Agilent 1100方法和序列设置中的小技巧

Agilent 1100方法和序列设置中的小技巧
供参考
做液相色谱断断续续有8年的历史了，自从买了Agilent 1100，感觉做实验方便得多。

无需手动进样，摸好条件后只要设好方法和序列，一点击start，仪器就开始工作了。

不只是做样品，还可以包括最后的冲柱子，它都能一次性完成。

但是方法或序列设置不当的话，会导致做无用功，全部白做都有可能。

下面我来谈谈自己的工作经验和技巧。

1. 摸条件(以C18柱为例)
可以选单针进样模式，将sample info设置好文件名，比如我做肌苷氯化钠注射液的有关物质，可以在前缀上设jglhn，后面自动生成000，第一针一定要走足够长的时间，我是做化学药的，通常走到主峰保留时间的2倍，看看后面是否有杂质峰出现，要保证针与针之间的数据平行必须做到一针出峰干净后再走第二针。

在method里设置必要的参数，比如进样量（20μl）、流动相配比（D泵0.5%的冰醋酸水溶液）、流速（1.0ml/min）、柱温（35℃）、检测波长（248nm）、保留时间（45min）等，将摸索好的方法用save as method保存到jg1.m。

需要说明一点，走单针时文件名自动累加，第一针是000，第二针就自动生成001。

2. 设置序列参数
选择序列进样模式，在sequence parameters中设置好第一针的文件名，还是以肌苷氯化钠注射液为例，在前缀上设jglhn，后面自动生成000，把它改为100与单针区别开，免得覆盖！在sequence table中有几个参数是必须设置的，如方法名和进样次数。

而瓶号和样品名称是可以不设置的，也就是说可以让仪器只运行方法而不进样，主要用来冲洗或平衡柱子。

一个序列中可以包括多种方法，比如做有关物质自身对照法时，低浓度的样品保留时间可以设得短些，假如21分钟出主峰，我就设到24分钟，方法另存为jg2.m。

假如我做两个批号的样品，进样和冲洗的设置如下：
瓶号样品名方法进样次数
1 ref1 jg
2 3
2 sample1 jg1 3
3 ref2 jg2 3
4 sample2 jg1 3
wash1 1
wash2 1
我们可以看到序列中一共包含14个文件，它们的文件名是jglhn100——113。

最后两个文件是不需要出报告的，wash1和wash2代表冲洗柱子程序，比如wash1用A泵（水）冲洗，wash2用A泵（水）-B泵（甲醇）（30：70）冲洗。

这样一来，人可以离开，仪器会自动完成全过程。

需要注意的是：确保充足的流动相！此外，在sequence information中设置关机程序，选择shut off，standby状态即可。

需要说明的是，如果中途停止，按stop，再按start 时文件名被覆盖。

如果你需要保留原来的文件，可以重新设置第一个文件的编号，比如200。

3. 巧用partial sequence来补针
假如发现有一针结果不理想，需要补进一针或数针，又不想改变原有的序列，就可以用sequence中的partial sequence→run sequence来进行补针。

在想要补的文件前面的小方框中打勾，然后运行部分序列即可。

4. 实验中出现机械手突然失灵，进样针指示灯变红怎么办？
有时侯时间做长了，机械手会失灵，停止工作，指示灯变红。

我最近就碰到过这个现象，解决办法：先将样品室的开关关掉，数分钟后重新开启，并且将样品瓶转移到机械手相对容易抓到的位置，重新设置一下瓶位号。

比如19、20号就是比较难抓的位置，需要往里转很大的角度，21、22就相对容易些。

这些是我从实践中摸索到的一点体会和窍门，也许比较简单一些，希望得到大家的补充。

再补充一点：
不要忘了设置装流动相的体积，如果中途添加了流动相，一定要即时更新。

虽然是个小的细节问题，忽略的话会带来大麻烦的！
比如如果实际体积是1000ml,你忘了设置，上回剩余的只有200ml,走一段时间后仪器就自动停止了。

而如果情况相反也不行，实际只有200ml,你设了1000ml,会导致空气进入色谱柱，严重时无法恢复。

当然这后一种情况很少会遇到，只是提个醒。

以下几种办法可以将Agilent 1100的工作站的报告导出：
1.如果只对图谱感兴趣，那就可以用窗口右下边的一个小按钮“拷贝窗口到剪贴板”，然后粘贴图谱就ok了；
2.如果想把报告原本的样子导出来，到别的计算机上看看也方便，可以这样：
2.1report－specify report－destination－file－选txt和htm（一般就够用了）－ok－print report .此时，你可以到你的data存放文件夹就会发现多出了四个文件，分别是report.txt，index.htm，page1.gif，content.htm，这几个文件任意一个都可以看见所有报告的内容。

2.2可以通过ctrl+print screen直接或去屏幕，不过是图像文件噢
2.3可以通过著名的抓图软件抓取当前屏幕，如snagIT 7.0，挺好用的。

2.4Data analysis－file－print setup－microsoft document Image Writer，选择打印。

2.5如果安装了pdf虚拟打印，就可以打印为pdf文件了。