手足口病样本采集运送

手足口病标本采集

手足口病样品的采集
一、样品采集生物安全的要求
手足口病采样器采样中避免污染对于人员和标本都是至关重要的，应采用防护措施，注意安全操作。

基本的安全要求如下：
采样戴手套
采样中尽可能穿防护服
污染的材料应先消毒后清洗或消毒后废弃
使用口罩、用于防止有传染力的可吸入病原
二、手足口病采样器材的要求：
拭子：应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做杆。

不能使用棉拭子收集标本。

标本采集管应包含3毫升病毒运输液
采样管：外螺旋口、耐－70℃冻存
采样液：无菌病毒保存液
三、手足口病采集的样品
核酸检验应在发病初期和急性期采样，因为此时病毒在体内大量繁殖，检出率高，病毒分类标本最好在发病1～2天内采取。

1.脑脊液、咽拭子、粪便或肛拭子或疱疹液内的粪便标本，用于病原检测。

粪便标本采集量5~8g/份，采集后立即放入无菌采便管内，4℃暂存立即(12h内)送达实验室，－20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于－70℃冰箱。

2．血清学检验
病人血清中特异性IgM抗体阳性，或急性期与恢复期血清IgG抗体有4倍以上的升高。

三、样品的储存和运送
所有呼吸道标本应保存在4℃，并尽快放置在-70℃。

如果没有-70℃度冰箱，标本应保存在4℃，但不应超过4天
手足口病病人样品采集、保存标准一览表
（1）采集新发或新入院病人的相关标本；
（2）样品采集时，如果标本需分装或分地检测，注意适当增加单份样品采集量；（3）采样时，做好样品登记工作，详细记录病人姓名、性别、年龄、发病时间、采样时间、主要临床表现、是否用药等信息，并注意和个案调查资料相匹配。

标本采集运输接收及保管制度

标本采集运输接收及保管制度一、引言在医疗行业中，标本采集运输接收及保管是非常重要的环节。

正确的标本采集、准确的运输方式、规范的接收及妥善的保管是确保医疗工作顺利进行的基础。

本制度的制定旨在规范标本采集、运输接收及保管流程，确保标本完整性、准确性和可追溯性，为医疗工作提供可靠的数据支持，减少工作风险，提高工作效率。

二、标本采集1.医务人员应经过严格的培训并持有相应的执业资格才能进行标本采集工作。

2.标本采集前应对患者进行相应的告知，包括标本采集的目的、过程和可能的不适感等。

3.医务人员应佩戴防护用品，包括口罩、手套和护目镜等，以防止交叉感染。

4.采集器械应为一次性器械，不得重复使用，采集器械的选择应根据标本类型进行。

5.采集过程中需要注意标本采集区域的清洁，避免污染。

6.采集完成后，应立即将标本进行正确的包装和标记，确保标本完整，并填写相应的标本采集记录。

三、标本运输1.标本运输应尽量选择专门的运输车辆，保证及时到达目的地。

2.运输车辆应具备稳定的温度和湿度控制装置，以保证标本的稳定性。

3.标本应以密封的容器进行运输，以防止泄漏和破损。

4.标本运输过程中需要注意防震措施，避免标本在运输过程中发生破损。

5.运输过程中需记录标本的运输情况，包括起运时间、到达时间等，以便追溯标本的运输历史。

6.运输车辆上应配备相应的急救设备和处理突发情况的人员。

四、标本接收1.标本接收人员应经过相应的培训，并持有相应的执业资格。

2.接收人员在接收标本之前应确认标本的完整性和准确性，并进行记录。

3.接收时需要核对标本相关信息，包括标本袋上的患者信息和标本类型等。

4.接收人员需要根据标本种类和要求将标本进行妥善的分类和保存。

5.接收完成后，应及时将接收情况填写至接收记录表，并交由相关部门进行后续处理。

五、标本保管1.标本应存放在专门的标本保管室中，禁止将标本放置于其他非相关区域。

2.标本保管室应具备相应的温度和湿度控制装置，以保证标本的稳定性。

标本采集、运送、保存程序

标本采集、运送、保存成序1.目的规范标本采集程序，保证实验室检测前标本质量。

2. 范围微生物标本。

3. 职责3.1 医护人员和检验人员负责指导病人如何正确留取标本。

3.2 标本运输人员负责收取标本和运输标本至微生物室。

4. 程序4.1 采集标本前，采样人员根据检验申请单检验项目的要求，确认采样计划并进行适当的准备工作，包括核对遗嘱、打印条形码、选择合适的标本容器、粘贴条形码及指导病人做好采样前的准备工作等。

