml iie n o6 g o p ,icu ig n r lc n rlg o p a d
1 O,1 2,1 n 6 m g k f S r m e eso lnn mio rn frs ( T) ttIbl cd e z me TB ) a d h au o ia e 4 a d 1 / g o. e u Iv l faa ie a n ta sea e AL , oa i a i n y ( A e n y lr nd s
( DA),s p r x d im u a e S M u e o i e d s t s ( OD)a d n to e n x d m ( n i g n mo o i u NO)i e a i is eh mo e a ewe ed t c e fe e s Re r n h p tcts u o g n t r e e t d a t r8 we k . -
mo e r u d l o pA,B,C,D n g a dE,1 c o a hg o p 0 mief re c ru .Mieo d l ru sweeijce h o g a d l enwi n fr8, c fmo e o p r netdt r u h cu a v i t Co A o g h
D : O 3 6 f.s n 1 7 - 1 0 2 1 . 0 0 1 oI 1 . 9 9 j i . 6 3 4 3 . 0 2 1 . 0 l s
文献标识码 : A

复合因子法建立大鼠肝纤维化模型的实验研究

复合因子法建立大鼠肝纤维化模型的实验研究

复合因子法建立大鼠肝纤维化模型的实验研究摘要目的:采用复合因子法建立健康SD雄性大鼠肝纤维化模型,探讨复合因子法建立肝纤维化模型的应用价值。

方法:于0周、2周、4周、6周分别对以复合因子所建立大鼠肝纤维化模型进行肝组织病理检查及血清纤维化指标检查,以病理诊断结果为标准,探讨复合因子法建立肝纤维化模型的应用价值。

结果:以复合因子法成功建立了鼠肝纤维化模型,该模型肝组织病理检查与血清纤维化指标检查相关性良好。

结论:复合因子法建立健康SD雄性大鼠肝纤维化模型成功率较高,有较高的应用价值。

肝纤维化动物模型的制作方法较多,根据不同的实验目的选用的动物和模型制作方法也不同[1]。

文献报道较多,经常应用的经典方法为四氯化碳制作肝纤维化模型法,选择的实验动物主要是小白鼠或大白鼠。

本实验采用复合因子法建立健康SD雄性大鼠肝纤维化模型,探讨复合因子法建立肝纤维化模型的应用价值。

资料与方法肝纤维化模型准备:实验材料:①实验动物:健康雄性Sprague-Dawley大鼠,购自包头医学院实验动物中心。

②实验试剂:四氯化碳,99.9%分析纯;10%乙醇。

肝纤维化模型制作:四氯化碳复合肝纤维化模型制备方法:健康清洁级雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠38只,体质量150~220g,平均180g,随机分5组,根据文献报道方法采用复合因子致肝纤维化模型方法,建立鼠肝纤维化模型。

造模方法:①以79.5%纯玉米粉加20%猪油、0.5%胆固醇制成低蛋白高脂肪高胆固醇混合饲料喂饲实验大鼠;②以10%乙醇为惟一饮用水喂饲实验大鼠;③第1次皮下注射40%四氯化碳石蜡油液0.5ml/100g,以后每隔3天0.3ml/100g 重复皮下注射,为期6周。

病理标本制作:各阶段造模结束后,处死实验动物,取肝组织以10%甲醛固定,标本大小约1cm×1cm×1cm。

常规石蜡连续切片,分别进行苏木精-伊红(HE)及Masson三色染色进行病理观察。

番茄红素对刀豆蛋白诱导的小鼠肝纤维化的影响

番茄红素对刀豆蛋白诱导的小鼠肝纤维化的影响

番茄红素对刀豆蛋白诱导的小鼠肝纤维化的影响目的观察对刀豆蛋白诱导鼠肝损干预前后的肝纤维化半定量计分(SSS计分)变化和小鼠肝脏大体形态及病理学HE染色结果变化,探讨番茄红素对刀豆蛋白诱导的小鼠肝纤维化的影响。

