CIK细胞对结肠癌SW620和LOVO细胞株的杀伤作用观察
CIK细胞对肿瘤细胞长时间细胞毒性的研究的开题报告
CIK细胞对肿瘤细胞长时间细胞毒性的研究的开题报告1.研究背景CIK(cytokine-induced killer)细胞是一种重要的免疫细胞,它由外周血中的单核细胞(PBMCs)经过体外活化和扩增而获得。
CIK细胞可识别并消灭多种肿瘤细胞,具有广泛的杀伤范围和较长的细胞毒性持续时间,因此被广泛应用于肿瘤免疫治疗中。
然而,在临床应用中,CIK细胞对肿瘤细胞长时间的细胞毒性仍存在一定的不确定性。
因此,深入探究CIK细胞对肿瘤细胞长时间细胞毒性的机制,对于优化临床应用方案,提高肿瘤治疗效果具有重要意义。
2.研究目的本研究旨在探究CIK细胞对肿瘤细胞长时间细胞毒性的机制,揭示CIK细胞的杀伤作用持续时间和杀伤细胞数量的关系,并为优化CIK细胞在肿瘤治疗中的应用提供理论依据。
3.研究内容和方法本研究将采用以下方法进行实验:3.1 CIK细胞的制备使用外周血中的单核细胞(PBMCs)经过体外活化和扩增得到CIK 细胞。
3.2 肿瘤细胞的培养选择常见的肿瘤细胞株进行培养,包括HepG2、MCF-7和HCT116等。
3.3 细胞毒性实验将CIK细胞与不同浓度的肿瘤细胞共同培养,并进行时间依赖的细胞毒性实验,观察杀伤作用和持续时间。
3.4 细胞周期和凋亡分析利用细胞周期分析和流式细胞术,确定CIK细胞对肿瘤细胞的作用机制,如细胞周期的阻滞和凋亡的诱导等。
4.研究意义和预期结果本研究将为探索CIK细胞在肿瘤治疗中的应用提供新的实验数据和参考依据,提高CIK细胞在长时间细胞毒性作用方面的效果。
预期结果包括:a)研究肿瘤细胞和CIK细胞的时间依赖性杀伤作用关系;b)确定CIK细胞的杀伤机制、活性和杀伤作用持续时间;c)为深入研究CIK细胞杀伤肿瘤的机制和促进其临床应用提供新的实验数据和理论依据。
5.研究的可行性和风险本研究采用体外培养法,实验操作简单易行,成本低并易于控制。
同时,肿瘤细胞和CIK细胞均为体外培养,不存在对人体的伤害和风险。
CIK细胞实验研究及治疗肿瘤的临床疗效观察
CIK细胞实验研究及治疗肿瘤的临床疗效观察施玲燕;刘继斌;刘晓玲;徐鸣【期刊名称】《肿瘤基础与临床》【年(卷),期】2009(22)2【摘要】目的研究CIK细胞体外增殖特性及对CIK细胞治疗肿瘤的临床疗效观察.方法提取外周血的PBMC,第0天加入IFN-γ,第1天加入IL-2、抗CD3单抗和IL-1培养CIK细胞,用流式细胞仪进行表型测定,并与LAK细胞进行比较;静脉输注CIK细胞对43例肿瘤患者进行治疗.结果体外培养5 d后,CIK扩增倍数明显高于LAK细胞,表型分析发现CIK细胞中杀伤作用细胞CD8和CD3+CD56+的比例分别为70.9%和36.9%,LAK细胞为50.6%和1.63%,CIK细胞治疗肿瘤的总有效率为32.6%;治疗过程中的主要毒副反应是发热,占治疗总人数的20.9%.体温37.5~38.5℃,发热在2 h内自动缓解.结论 CIK细胞治疗肿瘤是一种安全有效的方法.【总页数】3页(P141-143)【作者】施玲燕;刘继斌;刘晓玲;徐鸣【作者单位】南通大学附属肿瘤医院生物治疗中心,江苏,南通,226361;南通大学附属肿瘤医院生物治疗中心,江苏,南通,226361;南通大学附属肿瘤医院生物治疗中心,江苏,南通,226361;南通大学附属肿瘤医院生物治疗中心,江苏,南通,226361【正文语种】中文【中图分类】R730.54【相关文献】1.CIK细胞体外实验研究及治疗肿瘤的临床疗效 [J], 朱寿兴;朱建平;徐鸣;汝美华2.CIK细胞免疫治疗肿瘤患者对其血清LDH、ADA水平的影响分析 [J], 王萌;许晓群;3.CIK细胞免疫治疗肿瘤患者对其血清LDH、ADA水平的影响分析 [J], 王萌;许晓群4.CIK细胞免疫治疗肿瘤患者对其血清LDH、ADA水平的影响分析 [J], 王萌;许晓群;5.CIK细胞联合益气养血汤治疗肿瘤晚期气虚证疗效观察 [J], 王巍;何春霞因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
CIK细胞免疫疗法是怎么杀死肺癌细胞的
CIK细胞免疫疗法是怎么杀死肺癌细胞的?CIK细胞免疫疗法是目前较为尖端的生物技术,CIK是细胞因子诱导的杀伤细胞,也就是说可以杀灭癌细胞,但是CIK对癌细胞的“杀伤”作用可是表现在多方面的,那么,究竟CIK细胞免疫疗法是怎么杀死肺癌细胞的呢?下面我们一起去探索一下CIK对肺癌细胞的杀伤机制吧。
CIK细胞免疫疗法是怎么杀死肺癌细胞的?在肺癌的治疗方法中,肺癌的CIK免疫细胞生物治疗越来越多的受到国内外医学界的广泛重视,并逐渐发展成为继手术、放疗、化疗后的第四模式。
其安全、有效、无毒副作用、明显改善患者生命质量的优势为癌症患者带来了新希望。
CIK对肺癌细胞的杀伤作用主要通过以下几个途径达到:1、自然杀伤。
通过释放颗粒酶、穿孔素裂解靶细胞,这是CIK 细胞杀伤靶肿瘤细胞的主要机制;2、炎性细胞因子作用。
体内活化的CIK细胞可分泌多种细胞因子如干扰素γ、肿瘤坏死因子和白介素2等,不仅对肿瘤细胞有直接抑制杀伤作用,而且还可通过调节免疫系统间接杀伤瘤细胞;3、 CIK细胞表达FasL(Ⅱ型跨膜糖蛋白)通过与肿瘤细胞膜表达的Fas(Ⅰ型跨膜糖蛋白)结合,诱导肿瘤细胞凋亡。
CIK细胞回输后可以激活机体免疫系统,通过增强T细胞功能起作用,提高机体的免疫功能,是目前所知的杀伤活性最强的免疫效应细胞。
北京治疗癌症比较好的医院是哪家?解放军261医院是癌症患者的放心之选。
解放军261医院采用以细胞免疫疗法为核心对癌症患者采取综合征治疗。
这一综合疗法避免了放、化疗的毒副作用及手术的创伤,是一种安全有效的疗法。
北京解放军261医院拥有的先进医疗设备、精湛的医疗技术及优质的医护服务能够切实的使癌症患者受益。
细胞因子诱导杀伤_CIK_细胞的大容量扩增与杀伤活性观察
细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞的大容量扩增与杀伤活性观察石永进 虞积仁 岑溪南 朱 平 马明信(北京大学第一医院血液学研究室,北京 100034) 摘要 建立大容量细胞因子诱导杀伤(Cy tokine-induced killer,CIK)细胞培养方法,观察CIK细胞回输后对患者细胞免疫功能的影响。
采用1000ml培养袋大量扩增患者自体CIK细胞,用M T T法检测CIK细胞杀伤活性,比较回输前后患者外周血单个核细胞(PBM N C)对靶细胞的杀伤活性及其毒副作用。
结果表明:大容量培养法使自体CIK细胞扩增总量达1.6×1010以上,回输CIK细胞使患者PBM N C的杀伤活性明显增加,未出现毒副作用。
因此CIK细胞大容量扩增方法在治疗肿瘤微小残留病变上有着良好的临床应用前景。
