快速试纸条在转基因水稻和大米检测中的应用
粮油检验粮食中黄曲霉毒素B1检测胶体金快速定量法编制说明
《粮油检验粮食中黄曲霉毒素B1检测胶体金快速定量法》编制说明黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1简写为AFB1)是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物,含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素)。
黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种。
在天然食物中以黄曲霉毒素B1最为多见,危害性也最强,国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。
黄曲霉毒素B1对包括人和若干动物具有强烈的毒性,其毒性作用主要是对肝脏的损害。
黄曲霉毒素B1污染的食物主要是花生、玉米、稻谷、小麦、花生油等粮油食品,且以南方高温、高湿地区受污染最为严重。
目前,GB 2761-2011《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》中对谷物及其制品中黄曲霉毒素B1的最高限量为20μg/kg。
黄曲霉毒素B1的检测方法主要有高效液相色谱法、酶联免疫法、胶体金免疫层析法等,以往利用胶体金免疫快速检测法可对黄曲霉毒素B1样品进行定性分析,适用于阳性样品的初筛,不能准确定量。
本标准项目是通过化学合成法制备黄曲霉毒素B1人工抗原,利用此抗原免疫实验动物制备黄曲霉毒素B1单克隆抗体,基于此原料基础上开发黄曲霉毒素B1快速检测试纸条,再通过胶体金读数仪进行大米、玉米、小麦样品中黄曲霉毒素B1的定量分析。
本标准有助于提高粮食样品检测、监测效率,降低成本,保护环境,保障从业人员健康安全。
1工作简况1.1任务来源及起草单位本行业标准是在2012年12月国家粮食局标准质量中心组织对美国Charm公司开发的ROSA真菌毒素快速定量测试系统进行测试验证,并对验证结果进行专家评审通过的基础上提出并立项。
根据国家粮食局标准质量管理办公室质检办便函[2014]15号文件《关于下达2014年粮油行业标准制定计划的通知》的要求,由湖北省粮油食品质量监测站牵头负责《粮油检验粮食中黄曲霉毒素B1检测胶体金快速定量法》的起草工作。
起草单位成立了标准起草组负责进行本标准的各项工作。
抗虫转基因水稻检测技术研究综述
抗虫转基因水稻检测技术研究综述【摘要】抗虫转基因水稻是通过基因工程技术将具有抗虫性的基因导入水稻中,以提高水稻对害虫的抵抗能力。
针对抗虫转基因水稻的检测技术是确保市场上水稻产品的安全性和合法性的重要手段。
目前主要的检测方法包括PCR技术、ELISA技术和免疫层析技术。
这些技术在抗虫转基因水稻的快速检测和定量分析中起着关键作用。
随着技术的发展,抗虫转基因水稻检测技术已经取得了一定的进展,但仍面临着一些挑战和难题。
未来,需要进一步完善检测技术,提高检测的准确性和灵敏度,同时加强标准化和国际合作,以推动抗虫转基因水稻检测技术的发展,为水稻品质和食品安全做出贡献。
【关键词】抗虫转基因水稻、检测技术、PCR技术、ELISA技术、免疫层析技术、发展现状、未来发展趋势、研究展望1. 引言1.1 研究背景抗虫转基因水稻是通过基因工程技术将抗虫基因导入水稻中,使其具备抗虫能力的一种转基因作物。
随着转基因技术的不断发展,抗虫转基因水稻在农业领域中得到了广泛应用,对提高水稻产量、降低农药使用量、改善生态环境等方面具有重要意义。
随着全球人口的持续增长,粮食安全问题日益突出,水稻作为世界上最主要的粮食作物之一,其产量和质量对人类生存和发展具有重要意义。
由于害虫侵害导致的减产现象在水稻种植中普遍存在,传统的农药防治方式已经不能满足需求。
利用基因工程技术开发抗虫转基因水稻成为解决这一问题的重要途径。
近年来,随着抗虫转基因水稻品种的不断推广和种植规模的扩大,对其检测技术的研究也变得愈发重要。
检测技术的准确性和灵敏度直接影响到抗虫转基因水稻的合理种植和质量控制,对保障粮食安全和生态环境具有重要意义。
对抗虫转基因水稻检测技术进行深入研究和探索具有重要的现实意义和应用价值。
1.2 研究目的研究目的是为了探讨抗虫转基因水稻检测技术的研究现状,总结各种检测方法的优缺点,为进一步提高检测技术的准确性和灵敏度提供参考。
通过对不同检测方法的比较和分析,寻找出更加高效和可靠的检测技术,为抗虫转基因水稻的生产和管理提供科学依据。
转基因食品快速检测试纸的检测原理
转基因食品快速检测试纸的检测原理一、转基因食品快速检测试纸简介概述:托普云农转基因食品快速检测试纸用于快速检测种子或植物叶片等样品中的转基BtCry1Ab/1Ac,灵敏度为1%,整个检测过程只需要10-15分钟,适用于各类企业及检测机构。
大多数转基因植物有可能在耕种、收割、运输、储存与加工过程同时混入食品,不管是要对转基因食品贴示标签,亦或是对转基因与非转基因原料分别进行输送,转基因食品的原料和食品检测都是必不可少的;还有,要区别开来转基因和非转基因食品,对转基因食品进行进行标识,而食品中转基因含量的多少加以限制,更加需要有效准确的基因检测设备与良好的检测技术。