4.2 认真核对病人、标本容器和检验申请单是否一致，严防差错。

4.3 标本送到微生物室，标本运输人员必须与微生物室标本接收人员对标本进行核收登记并签名4.4 所有标本必须记录采样时间并立即送检，一般不得超过2h.5 采集方法5.1 血液及骨髓5.1.1 血液5.1.1.1采血时间：①在抗菌药物治疗前；②尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前30-60分钟内采血；③如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养；④同时或短时间内完成几套血培养采集，除非怀疑存在持续性菌血症时（如亚急性感染性心内膜炎1-2小时从不同部位采集3套标本）5.1.1.2采血量：成人一次采血5～10ml,儿童2～5 ml婴幼儿为1～2ml。

（附注：儿童的采血量不能超过其总血容量的1%）。

5.1.1.3采血方法：①成年病人，推荐同时在不同部位采集2～3套（每套包括一瓶需氧瓶、一瓶厌氧瓶）；对于感染性心内膜炎和真菌血症则应多次采集；对于婴幼儿病人，推荐同时在不同部位采集2～3瓶。

因为儿童患者很少见厌氧菌感染，因此推荐仅使用需氧瓶而不常规推荐同时做厌氧培养。

②采血量充足时，应先注入厌氧瓶，后注入需氧瓶；采血量不足时，应先注入需氧瓶，后注入厌氧瓶。

5.1.2 骨髓标本用骨髓穿刺针从髂骨采集。

5.1.3 标本保存：采集标本后立即送到实验室，不能及时送检可置于室温，切勿放入冰箱。

冬季血培养瓶在送检过程中应采取一定的保暖措施。

5.2 脑脊液标本：由临床医师以无菌要求做腰椎穿刺，抽取脑脊液2～3ml,盛于无菌容器中送检。

传染病样本采集运送接收储存流程

传染病样本采集运送接收储存流程1.样本采集样本的采集是诊断传染病的第一步，需要按照传染病的特点和采集标准进行。

常见的传染病样本包括血液、尿液、咽拭子、咳嗽样本等。

采集时需要穿戴一次性手套和口罩，并使用无菌棉签或吸管采集样本。

采集过程需要进行适当记录，包括患者信息、采集时间等。

2.样本运送采集完成后，样本需要尽快送到实验室进行检测。

在运送过程中，需要注意以下几点：-选择适当的容器：根据样本的性质选择适当的容器，如血液样本通常用抗凝剂管，尿液样本通常用无菌容器。

-包装和标记：样本需要进行适当的包装，并在容器上标明患者的信息，包括姓名、年龄、性别、住院号等。

-运送温度：根据不同样本的要求，选择合适的温度进行运送，如有些样本需要冷藏，有些则需要常温。

3.样本接收实验室收到样本后，需要进行以下处理：-首先检查包装：检查包装是否完好无损，并核对标记上的信息是否与样本一致。

-登记样本：将样本信息登记在实验室的系统中，包括患者信息、送样时间、送样人员等。

-处理样本：根据所需检测项目，对样本进行适当的处理，如离心分离血浆、提取核酸等。

4.样本储存在检测完成后，未使用的样本需要储存起来，以备后续可能的检测或检测验证使用。

样本储存需要满足以下要求：-选择适当的储存方式：根据样本的性质和要求，选择适当的储存方式，如低温冷冻、冻干、阴凉干燥等。

-标记完整：在样本容器上标明详细的信息，包括患者信息、储存日期、储存条件等。

-安全存放：确保样本的安全存放，避免交叉污染和损坏。

总结起来，传染病样本采集、运送、接收、储存流程是一个前后衔接的过程。

在每个环节都需要严格遵守相应的操作规范，以确保样本的质量和安全，从而保证检测结果的准确性和可靠性。

手足口病样本采集运送

DATE
ANALYSIS
SUMMAR Y
01
手足口病概述
定义与症状
定义
手足口病是一种由肠道病毒引起的传染病，主要通过消化道、呼吸道和接触传播。
症状
发热、口腔溃疡、手足皮疹等，严重时可导致脑膜炎、心脏疾病等并发症。
传播途径与风险因素
传播途径
粪-口传播、飞沫传播、接触传播等。
风险因素
儿童、免疫力低下者、卫生条件差等。
REPORT
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DATE
ANALYSIS
SUMMARY
手足口病样本采集运送
汇报人：可编辑
2024-01-11
目录
CONTENTS
• 手足口病概述 • 样本采集前的准备 • 样本采集方法与注意事项 • 样本运送与保存 • 安全防护与生物安全 • 案例分享与经验总结
REPORT
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REPORT
THANKS
感谢观看