关键词 细胞因子诱导杀伤细胞 大容量扩增 自体回输Large-Capacity Expanded Cytoline-induced KillerCells and Its Cytotoxic ActivityShi Yongjin Yu Jiren Cen Xinan Zhu Ping Ma Mingxin(Deartment of H ematology,Fir st H osital,Beij ing Univ ersity,B eij ing 100034) Abstract T his st udy w as conducted to estabilish t he larg e-capacity culture methd o f cy tokine-induced killer (CIK)cells for clinical therapy and assess its effect on the fuction o f cell-mediat ed immunity follow ing autolog ous CIK cells r einfusion.A utolog us CIK cells w er e ex panded in1000ml cluture-bag and r einfused back.T he M T T metho d w as used to t est the cy to tox ic activ ity of CIK cells bef or e a nd after reinfusio n.T he results sho wed that the to tal amount of autolog ous CI K cells r einfusion ex ceeded1.6×1010w it h the use of the cult ur e met ho d of larg e-capac-ity.T he P BM NC fr om patients tr eated by CIK cells sho wed significa nt incr ease in cy toto x ic act ivity,no side effects w ere o bser ved,and therefo re t he lar ge-capacity cultur e method of CIK cells is a simle and safe ther apy fo r tr eating the minim um r esidue o f diseases. Key words Cy tokine-induced killer cells L ar ge-ca pacit y ex panded A uto lo go us r einfusion1 引 言动物实验结果表明,细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞体内抗肿瘤活性明显强于LAK细胞[1],接种CIK细胞的荷瘤小鼠生存期均获延长,其中30%长期存活,而对照组及接种LAK细胞的荷瘤小鼠无长期存活[2],提示CIK细胞可能具有更高的临床应用价值。
CIK细胞对结肠癌移植瘤小鼠HIF-1a、T细胞亚群影响研究的开题报告
CIK细胞对结肠癌移植瘤小鼠HIF-1a、T细胞亚群
影响研究的开题报告
研究背景:
结肠癌是一种常见的消化系统肿瘤,其发生和发展与多种因素密切
相关,包括环境、基因、生活习惯等。
虽然目前结肠癌的治疗手段有所
进步,但其预后仍然不佳。
因此,寻找新的治疗方法对结肠癌的治疗至
关重要。
CIK细胞是一种免疫细胞,其具有杀伤肿瘤细胞的能力。
因此,CIK 细胞在肿瘤治疗中被广泛应用。
然而,为了促进免疫细胞的活性,对肿
瘤微环境影响的研究变得愈发重要。
研究内容:
本研究旨在探讨CIK细胞对结肠癌移植瘤小鼠HIF-1a、T细胞亚群
的影响。
具体研究内容包括:
1. 制备结肠癌移植瘤小鼠模型。
2. 分离CIK细胞,实现体外扩增。
3. 将CIK细胞移植入结肠癌移植瘤小鼠体内,观察其对肿瘤的影响。
4. 检测肿瘤组织中HIF-1a的表达情况以及T细胞亚群的变化。
5. 分析CIK细胞对结肠癌移植瘤小鼠免疫系统的影响及其可能的机制。
研究意义:
本研究将有助于探索CIK细胞在治疗结肠癌方面的应用价值,同时
为研究CIK细胞对肿瘤微环境影响的机制提供新的思路。
此外,本研究
还有助于深入了解肿瘤微环境对肿瘤生长发展以及免疫治疗的影响,为
进一步提高肿瘤治疗效果提供理论基础。
CIK细胞治疗中晚期妇科肿瘤临床疗效观察与护理
CIK细胞治疗中晚期妇科肿瘤临床疗效观察与护理施玲燕;刘继斌【期刊名称】《黑龙江医学》【年(卷),期】2010(034)008【摘要】目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK 细胞)过继免疫疗法治疗中晚期妇科肿瘤的临床效果与护理措施.方法参照美国斯坦福大学骨髓移植中心CIK细胞培养方法,诱导扩增CIK细胞,培养14 d后,分次回输给患者,观察治疗效果.结果在32例接受CIK细胞治疗的中晚期妇科肿瘤患者中,总缓解率为87.5%,随访1年生存率为90.6%,2年生存率为81.3%,3年生存率为75.0%.临床症状治疗前、后有明显改善(P<0.05);生存质量卡氏评分增高率为78.1%;肿瘤标志物CA199治疗前后有显著性差异(t=3.95,P<0.05);体重多数有增加;少数有发热反应,大多在38.5℃以下.结论 CIK细胞治疗为中晚期妇科肿瘤患者提供了一种可以继续延长生存期,提高生活质量的新的途径.合理的护理工作是良好疗效的重要保证.【总页数】3页(P636-638)【作者】施玲燕;刘继斌【作者单位】南通大学附属肿瘤医院生物中心,江苏,南通,226361;南通大学附属肿瘤医院生物中心,江苏,南通,226361【正文语种】中文【中图分类】R473【相关文献】1.Retronectin诱导自体CIK细胞联合IFN-α治疗中晚期肝癌的护理 [J], 范瑞华;杨茂君;徐本玲;张旭华;高全立2.重组纤维蛋白诱导自体CIK细胞联合干扰素-α治疗中晚期肝癌的护理 [J], 李春梅3.CIK细胞治疗中晚期妇科肿瘤的临床观察 [J], 刘晓玲;施玲燕;刘继斌4.DCs-CIK细胞联合化疗治疗中晚期恶性肿瘤的临床疗效观察 [J], 曹宇华;邱想英;冯国生;林辉;谭祥干5.CIK细胞治疗中晚期妇科肿瘤临床疗效察与护理 [J], 陈莉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
自体CIK细胞对晚期结肠癌患者免疫功能的影响
自体CIK细胞对晚期结肠癌患者免疫功能的影响芦兰;艾立清;师幸伟;谢君【摘要】Objective To investigate the effect of CIK cells influence on immune function in patients with advanced colorectal cancer. Methods 37 patients with advanced colon cancer patients before and after treatment treatment group ) and 40 non-cancer patients ( control group ) CIK immune phenotype and T lymphocyte rDNA transcription activity were tested. Results CD3 + , CD4 + , CD4 + /CD8 + , CD19 , NK and T lymphocyte rDNA transcription activity before CIK treatment were lower than the control group( P <0. 05 ); the above phenotype and T lymphocyte rDNA transcription activity after treatment were higher than before treatment(P <0.05 );CD8+ among the three groups had no significant difference( P >0.05 ). Conclusion The immune function is low in advanced colorectal cancer patients. The CIK cells can improve and enhance the immune function of the patients, and has a good application prospects.