跟随着每个国家转基因标识制度纷纷相继建立和老百姓对转基因产品高度关注度的提高,老百姓对转基因技术的认知度与准确性相继提出了更加严格性的要求,而因此各个转基因检测技术与转基因检测设备更成为了大家研究的热点和探讨的话题,最近十几年来国外的科学研究一直处于前沿,为了促进我国转基因作物相关科技技术研发、推广发展,托普云农也致力于让老百姓对转基因检测技术的现状以及未来发展趋势有较为清晰和全面的认知了解!托普云农专业检测团队采用PCR技术,从分子水平检测农产品、加工原料、成品中的转基因成分,为食品生产加工和流通企业、检测机构、研究院所提供全面快速、简便经济的专业基因检测服务。
为您食品的安全保驾护航!二、转基因食品快速检测试纸仅需30秒转基因现真身在实验室里,托普云农工作人员演示转基因快速检测的过程。
桌上的两个纸袋中,分别装有转基因和非转基因稻谷。
工作人员各取数粒研磨成粉,分别装入两只试管,滴入缓冲液静置,待固体物质沉底后,取出2张转基因检测试纸分别蘸取上面的清液。
30秒后,试纸呈现出不同的标记。
其中1张上、下两条检测线均呈现紫红色,为转基因样本,另外一张仅下检测线呈现紫红色,为非转基因。
“试纸样式、检测原理、使用方法与早孕试纸类似。
”试纸应用双抗体夹心免疫层析原理,如果样本中存在转基因抗原,与试纸上的转基因抗体结合就会使上、下检测线同时显色。
转基因快速检测试纸条的检测原理及使用方法详解
转基因快速检测试纸条的检测原理及使用方法详解一、转基因快速检测试纸条简介概述:随着科技的发展,转基因产品在我们身边并不少见,尤其是转基因粮食,因此为了加强转基因作物种子选育、生产和销售等环节管理,当前农业部建议“充分利用试纸条等快速检测方法,降低成本,扩大监测范围”。
转基因快速检测试纸条作为检测水稻、玉米等农作物种子转基因检测的重要工具,在行业中的应用越来越广泛。
转基因物质属于看不见摸不着的东西,因此通过什么途径将其快速有效地检测出来,是现代人们需要考虑的一个问题,同时由于转基因快速检测的特殊性,要求检测的方法必须简单、快速,而且成本要低,而转基因快速检测试纸条正好符合这些要求,采用转基因快速检测试纸条开展农作物种子转基因检测,不仅可以降低成本,而且适用性广,可以扩大监测范围,在转基因作物实验室研究和试验、品种区域试验和审定、种子生产和销售、产品加工等各重点环节加以监管,有效避免转基因非法扩散所带来的安全隐患。
托普云农转基因快速检测试纸条的模样、原理以及使用方法,基本和早孕试纸雷同,因此其使用方法非常简单,以水稻种子检测为例,首先是取一粒水稻种子,充分压碎,转移到做好标记的提取管中。
加0.5毫升提取缓冲液溶解,盖好提取管的盖子,用力上下震荡提取管20秒~30秒,确保样品与缓冲液充分混匀,静置等待固体物质沉淀在管底,然后插入试纸条,根据其显示的结果进行对比,就可以清楚的知道种子、植株、产品等中是否含有转基因物质。
托普云农转基因快速检测试纸条用于快速检测种子或植物叶片等样品中的转基因 Bt Cry1C,灵敏度为 1%,整个检测过程只需要 10-15 分钟,适用于各类企业及检测机构。
二、转基因快速检测试纸条检测原理:转基因 Bt Cry1C 快速检测试纸应用双抗体夹心免疫层析的原理,样本中的抗原在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体 1 结合,形成抗原-抗体复合物,继续向前方流动和 NC 膜检测线上特异性单克隆抗体 2 的结合形成双抗体夹心复合物。
大米中蛋白质含量的测定
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目的意义:
水稻是重要的粮食作物之一,其品质优劣是值得人们重视的问题。
一个高产水稻品种,往往由于食味差、或营养不丰富,而不受大众的欢迎。
因此,在保证高产的同时,还要改善稻米的品质。
本实验将测定大米品质的几个重要生化指标,为水稻育种提供理论依据。
Ⅰ大米蛋白质含量的测定——考马斯亮兰G —250法
一、原理
考马斯亮G —250是一种染料,在游离状态下呈红色,在465nm 波长处有最大光吸收。
它能与蛋(0~17212(1(2)85%(W/V (3)3三、实验方法
1.标准曲线的制作:
取6只10ml 刻度试管,编号,按下表数据配制牛血清白蛋白标准溶液。
准确吸取上述各管溶液0.1ml ,对应放于另外6支10ml 刻度试管中,加入5ml 考马斯亮兰G-250溶液,盖塞,将试管中溶液给向倒转混合,放置2分钟后,用10mm 光径的比色杯在595nm 波长下比色。
以光密度值为纵坐标,以蛋白质浓度值为横坐标,制作出标准曲线。
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2.样品中蛋白质提取:
(1)准确称取稻米粉0.5克,放入研钵中,加2ml0.1mol/LNaOH ,研磨成匀浆,转入到10ml 离放置30(232分钟,用5ml
(1差。
(2)定容时蒸馏水要沿着管壁缓慢加入,以免产生大量气泡,造成定容不准确,实验也会出现误差。
(3)谷物种子蛋白质主要是谷蛋白和醇溶蛋白,因此,稻米粉蛋白含量应为碱溶性谷蛋白和醇溶性蛋白含量之和。
水稻转基因实验方法与步骤