方法昆明小鼠64只,随机分为4组:正常组8只、模型组8只、预防组8只及治疗组40只,治疗组按治疗时间(1~5周)分为5组,每组8只。

刀豆蛋白A(Con A)经腹腔注射8周建立肝纤维化小鼠模型。

预防组在建模的同时、治疗组在建模成功后予番茄红素20 mg灌胃给药,每天1次,观察肝纤维化半定量计分变化水平,同时观察小鼠肝脏大体形态及病理学HE染色结果,并与正常组及模型组比较。

结果预防组及治疗组肝病理学染色结果好转明显。

结论番茄红素能有效对抗实验小鼠肝纤维化,抑制了肝纤维化的发展速度,并可能逆转肝纤维化。

标签:番茄红素;肝纤维化半定量计分;小鼠肝脏病理学;HE染色肝硬化(hepatic cirrhosis)是临床常见的慢性进行性肝病,由一种或多种病因长期或反复作用形成的弥漫性肝损害,肝硬化的主要发病机制是进行性纤维化。

刀豆蛋白诱导的小鼠肝纤维化模型已经被许多研究证实与HBV致肝纤维化的发病机制类似,本研究试图探讨在刀豆蛋白诱导的小鼠肝纤维化模型下用番茄红素干预治疗,探讨番茄红素预防和治疗肝纤维化的作用。

1 材料与方法1.1 实验材料(1)实验用昆明小鼠:体重分别在18~22 g的小鼠64只,来自江苏大学医学院动物实验中心,均在实验中心短期喂养1周适应后开始试验。

(2)番茄红素及Con A试剂:购自上海英轩医药有限公司的番茄红素纯度为99%;购自sigma 公司实验用的Con A。

1.2 实验方法1.2.1 实验小鼠分组所有实验小鼠随机分为正常对照组(N组8只)、模型组(M组8只)、建模同时即给予番茄红素灌胃组简称预防组8只和建模后给予番茄红素灌胃组简称治疗组40只一共四大组;治疗组分别按番茄红素灌胃时间分为1~5组,每组8只。

不同剂量刀豆蛋白A腹腔注射诱导昆明小鼠肝纤维化效果观察

不同剂量刀豆蛋白A腹腔注射诱导昆明小鼠肝纤维化效果观察

不同剂量刀豆蛋白A腹腔注射诱导昆明小鼠肝纤维化效果观察【摘要】目的观察不同剂量刀豆蛋白A(Con A)诱导昆明小鼠肝纤维化的效果,探讨其最佳剂量及成模时间。

方法昆明小鼠96只,随机分为低剂量ConA组(A组)、中剂量Con A组(B组)、高剂量Con A组(C组)及正常对照组(N 组),每组24只,分别经腹腔注射Con A-PBS溶液15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg及PBS溶液,每周一次。

于注射6、7、8、9周后分批处死各组昆明小鼠6只,测ALT、AST,肝脏作病理学检查。

结果实验组ALT、AST一直明显增高,B 组第8周出现典型的肝纤维化病理改变,且无动物死亡。

结论20mg/kg Con A腹腔注射是合适的剂量,每周1次,注射8次可建立肝纤维化动物模型。

【关键词】肝纤维化;动物模型;刀豆蛋白A合适的动物模型是研究肝纤维化的重要工具,我们已经采用Con A进行反复腹腔注射的方式成功建立昆明小鼠肝纤维化模型[1],此次期望通过改进和完善找到最佳剂量和成模时间,使之成为简便、价廉、可重复性好的动物模型。

1 材料与方法1.1 实验动物①实验动物:昆明小鼠96只,体重在18-22g,由江苏大学动物实验中心提供,均适应环境一周后开始实验;②主要试剂:Con A购于sigma公司。

1.2 实验方法1.2.1 动物分组昆明小鼠96只,随机平均分为4组,每组24只:低剂量Con A组(A组)、中剂量Con A组(B组)、高剂量Con A组(C组)和正常对照组(N组)。

