不同胰岛素给药方式对2型糖尿病小鼠血糖、血脂及氧自由基代谢的影响

ｏｂＶｉｏｕｓ ｐｌａｔｅａｕ ｐｈａｓｅ，ｍｅ ｄｏｓｅ．ｒｃｓｐｏｎｓｅ ｃｕｒｖｅ ｓｈｏｗｅｄ ａ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｌｔｈ ｔｌｌｅ
ｂｙ汕ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｂｌｏｏｄ Ｓｕｇａｒ ｌｅＶｄ ｉｎ ｒａｌｌｇｅ ｏｆ ２．１－９．２ ｍｍ０１／Ｌ
１ｎｊｅｃｔｉｏｎ·
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关键词：胰岛素，腹腔给药，２型糖尿病，脂代谢，氧自由基
Ａｂｓｔｒａｃｔ
Ｉｎｓｕｌｉｎ ｉｓ ａ ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｄｍｇ ｗｈｉＣｈ ｉｓ也ｅ ｍｏｓｔ ｅ伍ｃａｃｉｏｌｌｓ ｗｈｉｌｅ ｗｉｍ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ ｃｏｓｔ．Ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｗｒｈｉｃｈ ｉｓ ｔｈｅ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｒｏｕｔｅ ｏｆ ｉｎｓｕｌｉｎ ａｄｍｉｎｉｓ仃ａｔｉｏｎ ｈａｓ ｍａＩｌｙ
ｄｅｔ锄ｉｎｇ ｍａｎｉｆｅＳｔａｔｉｏｎ．Ｔｈｉｓ ｐ印ｅｒ ｆｏｃｕｓｅｄ ０ｎ
ｔｈｅ ｄｉａ研ｅＩｌｃｅｓ ｏｆ酉ｙｃｅｍｌａ ｃｏｎｔｌ．０ｌ，
ｌｉＤｉｄ ａｎｄ丘ｅｅ ｒａｄｉｃａｌｓ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｂｙ ＣｈｒｏＩｌｉｃ ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｉｎｓｕｌｉｎ ｄｅｌｉＶｅ叮ｅｉｍｅｒ ｂｙ ｎｌｅ
ｉ砷Ｆａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｏｒ ｂｙ ｔｈｅ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｒｏｕｔｅ．Ｔｈｅ ｒｅｓ＿ｕｌｔｓ ｈａｖｅ Ⅵｔａｌ ｃ１１ｍｃａＩ
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学校代码： ｌ００２３ 学 号：ｓ２００７４０４
硕士学位论文
不同胰岛素给药方式对２型糖尿病小鼠血糖、血脂及 氧自由基代谢的影响
所 院 ： 生物医学工程研究所 姓 名 ： 邓珊珊 指导教师： 孙洪范研究员 学科专业： 生物医学工程 研究方向： 生物医学工程 完成日期： ２０１０年５月
独创性声明
本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表或 撰写过的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材 料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明 并表示谢意。
（保密的学位论文在解密后适用本授权书）
ａ７划埘 学位论文作者签名：
签字同期：跏ｆ口年≠月 晓同
导师签名：砚ｉ，笏Ｄ
签字日期：伊ｆ ｐ年６月／２日
学位论文作者毕业后去向：粤舵江君 入硒久ｊ久油旧确ｆ艮船刁／ｏ习
工作单位： 通讯地址：
电话： 邮编：
目录
第一章前言…………………………………………………………………………．１ ｌ弓Ｉ言……………………………………………………………………………………………………………１ ２糖尿病与糖尿病治疗进展…………………………………………………………１ ３研究背景…………………………………………………………………………．１１ 参考文献……………………………………………………………………………．．１４ 第二章胰岛素不同给药途径控制２型糖尿病小鼠血糖药效动力学研究………１８ ｌ前言…………………………………………………………………………………１ ８ ２试剂与实验仪器…………………………………………………………………．１ ８ ３实验方法…………………………………………………………………………．１ ９ ４结果…………………………………………………………………………………………………………．１ ９ ５讨论…………………………………………………………………………………………………………．