%目的探讨细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞对晚期结肠癌患者免疫功能的影响.方法检测37例晚期结肠癌患者(治疗组)治疗前后和40例非肿瘤患者(对照组)CIK免疫表型及T淋巴细胞rDNA转录活性的变化,并进行比较.结果治疗前患者CD3 +、CD4 +、CD4 +/CD8 +、CD19、自然杀伤细胞和T淋巴细胞rDNA转录活性均低于对照组(P<0.05);治疗后以上免疫表型和T淋巴细胞rDNA转录活性高于治疗前(P<0.05);三组间CD8 +比较差异无统计学意义(P>0.05).结论晚期结肠癌患者免疫功能低下,CIK细胞能改善和提高患者免疫功能,具有良好的应用前景.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2013(019)006【总页数】3页(P1136-1138)【关键词】细胞因子诱导的杀伤细胞;晚期结肠癌;T细胞亚群【作者】芦兰;艾立清;师幸伟;谢君【作者单位】长江航运总医院肿瘤科,武汉,430000【正文语种】中文【中图分类】R730.54;R735.3结肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,居胃肠道肿瘤第3 位,Ⅳ期结肠癌患者5 年生存率仅为8. 1%,针对Ⅳ期结肠癌患者放化疗效果差、不良反应大,患者往往不能耐受,目前尚无有效的治疗手段。
CIK 细胞因子诱导的杀伤细胞的研究进展
CIK 细胞因子诱导的杀伤细胞的研究进展cik细胞因子诱导的杀伤细胞的研究进展细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)是一种非MHC限制的高效细胞毒性T细胞。
1986年,拉尼尔首次发现了这种细胞(CD3+CD56+细胞)。
外周血淋巴细胞中CD3+CD56+细胞的比例为1%~5%。
经过大量扩增,具有肿瘤杀伤活性。
它是最新最有效的肿瘤免疫治疗手段。
现将近年来CIK的研究进展综述如下。
1cik的来源1.1cik亚型早在1986年,Lanier等人就观察到CD3+T细胞同时表达CD56,即CD3+CD56+T细胞群。
根据细胞受体(TCR)+αβT细胞和CD3+CD56+γδT细胞的不同,这些双阳性T细胞进一步分为CD3+CD56两个亚群。
人cik在肝脏中最多[占肝内t细胞的(23.6±4.1%)],其次为外周血(<5%),但在人的骨髓细胞中至今未发现cik存在,说明人体具有天然杀伤细胞表面标志的t细胞在肝脏与骨髓是不同的细胞系。
关于人cik的起源目前尚未完全清楚,从一些健康供者的去单核细胞的外周血淋巴细胞[m(-)pbl]中加入il.2与il.12,可诱导出cd4+cd56+αβt细胞,提示cik可以被归入原始t细胞。
白细胞介素-白细胞介素(白细胞介素,简称白细胞介素,是指白细胞或免疫细胞之间相互作用的细胞因子。
它与血细胞生长因子属于同一种细胞因子。
它们相互协调和相互作用,共同完成造血和免疫调节的功能。
白细胞介素传递信息,激活和调节immune细胞介导T细胞和B细胞的活化、增殖和分化以及炎症反应,在免疫调节中起重要作用。
白介素2(il-2)分子量为1.5万的糖蛋白,对t细胞激活及生长有作用。
il-2主要由cd4+和cd8+t细胞产生,il-2主要以自分泌或旁分泌方式发挥效应。
不同种属间,il-2沿种系谱向上有约束性,向下无约束性。
il-2是参与免疫应答的重要细胞因子,并参与抗肿瘤效应和移植排斥反应。
CIK细胞治疗消化系统肿瘤患者的效果观察和护理体会
CIK细胞治疗消化系统肿瘤患者的效果观察和护理体会(四川成都市龙泉驿区疾病预防控制中心四川成都610100)目的探讨采用CIK细胞对消化系统肿瘤患者进行免疫治疗的临床疗效以及护理体会。
方法选取我院在2010年10月-2012年10月期间收治的78例消化系统肿瘤患者,所选取的患者采取CIK细胞进行免疫治疗以及相应的心理护理,在治疗期间对CIK细胞的制备,治疗中以及治疗后患者的不良反应进行详细的记录,并对患者在出院之后的疗效进行随访。
结果78例患者中,胆囊癌3例,其中有近期疗效的患者2例;肝癌4例,其中有近期疗效的患者3例;胰腺癌5例,其中有近期疗效的患者3例;食管癌2例,在治疗之后症状都明显改善。
在采用CIK细胞治疗的16例直肠癌、28例结肠癌、20例胃癌患者中,治疗的近期有效率为71.8%、65.6%和77.9%。
患者大部分都可以积极的配合治疗,取得了较好的临床疗效。
结论采用CIK细胞对消化系统肿瘤患者进行免疫治疗具有较好的临床疗效,而且没有明显的不良反应,是一种有效的治疗手段,值得在临床上进行推广。
标签:CIK细胞;消化系统肿瘤;治疗效果;护理体会Abstract:Objective To investigate the clinical efficacy of CIK cells immunotherapy in patients with tumors of the digestive system as well as nursing experience. Methods From October 2010 -2012 October 78 patients with digestive cancer patients, selected patients to take CIK cells immunotherapy and psychological care, preparation of CIK cells during treatment, treatment and adverse reactions in patients after treatment detailed records of the patients were followed up after discharge treatment.Results Of the 78 patients, three cases of gallbladder cancer, which have a short-term effect of 2 patients; 4 cases of liver cancer, which have a short-term effect of the 3 patients; 5 cases of pancreatic cancer, which have a short-term effect of the 3 patients; esophageal cancer Example symptoms significantly improved after treatment. CIK cell therapy of 16 patients with rectal cancer, 28 cases of colon cancer, 20 patients with gastric cancer, treatment response rate was 71.8%, 65.6% and 77.9%, respectively. The majority of patients can actively cooperate with the treatment, and achieved good clinical efficacy. Conclusion s CIK cells immunotherapy has good clinical efficacy in patients with tumors of the digestive system, and no significant adverse reactions, is an effective treatment, it is worth to promote clinical.Key words:CIK cells;digestive system tumors;therapeutic effect;nursing experience1资料与方法1.1一般资料选取我院在2010年10月-2012年10月期间收治的78例消化系统肿瘤患者,所选取的患者采取CIK细胞进行免疫治疗,共治疗129次。