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SUMMAR Y
避免污染
采样时要避免样本受到污染，特别是避免采集到其他微生物或杂质。
及时送检
采集到的样本应及时送往实验室进行检测，以保证结果的准确性和可靠性。
REPORT
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DATE
ANALYSIS
SUMMAR Y
04
样本运送与保存
运送容器与包装
容器材质
应使用密封性好、防漏、耐压的容器，如塑料或金属材质。
SUMMAR Y
05
安全防护与生物安全
采集过程中的防护措施
穿戴个人防护装备
采集人员应穿戴符合生物安全要求的防护服、口罩、手套等，确保自身安全。

标本采集运送标准操作规程

细菌室对微生物标本拒收的标准与处理方法
送检延误，超过要求送检时限
标本量过少或已明显干燥
与送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。
与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。
申请项目不适合如血液培养同时要求涂片革兰染色，肛门或直肠标本要求做革兰染色检查淋球菌。
联系申请医师，建议删去请求革兰染色项目
标本采集应力争在末使用抗菌药物之前，注意避免消毒剂污染标本。清洁中段尿：最好留取早晨清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床,由专业人员指导下采集中段尿标本。尿标本消毒采集程序：
女性中段尿的采集方法：

用肥皂水完全清洗尿道区域，用湿纱布垫漂洗。分开阴唇，开始排泄。排除前段尿后，不停止尿流，采集中段尿。留置导尿管收集尿液：利用留置采集标本时，应先夹住导尿管1-2小时后，以75﹪酒精消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液。注意不能从尿液收集袋中采集尿液。
送检容器不当或破损渗漏穿刺液标本严重凝固，无菌部位标本（如脑脊液、脓、穿刺液、尿液等）为非无菌管采集。
与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。退回申请单，并注明标本不当，要求重送标本。
一支拭子同时做细菌、支原体、衣原体及真菌培养
询问医师并补送标本，如不能补送，则按医师要求优先次序处理
同一天同一病人重复送多次同一检测目的的相同样本（血液标本除外）
标本接收至进行检验时间
标本接收至出报告时间
标本检验的周期（标本接收至报告送达时间）
1
肥达氏反应、肺支抗体、结核抗体、梅毒筛查梅毒确诊试验
2小时
1小时
24小时
2天
2
2小时

手足口病标本采集技术方案

手足口病标本采集技术方案标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]手足口病标本采集技术方案一、采集标本的种类、保存和运输（一）粪便标本。

采集病人发病 3 日内的粪便标本，用于病原检测。

粪便标本采集量 5-8g/份，采集后立即放入无菌采便管内，外表贴上带有唯一识别号码的标签，4℃暂存 12 小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（二）咽拭子标本。

采集病人发病 3 日内的咽拭子标本，用于病原检测。

用专用采样棉签，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将棉签放入装有 3-5ml 保存液（含5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）15ml 外螺旋盖采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，以防干燥，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

4℃暂存在 12 小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（三）血清标本。

各省（区、市）在手足口病流行年份中均应采集 EV71 和 CVA16感染的手足口病患儿的双份血清。

采集急性期（发病 0-7d）和恢复期（发病 14-30d）双份配对血清用于阐明和分析 EV71 和 CVA16 感染后 IgG 和 IgM 抗体的动态变化，评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。