水稻转基因实验操作方法步骤一、水稻愈伤组织的诱导(一)以水稻幼胚为试材诱导愈伤组织1.消毒:取水稻未成熟种子(灌浆期),按以下步骤消毒:1)用自来水冲洗种子,去掉浮起的瘪谷;2)将种子放入250ml无菌烧杯中(种子数量约占1/3体积),用200ml70%酒精消毒2分钟;(在操净工作台上进行无菌操作)3)加入250ml25%次氯酸钠(NaClO)溶液,同时加数滴吐温-20,浸泡90分钟;4)倒去NaClO溶液,用无菌蒸馏水清洗种子4-5遍。
2.诱导与继代培养:(以下步骤需无菌操作)1)用镊子夹住种子,在无菌滤纸上用钢钩挤出幼胚,置入诱导培养基中;2)操作完毕后封好培养皿(一般保鲜膜),在暗处适温下(25-28℃)培养5天;3)继代培养。
用镊子剥下胚性愈伤组织(去掉芽及膜状物),置入继代培养基中(凸起面向上),暗处适温下(25-28℃)培养3天。
(二)以水稻成熟胚为试材诱导愈伤组织1.消毒:取水稻成熟种子,人工或者机械脱壳,挑选饱满光洁无菌斑的种子,按以下步骤消毒:1)将适量种子放入10ml离心管中(100颗左右),倒入75%酒精消毒2分钟;2)倒去酒精,加入一定量的0.1%升汞溶液,浸泡10分钟;3)倒去次氯酸钠溶液,用无菌蒸馏水清洗种子5-6遍,最后一遍浸泡30分钟。
2.诱导与继代培养:(以下步骤需无菌操作)1)种子放在无菌滤纸上吸干,置入成就胚诱导培养基中,每皿12-14颗;2)操作完毕用封口膜(MicroporeTMSurgicalTape)封好培养皿,在28℃光照培养箱,暗培养培养3周;3)在超净工作台上打开培养皿,用镊子挑取自然分裂的胚性愈伤组织(淡黄色,致密呈球状,去除种子和芽),置入继代培养基中,在28℃光照培养箱,继代培养1周(2周愈伤组织更为松散)。
(如不马上用,需转移至暗处,于22℃继续培养1周)二、农杆菌培养挑取农杆菌单克隆或吸取所保藏的农杆菌菌液100国于4mlYEP(含50mg/lKan和50mg/lStr)培养液中,28℃,250rpm振荡培养20-36h至菌液OD600为0.8-1.0(颜色接近橙黄色)。
转基因大米检测
转基因大米检测一、实验目的(1)通过大米DNA提取、PCR等手段检测我们周边食用大米的转基因情况。
(2)熟练掌握试剂盒提取纯化DNA等方法。
二、实验原理DNA提取纯化:本次实验采用试剂盒法提取大米DNA。
该试剂盒采用可以独特结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取多种植物组织中的基因组DNA。
离心吸附柱中采用的硅基质材料具有高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白。
提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。
该试剂盒的基本原理为CTAB法。
CTAB是一种阳离子去污剂,能从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖,在高离子强度的溶液中与蛋白质和多聚糖形成复合物,不能沉淀核酸。
通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。
RNA可用RNA酶除去,再用上述方法去除残留蛋白质。
PCR检测转基因:根据食品中待测的外源基因核酸序列设计合适引物i,经PCR 反应是待测靶标DNA序列得以扩增放大,最后经凝胶电泳分析靶标PCR产物的有无,从而对食品中是否含有靶标基因序列成分进行判定。
本次实验共设计了4个PCR引物,分别为:蔗糖磷酸合酶(Sucrose Phosphate Synthase)基因预期扩增片段为287bp SPS-F2:ATCTGTTTACTCGTCAAGTGTCATCTCSPS-R2:GCCATGGATTACATATGGCAAGABt基因预期扩增片段为301bpBt-F1:GAAGGTTTGAGCAATCTCTACBt-R1:CGATCAGCCTAGTAAGGTCGTCaMV35S基因预期扩增片段为195bp35S-F1:GCTCCTACAAATGCCATCATTGC35S-R1:GATAGTGGGATTGTGCGTCATCCCNOS基因预期扩增片段为180bpNOS-F1:GAATCCTGTTGCCGGTCTTGNOS-R1:TTATCCTAGTTTGCGCGCTA三、材料及器具器具:PCR仪、DNA提取纯化试剂盒、震荡仪、离心机、离心管、天平、称量纸,称量钥匙四、实验步骤预实验:试剂盒提取纯化大米DNA电泳检测DNA抽提结果,根据电泳结果对抽提方法及用量进行适当调整。
转基因快速检测试纸条的检测原理及使用方法详解
转基因快速检测试纸条的检测原理及使用方法详解一、转基因快速检测试纸条简介概述:随着科技的发展,转基因产品在我们身边并不少见,尤其是转基因粮食,因此为了加强转基因作物种子选育、生产和销售等环节管理,当前农业部建议“充分利用试纸条等快速检测方法,降低成本,扩大监测范围”。
转基因快速检测试纸条作为检测水稻、玉米等农作物种子转基因检测的重要工具,在行业中的应用越来越广泛。
