奶牛性控胚胎移植技术应用试验

奶牛性控胚胎移植技术应用试验
摘要张家口地区奶牛场开展了性别控制胚胎移植的试验和奶牛的性控精液配种试验，使用冷冻性控胚胎（A级）30枚，移植给30头14～18月龄青年母牛受体，自然发情的移植了12头，同期发情处理母牛移植18头。

在胚胎移植后30d内无反情的17头，80d后进行了直肠妊娠检查，确定移植成功共14头，移植成功率为46.7％；产14头母犊，性别控制准确率达100％。

结果表明，直接使用性控胚胎进行移植是加速良种引进、提高繁殖效率和牛群质量的有效途径。

关键词胚胎移植；性控技术；移植
性别控制技术可以按照生产需求控制家畜出生性别，提高奶牛业生产的经济效益。

在育种方面，通过性别控制可以增加家畜遗传和表型的选择强度，加速育种进程。

在奶牛生产中，如能在繁殖技术上做到有效控制出生犊牛的性别比例，使繁殖出生母牛的比例大大增加，甚至能够确保得到的出生犊牛全为母牛，这对提高奶牛生产经济效益无疑将具有极为重要的现实意义。

随着现代胚胎生物技术的发展，奶牛的性别控制技术日臻成熟，在生产实际中有效提高母牛出生比例的性别控制技术已经逐渐获得应用。

目前实现性别控制的途径主要有3种：一是通过使用性控冻精；二是通过使用性控胚胎；三是通过克隆技术。

为了探索在张家口地区奶牛生产中推广应用的性别控制技术，我们开展了通过性别控制胚胎移植进行性别控制的试验，取得了预期效果。

1试验材料
1.1受体母牛
1.1.1 品种。

主要为黄牛及其杂交改良后代。

1.1.2 年龄。

选择0～4胎的空怀母牛，其中16～18月龄青年牛所占的比例不低于60％。

1.1.3 生殖状况。

母牛生殖系统（卵巢、输卵管、子宫和阴道）正常，没有生殖道疾病，具有正常的发情周期，经产母牛产犊后时间为60～100d。

1.1.4 健康状况。

健康无病，没有布病、结核等传染病以及寄生虫病病史。

1.1.5 体况及营养状况。

体况中等，营养体况中等，处于能量正常平衡（增
重），蛋白质和维生素能满足需要。

共筛选出符合以上条件的空怀母牛150头，将其分为3组集中饲养；同时进行标记。

1.2药品、器械
前列腺素（PG）、普鲁卡因注射液、70%酒精、胚胎移植枪、无菌硬外套、无菌软外套。

1.3 冷冻性控胚胎
购自圣隆生物科技有限公司。

2试验方法
2.1受体牛饲养
在移植胚胎的受体牛管理中，严格按照以下规定进行饲养管理：①受体母牛不能哺乳犊牛，受体群中不能有公牛。

②提供足够而营养全面的饲草饲料，胚胎移植时限内（胚胎移植前后30d）每天补充精饲料1.5kg。

③每日早晚观察2次发情，并详细记录准确的发情时间（准确到小时）。

④受体母牛自由运动。

2.2 做好受体牛的发情观察
发情观察在胚胎移植工作中非常重要，是确定移植时间的依据。

胚胎移植是在发情后第7天进行，起零时间应从适合做人工输精时算起。

发情观察要定人、定时，而且观察人员要有丰富的经验。

每天分早晨、上午、下午及夜晚4次观察，每次1h，准确记录每头母牛发情表现及时间。

2.3 黄体检查
在移植前，对受体牛要进行直检，确定黄体发育情况。

好的黄体凸出卵巢表面、质地柔软、有弹性、直径达1cm以上，底部充实。

个别牛卵巢偏小，所形成的黄体没有达到要求那么大，但质地的弹性和柔软程度都很好，这样的牛也可进行胚胎移植，也可以获得理想的受胎率。

在检查时，检查动作要轻，不要用力挤压，以免弄伤受体牛。

2.4 胚胎操作应严格按程序进行
甘油冷冻胚胎的操作程序为：解冻→解冻液→装枪。

3结果
对试验地点的母牛进行了3个批次的移植试验。

对150头受体牛进行了进一步地筛选，共选出适宜胚胎移植的母牛70头，自然发情的移植了12头。

同期发情处理母牛共58头，移植18头。

在胚胎移植后30d内无反情的17头，80d后进行了直肠妊娠检查，确定移植成功共14头。

移植成功率为46.7％。

试验表明，提高胚胎成功率的关键是熟练掌握胚胎移技术的各个环节，如选用优质同期发情激素、熟练的直检技术、对黄体发育水平的准确判定，都是显著影响胚移质量的因素，必须按操作规程严格执行。