静脉采集 3-5ml 全血，于真空无菌采血管中，自凝后，分离血清，将血清移到 2ml 外螺旋的血清保存管中，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

将血清于-20℃以下冰箱中冷冻保存。

（四）疱疹液。

在手足口病的实验室诊断中，从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因，可同时采集多个疱疹作为一份标本。

先用 75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒，然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液，迅速将棉签放入内装有 3-5ml 保存液（含 5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。

病毒样本采集、运送、接收、储存流程

病毒样本采集、运送、接收、储存流程---
1. 采集样本
- 选择合适的采集场所，确保环境清洁、无污染。

- 首先准备所需的采集工具和材料，包括手套、口罩、消毒剂等。

- 按照操作规程，正确采集病毒样本，避免交叉污染。

- 将采集样本放入适当的中，确保密闭。

2. 运送样本
- 采集完成后，将样本封装好，并贴上相应的标签，包括样本标识、采集时间等信息。

- 样本的运送过程中需要注意温度控制，确保样本的稳定性。

- 根据运输距离和时间，选择合适的运输方式，如专用运输车辆、干冰等。

- 在运送过程中，保持样本的密封性，避免外界污染。

3. 接收样本
- 在接收样本前，要核对样本标签上的信息，确保与运送单据
一致。

- 接收到样本后，及时将其储存到指定的储存设备或地点。

- 如果样本需要进行分析或检测，要及时进行样本提取和处理。

4. 储存样本
- 样本储存过程中要注意温度和湿度的控制，确保样本的稳定
性和可靠性。

- 对于需要长期储存的样本，应选择合适的冷冻设备或冷冻液
进行储存。

- 对于高风险的样本，应采取相应的安全措施，如使用防护设备、选择专用储存场所等。

以上为病毒样本采集、运送、接收、储存的流程简要介绍。

在
进行相关操作时，注意遵守相关法规和标准，确保操作的安全性和
可靠性。

手足口标本采样及上送要求课件

建立持续改进机制，提高检测水平
问题反馈
鼓励采样人员积极反馈在实际工作中遇到的问题，提出改进建议。
定期评估
定期对采样工作进行评估，总结经验教训，发现问题及时整改。
技术更新
关注新技术、新方法的发展，及时引进和应用，提高检测准确性和效率。
THANKS
感谢观看
了解患者信息及采样需求
询问患者病史、症状出现时间、就诊原因等，明确采样目的。
了解采样后的检测项目和时限要求，确保标本质量。
根据患者年龄、病情等因素，选择合适的采样方法和部位。
准备相关器材和试剂
选择合适的采样器材，如咽拭子、肛拭子、血液采集针等，确保无菌、无酶。
准备采样管、标签、消毒液等辅助用品，确保采样过程规范、无
发病后3-5天采集最佳，此时病毒载量较高。
采样部位
用无菌棉拭子在患者咽后壁和两侧扁桃体处轻轻擦拭。
采样量
每个拭子至少擦拭3次，将拭子头浸入含3ml采样液的螺口
塑料管中。
注意事项
采样前让患者用清水漱口，以减少食物残渣对采样效果的影
响。
肛拭子采集法
采样时间
发病后一周内采集最佳。
采样部位
用无菌棉拭子蘸取少量生理盐水，在患者肛门内轻轻旋转擦拭。
手足口病诊断标准与治疗原则
诊断标准
根据患儿的临床表现、实验室检测和流行病学史进行综合判断。典型症状包括手、足、口腔等部位的疱疹，可伴有发热、咳嗽等。
治疗原则
手足口病的治疗主要为对症治疗，如退热、止痛等。同时，应注意患儿的隔离和消毒，避免交叉感染。对于重症病例，应及时住院治疗。
02
标本采集前准备工作
持证上岗