转基因物质属于看不见摸不着的东西,因此通过什么途径将其快速有效地检测出来,是现代人们需要考虑的一个问题,同时由于转基因快速检测的特殊性,要求检测的方法必须简单、快速,而且成本要低,而转基因快速检测试纸条正好符合这些要求,采用转基因快速检测试纸条开展农作物种子转基因检测,不仅可以降低成本,而且适用性广,可以扩大监测范围,在转基因作物实验室研究和试验、品种区域试验和审定、种子生产和销售、产品加工等各重点环节加以监管,有效避免转基因非法扩散所带来的安全隐患。
托普云农转基因快速检测试纸条的模样、原理以及使用方法,基本和早孕试纸雷同,因此其使用方法非常简单,以水稻种子检测为例,首先是取一粒水稻种子,充分压碎,转移到做好标记的提取管中。
加0.5毫升提取缓冲液溶解,盖好提取管的盖子,用力上下震荡提取管20秒~30秒,确保样品与缓冲液充分混匀,静置等待固体物质沉淀在管底,然后插入试纸条,根据其显示的结果进行对比,就可以清楚的知道种子、植株、产品等中是否含有转基因物质。
托普云农转基因快速检测试纸条用于快速检测种子或植物叶片等样品中的转基因B t Cry1C,灵敏度为 1%,整个检测过程只需要 10-15 分钟,适用于各类企业及检测机构。
二、转基因快速检测试纸条检测原理:转基因 Bt Cry1C快速检测试纸应用双抗体夹心免疫层析的原理,样本中的抗原在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体1结合,形成抗原-抗体复合物,继续向前方流动和 NC 膜检测线上特异性单克隆抗体 2 的结合形成双抗体夹心复合物。
水稻转基因系的分子鉴定方法
水稻转基因系的分子鉴定1.目的1.1从T2不同转基因株后代中鉴定得到分离出的纯转基因株、杂合转基因株和非转基因株,为根系和生理学实验提供材料;1.2鉴定纯转基因株中插入T-DNA的拷贝数和插入方式;1.3鉴定纯转基因株中插入T-DNA的插入位置。
2.材料中华11 (CK)H05系列石狩白毛(CK)E10系列WD17系列3.主要试剂和配方3.1 DNA微量提取微量提取液:200mM Tris-HCl(pH7.5250mM NaCl25mM EDTA0.5% SDS酚/氯仿氯仿无水乙醇、70%乙醇TE缓冲液(pH8.0)10mg/ml RNase3.2 Htp的PCR鉴定Taq酶及Buffer 购自Takara公司dNTPs购自华美公司3.3 植物DNA大量提取抽提液: 1.5%CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)75mmol/L Tris-HCl PH8.01M NaCl15mmol/L EDTA沉淀液: 1%CTAB50mmol/L Tris-HCl PH8.010mmol/L EDTA高盐TE: 1mol/L NaCl10mmol/L Tris-HCl PH8.01mmol/L EDTA3.4 Southern杂交Southern杂交液(1×):20×SSC 250 mL5%SDS 5 mL10%Sarkosyl 10 mLddH2O 735 mLBlocking Reagent 5 g洗脱液(1x):20x SSC 10 mL5%SDS 40 mLddH2O 950 mL3.5 RNA提取Trizol: 购自Invitragen公司10×MOPS: 80mmol/L NaAc0.2mol/L MOPS10mmol/L EDTA加DEPC处理的水定容,调pH值至7.0 RNA上样混合物:0.25%溴酚兰0.25%二甲苯菁50%甘油1 mmol/L EDT A1.2%甲醛变性胶(100ml):1.2g grose73ml DEPC水10×MOPBuffer 10 mL2.2M甲醛 6 mL3.6 RT-PCR反转录酶SuperscriptIII试剂盒购自Invitragen公司 PCR所用试剂同前。
米业检验标准操作规程
哈尔滨市双利精米有限公司检验标准和操作规程(2017 版)2017年11 月01日目录前言 (1)QC-JF-001散装稻谷、大米扦样方法 (6)QC-JF-002包装稻谷、大米扦样方法 (7)QC-JF-003稻谷、大米分样方法 (9)QC-JF-004稻谷、大米水分检测方法 (10)QC-JF-005稻谷出糙率、不完善粒、红米检测方法 (12)QC-JF-006稻谷、大米的色泽、气味鉴定方法 (14)QC-JF-007稻谷、大米互混、异种粮粒、异品种检测方法 (15)QC-JF-008容重测定法 (17)QC-JF-009稻谷杂质、谷外糙米、不完善粒检测方法 (18)QC-JF-010黄粒米、爆腰粒检测方法 (22)QC-JF-011大米碎米检验方法 (23)QC-JF-012垩白率、垩白粒率检测方法 (24)QC-JF-013黑粒、部分黑粒、黑头米、损伤粒、红米及红线米检测方法 (25)QC-JF-014新鲜度及新陈度检测方法 (27)QC-JF-015长宽比检验方法 (28)QC-JF-016稻谷、糙米出米率检验方法 (29)QC-JF-017整精米率检验方法 (31)QC-JF-018大米加工精度、留胚率检验方法 (33)QC-SG-009粮油水分测量仪LSKC-4B操作规程 (35)QC-SG-014米麦水分测量仪M999操作规程 (36)QC-SG-019快速粮食水分测量仪PM-499操作规程 (37)前言为了规范工厂内部原料采购过程中的质量指标、检验标准、操作手法等步骤,使采购流程更加规范化,根据工厂内部管理需要并在集合了其他企业良好操作的基础上,现归纳总结出了《哈尔滨市双利精米有限公司检验标准和操作规程(2017 版)》,以期有效指导2017-2019 年度大米采购过程中的质量控制。