cik细胞治疗有什么好的作用
如对您有帮助,可购买打赏,谢谢cik细胞治疗有什么好的作用导语:随着社会的发展,现在的医疗设备方面也是发展的越来越好了。
治疗不一样的疾病都是有着独特的方式的,同样对于抗癌方面也是不断地进步,其中随着社会的发展,现在的医疗设备方面也是发展的越来越好了。
治疗不一样的疾病都是有着独特的方式的,同样对于抗癌方面也是不断地进步,其中大家不了解的就是关于cik细胞这个对于治疗抗癌方面的介绍,下面就去一起大概了解下也是帮助很大的,希望通过阅读下面的内容,对患者能够有所帮助。
CIK细胞,即细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-Induced Killer,CIK)是一种新型的免疫活性细胞,CIK增殖能力强,细胞毒作用强,具有一定的免疫特性。
由于该细胞同时表达 CD3 和 CD56 两种膜蛋白分子,故又称为 NK 细胞(自然杀伤细胞)样T 淋巴细胞,兼具有T 淋巴细胞强大的抗瘤活性,和NK 细胞的非MMC 限制性杀瘤优点。
该细胞对肿瘤细胞的识别能力很强,如同“ 细胞导弹” ,能精确“ 点射” 肿瘤细胞,但不会伤及“ 无辜” 的正常细胞。
尤其对手术后或放化疗后患者效果显著,能消除残留微小的转移病灶,防止癌细胞扩散和复发,提高机体免疫力,因此, CIK 细胞被认为是新一代的肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。
通过抽取患者少量外周血,使用高速离心机分离出单个核细胞,在体外(模拟人体内环境),加入多种细胞因子培养28-30天,CD3+和CD56+细胞迅速增多,较培养前升幅可达1000倍以上。
1、CIK细胞可以直接杀伤肿瘤细胞:CIK细胞可以通过不同的机制识别肿瘤细胞,释放颗粒酶/穿孔素等毒性颗粒,导致肿瘤细胞的裂解。
2、CIK细胞释放的大量炎性细胞因子具有抑瘤杀瘤作用:体外培养预防疾病常识分享,对您有帮助可购买打赏。
CIK细胞配合二线化疗治疗晚期肺癌的疗效分析
CIK细胞配合二线化疗治疗晚期肺癌的疗效分析王春娜【期刊名称】《中国实用医药》【年(卷),期】2018(013)002【摘要】目的分析细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞配合二线化疗治疗晚期肺癌患者的临床效果.方法 104例晚期肺癌患者,随机分成实验组和对照组,每组52例.对照组患者采用二线化疗方法进行治疗,实验组患者在对照组基础上使用CIK细胞进行联合治疗.比较两组患者治疗前后T细胞群改善情况及不良反应发生情况.结果治疗前,两组患者CD3+、CD56+、CD4+、CD4+/CD8+比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,实验组患者CD3+、CD56+、CD4+、CD4+/CD8+均高于本组治疗前,且实验组高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).实验组患者白细胞减少发生率为11.5%、胃肠不适发生率为19.2%、血红蛋白降低发生率为11.5%,均低于对照组的28.8%、38.5%、28.8%,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论采用CIK细胞配合二线化疗治疗晚期肺癌患者,疗效显著,安全性高,值得临床大力推广.【总页数】2页(P1-2)【作者】王春娜【作者单位】014000 内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院呼吸内科【正文语种】中文【相关文献】1.CIK细胞联合二线化疗治疗晚期肺癌的临床效果观察 [J], 曾辉;宋文玲;韩蓉;张曼;程丽萍;杨媛2.CIK细胞配合化疗治疗转移性乳腺癌患者的效果及安全性研究 [J], 董南;吴红卫;沈玉静;张莹;赵丽丽3.平消胶囊配合化疗治疗中、晚期肺癌疗效分析 [J], 梁长青4.MWA联合化疗治疗中晚期肺癌患者的近远期疗效分析 [J], 王玉璜;钱昌顺;陈仕林;张秀明;盛浏丽;刘念龙5.DC-CIK细胞联合全身静脉化疗治疗晚期结直肠癌伴弥漫性肝转移临床疗效分析[J], 刘光艺;李洋;陈振海;陈雷因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
综合护理干预配合肿瘤患者细胞免疫(CIK)治疗的观察体会
综合护理干预配合肿瘤患者细胞免疫(CIK)治疗的观察体会发表时间:2014-12-11T09:29:15.140Z 来源:《医药前沿》2014年第22期供稿作者:吴丽颖郑亚娜池燕平沈秋燕[导读] 自体细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)是目前临床继手术及放化疗之后治疗恶性肿瘤的有效方法。
吴丽颖郑亚娜池燕平沈秋燕(福建省肿瘤医院第一日间 350014)【摘要】目的探讨细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞免疫治疗肿瘤患者的综合护理效果。
方法收集2010年1月至2013年12月期间,我院收治的中晚期肿瘤患者82例,随机分为观察组与对照组,各41例。
两组均予以CIK细胞免疫治疗,对照组实施常规护理,观察组实施综合护理干预,比较两组的临床疗效。
结果观察组的不良反应率为9.76%,显著低于对照组的26.83%(P<0.05)。
结论细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞免疫治疗肿瘤过程,配以综合护理干预有利降低不良反应率,值得推广应用。
【关键词】肿瘤细胞因子诱导杀伤护理干预【中图分类号】R730.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)22-0014-02生物疗法是目前临床治疗恶性肿瘤的常用手段,其主要是针对患者细胞免疫功能较低时通过强化体内抗肿瘤细胞所具有的免疫功能而实现治疗效果[1]。
自体细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)是目前临床继手术及放化疗之后治疗恶性肿瘤的有效方法,其具有强效杀伤效应,能够显著杀伤肿瘤细胞,对于免疫功能低下患者尤其有效,例如骨髓移植后、放化疗后以及病毒感染损伤免疫细胞者[2]。
本研究对肿瘤患者应用CIK细胞免疫治疗,并配以综合护理干预,获得了显著疗效,现报道如下:1 资料与方法1.1 一般资料收集2010年1月至2013年12月期间,我院收治的中晚期肿瘤患者82例,均确诊为恶性肿瘤,患者均自愿并知情,均签署了知情同意书。
近15d内终止任何放疗或者化疗。
患者随机分为观察组与对照组,各41例。
CIK细胞治疗恶性肿瘤患者免疫功能变化分析研究的开题报告
CIK细胞治疗恶性肿瘤患者免疫功能变化分析研究的开题报告一、研究背景和意义恶性肿瘤是一种常见的、严重危害人类健康的疾病。
虽然目前治疗手段不断更新改进,如化疗、放疗、手术等,但恶性肿瘤的死亡率仍然很高。