手足口标本采样及上送要求

4、致病性
传染源：患者的粪便、唾液、咽部分泌物、污染的食物、水泡内容物多途径：粪—口途径、呼吸道、密切接触口鼻内分泌物在发病后一周内最强肠道排出病毒，时间可达8—12周之久肠内感染、肠外症状
二、实验室检测
病毒分离：RD、Hep-2
核酸检测：RT-PCR
血清学：IgM,IgG
三、标本采集
种类
咽拭子、粪便、疱疹液、脑脊液、肛拭子、血清
采集方法
1.粪便发病7日内，一般采集4—8 g，
不必加任何保护液。
2.肛拭子如粪便标本不能采集，通常
可用直肠拭子代替，采样后臵3ml病毒采
样液中，阳性率大大降低。
3.咽拭子患者发病内3日内，咽后壁及两
侧扁桃体，病毒采样管。
4.疱疹液选择有混浊疱疹，先进行皮肤消
第一层容器
第二层容器
第三层容器
谢谢
20面体立体对称无包膜单链rna柯萨奇病毒a组16457910型埃可病毒肠道病毒71型ev71ev71和coxa16在遗传学上同属人类肠道病毒a组病毒在50可被迅速灭活在4可存活1年在外环境中可长期存活尤其适合在湿热的环境下生存与传播
手足口标本采集上送要求
病原学简介
实验室诊断方法标本采集
标本上送
毒，然后用注射针头抽取疱疹液，拭子擦
取，臵3ml病毒采样液中。
5．脑脊液出现神经系统症状3日内，在无
菌条件下采集,臵于消毒试管中，立即送检
或冻存。
6．血清急性期（发病0-5天），恢复
期（发病14-28天）,空腹、5m1，真空采
血管，在室温放臵2 h，待凝固后分离血清。
注意事项
1.粪便：发病一周内，量要足、密闭螺旋盖容器内 2.咽拭子：发病3日内、有力度、不要触及舌头 3.疱疹液：皮肤消毒 4.血清：双份，血清析出后臵2ml冻存管内上送，勿溶血，急性期（发病0-5 天），恢复期（发病14-28天）。

手足口病标本采集技术方案

手足口病标本采集技术方案一、采集标本的种类、保存和运输（一）粪便标本。

采集病人发病 3 日内的粪便标本，用于病原检测。

粪便标本采集量 5-8g/份，采集后立即放入无菌采便管内，外表贴上带有唯一识别号码的标签，4℃暂存 12 小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（二）咽拭子标本。

采集病人发病 3 日内的咽拭子标本，用于病原检测。

用专用采样棉签，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将棉签放入装有 3-5ml 保存液（含 5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）15ml 外螺旋盖采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，以防干燥，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

4℃暂存在 12 小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（三）血清标本。

各省（区、市）在手足口病流行年份中均应采集 EV71 和 CVA16感染的手足口病患儿的双份血清。

采集急性期（发病 0-7d）和恢复期（发病 14-30d）双份配对血清用于阐明和分析 EV71 和 CVA16 感染后 IgG 和 IgM 抗体的动态变化，评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。

静脉采集 3-5ml 全血，于真空无菌采血管中，自凝后，分离血清，将血清移到 2ml 外螺旋的血清保存管中，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

将血清于-20℃以下冰箱中冷冻保存。

（四）疱疹液。

在手足口病的实验室诊断中，从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因，可同时采集多个疱疹作为一份标本。

先用 75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒，然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液，迅速将棉签放入内装有 3-5ml 保存液（含 5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。

所采集标本 4℃暂存立即（12h 内）送达实验室，－20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于－70℃冰箱。

手足口标本采集技术方案

附件1手足口病标本采集及检测技术方案一、采集标本的种类、保存和运输（一）粪便标本。

采集病人发病3日内的粪便标本，用于病原检测。

粪便标本采集量5-8g/份，采集后立即放入无菌采便管内，外表贴上带有唯一识别号码的标签，4℃暂存12小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（二）咽拭子标本。

采集病人发病3日内的咽拭子标本，用于病原检测。

用专用采样棉签，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将棉签放入装有3-5ml保存液（含5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的15ml外螺旋盖采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，以防干燥，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

4℃暂存并在12小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（三）血清标本。

各省（区、市）在手足口病流行年份中均应采集EV71 和CVA16感染的手足口病患儿的双份血清。

采集急性期（发病0-7d）和恢复期（发病14-30d）双份配对血清用于阐明和分析EV71和CVA16感染后IgG和IgM抗体的动态变化，评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。