在本标准中规定,稻谷采购中需要检验的项目如下:1、年产,新陈度2、水分(直收采用快速水分测定法,非直收采用烘箱水分测定法)3、杂质4、出糙率5、出米率6、整精米率7、黄粒8、异品种9、生芽10、谷外糙11、垩白粒率、垩白度(二者选一)12、其他关注指标:裂纹粒,红线米13、其他指标均以国标等粮为标准。
抗虫转基因水稻检测技术研究综述
抗虫转基因水稻检测技术研究综述抗虫转基因水稻是通过将特定的抗虫基因导入水稻,使其具有抵抗虫害的能力。
为了确保转基因水稻的安全性和环境友好性,对其进行检测是非常重要的。
本文综述了目前常用的抗虫转基因水稻检测技术。
一、抗虫鉴定技术抗虫鉴定是通过观察转基因水稻对虫害的抵抗性来确认其是否为抗虫转基因水稻的方法。
这是最直观的检测方法,但需要大量的时间和劳动力。
二、基因组学方法1. PCR技术PCR技术是一种常用的转基因水稻检测方法。
通过特异性引物,可以扩增出抗虫基因在转基因水稻中的片段。
这种方法能够准确快速地检测出转基因水稻的存在。
2. Southern blottingSouthern blotting是一种基于DNA的电泳分离和转移的技术。
通过使用与抗虫基因相应的DNA探针,可以检测出转基因水稻中抗虫基因在基因组中的存在。
2. ELISA技术ELISA技术是一种常用的免疫学检测方法。
通过使用与抗虫蛋白相应的抗体,可以检测出转基因水稻中抗虫蛋白的含量。
四、转录组学方法转录组学是研究一个细胞或组织中基因转录过程的一种方法。
通过分析转基因水稻和野生型水稻的RNA序列差异,可以检测出转基因水稻中抗虫基因是否被表达和转录。
抗虫转基因水稻的检测技术主要包括抗虫鉴定、基因组学方法、蛋白质组学方法和转录组学方法。
这些方法在检测抗虫转基因水稻中起到了重要的作用,并且随着科技的不断发展和进步,这些方法也在不断完善和优化,提高了检测的准确性和效率。
我们也需要加强对转基因水稻检测技术的研究,以满足抗虫转基因水稻的安全性和环境友好性要求。
转基因检测试剂盒的原理及使用
转基因检测试剂盒的原理及使用可能很多人都有疑问,市面上的商品哪些是转基因农作物,哪些是非转基因农作物?据小编收集资料得出,我国批准种植的转基因作物仅有棉花和番木瓜,批准进口用作加工原料的有大豆、玉米、棉花、油菜和甜菜5种作物。
那么,该如何分辨哪些是转基因产品呢?一般人可能是会通过外观或者口感来分辨,事实上这些方法都是不科学的,专业的检测转基因的方法是使用转基因检测试剂盒,尤其是在对转基因产品的安全评价、身份验证、国内监管、进出口检验、企业自控等,都离不开高效的转基因检测技术的支撑。
托普云农研发生产转基因检测试剂盒具有多种型号,不同的型号具有不同的功能特点,本文就重点介绍一下转基因Cry1C 试剂盒,该仪器也叫转基因植物蛋白浓度测定试剂盒,适用于玉米、棉花、大豆以及其各种农作物中转基因成分的快速定量测试,一起的测定原理及使用注意事项具体如下:一、转基因检测试剂盒原理:转基因Cry1C 试剂盒系用特异性抗Cry1C 单抗包被的微孔板和酶标记抗Cry1C 单抗,双抗体夹心法检测Cry1C 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的Bt-Cry1C 蛋白。
二、转基因检测试剂盒使用注意事项:1、测定中需使用的所有试剂和96 孔板提前30 min 放置室温温育(否则会影响试验准确性),注意12 连管必须温育后再从平板上取下,未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存;2、试剂使用前应充分摇匀;3、摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染;4、使用洗涤液漂洗时,洗涤液需要填满每个小孔,进行充分漂洗;5、研磨好的样品如果不能一次全部测量,可以暂时在4 ℃避光保存,但是最好在24 h 内测定;6、结果判读请在反应终止后15 min 内完成。
以上便是转基因检测试剂盒的原理和使用注意事项,转基因作物对人类的贡献毋庸置疑,规范、严格的监管是这一产业继续高速发展的根本保障,也是促进人们更加正确、客观地认识转基因作物,理性看待转基因技术和转基因食品的前提。
大米中农药残留的光谱快速检测
Lüs e n o n g c h a n p i n我国是粮食产量大国,大米作为重要的粮食作物,在我国大米的种植比率达到五分之二。
大米中蕴含大量的蛋白质和碳水化合物,对人体提供每日所需的能量和营养成分。
但是大米在种植过程中,因为气候、土壤、水分等性质因素的影响,大米易被病虫害所侵蚀,因此在大米的种植上常常喷洒抗病虫农药,致使大米表层农药含量过高,错误喷洒农药会造成种植土壤的污染,导致以后再种植大米等其它农作物产生极强抗药性,对大米的产量造成影响。
一、大米作物中所残留的农药不同地域大米的种植,在农药剂量的应用上,根据土壤的酸碱性和生长条件所决定,因此大米种植技术研究人员应探讨检测大米中农药剂量的科学方法,对于大米的种植应用何种的农药有所区分,从而制定合理的农药检测方法。
首先根据我国农业种植工作的实际情况出发,病虫害一直是农作物种植生产过程中的一个重要问题,因此农户在进行种植的过程中都会采用杀虫剂来用以保证作物的基本产量。