因此,寻找更有效、安全的治疗手段是当今恶性肿瘤研究的热点之一。
近年来,CIK细胞治疗成为治疗恶性肿瘤的新方向。
CIK细胞是一种由外周血单个核细胞经特定培养方法诱导、扩增并激活后的免疫细胞,具有杀伤肿瘤细胞的作用,尤其适用于治疗晚期肿瘤和复发转移性肿瘤。
目前,CIK细胞治疗已广泛应用于肝癌、胃癌、肺癌等多种恶性肿瘤的治疗中,并取得了良好的疗效。
然而,CIK细胞治疗后患者的免疫功能变化以及其对治疗效果的影响还有待进一步的研究。
本研究旨在通过对CIK细胞治疗后恶性肿瘤患者免疫功能变化的分析,探讨CIK细胞治疗的免疫学机制、疗效评价和临床应用价值,为进一步提高CIK细胞治疗恶性肿瘤的疗效提供科学依据。
二、研究内容和方法本研究将选择一定数量的恶性肿瘤患者,以CIK细胞为治疗手段,观察治疗后患者的免疫功能变化情况,并进行相关分析。
具体研究内容和方法如下:1、对象选择选择肝癌、胃癌、肺癌等常见恶性肿瘤的患者,包括手术切除后和手术切除后合并化疗的患者。
排除免疫功能紊乱、化疗前存在严重并发症、自身免疫性疾病等相关因素的患者。
2、CIK细胞治疗通过外周血采集和特定的培养方法制备CIK细胞,并给予CIK细胞治疗,按照个体化精准治疗方案进行,治疗持续时间为2~4周。
3、免疫学检测治疗前后分别检查患者的血清学指标、免疫细胞亚群、免疫细胞功能、细胞因子水平等免疫学指标,观察治疗前后免疫功能变化情况,并与对照组进行比较分析。
4、统计学分析通过对实验数据的统计学分析,得出CIK细胞治疗对恶性肿瘤患者免疫功能的影响和作用机制;并可以评估CIK细胞治疗在恶性肿瘤治疗中的安全性和有效性。
三、预期成果通过本研究,预期可以探究CIK细胞治疗后患者的免疫功能变化情况,为CIK细胞治疗的免疫学机制和临床应用价值提供科学依据。
CIK 细胞治疗晚期大肠癌的临床研究
CIK 细胞治疗晚期大肠癌的临床研究方慧云;程伟民;李晓玲;季明芳【摘要】目的:观察细胞因子诱导的杀伤细胞( CIK细胞)治疗晚期大肠癌的疗效。
方法经确诊并采用标准治疗方案治疗的晚期大肠癌患者30例作为观察组,取外周血分离单个核细胞(PBMC),体外细胞因子诱导培养CIK细胞,流式细胞仪检测细胞表型,接受CIK细胞免疫治疗。
以30例采用标准治疗方案治疗而未经CIK治疗的晚期大肠癌患者作为对照组。
结果观察组经CIK细胞治疗后检测T淋巴细胞亚群,发现CD3+、CD3+CD4+、CD56+( NK)效应细胞的比例和CD4+/CD8+比值显著上升,CD3+CD56+效应细胞比例下降,无进展生存期为(50.9±10.8)个月,生存期为(62.5±13.8)个月;对照组无进展生存期为(26.2±8.3)个月,生存期为(35.6±10.2)个月,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论经CIK细胞治疗后晚期大肠癌患者免疫功能增强,无进展生存期及生存期延长。
%Objective To investigate the efficacy of cytokine-induced killer ( CIK) cells for advanced colorectal cancer . Methods 30 advanced colorectal cancer patients treated with standard protocol and CIK cells for immunotherapy was the obser -vationgroup,peripheral blood mononuclear cells (PBMC)were isolated and CIK cells were induced and coculture in vitro .The phenotypes changes of CIK cells were identified by flow cytometric analysis .30 patients treated with standard protocol without CIK cells was the control group .Results In the observation group , Detection of T-lymphocyte subsets showed that ratioof effector cells CD3 +、CD3 +CD4 +、CD56 +(NK)and CD4 +/CD8+increased significantly, ratio of effector cells CD3 +CD56 +dropped,progression-free survival was(50.9 ±10.8) months,and survival time was (62.5 ±13.8) months;in the cont rol group,progres-sion-free survivalwas(26.2 ±8.3)months,and survival time was 35.6 ±10.2 months,there had statistical difference (P<0.05).Conclusion CIK is effective for advanced colorectal cancer ,it can improve imune function and prolong progression-free survival and survival of patients .【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】3页(P1008-1009,1012)【关键词】细胞因子诱导的杀伤细胞;晚期大肠癌;免疫治疗【作者】方慧云;程伟民;李晓玲;季明芳【作者单位】528403 中山大学附属中山医院肿瘤研究所;528403 中山大学附属中山医院肿瘤研究所;528403 中山大学附属中山医院肿瘤研究所;528403 中山大学附属中山医院肿瘤研究所【正文语种】中文【中图分类】R735.3+4大肠癌(colorectal cancer,CRC)包括结肠癌和直肠癌,是常见的消化道恶性肿瘤之一,全世界大肠癌的发病率处于恶性肿瘤的第三位[1-2]。
DC-CIK细胞治疗晚期结直肠癌的疗效观察
DC-CIK细胞治疗晚期结直肠癌的疗效观察摘要】目的:探讨树突状细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)细胞治疗晚期结直肠癌的临床效果。
方法:选取2013年12月~2014年12月在我院住院治疗的晚期结直肠癌患者作为实验组,实验组患者采取放化疗联合DC-CIK细胞疗法进行治疗,同时选取2012年12月~2013年12月在我院住院治疗的晚期结直肠癌患者作为对照组,对照组患者采取放化疗治疗,并比较两组患者近期临床效果以及1年无病生存率。
结果:实验组患者其RR和1年生存率分别为68.0%和88.0%,对照组患者RR和1年生存率分别为39.6%和66.7%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:DC-CIK细胞疗法在治疗晚期结直肠癌方面其临床效果明显,该方法可有效提高患者近期生存质量和远期生存率。
【关键词】晚期结直肠癌;树突状细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK);近期临床效果;远期生存率【中图分类号】R735.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)16-0230-02结直肠癌是临床上一种较为常见的恶性肿瘤疾病,是世界第四位致死肿瘤疾病。