1.2.2 动物的处理A组、B组、C组及N组分别经腹腔注射Con A溶液15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg及PBS溶液,每周一次。

于注射6、7、8、9周后(注射后24h)分批摘除小鼠眼球取血,将取血后的小鼠颈椎脱臼处死,取出肝脏,每组6只。

1.2.3 观察指标及检测①血浆ALT、AST:小鼠摘除眼球取血,采用全自动生化仪测定ALT及AST。

药理实验方法学

药理实验方法学

一个理想的肝纤维化动物模型应该符合以下 条件:
①与人类肝纤维化疾病的基本病变特征相似; ②病变有一定发展过程,即明显分期,以及病程发展存 在一个可逆与不可逆的阶段性演进过程; ③形成率高,死亡率低,重复性好; ④造模方法简便易行和动物易获得,经济实用。
中医症候动物模型:
中医学研究认为肝纤维化多是湿热、疫毒、痰瘀、饮 食失节、情志失调、劳逸失当、正虚所致,对肝纤维化的 主要病理认识多数建立在“血瘀”基本病机之上,认为血 瘀是其主要病机,治疗也以疏肝化瘀通络贯穿始终。
血吸虫法: 用血吸虫尾蚴来制备肝纤维化
模型。实验第6周可见肝脏中心静脉的变形坏死, 门脉区网状蛋白聚集并伸入到肝小叶,并最终形 成肝纤维化。此种模型可用于血吸虫病性肝硬 化的药物治疗研究,但不适宜用于其他人类肝纤 维化的研究。
显微镜下放大40倍的血吸虫尾蚴:
营养法(高脂饮食法):给大鼠含有胆固醇的高脂饲料 后,一定时间就可诱发体重超重、高脂血症、动脉粥样硬 化和脂肪肝。
目前的肝纤维化动物模型可模仿人肝 硬化发生过程,是研究肝硬化发病机制和 药物疗效的重要方法。
肝纤维化是肝脏对各种原因所致肝损 伤的创伤愈合反应,表现为肝内结缔组织 增生与沉积,是慢性肝病重要的病理特征, 也是进一步向肝硬化发展的重要环节。
在体外模型上,肝星状细胞(HSC)在肝纤 维化发病中的作用得到深入探讨。HSC梯度离 心分离和体外培养研究的建立与推广应用始于 上世纪八十年代,为研究肝脏基质的产生和作 用(如硬度、收缩性、组成、比较生物学等) 提供了有力工具,并证实HSC具有产生胶原等 细胞外基质的能力,在肝损伤和纤维化发病中 起重要作用。
在肝脏疾病中,利用不可预知的多种应激随机组合方 法,建立中医肝郁证大鼠模型。

大鼠肝纤维化模型的建立

大鼠肝纤维化模型的建立

大鼠肝纤维化模型的建立
史智勇;牛廷献
【期刊名称】《中国兽医科技》
【年(卷),期】1997(027)008
【摘要】大鼠肝纤维化模型的建立史智勇牛廷献周景熙(解放军兰州军区总医院730050)1材料与方法1.1动物选择与分组雄性Wistar大鼠40只(兰州医学院动物室提供),体重180~250g,随机分为4组,即正常对照组、四氯化碳(CCl4)组、CCl4+乙醇组...
【总页数】2页(P32-33)
【作者】史智勇;牛廷献
【作者单位】解放军兰州军区总医院;解放军兰州军区总医院
【正文语种】中文
【中图分类】R575.202
【相关文献】
1.复合多因素法对血瘀型肝纤维化大鼠模型的建立和评价 [J], 彭岳;韦燕飞;赵铁建;段雪琳;刘雪梅
2.大鼠肝纤维化模型建立及肝纤维化的检测 [J], 黄迪;古维立;胡志文;张帅;王成兴
3.小剂量二乙基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型的建立 [J], 玉苏甫·吐尔逊;赵燕霞
4.大鼠HSC-T6细胞建立体外肝纤维化模型的研究进展 [J], 梁宵;蔡晨宇;刘帅廷;李正祎
5.大鼠HSC-T6细胞建立体外肝纤维化模型的研究进展 [J], 梁宵; 蔡晨宇; 刘帅廷; 李正祎
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大鼠肝纤维化模型的制备