然而这就很容易导致部分杀虫剂残留在大米作物中,而杀虫剂中主要含有拟除虫菊酯、甲基氟磷酸环乙酯等。
那么如何快速准确的检测出大米中是否含有这些化学物质,就是目前农药检测工作中的核心内容,需要进一步引起技术及种植人员的重视。
其次是杀线虫剂,这种农药所蕴含的化学物质与杀虫剂有很大区别,它主要是含有敌敌畏、甲胺磷等。
因此如果在大米中残留这种农药药剂,很容易引起饮食上的安全问题或是健康问题。
因而,广大种植及技术人员必须要正确对待这种农药,合理使用检测技术,及时发现出大米作物是否蕴含这种农药的残留,进一步保障民众的饮食安全。
最后就是杀菌剂与杀鼠剂,这两种农药主要是对于农作物的日常除菌与除鼠害,然而无论是什么样的农药残留都会对人们的身体健康造成很不利的影响。
因而,大米当中是否存在农药的残留已经成为社会各界群众所重点关注的问题。
二、农药残留检测过程中的问题1、检测技术不到位现阶段我国针对大米上残存农药的检测害应用传统的检测技术,在农药检测效率和质量上无法提高,同时引入转基因技术,对大米中农药的检测标准也越来越严格。
鲁中地区糯质谷子品种引种适应性评价
鲁中地区糯质谷子品种引种适应性评价巩法江 李 娜 杨 平 陈昱利 毕海滨 高明慧 王东峰 卓 玛 齐 贵 巩素霞(山东省淄博市农业科学研究院,淄博 255000)摘要:糯质谷子胚乳中直链淀粉含量低,支链淀粉含量高,是加工小米黄酒、小米醋的最佳选材。
为了传承和发扬传统饮食文化,促进谷子产业健康快速发展,更好地助力乡村振兴,依托“特色功能性谷子品种选育及加工利用研究”项目,从全国各农科院所引进收集了19份糯谷种质资源进行了品种适应性试验,以期筛选出优质、高产、抗逆性强、适宜本地区种植的糯质谷子品种。
试验结果表明济糯米2号每667m2籽粒产量为372.69kg,在参试品种中最高,比对照品种豫谷18增产27.53kg,增产率达7.98%;汾特5产量最低,为206.68kg,比对照减产138.48kg,减产率为40.12%。
通过对各参试品种的产量、农艺性状、抗病性、抗逆性等进行综合分析,济糯米2号、济谷18和李渠黑谷表现较好,适宜在鲁中地区推广种植。
关键词:鲁中地区;糯质谷子;适应性评价谷子脱壳为小米,小米主要成分是淀粉,含量在50%~60%之间,由直链淀粉和支链淀粉组成[1]。
研究发现,直链淀粉和支链淀粉的不同比例将直接影响到米饭质地和蒸煮品质[2],直链淀粉比例低,米饭黏性大、柔软、有光泽;支链淀粉亲水基多,能增加小米饭的甜味和黏性[3]。
淀粉结构和性质不仅在一定程度上决定了小米的食品品质,还直接影响加工品质[4]。
谷子的糯和非糯从理化性质上以直链淀粉含量的高低来确定,直链淀粉含量在 2% 以下的为糯谷[5]。
糯谷胚乳中直链淀粉含量低,支链淀粉含量高,米饭柔软、有光泽、黏度大、口感较好[6],而且糯小米比普通小米淀粉分子量小20多倍,食用消化率高20%以上,在国外糯小米有“营养之王”之称[7]。
同时,糯谷也是加工小米黄酒、小米醋及许多传统食品的最佳选材,糯质谷子以其优良的加工性能、高营养价值和高消化速度越来越受到人们的欢迎[8-9]。
转基因大米定量检测TT51
转基因大米定量检测TT51转基因大米定量检测TT51-1品系1.范围本标准规定了稻谷和大米中TT51-1品系的数字PCR定量检测方法。
本标准适用于稻谷和大米中TT51-1品系特异性的数字PCR定量检测。
本方法的定量检测低限(LOQ)为0.1 %(w/w)。
2.规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 19495.1 转基因产品检测通用要求和定义GB/T 19495.2 转基因产品检测实验室技术要求GB/T 19495.3 转基因产品检测核酸提取纯化方法GB/T 19495.5 转基因产品检测核酸定量PCR检测方法GB/T 19495.7 转基因产品检测抽样和制样方法SN/T 1194 植物及其产品转基因成分检测抽样和制样方法3.术语、定义和缩略语3.1 术语和定义SPS基因:Sucrose Phosphate Synthase gene,水稻蔗糖磷酸合成酶基因。
TT51-1转化体特异性序列:Event-specific sequence of TT51-1,外源DNA插入受体水稻基因组后经重组产生的邻接区序列。
Taq酶:Taq DNA polymerase,源于水生栖热菌的耐热DNA聚合酶。
模板:Template, 指数字PCR引物/探针扩增检测的特定DNA片段。
定量检测低限:Limit of quantification(LOQ),在相对标准差不超过25 %的条件下,检测方法所能定量的最低转基因成分百分含量。
质控样品:Quality control sample, 具有确定的SPS基因和转化体特异性序列拷贝数的TT51-1转化体基因组DNA。
微反应体系:Tiny reaction system, 将含有模板、引物/荧光探针、耐热DNA复制酶及其缓冲液充分混匀之后分配至体积相同且相互物理隔离的油包水液滴或其它微孔、微室中所形成的小体积荧光PCR反应体系。
核酸检验试纸的原理和方法
核酸检验试纸的原理和方法核酸检验试纸是一种常用的快速、便捷的检测方法,用于检测核酸的存在和浓度。