近几年来,随着大家饮食习惯变化,结直肠癌疾病的发病率呈现出不断升高的趋势[1]。
目前临床上治疗结直肠癌疾病的首选方法为手术治疗,然而其临床治疗效果不理想。
细胞免疫治疗已经成为治疗癌症的一种重要方法,特别是对晚期结直肠癌患者具有较好疗效。
本文对2013年12月~2014年12月在我院住院治疗的晚期结直肠癌患者采取放化疗联合树突状细胞联合细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)细胞疗法进行治疗,其临床效果较好。
现将其报道如下。
1.资料和方法1.1 临床资料选取2013年12月~2014年12月在我院住院治疗的50例晚期结直肠癌患者作为实验组,同时选取2013年12月~2014年12月在我院住院治疗的48例晚期结直肠癌患者作为对照组。
CIK细胞免疫治疗在晚期恶性肿瘤患者中的疗效观察
CIK细胞免疫治疗在晚期恶性肿瘤患者中的疗效观察摘要:目的:观察CIK细胞免疫治疗在晚期恶性肿瘤患者中的临床疗效。
方法:选取我院收治的晚期恶性肿瘤患者34例,均采取CIK细胞免疫治疗,观察临床疗效。
结果:CIK细胞治疗后T细胞亚群均有改变,差异有统计学意义(P<0.05)。
34例临床疗效有效率为79.4%。
CIK细胞回输中有4例出现发热,10例患者出现乏力、全身肌肉酸痛等症状,1例出现血压升高。
结论:自体的CIK细胞过继性免疫治疗可以改善晚期恶性肿瘤患者的细胞免疫功能,从而提高患者的生活质量。
关键词:CIK细胞免疫治疗;晚期恶性肿瘤;临床疗效【 abstract 】 objective:to observe the CIK cells immunotherapy clinical curative effect in patients with late malignant tumor.Selection methods:our hospital patients with late malignant tumor 34 cases,all adopt immunotherapy CIK cells,to observe the clinical curative effect.Results:the treatment of CIK cells after T cell subgroup has the change,the difference was statistically significant(P < 0.05).34 cases of clinical curative effect of effective rate was 79.4%.CIK cells back to lose in 4 cases of fever,10 patients with symptoms such as fatigue,systemic muscle soreness,1 case of blood pressure.Conclusion:autologous of CIK cells adoptive immunotherapy can improve cellular immune function in patients with late malignant tumor,so as to improve the quality of life of patients.【 key words 】 immunotherapy CIK cells;Late malignant tumor;Clinical curative effect细胞过继性免疫治疗是将具有强大杀瘤活性的免疫细胞在体外扩增后回输给患者的治疗方法,已成为继手术、放疗、化疗后对肿瘤患者进行综合治疗的重要手段[1]。
化疗联合CIK_DC细胞治疗中晚期结肠癌的临床疗效观察 (1)
化疗联合CIK/DC细胞治疗中晚期结肠癌的临床疗效观察倡张洁1,耿杰1,韩正祥2倡,高向阳2(1.徐州医学院2009级肿瘤学研究生,江苏徐州221002;2.徐州医学院附属医院肿瘤科,江苏徐州221002) 摘要:目的 观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)和树突状细胞(DC)联合化疗治疗结肠癌患者的临床疗效。
方法 63例中晚期结肠癌患者随机分为2组:研究组(化疗联合过继免疫治疗组)32例,对照组(单纯化疗组)31例,观察2组患者临床疗效、生活质量、免疫指标的变化。
结果 研究组化疗联合CIK/DC细胞治疗后,总有效率(CR+PR)为65.62%。
对照组单纯化疗后,总有效率为41.94%。
2组之间总有效率的差异有统计学意义(χ2=4.58,P<0.05)。
研究组第1、2年生存率为96.4%、87.3%,对照组第1、2年生存率为91.3%、82.7%,差异无统计学意义(P>0.05)。
研究组治疗后生活质量及免疫功能明显高于对照组(P<0.05)。
结论 化疗联合过继免疫治疗中晚期结肠癌近期疗效好,可明显提高患者的生活质量和免疫功能。
关键词:中晚期结肠癌;树突状细胞;细胞因子诱导的杀伤细胞;过继免疫治疗中图分类号:R735.3+5 文献标志码:B 文章编号:1000-2065(2011)07-0457-03 细胞介导的过继免疫治疗已成为肿瘤患者放、化疗后辅助治疗的重要手段之一,其对于促进患者免疫系统的重建、消除残留病灶及骨髓净化都具有良好效果。
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokin-in-ducedkillercell,CIK)是将人外周血或人脐带血单个核细胞在体外由多种细胞因子诱导而成的对多种肿瘤具有杀伤活性的细胞毒性T细胞,其溶瘤活性具有非MHC限制性[1]。
树突状细胞(DC)是人体内功能强大的主要的抗原递呈细胞,分布于除脑和睾丸以外身体各部的任何组织。
肿瘤患者一般存在功能性的DC缺乏,肿瘤细胞免疫效应细胞发生抵抗导致过继免疫治疗疗效不佳。
CIK细胞的作用机制和研究现状
CIK细胞的作用机制和研究现状CIK细胞治疗肿瘤的作用机制和发展现状姓名:吴建军摘要:CIK细胞是细胞因子诱导的杀伤细胞,它能够同时表达CD3 和CD56 两种膜蛋白分子,[1]既具有T 淋巴细胞强大的杀伤活性,也具有自然杀伤细胞杀伤时的非MHC限制性。
与其他过继性免疫治疗细胞相比,CIK细胞具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、副作用小、对正常骨髓造血的影响轻微等优点,被认为是新一代肿瘤过继免疫治疗的首选方案。
关键词:CIK细胞自然杀伤细胞外周血单个核细胞(PBMC)多重耐药肿瘤细胞非MHC限制性过继细胞免疫治疗恶性肿瘤是危害人类健康的最严重的疾病之一,其死亡率居各种疾病的第2 位, 并且在我国仍呈现出上升趋势。
随着肿瘤对人类生存健康的威胁日益严重,应对肿瘤的治疗模式也发生着日新月异的变化,各种肿瘤治疗的新药物、新技术、新方法层出不穷,其中细胞生物治疗已经初露锋芒,成为肿瘤生物治疗中重要的发展方向。
继淋巴因子激活杀伤细胞(LA K) 、浸润肿瘤淋巴细胞( TIL) 及CD3 单抗激活的杀伤细胞后,细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer ,CIK) 的杀瘤作用日益受到重视。
CIK 细胞最早是1991 年由美国斯坦福大学Schmidt Wolf 等[2] 首次报道,他们发现在多种细胞因子(INF-γ、CD3 单抗、IL-1α和IL-2)的作用下,外周血淋巴细胞可以被定向诱导并大量增殖成为肿瘤杀伤细胞。
由于该种细胞同时表达CD3 和CD56 两种膜蛋白分子,因此具有T 淋巴细胞强大的抗瘤活性和自然杀伤细胞的非MHC限制性杀瘤的优点。