２１ ６小结…………………………………………………………………………………………………………．２２ 参考文献……………………………………………………………………………．２３ 第三章胰岛素不同给药途径对２型糖尿病小鼠血脂代谢的影响………………２５ １前言…………………………………………………………………………………………………………．２５ ２试剂与实验仪器…………………………………………………………………．．２６ ３实验方法……………………………………………………………………………．２６ ４结果…………………………………………………………………………………………………………．２７ ５讨论…………………………………………………………………………………………………………．３０ ６小结…………………………………………………………………………………………………………．３２ 参考文献……………………………………………………………………………．．３３ 第四章胰岛素不同给药途径对２型糖尿病小鼠氧自由基水平的影响…………３５ ｌ前言…………………………………………………………………………………………………………．３５ ２试剂与实验仪器…………………………………………………………………．３６ ３实验方法…………………………………………………………………………．３７ ４结果…………………………………………………………………………………………………………．４５ ５讨论…………………………………………………………………………………………………………．４８ ６／Ｊ、结…………………………………………………………………………………………………………．５０ 参考文献……………………………………………………………………………．５２ 全文总结……………………………………………………………………………．５４
学位论文作者签名：≥芦叫淞＋ 签字Ｒ期：２。／口年多月，２日
学位论文版权使用授权书
本学位论文作者完全了解ｊ壁塞进塑匡堂院有关保存、使用学位论文的 管理办法。有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论 文被查阅和借阅。本人授权ｊ匕塞迹塑医堂瞳可以将学位论文的全部或部分内容 编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学 位论文。
ｄｅｌｌＶｅⅨ Ｅｘｐ嘶ｍｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆ０咖ｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ＫＫ ｍｉｃｅ ｗｈｉＣｈ ａｒｅ ｉｄｅａｌａｂｅｔｅｓ ｂｅｃａｕｓｅ ｏｆ ｔｌｌｅ ｃｈａｒａｃｔ甜ｓｔｉｃｓ ｏｆ ｏｂｅｓｉ劬ｈｙｐｅ增ｙｃ锄１ａ，
ｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅＩｌｌｉａ ａｎｄ ｈｙｐｅｒｉｎｓｕｌｉｎ锄ｉａ，ｗｈｉｃｈ Ｖｅ秽 ｓｉｍｉｌａｒ ｔｏ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｃｌｍｌｃａｌ
Ｄｏｔｅｎｔｉａｌ ｄｉｓａｄｖ觚ｔａｇｅｓ ｉｎ ｔｈｅ仃ｅａ嘶肌ｔ ｏｆ ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ａｒｅ ｔｈｅ ｋｅｙ ｐ０１‘ｌｔｓ
ｗｈｉｃｈ ａｒｅ ａｌｗａｙｓ ａ ｄｉｍｌｒｂｉｎｇ ｐｒｏｂｌｅｍ ｆｏｒ ｄｉａｂｅｔｉｃｓ，ｂｕｔ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏＩｌｓ ｃａｎ ｎｏｔ ｂｅ
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ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｗｉｔｈｉｎ ｎｏｎｎａｌ ｓｃｏｐｅ（５．１士Ｏ．２）ｍｍｏｌ／Ｌ ｂｙ ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｒｏｕｔｅ ｗｈｅｎ ｔｎｅ ｉｎｓｕｌｉｎ ｄｏｓｅ ｗａｓ ｉｎ ｍｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １．１—１．７ Ｕ／ｋｇ，ａ１１ｄ ｔｈｅ ｄｏｓ争ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｕｌⅣｅ ｓｈｏｗｅｄ觚