它的原理是通过特定的化学反应,将核酸的存在转化为可见的颜色变化或其他信号。
以下将详细介绍核酸检验试纸的原理和方法。
一、核酸检验试纸的原理核酸是由四种碱基(腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶)组成的线性生物大分子。
核酸检验试纸主要依据核酸和染料间的相互作用原理进行检测。
核酸可与染料发生特异性的结合,当细胞核酸检测试纸中染料与核酸结合后,会发生颜色变化。
具体来说,核酸检验试纸的原理包括以下两个方面:1. 染料与DNA结合:核酸检验试纸中的染料分子通常具有亲核性,可以特异性地与核酸的碱基结合,形成染色复合物。
染色复合物的形成会导致试纸颜色发生变化。
2. 阻断作用:核酸检验试纸还可以通过阻断作用实现核酸的检测。
某些试纸上的试剂能够与核酸结合,以阻断其与其他试剂的反应。
二、核酸检验试纸的方法核酸检验试纸通常分为几个步骤,包括样品处理、试纸处理以及结果读取。
下面将详细介绍核酸检验试纸的方法。
1. 样品处理核酸检验试纸适用于各种来源和类型的核酸样品,如细胞提取物、血清、尿液等。
在进行检测之前,需要对样品进行初步处理,以获得纯度较高的核酸。
具体方法包括细胞裂解、酸性醇提取、蛋白酶处理等。
一般而言,核酸提取试剂盒可以提供一站式的样品处理方案。
2. 试纸处理将样品与试纸反应,通常有两种方法:- 带吸管的净化柱法:将样品吸入吸管中,然后通过离心等方式使样品与试纸反应,最后将试纸与核酸样品接触,充分混合。
待染料与核酸结合后,将试纸离心收集染料上清液。
- 直接滴加法:将样品直接滴加到试纸上,使样本与试纸中的试剂发生反应。
3. 结果读取待试纸染料上清液脱色后,通过目测或特定设备进行颜色定量分析或其他信号的测量。
结果的解读通常通过对比样品与对照进行,观察颜色的变化。
三、核酸检验试纸的应用核酸检验试纸可以广泛应用于临床诊断、食品安全、环境监测等领域。
(完整)大米新鲜度检测
(完整)大米新鲜度检测1、目的:大米新鲜与否,会密切影响成品酒的口味与风味及其保质期。
采用此方法把关大米的新陈度。
2、范围:本操作标准适合于检测大米的新陈度.3、相关文件和参考资料:无4、原理:酸度指示剂法:大米经过储存,其内的脂肪酸被脂肪酸酶氧化或水解,分解出游离脂肪酸,使溶液的PH值发生变化。
酸度指示剂在一定PH下呈现不同颜色,随大米氧化程度情况依次呈现绿色→黄色→橙色.愈创木酚法、胚染色法、愈创木酚对苯二胺并用法:利用大米中过氧化氢酶催化过氧化氢,促使过氧化氢放出活性很强的氧,氧化作为氢供给体的愈创木酚生成四愈创醌,从而使其颜色变深,颜色越深,说明大米中过氧化氢酶活性越高,证明大米越新鲜,是利用过氧化氢酶为“载体”来表示大米的新鲜程度.目前用单一的显色方法判断大米的新陈度存在一定的缺陷,各方法都有其适用范围。
但上述方法之间具有互补性,综合采用新鲜度显色体系能克服单一方法的缺陷,提高大米新陈度判定的可靠性.5、环境/安卫因素6、准备:6.1仪器和设备:1-52-56。
6。
2。
1原液:取甲基红0。
1g ,溴百里酚蓝0。
3g 溶于150ml95%乙醇内,加水稀释至200ml 。
6。
2.2使用液:将原液与水按1:50混合作为使用液。
6。
2.3 1%愈创木酚溶液:取1ml 愈创木酚溶于100ml95%的乙醇溶液中 6。
2.4 1%过氧化氢溶液:将浓度为30%的过氧化氢溶液用蒸馏水稀释30倍 6。
2.5 3%过氧化氢溶液:将浓度为30%的过氧化氢溶液用蒸馏水稀释10倍6。
2。
6 2%对苯二胺溶液:称取2克对苯二胺用95%酒精进行溶解,并定容至100ml 。
6。
3标样/控制样无6。
4样品准备:常温下测定 7。
操作: 7。
1设备安装: 无7.2仪器校准: 无7。
3操作程序与关键点提示:7。
4流程图酸度指示剂法测定大米新鲜度操作步骤是是8.数据处理:无9。
异常结果排查:10。
结束/清理:10.1吸管、小烧杯、容量瓶、玻璃棒、培养皿的刷洗:可使用少量清洗剂进行刷洗,自来水、蒸馏水冲洗干净,室温下放置备用。
大米检验中的染色法
1 3 苏丹
#乙醇溶液染色法
表 1 3 GB/ T 5502
1985 苏丹
# 乙醇溶液染色法
仪器与用具
( 1) 天平: 感量 0. 1, 0. 01g; ( 2) 蒸发皿或培养皿; ( 3) 25ml 量杯或量筒; ( 4) 试剂 瓶; ( 5) 烧 杯; ( 5) 电热恒温水 浴锅; ( 7) 玻璃棒等。
溶液与 染色液 苏丹 # 乙醇饱和溶液: 称取 4g 苏丹 试剂 洗液 50% 乙醇
# 溶于 1000ml 乙 醇中即成。
试样制备 从平均样品中称取试样和标样各 20g , 从中不加挑选地数出整米 50 粒, 分别放入两 只烧杯中。
1 染色
加入染色液浸泡米粒, 将烧杯放在 70~ 75 + 电热恒温水溶锅中加温 约 5min, 使米粒着 色。着色后, 取出烧 杯, 倒 出染色液。
2000( 11) . 3~ 6 5 宋国安. 我国调味 品工业 的发 展趋势 及市场 前景[ J] . 中 国调 味
品. 1996( 8) . 5~ 8 6 大田静行. 食品调味论[ M ] . 中国商业出版社. 1989. 247 7 詹沛鑫. 酵母与营养型酵母调味 品[ M ]. 中国食 品出版社. 1992.