4讨论
4.1 选择适宜的受体牛
应选择体型较大、性情温顺的个体。

从年龄上看，以3～6岁的经产母牛为最佳。

初产牛必须达到性成熟以后，年龄应在16个月龄以上、体重达成年体重的75％的个体方可选用。

要求受体牛是健康、没有疾病的个体，尤其是没有生殖系统疾病。

对于过肥或过瘦、卵巢发育不良、生殖器官有炎症、人工授精不受孕的母牛，都不宜选做受体牛。

4.2 在发情阶段适时移植
母牛不发情，就不能排卵形成黄体，也不能进行胚胎移植。

在第1次同期发情处理时，我们采用间隔10d进行2次PG注射，由于某些母牛产后没有发情，结果进行注射的75头母牛中，只有33头牛发情，同期发情率仅为44％，效果欠佳。

因此，发情周期不正常的受体牛，不适宜做胚胎移植。

4.3短期优势饲养
在移植前6～8周，受体牛要进行科学补饲，使机体达到最佳繁殖状态。

每天补饲精料1.5kg，所补饲的精料要求营养丰富、品质优良，同时，还应注意V A、VD、VE和微量元素及矿物质饲料的供给。

4.4 注意环境条件及物品消毒
胚胎操作室要求干净、无灰尘、无异味，因此最好在移植前进行紫外线消毒，所有器械、用品需经严格消毒处理、摆放井然有序，便于使用。

工作人员的手臂，在操作前要用酒精棉消毒。

4.5 麻醉剂量适当
麻醉的目的，一是为了减轻移植时对受体牛刺激，使其安稳；二是防止直肠努责，便于操作。

麻醉采取尾椎麻醉方式，如果麻醉部位靠后或剂量不足，直肠努责得不到抑制；如果剂量过大，使直肠扩约肌过度松弛，在体内形成大的管状空腔，有的后肢麻痹站不起来，给移植带来不便，甚至无法移植。

4.6 要熟练掌握胚胎移植操作技术
胚胎移植是将早期胚胎移植到生理状态相同的受体牛体内，使之继续发育。

一般是发育了7d的胚胎，第7天进行移植。

移植部位是黄体发育较好一侧子宫角的上1/2至下1/3，如有可能则越深越好。

要求操作人员要在短时间内将胚胎移植到位，原则不超过10min。

同时要注意两手的协调性，避免在移植的过程中擦破子宫内膜。

4.7 胚胎质量要有保证
胚胎质量是决定移植是否成功的重要因素之一，只有好的胚胎才能获得较高受胎率。

实践中，移植的胚胎质量须达到B级以上，C级胚胎不能单独移植，D 级属于死亡或没有利用价值的胚胎。

冷冻胚胎要选择A级胚胎，因为胚胎在冷冻过程中，质量有所下降。

甘油冷冻胚胎的操作程序为：解冻→解冻液→装枪。

4.8 选择适宜的移植季节和时间
胚胎移植要避开酷暑和严寒的影响，最佳移植季节是每年的3～5月份和10～11月份。

在高温季节进行移植，应选择早、晚天气凉爽的时候。

7月17日至9月24日，对6头自然发情母牛在早8时前和晚18时先后进行7次胚胎移植，有3头母牛受孕，效果良好。

胚胎移植技术是科学性与技术性要求较高的一项系统工程，受体牛选择、饲养管理、同期发情、胚胎质量检查和胚胎移植等所有环节都紧密相连，任一环节出现问题都会直接影响移植效果，实践中要严格按照胚胎移植操作规程，熟练掌握各技术环节，才能获得高水平、高效率的胚胎移植效果。

5参考文献
[1] 江成，徐光勇，王芸，等.奶牛性别控制胚胎移植研究报告[J].当代畜牧，2007（2）：38-40.
[2] 高庆华，韩春梅，文智举，等.奶牛性别控制胚胎移植试验[J].黑龙江畜牧兽医，2007（5）：36-37.
[3] 李金永，张乐翠，张海美.奶牛性别控制技术的应用探讨[J].黑龙江动物繁殖，2007（4）：26-27.。