综述……………………………………………………………………………………………………………．．５６ 致谢……………………………………………………………………………………………………………．．６４
中文摘要
胰岛素是目前治疗糖尿病最有效且成本最低的药物，但通常的皮下胰岛素给 药途径不能避免并发症的产生，而并发症是困扰糖尿病患者的主要问题。血糖不 稳定、脂代谢异常以及氧自由基代谢失衡是促进并发症发生和发展的主要因素。 腹腔给药途径因其能够更好地模拟生理条件而受到人们的广泛关注。
ｄｏｓｅ．Ｄｅｔｅｎｌｌｉｎａｔｉｏｎ ｏｆｂｌｏｏｄ ｌｉｐｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔｓ Ｓｈｏｗｅｄ ｍａｔ ＴＧＩ ＬＤＬ－ｃ ａｎｄ ＨＤＬ－ｃ ｗｅｒｅ
ｎｏｔ ｒｅｃ０Ｖｅｒｄ ｔｏ ｔｈｅ ｎｏｍａｌ ｓｃｏｐｅ ｂｙ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ，ｂｕｔ ＴＧ ＴＣ，ＬＤＬ。ｃ
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Ｄｅｔｅｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ舶ｅ ｒａｄｉｃａｌｓ ａｂｉｌｉｔ），ｓｈｏｗｅｄ ｍａｔ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｌｔｈ Ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ
ｉｎｉｅｃｔｉｏｎ，ｉｎ仃ａｐ甜ｔｏｎｅａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｃａｎ ｂｅ ｍｏｒｅ ｅｆｊＥｉｃａｃｉｏｕｓ ｔｏ ｅ１１ｌｌａｎｃｅ ｔｈｅ ａｎｔｌ－ｏＸｌｄａｎｔ ２Ｉｂｉｌｉｔｖ ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ仔ｅｅ ｒａｄｉｃａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｋｉｄｎｅｙ ａｎｄ ｓｅｎ埘·Ｉｎ ｔｈｅ ｈＶ‘墨
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ｉｎｊｅＣｔｉｏｎ，ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｌｎＪｅｃｔｉｏｎ ｃａＩｌ ｂｅ
本实验采用ＫＫ小鼠为研究对象，ＫＫ小鼠具有肥胖、高血糖、高血脂和高 胰岛素血症的特点，其发病过程和人类２型糖尿病的表现极为相似，是一种较理 想的２型糖尿病动物模型。本文的目标是比较腹腔与皮下两种胰岛素给药方式对 ２型糖尿病模型血糖、脂代谢及氧自由基代谢的影响，探讨腹腔胰岛素给药对防 治糖尿病并发症的价值。
ａＶｏｉｄｅｄ ｂｖ ｔｈｉｓ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｒｏｕｔｅ．Ｕｎｓｔａｂｌｅ ｂｌｏｏｄ ｓｕｇａｒ １ｅｖｅｌ，ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ｏｆ。ｌｉｐｌｄ锄ｄ
ｃｏ咖ｂｕｔｏｒｓ ｒｅｃｏ嘶ｚｅｄ 舒ｅｅ ｒａｄｉｃａｌｓ ｍｅｔａｂ０１ｉｓｍ ａｒｅ ｍａｊｏｒ ｆａｃｔｏｒｓ ｗｈｉｃｈ ａｒｅ
药效动力学实验显示，胰岛素剂量在１．１．１．７ Ｕ／Ｋｇ范围内时，ｉ．ｐ．组血糖可 稳定地控制在正常水平（５．１±０．２）ｎｕｎ０１／Ｌ，曲线形成显著的平台，血糖不会随 着胰岛素剂量改变而产生显著波动，ｓ．Ｃ．组的血糖则在２．１－９．２ ｍｍｏｌ／Ｌ之间，且 与胰岛素剂量呈线性关系。
在腹腔给药组胰岛素剂量比皮下给药组低２０％的条件下，血清脂质含量测定 实验显示，皮下给药组治疗４周后，血清中甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固 醇（ＨＤＬ．ｃ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ．ｃ）含量未达到正常对照组水平，而 腹腔给药可以有效地恢复上述３项指标至正常对照组水平。
在氧自由基代谢方面，两种给药方式都可以使糖尿病小鼠的血液和心、肝、 肾组织ＭＤＡ水平降至正常对照组水平，腹腔给药对提高血清和肾脏的ＳＯＤ及 ＧｓＨ．ＰＸ活性、降低ＭＤＡ含量效果更好。对于肝脏，腹腔给药提高ＧＳＨ．ＰＸ活 性的效果更好，而皮下给药提高ＳＯＤ活性的效果更好。
上述结果提示，腹腔胰岛素给药可以更好地控制血糖和纠正血脂异常。两种 给药方式都可有效降低各组织ＭＤＡ至正常对照组水平，但作用模式有所不同。