7. 2ml, 注入 盛 有 400 ~ 500ml 水的 容 器内 , 然后加水稀释到 100ml 备用。
称取称样和试 样( 从平 均样 品 取) 各 20g, 从 中不 加挑 选地 各数 出整 米 50 粒, 分 别放 入 两个蒸发皿内。
用清水洗去米粒附着的糠粉, 倒出清水。
各注入 0 1% 染色液数毫升, 淹 没米粒, 浸泡 约 205, 米粒着色后, 倒出染色液。
染
色
溶 液
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输、 储藏以及加工等环节的现场检测 , 特别适合大量样品的初 筛, 能有效扩大监测范围, 降低检测成本。 [ 关键词 ] 快速试纸条 ; 转基 因; 实时荧光 P C R; 稻谷
快 速试 纸条在 转基 因水稻 和 大米检 测 中的应用
张 欣, 彭 毛, 刘 波 , 魏 建 林
4 3 0 0 2 1 ) ( 武汉 市粮 油食 品 中 1 5 、 " 检验 站 , 湖北 武汉
[ 摘要 ] 采用快速试纸条法与实时荧光 P C R法检测了大量稻谷 、 大米样品, 比较 2 种检测方法的一致性。 实验
再次结合 , 从而在 线上产生特异颜色 , 而未结合的
反应液和模板组成 , 反应程序为 : ①9 5 ℃, 3 0 m i n ; ② 抗体则与 c线上的二抗结合显色[ ¨] 。 若纸条上仅存 9 5 ℃, 1 5 s ; ③6 0 o C , 1 m i n ; 4 0 个循环[ 。 每个反应重 在 1 条 黑色对 照线 , 便说 明被 检样 品为 阴性样 品 , 若 复 2 次。阈值设置采用默认值 , 阴性对照的 c t 值≥
1 . 3 测 试方 法 1 . 3 . 1 快速检 测试 纸条 法
备价格昂贵 , 对实验室的环境要求较高 , 需要有专业 背景的技术人员操作 。目前 , 国内多数粮食检测机
称取约 3 0 g 样品于搅拌机中, 加入约 1 0 0 m L T J  ̄ ,
构不具备转基因检测所需要的实验室环境 , 几乎所 搅拌机搅拌 5 m i n , 静置 3 0 s 。将上清液倒人一次性 有 的粮食收购点 、 大米加工厂都不具备该项技术的 样品管中, 将快速测试试纸条插人样品提取液中( 提
自 从第一批水稻转基 因植株在 1 9 9 8 年 问世 以
来, 许 多 国家 在 水 稻转 基 因研 究 领 域都 取 得 了一 系 列 的成 果 , 很多转 基 因水稻 品种 已进入 了田间试 验 , 并 不 断地 向实用化 发展 [ ” 。目前 , 国 内转基 因检 测 主
油料作物研究所 ; 搅拌机 : 市售 ; 植物基 因组 D N A提
检测能力 , 因此 , 急 需 建 立 一 种 有 效 的 快 速 检 测 方 法, 用 于水稻及 其产 品在 种植 、 收购 、 运输 、 储 藏 以及 加 工等环 节 的现场 检测 。 试纸 条 检测 的是外 源 基 因表 达 的蛋 白 , 固定 在 取液 不要 没过试 纸 条下 面 的蓝 色线 条 ) , 静置 5 m i n 。
认; 阴性大米样品为市场购买; 阳性大米样品由阳性
稻谷 实验室 自制 ; 快 速检测试 纸 条 : 中国农业 科 学 院
收 稿 日期 : 2 0 1 5 — 0 6 — 1 2
快速试纸条测定为阴性样品 , 实时荧光 P C R法
与 之 比较 , 结果见 表 1 。结果 表 明 , 快速 试 纸条 法测 定结果 为 阴性 样品时 , 同时用实 时荧光 P C R法检测 , 检 测结果 一致 , 准确 性很 高 。
取试 剂 盒及 核 酸检 测 试 剂盒 : 广州 迪奥 生 物科 技 有
限公 司 。 1 . 2 仪器
要是 以核酸为基础的实时荧光 P C R法 , 该法具有检
出 限低 、 准确 、 应 用 范 围广 的特点 , 但 需 要 的仪 器 设
7 5 0 0 型实时荧光 P C R仪: 美国A B I 公司。
观看试纸条 , 若试纸条结果窗上出现 1 条黑线 , 则为 阴性样 品; 若 出现 2 条黑线 , 则为阳性样品。
1 . 3 . 2 实时 荧光 P C R 法
试纸上的能与外源蛋 白特异结合的 N A提 取使 用植物 基 因组 D N A 基 团, 外源蛋 白在毛细管作用下流动与特异性抗体 提取试 剂 盒 。 结 合后形 成 的复合 物可 与含 有特殊识 别 位点 的二 抗 ( 2 ) 荧 光定 量 P C R。荧 光 定量 P C R反应 体 系 由
进 一步 通过 P C R确认 。 用快 速试 纸条 检测 用油脂 抛
光 的 大米 样 品 时 , 有 假 阳性 出现 , 因此 , 检测 大 米 为 阳性 时要 进 一 步通 过 实时 荧 光 P C R法 确认 。
作者简 介: 张欣 , 女, 硕士 , 工程师, 主要从事粮油食 品分析检测工作 。
4 8
张欣等 : 快速试纸条在转基 因水稻和 大米检测 中的应 用 表 1 快速试纸条法与 P CR测定 结果
第 4 0卷 2 0 1 5年 第 5期
荧光 P C R法检测结果为阴性的情况 , 检测结果需要
第 4 0 卷 第 5期
2015 年 1 O月
G 帐食 钟 妓占 任
r a i n S c i e n c e a n d I T e c h n o l o g y{
VoI . 40 . No. 5 Oc t . 2O 1 5
D O I : 1 0 . 1 6 4 6 5 0 . g s t e . e n 4 3 1 2 5 2 t s . 2 0 1 5 0 5 1 3
存 在 2条线 , 便说 明被 检样 品为 阳性 样 品 。
4 0 。做样 品时要 同时做 阴性 对照 , 阳性 对照 , 以确 保
1 材料与方法
1 . 1 试 剂
试验 数据 的有效 性 。
2 结果与分析
2 . 1 阴性样 品 2种方 法测定 结果 比较
转基 因水稻 B T 6 3与非 转基 因水 稻均 源 于 田 间 采 样并 送 中 国农业 科 学 院油 料作 物研究 所进 一 步确