使用高倍显微镜观察几种细胞教案

使用高倍显微镜观察几种细胞
参考资料：
（一）了解显微镜的工作原理
显微镜是由目镜和物镜2个凸透镜成像。

物体在物镜一二倍焦距之间使物体呈一个放大的实象，这个实象落在目镜的一倍焦距之。

目镜再呈一个放大的虚象，进人眼。

（二）认识显微镜的结构
1. 机械部分（1）镜座（2）镜柱（3）镜臂（4）镜筒（5）物镜转换器(旋转器)（6）镜台(载物台)（7）调节器：①粗调节器(粗准焦螺旋)：大螺旋称粗调节器，移动时可使镜台作快速和较大幅度的升降，所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗调节器迅速找到物象。

②细调节器(细准焦螺旋)：小螺旋称细调节器，移动时可使镜台缓慢地升降，多在运用高倍镜时使用，从而得到更清晰的物象，并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。

2. 照明部分装在镜台下方，包括反光镜、集光器。

（1）反光镜（2）集光器(聚光器)①聚光镜：由一片或数片透镜组成，起汇聚光线的作用，加强对标本的照明，并使光线射入物镜，镜柱旁有一调节螺旋，转动它可升降聚光器，以调节视野中光亮度的强弱。

②光圈(虹彩光圈)：在聚光镜下方，由十几金属薄片组成，其外侧伸出一柄，推动它可调节其开孔的大小，以调节光量。

3. 光学部分（1）目镜：装在镜筒的上端，通常备有2－3个，上面刻有5×、10×或15×符号以表示其放大倍数，一般装的是10×的目镜。

（2）物镜：装在镜筒下端的旋转器上，一般有3－4个物镜，其中最短的刻有“10×”符号的为低倍镜，较长的刻有“40×”符号的为高倍镜，最长的刻有“100×”符号的为油镜，此外，在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线，以示区别。

（三）掌握使用显微镜的方法
1、低倍镜的使用方法
（1）取镜和放置：显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边1－2寸为宜，便于坐着操作。

（2）对光：用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动)，使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心)。

打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼在目镜上观察(右眼睁开)，同时调节反光镜方向，直到视野的光线均匀明亮为止。

（3）放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。

（4）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。

一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。

然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。

2、高倍镜的使用方法
（1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。

（2）转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片)，如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。

（3）调节焦距：转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈，即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)如果视野的亮度不合适，可用集光器和光圈加以调节，如果需要更换玻片标本时，必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降，方可取下玻片标本。

（四）练习用显微镜进行实际观察（观察写有“上”的标本）
1、将观察到的标本移到视野中央.先移动一下标本,看朝哪个方向移动,这说明了什么?
2、观察写有“上”字的标本．并写下你在视野中看到的图象．
3、变换不同的目镜和物镜进行观察，看看物象有什么变化？
4、放大倍数不同，看到的细胞个数与大小有什么不同？
5、看到的物像究竟被放大了多少倍？
（五）显微镜使用注意事项：
(1)成像特点：放大倒立的虚像。

(2)放大倍数计算：物镜的放大倍数×目镱的放大倍数。

放大倍数指的是物体的长或宽。

(3)物像的移动方向与装片的移动方向相反。

(4)低倍镜下成像特点：物像小、细胞数目多、视野亮。

高倍镜下成像特点：物像大、细胞数目少、视野暗。

(5)物镜和目镜的判断方法：物镜有螺纹，目镜无螺纹。

(6)放大倍数的判断方法：目镜：镜头长放大倍数小，镜头短放大倍数大。

物镜：镜头长放大倍数大，镜头短放大倍数小。

物镜与装片之间的距离：距离近放大倍数大，距离远放大倍数小。

(7)显微镜的有关性能参数。

最重要的性能参数是分辨率，而不是放大倍数。

(8)低倍镜使用过程中，下降镜筒时必须双眼侧视镜筒，防止镜头撞到玻片。

(9)低倍镜找到物像后，换上高倍镜时，观察过程中只能使用细准焦螺旋。

生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的鉴定
参考资料还原糖的鉴定生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。

它们的分子都含有还原性基团（游离醛基或游离酮基），因此叫做还原糖。

蔗糖的分子没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。

本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。

斐林试剂由质量浓度为0.1 g／mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05 g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。

Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。

其反应式如下：
CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：蓝色棕色砖红色(沉淀)。

用于鉴定还原糖的实验材料准备植物组织是常用的实验材料，但必须加以选择。

在双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖形成后，合成为淀粉，暂时储藏在叶子，因此最好不用双子叶植物的叶子作实验材料。

有些单子叶植物，如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的初始产物转变为淀粉，因此叶含有大量的可溶性单糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此，也不宜用单子叶植物的叶子作实验材料。

本实验最理想的实验材料是还原糖含量较高的植物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅或近于白色的，如苹果和梨的果实。