静脉采集3-5ml全血，置于真空无菌采血管中，自凝后，分离血清，将血清移到2ml外螺旋的血清保存管中，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

将血清置于-20℃以下冰箱中冷冻保存。

（四）疱疹液。

在手足口病的实验室诊断中，从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因，可同时采集多个疱疹作为一份标本。

先用75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒，然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液，迅速将棉签放入内装有3-5ml保存液（含5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。

所采集标本4℃暂存立即（12h内）送达实验室，－20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于－70℃冰箱。

标本采集和运送方法

附件3 标本采集和运送方法一、标本采集（一）血标本。

1．采集病例出疹后28日内静脉血2～3ml，加入到无菌试管中，标明采集日期和病例姓名、编号。

2．有条件地区可用1500rpm/20分钟离心机分离血清。

如果没有离心机，在室温下凝固分离血清，或冷藏条件下放置，直到血清完全析出。

3．在无菌条件下，将血清移至外螺旋盖带垫圈的无菌管中，避免吸到红血球。

4．血清标本运送前应在2～8℃保存，如果7日内不能运送的，应置-20℃以下保存，避免反复冻融。

全血标本不能冻结。

5．填写完整的标本送检表，送检表上要注明病例编号。

6．出疹后3日内采集的血标本检测麻疹、风疹IgM抗体均为阴性，且无病原学标本核酸检测结果的，应在出疹后4～28日采集第2份血标本进行检测。

注：合格血标本的基本要求是：出疹后28日内采集，血清量不少于0.5ml，无溶血，无污染；2～8℃条件下保存、运送。

（二）病原学标本。

咽拭子病原学标本的采集方法如下：（1）出疹当日至出疹后5日采集。

（2）使用的棉拭子和试管等应灭菌。

（3）用无菌棉拭子适度用力在咽喉部擦拭，获得上皮细胞。

（4）把拭子放入有外螺旋盖并装有2ml病毒运输液的冻存管中。

（5）病毒运输液有商业成品可用。

常用的病毒运输液包括：pH 7.4～7.6的Hank’s液：在90ml蒸馏水中加入10mlHank’s，然后加入10ml牛血清和0.2ml 0.4％酚红溶液，过滤消毒。

加1ml青/链霉素溶液。

分装到无菌管中，于4℃储存备用。

组织培养液：DMEM液加入青/链霉素使其终末浓度分别为500～1000IU/ml 和500～1000ug/ml，加入胎牛血清使其终末浓度为2％，加入谷氨酰胺至浓度为1％；加入7.5％的NaHCO调节pH至7.4～7.6。

3注：合格病原学标本的基本要求：出疹后5日内采集，冷藏运送，-70℃以下保存。

二、标本运送（一）血标本。

1．标本采集后按照监测方案要求送到实验室，严防标本污染或容器渗漏。

手足口病室检测方案-中国疾病预防控制中心

附件3手足口病实验室检测方案（试行）为规范手足口病的标本采集、运送及实验室检测操作程序，提高检测准确性，从而为手足口病的明确诊断和相关实验研究提供可靠的依据，特制定本方案。

手足口病的实验室检测原则和程序手足口病的诊断一般是通过采集适当的临床标本后进行病毒分离和病毒鉴定，如果没有采到合适的临床标本，或无法进行病毒分离，也可以通过血清学检测（如中和实验）来检测血清中的中和抗体，或直接从临床标本中检测病毒的核酸来诊断（见下图：手足口病的实验室诊断流程图）。

一般是由省级病毒实验室进行病毒的分离，爆发疫情范围较大时，国家参比实验室也可以提供技术支持。

病毒分离成功后，送至国家参比实验室进行鉴定或复核，同时对全国手足口病的病原进行病毒学监测。

国家参比实验室接到标本后，在30日内将结果反馈给省级实验室。

很多血清型的肠道病毒能引起手足口病，不同细胞系对不同病毒的敏感性是有所不同的，而不同时期肠道病毒的流行株也不同。

通常用于肠道病毒分离的细胞系为RD细胞（对CA16和EV71敏感）、HEp-2细胞（对某些柯萨奇B组病毒敏感）等，联合使用上述两种或更多细胞（如Vero细胞）有助于分离到更多的肠道病毒。

