灌流固定

灌流固定
1.准备
固定液：2%多聚甲醛2.5%戊二醛（用PB进行配置）（用之前4℃预冷）
0.9%生理盐水（用之前37℃预热）
常用的输液器
2.步骤
大鼠：麻醉后打开胸腔，暴露心脏，将输液器针头自左心室刺入至升主动脉，剪开右心耳。

开始灌流生理盐水（150ml），快速灌流将体内血液冲出，待将冲完时加入400ml固定液，同样快速冲固定液的1/3，后2/3减慢速度，耗时40分钟灌完即可。

小鼠：方法同上，生理盐水20ml，固定液150ml，快速灌流，灌完为止。

PB缓冲液（2000ml）
磷酸氢二钠：71.71g
磷酸二氢钠：7.3g
蒸馏水：2000ml
待完全溶解后，再配多聚（可适当加热，加速溶解）。

2%多聚的配法（配1000ml）：
20g多聚甲醛先加入800mlPB加热至完全溶解（注意不要沸腾），然后用PB定容到1000ml即可，然后用滤纸进行过滤，再用这个配置2.5%的戊二醛。

2%多聚甲醛2.5%戊二醛配法(配1000ml)
50ml戊二醛（50%戊二醛原液）加入上述溶液中。