与其他过继性免疫治疗细胞相比,CIK细胞具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、副作用小、对正常骨髓造血影响轻微等优点。
因此, CIK细胞被认为是抗肿瘤过继细胞免疫治疗的新希望。
1CIK细胞治疗肿瘤的优点1.1CIK细胞增值活性高通过INF-γ、CD3 单克隆抗体、IL-1α和IL-2诱导外周血或脐血中的单个核细胞,生成免疫活性更大的CIK细胞,经过2~3周的扩增,CIK细胞的数量可达20~100倍左右,平均增加约25倍。
CIK系列二CIK细胞对结直肠癌患者的临床疗效
CIK系列二CIK细胞对结直肠癌患者的临床疗效自体细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-inducedkillercells,CIK)治疗是肿瘤过继性细胞免疫治疗的一种,具有与细胞毒T淋巴细胞相似的肿瘤杀伤活性,并且不受机体主要组织相容性抗原(MHC)的限制,是目前肿瘤治疗的研究热点之一。
该方法通过对自体免疫细胞进行体外激活和扩增,然后重新回输至患者体内,促使其在体内发挥杀伤肿瘤细胞的作用,具有增殖活性高、杀瘤活性强、杀瘤谱广泛等特点。
临床研究表明化疗联合CIK细胞治疗能显著提高不同阶段肺癌、结直肠癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、肝癌等患者临床疗效、延长生存期、提高近期生存质量,提高化疗期患者体内免疫细胞持续对抗肿瘤的细胞毒性和免疫应答能力,尤其对晚期患者的疗效更佳。
CIK细胞的临床疗效系列:CIK系列一 | CIK细胞对肺癌患者的临床疗效CIK系列二 | CIK细胞对结直肠癌患者的临床疗效CIK系列三 | CIK细胞对乳腺癌患者的临床疗效CIK系列四 | CIK细胞对胃癌患者的临床疗效CIK系列五 | CIK细胞对胰腺癌患者的临床疗效CIK系列六 | CIK细胞对肝癌患者的临床疗效本期:CIK系列二 | CIK细胞对结直肠癌患者的临床疗效根据国际癌症研究机构(IARC)最新癌症数据库GLOBOCAN2020,我国结直肠癌的新发病例已从2015年的38.8万例增加到了2020年的55.5万例,正以每年7.4%的速度增加快速攀升。
中国已成为世界上结直肠癌新发病例最多的国家。
此外,结直肠肿瘤的发病率呈年轻化趋势。
晚期结直肠癌除高强度的化疗及局部治疗外,治疗手段十分有限,且复发转移几率极高,患者生存期短,患者的生活质量也会明显下降,寻找新的有效治疗方案对改善患者预后及生存质量具有十分重要的意义。
CIK细胞治疗是在I临床上应用最广的生物治疗,是采集患者外周血单核细胞,在体外经多种细胞因子诱导和培养后获得的一类具有非主要组织相容性抗原限制性杀瘤活性的免疫细胞,目前已证实对多种恶性肿瘤细胞均有杀灭作用。
结直肠癌细胞应用CIK细胞联合西妥昔单抗的杀伤效应研究
结直肠癌细胞应用CIK细胞联合西妥昔单抗的杀伤效应研究结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,在我国恶性肿瘤发病率中位居第四。
靶向表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的单克隆抗体西妥昔单抗(cetuximab)是目前研究最为广泛的肿瘤靶向抗体治疗药物之一,2004年被FDA批准用于转移性结直肠癌的治疗,虽有一定疗效,但单一的靶向治疗仍存在着局限性,部分使用西妥昔单抗治疗的患者在治疗一段时间后出现耐药,最终导致肿瘤的复发。
目前发现KRAS突变会导致肿瘤细胞对西妥昔单抗的原发性耐药,使用西妥昔单抗的指征被严格限定在KRAS野生型的患者。
约有35% ~40% 结直肠癌患者存在KRAS突变,这部分 KRAS突变患者不能从单独西妥昔单抗治疗中获益。
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)是由外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PB-MC)在体外经多种细胞因子及CD3单抗诱导培养的一群异质性细胞群,包括CD8+T、NK和 NKT细胞等。
CIK作为抗肿瘤过继细胞免疫治疗的方案之一已在临床肿瘤治疗中被广泛应用,有研究报道CIK在结直肠癌治疗中的临床疗效及安全性,但CIK细胞不能长久地对肿瘤细胞进行抑制而疗效有限,CIK细胞与其他抗肿瘤治疗手段联合使用来促进抗肿瘤效应被越来越多的学者所关注。
本课题组前期的研究中发现,NK细胞在联合西妥昔单抗后可通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒(antibody dependent cell mediated cytotoxicity,ADCC)作用对 KRAS 突变及野生型结直肠癌细胞发挥相同的杀伤效应。
本研究通过观察CIK细胞联合西妥昔单抗后对 KRAS突变及野生型结直肠癌细胞株的杀伤效应,探讨 CIK细胞联合靶向治疗抗体在结直肠治疗中的应用。
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C IK细胞对结肠癌SW620和LOVO细胞株的杀伤作用观察要跟东,刘爱民,霍红旗,张 灿,王海东(邯郸市中心医院,河北邯郸056001) 摘要:目的 观察细胞因子诱导的杀伤细胞(C I K细胞)对结肠癌S W620和LOVO细胞株的杀伤作用。
方法 无菌采集健康人和结肠癌患者外周血,诱导制备C I K细胞。
采用流式细胞术检测两者细胞表型。
将健康人、结肠癌患者来源的C I K细胞分别以20∶1、10∶1的效靶比作用于结肠癌S W620、LOVO细胞株,测算杀伤活性。
结果 用健康人来源的C I K细胞处理S W620细胞,效靶比为20∶1时的杀伤活性为80.86%±6.08%,10∶1时为78.00%±7.63%;处理LOVO细胞,效靶比为20∶1时的杀伤活性为86.13%±6.97%,10∶1时为82.15%±6.60%。
用结肠癌患者来源的C I K细胞处理S W620细胞,效靶比为20∶1时的杀伤活性为63.36%±5.26%,10∶1时为65.35%±6.28%;处理LOVO细胞,效靶比为20∶1时的杀伤活性为60.33%±4.09%,10∶1时为55.16%±5.82%。
相同靶细胞和相同效靶比下健康人来源的C I K细胞的杀伤活性明显高于结肠癌来源的C I K细胞(P均<0.05)。
结论 健康人、结肠癌患者来源的C I K细胞对结肠癌S W620、LOVO细胞均有杀伤作用。
健康人来源的C I K细胞对结肠癌S W620、LOVO细胞株的杀伤作用更强。
关键词:大肠肿瘤;结肠癌;细胞因子诱导的杀伤细胞;免疫疗法 中图分类号:R735.3 文献标志码:B 文章编号:10022266X(2011)0620074202 细胞因子诱导的杀伤细胞(C I K细胞)是人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子刺激后获得的一群异质细胞[1,2],其具有增殖速度快,杀瘤活性高,杀瘤谱广的特点。
与其他疗法相比,C I K细胞可以在不损伤机体免疫系统结构和功能的前提下,直接杀伤肿瘤细胞,并可调节和增强机体的免疫功能,特别适用于那些已无手术、放疗、化疗适应证的患者[3,4]。
2006年12月~2010年8月,我们分别制备了健康人和结肠癌患者来源的C I K细胞,观察其细胞表型并将其作用于结肠癌细胞株S W620、LOVO,观察其对结肠癌细胞的体外杀伤活性。
现报告如下。
1 资料与方法1.1 C I K细胞的制备 无菌采集15例健康人和15例结肠癌患者外周血各20m l,肝素钠(20U/m l)抗凝。