大鼠肝纤维化模型的制备

中文摘要目的本文通过对SD大鼠腹腔注射四氯化碳以诱导大鼠肝纤维化动物模型。

方法取15只SD大鼠,180—220g,分为A组10只,B组5只,A组为模型组:40%CCL4橄榄油混合液按0.12ml/100g腹腔注射,一周两次,共八周。

B组为对照组:纯橄榄油按0.12ml/100g腹腔注射,一周两次,共八周,八周后,禁食12小时处死全部大鼠,解剖取肝组织。

病理学检测:HE染色,MASSON染色,PAS染色。

基因学检测:1.3.4型胶原蛋白结果八周试验期间B组大鼠全部存活,肝组织标本结构清晰,无异常情况;A组大鼠出现明显的病态,肝组织标本均已达到肝纤维化S3以上,多数标本可见小叶被纤维结构分割包围,假小叶形成,干细胞可见脂肪变性;结论该方法肝损伤明显,死亡率低,周期短,能够成功作为慢性肝损伤,肝纤维化的模型。

关键词肝纤维化,四氯化碳,动物模型AbstractObjective: Established animal model of hepatic fibrosis in rats induced by carbon tetrachloride.Methods: Take 15 SD rats,180-220g, divided into 10 group A, group B 5 只, A group of model group: 40% CCL4 0.12ml/100g by abdominal injection of a mixture of olive oil, twice a week, a total of eight weeks. Group B was the control group: pure olive oil press 0.12ml/100g abdominal injection twice a week, a total of eight weeks, eight weeks later, all rats were fasted for 12 hours were sacrificed, dissected liver tissue. Pathology: HE staining, MASSON staining, PAS staining. Genetics testing: 1.3.4 collagenResults: During the eight-week test group B rats survived, liver tissue specimens clear structure, no exceptions; significant morbidity A rat liver tissue fibrosis S3 have reached above, the majority of samples are split fiber structure visible lobular surrounded pseudo lobule formation, stem cell degeneration visible fat.Conclusion: This method obviously liver injury mortality, the period is short, to be successful as chronic liver damage, liver fibrosis model.Key words: Fibrosis, carbon tetrachloride, animal model前言肝病包括1.慢性病毒性肝炎2.药物性肝炎 3.中毒性肝炎 4.脂肪肝 5.酒精肝 6.肝硬化 7.肝肿瘤 8.肝胆结石 9.肝囊肿大多数肝病伴随着肝纤维化,肝纤维化是威胁人类健康的常见疾病,是各种慢性肝病最重要的病理特征,是发生肝硬化的病理基础,也是原发性肝癌发病的危险因素之一。

血府逐瘀汤对刀豆蛋白A诱导小鼠肝纤维化的干预作用

血府逐瘀汤对刀豆蛋白A诱导小鼠肝纤维化的干预作用

血府逐瘀汤对刀豆蛋白A诱导小鼠肝纤维化的干预作用吴惠春;吴韶飞;周振华;张鑫;李曼;高月求【期刊名称】《中西医结合肝病杂志》【年(卷),期】2014(000)005【摘要】目的:观察血府逐瘀汤对刀豆蛋白A ( Con A)诱导小鼠肝纤维化的干预作用。

方法: Balb/c雄性小鼠40只,随机分为正常组(8只),模型组(16只)和治疗组(16只)。

模型组和治疗组按照1.25mg/100g小鼠体重予以尾静脉注射Con A,正常组予注射相应剂量生理盐水,1次/周,共10周。

治疗组于造模同时,予血府逐瘀汤药液1ml/100g小鼠体重灌胃,正常组及模型组则予以等量饮用水,1次/d。

10周后,处理各组小鼠,留取血清、肝脾标本。

全自动生化仪检测血清血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和白蛋白(Alb); HE和天狼星红染色观察肝组织炎症和胶原沉积; RT-PCR和Western Blot法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达。

