动物实验.doc
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动物实验
一、动物实验的分类
1、按动物实验的时间长短
(1)急性实验(2天以内)
(2)亚急性实验(1~4周)
(3)慢性实验(2~6个月或更长时间甚至整个生命期)
急性实验:在麻醉或清醒状态下进行实验研究,实验结束后马上初死,一般对动物做了较大的手术
慢性实验:通过手术或特定处理,造成某种预期的病理状态,然后再详细进行较长时期研究的实验。
2、动物实验按机体水平不同的可分为
在体实验
离体实验
二、常用动物的种类和特点:
豚鼠、仓鼠、家兔、犬
1、过敏反应或变态反应的研究直接用豚鼠:动物致敏反应大小顺序为:豚鼠〉家兔〉狗〉小鼠〉猫。
2、以呕吐反应为指标的实验研究最好用猫狗,不用食草动物。
如:兔、豚鼠不易产生呕吐。
3、外界环境因素对机体致热反应的研究最好用兔,次用猫。
4、做高血压病理模型用狗、大鼠、兔。
因为它们与人类的高血压有许多相似之处。
5、研究化学致癌作用时,用大鼠、小鼠,而且不同种系的小鼠发病率不同,甚至有的种系有自发性癌肿。
6、研究气体等物质对黏膜的刺激时用猫。
7、研究毒物对皮肤的局部作用时,用豚鼠、兔。
8、研究毒性物质对脏器的毒性时,用小鼠。
9、兔、狗、鸡、鸽最易形成动脉粥样硬化病变。
10、研究放射性物质致癌时,用狗、猴、大小鼠。
11、研究烧伤机理时,用猪,次用兔、狗、小鼠。
12、消化道分泌活动的研究时,用狗、猫,特别是狗。
13、在观察减压神经的作用时,只能用兔。
14、须摘甲状腺的手术时,用狗。
15、胰腺的切除、移植等用狗。
兔的较分散。
16、马和大鼠无胆囊。
一般动物都有。
17、免疫学实验常用青紫兰兔子后肢膕窝部有一个粗大的淋巴结。
18、大小鼠的子宫生长的很快,常用于避孕药物的研究。
三、常用体液标本的采集:
(一)动物的取血方法
1、采集血液:根据用血量多少
1)微量取血,少于0.5ml:
小鼠断尾、眶静脉取血;眼球摘除法;
2)少量取血,0.5ml -2ml:
兔耳缘静脉、狗贵要静脉取血;
3)大量取血,大于5ml:
大鼠腹主动脉取血、心室内取血、颈动脉、股动脉取血。
(二)脑脊液
(三)消化液:
通常事先要做手术,在相应的部位安置瘘管。
(四)尿液:
插尿管、输尿管瘘、代谢笼等收集动物一定时间的尿量。
代谢笼法:能将尿液和粪便分开而达到收集动物尿液目的的特殊装置。
适用于大、小鼠。
导尿法:适用于雄性兔、犬等。
四、处死方法:
空气栓塞法小鼠尾静脉注射2-3毫升空气,兔耳缘静脉注射10-15毫升空气
急性失血法兔颈总动脉插管、股动脉插管、断头取血
破坏延髓法青蛙/小鼠脱髓
化学药物法静脉注射氯化钾
原则:安乐死
安乐死必须符合的标准:
1.死亡时尽可能减少惊恐、疼痛。
2.使其在最短时间内失去意识迅速死亡。
3.方法可靠且可重复。
4.对操作人员安全。
5.采用的方法要与研究的要求和目的一致。
6.对观察者和操作者的情绪影响最小。
7.对环境污染的影响最小。
8.需要的机械设备简单,价廉,易操作。
9.处死动物的地点应远离并与动物房分开。
善待动物如其说是人道主义,不如说是我们本身需要。
动物实验细小的动作都能给动物以刺激,产生应激反应,这就混淆了预定要想得到的实验结论。
小的如抓取小动物、大到驱赶鞭打大动物、电击保定、绳索捆绑、都可能影响动物,导致结果不可靠。
试验前动物受的待遇、当然会影响实验时的动物状态,所以“善对”应是动物的生命全过程。
美国旧金山加州大学刘定良教授的动物房中,小型猪有玩具、猴子看电视。
白大衣改为淡绿色。
动物死尸不可乱放,除有储尸桶外,应有鲜花供奉,以示对其为科研舍身的感谢。
大单位应有“慰灵碑”,上海第二医科大学动物部的楼后就有一个。
这对外显示文化修养,实际也改善了环境。
五、给药途径:
1、静脉注射:
大小鼠尾静脉,舌下静脉、兔耳缘静脉
2、皮下注射:
3、肌肉注射:
大小鼠等在股部,小鼠的量小于0.25ml,大鼠的量小于1ml,猫兔狗等在臀部,小于2ml。
注意回抽无血。
4、腹腔注射:
多在动物的右下腹股沟部,,针与腿平行,抽无回血、无尿液之后再注射,45度角入针,应有空虚感。
小鼠小于0.5ml,大鼠小于2ml。
麻药后动物突然死亡,可能是针尖进入静脉或麻药过敏。
小鼠腹腔注射方法
5、口服给药:
6、灌肠给药:
家兔的灌胃
六、麻醉方法:
1、全麻:
乙醚吸入:放一个棉球,醒的快,不能过量,致死。
家兔:氨基甲酸乙酯 20% 5ml/kg体重
大小鼠:腹腔注射10%水合氯醛,0.35ml/100g体重,可持续2h以上。
2、局麻:的卡因、普鲁卡因
麻醉剂用法及剂量表
麻醉动物给药方
法剂量
(mg/kg)
常用
浓度%
维持时间
戊巴比妥纳狗、兔静脉3032-4小时中途
加上1/5量,
可维持1小时
以上,麻醉力
强,易抑制呼
吸。
腹腔40-503
大、小鼠、
豚鼠
腹腔40-502
硫喷妥纳狗、兔静脉15-20215-30分钟,
麻醉力强,宜
缓慢注射。
大白鼠腹腔401
小白鼠腹腔15-201
氯醛糖兔静脉80-10023-4小时,诱
导期不明显
大白鼠腹腔502
乌拉坦兔静脉750-1000302-4小时,
毒性小,主要
适用小动物的
麻醉。
大、小白鼠皮下或
肌肉
800-100020
蛙淋巴囊
注射
0.1ml/100g20-25
蟾蜍淋巴囊
注射
1ml/100g10
七、动物用药量的确定:
1、原则:
先用少量小鼠探索一下中毒剂量或致死量,
然后取小于中毒剂量的药量或致死剂量的1/10---1/15,通过预实验再在动物身上摸索;
若用大动物如猫狗等,须在鼠类用量的1/15----1/2范围内摸索。
2、人与动物用药量的折算:
人类用药量1时,
猫狗的用量是人的5-10倍,
兔、豚鼠的用量是人的15-20倍。
大小鼠的用量是人的50-100倍。
动物体表面积越小,用药量越大。
八、动物疾病模型的复制
(一)复制目的:
1、在动物模型上找出人类疾病的有关规律
2、探索机理
(二)复制要求
1、动物模型尽量与人类疾病相似,具有稳定性,重复性好。
2、动物模型具有稳定性,可靠性;
3、具有可行性,经济性。
(三)急性心肌缺血模型复制
家兔
耳缘静脉注射2单位/Kg脑垂体后叶素30分钟后分别记录5,10,15,20分钟心电图的变化
大鼠
静脉注射0.5-1.0单位/Kg脑垂体后叶素
(四)休克模型的复制
1 失血性休克
失血量达总血量的12-15%即可休克
家兔颈总动脉放血法,边放血边观察血压,血压下降40-50mmHg,即可进入休克状态
3 创伤性休克
家兔后腿用布包,用木棍打击,力量中等,每分钟80-120次,血压下降40-50mmHg
4 过敏性休克
家兔在实验前1-2周注射马血清,1.5ml/Kg,目的使家兔敏感性增加,2周后,实验时再注射3ml/Kg马血清,5分钟可造成模型。
(五)微循环障碍的模型复制
用大分子葡聚糖或右旋糖酐配10%生理盐水,7-15ml/Kg,快速注射,3分钟可制成。
24小时内情况严重,少部分可死亡,72小时恢复。
(六)实验性发热动物模型的复制
(1)细菌性发热
大肠杆菌、内毒素、葡萄球菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌
(2)非细菌性发热
牛奶
(3)致死性发热
二硝基酚不可逆
1、弄清动物实验的目的及必要性
首先要弄清其目的是什么,动物实验也不例外。
只有明确动物实验的目的,才能避免实验的盲目性,真正做到有的放矢,少走弯路,节约经费和时间,从而达到科学、节俭和高效。
其次要搞清有无必要进行动物实验。
“3R”原则(即:替代、减少和优化)
要求科学工作者在进行动物实验时,尽可能地用物理、化学等非生命方法(如体外细胞实验、电脑模拟等) 来替代动物进行实验;
确需用动物进行实验时,应尽可能通过优选实验方案(如通过预实验缩小实验组数、用高质量的实验动物减少各组的动物只数等) 以减少所用实验动物的数量; 通过改良仪器设备、改善实验操作方法和动物饲养管理条件等来优化动物实验,善待动物,减少对动物的侵扰。