用P BS液1∶1稀释,吸管吹打均匀,以2∶1的比例加到淋巴细胞分离液上层,离心(400g,20m in)。
取中间白膜层,置50m l离心管中,用P BS液悬浮细胞,离心(450g,10m in)。
洗涤1次,低速离心(80 g,10m in)洗涤2次。
接种1×106/m l上述细胞于培养瓶中,用加入3%人血浆的P AA淋巴细胞培养基培养,加入1000U/m l I F N2γ,24h后加入1000 U/m l I L22、300U/m l I L21和50ng/m l CD3mAb。
每2~3d半量换液并补加I L22、CD3mAb。
收集健康人和结肠癌患者P BMC和培养2周的C I K细胞,用P BS调细胞浓度为5×106/m l,加入离心管,100μl/管;分别加入CD3+CD56+双标记荧光抗体及阴性对照各10μl,置暗处,4℃标记20m in,P BS洗涤2次,然后用流式细胞仪和F ACS cant oⅡ软件检测细胞表型。
1.2 C I K细胞对S W620和LOVO的杀伤作用检测 将S W620和LOVO(靶细胞)加入96孔板,调细胞浓度为5×104/m l,常规培养。
次日待靶细胞贴壁后再加入C I K细胞(效应细胞)1.0×106/m l,效靶比分别为10∶1和20∶1。
另设靶细胞对照组和单独效应细胞对照组,每组均设3个复孔,37℃、5% CO2孵箱中培养48h后离心(1000r/m in,10m in),弃上清,每孔加二甲基亚砜150μl,振荡溶解10m in 后,用酶标仪570nm处测OD值,计算C I K细胞对S W620和LOVO的杀伤活性。
杀伤活性=[(靶细胞对照组OD值+效应细胞对照组OD值-实验组OD值)/靶细胞对照组OD值]×100%。
1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。
组间比较采用χ2检验。
P≤0.05为差异有统计学意义。
2 结果经14d诱导后,健康人、结肠癌患者来源的C I K细胞表型中CD3+CD56+比例分别为40.01%±0.69%、21.32%±0.26%(P<0.01)。
用健康人来源的C I K细胞处理S W620,效靶比47山东医药2011年第51卷第6期为20∶1时的杀伤活性为80.86%±6.08%,效靶比为10∶1时为78.00%±7.63%;处理LOVO,效靶比为20∶1时的杀伤活性为86.13%±6.97%,效靶比为10∶1时为82.15%±6.60%。
用结肠癌患者来源的C I K 细胞处理S W 620,效靶比为20∶1时的杀伤活性为63.36%±5.26%,效靶比为10∶1时为65.35%±6.28%;处理LOVO,效靶比为20∶1时的杀伤活性为60.33%±4.09%,效靶比为10∶1时为55.16%±5.82%。
相同靶细胞和相同效靶比下健康人来源的C I K 细胞的杀伤活性明显高于结肠癌来源的C I K 细胞(P 均<0.05)。
3 讨论结肠癌具有起病隐匿、病程短、进展快、恶性程度高、生存期短等特点,发现时多属晚期,故临床治疗难度大,患者生活质量差,病死率高,严重危害着人类的生命和健康。
C I K 细胞是患者外周血单个核细胞体外经多种细胞因子共同诱导而获得的一群以CD 3+CD 56+细胞为主的异质细胞群,兼具有T 淋巴细胞的抗肿瘤活性和NK 细胞非MHC 限制性杀瘤活性,且体内外增殖能力强,杀瘤活性强,杀瘤谱广[7]。
输注C I K 细胞对促进患者免疫系统重建、净化骨髓、清楚微小残留病灶以及防止肿瘤的复发和转移等均具有重要的意义。
国内外临床研究表明[8,9],不同来源的C I K 细胞在临床应用中是安全有效的。
C I K 细胞疗法的疗效取决于是否获得足够数量并且具有高效杀伤活性的免疫效应细胞。
本研究结果显示,健康人来源的C I K 与诱导前相比胞体和胞核均增大,胞质增多,胞核密度较大,胞质内可见分泌颗粒,胞膜光滑,未见突起,且细胞体积及集落均较肿瘤患者C I K 大,CD 3+CD 56+细胞百分比较高,对肿瘤细胞株S W 620、LOVO 的杀伤活性亦较强。
我们的研究还表明,源于健康人C I K 细胞和源于癌患者C I K 细胞具有相似的增殖活性,均可有效抑制肿瘤细胞的生长,这种差异说明C I K 细胞适用于肿瘤的过继免疫治疗,对肿瘤的临床治疗具有意义。
另外,C I K 细胞的抗瘤效应对机体免疫系统的结构和功能均不产生影响,在当前对肿瘤特异性抗原了解相对较少的情况下,应用C I K 细胞作为肿瘤手术、放疗、化疗后的辅助治疗,可能有一定的临床意义。
参考文献:[1]秦福丽,张绍林,孙慧.C I K 细胞的特点及临床应用[J ].国外医学:肿瘤学分册,2004,31(11):8242826.[2]陈复兴,刘军权,张南征,等.自身细胞因子诱导的杀伤细胞过继性免疫治疗恶性肿瘤的临床观察[J ].癌症,2002,21(7):7972801.[3]J iang J,Xu N,W u C,et al .Treat m ent of advanced gastric cancer bychemotherapy combined with aut ol ogous cyt okine 2induced killer cells [J ].Anticancer Res,2006,26(38):223722242.[4]L inn YC .Hui K M.Cyt okine .induced killer cells:NK 2like T cellswith cyt olytic s pecificity against leuke m ia [J ].Leuk Ly mphoma,2003,44(3):145721462.[5]朱建平,徐鸣,汝美华.C I K 细胞临床应用中的制度建设探讨[J ].中国医药生物技术,2007,2(3):2262227.[6]鲍锋,徐岩,尹富华,等.C I K 细胞过继免疫治疗中晚期恶性肿瘤的临床研究[J ].辽宁医学杂志,2003,17(4):1872188.[7]Mehta BA,Schm idt 2Wolf I G,W eiss man I L ,et al .T wo pathways ofexocyt osis of cyt op las m ic granule contents and target cell killing bycyt okine 2induced CD 3+CD 56+killer cells[J ].B l ood,1995,86(9):349323499.[8]L inn YC,Hui K M.Cyt okine induced killer cells:NK 2like T cellswith cyt olytic s pecificity against leuke m ia [J ].Leuk Ly mphoma,2003,44(4):145721462.[9]赵明,吴沛宏,曾益新,等.经肝动脉栓塞化疗序贯联合射频消融和细胞因子诱导的杀伤细胞治疗肝细胞癌的随机研究[J ].中华医学杂志,2006,86(26):182321828.(收稿日期:2010211219)・告读者・《山东医药》关于摘要与关键词的说明 论著需附中、英文摘要(包括目的、方法、结果、结论四部分)。
中文摘要300~500字,英文摘要400~500个实词。
英文摘要尚应包括文题、作者姓名(汉语拼音)。
论著、基础研究、临床研究、综述与讲座需标引关键词2~5个,尽量使用美国国立医学图书馆编辑的最新版《I ndex M edicus 》中医学主题词表(MeSH )所列的词。
英文关键词中的缩写词应按MeSH 还原为全称。
57山东医药2011年第51卷第6期。