结果:模型组小鼠ALT和AST活性均较正常组明显升高(P<0.05);肝组织HE染色可见肝细胞坏死和大量炎性细胞浸润;天狼猩红染色可见大量胶原沉积和假小叶形成;肝组织α-SMA和TGF-β1较正常组显著升高(P<0.01)。

与模型组相比,治疗组ALT、 AST水平明显降低(P<0.05);肝脏炎症和胶原沉积明显改善;α-SMA和TGF-β1表达显著下调(P<0.01)。

结论:血府逐瘀汤可通过减轻肝脏炎症和抑制肝星状细胞活化而改善Con A诱导的小鼠肝纤维化。

%Objective: To investigate the preventing effects of Xuefuzhuyu decoction on concanavalin A ( Con A) -induced liver fibrosis inmice.Methods: Forty male Balb/c mice were randomly devided into threegroups, normal group, model group and treatment group.In model group and treatment group were i.v.injected Con A at a dose of 1.25mg/100g once a week for ten weeks, meanwhile mice in normal group werei.v.injected with normal saline.When modeling, mice in treatment group were administered with Xuefuzhuyu decoction at a dose of 1ml/100g once daily;correspondingly mice in normal group and model group were administered with water.Ten weeks later, mice were sacrificed and blood serum, liver and spleen tissue were collected.Levels of ALT, AST and Alb were detected by an automatic biochemical analyzer; liver inflammation and collagen deposition were observed by HE and sirius red staining;the expression ofα-smooth muscle actin (α-SMA) and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) were dectected by real-time PCR and Westernblot.Results:Compared to the normal group, the levels of ALT and AST in the model group were significantly increased ( P<0.05);in the model group, the necrosis of liver cells and infiltra-tion of inflammatory cells can be observed in HE staining, meanwhile collagen deposition and pseudolobule can be seen in sirius red staining; the expression ofα-SMA and TGF-β1 were significantly increased (P<0.01) .The Xuefuzhuyu decoction signif-icantly decreased the serum level of ALT and AST (P<0.05), relieved the hepatic inflammation and the deposition of collagen, as well as down-regulated the expression ofα-SMA and TGF-β1 ( P<0.01 ) .Conclusion: Xuefuzhuyu decoction can protect liver tissue against Con A-induced liver fibrosis by alleviating inflammatory response and inhibiting the activation of hepatic stel-late cells ( HSC) .【总页数】4页(P287-289,320)【作者】吴惠春;吴韶飞;周振华;张鑫;李曼;高月求【作者单位】上海中医药大学附属曙光医院肝病科上海,201203;上海中医药大学附属曙光医院肝病科上海,201203;上海市中医临床重点实验室;上海市中医临床重点实验室;上海市中医临床重点实验室;上海中医药大学附属曙光医院肝病科上海,201203; 上海市中医临床重点实验室【正文语种】中文【相关文献】1.不同剂量刀豆蛋白A腹腔注射诱导昆明小鼠肝纤维化的效果观察 [J], 潘红芳;赵凯;张炜2.不同剂量刀豆蛋白A腹腔注射诱导昆明小鼠肝纤维化的效果观察 [J], 潘红芳;赵凯;张炜;3.