2、作好实验设计
对照原则随机化原则
重复原则均衡性原则
3、选择适宜的实验动物
实验动物遗传特性的选择
实验动物微生物等级的选择
实验动物数量、规格和性别的选择
4、做好实验操作和实验条件保障工作
5、搞好动物实验结果的统计、分析和资
料的整理、归档工作
(1)品种、品系描述清楚;
(2)强调来源;
(3)体重明确;
(4)等级明确;
(5)饲养环境和实验环境明确;
(6)性别明确;
(7)有对饲养方式的描述(如饲料类型、营养水平、照明方式、温度、湿度要求);
(8)所用动物数量准确;
(9)对动物的健康状况的描述详细;
(10)对动物实验的处理方式有单独清楚的交代;
(11)全部有对照,采用双因素方差分析
情感语录
1.爱情合适就好,不要委屈将就,只要随意,彼此之间不要太大压力
2.时间会把最正确的人带到你身边,在此之前,你要做的,是好好的照顾自己
3.女人的眼泪是最无用的液体,但你让女人流泪说明你很无用
4.总有一天,你会遇上那个人,陪你看日出,直到你的人生落幕
5.最美的感动是我以为人去楼空的时候你依然在
6.我莫名其妙的地笑了,原来只因为想到了你
7.会离开的都是废品,能抢走的都是垃圾
8.其实你不知道,如果可以,我愿意把整颗心都刻满你的名字
9.女人谁不愿意青春永驻,但我愿意用来换一个疼我的你
10.我们和好吧,我想和你拌嘴吵架,想闹小脾气,想为了你哭鼻子,我想你了
11.如此情深,却难以启齿。
其实你若真爱一个人,内心酸涩,反而会说不出话来
12.生命中有一些人与我们擦肩了,却来不及遇见;遇见了,却来不及相识;相识了,却来不及熟悉,却还要是再见
13.对自己好点,因为一辈子不长;对身边的人好点,因为下辈子不一定能遇见
14.世上总有一颗心在期待、呼唤着另一颗心
15.离开之后,我想你不要忘记一件事:不要忘记想念我。
想念我的时候,不要忘记我也在想念你
16.有一种缘分叫钟情,有一种感觉叫曾经拥有,有一种结局叫命中注定,有一种心痛叫绵绵无期
17.冷战也好,委屈也罢,不管什么时候,只要你一句软话,一个微笑或者一个拥抱,我都能笑着原谅
18.不要等到秋天,才说春风曾经吹过;不要等到分别,才说彼此曾经爱过
19.从没想过,自己可以爱的这么卑微,卑微的只因为你的一句话就欣喜不已
20.当我为你掉眼泪时,你有没有心疼过
情感语录
1.爱情合适就好,不要委屈将就,只要随意,彼此之间不要太大压力
2.时间会把最正确的人带到你身边,在此之前,你要做的,是好好的照顾自己
3.女人的眼泪是最无用的液体,但你让女人流泪说明你很无用
4.总有一天,你会遇上那个人,陪你看日出,直到你的人生落幕
5.最美的感动是我以为人去楼空的时候你依然在
6.我莫名其妙的地笑了,原来只因为想到了你
7.会离开的都是废品,能抢走的都是垃圾
8.其实你不知道,如果可以,我愿意把整颗心都刻满你的名字
9.女人谁不愿意青春永驻,但我愿意用来换一个疼我的你
10.我们和好吧,我想和你拌嘴吵架,想闹小脾气,想为了你哭鼻子,我想你了
11.如此情深,却难以启齿。
其实你若真爱一个人,内心酸涩,反而会说不出话来
12.生命中有一些人与我们擦肩了,却来不及遇见;遇见了,却来不及相识;相识了,却来不及熟悉,却还要是再见
13.对自己好点,因为一辈子不长;对身边的人好点,因为下辈子不一定能遇见
14.世上总有一颗心在期待、呼唤着另一颗心
15.离开之后,我想你不要忘记一件事:不要忘记想念我。
想念我的时候,不要忘记我也在想念你
16.有一种缘分叫钟情,有一种感觉叫曾经拥有,有一种结局叫命中注定,有一种心痛叫绵绵无期
17.冷战也好,委屈也罢,不管什么时候,只要你一句软话,一个微笑或者一个拥抱,我都能笑着原谅
18.不要等到秋天,才说春风曾经吹过;不要等到分别,才说彼此曾经爱过
19.从没想过,自己可以爱的这么卑微,卑微的只因为你的一句话就欣喜不已
20.当我为你掉眼泪时,你有没有心疼过。