经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。

蛋白质的鉴定鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。

双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g／mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01 g／mL的硫
酸铜溶液。

在碱性溶液(NaOH)中，双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。

由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。

实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官)，植物材料常用的是大豆种子，动物材料常用的是鸡蛋(卵白)。

如用大豆种子，必须提前浸泡1～2 d，这样容易研磨成浆。

有条件的学校，可以直接采用现成的大豆磨成的豆浆，豆浆可以购买，也可用小型的研磨机制取。

利用豆浆作实验材料，可以节约实验时间。

如果用稀释的卵白作实验材料，效果会更好。

用于鉴定脂肪的实验材料准备实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花生种子(取其子叶)。

供实验用的花生种子，必须提前浸泡3～4 h。

浸泡时间短了，不容易切成片；浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。

做鉴定脂肪的实验，教师可根据本地区的情况选用丹Ⅲ或丹Ⅳ染液。

丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。

因丹Ⅳ染液与脂肪的亲和力比较强，所以，染色的时间应比较短，一般为1 min左右。

用于鉴定淀粉的实验材料准备实验材料最好选择富含淀粉的材料，颜色比较浅，易观察。

如：马铃薯。

观察DNA和RNA在细胞中的分布
用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体
体和叶绿体的形态与分布，了解了线粒
学生思考回答
体和叶绿体是可以移动的，大家思考这
对其完成其生理功能有什么意义？
我们在第五章中要具体学习线粒体和叶
绿体的功能，大家就要结合它们的形态、
分布和结构分析它们的功能，体会结构
与功能相适应的生物学理念。

【布置作业】
1. 完成实验报告。

2. 回答上面的分析讨论题。

参考材料：
观察叶绿体实验材料的准备实验用的葫芦藓必须提前准备。

从阴面潮湿的墙根、林地、花房的花盆土表可以找到葫芦藓。

将它连根铲起，带土栽在花盆，放在阴面，要经常洒水，保持湿润。

观察细胞质流动实验材料的准备实验用的黑藻应该提前到池塘或小河中捞取，采集后放在实验室的养鱼缸中，让它继续生长。

黑藻是淡水沉水草本植物，根入泥，叶短，3～4片叶轮生(图2-6)。

有冬芽，生小枝顶端，芽的苞叶卵状披针形至线形，排列紧密，可进行营养繁殖。

夏季采集到以后，可以一年四季连续培养。

春天时，其冬芽伸展，一个月之后，茎可伸出，并长出较多的叶。

观察细胞质流动的代替实验材料观察细胞
质流动的材料，如果找不到黑藻，可用以下
材料代替：①紫鸭跖草雄蕊的花丝表皮毛；
②鸭跖草的蓝色花瓣，观察韧皮部筛管细胞
中的细胞质流动；③向日葵舌状花花冠的表
皮；④万寿菊管状花的花瓣表皮；⑤新鲜大
白菜层叶片宽大中脉处的表皮；⑥黄瓜嫩茎
的表皮毛；⑦小麦的根毛。

1.植物体
2.叶(放大)
3.雄花
4.雌花
5.种子
使用上述实验材料时，实验课前教师应该对实验用的植株浇足水分。

如果是在野外采集的，则应将采集到的实验材料放在塑料袋，扎紧袋口，以防止水分散失过快。

在使用植物的表皮或表皮毛观察细胞质流动时，视野应调暗些。

尝试制作真核细胞的三维结构模型
植物细胞的吸水和失水
比较过氧化氢在不同条件下的分解
影响酶活性的条件
绿叶中色素的提取和分离
参考资料：
替代方案
材料：新鲜的绿色叶片（如菠菜叶、朱槿叶等）
用具：吸水纸，定性滤纸，小烧杯，培养皿盖，垫板，硬币，量筒。

试剂：层析液
操作要点：
1．制备滤纸条
取干燥的定性滤纸，剪成长6 cm左右、宽1 cm左右的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端1 cm处用铅笔画一条细横线。

2．获取色素线（1）取一片新鲜的绿色叶片。

（2）将垫板放在实验台上，把吸水纸铺在垫板上，将制备好的滤纸条放在吸水纸上。

（3）把叶片放在滤纸条上，用硬币的侧缘对准滤纸条上的铅笔细线滚压叶片，反复多次，直到在滤纸条上出现一条深绿色的色素线。

3．分离光合色素
将3 mL层析液倒入小烧杯，将滤纸条有色素线的一端向下，轻轻插入层析液中。

不要让色素线浸入层析液中，不要让滤纸条贴在烧杯壁上。

用培养皿盖盖在烧杯上。

4．观察结果
10 min左右取出滤纸条。

待其干燥后，观察分离出的色素带有几条，分别呈什么颜色，并做好记录。

环境因素对光合作用强度的影响
观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
细胞大小和物质运输的关系
实验记录表：。