川芎嗪对刀豆蛋白A诱导的小鼠肝纤维化JAK2/STAT3信号通路的影响 [J], 严栋梁;邵伟斌;葛创;陈杰;陈靓;朱冬梅;朱斌4.刀豆蛋白A诱导小鼠肝纤维化动物模型的建立及机制探讨 [J], 陈丽;谭友文;叶云;孙莉5.川芎嗪对刀豆蛋白A诱导的小鼠肝纤维化TNF-α、IL-6、IL-10表达的影响 [J], 严栋梁;陈杰;葛创;钱益;朱斌;邵伟斌因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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[ Ab s t rT o e s t a b l i s h h e p a t i c f i b r o s i s a n i m a l m o d e l i n Wi s t a r r a t .Me t h o d s :F i t f y Wi s t a r r a t s w e r e r a n d o ml y d i —
v i d e d i n t o 2 g r o u p s .I n t h e e x p e i r m e n t a l g r o u p ( E) , t e n r a t s w e r e i n j e c t e d C o n A a t a d o s e o f 1 2 . 5 m g / k g o n c e a w e e k f o r 4 w e e k s a n d
目前已建立了多种肝纤维化模型如反复注射四氯化碳及二甲基亚硝胺结扎胆总管腹腔注射异种血清蛋白810但这些方法主要是通过直接或间接对肝细等胞的毒性作用而产生的肝纤维化或硬化模型11而非激起体内的免疫反应如淋巴细胞浸润细胞因子分泌等因此与人类由慢性病毒或自身免疫引起的肝纤维化存在一定的差距不适合用于人类肝纤维化疾病的研究
G E NG X i a o .D e p a r t m e n t o f I m mu n o l o g y , Me d i c a l C o l l e g e f o Q i n g d a o U n i v e r s i t y , Q i n g d a o 2 6 6 0 7 1 ,C h i n a
Co n c a n a v a l i n A i n du c e d Wi s t a r r a t mo de l f o r h e pa t i c ib f r o s i s
L I A NG ie f , ZH A NG Be i , J i a — Ba o , Z H A NG Xi — Do n g, L I Y u a n — Y u a n, WA NG S h i — in, f W A NG L i , Z HOU 耽 n - C h a o ,
中国免疫学杂志 2 0 1 3年第 2 9卷
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刀 豆蛋 白 A 诱导 Wi s t a r大 鼠 肝 纤 维 化 模 型 的 建 立 ①
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e r w e r e o b s e r v e d b y m i c r o s c o p e a t f e r h e m a t o x y l i n& e o s i n a n d Ma s s o n T r i c h r o m e s t a i n i n g .H e p a t o c e l l e r i n j u i r e s w e r e e v a l u a t e d b y
梁 洁 张 蓓 刘佳 宝② 张 希东⑤ 李 园园 王 十锦 王 丽 周文超 耿 霄
( 青 岛大 学医 学院免疫教 研 室 , 青 岛2 6 6 0 7 1 )
中 国 图 书分 类 号 l b9 2 文献 标 识 码 A 文 章编 号 1 0 0 0 - 4 8 4 X( 2 0 1 3 ) 1 1 . 1 1 9 8 - 0 4
[ 摘
要] 目的 : 建立 Wi s t a r 大 鼠肝纤维化模型。方法 : 5 O只 Wi s t a r 大鼠随机分成两组 。实 验组( E组 ) 3 0只 , 经尾静脉
注射 1 2 . 5 m g / k g 剂量 的刀豆蛋 白 A( C o n A) , 每周 1次 , 1 0只大鼠在第 4次注射 1 周后处死 , 其余 2 O只 8周后处死 。正常对照 组( N组 ) 2 o只 , 大 鼠经尾静脉注射 3 0 0 I x l 的P B S , 第 8次注射 1周后处死 。取大 鼠肝 脏计算肝脏指 数并 进行肝纤 维化评 分 , 做 H E和 M a s s o n T r i c h r o me 染色 , 显微镜下观察肝脏 的病理变化 。取血清测 A L T、 A S T 、 T P及 A L B 。结果 : 与对 照组相 比, 实验 组连续注射 C o n A 8周 的大 鼠 A L T 、 A S T显著升高 , T P变化不明显 , A L B及 白球 比显著 降低 。肝脏体积增大 , 肝脏指数增高 . 病 理分析示 明显纤维化 。结论 : 反复尾静脉注射 C o n A可成功诱 导 Wi s t a r 大 鼠肝脏纤 维化模 型的建立 。 [ 关键 词] 肝纤维化 ; 动物模型 ; 刀豆蛋 白 A; Wi s t a r 大 鼠
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