使用血清型特异性的中和抗血清进行的中和实验是肠道病毒鉴定的基本方法，如果使用了适当的抗血清，实验结果是比较可靠的。

因为肠道病毒包括若干个血清型，通常使用组合抗血清进行鉴定，有些组合抗血清已经商品化。

当无法进行病毒分离或得不到适用于病毒分离用的标本时，血清学检测可以为肠道病毒的感染提供一个间接的证据。

一般用急性期血清与恢复期血清的检测结果进行比较，抗体滴度呈四倍或以上增高证明有急性感染。

但是，无症状的肠道病毒感染也是常见的，所以对检测结果的解释要慎重一些。

为了提高检测速度，也为了辅助中和实验法进行毒株鉴定，最近很多实验室都使用分子生物学方法。

目前，用分子生物学方法对肠道病毒进行定型还没有统一的标准，而且要根据检测目的选择使用适用的方法。

手足口病样本采集运送课件

无菌棉签或拭子，集到的样本放入
采集患者口腔、咽部、肛门等部位的分泌物
无菌容器中，密封保存，避免污染和变质
安全处理：采集和运送过程中，注意避免接触患者血液、体液等，防止交叉感染
样本保存
1
保存温度： 2-8℃
2
保存时间：不超过24小时
3
保存容器：无菌容器
4
保存方式：冷藏或冷冻保存
04
神经系统症状：部分患者吸系统症状：部分患者可能出现咳嗽、呼吸困难等症状
06
消化系统症状：部分患者可能出现恶心、呕吐、腹泻等症状
样本采集
2
采集方法
01
采集部位：口腔、咽部、肛门等
02
采集工具：棉签、拭子等
03
采集步骤：清洁皮肤、擦拭样本、放入容器等
运送流程
3
运送要求
01
样本采集：采集的样本应符合要求，如采集部位、数量等
02
包装要求：包装应符合要求，如包装材料、包装方式等
03
运送方式：运送方式应符合要求，如运送时间、运送温度等
04
安全要求：运送过程中应保证样本的安全，如避免污染、避免破损等
运送方式
01
专人运送：由专业人员负责运送样本，确保安全
02
冷链运输：使用冷藏设备运输样本，保持低温环
境
03
密封包装：使用密封袋或容器包装样本，防止污
染
04
定时监测：在运输过程中定时监测样本温度，确
保温度稳定
运送安全
01
04
安全防护：运输过程中，注意防止样品泄漏、破损等意外情况发生

手足口标本采集技术方案

附件1手足口病标本采集及检测技术方案一、采集标本的种类、保存和运输（一）粪便标本。

采集病人发病3日内的粪便标本，用于病原检测。

粪便标本采集量5-8g/份，采集后立即放入无菌采便管内，外表贴上带有唯一识别号码的标签，4℃暂存12小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（二）咽拭子标本。

采集病人发病3日内的咽拭子标本，用于病原检测。

用专用采样棉签，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将棉签放入装有3-5ml保存液（含5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的15ml外螺旋盖采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，以防干燥，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

4℃暂存并在12小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（三）血清标本。

各省（区、市）在手足口病流行年份中均应采集EV71 和CVA16感染的手足口病患儿的双份血清。

采集急性期（发病0-7d）和恢复期（发病14-30d）双份配对血清用于阐明和分析EV71和CVA16感染后IgG和IgM抗体的动态变化，评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。

静脉采集3-5ml全血，置于真空无菌采血管中，自凝后，分离血清，将血清移到2ml外螺旋的血清保存管中，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

将血清置于-20℃以下冰箱中冷冻保存。

（四）疱疹液。

在手足口病的实验室诊断中，从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因，可同时采集多个疱疹作为一份标本。

先用75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒，然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液，迅速将棉签放入内装有3-5ml保存液（含5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。

所采集标本4℃暂存立即（12h内）送达实验室，－20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于－70℃冰箱。